提高罗非鱼抗病性能的育种方法.pdf

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1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 202010017259.2 (22)申请日 2020.01.08 (71)申请人 广西壮族自治区水产引育种中心 地址 530031 广西壮族自治区南宁市江南 区白沙大道30号 (72)发明人 何金钊冯鹏霏周大颜廖洁明 廖愚滕云王冬钦冯勇翔 覃定彪杨宾兰 (74)专利代理机构 南宁智卓专利代理事务所 (普通合伙) 45129 代理人 谭月萍邓世江 (51)Int.Cl. A01K 61/10(2017.01) (54)发明名称 一种提高罗非鱼抗病性能的育种方法 (57)摘要 本发。

2、明公开了一种提高罗非鱼抗病性能的 育种方法， 包括以下步骤： 育苗养殖筛选， 将育苗 饲养后按大小筛选出来； 抗病性筛选， 向筛选出 来的个头大的鱼苗添加运动性气单胞菌、 假单胞 菌、 链球菌， 并给罗非鱼喂低蛋白高脂肪的饲料 后筛选出健康的鱼苗； 杂交选育， 将筛选出来的 罗非鱼个头较小的健康罗非鱼培育二代鱼苗； 循 环筛选育种， 将培育出来的二代鱼苗重复筛选， 当得到的健康鱼苗占据95以上为选育品种； 交 配育苗： 将选育品种作为选育繁殖的基础群体进 行繁殖培育。 该方法利用罗非鱼的免疫系统， 通 过病菌刺激产生抗体， 并且进行循环代代传下去 形成具有多种抗体的优良罗非鱼品种， 且该方法 。

3、的可操作性强， 便于进行批量作业繁殖， 经济价 值可观。 权利要求书1页 说明书5页 CN 111053054 A 2020.04.24 CN 111053054 A 1.一种提高罗非鱼抗病性能的育种方法， 其特征在于： 包括以下步骤： (1)育苗养殖筛选： 收集不同品系、 大小相近的罗非鱼苗混合饲养， 饲养一段时间后筛 选出个头大的和个头小的分别分开饲养； (2)抗病性筛选： 将步骤(1)中筛选出来的个头大的鱼苗置于适于罗非鱼生长的环境中 进行培养， 将向养殖环境中添加运动性气单胞菌、 假单胞菌、 链球菌， 并给罗非鱼喂低蛋白 高脂肪的饲料， 观察罗非鱼的生长状况并培养一段时间后筛选出健康的。

4、鱼苗； (3)杂交选育： 将步骤(2)中筛选出来的罗非鱼和步骤(1)中筛选出来的个头较小的健 康罗非鱼进行混合杂交育种， 培育出来的二代鱼苗备用； (4)循环筛选育种： 将步骤(3)中培育出来的二代鱼苗重复步骤(2)和步骤(3)， 直到操 作步骤(2)中筛选出来的健康鱼苗占据95以上， 得到选育品种； (5)交配育苗： 将步骤(4)中的选育品种作为选育繁殖的基础群体， 根据需要选择对应 的罗非鱼品种与选育品种进行育种繁殖得到对应品种的抗病性罗非鱼。 2.根据权利要求1所述的一种提高罗非鱼抗病性能的育种方法， 其特征在于： 在步骤 (1)中， 所述不同品系的罗非鱼包括尼罗罗非鱼、 莫桑比克罗非鱼。

5、、 黄边黑罗非鱼、 奥利亚罗 非鱼， 所述混合饲养的条件为水温保持在25-30， 水的PH值为6.8-8.0,水质经过杀菌消 毒， 且常流活水， 所有的罗非鱼苗在一个没有网格的水池中， 统一投食喂养。 3.根据权利要求2所述的一种提高罗非鱼抗病性能的育种方法， 其特征在于： 所述筛选 出个头较大的一半的筛选方法为将水池通过滤网分隔成两半， 将所有的罗非鱼置于其中一 半水池中， 向另一半无鱼的水池中投喂饲料， 小的罗非鱼会从滤网中穿过， 通过更换不同孔 径的滤网至滤网两侧的罗非鱼数量相等。 4.根据权利要求1所述的一种提高罗非鱼抗病性能的育种方法， 其特征在于： 在步骤 (2)中， 所述适于罗非。

6、鱼生长的环境为温度25-35， 保持活水， 水质PH值为6.5-7.2， 向水质 中添加运动性气单胞菌、 假单胞菌病、 链球菌病的量均为为1.0104-1.0106CFU/ml。 5.根据权利要求4所述的一种提高罗非鱼抗病性能的育种方法， 其特征在于： 所述无蛋 白高脂肪的饲料为以下重量份数的物质组成： 豆粕3-10份、 玉米淀粉40-70份、 大豆油20-40 份、 麦芽糖40-50份。 6.根据权利要求1所述的一种提高罗非鱼抗病性能的育种方法， 其特征在于： 在步骤 (3)中， 所述混合杂交育种是将步骤(2)中筛选出来的雌性罗非鱼和步骤(1)中筛选出来的 个头较小的雄性健康罗非鱼混合杂交，。

7、 步骤(2)中筛选出来的雄性罗非鱼和步骤(1)中筛选 出来的个头较小的雌性健康罗非鱼混合杂交。 7.根据权利要求1所述的一种提高罗非鱼抗病性能的育种方法， 其特征在于： 在步骤 (4)中， 所述健康鱼苗是无任何病症且能够和未经过抗病性筛选的罗非鱼一样增重的罗非 鱼。 8.根据权利要求1所述的一种提高罗非鱼抗病性能的育种方法， 其特征在于： 在步骤 (5)中所述与选育品种进行育种繁殖的罗非鱼为经过筛选的健康的优良罗非鱼。 权利要求书 1/1 页 2 CN 111053054 A 2 一种提高罗非鱼抗病性能的育种方法 技术领域 0001 本发明涉及鱼类育种技术领域， 特别涉及一种提高罗非鱼抗病性能。

8、的育种方法。 背景技术 0002 罗非鱼是世界水产业重点科研培养的淡水养殖鱼类， 且被誉为未来动物性蛋白质 的主要来源之一。 罗非鱼是我国主要水产养殖品种和出口创汇的主导水产品之一。 近年来， 在加工出口需求的拉动和政府优惠政策的扶持下， 罗非鱼的养殖面积和产量呈逐年较快增 长态势。 据统计， 2013年中国罗非鱼总产量达165万吨,加工出口86.7万吨。 苗种是罗非鱼养 殖产业的源头和必要的物质基础， 也是养殖业的核心问题， 良种对养殖业贡献率一般达到 40以上， 加强良种选育， 是实现罗非鱼从传统养殖模式向标准化、 规范化健康养殖转型升 级的前提。 但罗非鱼在养殖过程中易于出现运动性气单胞。

9、菌病、 假单胞菌病、 罗非鱼肥胖病 和链球菌病等疾病， 运动性气单胞菌病由嗜水气单细胞菌感染引起， 假单胞菌并是由荧光 假单胞菌感染引起， 罗非鱼肥胖病则是由于长期食用低蛋白高脂肪和高糖分的缺乏维生素 的饵料导致， 而链球菌则是由于链球菌感染引起， 这几种病害对罗非鱼养殖产量造成了极 大的威胁， 所以我们可以寻找一种能够解决上述问题的育种方法。 发明内容 0003 本发明的目的在于： 针对以上提出的问题， 提供了一种能够提高罗非鱼对运动性 气单胞菌病、 假单胞菌病、 罗非鱼肥胖病和链球菌病的抗病性的育种方法， 该方法操作简 单， 使用本方法选育出来的罗非鱼生病概率小， 不易传染， 便于密集养殖。

10、， 增加经济效益。 0004 为了实现上述发明目的， 本发明采用的技术方案如下： 0005 一种提高罗非鱼抗病性能的育种方法， 包括以下步骤： 0006 (1)育苗养殖筛选： 收集不同品系、 大小相近的罗非鱼苗混合饲养， 饲养一段时间 后筛选出个头大的和个头小的分别分开饲养； 0007 (2)抗病性筛选： 将步骤(1)中筛选出来的个头大的鱼苗置于适于罗非鱼生长的环 境中进行培养， 将向养殖环境中添加运动性气单胞菌、 假单胞菌、 链球菌， 并给罗非鱼喂低 蛋白高脂肪的饲料， 观察罗非鱼的生长状况并培养一段时间后筛选出健康的鱼苗； 0008 (3)杂交选育： 将步骤(2)中筛选出来的罗非鱼和步骤(。

11、1)中筛选出来的个头较小 的健康罗非鱼进行混合杂交育种， 培育出来的二代鱼苗备用； 0009 (4)循环筛选育种： 将步骤(3)中培育出来的二代鱼苗重复步骤(2)和步骤(3)， 直 到操作步骤(2)中筛选出来的健康鱼苗占据95以上， 得到选育品种； 0010 (5)交配育苗： 将步骤(4)中的选育品种作为选育繁殖的基础群体， 根据需要选择 对应的罗非鱼品种与选育品种进行育种繁殖得到对应品种的抗病性罗非鱼。 0011 进一步地， 在步骤(1)中， 所述不同品系的罗非鱼包括尼罗罗非鱼、 莫桑比克罗非 鱼、 黄边黑罗非鱼、 奥利亚罗非鱼， 所述混合饲养的条件为水温保持在25-30， 水的PH值为 6。

12、.8-8.0,水质经过杀菌消毒， 且常流活水， 所有的罗非鱼苗在一个没有网格的水池中， 统一 说明书 1/5 页 3 CN 111053054 A 3 投食喂养。 0012 进一步地， 所述筛选出个头较大的一半的筛选方法为将水池通过滤网分隔成两 半， 将所有的罗非鱼置于其中一半水池中， 向另一半无鱼的水池中投喂饲料， 小的罗非鱼会 从滤网中穿过， 通过更换不同孔径的滤网至滤网两侧的罗非鱼数量相等。 0013 进一步地， 在步骤(2)中， 所述适于罗非鱼生长的环境为温度25-35， 保持活水， 水质PH值为6.5-7.2， 向水质中添加运动性气单胞菌、 假单胞菌病、 链球菌病的量均为为1.0 1。

13、04-1.0106CFU/ml。 0014 进一步地， 所述无蛋白高脂肪的饲料为以下重量份数的物质组成： 豆粕3-10份、 玉 米淀粉40-70份、 大豆油20-40份、 麦芽糖40-50份。 0015 进一步地， 在步骤(3)中， 所述混合杂交育种是将步骤(2)中筛选出来的雌性罗非 鱼和步骤(1)中筛选出来的个头较小的雄性健康罗非鱼混合杂交， 步骤(2)中筛选出来的雄 性罗非鱼和步骤(1)中筛选出来的个头较小的雌性健康罗非鱼混合杂交。 0016 进一步地， 在步骤(4)中， 所述健康鱼苗是无任何病症且能够和未经过抗病性筛选 的罗非鱼一样增重的罗非鱼。 0017 进一步地， 在步骤(5)中， 。

14、所述与选育品种进行育种繁殖的罗非鱼为经过筛选的健 康的优良罗非鱼。 0018 综上所述， 由于采用了上述技术方案， 本发明的有益效果是： 0019 1、 本发明方法利用罗非鱼的免疫系统， 通过病菌刺激产生抗体， 并且进行循环代 代传下去形成具有多种抗体的优良罗非鱼品种， 且该方法的可操作性强， 便于进行批量作 业繁殖， 经济价值可观； 0020 2、 本发明在不同品种的罗非鱼中先进行第一步也就是生长力的筛选， 选择后通过 抗病性的测试， 使存活下来的罗非鱼能够免疫运动性气单胞菌、 假单胞菌、 链球菌， 而且能 够抵抗罗非鱼肥胖病的侵袭， 再使用这样的罗非鱼去进行繁殖培育能够得到可以密集饲养 且。

15、患病概率小的罗非鱼种， 具有巨大的经济价值。 具体实施方式 0021 为使本发明的目的、 技术方案及优点更加清楚明白， 以下举出优选实施例， 对本发 明进一步详细说明。 然而， 需要说明的是， 说明书中列出的许多细节仅仅是为了使读者对本 发明的一个或多个方面有一个透彻的理解， 即便没有这些特定的细节也可以实现本发明的 这些方面。 0022 实施例1 0023 一种提高罗非鱼抗病性能的育种方法， 包括以下步骤： 0024 (1)育苗养殖筛选： 收集不同品系、 大小相近的罗非鱼苗混合饲养， 饲养一段时间 后筛选出个头大的和个头小的分别分开饲养， 不同品系的罗非鱼包括尼罗罗非鱼、 莫桑比 克罗非鱼、。

16、 黄边黑罗非鱼、 奥利亚罗非鱼， 所述混合饲养的条件为水温保持在25， 水的PH 值为6.8-8.0,水质经过杀菌消毒， 且常流活水， 所有的罗非鱼苗在一个没有网格的水池中， 统一投食喂养； 0025 (2)抗病性筛选： 将步骤(1)中筛选出来的个头大的鱼苗置于适于罗非鱼生长的环 境中进行培养， 筛选出个头较大的一半的筛选方法为将水池通过滤网分隔成两半， 将所有 说明书 2/5 页 4 CN 111053054 A 4 的罗非鱼置于其中一半水池中， 向另一半无鱼的水池中投喂饲料， 小的罗非鱼会从滤网中 穿过， 通过更换不同孔径的滤网至滤网两侧的罗非鱼数量相等， 向养殖环境中添加运动性 气单胞菌。

17、、 假单胞菌、 链球菌， 并给罗非鱼喂低蛋白高脂肪的饲料， 无蛋白高脂肪的饲料为 以下重量份数的物质组成： 豆粕3份、 玉米淀粉40份、 大豆油20份、 麦芽糖40份， 观察罗非鱼 的生长状况并培养一段时间后筛选出健康的鱼苗， 适于罗非鱼生长的环境为温度25， 保 持活水， 水质PH值为6.5， 向水质中添加运动性气单胞菌、 假单胞菌、 链球菌的量均为为1.0 104CFU/ml； 0026 (3)杂交选育： 将步骤(2)中筛选出来的罗非鱼和步骤(1)中筛选出来的个头较小 的健康罗非鱼进行混合杂交育种， 将步骤(2)中筛选出来的雌性罗非鱼和步骤(1)中筛选出 来的个头较小的雄性健康罗非鱼混合杂。

18、交， 步骤(2)中筛选出来的雄性罗非鱼和步骤(1)中 筛选出来的个头较小的雌性健康罗非鱼混合杂交， 培育出来的二代鱼苗备用； 0027 (4)循环筛选育种： 将步骤(3)中培育出来的二代鱼苗重复步骤(2)和步骤(3)， 直 到操作步骤(2)中筛选出来的健康鱼苗占据95以上， 健康鱼苗是无任何病症且能够和未 经过抗病性筛选的罗非鱼一样增重的罗非鱼为选育品种； 0028 (5)交配育苗： 将步骤(4)中的选育品种作为选育繁殖的基础群体， 根据需要选择 对应的罗非鱼品种且经过筛选的健康的优良罗非鱼与选育品种进行育种繁殖得到对应品 种的抗病性罗非鱼。 0029 实施例2 0030 一种提高罗非鱼抗病性。

19、能的育种方法， 包括以下步骤： 0031 (1)育苗养殖筛选： 收集不同品系、 大小相近的罗非鱼苗混合饲养， 饲养一段时间 后筛选出个头大的和个头小的分别分开饲养， 不同品系的罗非鱼包括尼罗罗非鱼、 莫桑比 克罗非鱼、 黄边黑罗非鱼、 奥利亚罗非鱼， 所述混合饲养的条件为水温保持在30， 水的PH 值为8.0,水质经过杀菌消毒， 且常流活水， 所有的罗非鱼苗在一个没有网格的水池中， 统一 投食喂养； 0032 (2)抗病性筛选： 将步骤(1)中筛选出来的个头大的鱼苗置于适于罗非鱼生长的环 境中进行培养， 筛选出个头较大的一半的筛选方法为将水池通过滤网分隔成两半， 将所有 的罗非鱼置于其中一半水。

20、池中， 向另一半无鱼的水池中投喂饲料， 小的罗非鱼会从滤网中 穿过， 通过更换不同孔径的滤网至滤网两侧的罗非鱼数量相等， 向养殖环境中添加运动性 气单胞菌、 假单胞菌、 链球菌， 并给罗非鱼喂低蛋白高脂肪的饲料， 无蛋白高脂肪的饲料为 以下重量份数的物质组成： 豆粕10份、 玉米淀粉70份、 大豆油40份、 麦芽糖50份， 观察罗非鱼 的生长状况并培养一段时间后筛选出健康的鱼苗， 适于罗非鱼生长的环境为温度35， 保 持活水， 水质PH值为7.2， 向水质中添加运动性气单胞菌、 假单胞菌病、 链球菌病的量均为为 1.0106CFU/ml； 0033 (3)杂交选育： 将步骤(2)中筛选出来的罗。

21、非鱼和步骤(1)中筛选出来的个头较小 的健康罗非鱼进行混合杂交育种， 将步骤(2)中筛选出来的雌性罗非鱼和步骤(1)中筛选出 来的个头较小的雄性健康罗非鱼混合杂交， 步骤(2)中筛选出来的雄性罗非鱼和步骤(1)中 筛选出来的个头较小的雌性健康罗非鱼混合杂交， 培育出来的二代鱼苗备用； 0034 (4)循环筛选育种： 将步骤(3)中培育出来的二代鱼苗重复步骤(2)和步骤(3)， 直 到操作步骤(2)中筛选出来的健康鱼苗占据95以上， 健康鱼苗是无任何病症且能够和未 说明书 3/5 页 5 CN 111053054 A 5 经过抗病性筛选的罗非鱼一样增重的罗非鱼为选育品种； 0035 (5)交配育。

22、苗： 将步骤(4)中的选育品种作为选育繁殖的基础群体， 根据需要选择 对应的罗非鱼品种且经过筛选的健康的优良罗非鱼与选育品种进行育种繁殖得到对应品 种的抗病性罗非鱼。 0036 实施例3 0037 一种提高罗非鱼抗病性能的育种方法， 包括以下步骤： 0038 (1)育苗养殖筛选： 收集不同品系、 大小相近的罗非鱼苗混合饲养， 饲养一段时间 后筛选出个头大的和个头小的分别分开饲养， 不同品系的罗非鱼包括尼罗罗非鱼、 莫桑比 克罗非鱼、 黄边黑罗非鱼、 奥利亚罗非鱼， 所述混合饲养的条件为水温保持在30， 水的PH 值为7,水质经过杀菌消毒， 且常流活水， 所有的罗非鱼苗在一个没有网格的水池中， 。

23、统一投 食喂养； 0039 (2)抗病性筛选： 将步骤(1)中筛选出来的个头大的鱼苗置于适于罗非鱼生长的环 境中进行培养， 筛选出个头较大的一半的筛选方法为将水池通过滤网分隔成两半， 将所有 的罗非鱼置于其中一半水池中， 向另一半无鱼的水池中投喂饲料， 小的罗非鱼会从滤网中 穿过， 通过更换不同孔径的滤网至滤网两侧的罗非鱼数量相等， 向养殖环境中添加运动性 气单胞菌、 假单胞菌、 链球菌， 并给罗非鱼喂低蛋白高脂肪的饲料， 无蛋白高脂肪的饲料为 以下重量份数的物质组成： 豆粕6份、 玉米淀粉60份、 大豆油30份、 麦芽糖45份， 观察罗非鱼 的生长状况并培养一段时间后筛选出健康的鱼苗， 适于。

24、罗非鱼生长的环境为温度30， 保 持活水， 水质PH值为7， 向水质中添加运动性气单胞菌、 假单胞菌、 链球菌的量均为为1.0 105CFU/ml； 0040 (3)杂交选育： 将步骤(2)中筛选出来的罗非鱼和步骤(1)中筛选出来的个头较小 的健康罗非鱼进行混合杂交育种， 将步骤(2)中筛选出来的雌性罗非鱼和步骤(1)中筛选出 来的个头较小的雄性健康罗非鱼混合杂交， 步骤(2)中筛选出来的雄性罗非鱼和步骤(1)中 筛选出来的个头较小的雌性健康罗非鱼混合杂交， 培育出来的二代鱼苗备用； 0041 (4)循环筛选育种： 将步骤(3)中培育出来的二代鱼苗重复步骤(2)和步骤(3)， 直 到操作步骤(。

25、2)中筛选出来的健康鱼苗占据95以上， 健康鱼苗是无任何病症且能够和未 经过抗病性筛选的罗非鱼一样增重的罗非鱼为选育品种； 0042 (5)交配育苗： 将步骤(4)中的选育品种作为选育繁殖的基础群体， 根据需要选择 对应的罗非鱼品种且经过筛选的健康的优良罗非鱼与选育品种进行育种繁殖得到对应品 种的抗病性罗非鱼。 0043 以上实施例中， 实施例1-实施例3是完全按照本发明的操作步骤进行， 将实施例1、 实施例2和实施例3中的罗非鱼作为实验组， 分别为实验组1、 实验组2和实验组3， 采用步骤 (1)的方法筛选出来的个头大的鱼作为对照组， 分为4组分别为对照组1、 对照组2、 对照组3， 将这六。

26、组置于统一的环境进行饲养， 投食情况均一样， 并向这6组中加入同样数量的健康罗 非鱼进行繁殖， 并向实验组1和对照组1中投入运动性气单胞菌、 向实验组2和对照组2中投 入假单胞菌、 向对照组3和实验组3中投入链球菌， 同时这6组中的饲料中采用本发明的低蛋 白高脂肪的饲料， 最终6组罗非鱼的成活情况如下表所示。 0044 表1各组罗非鱼的成活情况 说明书 4/5 页 6 CN 111053054 A 6 0045 0046 由上表可知， 只有完全按照本发明的步骤操作选育出来的罗非鱼才能够真正实现 对运动性气单胞菌、 假单胞菌、 链球菌和肥胖鱼病的抵抗， 利用本方法育种出来的罗非鱼出 来抗病性强， 生长力旺盛， 能够快速实现售卖， 具有巨大的经济价值。 0047 以上所述仅是本发明的优选实施方式， 应当指出， 对于本技术领域的普通技术人 员来说， 在不脱离本发明原理的前提下， 还可以作出若干改进和润饰， 这些改进和润饰也应 视为本发明的保护范围。 说明书 5/5 页 7 CN 111053054 A 7 。