一株分离自母乳的鼠李糖乳杆菌M9及其应用.pdf

《一株分离自母乳的鼠李糖乳杆菌M9及其应用.pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《一株分离自母乳的鼠李糖乳杆菌M9及其应用.pdf（12页完成版）》请在专利查询网上搜索。

1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910453691.3 (22)申请日 2019.05.28 (83)生物保藏信息 CGMCC No.16002 2018.06.22 (71)申请人 北京科拓恒通生物技术股份有限公 司 地址 101407 北京市怀柔区雁栖经济开发 区牤牛河路31号院1号-2 (72)发明人 张凌宇马晨马杰杨慧娟 郭霄 (74)专利代理机构 北京弘权知识产权代理事务 所(普通合伙) 11363 代理人 逯长明许伟群 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) A23L 3。

2、3/135(2016.01) A23C 9/123(2006.01) A23L 7/104(2016.01) A61P 1/00(2006.01) A61P 1/12(2006.01) C12R 1/225(2006.01) (54)发明名称 一株分离自母乳的鼠李糖乳杆菌M9及其应 用 (57)摘要 本申请提供一株分离自母乳的鼠李糖乳杆 菌M9(LactobacillusrhamnosusM9)， 其微生物 保藏编号为CGMCCNo.16002， 所述鼠李糖乳杆菌 M9具有优异的胃肠液耐受性和良好的胆盐耐受 性， 具备作为益生菌的基本条件； 并且具有增强 免疫抵抗作用、 提高肠道菌群多样性、 。

3、增加肠道 菌群稳定性的益生特点； 所述鼠李糖乳杆菌M9 (LactobacillusrhamnosusM9)可以作为益生 菌添加到各类普通食品、 保健品等中。 权利要求书1页 说明书8页 附图2页 CN 110106119 A 2019.08.09 CN 110106119 A 1.一株分离自母乳的鼠李糖乳杆菌M9(Lactobacillus rhamnosus M9)， 其特征在于， 其微生物保藏编号为CGMCC No.16002。 2.权利要求1所述的鼠李糖乳杆菌M9在制备用作肠道菌群调节剂中的用途。 3.权利要求1所述的鼠李糖乳杆菌M9用作乳制品和/或谷物制品发酵剂的用途。 4.一种益生。

4、菌菌剂， 其特征在于， 所述益生菌菌剂由权利要求1所述鼠李糖乳杆菌M9制 备。 5.一种复合益生菌， 其特征在于， 所述复合益生菌包括权利要求1所述的鼠李糖乳杆菌 M9。 6.权利要求5所述的复合益生菌用作肠道菌群调节剂的用途。 7.权利要求5所述的复合益生菌用作乳制品和/或谷物制品发酵剂的用途。 8.一种制备鼠李糖乳杆菌菌剂的方法， 其特征在于， 以权利要求1所述的鼠李糖乳杆菌 M9为原料进行发酵。 9.一种复合益生菌菌剂， 其特征在于， 所述复合益生菌菌剂包括权利要求4所述的鼠李 糖乳杆菌菌剂。 10.权利要求9所述的复合益生菌菌剂用作肠道菌群调节剂， 以及乳制品和/或谷物制 品发酵剂的用。

5、途。 权利要求书 1/1 页 2 CN 110106119 A 2 一株分离自母乳的鼠李糖乳杆菌M9及其应用 技术领域 0001 本申请涉及鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)， 特别涉及一株分离自母 乳的鼠李糖乳杆菌M9及其应用。 背景技术 0002 健康人的胃肠道内寄居着种类繁多的微生物， 这些微生物称为肠道菌群。 肠道菌 群按一定的比例组合， 各菌间互相制约， 互相依存， 在质和量上形成一种生态平衡， 一旦机 体内外环境发生变化， 特别是长期应用广谱抗生素， 敏感肠菌被抑制， 未被抑制的细菌而乘 机繁殖， 从而引起菌群失调， 其正常生理组合被破坏， 而产生病理性。

6、组合、 引起临床症状就 称为肠道菌群失调症。 0003 肠道菌群失调症以严重腹泻或慢性腹泻为主要临床表现， 有些旅游者可能因气候 和环境的改变而发生肠道菌丛失调， 俗称水土不服。 近年来， 由于冰箱的普及使用， 有的家 庭储存大量的肉食品及疏菜， 过久的储存使食物变质， 食用后引起肠道菌群失调， 造成呕 吐、 腹泻， 有的出现精神不集中甚至精神恍惚。 0004 肠道菌群的平衡一旦被破坏， 则很难重新恢复原有的平衡状态， 导致肠道菌群失 调难以调整和治愈。 发明内容 0005 本申请的目的之一在于提供一株从中国内蒙古、 新疆、 湖北、 北京等地区100份健 康妇女母乳样中分离得到的540株乳酸菌。

7、和双歧杆菌中筛选出的鼠李糖乳杆菌M9 (Lactobacillus rhamnosus M9)， 其微生物保藏编号为CGMCC No.16002， 分类命名为： 鼠李 糖乳杆菌； 保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心； 保藏时间为2018 年6月22日； 保藏地址： 中国北京市朝阳区北辰西路1号院3号， 中国科学院微生物研究所。 0006 在本申请中， 采用PacBio SMRT RSII第三代测序平台对Lactobacillus rhamnosus M9全基因组进行测定， 其基因组长度3002913bp， GC含量46.77(其中， GC含量 是指在DNA4种碱基中， 鸟嘌呤。

8、和胞嘧啶所占的比率)， 染色体基因组含有2965个编码基因， 76个RNA基因。 0007 在本申请中， 所述鼠李糖乳杆菌M9(Lactobacillus rhamnosus M9)可以根据包括 以下方法分离得到： 将采集到的100份健康妇女的母乳样品进行倍比稀释， 得到10-110-2 稀释梯度， 吸取各梯度母乳样品200 L均匀涂布于MRS固体培养基平皿内， 37厌氧培养48- 72h。 挑取形态、 大小、 颜色不同的单克隆接种于液体培养基中， 于37恒温培养箱培养24h。 待菌株生长良好后， 进行革兰氏染色、 镜检。 保存分离株， 并提取菌株基因组DNA用于后续测 定分析。 0008 其。

9、中MRS培养基的组成是： 大豆蛋白胨10g、 牛肉膏5g、 酵母粉4g、 葡萄糖20g、 Tween80 1ml、 磷酸二氢钠2g、 无水乙酸钠5g、 柠檬酸三胺2g、 硫酸锰0.02g、 硫酸镁0.1g， 蒸 馏水1L， 调节pH至6.2左右， 琼脂15g， 121、 15min灭菌。 说明书 1/8 页 3 CN 110106119 A 3 0009 本申请对所述鼠李糖乳杆菌M9(Lactobacillus rhamnosus M9)分子生物学鉴定 方法包括： 0010 将冷冻保存的供试菌株接种于TPY增菌液体培养基中， 于30恒温培养24h， 经TPY 传代培养23代后， 取2mL对数生。

10、长末期的菌体培养物置于无菌EP管内离心， 经8000g离 心3min(4)后收集菌体， 弃上清， 采用乳酸菌专用CTAB冻融法提取菌株的基因组DNA。 0011 其中， TPY增菌培养液的组成是： 乳糖10g、 牛肉膏5g、 酵母粉5g、 酪蛋白胨10g、 大豆 蛋白胨5g、 磷酸氢二钾2.5g、 磷酸二氢钾2.5g、 硫酸镁0.1g、 吐温80 0.25g、 L-半胱氨酸盐酸 盐0.5g、 15g琼脂、 蒸馏水1L， 121、 15min灭菌。 0012 采用PacBio SMRT RSII第三代测序平台对Lactobacillus rhamnosus M9全基因 组进行测定， 其基因组长度。

11、3,002,913bp， GC含量46.77， 染色体基因组含有2965个编码基 因， 76个RNA基因。 0013 本发明提供的鼠李糖乳杆菌M9(Lactobacillus rhamnosus M9)具有如下形态学 特征： 菌体在显微镜(5000倍电镜)下呈杆状， 细胞成单、 成对或成链状， 如图1所示， 不具鞭 毛或纤毛， 不会移动。 0014 本发明的鼠李糖乳杆菌M9(Lactobacillus rhamnosus M9)在MRS培养基上形成的 明显菌落且较大， 直径在0.5-1mm之间， 边缘整齐， 呈奶油白色的不透明菌落， 如图2所示。 0015 本申请的另一目的是提供所述鼠李糖乳杆。

12、菌M9在制备用作肠道菌群调节剂中的 用途。 本申请所分离的鼠李糖乳杆菌M9(Lactobacillus rhamnosus M9)的发酵代谢产物具 有调节肠道菌群， 从而缓解腹泻的作用。 0016 进一步地， 所述鼠李糖乳杆菌M9还可以用作发酵乳制品以及发酵谷物制品的发酵 剂。 具体地， 所述鼠李糖乳杆菌M9可以作为乳制品发酵剂， 例如可以作为酸奶、 饮用型酸奶、 发酵乳饮料或者发酵豆乳的发酵剂。 所述鼠李糖乳杆菌M9可以作为发酵谷物制品的发酵 剂， 例如， 可以作为发酵燕麦、 糙米或者薏米的发酵剂。 0017 世界卫生组织定义的益生菌是指 “摄入一定数量， 能够对宿主健康起有益作用的 活的微。

13、生物制剂” 。 0018 本申请提供的鼠李糖乳杆菌M9能够对胃肠道消化液和胆盐有良好的耐受性， 因 此， 本申请提供的鼠李糖乳杆菌M9属于益生菌。 0019 本申请还提供一种益生菌菌剂， 所述益生菌菌剂由所述鼠李糖乳杆菌M9制备。 0020 本申请还提供一种复合益生菌， 所述复合益生菌包括前述鼠李糖乳杆菌M9， 其中， 所述鼠李糖乳杆菌M9可以为主要成分也可以为辅助成分。 0021 在本申请中， 所述复合益生菌可以为粉剂、 片剂、 溶液剂或者乳剂等所有医学可接 受剂型。 0022 在本申请中， 所述复合益生菌可以用作调节肠道菌群平衡的调节剂。 所述复合益 生菌用作调节肠道菌群平衡的调节剂时， 。

14、可以单独使用， 也可以与其它调节肠道菌群的物 质配合使用。 0023 可选地， 在所述复合益生菌中， 还可以包括所述鼠李糖乳杆菌M9的代谢产物。 0024 本申请还提供一种鼠 李糖乳杆菌菌剂 ， 该菌剂由所述鼠 李糖乳杆菌M9 (Lactobacillus rhamnosus M9)发酵而得， 具体包括鼠李糖乳杆菌M9(Lactobacillus rhamnosus M9)及其发酵代谢产物。 该菌剂也可以用作缓解腹泻的药物。 说明书 2/8 页 4 CN 110106119 A 4 0025 进一步地， 本申请还提供一种包括所述鼠李糖乳杆菌菌剂的复合菌剂， 在该复合 菌剂中， 所述鼠李糖乳杆菌。

15、菌剂可以为主要成分， 也可以为辅助成分。 该复合菌剂也可以用 作缓解腹泻的药物。 0026 本申请人发现， 本申请提供的鼠李糖乳杆菌M9(Lactobacillus rhamnosus M9)， 具有优异的胃肠液耐受性和良好的胆盐耐受性， 具备作为益生菌的基本条件； 并且具有增 强免疫抵抗作用、 提高肠道菌群多样性、 增加肠道菌群稳定性的益生特点； 所述鼠李糖乳杆 菌M9(Lactobacillus rhamnosus M9)可以作为益生菌添加到各类普通食品、 保健品等中。 附图说明 0027 图1示出鼠李糖乳杆菌M9的电镜下形态图； 0028 图2示出鼠李糖乳杆菌M9的菌落形态图； 0029。

16、 图3示出鼠李糖乳杆菌M9在模拟胃肠液中存活率变化图； 0030 图4示出鼠李糖乳杆菌M9发酵稳定性结果。 具体实施方式 0031 下面通过对本发明进行详细说明， 本发明的特点和优点将随着这些说明而变得更 为清楚、 明确。 0032 以下详述本发明。 0033 实施例 0034 实施例1菌株益生特性 0035 耐酸、 耐胆盐和粘附性是用来筛选益生菌的首要标准， 因为益生菌被摄入人体后， 在肠道内存活能力高低直接关系到益生菌能否发挥健康的促进作用， 因此益生菌耐酸、 耐 胆盐和粘附性特性是益生菌作为功能性食补因子的重要指标。 0036 (1)菌种供试菌液的制备 0037 将连续传代培养的培养周期。

17、末期的菌体离心(2500g、 7min)收集， 用PBS(pH 7.2， 0.8NaCl、 0.02KH2PO4、 0.115Na2HPO4， W/V， PBS下同)洗涤2次后， 菌体悬浮于10mL PBS中， 然后用灭菌PBS梯度稀释至合适倍数后， 采用MRS琼脂培养基平板倾注法计菌落总 数， 同时测定相应稀释度菌悬液在600nm处OD值。 0038 依据上述各稀释度OD值与所对应的近似菌落数(cfu/ml)的线性关系， 即可通过调 整各菌体在600nm处OD值， 使供试菌液菌体最终浓度为12109cfu/ml。 0039 (2)人工胃液和肠液的制备 0040 模拟胃肠液的制备方法： 将PB。

18、S灭菌后， 用1mol/L HCL调节pH值至2.5， 加入3.0mg/ ml胃蛋白酶， 用0.22 m微孔滤膜过滤除菌， 制成模拟人工胃液； 将PBS灭菌后， 用0.1mol/L NaOH调节pH值至8.0， 加入0.1胰蛋白酶和1.8牛胆盐， 用0.22 m微孔滤膜过滤除菌， 制 成人工模拟肠液。 0041 (3)供试菌株对人工胃液和肠液耐受能力测定 0042 (3.1)胃液耐受性： 取1.0ml各供试菌液加入到9.0ml(2)中制得的人工胃液中， 37 消化3h， 同时分别于0h、 3h取样平板倾注法计数测定活菌数， 每个样品做3个平行， 将分离 纯化得到的菌株活化培养两代， 离心洗菌两。

19、次， 收集菌体。 说明书 3/8 页 5 CN 110106119 A 5 0043 (3.2)肠液耐受性： 取1.0ml已经胃液消化3h的人工含菌胃液加入到9.0ml(2)中制 得的人工肠液中， 继续于37水浴培养， 分别于进入肠液的4h和8h， 即， 与胃液消化的3h累 加， 如图4所示， 所述菌液分别于7h和11h再次采样， 用MRS琼脂培养基倾注法计数测定活菌 数， 每个样品做3个平行。 0044 菌株存活率用菌株存活率可以使用以下公式I进行计算： 0045 0046 其中， 0047 N1表示菌株处理后活菌数； 0048 N0表示菌株初始活菌数。 0049 试验结果如图3所示， 由图。

20、3可知： 所述鼠李糖乳杆菌M9(Lactobacillus rhamnosus M9)在pH2.5的人工胃液中消化3小时的存活率83.72， 之后继续在pH8.0 的人工消化液中消化11小时， 其存活率高达78.33。 0050 由此可知， 所述鼠李糖乳杆菌M9(Lactobacillus rhamnosus M9)具有良好的胃肠 道消化液耐受性， 能够以活的状态进入人体肠道， 发挥健康功效， 所述特性是作为益生菌的 基础。 0051 本申请人认为： 本发明提供的鼠李糖乳杆菌M9(Lactobacillus rhamnosus M9)能 够抵御消化道环境的不利影响并在肠道内很好的黏附和定植， 。

21、其活菌体具有增强免疫抵抗 作用、 提高肠道菌群多样性、 增加肠道菌群稳定性的效果， 用于人以及动物时， 能够密集、 停 留在肠内的消化管道壁上， 从而起到使有害菌不能够停留的作用， 并且产生乳酸来降低肠 内的pH值， 抑制有害细菌的繁殖。 并且， 所述鼠李糖乳杆菌M9(Lactobacillus rhamnosus M9)活菌菌体能够生成细菌素和过氧化物， 从而能够抑制病原菌的繁殖， 对负责吸收营养成 分的肠绒毛的活动起到帮助作用。 0052 (4)胆盐耐受能力 0053 在菌株传代过程中， 每培养200代测定菌株的胆盐耐受能力。 0054 试验方法： 将处于培养周期末期的试验菌株按1接种量接。

22、入含牛胆盐MRS培养基 (0.3Oxgall+0.05半胱氨酸+0.2巯基乙酸钠)中， 以不加牛胆盐的MRS为对照。 将试验 菌株置于37水浴培养， 每小时取样于620nm测定其吸光值， 至吸光值增加0.3个单位为止。 0055 试验菌株耐受胆盐的能力以延滞期的长短为评价标准， 其中试验组与空白组菌株 吸光值增加0.3个单位所需时间的差值即为延迟时间(LT， lag time)， 每个菌株均做三个平 行试验。 0056 分离纯化得到的菌株活化培养三代后， 以1的接种量分别接种到含0.3牛胆盐 (培养基中添加0.2g/100mL巯基乙酸钠， 0.3g/100mL牛胆盐)和不含牛胆盐的MRS培养基。

23、中， 后者作为空白对照， 置于37厌氧培养。 培养期间， 每隔一小时取样于620nm测定OD值， 每组 测定三个平行， 直到OD值增加0.3个单位及以上时停止培养。 并计算菌株在含有胆盐和不含 胆盐的MRS培养基中生长， OD值增加0.3个单位所需的时间， 二者之差被称为延迟时间(LT)。 0057 本发明的鼠李糖乳杆菌M9(Lactobacillus rhamnosus M9)在不含胆盐的培养基 中培养， OD620nm值增加0.3个单位所需的时间为2.51h， 在含有胆盐的培养基中所需的时间 为2.17h， 延迟时间为0.34h。 说明书 4/8 页 6 CN 110106119 A 6 。

24、0058 在本领域中， 一般认为， 抗性菌株(延迟时间0.25h)， 耐受性菌株(0.25h延迟 时间0.67h)， 弱耐受性菌株(0.67h延迟时间1.00h)， 敏感菌株(延迟菌株1.00h)。 因此， 鼠李糖乳杆菌M9(Lactobacillus rhamnosus M9)的延迟时间为0.34h， 为耐受性菌 株。 0059 对于活细胞来说， 胆盐能破坏活细胞的细胞膜， 并且， 在小肠中对益生菌存活性影 响最大的因素就是胆盐， 所以， 对胆盐的耐受性是评价益生菌的重要指标之一。 由本实施例 可知， 分离自母乳的鼠李糖乳杆菌M9(Lactobacillus rhamnosus M9)具有良。

25、好的益生特 性。 0060 (6)菌株糖发酵实验 0061 糖发酵试验是常用的鉴别微生物的生化反应， 在肠道细菌的鉴定上尤为重要。 绝 大多数细菌都能利用糖类作为碳源和能源， 但是它们在分解糖类物质的能力上有很大的差 异。 根据API 50CH标准化鉴定系统的规范流程进行操作。 0062 本申请提供的鼠李糖乳杆菌M9(Lactobacillus rhamnosus M9)可利用乳糖及发 酵多种单糖， 如， 葡萄糖、 阿拉伯糖以及麦芽糖等。 0063 具体实验结果如表1所示： 0064 表1 Lactobacillus rhamnosus M9糖发酵实验结果 说明书 5/8 页 7 CN 110。

26、106119 A 7 0065 说明书 6/8 页 8 CN 110106119 A 8 0066 0067 其中，“+” 表示能够被利用的底物，“-” 表示不能被利用的底物。 由表2可知， 鼠李糖 乳杆菌M9(Lactobacillus rhamnosus M9)可利用D/L-阿拉伯糖、 D-葡萄糖、 D-半乳糖、 木糖 醇等， 不可利用甘露醇、 L-木糖、 淀粉和糖原等等。 0068 综上所述， 本发明的鼠李糖乳杆菌M9(Lactobacillus rhamnosus M9)可以很好的 利用乳糖并具有良好的胃肠液和胆盐耐受性， 能够以活的状态进入人体肠道， 发挥健康功 效， 是一株可以广泛。

27、应用于普通食品和保健品等的益生菌。 0069 实施例2 Lactobacillus rhamnosus M9在发酵豆乳中的应用 0070 豆乳中富含蛋白质、 膳食纤维、 矿物质、 维生素， 以及大量人体必需的亚油酸和亚 麻酸。 发酵豆乳是豆制品的重要组成部分， 是在豆浆基础上接种乳酸菌发酵而成的植物性 发酵食品。 经乳酸菌发酵作用， 发酵豆乳可提高脂质代谢， 不会引起肥胖； 发酵后的大豆蛋 白质更容易消化吸收， 且能提高机体免疫力并有效降低血清中总胆固醇含量； 被分解的大 豆低聚糖能促进益生菌增殖， 保持肠道健康。 0071 但是， 发酵豆乳目前存在菌种适应性不强、 组织状态差、 发酵风味不佳。

28、以及具有豆 腥味等问题。 将Lactobacillus rhamnosus M9添加到发酵豆乳中可以很好的改善豆乳发酵 状态和风味， 有效去除豆腥味。 0072 实验方法： 水预热至65后加入大豆粉， 混料均匀后55水合30min， 加入8的白 砂糖和稳定剂， 均质后杀菌(9010min)， 冷却4143接菌发酵， 其中， 接菌所用菌种为嗜 热链球菌ST-6(5106CFU/g)和益生菌Lactobacillus rhamnosus M9(1104CFU/g)， 发酵 终点至pH4.50及以下， 约发酵6小时， 后熟后， 10留样每间隔7天测定货架期内酸度和益 生菌活菌数变化， 结果如表2所示。

29、： 0073 表2发酵豆乳在10贮藏期间酸度和M9活菌数的变化 0074 0075 由表2的测定结果可知， 发酵豆乳中添加益生菌Lactobacillus rhamnosus M9没 有加重豆乳的后酸化现象， 几乎没有影响； 发酵结束后M9的活菌数达到109CFU/g以上且在 贮藏期间均保持较高的活菌数， 证明分离自母乳的Lactobacillus rhamnosus M9具有良好 的益生特性。 说明书 7/8 页 9 CN 110106119 A 9 0076 实施例3 Lactobacillus rhamnosus M9在发酵薏米饮料中的应用 0077 目前， 用于谷物饮料发酵的益生菌以保。

30、加利亚乳杆菌、 嗜热链球菌、 嗜酸乳杆菌和 双歧乳杆菌等乳酸菌为主。 0078 本实施例用鼠李糖乳杆菌M9(Lactobacillus rhamnosus M9)与嗜热链球菌S10组 合物发酵薏米来制备薏米饮料， 并以单嗜热链球菌S10发酵薏米制备薏米饮料作为对照组。 0079 具体实验方法： 将薏米清洗并浸泡过夜后按1:10的比例加水， 90熬制2小时， 并 加入耐高温淀粉酶进行水解， 水解后待冷却至65， 加入6wt的白砂糖， 混合均匀后在 30Mpa条件下均质， 再在95条件下杀菌10分钟， 冷却至37时接菌发酵。 0080 实验组接入鼠李糖乳杆菌M9(Lactobacillus rha。

31、mnosus M9)(1106CFU/g)和嗜 热链球菌S10(2106CFU/g)进行发酵； 对照组接入嗜热链球菌S10(2106CFU/g)， 发酵终点 至pH4.0， 发酵约2024小时， 发酵结束后进行感官评定和稳定性比较， 结果如表3和图4 所示： 0081 表3发酵薏米饮料感官评鉴结果 0082 0083 由表3和图4结果表明， 添加鼠李糖乳杆菌M9(Lactobacillus rhamnosus M9)的实 验组能够改善发酵薏米饮料的口感， 酸中带甜， 滋气味丰富柔和， 而且在一定程度上增强发 酵薏米的稳定性。 0084 本申请人发现， 谷物饮料最大的问题是稳定性， 有研究表明，。

32、 益生菌发酵可降解支 链淀粉提高淀粉保水性， 形成强凝胶特性； 另外， 微生物对糖的消耗， 多种分泌酶系对蛋白 质持水性和乳化性的提高、 代谢物对黏度的增加， 均能促进谷物饮料的稳定性。 薏米是我国 传统的药食兼用谷物资源， 含多种必需氨基酸及矿物质， 我国薏米产量较大， 把薏米加工成 方便食用易吸收的谷物饮料， 既符合现代饮料潮流， 又有利于开发薏米深加工食品。 0085 以上结合具体实施方式和范例性实例对本申请进行了详细说明， 不过这些说明并 不能理解为对本申请的限制。 本领域技术人员理解， 在不偏离本申请精神和范围的情况下， 可以对本申请技术方案及其实施方式进行多种等价替换、 修饰或改进， 这些均落入本申请 的范围内。 本申请的保护范围以所附权利要求为准。 说明书 8/8 页 10 CN 110106119 A 10 图1 图2 说明书附图 1/2 页 11 CN 110106119 A 11 图3 图4 说明书附图 2/2 页 12 CN 110106119 A 12 。