杜仲雄花核桃奶及其制备方法和用途.pdf

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1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910464625.6 (22)申请日 2019.05.30 (71)申请人 成都中医药大学 地址 610000 四川省成都市温江区柳台大 道1166号 (72)发明人 黄勤挽胡菊王瑾张晓瑞 (74)专利代理机构 成都高远知识产权代理事务 所(普通合伙) 51222 代理人 李高峡张娟 (51)Int.Cl. A23C 11/10(2006.01) A61K 36/52(2006.01) A61P 9/12(2006.01) A61P 39/06(2006.01) A61P。

2、 39/00(2006.01) A61P 25/00(2006.01) (54)发明名称 一种杜仲雄花核桃奶及其制备方法和用途 (57)摘要 本发明提供了一种食品或功能食品组合物， 它是由杜仲雄花提取液和核桃汁为活性成分， 加 入食品上可接受的辅料或者辅助性成分制备而 成的食品。 本发明杜仲雄花核桃奶不仅口感好、 品质优良、 营养丰富： 颜色乳白色， 微黄， 具有核 桃应有的滋味与气味， 无异味， 液体均匀， 无凝 块， 无正常视力可见外来杂质， 质量指标符合标 准， 蛋白质含量高； 还具有多重功效： 有显著的降 压效果和抗衰老作用， 能强身健体， 提高抗应激 能力， 还能补益大脑， 提高学习。

3、和记忆能力。 本发 明杜仲雄花核桃奶在具备良好口感的情况下， 克 服了现有核桃饮品功效单一的缺陷， 预估市场竞 争力强。 权利要求书1页 说明书14页 CN 110150389 A 2019.08.23 CN 110150389 A 1.一种食品或功能食品组合物， 其特征在于： 它是由杜仲雄花提取液和核桃汁为活性 成分， 加入食品上可接受的辅料或者辅助性成分制备而成的食品。 2.根据权利要求1所述的食品或功能食品组合物， 其特征在于： 所述仲雄花提取液和核 桃汁的体积比为2:11:2； 优选地， 所述仲雄花提取液和核桃汁的体积比为1:1。 3.根据权利要求1所述的食品或功能食品组合物， 其特征。

4、在于： 所述辅料为乳化剂、 增 稠剂和矫味剂； 其中， 乳化剂的重量是活性成分总重量的0.080.14， 增稠剂的重量是活 性成分总重量的0.090.15， 矫味剂的重量是活性成分总重量的0.0200.030； 优选 地， 所述乳化剂的重量是活性成分总重量的0.12， 增稠剂的重量是活性成分总重量的 0.12， 矫味剂的重量是活性成分总重量的0.025。 4.根据权利要求3所述的食品或功能食品组合物， 其特征在于： 所述乳化剂由单甘脂和 蔗糖酯组成； 所述增稠剂为黄原胶； 所述矫味剂为蔗糖； 优选地， 所述单甘脂和蔗糖酯的重 量比为1:1。 5.根据权利要求1所述的食品或功能食品组合物， 其特。

5、征在于： 所述食品为饮品。 6.根据权利要求1或2所述的食品或功能食品组合物， 其特征在于： 所述杜仲雄花提取 液的制备方法如下： 称取杜仲雄花粉末， 加入59倍量(v/w)的水， 加热回流13次， 每次加热回流为在85 95下加热回流0.51.5h， 过滤， 将滤液离心， 取上清液， 即得。 7.根据权利要求6所述的食品或功能食品组合物， 其特征在于： 所述杜仲雄花提取液的 制备方法如下： 称取杜仲雄花粉末， 加入7倍量(v/w)的水， 加热回流3次， 每次加热回流为在95下加 热回流1h， 定量滤纸过滤， 取续滤液， 将滤液离心， 取上清液， 即得。 8.根据权利要求1或2所述的食品或功能。

6、食品组合物， 其特征在于： 所述核桃汁的制备 方法如下： 将核桃仁用80水热烫处理15min， 加入10倍量(v/w)的水， 打浆， 并加入NaHCO3， 混合均 匀， NaHCO3浓度为0.3wt， 过100目纱布， 胶体磨磨两次， 再过滤200目纱布， 即得。 9.一种权利要求18任一项所述的食品或功能食品组合物的制备方法， 其特征在于： 它包括如下步骤： (1)称取上述体积比称取仲雄花提取液和核桃汁， 并按上述重量百分比称取辅料乳化 剂、 增稠剂和矫味剂； (2)将仲雄花提取液和核桃汁混合后， 依次加入乳化剂、 增稠剂和矫味剂， 在压力 40MPa、 温度70的条件下均质两次， 灭菌， 。

7、即得； 优选地， 步骤(2)中， 所述灭菌为121下灭菌15min。 10.权利要求18任一项所述的食品或功能食品组合物在制备降低血压、 抗衰老、 强身 健体、 提高抗应激能力、 提高学习能力、 提高记忆能力的功能食品中的用途。 权利要求书 1/1 页 2 CN 110150389 A 2 一种杜仲雄花核桃奶及其制备方法和用途 技术领域 0001 本发明属于食品领域， 具体涉及一种杜仲雄花核桃奶及其制备方法和用途。 背景技术 0002 杜仲科植物杜仲Eucommia ulmoidesOliv.， 具有补肝肾、 强筋骨、 安胎等功效。 杜 仲雄花是杜仲雄树开的花， 现代研究表明， 雄花含有同树皮。

8、、 叶类似的多种药效物质成分。 杜仲雄花富含次生代谢产物， 如环烯醚萜类、 黄酮类、 苯丙素类等80多种活性物质， 具有防 癌抗癌、 降压、 抗疲劳、 保肝利胆、 抗衰老、 安胎等作用。 2014年， 根据 中华人民共和国食品 安全法 和 新食品原料安全性审查管理办法 有关规定， 批准杜仲雄花为新食品原料。 而市 面上仅有杜仲雄花茶， 造成杜仲雄花的资源浪费。 0003 核桃， 又称胡桃， 被誉为 “长寿果” 。 核桃仁含有蛋白质、 氨基酸、 脂肪、 脂肪酸、 维生 素等多种营养成分， 具有健脑益智、 预防心血管疾病、 抗衰老、 益寿、 强肾助肝等作用。 中国 饮料工业协会指出， 未来五年， 。

9、我国饮料总产量将保持12-15的年均增速发展。 利用核 桃制备的饮料(核桃饮品)， 却仅占到国内饮料市场份额的5， 而且市场上核桃饮品产品单 一， 主要是六个核桃、 核桃花生奶等， 未推陈出新， 功效单一， 主要用于补脑益智， 改善大脑 疲乏， 未能完全体现核桃的优势。 0004 因此， 一种口味良好、 营养丰富、 功效多的核桃饮品对于丰富市场上核桃饮品的种 类， 提高核桃饮品市场份额十分重要。 发明内容 0005 为了解决上述问题， 本发明提供了一种杜仲雄花核桃奶及其制备方法和用途。 0006 本发明首先提供了一种食品或功能食品组合物， 它是由杜仲雄花提取液和核桃汁 为活性成分， 加入食品上。

10、可接受的辅料或者辅助性成分制备而成的食品。 0007 进一步地， 所述仲雄花提取液和核桃汁的体积比为2:11:2； 优选地， 所述仲雄花 提取液和核桃汁的体积比为1:1。 0008 进一步地， 所述辅料为乳化剂、 增稠剂和矫味剂； 其中， 乳化剂的重量是活性成分 总重量的0.080.14， 增稠剂的重量是活性成分总重量的0.090.15， 矫味剂的重量 是活性成分总重量的0.0200.030； 优选地， 所述乳化剂的重量是活性成分总重量的 0.12， 增稠剂的重量是活性成分总重量的0.12， 矫味剂的重量是活性成分总重量的 0.025。 0009 进一步地， 所述乳化剂由单甘脂和蔗糖酯组成； 。

11、所述增稠剂为黄原胶； 所述矫味剂 为蔗糖； 优选地， 所述单甘脂和蔗糖酯的重量比为1:1。 0010 进一步地， 所述食品为饮品。 0011 进一步地， 所述杜仲雄花提取液的制备方法如下： 0012 称取杜仲雄花粉末， 加入59倍量(v/w)的水， 加热回流13次， 每次加热回流为 在8595下加热回流0.51.5h， 过滤， 将滤液离心， 取上清液， 即得。 说明书 1/14 页 3 CN 110150389 A 3 0013 进一步地， 所述杜仲雄花提取液的制备方法如下： 0014 称取杜仲雄花粉末， 加入7倍量(v/w)的水， 加热回流3次， 每次加热回流为在95 下加热回流1h， 定量。

12、滤纸过滤， 取续滤液， 将滤液离心， 取上清液， 即得。 0015 进一步地， 所述核桃汁的制备方法如下： 0016 将核桃仁用80水热烫处理15min， 加入10倍量(v/w)的水， 打浆， 并加入NaHCO3， 混合均匀， NaHCO3浓度为0.3wt， 过100目纱布， 胶体磨磨两次， 再过滤200目纱布， 即得。 0017 本发明还提供了一种前述的食品或功能食品组合物的制备方法， 它包括如下步 骤： 0018 (1)称取上述体积比称取仲雄花提取液和核桃汁， 并按上述重量百分比称取辅料 乳化剂、 增稠剂和矫味剂； 0019 (2)将仲雄花提取液和核桃汁混合后， 依次加入乳化剂、 增稠剂和。

13、矫味剂， 在压力 40MPa、 温度70的条件下均质两次， 灭菌， 即得； 0020 优选地， 步骤(2)中， 所述灭菌为121下灭菌15min。 0021 本发明还提供了前述的食品或功能食品组合物在制备降低血压、 抗衰老、 强身健 体、 提高抗应激能力、 提高学习能力、 提高记忆能力的功能食品中的用途。 0022 本发明中v/w指体积质量比， 单位为mL/g。 0023 杜仲是雌雄双株的树， 本发明中杜仲雄花就是杜仲雄树开的花。 0024 本发明杜仲雄花核桃奶不仅口感好、 品质优良、 营养丰富： 颜色乳白色， 微黄， 具有 核桃应有的滋味与气味， 无异味， 液体均匀， 无凝块， 无正常视力可。

14、见外来杂质， 质量指标符 合标准， 蛋白质含量高； 还具有多重功效： 有显著的降压效果和抗衰老作用， 能强身健体， 提 高抗应激能力， 还能补益大脑， 提高学习和记忆能力。 本发明杜仲雄花核桃奶在具备良好口 感的情况下， 克服了现有核桃饮品功效单一的缺陷， 预估市场竞争力强。 0025 显然， 根据本发明的上述内容， 按照本领域的普通技术知识和惯用手段， 在不脱离 本发明上述基本技术思想前提下， 还可以做出其它多种形式的修改、 替换或变更。 0026 以下通过实施例形式的具体实施方式， 对本发明的上述内容再作进一步的详细说 明。 但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。 凡基于本。

15、发明上述内容 所实现的技术均属于本发明的范围。 具体实施方式 0027 1、 本发明制备杜仲雄花核桃奶的原料 0028 杜仲雄花购买于四川亿明生物有限公司； 核桃购自荷花池市场； 海藻酸钠(批号： 161211)、 羧甲基纤维素钠(CMC-Na， 批号： 161121)、 黄原胶(批号： 161218)、 单甘脂(批号： 161107)、 蔗糖脂(批号： 161230)、 蔗糖(批号： 170118)、 氯化钠(批号： 160929)均购买于河南 恩苗食品有限公司； 碳酸氢钠(批号： 160123)购买于淮坊邦华化工有限公司； 无水芦丁(批 号： 160721)购买于上海源叶生物有限公司。 0。

16、029 2、 本发明使用的仪器 0030 PS-80超声波清洗机(深圳市洁康洗净电器有限公司)； HHS-8S电子恒温不锈钢水 浴锅(上海宜昌仪器纱筛长)； 打汁机(广东美的生活电器制造有限公司)、 JML胶体磨(温州 吴星机械设备制造有限公司)； GJJ高压均质机(温州吴星机械设备制造有限公司)； FJ200-S 说明书 2/14 页 4 CN 110150389 A 4 高速匀浆机(常州市金坛友联仪器研究所)、 DZF-6051真空干燥箱(上海将任实验设备有限 公司)； 微波炉(广东美的生活电器制造有限公司)； 高压灭菌锅(上海博讯实业有限公司)； 制冷柜(广州市成菱厨具制冷设备有限公司；。

17、 Q-400B高速多功能粉碎机(上海冰都电器有限 公司)； ZDHW调温电热套(河北省黄骅市中兴仪器有限公司)； 四川优普超纯水机(四川优普 超纯科技有限公司)； FA1204C型电子天平(上海越平科学仪器有限公司)； UV-6100型紫外可 见分光光度计(上海美谱达仪器有限公司)。 0031 实施例1、 本发明杜仲雄花核桃奶的制备 0032 制备本发明杜仲雄花核桃奶的原料为杜仲雄花提取液和核桃汁， 辅料为乳化剂、 增稠剂和矫味剂。 0033 1、 原辅料的准备： 0034 (1)杜仲雄花提取液的制备： 精确称取杜仲雄花粉末， 加入7倍量(v/w)的水， 加热 回流3次， 每次加热回流为在95。

18、下加热回流1h， 定量滤纸过滤， 取续滤液， 将滤液3500转离 心20分钟， 离心后取上清液， 即得杜仲雄花提取液。 0035 (2)核桃汁的制备： 将核桃仁用80水热烫处理15min， 加入10倍量(v/w)的水， 打 浆2min， 并加入NaHCO3， 混合均匀， NaHCO3浓度为0.3wt， 过100目纱布， 胶体磨磨两次， 再过 滤200目纱布， 即得核桃汁。 0036 (3)原辅料的用量： 原料杜仲雄花提取液和核桃汁的体积比为1:1； 辅料中， 乳化剂 的重量是原料总重量的0.12(乳化剂由重量比1:1的单甘脂和蔗糖酯组成)， 增稠剂黄原 胶的重量是原料总重量的0.12， 矫味剂。

19、蔗糖的重量是原料总重量的0.025。 0037 2、 制备方法： 将杜仲雄花提取液与核桃汁混合后， 依次加入乳化剂、 增稠剂和矫味 剂。 在压力40MPa、 温度70的条件下均质两次， 然后在121下灭菌15min， 即得本发明杜仲 雄花核桃奶。 0038 实施例2、 本发明杜仲雄花核桃奶主要原辅料的筛选 0039 本发明杜仲雄花核桃奶的原辅料主要为杜仲雄花提取液、 核桃汁、 增稠剂和乳化 剂。 原辅料对于杜仲雄花核桃奶的品质、 口感等有重要的影响。 下面对杜仲雄花提取液、 核 桃汁、 增稠剂和乳化剂制备工艺、 种类和用量进行筛选， 确定最优原辅料。 0040 1、 杜仲雄花提取液的制备工艺 。

20、0041 1.1提取方法的筛选 0042 (1)试验方法 0043 杜仲雄花提取液的提取方法主要有超声法、 加热回流法和浸渍法。 接下来以提取 液中总黄酮含量为指标， 对超声法、 加热回流法、 浸渍法进行考察： 0044 超声法： 精确称量2g杜仲雄花粉末于100ml锥形瓶， 加水25ml， 超声2h， 定量滤纸过 滤， 取续滤液， 滤液装10ml离心管， 3500转离心20分钟， 离心后取上清液， 即得杜仲雄花提取 液。 0045 加热回流法： 精确称量2g杜仲雄花粉末于100ml锥形瓶， 加水25ml， 95加热回流 2h， 定量滤纸过滤， 取续滤液， 滤液装10ml离心管， 3500转离。

21、心20分钟， 离心后取上清液， 即 得杜仲雄花提取液。 0046 浸渍法： 精确称量2g杜仲雄花粉末于100ml锥形瓶， 加水25ml， 浸渍2h， 定量滤纸过 滤， 取续滤液， 滤液装10ml离心管， 3500转离心20分钟， 离心后取上清液， 即得杜仲雄花提取 说明书 3/14 页 5 CN 110150389 A 5 液。 0047 利用本领域常规方法， 以无水芦丁为对照品， 利用紫外-分光光度计测定吸光度， 检测并计算三种提取方法得到的提取液中总黄酮含量。 0048 (2)试验结果 0049 不同提取方法得到的杜仲雄花提取液的总黄酮含量如表1所示。 0050 表1不同提取方法得到的杜仲。

22、雄花提取液的总黄酮含量 0051 0052 0053 由表1可知， 提取方法为加热回流时， 得到的提取液中总黄酮含量最多。 因此， 制备 杜仲雄花提取液的提取方法选用加热回流。 0054 1.2加热回流法的最佳工艺研究 0055 (1)试验方法 0056 按照 “1.1中” 加热回流法制备杜仲雄花提取液。 其中， 选择加热回流中的液料比 (水与药材的体积质量比)、 加热回流时间和加热回流次数作为加热回流工艺中的可变因 素， 加热回流工艺分组见表2。 0057 表2加热回流工艺分组 0058 0059 (2)试验结果 0060 出膏率的测定 0061 将提取液定容至50ml， 精密量取25ml稀。

23、释后的提取液， 置于已恒重的蒸发皿中， 于 105干燥3h， 称定重量， 计算出膏率， 结果见表3。 说明书 4/14 页 6 CN 110150389 A 6 0062 表3不同加热回流提取工艺的出膏率结果 0063 0064 0065 总黄酮含量 0066 提取液中总黄酮含量检测方法同 “1.1” ： 利用本领域常规方法， 以无水芦丁为对照 品， 利用紫外-分光光度计测定吸光度， 检测并计算各组提取液中总黄酮含量。 不同加热回 流提取工艺得到提取液中总黄酮含量见表4。 0067 表4不同加热回流提取工艺的总黄酮含量 0068 0069 上述实验结果可知， 当液料比为7:1， 加热回流3次，。

24、 每次加热回流1小时， 得到的杜 仲雄花提取液质量最优。 0070 2、 核桃汁的制备 0071 2.1不同核桃汁制备方法 0072 制备核桃汁时， 以气味、 口感、 脂肪上浮情况、 沉降为指标， 考察干热法， 热烫法， 远 红外加热法对脂肪酶的钝化作用。 设计实验如下： 0073 干热法： 取10g核桃仁， 通过烘箱160干热处理30s， 加100ml水， 打浆2min， 得核 桃汁， 并观察。 0074 热烫法： 取10g核桃仁， 通过80水热烫处理15min， 加100ml水， 打浆2min， 得核 桃汁， 并观察。 0075 远红外加热法： 取10g核桃仁， 通过热空气消毒箱105远红。

25、外加热处理2min， 加 100ml水， 打浆2min， 得核桃汁， 并观察。 0076 2.2实验结果 说明书 5/14 页 7 CN 110150389 A 7 0077 三种方法制备的核桃汁均静置一天后， 除热烫法外， 另外两种方法得到的核桃汁 均有较厚脂肪圈； 静置两天后， 除热烫法外， 另外两种方法得到的核桃汁均有变味。 0078 因此， 制备核桃汁的最优方法为热烫法。 0079 3、 增稠剂的确定 0080 3.1海藻酸钠和羧甲基纤维素钠组合作为增稠剂 0081 以海藻酸钠用量、 羧甲基纤维素钠(CMC-Na)用量、 核桃汁与杜仲雄花提取液的体 积比为可变因素， 利用实施例1所述的。

26、制备方法制备杜仲雄花核桃奶(除可变因素， 其余与 实施例1一致)， 以液体的稳定性能为指标， 研究海藻酸钠和羧甲基纤维素钠组合作为增稠 剂对杜仲雄花核桃奶品质的影响， 实验分组见表5， 各组实验结果见表6。 0082 表5海藻酸钠和羧甲基纤维素钠组合作为增稠剂的实验分组 0083 0084 表6海藻酸钠和羧甲基纤维素钠组合作为增稠剂的实验结果 0085 0086 实验结果： 海藻酸钠与CMC-Na重量比为2:1， 海藻酸钠与CMC-Na总重量是原料总重 量0.6时， 杜仲雄花核桃奶不会分层， 但此时增稠剂用量过大， 导致液体过于黏稠， 因此不 考虑海藻酸钠与CMC-Na合用。 从而考察其他增稠。

27、剂。 0087 3.2黄原胶作为增稠剂 0088 选用不同用量的黄原胶作为增稠剂， 黄原胶的重量分别是原料总重量的0.09、 0.12、 0.15， 核桃汁： 杜仲雄花汁体积比为1： 1， 利用实施例1所述的制备方法制备杜仲 雄花核桃奶。 结果显示： 分别加入黄原胶0.09、 0.12、 0.15时， 静置后液体均稳定， 呈 说明书 6/14 页 8 CN 110150389 A 8 乳白色， 饮品差别不大， 由于核桃汁脂肪含量高， 密度较杜仲雄花汁大， 因此选用的黄原胶 的重量是原料总重量的0.12。 0089 上述试验结果说明： 增稠剂最优种类和剂量分别是黄原胶， 黄原胶的重量是原料 总重。

28、量的0.12。 0090 4、 乳化剂的确定 0091 选单甘脂和蔗糖酯组合作为乳化剂， 以单甘脂用量、 蔗糖酯用量、 核桃汁与杜仲雄 花提取液的体积比为可变因素， 利用实施例1所述的制备方法制备杜仲雄花核桃奶(除可变 因素， 其余与实施例1一致)， 以液体稳定为指标， 研究单甘脂和蔗糖酯组合作为乳化剂对杜 仲雄花核桃奶品质的影响。 实验分组见表7， 各组实验结果见表8。 0092 表7单甘脂和蔗糖酯组合作为乳化剂的实验分组 0093 0094 表8单甘脂和蔗糖酯组合作为乳化剂的实验结果 0095 0096 实验结果： 单甘脂与蔗糖酯重量比为1:1， 单甘脂与蔗糖酯总重量是原料总重量 0.12。

29、， 杜仲雄花提取液与核桃汁体积比为1:2或1:1时， 杜仲雄花核桃奶稳定性都好。 但 是， 由于核桃汁不稳定， 易氧化表性， 且密度较大， 因此杜仲雄花提取液与核桃汁体积比为 1:1是最优体积比。 0097 实施例3、 本发明杜仲雄花核桃奶质量标准研究 说明书 7/14 页 9 CN 110150389 A 9 0098 1、 试验试剂与试药 0099 甲醇(分析纯)， 正己烷(色谱纯)， 盐酸(分析纯)， 三氯甲烷(分析纯)， 碘， 冰醋酸 (分析纯)， 溴， 硫酸(分析纯)， 氢氧化钾(分析纯)， 脂肪酸甲酯标准品(纯度不低于99)： 棕 榈酸甲酯、 硬脂酸甲酯、 油酸甲酯、 亚油酸甲酯、。

30、 亚麻酸甲酯、 花生酸甲酯、 山嵛酸甲酯(均购 买于中国食品药品检定研究院)， 硫酸铜(分析纯)， 酒石酸钾钠(分析纯)， 碘化钾(分析纯)， 氢氧化钠(分析纯)， 血清白蛋白(分析纯)。 0100 2、 仪器 0101 7890A-5975C气相色谱-质谱联用仪(美国Agilent公司)； RJ-TGL-16C型高速离心 机(无锡市瑞江分析仪器有限公司)； XW-80A型旋涡混合仪(海门市其林贝尔仪器制造有限 公司)； FA1204C型电子天平(上海越平科学仪器有限公司)； UV-6100型紫外可见分光光度计 (上海美谱达仪器有限公司)。 0102 3、 感官检查 0103 取约50mL实施。

31、例1制备的杜仲雄花核桃奶于无色透明的容器中， 置于明亮处， 迎光 观察其组织状态及色泽， 并在室温下， 嗅其气味， 品尝其滋味。 0104 4、 蛋白质 0105 按照GB 5009.5规定的方法测定实施例1制备的杜仲雄花核桃奶中蛋白质含量， 蛋 白质的换算系数为6.25。 0106 5、 脂肪 0107 按照GB/T 5009.6-2003规定的 “第二法酸水解法测定” 检测实施例1制备的杜仲雄 花核桃奶中脂肪含量。 0108 6、 各脂肪酸 0109 6.1试液的制备 0110 将实施例1制备的杜仲雄花核桃奶充分振摇， 使其均匀一致， 没有明显分层后， 迅 速量取30.0ml样品置于100。

32、ml具塞试管内， 加入0.1ml盐酸， 20ml正己烷， 充分振摇3min， 并 小心开塞放出气体， 将处理后的样品倒人离心管中， 置于高速离心机中， 离心10min， 吸取上 清液于具塞试管中， 加人0.8ml氢氧化钾-甲醇溶液， 在漩涡混合器中充分振荡1min， 静置 10min， 吸取上层澄清液， 将上层澄清液转移到具塞样品瓶中备用， 制备好的溶液应在24h内 完成分析。 0111 6.2脂肪酸甲酯标准品混合溶液的制备 0112 分别称取棕榈酸甲酯0.2g、 硬脂酸甲酯0.1g、 油酸甲酯0.3g、 亚油酸甲酯0.6g、 亚 麻酸甲酯0.2g、 花生酸甲酯0.05g、 山嵛酸甲酯0.05。

33、g(精密称定至0.001g)， 用正己烷定容至 10ml， 得到脂肪酸甲酯溶液。 0113 6.3测定 0114 分别吸取上述制备好的试液(样品)及脂肪酸甲酯溶液1 l注入色谱仪。 以检测器 温度250， 进样口温度250， 柱温初始温度150， 以8/min升至190， 保持3min， 再以 10/min升至230， 保持8min的条件进行测定。 0115 7、 结果 0116 7.1感官结果 0117 表9本发明杜仲雄花核桃奶的感官结果 说明书 8/14 页 10 CN 110150389 A 10 0118 0119 7.2理化检测结果 0120 表10本发明杜仲雄花核桃奶的理化检测结果。

34、 0121 0122 本发明杜仲雄花核桃奶质量标准研究结果显示： 本发明杜仲雄花核桃奶具有良好 的感官结果， 同时蛋白质含量不少于0.55g/100g， 脂肪含量不少于2.0g/100g， 油酸不超过 28， 亚油酸不少于50， 亚麻酸不少于6.5， 花生酸及山嵛酸总共不超过0.2， 符合GB/ T31325-2014植物蛋白饮料核桃露(饮)标准。 说明本发明杜仲雄花核桃奶品质优良。 0123 实施例4、 本发明杜仲雄花核桃奶药理实验研究 0124 1、 本发明杜仲雄花核桃奶对血压的影响 0125 1.1实验材料 0126 1.1.1实验动物 0127 Wistar大鼠， 雌雄兼有， 体重20。

35、020g， 购买于成都达硕实验动物有限公司， 购进 后适应三天。 0128 1.1.2实验药材与仪器 0129 实施例1制备的杜仲雄花核桃奶； 核桃(购自荷花池市场)， 杜仲雄花和杜仲(购买 于四川亿明生物有限公司)； FA1204C电子天平(上海越平科学仪器有限公司)； 鼠尾动脉血 压测量系统(北京软隆科技有限公司)。 0130 1.2实验方法和结果 0131 1.2.1各给药组实验药物的准备 0132 杜仲雄花核桃奶组： 实施例1制备的杜仲雄花核桃奶， 旋蒸浓缩至杜仲雄花和核桃 总含量1g/1ml。 0133 核桃奶组： 利用实施例1中核桃汁的制备方法制备核桃汁， 旋蒸浓缩至核桃汁中核 桃。

36、仁含量为1g/1ml。 0134 杜仲雄花组： 利用实施例1中杜仲雄花提取液的制备方法制备杜仲雄花提取液， 旋 蒸浓缩至提取液中杜仲雄花含量为1g/1ml。 0135 杜仲组： 利用实施例2 “1” 中优选的方法提取杜仲提取液， 旋蒸浓缩至提取液中杜 说明书 9/14 页 11 CN 110150389 A 11 仲含量为1g/1ml。 0136 阳性药物组： 杜仲叶打粉溶于水并过滤， 再与按照实施例2 “2” 的方法制备的液料 比为5： 1的核桃汁， 混匀， 制备杜仲核桃汁， 最终1000kg饮品中含有0.7kg杜仲叶， 30kg核桃， 减压旋蒸浓缩至杜仲叶和核桃总含量1g/1ml， 装瓶备。

37、用。 0137 1.2.2分组给药 0138 取体重20020g大鼠70只， 雌雄各半， 随机分7组， 每组10只， 分别为空白组， 模型 组， 阳性药物组， 杜仲雄花核桃奶组， 核桃奶组， 杜仲雄花组， 杜仲组。 空白对照组给予正常 饲料(含1氯化钠饲料)和饮水(自来水)， 其余八组给予高盐饲料(含4氯化钠饲料)， 饮 用2氯化钠液。 每天空白对照组和模型组灌胃生理盐水20ml/kg， 杜仲雄花核桃奶组灌胃 杜仲雄花核桃奶20ml/kg， 另外四组分别灌胃等量相应的试剂， 连续给药30天。 末次给药 30min后测量鼠尾血压。 0139 1.2.3数据处理 0140 所有数据用计算机软件SP。

38、SS19.0进行处理， 均以xs表示， 结果见表11。 0141 表11各组大鼠血压测定结果(xs) 0142 0143 0144 注： (1)模型组与空白组比较， *P0.01； 0145 (2)各给药组与模型组比较， #P0.05，#P0.01。 0146 由表11可以看出， 与模型组相比， 各给药组均能降低高钠饮食所引起的高血压大 鼠的血压， 其中杜仲雄花核桃奶组对血压降低最明显。 在相同的给药剂量下， 杜仲雄花核桃 奶组降压效果不仅明显优于核桃奶组、 杜仲雄花组和杜仲组， 甚至比阳性药组的降压效果 更优。 说明本发明杜仲雄花核桃奶对降低血压有显著的效果。 0147 2、 本发明杜仲雄花。

39、核桃奶抗衰老作用 0148 2.1实验材料 0149 2.1.1实验动物 0150 雄性小白鼠， 体重262g， 购买于成都达硕实验动物有限公司， 购进后适应三天。 0151 2.1.2实验药材与仪器 0152 实施例1制备的杜仲雄花核桃奶， 核桃(购自荷花池市场)， 杜仲雄花和杜仲(购买 于四川亿明生物有限公司)， 超氧化物岐化酶(SOD)试剂盒、 谷胱苷肽过氧化物酶(GSH-Px) 试剂盒、 丙二醛(MDA)试剂盒(购买于南京建成生物工程研究所) ， D-半乳糖(批号： 17042706)购买于成都普菲德生物技术有限公司， HHS-8S电子恒温不锈钢水浴锅(上海宜昌 说明书 10/14 页。

40、 12 CN 110150389 A 12 仪器纱筛厂)， FA1204C电子天平(上海越平科学仪器有限公司)， UV-6100型紫外可见分光光 度计(上海美谱达仪器有限公司)。 0153 2.2实验方法和结果 0154 2.2.1给药组实验药物的准备 0155 杜仲雄花核桃奶组： 实施例1制备的杜仲雄花核桃奶， 旋蒸浓缩至杜仲雄花和核桃 总含量1g/1ml。 0156 2.2.2动物分组给药及组织样品的制备 0157 注射D-半乳糖可以用于制造衰老模型。 0158 取健康小鼠30只， 随机分为3组， 每组10只， 分别为空白对照组， D-半乳糖模型组， 杜仲雄花核桃奶组， 每天上午空白对照组。

41、和D-半乳糖模型组灌胃生理盐水20ml/kg， 杜仲雄 花核桃奶组灌胃杜仲雄花核桃奶20ml/kg， 下午空白组皮下注射生理盐水5ml/kg， 其它2组 均皮下注射D-半乳糖5ml/kg。 连续给药30d， 最后一次给药后， 禁食不禁水12h后， 眼眶取血， 分离血清， 并利用ELISA法测定小鼠血清中的SOD、 MDA和GSH-Px含量。 0159 2.2.3数据处理 0160 所有数据用计算机软件SPSS19.0进行处理， 均以xs表示， 试验结果见表12。 0161 表12小鼠血清的抗氧化功能指标测定结果(xs) 0162 0163 注： (1)模型组与空白组比较， *P0.01； 01。

42、64 (2)杜仲雄花组与模型组比较， #P0.05，#P0.01。 0165 试验结果(表12)表明： 与D-半乳糖模型组相比， 本发明杜仲雄花核桃奶可以显著 增加小鼠血清中SOD和MAD的浓度， 减少GSH-Px的产生。 说明本发明杜仲雄花核桃奶具有显 著的抗衰老作用。 0166 3、 本发明杜仲雄花核桃奶对小鼠抗应激能力的影响 0167 3.1实验材料 0168 3.1.1实验动物 0169 小鼠60只， 雌雄兼有， 体重202g， 购买于成都达硕实验动物有限公司， 购进后适 应三天。 0170 3.1.2实验药材与仪器 0171 实施例1制备的杜仲雄花核桃奶， 核桃(购自荷花池市场)， 。

43、杜仲雄花和杜仲(购买 于四川亿明生物有限公司)， HHS-8S电子恒温不锈钢水浴锅(上海宜昌仪器纱筛厂)， FA1204C电子天平(上海越平科学仪器有限公司)， 温度计(河北省河间市玻璃仪表厂)。 0172 3.2实验方法和结果 0173 3.2.1给药组实验药物的准备 0174 同实施例4 “1.2.1” 。 0175 3.2.2耐低温实验 说明书 11/14 页 13 CN 110150389 A 13 0176 取小鼠60只， 雌雄各半， 随机分为6组， 每组10只， 分别为空白组、 阳性药物组、 杜仲 雄核桃奶组、 核桃奶组、 杜仲雄花组和杜仲组。 每天， 空白组灌胃生理盐水3ml/k。

44、g， 其余各组 分别灌胃等剂量的相应药物， 连续给药10天。 于末次给药1h后， 将小鼠放入25的低温冰 箱中， 记录其存活时间。 0177 3.2.3耐高温实验 0178 取小鼠60只， 雌雄各半， 分组、 给药剂量和给药时间同 “3.2.2” 。 末次给药1h后， 将 小鼠置于的250ml锥形瓶中， 然后将锥形瓶放入温度为420.5的恒温水浴锅中， 并用纱 布封住瓶口。 记录小鼠在此条件下的存活时间。 0179 3.2.4负重游泳实验 0180 取小鼠60只， 雌雄各半， 分组、 给药剂量和给药时间同 “3.2.2” 。 末次给药1h后， 随 机抽取小鼠， 每只负重(5体重)， 然后放入深。

45、23cm、 温度为251的水中游泳。 以小鼠游 泳至头部深入水中15s不再浮起为结束， 记录小鼠游泳持续时间。 0181 3.2.5耐缺氧实验 0182 取小鼠60只， 雌雄各半， 分组、 给药剂量和给药时间同 “3.2.2” 。 末次给药1h后， 将 小鼠放入盛有10g钠石灰的磨口广口瓶中， 钠石灰上垫滤纸用以吸收尿液， 每瓶一只小鼠， 瓶口涂凡士林密封容器， 拧紧瓶塞， 以最后一次呼吸为指标， 记录小鼠在缺氧条件下的存活 时间。 0183 3.2.6数据处理 0184 所有数据用计算机软件SPSS19.0进行处理， 均以xs表示， 实验结果见表13。 0185 表13小鼠抗应激能力结果(x。

46、s) 0186 0187 注： 各组与空白组比较， #P0.05， #P0.01。 0188 表13表明： 与空白组相比， 杜仲雄花核桃奶组、 核桃奶组、 杜仲雄花组、 杜仲组和阳 性药物组都能显著的延长小鼠的低温、 高温存活时间， 负重游泳时间和缺氧存活时间， 其 中， 杜仲雄花核桃奶组延长的存活时间最长。 在相同给药剂量下， 杜仲雄花核桃奶组存活时 间不仅明显长于核桃奶组、 杜仲雄花组和杜仲组， 甚至比阳性药组的存活时间更长。 说明本 发明杜仲雄花核桃奶能够显著延长存活时间， 提高小鼠抗应激能力。 0189 4、 本发明杜仲雄花核桃奶对小鼠学习与记忆行为的影响 0190 4.1实验材料 0。

47、191 4.1.1实验动物 0192 雌性小鼠， 体重202g， 购买于成都达硕实验动物有限公司， 购进后适应三天。 0193 4.1.2实验药材与仪器 说明书 12/14 页 14 CN 110150389 A 14 0194 实施例1制备的杜仲雄花核桃奶， WX-型小鼠跳台仪(安徽正华生物仪器设备有 限公司)， 水迷宫自动记录仪(安徽正华生物仪器设备有限公司)。 0195 4.2实验方法和结果 0196 4.2.1小鼠跳台试验 0197 采用WX一型小鼠跳台仪， 将断乳雌性小鼠20只随机分为空白对照组和杜仲雄花 核桃奶组， 两组小鼠每天给药量为3ml/kg， 连续给药30天， 末次给药后次。

48、日开始实验。 实验 时先将动物放入反应箱， 适应环境3分钟， 然后立即通以36v的交流电， 动物受到电击， 其逃 避反应是跳上平台， 部分动物会再次或多次跳至铜栅上， 受到电击后又迅速跳回平台， 如此 训练五分钟， 仪器自动记录每只鼠受电击的次数(即错误次数)以此作为学习成绩。 24小时 后在底部铜栅通电的情况下， 直接将动物置于平台上， 记录第一次跳下的潜伏期和3分钟内 的错误次数， 以此作为记忆的成绩。 0198 4.2.2小鼠迷宫实验 0199 水迷宫自动记录仪。 将断乳雌性小鼠20只随机分为空白对照组和杜仲雄花核桃奶 组， 两组小鼠每天给药量为3ml/kg， 连续给药30d， 末次给药。

49、后次日开始训练。 训练期间继续 给药， 每天一次。 迷宫泳道水深15cm， 水温25士l。 试验时， 将小鼠放于泳道的起点(s)处， 同时按下启动键， 观察到达终点(G)所需时间， 以及出现错误次数。 将小鼠训练时间限定为 120秒(S)， 在120s内未到达终点的小鼠均一记为120s。 第一次训练前将小鼠放在梯子附近， 使其自动爬3次。 以后每次训练前将小鼠放在梯子附近， 使其自动爬1次。 试验分阶段进行， 视动物学习成绩逐步加长路程。 第一次训练时用一挡板在A处开始训练。 第二次训练加长路 程， 从B处开始， 此路程约训练3次， 共训练4次， 至动物数80以上达到终点， 末次从起点进 行训。

50、练。 最后计算各组动物的错误次数， 到达终点的时间及到达终点的动物数。 0200 4.2.3数据处理 0201 所有数据用计算机软件SPSS19.0进行处理， 均以xs表示。 0202 4.2.3.1跳台试验 0203 跳台试验结果见表14。 0204 表14跳台试验结果(xs) 0205 0206 注： 杜仲雄花核桃组与空白组比较， #P0.05， #P0.01。 0207 由表14可知， 第一次训练， 杜仲雄花核桃奶组错误次数低于空白组， 与空白组有显 著性意义(P0.05)； 24小时后与空白组相比， 杜仲雄花核桃奶组跳台潜伏期明显延长。 实验 结果说明本发明杜仲雄花核桃奶可以提高小鼠的。