一种高密度培养异胶藻的培养基和培养方法.pdf

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1、10申请公布号CN104130945A43申请公布日20141105CN104130945A21申请号201410386362922申请日20140808C12N1/12200601C12R1/8920060171申请人临沂大学地址276000山东省临沂市双岭路中段临沂大学72发明人王培磊54发明名称一种高密度培养异胶藻的培养基和培养方法57摘要本发明涉及水产养殖领域。利用皮革厂废水培养异胶藻，能够实现皮革厂废水中有用物质的重复利用且可提高异胶藻生长速度及营养成分含量，达到保护环境和生产生物资源的双重效果，操作简便快速、成本低、无污染、社会、经济和生态效益高，既解决了皮革厂废水污染的问题，又解。

2、决了异胶藻生长慢、产量低、效益差、易污染、营养成分含量低的缺点，实现了异胶藻的高效生产。51INTCL权利要求书2页说明书6页附图1页19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书2页说明书6页附图1页10申请公布号CN104130945ACN104130945A1/2页21一种利用皮革厂废水养殖异胶藻的培养基，其特征在于配方如下皮革厂废水90毫升，羊粪浸出液12毫升，兔粪浸出液15毫升，土壤浸出液16毫升，海泥抽取液12毫升，F/2微量元素溶液1毫升，F/2维生素溶液1毫升，羧甲基纤维素钠3毫克，赤霉素01毫克，三十烷醇02毫克，硬脂酸镁2毫克，葡萄糖氧化酶05毫克，硬脂酰乳酸钙。

3、4毫克，羟丙基甲基纤维素10毫克，D异抗坏血酸钠2毫克，柠檬酸钠2毫克，异亮氨酸1毫克，丝氨酸2毫克，氯化钴02毫克，铬酸钾01毫克，尿素3毫克，磷酸二氢钾5毫克，碳酸氢铵8毫克，硝酸钠4毫克，硅酸钾6毫克，肌醇005毫克，麦饭石粉4毫克，臭氧消毒的纯净海水1000毫升。2一种利用皮革厂废水养殖异胶藻的培养方法，其特征在于具体步骤如下培养容器为1000升贮水桶，市场有售，食品级高密度聚乙烯材料制成，无缝一体式结构，坚固耐用，抗冲击，无色或白色，有较好的透光性，以利藻类进行光合作用，靠近底部有一水龙头，水桶顶部有一圆形盖子，上有旋丝，可旋转而密封，盖子打上3个孔，一个孔插入充气管，另一个孔插入排。

4、气管，充气管和排气管都是玻璃管，内径6毫米，还有一个孔穿入一根金属导线，导线末端接一个40W节能灯，将贮水桶洗刷干净，后用蒸馏水润洗3遍，装入权利要求1所述的培养基650升，充气混合5分钟，选择生命力旺盛、无污染的异胶藻接种，接种密度5104CELL/ML；盖子上插入两根干净玻璃管，一根较长，60厘米，顶端露出盖子15厘米，下端通过料管与散气石连接，用以充气，散气石的作用是形成很小的气泡，避免大气泡或翻滚的波浪打碎藻细胞，另一根较短，30厘米，两端露出盖子即可，用以排气，两根玻璃管同样粗细，用干净的透明胶带将两根玻璃管固定，长的玻璃管上端用料管与充气泵相连，充入混合气体，混合气体成分和体积比例。

5、是空气纯二氧化碳臭氧氨气92611，连续充气，充气量不宜太大，以藻细胞浮起不下沉即可，室外培养，太阳光照射，最佳温度252，最佳光照强度40008000LUX，夜间打开节能灯进行照明，培养的前5天，水桶上方搭建一简易棚，上放置帘子遮挡光线，使光照强度维持在16003200LUX，避免强烈阳光对细胞造成的光伤害，第6天撤掉帘子，较强的光照有利于细胞的生长繁殖和高不饱和脂肪酸的合成，培养至第7天，停止充气，拿开盖子，补充新鲜培养基80升，以弥补蒸发掉的水分，盖上盖子，充气，继续培养，至第9天，异胶藻密度增加至500104CELL/ML，停止培养，从底部的水龙头放出藻液，将培养容器洗刷干净后，加入中。

6、药消毒液消毒30分钟，后进入下一轮培养；所述中药消毒液由以下重量比的物质组成每100份85乙醇中加入以下重量份的中药材板蓝根3050份、柴胡1525份、薄荷1525份、栀子515份、艾叶515份，中药消毒液制作方法将新鲜板蓝根、柴胡、薄荷叶、艾叶、山栀果切碎，于6070下烘干，再用中药材粉碎机分别粉碎至70目备用，用托盘天平分别称取烘干并粉碎的板蓝根120克，柴胡60克，薄荷叶60克，艾叶30克，山栀果30克，置于三角烧瓶中充分混合后，加入1000毫升85乙醇，浸泡48小时，200筛绢过滤，将清液静置沉淀36小时，撇去液面漂浮物，取中上层的清液，即为复方中药消毒液，密封于黑色试剂瓶中，贴上标签。

7、，置于4冰箱备用。3根据权利要求2所述的一种利用磷肥厂废水养殖半裸舟形藻方法，其特征在于，对选用的所述的反应器，洗刷干净后进行消毒，使用紫外灯消毒，消毒1020分钟。4根据权利要求2所述的一种利用磷肥厂废水养殖半裸舟形藻方法，其特征在于，对权利要求书CN104130945A2/2页3选用的所述的反应器，洗刷干净后进行消毒，使用高压氮气喷射消毒，消毒510分钟。5根据权利要求2所述的一种利用磷肥厂废水养殖半裸舟形藻方法，其特征在于，对选用的所述的反应器，洗刷干净后进行消毒，使用高压二氧化碳喷射消毒，消毒56分钟。6根据权利要求2所述的一种利用磷肥厂废水养殖半裸舟形藻方法，其特征在于，对选用的所述。

8、的反应器，洗刷干净后分两个阶段消毒，先使用高压氮气喷射消毒，消毒23分钟，使用高压二氧化碳喷射消毒，消毒23分钟，消毒完毕后再进行藻类培养。权利要求书CN104130945A1/6页4一种高密度培养异胶藻的培养基和培养方法技术领域0001本发明属于水产养殖领域，尤其涉及一种利用皮革厂废水养殖异胶藻培养基和培养方法。背景技术0002皮革厂废水主要来源于鞣前准备、鞣制和其它湿加工工段。污染最重的是脱脂废水、浸灰脱毛废水、铬鞣废水，这3种污水约占总废水量50，但却包含了绝大部分污染物。皮革厂废水特点是水质、水量波动大，可生化性好，悬浮物浓度高，易腐败，污水量大，废水含S2和铬等有毒化合物。皮革污水中。

9、污染物组成复杂，传统处理方法有4种，见表1。0003表1皮革厂污水传统处理方法及其优缺点00040005为了克服目前皮革厂废水处理存在的费用高、效率低、占地面积大和异胶藻培养生长慢、产量低、投资大、易污染、效益低等技术的不足，本发明提供了一种利用皮革厂废水养殖异胶藻的培养基和培养方法，既能低成本、高效率处理皮革厂废水，又能获得有重要饵料价值的生物产品异胶藻，变废为宝，化害为利，可大幅度降低废水处理费用并提高处理效果，为皮革厂废水处理开辟了新途径。本发明利用皮革厂废水培养异胶藻，能够实现皮革说明书CN104130945A2/6页5厂废水中有用物质的重复利用，并且可以提高异胶藻生长速度及蛋白质含量。

10、，达到保护环境和生产生物资源的双重效果，操作简便快速、成本低、零污染、社会、经济和环境效益高，既解决了皮革厂废水污染问题，又解决了异胶藻生长慢、产量低、效益差、营养成分含量低的问题，实现了异胶藻的高效生产。0006异胶藻HEROGLOEASP是一种海洋单胞藻，属黄藻门，黄藻纲，异囊藻目，异囊藻科，异胶藻属。细胞长椭圆形，色素体一个，黄绿色，侧生，占细胞大部分，无蛋白核。细胞长455微米，宽254微米，二分裂繁殖；盐度1331范围正常繁殖，最适盐度2029；适温范围835，最适1533；适宜光照强度10008000LUX，PH7582。因其个体小、易消化、无副作用、营养价值高、适应性强、繁殖迅速。

11、、易大量培养、细胞壁不含纤维质、富含160、161N7和EPA等高不饱和脂肪酸、易被贝类幼虫捕捉、吞食和消化，是海产经济动物紫贻贝、泥蚶、杂色蛤及栉孔扇贝、刺参、马粪海胆、日本对虾、牡蛎、文蛤、菲律宾蛤仔、贻贝、舌鳎、银鲛、鲍鱼、梭子蟹等多种名贵海产经济动物良好饵料，特别是在扇贝人工育苗中，异胶藻是扇贝幼苗最佳开口饵料，其质量和数量直接关系到扇贝育苗成败和产量高低。0007异胶藻传统上采用F/2培养液并使用环形跑道池培养，生长慢、产量低、投资大、易污染、效益低，现在我采用白色贮水桶充气培养且在培养基中增加了皮革厂废水、羊粪浸出液、兔粪浸出液、土壤浸出液、海泥抽取液、F/2微量元素溶液、F/2维。

12、生素溶液、羧甲基纤维素钠、赤霉素、三十烷醇、硬脂酸镁、葡萄糖氧化酶、硬脂酰乳酸钙、羟丙基甲基纤维素、D异抗坏血酸钠、柠檬酸钠、异亮氨酸、丝氨酸、氯化钴、铬酸钾、尿素、磷酸二氢钾、碳酸氢铵、硝酸钠、硅酸钾、肌醇、麦饭石粉等营养成分，有机和无机肥混合使用，营养更全面、均衡，生长快，不易污染，异胶藻生长速度大幅提高，产量提高240。发明内容0008为了克服目前皮革厂废水处理存在的费用高、效率低、占地面积大和异胶藻培养生长慢、产量低、投资大、易污染、效益低等技术的不足，本发明提供了一种利用皮革厂废水养殖异胶藻的培养基，配方如下0009皮革厂废水90毫升，羊粪浸出液12毫升，兔粪浸出液15毫升，土壤浸出。

13、液16毫升，海泥抽取液12毫升，F/2微量元素溶液1毫升，F/2维生素溶液1毫升，羧甲基纤维素钠3毫克，赤霉素01毫克，三十烷醇02毫克，硬脂酸镁2毫克，葡萄糖氧化酶05毫克，硬脂酰乳酸钙4毫克，羟丙基甲基纤维素10毫克，D异抗坏血酸钠2毫克，柠檬酸钠2毫克，异亮氨酸1毫克，丝氨酸2毫克，氯化钴02毫克，铬酸钾01毫克，尿素3毫克，磷酸二氢钾5毫克，碳酸氢铵8毫克，硝酸钠4毫克，硅酸钾6毫克，肌醇005毫克，麦饭石粉4毫克，臭氧消毒的纯净海水1000毫升。0010一种利用皮革厂废水养殖异胶藻的培养方法，具体步骤如下0011培养容器为1000升贮水桶，市场有售，食品级高密度聚乙烯材料制成，无缝一。

14、体式结构，坚固耐用，抗冲击，无色或白色，有较好的透光性，以利藻类进行光合作用。靠近底部有一水龙头，水桶顶部有一圆形盖子，上有旋丝，可旋转而密封，盖子打上3个孔，一个孔插入充气管，另一个孔插入排气管，充气管和排气管都是玻璃管，内径6毫米。还有一个孔穿入一根金属导线，导线末端接一个40W节能灯。将贮水桶洗刷干净，后用蒸馏水润洗3遍，装入权利要求1所述的培养基650升，充气混合5分钟，选择生命力旺盛、无污染的异说明书CN104130945A3/6页6胶藻接种，接种密度5104CELL/ML；盖子上插入两根干净玻璃管，一根较长，60厘米，顶端露出盖子15厘米，下端通过料管与散气石连接，用以充气散气石的。

15、作用是形成很小的气泡，避免大气泡或翻滚的波浪打碎藻细胞；另一根较短，30厘米，两端露出盖子即可，用以排气；两根玻璃管同样粗细；用干净的透明胶带将两根玻璃管固定；长的玻璃管上端用料管与充气泵相连，充入混合气体，混合气体成分和体积比例是空气纯二氧化碳臭氧氨气92611；连续充气，充气量不宜太大，以藻细胞浮起不下沉即可；室外培养，太阳光照射，最佳温度252，最佳光照强度40008000LUX；夜间打开节能灯进行照明。培养的前5天，水桶上方搭建一简易棚，上放置帘子遮挡光线，使光照强度维持在16003200LUX，避免强烈阳光对细胞造成的光伤害；第6天撤掉帘子，较强的光照有利于细胞的生长繁殖和高不饱和脂。

16、肪酸的合成；培养至第7天，停止充气，拿开盖子，补充新鲜培养基80升，以弥补蒸发掉的水分，盖上盖子，充气，继续培养，至第9天，异胶藻密度增加至500104CELL/ML，停止培养，从底部的水龙头放出藻液，将培养容器洗刷干净后，不采用“加入02过氧乙酸消毒溶液浸泡消毒2小时，再用蒸馏水润洗2遍，后进入下一轮培养；”的消毒方式，而采用“，加入中药消毒液消毒30分钟，后进入下一轮培养；所述中药消毒液由以下重量比的物质组成每100份85乙醇中加入以下重量份的中药材板蓝根3050份、柴胡1525份、薄荷1525份、栀子515份、艾叶515份，中药消毒液制作方法将新鲜板蓝根、柴胡、薄荷叶、艾叶、山栀果切碎，。

17、于6070下烘干，再用中药材粉碎机分别粉碎至70目备用，用托盘天平分别称取烘干并粉碎的板蓝根120克，柴胡60克，薄荷叶60克，艾叶30克，山栀果30克，置于三角烧瓶中充分混合后，加入1000毫升85乙醇，浸泡48小时，200筛绢过滤，将清液静置沉淀36小时，撇去液面漂浮物，取中上层的清液，即为复方中药消毒液，密封于黑色试剂瓶中，贴上标签，置于4冰箱备用。”。0012优选地，对选用的所述的反应器，洗刷干净后进行消毒，使用紫外灯消毒，消毒1020分钟。0013优选地，对选用的所述的反应器，洗刷干净后进行消毒，使用高压氮气喷射消毒，消毒510分钟；0014优选地，对选用的所述的反应器，洗刷干净后进。

18、行消毒，使用高压二氧化碳喷射消毒，消毒56分钟；0015优选地，对选用的所述的反应器，洗刷干净后分两个阶段消毒，先使用高压氮气喷射消毒，消毒23分钟；使用高压二氧化碳喷射消毒，消毒23分钟；消毒完毕后再进行藻类培养。0016有益结果0017为了克服目前皮革厂废水处理存在的费用高、效率低、占地面积大和异胶藻培养生长慢、产量低、投资大、易污染、效益低等技术的不足，本发明提供了一种利用皮革厂废水养殖异胶藻的培养基和培养方法，既能低成本高效率处理皮革厂废水，又能获得有重要饵料价值的生物产品异胶藻，变废为宝，化害为利，可大幅度减少废水处理费用并提高处理效果，为皮革厂废水处理开辟了新途径。异胶藻传统上采用。

19、F/2培养液并使用环形跑道池培养，生长慢、产量低、投资大、易污染、效益低，现在我采用白色贮水桶充气培养且在培养基中增加了皮革厂废水、羊粪浸出液、兔粪浸出液、土壤浸出液、海泥抽取液、F/2微量元素溶液、F/2维生素溶液、羧甲基纤维素钠、赤霉素、三十烷醇、硬脂酸镁、葡萄糖氧化酶、硬脂说明书CN104130945A4/6页7酰乳酸钙、羟丙基甲基纤维素、D异抗坏血酸钠、柠檬酸钠、异亮氨酸、丝氨酸、氯化钴、铬酸钾、尿素、磷酸二氢钾、碳酸氢铵、硝酸钠、硅酸钾、肌醇、麦饭石粉等营养成分，有机和无机肥混合使用，营养更全面、均衡，生长快，不易污染，异胶藻生长速度大幅提高，产量提高240。本发明利用皮革厂废水培养。

20、异胶藻，能够实现皮革厂废水中有用物质的重复利用，并且可以提高异胶藻生长速度及蛋白质含量，达到保护环境和生产生物资源的双重效果，操作简便快速、成本低、零污染、社会、经济和环境效益高，既解决了皮革厂废水污染问题，又解决了异胶藻生长慢、产量低、效益差、营养成分含量低的问题，实现了异胶藻的高效生产。附图说明0018图1为异胶藻形态结构图；0019其中附图标记为1细胞壁2色素体3细胞质。0020图2为利用皮革厂废水养殖异胶藻方法图；0021其中附图标记为4排气管5培养罐6水龙头7散气石8藻液9节能灯10充气管。具体实施方式00221皮革厂废水预处理方法皮革厂废水用于养藻前需要进行预处理，方法是先用60目。

21、的筛绢过滤废水，除去漂浮物、玻璃渣子、毛发、泥沙、树叶、塑料袋等体积较大固形物，后将污水引入长30米、宽20米、深07米的水泥曝气池中，池子呈东西走向，以接受更多的阳光照射；水深保持在60厘米；按每立方米污水加入50克生石灰的量均匀泼洒生石灰生石灰最好预先按1公斤加入5升纯水的量在塑料桶中溶解、稀释、搅拌均匀，再全池泼洒，隔60分钟，再按每立方米污水加入80克的量全池泼洒明矾明矾最好预先按100克加4升纯水的量在塑料桶中溶解、稀释并搅拌均匀，再全池泼洒，然后用耙子搅动或充气搅拌60分钟，使石灰和明矾充分溶解、混合并与污水中有机物充分发生化学反应，然后自然沉淀、发酵、曝光72小时，撇去水面泡沫等。

22、漂浮物，勿搅动池底，取中上层的污水，装入不透光的黑色塑料桶中，密封，4冰箱或冷库保存，备用；00232土壤浸出液制备方法取树林中松散、富含有机质的上层土壤1公斤，加纯水1000毫升，煮沸60分钟，在暗处放置2天，过滤，滤液600毫升加纯水400毫升使用；00243臭氧消毒海水方法取海水，脱脂棉过滤，通入臭氧消毒；所用臭氧发生器产臭氧量为3500毫克/小时，每立方米海水充臭氧30分钟，充完后自然曝气90分钟，让水体中过多的臭氧挥发出来，即可用以养藻；00254过氧乙酸消毒液制备方法和使用注意事项市售过氧乙酸原液含量35以重量计，无色液体，有强烈刺激性气味。使用时应用洁净自来水稀释成02溶液，浸泡。

23、贮水桶内壁2小时。该品对眼睛、皮肤、粘膜和上呼吸道有强烈刺激作用，头痛、恶心且易燃，具爆炸性、强腐蚀性、强刺激性，可致人体灼伤，加热至100即猛烈分解，遇火或受热、受震都可起爆。与还原剂、促进剂、有机物、可燃物等接触会发生剧烈反应；不可直接用手接触，操作时应带胶皮手套、口罩和眼镜，对金属有腐蚀性，不可用于金属器械的消毒；原液长期放置可分解，注意保质期，应贮于塑料桶内凉暗处保存；00265接种用的异胶藻预先进行提纯本领域常规方法，只要可实现提纯即可，例如说明书CN104130945A5/6页8凯氏提取法，以确保接种时藻种处于生长旺盛的指数生长期；00276各种营养盐要按配方中提供的顺序加入，以免。

24、发生化学反应；00287各种无机营养盐和维生素需预先配成母液且置于4冰箱冷藏保存备用，放置时间不要超过45天；00298兔粪浸出液制备方法把新鲜兔粪、青草、豆饼、米糠、颖壳五谷杂粮的外壳和腐殖土按6010121521的重量比例混合，搅拌均匀，装入缸内密闭进行发酵，30天后，倒出，在干净水泥地上，摊成薄层，晾干48小时，后取2公斤，置于塑料水桶，加自来水10公斤，搅拌均匀，用80目筛绢过滤，将清液煮沸5分钟，冷却，静置24小时，取上清液，装入试剂瓶，贴上标签，置于4冰箱保存，备用；00309麦饭石粉是麦饭石粉制品，由麦饭石原矿经过筛选，粉碎，加工成面粉状，颗粒大小可以通过200目筛绢即可；003。

25、110赤霉素为白色结晶粉末，不易溶解于水，可先用酒精充分溶解一般每克用50毫升酒精或60度白酒溶解1小时以上，再按所需浓度兑水稀释；003211羊粪浸出液制备方法取新鲜羊粪10公斤，加入麸皮1公斤，玉米面05公斤，自来水1升，充分搅拌，装入塑料袋发酵10天，后取2公斤放入盆中，加入6升蒸馏水，充分搅拌15分钟，静置，7天后500目筛绢过滤，取滤液加热煮沸30分钟，以杀死其中的微生物，冷却，静置72小时，取上清液，即为羊粪浸出液，装入磨口塞试剂瓶，密封，置于4冰箱备用；003312海泥抽取液制备方法取比较肥沃又不於黑的海泥，以1份泥加2份淡水，充分搅拌均匀，静置12分钟，取上层泥浆于铝锅中，按每。

26、1000毫升泥浆加1克NAOH的量加入NAOH，煮沸25分钟。煮时需不断搅拌均匀，煮后静置24小时取上清液，密封，置于4冰箱或冷库备用；003413F/2微量元素溶液配方ZNSO44H2O23毫克，MNCL24H2O178毫克，CUSO45H2O10毫克，FEC6H5O75H2O39克，NA2MOO42H2O73毫克，COCL26H2O12毫克，NA2EDTA435克，纯水1000毫升；003514F/2维生素溶液配方维生素B1205毫克，维生素B1100毫克，维生素H05毫克，纯水1000毫升；003615所用化学药品纯度均需化学纯级别。0037一种利用皮革厂废水养殖异胶藻的培养基，配方如下。

27、0038皮革厂废水90毫升，羊粪浸出液12毫升，兔粪浸出液15毫升，土壤浸出液16毫升，海泥抽取液12毫升，F/2微量元素溶液1毫升，F/2维生素溶液1毫升，羧甲基纤维素钠3毫克，赤霉素01毫克，三十烷醇02毫克，硬脂酸镁2毫克，葡萄糖氧化酶05毫克，硬脂酰乳酸钙4毫克，羟丙基甲基纤维素10毫克，D异抗坏血酸钠2毫克，柠檬酸钠2毫克，异亮氨酸1毫克，丝氨酸2毫克，氯化钴02毫克，铬酸钾01毫克，尿素3毫克，磷酸二氢钾5毫克，碳酸氢铵8毫克，硝酸钠4毫克，硅酸钾6毫克，肌醇005毫克，麦饭石粉4毫克，臭氧消毒的纯净海水1000毫升。0039一种利用皮革厂废水养殖异胶藻的培养方法，具体步骤如下00。

28、40培养容器为1000升贮水桶，市场有售，食品级高密度聚乙烯材料制成，无缝一体式结构，坚固耐用，抗冲击，无色或白色，有较好的透光性，以利藻类进行光合作用。靠近底说明书CN104130945A6/6页9部有一水龙头，水桶顶部有一圆形盖子，上有旋丝，可旋转而密封，盖子打上3个孔，一个孔插入充气管，另一个孔插入排气管，充气管和排气管都是玻璃管，内径6毫米。还有一个孔穿入一根金属导线，导线末端接一个40W节能灯。将贮水桶洗刷干净，后用蒸馏水润洗3遍，装入权利要求1所述的培养基650升，充气混合5分钟，选择生命力旺盛、无污染的异胶藻接种，接种密度5104CELL/ML；盖子上插入两根干净玻璃管，一根较长。

29、，60厘米，顶端露出盖子15厘米，下端通过料管与散气石连接，用以充气散气石的作用是形成很小的气泡，避免大气泡或翻滚的波浪打碎藻细胞；另一根较短，30厘米，两端露出盖子即可，用以排气；两根玻璃管同样粗细；用干净的透明胶带将两根玻璃管固定；长的玻璃管上端用料管与充气泵相连，充入混合气体，混合气体成分和体积比例是空气纯二氧化碳臭氧氨气92611；连续充气，充气量不宜太大，以藻细胞浮起不下沉即可；室外培养，太阳光照射，最佳温度252，最佳光照强度40008000LUX；夜间打开节能灯进行照明。培养的前5天，水桶上方搭建一简易棚，上放置帘子遮挡光线，使光照强度维持在16003200LUX，避免强烈阳光对。

30、细胞造成的光伤害；第6天撤掉帘子，较强的光照有利于细胞的生长繁殖和高不饱和脂肪酸的合成；培养至第7天，停止充气，拿开盖子，补充新鲜培养基80升，以弥补蒸发掉的水分，盖上盖子，充气，继续培养，至第9天，异胶藻密度增加至500104CELL/ML，停止培养，从底部的水龙头放出藻液，将培养容器洗刷干净后，不采用“加入02过氧乙酸消毒溶液浸泡消毒2小时，再用蒸馏水润洗2遍，后进入下一轮培养；”的消毒方式，而采用“，加入中药消毒液消毒30分钟，后进入下一轮培养；所述中药消毒液由以下重量比的物质组成每100份85乙醇中加入以下重量份的中药材板蓝根3050份、柴胡1525份、薄荷1525份、栀子515份、艾。

31、叶515份，中药消毒液制作方法将新鲜板蓝根、柴胡、薄荷叶、艾叶、山栀果切碎，于6070下烘干，再用中药材粉碎机分别粉碎至70目备用，用托盘天平分别称取烘干并粉碎的板蓝根120克，柴胡60克，薄荷叶60克，艾叶30克，山栀果30克，置于三角烧瓶中充分混合后，加入1000毫升85乙醇，浸泡48小时，200筛绢过滤，将清液静置沉淀36小时，撇去液面漂浮物，取中上层的清液，即为复方中药消毒液，密封于黑色试剂瓶中，贴上标签，置于4冰箱备用。”。0041优选地，对选用的所述的反应器，洗刷干净后进行消毒，使用紫外灯消毒，消毒1020分钟。0042优选地，对选用的所述的反应器，洗刷干净后进行消毒，使用高压氮气。

32、喷射消毒，消毒510分钟；0043优选地，对选用的所述的反应器，洗刷干净后进行消毒，使用高压二氧化碳喷射消毒，消毒56分钟；0044优选地，对选用的所述的反应器，洗刷干净后分两个阶段消毒，先使用高压氮气喷射消毒，消毒23分钟；使用高压二氧化碳喷射消毒，消毒23分钟；消毒完毕后再进行藻类培养。0045最后应说明的是以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解其依然可以对前述实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明实施例技术方案的精神和范围。说明书CN104130945A1/1页10图1图2说明书附图CN104130945A10。