提高细胞克隆融合效率的新型融合槽.pdf

《提高细胞克隆融合效率的新型融合槽.pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《提高细胞克隆融合效率的新型融合槽.pdf（5页完成版）》请在专利查询网上搜索。

1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)实用新型专利 (10)授权公告号 (45)授权公告日 (21)申请号 202020628970.7 (22)申请日 2020.04.23 (73)专利权人 河南创源生物技术有限公司 地址 450000 河南省郑州市航空港区四港 联动大道与省道S102交汇处西南方台 湾科技园A区A2-4-402号 (72)发明人 刘红波吕培茹尹珊 (74)专利代理机构 郑州中原专利事务所有限公 司 41109 代理人 张春 (51)Int.Cl. C12M 1/00(2006.01) C12M 1/42(2006.01) (54)实用新型名称 一种提高细胞克隆融合效。

2、率的新型融合槽 (57)摘要 本实用新型提供一种提高细胞克隆融合效 率的新型融合槽， 包括槽体， 槽体为矩形槽体， 相 对设置的两个侧壁设置平行电极， 槽底上表面设 置与细胞配合的网格槽； 所述网格槽是长方形、 正方形、 菱形的任一一种； 所述网格槽的边长为 40150m， 高度为1050m， 网格槽间距为小于45 m相对于现有技术， 本实用新型通过在槽底上设 置网格槽， 网格槽能够限制卵母细胞的轻微位 移， 以期提高电融合操作的效率； 长方形、 正方 形、 菱形的网格槽能够限制卵母细胞在网格槽内 打转。 权利要求书1页 说明书2页 附图1页 CN 212246997 U 2020.12.29。

3、 CN 212246997 U 1.一种提高细胞克隆融合效率的新型融合槽， 包括槽体， 其特征在于： 槽体为矩形槽 体， 相对设置的两个侧壁设置平行电极， 槽底上表面设置与细胞配合的网格槽。 2.根据权利要求1所述的提高细胞克隆融合效率的新型融合槽， 其特征在于： 所述网格 槽是长方形、 正方形的任一一种。 3.根据权利要求2所述的提高细胞克隆融合效率的新型融合槽， 其特征在于： 所述网格 槽的边长为40-150m， 高度为10-50m， 网格槽间距为小于45m。 4.根据权利要求3所述的提高细胞克隆融合效率的新型融合槽， 其特征在于： 所述电极 沿槽底长度方向设置。 5.根据权利要求4所述的。

4、提高细胞克隆融合效率的新型融合槽， 其特征在于： 所述槽体 侧壁挡板为无细胞毒性的胶， 电极由无细胞毒性的胶固定在槽底。 6.根据权利要求5所述的提高细胞克隆融合效率的新型融合槽， 其特征在于： 所述槽底 由折光性较好的透明塑料或玻璃制成； 电极为铂金制成。 权利要求书 1/1 页 2 CN 212246997 U 2 一种提高细胞克隆融合效率的新型融合槽 技术领域 0001 本实用新型生物医学技术领域， 具体涉及一种提高细胞克隆融合效率的新型融 合槽。 背景技术 0002 自从1997年体细胞克隆绵羊 “多莉” 诞生以来， 体细胞克隆技术已经在众多物种得 到应用， 目前在美国、 日本、 澳大。

5、利亚和阿根廷等国已经进行了产业应用和推广， 在中国也 有商业化的克隆公司开始进行猪、 牛、 犬、 猫和马的商业化推广。 体细胞克隆技术不仅可以 提高畜牧业的生产效率， 而且可以大力推动异种器官移植、 动物生物反应器和人源化抗体 等生物医药领域的巨大进步。 0003 影响体细胞克隆技术效率的因素有很多， 其中电融合效率是重要一环。 常见动物 的卵母细胞直径一般为100-150m， 呈规则的球形结构， 在细胞培养皿底可以自由滚动。 用 于体细胞克隆的体外培养细胞， 在悬浮状态一般为球形结构， 直径一般为10-30m。 常见动 物的克隆大多采用电融合法， 即将卵母细胞核去除之后， 将球形体外培养细胞。

6、显微注射到 卵母细胞透明带之下， 并与卵母细胞胞质贴紧， 然后在电脉冲刺激下， 培养体细胞细胞膜与 卵母细胞细胞膜融合到一起， 体细胞则整体融入卵母细胞胞质中， 完成重构胚胎的构建， 在 化学或电刺激下， 重构胚胎启动发育， 将其移植到动物体内即可获得克隆动物。 0004 而电融合的难点在于， 卵母细胞透明带下， 体细胞的细胞膜与卵母细胞的细胞膜 的接触面必须与电场的方向垂直， 才可以完成融合。 正常情况下， 技术人员需要长时间的培 训， 在显微镜下， 充满电融合液的融合槽中， 用微针拨动球状的卵母细胞， 使得体细胞膜与 卵母细胞膜的接触面与电场方向保持垂直。 这非常难， 因为液面的轻微抖动，。

7、 微针在融合液 的轻微摆动， 都会使得卵母细胞发生转动而脱离预定垂直位置。 因此， 电融合成为全球范围 内体细胞克隆应用的重要制约因素。 市面上有很多相关的融合装置， 如中国专利 CN208532756U， 公开了一种哺乳动物体细胞核移植重构胚融合装置， 包括融合皿、 两个电极 槽和若干个微穴， 融合皿底面的盲孔， 盲孔内可容纳重构胚， 并且微穴的直径略小于重构胚 的直径； 若干个所述微穴为两行排列设置， 各行的所述微穴依次间隔排列； 其中两个电极设 置的距离比较远， 需要较大电压才能达到所需电压； 表面微穴之间仍有较宽的平面存在， 将 细胞放置到电极槽内后仍需要拨动到微穴内才能进行下一步的操。

8、作； 同时微穴为圆孔， 当 微针进入液面拨动细胞时会带动其他细胞在微穴内转圈。 实用新型内容 0005 针对上述现有技术中存在的问题， 本实用新型的目的是提供一种提高细胞克隆融 合效率的新型融合槽。 0006 本实用新型的目的是以下述方式实现的： 0007 一种提高细胞克隆融合效率的新型融合槽， 包括槽体， 槽体为矩形槽体， 相对设置 的两个侧壁设置平行电极， 槽底上表面设置与细胞配合的网格槽。 说明书 1/2 页 3 CN 212246997 U 3 0008 所述网格槽是长方形、 正方形、 菱形的任一一种。 0009 所述网格槽的边长为40-150m， 高度为10-50m， 网格槽间距为小。

9、于45m。 0010 所述电极沿槽底长度方向设置。 0011 所述挡板为无细胞毒性的胶， 电极由无细胞毒性的胶固定在槽底。 0012 所述槽底由折光性较好的透明塑料或玻璃制成； 电极为铂金制成。 0013 相对于现有技术， 本实用新型通过在槽底上设置网格槽， 网格槽能够限制卵母细 胞的轻微位移， 以期提高电融合操作的效率； 长方形、 正方形、 菱形的网格槽能够限制卵母 细胞在网格槽内打转。 附图说明 0014 图1 是本实用新型的结构示意图。 0015 其中， 1是槽体， 11是电极， 12是挡板， 13是网格槽。 具体实施方式 0016 如图1所示， 一种提高细胞克隆融合效率的新型融合槽， 。

10、包括槽体1， 槽体1为矩形 槽体， 相对设置的两个侧壁设置平行电极11， 槽底上表面设置与细胞配合的网格槽13。 当细 胞放置在槽底上表面时， 细胞刚好在网格槽13上， 网格槽13限制了细胞的位移， 在微针拨动 细胞时不会影响其他细胞， 使操作更加稳定。 0017 所述网格槽13是长方形、 正方形、 菱形的任一一种。 0018 所述网格槽13的边长为40-150m， 高度为10-50m， 网格槽间距为小于45m。 卵母 细胞一般在90-150m， 当卵母细胞放置在槽底上表面时， 细胞刚好卡进网格槽13口上， 既不 会掉进网格槽内， 也不会掉落在网格槽13之间的表面上， 无需再次拨动细胞使之固定。

11、在网 格槽13口上， 方便工作人员的操作。 0019 所述电极11沿槽底长度方向设置。 在融合槽的长度方向上设置电极11， 使得细胞 在任何位置都可以进行细胞的融合， 其电压都能够符合操作的条件。 0020 所述挡板为无细胞毒性的医用胶， 电极11由无细胞毒性的医用胶固定在槽底， 医 用胶可以是 -氰基丙烯酸酯胶类产品。 0021 所述槽底由折光性较好的透明塑料或玻璃制成； 电极11为铂金制成。 透光性好的 塑料或者玻璃能够使其在显微镜下方便操作， 清楚的看到细胞； 铂金制作的电极11比普通 电机11更加耐用、 效果好。 0022 当把细胞放置在槽底上表面时， 只需在显微镜下找到细胞所在的位置即可进行融 合操作， 无需用微针拨动， 而且在融合操作的过程中， 微针在拨动的过程中不会影响其他细 胞的稳定。 0023 其他参照现有技术。 0024 以上所述的仅是本实用新型的优选实施方式， 应当指出， 对于本领域的技术人员 来说， 在不脱离本实用新型整体构思前提下， 还可以作出若干改变和改进， 这些也应该视为 本实用新型的保护范围。 说明书 2/2 页 4 CN 212246997 U 4 图1 说明书附图 1/1 页 5 CN 212246997 U 5 。