治疗胰腺癌用特异靶向药剂配方及其制备工艺.pdf

《治疗胰腺癌用特异靶向药剂配方及其制备工艺.pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《治疗胰腺癌用特异靶向药剂配方及其制备工艺.pdf（6页完成版）》请在专利查询网上搜索。

1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 202010271731.5 (22)申请日 2020.04.09 (71)申请人 类承斌 地址 255036 山东省淄博市张店区共青团 西路54号淄博市中心医院 (72)发明人 类承斌张文杜文燕 (74)专利代理机构 天津铂茂专利代理事务所 (普通合伙) 12241 代理人 张天翔 (51)Int.Cl. A61K 9/16(2006.01) A61K 47/12(2006.01) A61K 47/02(2006.01) A61K 47/36(2006.01) A61K 31/。

2、439(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 一种治疗胰腺癌用特异靶向药剂配方及其 制备工艺 (57)摘要 本发明公开了一种治疗胰腺癌用特异靶向 药剂配方， 包括以下组分： 化合物X-76， 即43-O- (2-(4-(二乙氨基甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-1- 基)乙酰基)氧雷帕霉素、 改性磁性羧甲基壳聚糖 纳米微球， 其中， 所述化合物X-76与改性磁性羧 甲基壳聚糖纳米微球的重量份比为1： 1520。 本 发明能够使得化合物X-76/改性磁性羧甲基壳聚 糖纳米载药微球具有超顺磁性， 不仅可在外磁场 引导下通过静脉、 动脉导管和口服给药或直接注 射。

3、等途径选择性地到达并定位于肿瘤靶区释放 药物， 提高化合物X-76的靶向治疗作用制作工艺 中温度、 时间及搅拌速度的综合控制， 使得化合 物X-76/改性磁性羧甲基壳聚糖纳米载药微球直 径较小 （352nm） 、 缓释性能好， 同时加强了药剂 对胰腺癌细胞PANC-1的靶向治疗效果。 权利要求书1页 说明书4页 CN 111388427 A 2020.07.10 CN 111388427 A 1.一种治疗胰腺癌用特异靶向药剂配方， 其特征在于， 包括以下组分： 化合物X-76， 即 43-O-(2-(4-(二乙氨基甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)乙酰基)氧雷帕霉素、 改性磁性羧甲 基。

4、壳聚糖纳米微球， 其中， 所述化合物X-76与改性磁性羧甲基壳聚糖纳米微球的重量份比 为1： 1520。 2.根据权利要求1所述的一种治疗胰腺癌用特异靶向药剂配方， 其特征在于， 所述改性 磁性羧甲基壳聚糖纳米载药微球的制备， 具体步骤如下： 首先将油酸包裹的磁性Fe3O4纳米 颗粒分散到环己烷中作为油相， 其次将羧甲基壳聚糖水溶液作为水相加入至油相中， 在超 声波作用下搅拌混合均匀， 得到混合液， 然后向混合液中加入原酸酯类交联剂， 继续搅拌反 应13h； 再进行磁分离收集下层沉淀， 分别用石油醚、 丙酮洗涤， 干燥， 得到改性磁性羧甲 基壳聚糖纳米微球。 3.根据权利要求2所述的一种治疗胰。

5、腺癌用特异靶向药剂配方， 其特征在于， 所述油酸 包裹的磁性Fe3O4纳米颗粒形成的油相与羧甲基壳聚糖水溶液形成的水相的体积比46:1， 所述羧甲基壳聚糖水溶液的质量体积浓度为1.51.8%， 所述超声波的超声时间为15 25min， 搅拌转速为500600rpm。 4.一种治疗胰腺癌用特异靶向药剂的制备工艺， 包括以下步骤： S1、 将化合物X-76， 即43-O-(2-(4-(二乙氨基甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)乙酰基) 氧雷帕霉素溶于马来酸中， 作为有机相， 将改性磁性羧甲基壳聚糖纳米微球配成水分散液， 作为水相； S2、 将步骤S1得到的有机相边搅拌边加入至水相中， 在2。

6、040下搅拌820h， 得到混 合料； S3、 采用去离子水对步骤S2得到的混合料进行洗涤， 然后用磁分离收集微球； S4、 将步骤S3得到的微球进行冷冻干燥， 粉碎， 得到化合物X-76/改性磁性羧甲基壳聚 糖纳米载药微球， 即特异靶向药剂。 5.根据权利要求4所述的一种治疗胰腺癌用特异靶向药剂的制备工艺， 其特征在于， 步 骤S1中， 所述改性磁性羧甲基壳聚糖纳米微球配成的水分散液的浓度为0.20.5%， 所述改 性磁性羧甲基壳聚糖纳米微球与化合物X-76的重量份比1： 1518。 6.根据权利要求4所述的一种治疗胰腺癌用特异靶向药剂的制备工艺， 其特征在于， 步 骤S2中， 所述搅拌的转。

7、速为6001500rpm， 搅拌时间为915h， 步骤S3中， 所述去离子水洗 涤、 磁分离步骤反复进行35次。 7.根据权利要求4所述的一种治疗胰腺癌用特异靶向药剂的制备工艺， 其特征在于， 步 骤S4中， 所述冷冻干燥时间为1015h， 所述冷冻干燥的温度为-10-15， 所述特异靶向 药剂的粒径为352nm。 权利要求书 1/1 页 2 CN 111388427 A 2 一种治疗胰腺癌用特异靶向药剂配方及其制备工艺 技术领域 0001 本发明涉及靶向抗癌药剂技术领域， 尤其涉及一种治疗胰腺癌用特异靶向药剂配 方及其制备工艺。 背景技术 0002 胰腺癌是一种恶性程度很高， 诊断和治疗都很。

8、困难的消化道恶性肿瘤， 约90%为起 源于腺管上皮的导管腺癌。 其发病率和死亡率近年来明显上升。 5年生存率1%， 是预后最差 的恶性肿瘤之一。 胰腺癌早期的确诊率不高， 手术死亡率较高， 而治愈率很低。 本病发病率 男性高于女性， 男女之比为1.52:1， 男性患者远较绝经前的妇女多见， 绝经后妇女的发病 率与男性相仿。 0003 靶向药物是目前最先进的用于治疗癌症的药物， 它与传统药物最大的不同就在于 其作用机理上。 常规化疗药物是通过对细胞的毒害发挥作用的， 由于不能准确识别肿瘤细 胞， 因此在杀灭肿瘤细胞的同时也会殃及正常细胞， 这就是化疗药物副作用的根源。 靶向药 物是针对肿瘤基因开。

9、发的， 它能够识别肿瘤细胞上由肿瘤细胞特有的基因所决定的特征性 位点。 目前靶向治疗在大肠癌、 肺癌等癌症方面都取得非常好的疗效， 但靶向药物治疗在胰 腺癌中的治疗效果还不是很理想。 小尺寸的磁性纳米粒子具有与病毒 （20450nm） 、 蛋白质 （550nm） 、 DNA或基因 （2nm宽 和10nm100nm长） 尺度相比拟的大小， 因此当它们用作磁靶向药物载体时， 不仅能进入到 病变器官或组织靶向位置， 而且能够进入到肿瘤细胞的内部， 还能够避免靶位栓塞。 同时， 它具有较高的表面活性和磁性能， 在真空密封、 润滑、 磁记录、 靶向药物和生物技术等方面 具有广泛的应用。 发明内容 000。

10、4 本发明的目的是为了解决现有技术中存在的缺点， 而提出的一种治疗胰腺癌用特 异靶向药剂配方以及制备工艺。 0005 本发明的目的之一在于提供一种治疗胰腺癌用特异靶向药剂配方， 包括以下组 分： 化合物X-76， 即43-O-(2-(4-(二乙氨基甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)乙酰基)氧雷帕 霉素、 改性磁性羧甲基壳聚糖纳米微球， 其中， 所述化合物X-76与所述改性磁性羧甲基壳聚 糖纳米微球的重量份比为1： 1520。 0006 优选的， 所述改性磁性羧甲基壳聚糖纳米载药微球的制备， 具体步骤如下： 首先将 油酸包裹的磁性Fe3O4纳米颗粒分散到环己烷中作为油相， 其次将羧甲基壳。

11、聚糖水溶液作为 水相加入至油相中， 在超声波作用下搅拌混合均匀， 得到混合液， 然后向混合液中加入原酸 酯类交联剂， 继续搅拌反应13h； 再进行磁分离收集下层沉淀， 分别用石油醚、 丙酮洗涤， 干燥， 得到改性磁性羧甲基壳聚糖纳米微球。 0007 优选的， 所述油酸包裹的磁性Fe3O4纳米颗粒形成的油相与羧甲基壳聚糖水溶液形 说明书 1/4 页 3 CN 111388427 A 3 成的水相的体积比46:1， 所述羧甲基壳聚糖水溶液的质量体积浓度为1.51.8%； 所述超 声波的超声时间为1525min， 搅拌转速为500600rpm。 0008 本发明的目的之二在于提供一种治疗胰腺癌用特异。

12、靶向药剂的制备工艺， 包括以 下步骤： S1、 将化合物X-76， 即43-O-(2-(4-(二乙氨基甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)乙酰基) 氧雷帕霉素溶于马来酸中， 作为有机相， 将改性磁性羧甲基壳聚糖纳米微球配成水分散液， 作为水相； S2、 将步骤S1得到的有机相边搅拌边加入至水相中， 在2040下搅拌820h， 得到混 合料； S3、 采用去离子水对步骤S2得到的混合料进行洗涤， 然后用磁分离收集微球； S4、 将步骤S3得到的微球进行冷冻干燥， 粉碎， 得到化合物X-76/改性磁性羧甲基壳聚 糖纳米载药微球， 即特异靶向药剂。 0009 优选的， 步骤S1中， 所述改性磁。

13、性羧甲基壳聚糖纳米微球配成的水分散液的浓度 为0.20.5%， 所述改性磁性羧甲基壳聚糖纳米微球与化合物X-76的重量份比1： 1518。 0010 优选的， 步骤S2中， 所述搅拌的转速为6001500rpm， 搅拌时间为915h， 步骤S3 中， 所述去离子水洗涤、 磁分离步骤反复进行35次。 0011 优选的， 步骤S4中， 所述冷冻干燥时间为1015h， 所述冷冻干燥的温度为-10- 15， 所述特异靶向药剂的粒径为352nm。 0012 与现有技术相比， 本发明的有益效果如下： 本发明中， 由于采用油酸包裹的磁性Fe3O4纳米颗粒代替常规的磁性Fe3O4纳米颗粒进 行植入， 能够使得。

14、化合物X-76/改性磁性羧甲基壳聚糖纳米载药微球具有超顺磁性， 不仅可 在外磁场引导下通过静脉、 动脉导管和口服给药或直接注射等途径选择性地到达并定位于 肿瘤靶区释放药物， 提高化合物X-76的靶向治疗作用。 本发明制作工艺中温度、 时间及搅拌 速度的综合控制， 使得化合物X-76/改性磁性羧甲基壳聚糖纳米载药微球直径较小 （35 2nm） 、 缓释性能好， 同时加强了药剂对胰腺癌细胞PANC-1的靶向治疗效果。 具体实施方式 0013 下面结合具体实施例对本发明作进一步解说。 0014 实施例1 S1、 将化合物X-76， 即43-O-(2-(4-(二乙氨基甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-。

15、1-基)乙酰基) 氧雷帕霉素溶于马来酸中， 作为有机相， 将改性磁性羧甲基壳聚糖纳米微球配成水分散液， 作为水相， 其中， 改性磁性羧甲基壳聚糖纳米微球配成的水分散液的浓度为0.2%， 改性磁性 羧甲基壳聚糖纳米微球与化合物X-76的重量份比1： 18； S2、 将步骤S1得到的有机相边搅拌边加入至水相中， 在20下搅拌8h， 搅拌的转速为 600rpm， 得到混合料； S3、 采用去离子水对步骤S2得到的混合料进行洗涤， 然后用磁分离收集微球， 其中， 所 述去离子水洗涤、 磁分离步骤反复进行5次； S4、 将步骤S3得到的微球进行冷冻干燥， 冷冻干燥时间为15h， 冷冻干燥的温度为-15 。

16、， 粉碎， 得到化合物X-76/改性磁性羧甲基壳聚糖纳米载药微球， 即特异靶向药剂 （记为 说明书 2/4 页 4 CN 111388427 A 4 P1） ， 所述特异靶向药剂的粒径为37nm。 0015 实施例2 S1、 将化合物X-76， 即43-O-(2-(4-(二乙氨基甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)乙酰基) 氧雷帕霉素溶于马来酸中， 作为有机相， 将改性磁性羧甲基壳聚糖纳米微球配成水分散液， 作为水相， 其中， 改性磁性羧甲基壳聚糖纳米微球配成的水分散液的浓度为0.2%， 改性磁性 羧甲基壳聚糖纳米微球与化合物X-76的重量份比1： 20； 其中， 所述改性磁性羧甲基壳聚。

17、糖纳米载药微球的制备， 具体步骤如下： 首先将油酸包 裹的磁性Fe3O4纳米颗粒分散到环己烷中作为油相； 其次将质量体积浓度为1.5%的羧甲基壳 聚糖水溶液作为水相加入至油相中， 其中， 所述油酸包裹的磁性Fe3O4纳米颗粒形成的油相 与羧甲基壳聚糖水溶液形成的水相的体积比4： 1， 在超声波作用下搅拌混合均匀， 超声波的 超声时间为15min， 搅拌转速为550rpm， 得到混合液， 然后向混合液中加入原酸酯类交联剂， 继续搅拌反应2h； 再进行磁分离收集下层沉淀， 分别用石油醚、 丙酮洗涤， 干燥， 得到改性磁 性羧甲基壳聚糖纳米微球； S2、 将步骤S1得到的有机相边搅拌边加入至水相中，。

18、 在20下搅拌8h， 搅拌的转速为 500rpm， 得到混合料； S3、 采用去离子水对步骤S2得到的混合料进行洗涤， 然后用磁分离收集微球， 其中， 所 述去离子水洗涤、 磁分离步骤反复进行4次； S4、 将步骤S3得到的微球进行冷冻干燥， 冷冻干燥时间为15h， 冷冻干燥的温度为-12 ， 粉碎， 得到化合物X-76/改性磁性羧甲基壳聚糖纳米载药微球， 即特异靶向药剂 （记为 P2） ， 所述特异靶向药剂的粒径为36nm。 0016 实施例3 S1、 将化合物X-76， 即43-O-(2-(4-(二乙氨基甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)乙酰基) 氧雷帕霉素溶于马来酸中， 作为有机。

19、相， 将改性磁性羧甲基壳聚糖纳米微球配成水分散液， 作为水相， 其中， 改性磁性羧甲基壳聚糖纳米微球配成的水分散液的浓度为0.2%， 改性磁性 羧甲基壳聚糖纳米微球与化合物X-76的重量份比1： 16； 其中， 所述改性磁性羧甲基壳聚糖纳米载药微球的制备， 具体步骤如下： 首先将油酸包 裹的磁性Fe3O4纳米颗粒分散到环己烷中作为油相； 其次将质量体积浓度为1.8%的羧甲基壳 聚糖水溶液作为水相加入至油相中， 其中， 所述油酸包裹的磁性Fe3O4纳米颗粒形成的油相 与羧甲基壳聚糖水溶液形成的水相的体积比5： 1， 在超声波作用下搅拌混合均匀， 超声波的 超声时间为25min， 搅拌转速为600。

20、rpm， 得到混合液， 然后向混合液中加入原酸酯类交联剂， 继续搅拌反应3h； 再进行磁分离收集下层沉淀， 分别用石油醚、 丙酮洗涤， 干燥， 得到改性磁 性羧甲基壳聚糖纳米微球； S2、 将步骤S1得到的有机相边搅拌边加入至水相中， 在30下搅拌8h， 搅拌的转速为 700rpm， 得到混合料； S3、 采用去离子水对步骤S2得到的混合料进行洗涤， 然后用磁分离收集微球， 其中， 所 述去离子水洗涤、 磁分离步骤反复进行3次； S4、 将步骤S3得到的微球进行冷冻干燥， 冷冻干燥时间为15h， 冷冻干燥的温度为-15 ， 粉碎， 得到化合物X-76/改性磁性羧甲基壳聚糖纳米载药微球， 即特异。

21、靶向药剂 （记为 P3） ， 所述特异靶向药剂的粒径为34nm。 说明书 3/4 页 5 CN 111388427 A 5 0017 细胞毒性试验 受试药物： 实施例13制备的X-76/改性磁性羧甲基壳聚糖纳米载药微球P1、 P2、 P3作 为实验组， 以及雷帕霉素作为对照组。 0018 将人胰腺癌PANC-1培养在含10胎牛血清F12培养基中， 置于37 C、 含5CO2的饱 和湿度条件下培养。 将对数生长期的肿瘤细胞以10000个/孔接种于96孔培养板， 培养24h 后， 加入用培养基稀释分别至终浓度分别为0.01、 0.1、 1、 5、 l0、 20、 25及50 mol/L的化合物， 。

22、以相同浓度梯度的雷帕霉素作为阳性对照， 不加药培养基作空白对照， 每个浓度设3个重复 孔。 培养48h， 用预冷体积分数10的TCA固定细胞， 4放置1h弃培养液， 后蒸馏水洗涤5次， 室温自然干燥。 加入由1冰醋酸配制的0.4SRB溶液， 室温染色15min， 弃去培养液， 以1 醋酸洗涤5次， 室温自然干燥。 最后加入10mmol/LTris溶液(pH10.5)， 酶标仪540nm波长下测 定OD值。 细胞增殖抑制率()(1-实验组/空白对照组)*100。 并计算化合物对肿瘤细胞 的IC50。 并计算化合物对肿瘤细胞的IC50。 0019 抑制率 （%） = （ （阴性对照组OD值-实验组。

23、OD值） /阴性对照组OD值） *100% 实施组1实施组2实施组3对照组1 人胰腺癌 （IC50）20.30.219.70.220.50.225.20.3 有上述细胞毒性实验得到的数据结果可知， 本发明制备的化合物X-76/改性磁性羧甲 基壳聚糖纳米载药微球对人胰腺癌PANC-1细胞较单纯的雷帕霉素具有更强的杀伤力。 0020 以上所述， 仅为本发明较佳的具体实施方式， 但本发明的保护范围并不局限于此， 任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内， 根据本发明的技术方案及其 发明构思加以等同替换或改变， 都应涵盖在本发明的保护范围之内。 说明书 4/4 页 6 CN 111388427 A 6 。