超声波辅助酶法提取的百尾参多糖、其方法及应用.pdf

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1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201911281242.1 (22)申请日 2019.12.13 (71)申请人 贵州大学 地址 550025 贵州省贵阳市花溪区贵州大 学 （北区） 科技处 (72)发明人 甘秀海宋宝安胡德禹吴剑 张建陈吉祥 (74)专利代理机构 贵阳东圣专利商标事务有限 公司 52002 代理人 袁庆云 (51)Int.Cl. C08B 37/00(2006.01) A01N 65/42(2009.01) A01N 43/16(2006.01) A01P 1/00(2006.01) A61。

2、K 31/715(2006.01) A61K 36/896(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 超声波辅助酶法提取的百尾参多糖、 其方法 及应用 (57)摘要 本发明公开了一种超声波辅助酶法提取的 百尾参多糖、 其方法及应用， 是按质量份数取1份 过60目筛后的百尾参粉末浸泡于1550份的蒸馏 水中并调pH值至3.57.0， 于3070下保温静置 1530min； 然后加入百尾参干粉质量0.110%的 酶， 于3070下酶解0.53h， 得混合物； 3070 下超声提取1060min； 8090下灭酶处理5 20min； 室温冷却， 于30006000r。

3、pm离心1030 min， 取上清液用旋转蒸发仪浓缩至1/21/5体 积， 然后加入45倍浓缩液体积的无水乙醇， 于4 下静置28h， 50006000rpm离心1020min， 再经无水乙醇洗涤， 冷冻干燥得到。 本发明对肿 瘤细胞具有毒性， 对烟草花叶病毒和黄瓜花叶病 毒较好的抑制活性， 提取率高， 提取时间短， 节约 能源， 环保。 权利要求书1页 说明书7页 CN 110950972 A 2020.04.03 CN 110950972 A 1.一种超声波辅助酶法提取的百尾参多糖， 按质量份数取1份过60目筛后的百尾参粉 末浸泡于1550份的蒸馏水中并调pH值至3.57.0， 于3070。

4、下保温静置1530 min； 然后 加入百尾参干粉质量0.110%的酶， 于3070下酶解0.53 h， 得混合物； 3070下超声 提取1060 min； 8090 下灭酶处理520 min； 室温冷却， 于30006000 rpm离心1030 min， 取上清液用旋转蒸发仪浓缩至1/21/5体积， 然后加入45倍浓缩液体积的无水乙醇， 于4下静置28h， 50006000 rpm离心1020 min， 再经无水乙醇洗涤， 冷冻干燥得到。 2.一种超声波辅助酶法提取百尾参多糖的方法， 其包含以下步骤： （1） 将干燥的百尾参粉碎后过60目筛； （2） 按质量份数取1份过筛后的百尾参粉末浸泡于。

5、1550份的蒸馏水中并调pH值至3.5 7.0， 于3070下保温静置1530 min； （3） 然后加入百尾参干粉质量0.110%的酶， 于3070下酶解0.53 h， 得混合物； （4） 将混合物置于超声仪中， 3070下超声提取1060 min， 其功率为180400 W； （5） 然后置于8090 下灭酶处理520 min， 使酶制剂变性失活； （6） 灭酶处理后室温冷却， 于30006000 rpm离心1030 min， 除去蛋白和多肽， 上清液 即百尾参多糖提取液； （7） 用旋转蒸发仪将百尾参多糖提取液浓缩至1/21/5体积， 然后加入45倍浓缩液体 积的无水乙醇， 于4下静置2。

6、8h沉淀多糖， 50006000 rpm离心1020 min， 再经无水乙醇 洗涤， 冷冻干燥得到百尾参粗多糖。 3.如权利要求2所述的一种超声波辅助酶法提取百尾参多糖的方法， 其中： 步骤 （3） 中 的酶为-淀粉酶、-淀粉酶、 半乳糖苷酶、 木瓜蛋白酶、 酸性蛋白酶、 半纤维素酶、-葡萄糖 苷酶和纤维素酶中的一种或两种、 组分比例1： 1010： 1的混合物。 4.一种超声波辅助酶法提取的百尾参多糖在制备抑制肿瘤细胞药物和抗植物病毒药 物中的应用。 权利要求书 1/1 页 2 CN 110950972 A 2 超声波辅助酶法提取的百尾参多糖、 其方法及应用 技术领域 0001 本发明涉及中。

7、药技术领域， 具体来说涉及超声波辅助酶法提取的百尾参多糖， 同 时还涉及该超声波辅助酶法提取的百尾参多糖的方法， 及该超声波辅助酶法提取的百尾参 多糖对肿瘤细胞毒性和抗病毒领域的应用。 背景技术 0002 多糖是由10个以上的单糖通过糖苷键连接形成的天然高分子聚合物， 广泛存在于 植物、 动物及微生物中。 它既是细胞的组成物质， 又是调节各种生命活动的重要物质。 研究 发现植物多糖具有多种生理功能， 如抗氧化、 抗疲劳、 抗肿瘤、 抗凝血、 降血糖、 降血脂及调 节免疫功能， 并且对人体的毒副作用相对较小。 多糖在医学领域的研究与应用越来越受到 国内外专家学者的青睐， 目前应用于临床的有香菇多。

8、糖、 猪苓多糖、 灵芝多糖、 云芝多糖、 黄 芪多糖等。 相关文献报道多糖还具有较好的抗植物病毒活性， 如香菇多糖及其组合物具有 较好的抗烟草花叶病毒和黄瓜花叶病毒的活性， 且具有诱导作物产生抗病力， 抑制病毒侵 染的作用， 进而增加产量和提高品质的作用。 因此， 多糖已成为当前医药及农药研究的热点 领域之一。 0003 百尾参为百合科万寿竹属植物万寿竹(Disporum cantoniense(Lour.)Merr.)的 根及根茎， 为多年生草本植物， 为苗族习用药材， 是咳速停系列药物的主药， 其味甘、 淡， 性 平， 具有润肺止咳、 健脾消积的功效， 用于虚损咳喘、 痰中带血等症状。 有。

9、关百尾参的研究主 要集中在栽培方面， 对其化学成分研究较少， 主要含有甾体、 酰胺及黄酮等成分； 研究报道 百尾参及其化学成分具有抗菌、 抗氧化、 抗炎镇痛及袪痰止咳等药理作用。 0004 目 前 关 于 多 糖 提 取 工 艺 的 研 究 极 少 ， 目 前已 公 开 的 中 国 专 利 公 开 号 CN104844720A， 公开了 “一种百尾参多糖的分离提取方法” ， 该方法是将干燥粉粹后的百尾 参先用石油醚脱脂3h， 再于高温下提取数次， 每次数小时， 最后用树脂脱色、 Sevag试剂脱蛋 白得到百尾参多糖； 所得多糖具有较强的袪痰止咳及抗氧化活性。 上述方法为百尾参多糖 的开发提供了。

10、科学依据和实验基础， 但是在工艺推广及工业化生产上仍存在以下不足： 传统水提法得率较低， 且提取时间较长， 能耗大， 提取成本较高； 提取及纯化过程中使用 大量的有机溶剂， 带来了环境污染。 0005 相对于传统水提法， 使用酶处理超声辅助可在比较温和的条件下分解植物组织， 破粹细胞， 加速多糖的溶出， 能快速提高得率。 中国专利公开号CN101580553B， 公开了一种 酶法辅助提取蒺藜多糖的方法， 该方法使用纤维素酶、 木聚糖酶及果胶酶辅助提取蒺藜多 糖， 可使得率提高18-40.67， 纯度提高15-42。 中国专利公开号CN103319617A， 公开了一 种利用超声波协同酶法提取紫。

11、薯多糖的方法及应用， 该方法利用超声波协同淀粉酶辅助提 取紫薯多糖， 可明显提高多糖的得率。 中国专利公开号CN103145863A， 公开了一种酶处理提 取锁阳多糖的方法及锁阳多糖抗肿瘤制剂的制备， 相对于传统方法， 该方法可使多糖得率 提高10-65， 多糖含量提高5-40。 中国专利公开号CN 104004108A， 公开了一种酶解制备 锁阳多糖的方法， 该方法利用胃蛋白酶辅助提取锁阳多糖， 可使多糖的得率提高95-273。 说明书 1/7 页 3 CN 110950972 A 3 但尚未见到酶处理、 超声处理或酶解超声辅助提取百尾参多糖对肿瘤细胞毒性、 抗植物病 毒活性的报道。 发明内。

12、容 0006 本发明的目的在于克服上述缺点而提供的一种对肿瘤细胞具有毒性， 对烟草花叶 病毒和黄瓜花叶病毒具有较好的抑制活性， 得率高， 提取时间短， 节约能源， 环保的超声波 辅助酶法提取的百尾参多糖。 0007 本发明的另一目的在于提供该超声波辅助酶法提取的百尾参多糖的方法。 0008 本发明的再一目的在于提供该超声波辅助酶法提取的百尾参多糖在肿瘤细胞毒 性和抗植物病毒领域的应用。 0009 本发明的一种超声波辅助酶法提取的百尾参多糖， 是按质量份数取1份过60目筛 后的百尾参粉末浸泡于1550份的蒸馏水中并调pH值至3.57.0， 于3070下保温静置 1530min； 然后加入百尾参干。

13、粉质量0.110的酶， 于3070下酶解0.53h， 得混合 物； 3070下超声提取1060min； 8090下灭酶处理520min； 室温冷却， 于3000 6000rpm离心1030min， 取上清液用旋转蒸发仪浓缩至1/21/5体积， 然后加入45倍浓 缩液体积的无水乙醇， 于4下静置28h， 50006000rpm离心1020min， 再经无水乙醇洗 涤， 冷冻干燥得到。 0010 本发明的一种超声波辅助酶法提取百尾参多糖的方法， 其包含以下步骤： 0011 (1)将干燥的百尾参粉碎后过60目筛； 0012 (2)按质量份数取1份过筛后的百尾参粉末浸泡于1550份的蒸馏水中并调pH值。

14、 至3.57.0， 于3070下保温静置1530min； 0013 (3)然后加入百尾参干粉质量0.110的酶， 于3070下酶解0.53h， 得混合 物； 0014 (4)将混合物置于超声仪中， 3070下超声提取1060min， 其功率为180 400W； 0015 (5)然后置于8090下灭酶处理520min， 使酶制剂变性失活； 0016 (6)灭酶处理后室温冷却， 于30006000rpm离心1030min， 除去蛋白和多肽， 上 清液即百尾参多糖提取液； 0017 (7)用旋转蒸发仪将百尾参多糖提取液浓缩至1/21/5体积， 然后加入45倍浓 缩液体积的无水乙醇， 于4下静置28h。

15、沉淀多糖， 50006000rpm离心1020min， 再经无 水乙醇洗涤， 冷冻干燥得到百尾参粗多糖。 0018 上述的一种超声波辅助酶法提取百尾参多糖的方法， 其中： 步骤(3)中的酶为 -淀 粉酶、 -淀粉酶、 半乳糖苷酶、 木瓜蛋白酶、 酸性蛋白酶、 半纤维素酶、 -葡萄糖苷酶和纤维 素酶中的一种或两种(组分比例1： 1010： 1)的混合物。 0019 本发明的超声波辅助酶法提取的百尾参多糖在制备抑制肿瘤细胞药物和抗植物 病毒药物中的应用。 0020 本发明与现有技术相比， 具有明显的有益效果， 从以上技术可知： 本发明的方法先 利用酶解预处理， 之后进行超声波提取， 增强多糖的溶出。

16、， 提取结束后离心， 收集上清液， 浓 缩后加入无水乙醇， 静止后离心， 再经收集液进行絮凝、 洗涤纯化， 除去蛋白等高分子杂质。 说明书 2/7 页 4 CN 110950972 A 4 本发明提高了百尾参多糖的得率， 所得到的得率为18.928.6， 均高于目前文献报道的 得率。 本发明降低了提取温度， 简化了纯化过程， 不仅缩短了时间， 还节约了能源， 避免大量 有机溶剂对环境的污染。 本发明所得到的百尾参多糖48h对前列腺癌增生细胞(BPH-1)、 大 鼠肾上腺髓质嗜铬瘤分化细胞株PC12、 黑色素瘤细胞株WM9和人乳腺癌细胞株MCF-7对多种 细胞株均表现出明显的毒性， 可以作为抗肿。

17、瘤药物使用。 本发明所得到的百尾参多糖经试 验证明对烟草花叶病毒和黄瓜花叶病毒表现出较好的治疗和保护活性， 可应用于田间防控 植物病毒病。 具体实施方式 0021 实施例1 0022 一种超声波辅助酶法提取百尾参多糖的方法， 包括以下步骤： 0023 称取过60目筛的百尾参粉末5g， 加入pH值为7.0的蒸馏水150mL于60下保温静置 20min， 再向浸泡后的样品中加入0.5g的 -淀粉酶， 并于70下酶解3h， 将混合物置于超声 仪中， 在70水浴及超声功率400W条件下超声提取60min， 再将混合物置于90下灭酶处理 20min， 使酶制剂变性失活， 之后冷却至室温， 并于3000r。

18、pm离心10min， 转移上清液， 利用旋 转蒸发仪将所得提取液浓缩至1/5体积， 然后加入5倍浓缩液体积的无水乙醇， 于4下静置 8h沉淀多糖， 于6000rpm离心20min， 再次经无水乙醇洗涤， 离心， 经冷冻干燥得到百尾参粗 多糖。 0024 经多糖含量用苯酚-硫酸法定量测定， 用公式计算得率： 0025 得率()测出的多糖重量/样品重量100。 0026 该方法百尾参多糖的得率为28.3， 多糖含量76.1。 0027 实施例2 0028 一种超声波辅助酶法提取百尾参多糖的方法， 包括以下步骤： 0029 称取过60目筛的百尾参粉末5g， 加入PH值为7.0的蒸馏水150mL于60。

19、下保温静置 20min， 再向浸泡后的样品中加入0.1g的 -淀粉酶， 并于60下酶解2h， 将混合物置于超声 仪中， 在60水浴及超声功率300W条件下超声提取15min， 再将混合物置于95下灭酶处理 10min， 使酶制剂变性失活， 之后冷却至室温， 并于3500rpm离心10min， 转移上清液， 利用旋 转蒸发仪将所得提取液浓缩至1/2体积， 然后加入4倍浓缩液体积的无水乙醇， 于4下静置 4h沉淀多糖， 于5000rpm离心10min， 再次经无水乙醇洗涤， 离心， 经冷冻干燥得到百尾参粗 多糖。 0030 经多糖含量用苯酚-硫酸法定量测定， 用公式计算得率， 该方法百尾参多糖的得。

20、率 为23.1， 多糖含量52.9。 0031 实施例3 0032 一种超声波辅助酶法提取百尾参多糖的方法， 包括以下步骤： 0033 称取过60目筛的百尾参粉末5g， 加入pH值为3.5的蒸馏水250mL于30下保温静置 15min， 再向浸泡后的样品中加入0.05g的半乳糖苷酶， 并于30下酶解0.5h， 将混合物置于 超声仪中， 在30水浴及超声功率180W条件下超声提取10min， 再将混合物置于80下灭酶 处理5min， 使酶制剂变性失活， 之后冷却至室温， 并于3000rpm离心10min， 转移上清液， 利用 旋转蒸发仪将所得提取液浓缩至1/5体积， 然后加入5倍浓缩液体积的无水。

21、乙醇， 于4下静 说明书 3/7 页 5 CN 110950972 A 5 置2h沉淀多糖， 于5000rpm离心10min， 再次经无水乙醇洗涤， 离心， 经冷冻干燥得到百尾参 粗多糖。 0034 经多糖含量用苯酚-硫酸法定量测定， 用公式计算得率， 该方法百尾参多糖的得率 为18.9， 多糖含量91.7。 0035 实施例4 0036 一种超声波辅助酶法提取百尾参多糖的方法， 包括以下步骤： 0037 称取过60目筛的百尾参粉末5g， 加入pH值为7.0的蒸馏水150mL于50下保温静置 20min， 再向浸泡后的样品中加入0.1g的木瓜蛋白酶， 并于50下酶解2h， 将混合物置于超 声仪。

22、中， 在50水浴及超声功率300W条件下超声提取15min， 再将混合物置于90下灭酶处 理10min， 使酶制剂变性失活， 之后冷却至室温， 并于3500rpm离心10min， 转移上清液， 利用 旋转蒸发仪将所得提取液浓缩至1/2体积， 然后加入4倍浓缩液体积的无水乙醇， 于4下静 置4h沉淀多糖， 于5000rpm离心10min， 再次经无水乙醇洗涤， 离心， 经冷冻干燥得到百尾参 粗多糖。 0038 经多糖含量用苯酚-硫酸法定量测定， 用公式计算得率， 该方法百尾参多糖的得率 为21.1， 多糖含量72.1。 0039 实施例5 0040 一种超声波辅助酶法提取百尾参多糖的方法， 包括。

23、以下步骤： 0041 称取过60目筛的百尾参粉末5g， 加入pH值为5.0的蒸馏水150mL于50下保温静置 20min， 再向浸泡后的样品中加入0.25g的半纤维素酶， 并于50下酶解2h， 将混合物置于超 声仪中， 在50水浴及超声功率300W条件下超声提取15min， 再将混合物置于90下灭酶处 理10min， 使酶制剂变性失活， 之后冷却至室温， 并于3500rpm离心10min， 转移上清液， 利用 旋转蒸发仪将所得提取液浓缩至1/2体积， 然后加入4倍浓缩液体积的无水乙醇， 于4下静 置4h沉淀多糖， 于5000rpm离心10min， 再次经无水乙醇洗涤， 离心， 经冷冻干燥得到百。

24、尾参 粗多糖。 0042 经多糖含量用苯酚-硫酸法定量测定， 用公式计算得率， 该方法百尾参多糖的得率 为28.1， 多糖含量50.2。 0043 实施例6 0044 一种超声波辅助酶法提取百尾参多糖的方法， 包括以下步骤： 0045 称取过60目筛的百尾参粉末5g， 加入PH值为5.0的蒸馏水150mL于50下保温静置 30min， 再向浸泡后的样品中加入0.1g的纤维素酶， 并于50下酶解2h， 将混合物置于超声 仪中， 在50水浴及超声功率300W条件下超声提取15min， 再将混合物置于85下灭酶处理 10min， 使酶制剂变性失活， 之后冷却至室温， 并于3500rpm离心10min。

25、， 转移上清液， 利用旋 转蒸发仪将所得提取液浓缩至1/2体积， 然后加入4倍浓缩液体积的无水乙醇， 于4下静置 4h沉淀多糖， 于5000rpm离心10min， 再次经无水乙醇洗涤， 离心， 经冷冻干燥得到百尾参粗 多糖。 0046 经多糖含量用苯酚-硫酸法定量测定， 用公式计算得率， 该方法百尾参多糖的得率 为22.5， 多糖含量49.7。 0047 实施例7 0048 一种超声波辅助酶法提取百尾参多糖的方法， 包括以下步骤： 说明书 4/7 页 6 CN 110950972 A 6 0049 称取过60目筛的百尾参粉末5g， 加入pH值为3.5的蒸馏水75mL于30下保温提取 15min。

26、， 将混合物置于超声仪中， 在30水浴及超声功率180W条件下超声提取10min， 再于90 下加热处理5min， 之后冷却至室温， 并于3000rpm离心10min， 转移上清液， 利用旋转蒸发 仪将所得提取液浓缩至1/5体积， 然后加入4倍浓缩液体积的无水乙醇， 于4下静置2h沉淀 多糖， 于5000rpm离心10min， 再次经无水乙醇洗涤， 离心， 经冷冻干燥得到百尾参粗多糖。 0050 经多糖含量用苯酚-硫酸法定量测定， 用公式计算得率， 该方法百尾参多糖的得率 为18.0， 多糖含量28.5。 0051 试验例1： 实施例1-7制得的百尾参粗多糖对肿瘤细胞的毒性试验 0052 采用。

27、MTT法评价百尾参多糖对前列腺癌增生细胞(BPH-1)、 大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤 分化细胞株PC12、 黑色素瘤细胞株WM9和人乳腺癌细胞株MCF-7的毒性， 具体操作如下： 0053 取对数生长期的肿瘤细胞于96孔板内， 每孔100 L， 静止培养12h后， 以溶剂为阴性 对照， 5-氟尿嘧啶为阳性对照， 向每孔内分别加入100 L不同浓度的多糖样品， 每个浓度设3 个平行， 之后于37的CO2培养箱中培养48h,弃上清， 再加入20 L5mg/mL的MTT溶液， 继续培 养4h， 吸去上清， 再加入150 LDMSO， 避光振荡10min， 使之溶解， 最后用酶标仪在570nm处测 定各处理。

28、组中每孔的OD值， 根据下式计算样品对肿瘤细胞的抑制率， 并计算其IC50值。 0054 抑制率(1-A/A0)100 0055 式中A为样品组的吸光值； A0为空白组吸光值。 0056 其中， 各组三次重复， 试验结果见表1 0057 表1百尾参粗多糖对肿瘤细胞的抑制率IC50( g/mL) 0058 0059 0060 试验例2： 实施例1-7制得的百尾参粗多糖对烟草花叶病毒(TMV)治疗和保护活性 试验 0061 采用半叶枯斑法法评价百尾参多糖对TMV治疗和保护活性， 具体操作如下： 0062 采用宋宝安方法(Song B A， Zhang H P， Wang H， Yang S， Ji。

29、n L H， Hu D Y， Pang L L， Xue W.J.Agric.Food.Chem.2005,53,7886-7891.)， 选取接种3周以上， TMV系统侵染寄主 Nicotiana tabacum.L植株上部叶片， 在磷酸缓冲液中匀浆， 双层纱布过滤， 8000g离心， 经2 次聚乙二醇处理， 再离心， 沉淀用磷酸缓冲液悬浮， 即得到TMV的精提液体。 用紫外分光光度 计测定260nm波长的吸光度值， 根据公式计算病毒浓度。 0063 病毒浓度(mg/mL)(A260稀释倍数)/E0.11cm260nm 0064 其中E表示消光系数， 即波长260nm时， 浓度为0.1(1m。

30、g/mL)的悬浮液， 在光程为 1cm时的光吸收值。 TMV的E0.11cm260nm是5.0。 说明书 5/7 页 7 CN 110950972 A 7 0065 百尾参粗多糖对TMV侵染的活体治疗试验:选长势一致的5-6叶期的心叶烟打顶， 向全叶撒匀金刚砂， 用排笔蘸取病毒汁液(610-3mg/mL)全叶接种病毒， 自然晾干后用清 水冲洗。 待叶片干后， 用毛笔在左半叶轻轻涂施药剂， 右半叶涂施对应溶剂的浓度的溶剂作 对照， 6-7d后记录枯斑数， 按公式计算治疗活性抑制率， 试验结果见表2。 0066 百尾参粗多糖对TMV侵染的活体保护试验:药剂对TMV侵染的活体保护作用： 选长 势一致。

31、的5-6叶期的心叶烟打顶， 用毛笔在左半叶轻轻涂施药剂， 右半叶涂施对应溶剂的浓 度的溶剂作对照。 24h后， 向全叶撒匀金刚砂， 用排笔蘸取病毒汁液(610-3mg/mL)全叶接 种病毒， 用清水冲洗， 6-7d后记录枯斑数， 按下列公式计算保护活性抑制率， 试验结果见表 2。 0067 抑制率()(未施药枯斑数-施药枯斑数)/未施药枯斑数100 0068 其中， 各组三次重复， 试验结果见表2 0069 表2百尾参粗多糖抗TMV活性() 0070 0071 试验例3： 实施例1-7制得的百尾参粗多糖对黄瓜花叶病毒治疗(CMV)和保护活性 试验 0072 采用半叶枯斑法法评价百尾参多糖对CM。

32、V治疗和保护活性， 具体操作如下： 0073 采用周雪平(Zhou X P， Xu Z X， Xu J， Li D B， J.South Chin.Agric.Univ.1995, 16,74-79.)方法， 选取接种3周以上， CMV系统侵染寄主Nicotiana tabacum.L植株上部叶 片， 在磷酸缓冲液中匀浆， 双层纱布过滤， 8000g离心， 经2次聚乙二醇处理， 再离心， 沉淀用 磷酸缓冲液悬浮， 即得到CMV的精提液体。 整个实验在4下进行。 用紫外分光光度计测定 260nm波长的吸光度值， 根据公式计算病毒浓度。 0074 病毒浓度(mg/mL)(A260稀释倍数)/E0.。

33、11cm260nm 0075 其中E表示消光系数， 即波长260nm时， 浓度为0.1(1mg/mL)的悬浮液， 在光程为 1cm时的光吸收值。 CMV的E0.11cm260nm是5.0。 0076 百尾参粗多糖对CMV侵染的活体治疗作用： 选长势一致的5-6叶期的苋色藜打顶， 向全叶撒匀金刚砂， 用排笔蘸取病毒汁液(610-3mg/mL)全叶接种病毒， 自然晾干后用清水 冲洗。 待叶片干后， 用毛笔在左半叶轻轻涂施药剂， 右半叶涂施对应溶剂的浓度的溶剂作对 照， 3-4d后记录枯斑数， 按下列公式计算治疗活性抑制率， 结果见表3。 0077 百尾参粗多糖对CMV侵染的活体保护试验:选长势一致。

34、的5-6叶期的苋色藜打顶， 用毛笔在左半叶轻轻涂施药剂， 右半叶涂施对应溶剂的浓度的溶剂作对照。 24h后， 向全叶 撒匀金刚砂， 用排笔蘸取病毒汁液(610-3mg/mL)全叶接种病毒， 用清水冲洗， 3-4d后记录 枯斑数， 按下列公式计算保护活性抑制率， 结果见表3。 说明书 6/7 页 8 CN 110950972 A 8 0078 抑制率()(未施药枯斑数-施药枯斑数)/未施药枯斑数100 0079 其中， 各组三次重复， 试验结果见表3 0080 表3百尾参粗多糖抗CMV活性() 0081 0082 以上所述， 仅是本发明的较佳实施例而已， 并非对本发明作任何形式上的限制， 任 何未脱离本发明技术方案内容， 依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修 改、 等同变化与修饰， 均仍属于本发明技术方案的范围内。 说明书 7/7 页 9 CN 110950972 A 9 。