染料木素纳米冻干粉在抑制皮肤瘢痕形成和皮肤纤维化中的应用.pdf

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1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910664357.2 (22)申请日 2019.07.23 (71)申请人 成秋宸 地址 530007 广西壮族自治区南宁市青秀 区双拥路22号 (72)发明人 成秋宸覃雯廖泽勇卓朗 (74)专利代理机构 北京天奇智新知识产权代理 有限公司 11340 代理人 韦玲双 (51)Int.Cl. A61K 9/19(2006.01) A61K 31/352(2006.01) A61P 17/00(2006.01) A61P 17/02(2006.01) A61K 8/49(2。

2、006.01) A61K 8/60(2006.01) A61K 8/73(2006.01) A61Q 19/00(2006.01) A61Q 19/02(2006.01) A61Q 19/08(2006.01) (54)发明名称 染料木素纳米冻干粉在抑制皮肤瘢痕形成 和皮肤纤维化中的应用 (57)摘要 本发明公开了染料木素纳米冻干粉在抑制 皮肤瘢痕形成和皮肤纤维化中的应用， 染料木素 纳米冻干粉对3T3细胞(成纤维细胞)、 B16细胞 (黑色素瘤细胞)具有抑制作用， 有抑制成纤维细 胞、 黑色素瘤细胞增殖的作用， 对羟自由基的清 除作用高， 具有抗衰老、 抑制肿瘤生长、 预防辐射 损伤等作用，。

3、 将染料木素纳米冻干粉应用于抑制 皮肤瘢痕形成和皮肤纤维化中时， 可与其他药物 或者药物载体复合制成药膏、 药液等药剂， 直接 涂布于患处， 具有抑制皮肤疤痕形成的效果。 也 可将染料木素纳米冻干粉与海藻糖、 玻尿酸、 熊 果苷、 纯露、 霍霍巴油、 维生素E、 甘油、 乳化剂、 双 蒸水等护肤成分制成肤护品， 具有改善皮肤微环 境， 防止疤痕形成， 同时增强美白、 保湿效果。 权利要求书1页 说明书9页 附图5页 CN 110200928 A 2019.09.06 CN 110200928 A 1.染料木素纳米冻干粉在抑制皮肤瘢痕形成和皮肤纤维化中的应用。 2.一种护肤品， 其特征在于， 其。

4、含有权利要求1所述的染料木素纳米冻干粉。 3.一种含有权利要求1所述的染料木素纳米冻干粉的护肤品， 其特征在于， 其由质量百 分含量的如下组分组成： 4.根据权利要求3所述的护肤品， 其特征在于， 其由质量百分含量的如下组分组成： 5.一种权利要求2-4所述的护肤品的制备方法， 其特征在于， 其包括如下步骤： S1： 按配比将海藻糖、 玻尿酸、 染料木素胶束冻干粉、 熊果苷、 纯露和水混合， 制备出水 相； S2： 按配比将霍霍巴油、 维生素E、 甘油混合， 制备出油相； S3： 将水相和油相混合， 再加入乳化剂， 混匀即制成所述护肤品。 6.一种抑制皮肤瘢痕形成和皮肤纤维化的药物组合物， 其。

5、特征在于， 其含有权利要求1 所述的染料木素纳米冻干粉。 权利要求书 1/1 页 2 CN 110200928 A 2 染料木素纳米冻干粉在抑制皮肤瘢痕形成和皮肤纤维化中的 应用 技术领域 0001 本发明涉及纳米药物制剂技术领域， 具体涉及染料木素纳米冻干粉在抑制皮肤瘢 痕形成和皮肤纤维化中的应用。 背景技术 0002 皮肤瘢痕形成是皮肤纤维化的表现， 主要是成纤维细胞的异常增生， 胶原的过度 沉积。 目前临床上导致皮肤瘢痕形成的原因有： 外伤、 烧伤、 外科手术、 放疗后、 晒伤、 激光手 术后等。 0003 目前抗疤痕的药物主要有类固醇激素和细胞毒性药物， 均存在副作用。 疤痕的治 疗不。

6、应只针对胶原细胞， 而是调整皮肤微环境， 从而达到减缓瘢痕的目的。 0004 染料木素是一种安全性较高的天然产物单体， 但是由于其水溶性差， 故生物利用 度很低， 皮肤难以吸收。 现有技术中， 有染料木素制备成胶束纳米化后， 以提高其溶解度和 生物利用率。 参见专利号CN201710974436公布的一种染料木素纳米共聚物胶束冻干粉的制 备方法和应用， 其公布了染料木素的制备方法包括如下步骤： 步骤1： 取一定量的PEG-PLA加 入一定体积的丙酮中溶解， 用丙酮作为溶剂， 配制一定浓度PEG-PLA丙酮溶液； 步骤2： 将一 定量染料木素加入步骤1配制的丙酮溶液中， 形成染料木素、 PEG-。

7、PLA丙酮混合溶液， 涡旋混 匀， 使其充分溶解； 步骤3： 将一定量Tween80加入步骤2配制的丙酮混合溶液中， 形成染料木 素、 PEG-PLA、 Tween80丙酮混合溶液， 涡旋混匀， 使其充分溶解； 步骤4： 通过注射器将步骤3 配置好的混合溶液加入含聚乙烯醇(PVA)的水溶液， 该过程在搅拌状态下进行； 步骤5： 将步 骤4中的溶液体系， 用超声波细胞破碎仪超声一定时间； 步骤6： 将步骤5中的溶液体系维持 搅拌， 使丙酮挥发完全； 步骤7： 步骤6进行完的混悬液经高压锅高压， 冷却， 得到带蓝色乳光 的胶体溶液， 用光束透射， 可观察到丁达尔现象； 步骤8： 将步骤7得到的胶体。

8、溶液经微孔滤 膜过滤， 得到染料木素纳米共聚物胶束； 步骤9： 将步骤8收集的产物以海藻糖为冻干保护剂 冻干， 即获得染料木素纳米共聚物胶束冻干粉。 其还公布了染料木素纳米共聚物胶束冻干 粉可作为抗肝纤维化药物。 科研人员经过进一步研究发现， 该染料木素纳米共聚物胶束冻 干粉还具有抑制皮肤瘢痕形成的作用， 因此将染料木素纳米共聚物胶束冻干粉应用于抑制 皮肤瘢痕形成药物以及护肤品具有很大的药用价值。 发明内容 0005 本发明克服了现有技术中抗疤痕的药物主要有类固醇激素和细胞毒性药物， 均存 在副作用的技术问题， 提供染料木素纳米冻干粉在抑制皮肤瘢痕形成和皮肤纤维化中的应 用， 辅助改善皮肤微环。

9、境、 调整皮肤水油比例、 润肤、 美白等功效。 0006 为解决上述问题， 本发明采取如下技术方案： 0007 染料木素纳米冻干粉在抑制皮肤瘢痕形成和皮肤纤维化中的应用。 0008 其中， 所述染料木素纳米冻干粉由如下制备方法得到： 说明书 1/9 页 3 CN 110200928 A 3 0009 S1： 取一定量的PEG-PLA加入一定体积的丙酮中溶解， 配制成PEG-PLA浓度为 4- 20mg/mL的丙酮溶液； 0010 S2： 将一定量染料木素加入步骤1配制的丙酮溶液中， 形成染料木素、 PEG-PLA丙酮 混合溶液， 混匀， 使其充分溶解； 所述配制的染料木素、 PEG-PLA丙酮。

10、混合溶液中， 染料木素 的含量为0.0833-3.33mg/mL； 0011 S3： 将一定量表面活性剂加入步骤2配制的丙酮混合溶液中， 形成染料木素、 PEG- PLA、 Tween80丙酮混合溶液， 混匀， 使其充分溶解； 所述配制的染料木素、 PEG-PLA、 Tween80 丙酮混合溶液中Tween80浓度为0-82.5mg/mL； 0012 S4： 将S3配置好的混合溶液加入双蒸水中， 该过程在搅拌状态下进行； 0013 S5： 将S4中的溶液体系维持搅拌， 使丙酮挥发完全； 0014 S6： S5进行完的混悬液经高压灭菌锅高压， 冷却， 得到染料木素胶束； 0015 S7： 将S6。

11、收集的产物加入冻干保护剂冻干， 即获得染料木素纳米冻干粉。 0016 本发明的另一目的还在于保护一种护肤品， 其含有上述染料木素纳米冻干粉。 0017 一种含有上述染料木素纳米冻干粉的护肤品， 其由质量百分含量的如下组分组 成： 0018 0019 0020 优选的， 所述护肤品由质量百分含量的如下组分组成： 0021 0022 其中， 上述护肤品的制备方法， 包括如下步骤： 0023 S1： 按配比将海藻糖、 玻尿酸、 染料木素胶束冻干粉、 熊果苷、 纯露和水混合， 制备 出水相； 0024 S2： 按配比将霍霍巴油、 维生素E、 甘油混合， 制备出油相； 0025 S3： 将水相和油相混合。

12、， 再加入乳化剂， 混匀即制成所述护肤品。 说明书 2/9 页 4 CN 110200928 A 4 0026 本发明的另一目的还在于保护一种抑制皮肤瘢痕形成和皮肤纤维化的药物组合 物， 其含有上述的染料木素纳米冻干粉。 0027 将染料木素纳米冻干粉应用于抑制皮肤瘢痕形成和皮肤纤维化时， 可将染料木素 纳米冻干粉制成护肤品或药剂， 例如凝胶、 软膏、 乳膏、 药液、 爽肤水、 面霜、 面膜、 精华液、 敷 贴或透皮剂等等可直接涂抹于患处的用剂。 当然， 含有染料木素纳米冻干粉的用于抑制皮 肤瘢痕形成和皮肤纤维化的用剂不限于上述几种形式。 0028 本发明与现有技术相比较具有以下有益效果： 0。

13、029 (1)本发明的染料木素纳米冻干粉无细胞毒性作用， 对3T3细胞具有抑制作用， 有 抑制成纤维细胞增殖的作用。 同时本发明的染料木素纳米冻干粉相比于普通的染料木素对 羟自由基(OH)的清除作用高， 具有抗光皮肤老化、 抑制肿瘤生长、 预防辐射损伤、 雌激素 缺乏症皮肤等作用， 能抑制皮肤瘢痕形成和皮肤纤维化， 修复皮肤损伤， 可应用于抑制皮肤 瘢痕形成和皮肤纤维化中。 0030 (2)本发明的护肤品种含有染料木素纳米冻干粉的乳液PH值为6.00.5， 针对亚 洲人肤质， 无皮肤敏感性及其他副作用， 为O/W包裹， 整体不油腻， 截止目前出现过敏案例， 对皮肤具有长久的保湿、 护肤效果。 。

14、本发明的护肤品中的染料木素纳米冻干粉采用冷冻干 燥法处理， 最大程度保存其性状， 且测试表明染料木素纳米冻干粉性质稳定， 便于保存； 高 溶解度， 纳米级颗粒分散均匀， 能快速深入皮肤内， 对抗羟自由基具有清除作用， 从而达到 抗氧化和抗成纤的效果， 护肤品中还添加熊果苷和玻尿酸达到美白、 保湿效果， 护肤品中， 染料木素纳米冻干粉除了能促进熊果苷和玻尿酸等物质的吸收， 增强护肤效果。 初期本品 具有长久保湿护肤的作用， 最长保湿时间可长达8小时。 当然可根据地域气候调整配方比 例， 也可根据皮肤特性进行个性化定制， 研制成不同含有染料木素纳米冻干粉的护肤品， 含 有染料木素纳米冻干粉的护肤品。

15、具有抑制皮肤瘢痕形成的作用外， 还可促进其他护肤成分 的吸收， 护肤效果显著。 0031 (3)本发明中的染料木素具有类雌激素作用， 可绑定雌激素受体并刺激它们的活 性， 对人体雌激素受体的激活具有双向调节的作用。 故可安全应用于更年期皮肤老化、 男士 护肤品， 也可避免女性因为使用护肤品而导致内分泌紊乱。 这也是染料木素纳米冻干粉具 有改善皮肤微环境的原因之一。 0032 (4)将染料木素纳米冻干粉应用于抑制皮肤瘢痕形成和皮肤纤维化中时， 可与其 他药物或者药物载体复合制成药膏、 药液、 医用敷贴等药剂， 直接涂布于患处， 具有抑制皮 肤疤痕形成的效果。 附图说明 0033 图1为染料木素纳。

16、米冻干粉与染料木素游离药物组对羟自由基的清除作用的测定 结果图； 0034 图2为染料木素胶束冻干粉和染料木素游离药物组对3T3细胞处理24小时后的抑 制作用效果图； 0035 图3为染料木素胶束冻干粉和染料木素游离药物组对3T3细胞处理48小时后的抑 制作用抑制作用效果图； 0036 图4为染料木素胶束冻干粉和染料木素游离药物组对3T3细胞处理72小时后的抑 说明书 3/9 页 5 CN 110200928 A 5 制作用抑制作用效果图； 0037 图5为染料木素胶束冻干粉和染料木素游离药物组对B16细胞处理24小时后的抑 制作用效果图； 0038 图6为染料木素胶束冻干粉和染料木素游离药物。

17、组对B16细胞处理48小时后的抑 制作用抑制作用效果图； 0039 图7为染料木素胶束冻干粉和染料木素游离药物组对B16细胞处理72小时后的抑 制作用抑制作用效果图。 0040 图8为本发明护肤品保湿持久性测试中额头、 脸颊、 手背测试部位示意图； 0041 图9为本发明护肤品保湿持久性测试中手掌测试部位示意图； 0042 图10为本发明所采用数字皮肤水份检测笔的检测界面图； 0043 图11为本发明所采用数字皮肤水份检测笔的弹性值说明图。 具体实施方式 0044 下面结合实施例和试验对本发明作进一步说明。 0045 实施例1 0046 一种含有染料木素纳米冻干粉的护肤品， 其由质量百分含量的。

18、如下组分组成： 0047 0048 其制备方法， 包括如下步骤： 0049 S1： 按配比将海藻糖、 玻尿酸、 染料木素胶束冻干粉、 熊果苷、 纯露和水混合， 制备 出水相； 0050 S2： 按配比将霍霍巴油、 维生素E、 甘油混合， 制备出油相； 0051 S3： 将水相和油相混合， 再加入乳化剂， 混匀即制成所述护肤品。 0052 实施例2 0053 一种含有染料木素纳米冻干粉的护肤品， 其由质量百分含量的如下组分组成： 说明书 4/9 页 6 CN 110200928 A 6 0054 0055 其制备方法同实施例1。 0056 实施例3 0057 一种含有染料木素纳米冻干粉的护肤品，。

19、 其由质量百分含量的如下组分组成： 0058 0059 其制备方法同实施例1。 0060 对照组1 0061 对照组1与实施例1的配方基本相同， 区别在于， 对照组1不含有染料木素纳米冻干 粉， 其他成分不变。 0062 对照组2 0063 对照组2与实施例1的配方基本相同， 区别在于， 对照组2将染料木素纳米冻干粉替 换成普通的染料木素(普通燃料木素即为染料木素纳米冻干粉制备方法中， S2中未经任何 处理的染料木素)。 0064 1、 护肤品控油、 保湿测试： 0065 选取2040岁女性30人， 随机平均分成5组， 分别使用实施例1实施例3以及对照 组1、 对照组2的护肤品， 使用方法为：。

20、 早晚各将护肤品涂抹于面部， 且不用其他护肤品。 采用 数字皮肤水份检测笔(数字皮肤水份检测笔如图10所示， 其由深圳市美思诚科技有限公司 生产， 型号1504.SK-IV)测定使用护肤品0周、 2周、 4周、 6周、 8周后的试验人员面部的水份、 油份以及弹性值(如图11所述， 弹性值从左到右依次为1、 2、 3、 4、 5)， 水份测试结果如下表1、 油份测试结果如下表2、 弹性值测试结果如下表3。 0066 表1持续使用不同时间长度的水份值() 说明书 5/9 页 7 CN 110200928 A 7 0067 0068 表2持续使用不同时间长度的油份值() 0069 0070 表3持续。

21、使用不同时间长度的弹性值 0071 0072 由表1可知， 本发明实施例1实施例3的护肤品使用8周后的皮肤保湿效果由37 左右提高至50左右， 而对照组1、 对照组2护肤品使用8周后皮肤保湿效果仅提高至40。 说明染料木素纳米冻干粉能促进熊果苷和玻尿酸等物质的吸收， 增强保湿效果， 而普通染 料木素则没有此效果。 由表2可知， 本发明实施例1实施例3的护肤品使用8周后的皮肤控 油效果由29左右降低20左右， 而对照组1、 对照组2使用8周后皮肤控油效果仅降低至 25左右； 说明染料木素纳米冻干粉能增强控油效果， 而普通染料木素则没有此效果。 由表 3可知， 未使用任何护肤品前， 测试人员的皮肤。

22、弹性值主要集中在23之间， 使用本发明实 施例 1实施例3护肤品八周之后皮肤弹性值在34之间， 弹性值上升了一个幅度， 而对照 组1、 对照组2使用八周后弹性值依然还是3， 说明染料木素纳米冻干粉能增强皮肤弹性， 增 强护肤效果， 而普通染料木素则没有此效果。 0073 2、 护肤品保湿持久性测试： 0074 选取2040岁男性3人、 女性3人作为测试对象。 采用数字皮肤水份检测笔检测护 肤品使用前、 护肤品刚使用后以及使用后4小时、 使用后8小时皮肤水份、 油份以及弹性值， 测试部位为脸颊、 额头、 手背、 手掌(检测部位如图8、 图9所示)， 结果取平均值， 水份测试结 果如下表4、 油份。

23、测试结果如下表5、 弹性值测试结果如下表6。 0075 表4测试各部位使用前后水份值() 说明书 6/9 页 8 CN 110200928 A 8 0076 0077 表5测试各部位使用前后油份值() 0078 0079 表6测试各部位使用前后弹性值 0080 0081 0082 由表4、 表5、 表6可知， 本发明护肤品使用后8个小时， 脸颊、 额头、 手背、 手心皮肤中 的水份以及皮肤弹性值均在较高水平， 油份上升不快， 说明本发明护肤品在使用后较长时 间内依然具有很好保湿控油效果， 本发明护肤品保湿持久性高。 0083 3、 染料木素纳米冻干粉与染料木素游离药物组对羟自由基的清除作用的测。

24、定 0084 根据Fenton反应原理产生OH， H2O2的量和Fenton反应产生的OH量成正比。 取 10mg 染料木素溶于200 LDMSO或含10mg染料木素的染料木素纳米冻干粉溶于200 L水中， 分别配置成含1.25、 2.5、 5、 10、 20、 40、 80、 160 g/mL染料木素的溶液。 吸取60 L不同浓度样 品于96孔板中， 加入60 L 10mmol/L的FeSO4， 再加入60 L 10mmol/L的水杨酸-乙醇溶液， 最 后加入20 L 8.8mmol/L的H2O2启动反应， 37反应30分钟， 以蒸馏水作参比， 测定不同样品 在510nm下的吸光值。 结果如。

25、图1所示(注： 图1中GS-ML冻干粉为染料木素纳米冻干粉， GS为 染料木素游离药物组)。 0085 由图1可知， 染料木素纳米冻干粉、 染料木素游离药物组的浓度大于10 g/mL时， 染 料木素纳米冻干粉对羟自由基的清除作用高于染料木素游离药物组的清除作用， 浓度大于 20 g/mL时， P0.01， 具有显著差异， 说明染料木素纳米冻干粉对羟自由基的清除作用远远 高于染料木素游离药物组。 说明书 7/9 页 9 CN 110200928 A 9 0086 4、 染料木素胶束冻干粉对3T3细胞(成纤维细胞)的抑制作用 0087 (一)、 依照如下步骤， 测定染料木素胶束冻干粉对3T3细胞的。

26、抑制作用： 0088 (1)接种细胞 0089 0.25胰蛋白酶消化液消化细胞， 计数， 用10FBS培养液配成5104个/mL的细 胞悬液， 按每孔100 L加入96孔板中， 每组、 每时间段设5个复孔， 在37、 5CO2、 饱和湿度 的恒温培养箱中培养。 选择MTT实验的细胞3T3生长处于对数期。 MTT细胞在复苏后2-3次分 瓶的时候用于实验较好。 0090 (2)药物作用 0091 培养24小时， 当细胞贴壁时， 快速倒去培养液， 无尘纸吸干。 对照组各孔加入10 FBS 的DMEM高糖培养液100 L， 处理组各孔分别加入不同浓度的药物各100 L。 在37、 5 CO2、 饱和湿。

27、度的恒温培养箱中培养24小时、 48小时、 72小时。 0092 (3)显色 0093 快速倾倒培养液， 药物浑浊时PBS洗涤后无尘纸吸干。 加入含10DMEM液100 L。 混 匀后培养箱继续培养4小时。 快速倾倒培养液， 吸干， 每孔加入DMSO 100 L裂解细胞， 在水平 摇床上摇1分钟， 20分钟内测定OD值， 测定波长为490nm。 0094 二、 实验分组 0095 调零组： DMEM液， 即为阴性对照组 0096 对照组： DMEM培养液+细胞+稀释药物介质， 即为细胞对照组 0097 处理组： DMEM培养液+细胞+不同浓度药物 0098 三、 计算 0099 计算处理组细胞。

28、生长抑制率的平均值(排除最大值和最小值， 其余数值取平均)， 计算公式如下： 0100 0101 用药物抑制浓度计算软件(IC50)计算出药物作用细胞24小时、 48小时、 72小时该 细胞存活率为50的药物浓度。 0102 染料木素胶束冻干粉对3T3细胞的抑制作用结果如图2、 图3、 图4所示(注： 图2中 GNP为染料木素纳米冻干粉， G为染料木素纳米冻干粉制备方法中， S2中未经任何处理的染 料木素游离药物组)。 0103 由图2、 图3、 图4可知， 染料木素纳米冻干粉和染料木素游离药物组对3T3细胞均有 一定的抑制作用， 染料木素纳米冻干粉在40 g/mL浓度下处理24小时即可杀死5。

29、0细胞， 或 者在5 g/mL浓度下处理72小时也可杀死50细胞。 当药物处理24小时， 浓度大于20 g/mL， 两种药品具有统计学差异， 药物处理48小时， 浓度大于10 g/mL， 药物处理72小时， 药物浓度 浓度大于10 g/mL两种药品即具有显著的差异， 说明染料木素纳米冻干粉与染料木素游离 药物相比对3T3细胞的抑制作用更稳定， 更强。 0104 5、 染料木素胶束冻干粉对B16细胞(黑色素瘤细胞)的抑制作用 0105 (一)、 依照如下步骤， 测定染料木素胶束冻干粉对B16细胞的抑制作用： 0106 (1)接种细胞 0107 0.25胰蛋白酶消化液消化细胞， 计数， 用10FB。

30、S培养液配成5104个/mL的细 说明书 8/9 页 10 CN 110200928 A 10 胞悬液， 按每孔100 L加入96孔板中， 每组、 每时间段设5个复孔， 在37、 5CO2、 饱和湿度 的恒温培养箱中培养。 选择MTT实验的细胞B16生长处于对数期。 MTT细胞在复苏后2-3次分 瓶的时候用于实验较好。 0108 (2)药物作用 0109 培养24小时， 当细胞贴壁时， 快速倒去培养液， 无尘纸吸干。 对照组各孔加入10 FBS 的DMEM培养液100 L， 处理组各孔分别加入不同浓度的药物各100 L。 在37、 5CO2、 饱和湿度的恒温培养箱中培养24小时、 48小时、 。

31、72小时。 0110 (3)显色 0111 快速倾倒培养液， 药物浑浊时PBS洗涤后无尘纸吸干。 加入含10DMEM液100 L。 混 匀后培养箱继续培养4小时。 快速倾倒培养液， 吸干， 每孔加入DMSO 100 L裂解细胞， 在水平 摇床上摇1分钟， 20分钟内测定OD值， 测定波长为490nm。 0112 二、 实验分组 0113 调零组： DMEM液， 即为阴性对照组 0114 对照组： DMEM培养液+细胞+稀释药物介质， 即为细胞对照组 0115 处理组： DMEM培养液+细胞+不同浓度药物 0116 三、 计算 0117 计算处理组细胞生长抑制率的平均值(排出最大值和最小值， 其。

32、余数值取平均)， 计算公式如下： 0118 0119 用药物抑制浓度计算软件(IC50)计算出药物作用细胞24小时、 48小时、 72小时该 细胞存活率为50的药物浓度。 0120 染料木素胶束冻干粉对B16细胞的抑制作用结果如图5、 图6、 图7所示(注： 图中GNP 为染料木素纳米冻干粉， G为染料木素纳米冻干粉制备方法中， S2中未经任何处理的染料木 素游离药物组)。 0121 由图5、 图6、 图7可知， 采用不同的浓度的染料木素纳米冻干粉处理B16细胞24小 时、 48小时、 72小时， 染料木素纳米冻干粉在48小时大于40 g/mL浓度和72小时大于5 g/mL 浓度时对B16细胞。

33、均有一定的抑制作用， 而染料木素游离药物组在低于2.5 g/mL浓度时对 B16细胞没有抑制作用， 甚至有一定的增殖作用。 说明染料木素纳米冻干粉对B16细胞具有 抑制作用， 而染料木素游离药物却没有明显的B16细胞抑制作用。 由此可知染料木素纳米冻 干粉较染料木素对黑色素瘤细胞有一定的抑制作用。 0122 上述说明是针对本发明较佳可行实施例的详细说明， 但实施例并非用以限定本发 明的专利申请范围， 凡本发明所提示的技术精神下所完成的同等变化或修饰变更， 均应属 于本发明所涵盖专利范围。 说明书 9/9 页 11 CN 110200928 A 11 图1 图2 说明书附图 1/5 页 12 CN 110200928 A 12 图3 图4 说明书附图 2/5 页 13 CN 110200928 A 13 图5 图6 说明书附图 3/5 页 14 CN 110200928 A 14 图7 图8 说明书附图 4/5 页 15 CN 110200928 A 15 图9 图10 图11 说明书附图 5/5 页 16 CN 110200928 A 16 。