一种从水柏枝中提取槲皮素的方法.pdf

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1、10申请公布号CN104072463A43申请公布日20141001CN104072463A21申请号201410266358922申请日20140616C07D311/30200601C07D311/4020060171申请人南京泽朗医药科技有限公司地址210046江苏省南京市栖霞区尧化街道甘家边108号05幢6楼72发明人刘东锋杨成东54发明名称一种从水柏枝中提取槲皮素的方法57摘要本发明涉及一种从水柏枝中提取槲皮素的方法，具体涉及一种利用生物酶酶解与大孔吸附树脂相结合的方法。其处理步骤将水柏枝烘干、粉碎酶解加提取溶剂回流提取减压浓缩纯化、浓缩。本发明工艺简单、提取效率高、成本低、适于大规。

2、模工业化生产。51INTCL权利要求书1页说明书2页19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书1页说明书2页10申请公布号CN104072463ACN104072463A1/1页21一种从水柏枝中提取槲皮素的方法，其特征在于采用以下操作步骤A、将新鲜水柏枝材料在温度为6070的烘箱中干燥13小时，粉碎过4060目筛，收集粗粉备用；B、称取一定量的粗粉置于提取器中，加水浸润并加入生物酶试剂进行酶解反应，收集酶解原料；C、然后在粗粉混合液中加入提取溶剂，采用回流提取方法；D、过滤，收集滤液，滤渣重复提取24次，合并提取液减压浓缩至原体积的1/41/2；E、将浓缩液上大孔吸附树脂，用。

3、洗脱液洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩至原体积的1/41/2。2根据权利要求1所述的从水柏枝中提取槲皮素的方法，其特征在于步骤B中所述的粗粉与水的料液比为1051，加入生物酶的量为粗粉重量的053。3根据权利要求1所述的从水柏枝中提取槲皮素的方法，其特征在于步骤B所述的生物酶为纤维素酶、淀粉酶、半纤维素酶和果胶酶中的一种，酶解时的温度设定在3045，酶解反应的时间为4080MIN。4根据权利要求1所述的从水柏枝中提取槲皮素的方法，其特征在于步骤C中加入的提取溶剂为30盐酸和75甲醇的混合液，且体积比为114。5根据权利要求1所述的从水柏枝中提取槲皮素的方法，其特征在于步骤C中回流提取的固液比为1。

4、410，每次回流提取的时间为60120MIN。6根据权利要求1所述的从水柏枝中提取槲皮素的方法，其特征在于步骤E中所述的大孔吸附树脂为AB8、D101、D101I、DA20中的一种。7根据权利要求1所述的从水柏枝中提取槲皮素的方法，其特征在于步骤E中所述的洗脱过程为先用柱体积68倍的去离子水洗脱，再用48倍柱体积、浓度为7585的乙醇洗脱。权利要求书CN104072463A1/2页3一种从水柏枝中提取槲皮素的方法技术领域0001本发明涉及一种天然药用植物中活性成分的提取技术，具体涉及一种利用生物酶酶解技术与大孔吸附树脂相结合的方法提取天然植物中的有效成分。背景技术0002水柏枝，其主要含有的化。

5、学成分为黄酮、槲皮苷、槲皮素、山奈酚、没食子酸等。水柏枝是一种藏药，可用于解表透疹，祛风止痒，主治麻疹不透，风湿痹痛，癣症。分布于湖北巴东、秭归和四川巫山，生于低山河岸边及路旁。0003槲皮素，又名栎精，槲皮黄素，分子式C15H10O7，分子量30223。溶于冰醋酸，碱性水溶液呈黄色，几乎不溶于水、乙醇溶液；味很苦。可作为药品，具有较好的祛痰、止咳作用，并有一定的平喘作用。此外还有降低血压、增强毛细血管抵抗力、减少毛细血管脆性、降血脂、扩张冠状动脉，增加冠脉血流量等作用。用于治疗慢性支气管炎。对冠心病及高血压患者也有辅助治疗作用。0004目前槲皮素提取的材料来源主要是以银杏叶和芦丁为主，本发明。

6、提供了从另外一种植物中提取槲皮素的方法，从而使得槲皮素的植物来源更为广泛。本发明采用的是醇溶液回流提取法、在生物酶解的条件下提取水柏枝中的槲皮素以及采用大孔吸附树脂对槲皮素的纯化，使得槲皮素的出率和纯度都得到了很大的提高。在申请公开的专利“一种从杜仲叶中提取槲皮素的方法”（专利号2012101262360）中公开了一种提取槲皮素的方法，其步骤主要为采用醇溶液回流提取、浓缩、纯化即得槲皮素，其中材料处理的过程不充分，使得材料里面有效成分的出率大大降低了。发明内容0005本发明是针对现有制备水柏枝槲皮素的方法所存在的缺陷而进行的研究，主要是为了提供一种操作简单、提取效率高、成本低、可工业化实现的提。

7、取方法。0006本发明的步骤如下A、将新鲜水柏枝材料在温度为6070的烘箱中干燥13小时，粉碎过4060目筛，收集粗粉备用；B、称取一定量的粗粉置于提取器中，加入粗粉重量051倍的水浸润，然后加入粗粉重量053的生物酶试剂进行酶解反应，在3045的条件下让其酶解反应4080MIN，收集酶解原料；C、然后在粗粉混合液中加入提取溶剂，采用醇溶液回流提取方法；D、过滤，收集滤液，滤渣重复提取24次，合并提取液减压浓缩至原体积的1/41/2；E、将浓缩液上大孔吸附树脂，用洗脱液洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩至原体积的1/41/2。0007步骤B所述的生物酶为纤维素酶、淀粉酶、半纤维素酶和果胶酶中的一种。

8、。0008步骤C中所述加入的提取溶剂为30盐酸和75甲醇的混合液，且体积比为1说明书CN104072463A2/2页414。0009步骤C中所述加入的原材料与提取溶剂的料液比为1410，每次回流提取的时间为60120MIN。0010步骤E中所述的大孔吸附树脂为AB8、D101、D101I、DA20中一种，所述的洗脱过程为先用柱体积68倍的去离子水洗脱，再用48倍柱体积、浓度为7585的乙醇洗脱。0011本发明先对材料进行酶解处理，使得水柏枝中有效成分的出率得到了很大的提高，其操作步骤简单易行，对环境无污染；而且本发明采用醇跟酸的混合液作为提取溶剂，可以很大程度上提高槲皮素的提取率；大孔吸附树脂。

9、的使用，让所得槲皮素的纯度更高，并且大孔吸附树脂可以重复使用，从而降低了生产的成本，具有工业化意义。0012下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。0013具体实施方式实施例1将新鲜的水柏枝放在温度设定为70的烘箱中干燥1小时，干燥完毕，将其粉碎过筛40目，收集粗粉备用，称取100G水柏枝粗粉于提取器中，加入50ML水，同时加入2G的纤维素酶在35的条件下酶解60MIN，收集酶解原料，然后加入400ML的提取溶剂（提取溶剂为V30盐酸V75甲醇13）回流提取60MIN，过滤，收集滤液，滤渣重复回流提取2次，合并提取液减压浓缩至原体积的1/3。将浓缩液上AB8大孔吸附树脂柱，先用柱体积6倍的去离子水洗脱，再用5倍柱体积、浓度为75的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩至原体积的1/4，即得水柏枝槲皮素样品。经HPLC检测，所得原材料中槲皮素的含量为895，槲皮素的提取率为6041。说明书CN104072463A。