营养无腥味南极磷虾油的制备方法.pdf

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1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 202010454143.5 (22)申请日 2020.05.26 (71)申请人 梁志勇 地址 266000 山东省青岛市城阳区明阳路 287号38号楼2单元1202户 (72)发明人 梁志勇杨庆利马迪宋仁芳 (74)专利代理机构 北京挺立专利事务所(普通 合伙) 11265 代理人 贾楠楠 (51)Int.Cl. C11B 1/02(2006.01) C11B 1/10(2006.01) C11B 3/00(2006.01) C11B 3/16(2006.01) C12N 1。

2、/16(2006.01) C12N 1/20(2006.01) C12R 1/72(2006.01) C12R 1/125(2006.01) C12R 1/07(2006.01) (54)发明名称 一种营养无腥味南极磷虾油的制备方法 (57)摘要 本发明公开了一种营养无腥味南极磷虾油 的制备方法， 属于海洋生物技术领域。 本发明以 南极磷虾粉为原料， 集成现代生物分离技术、 生 物酶解技术、 混菌微生物发酵技术， 研制开发出 高抗衰老功效的南极磷虾油生物制品， 满足保 健、 医疗、 食品等领域对南极磷虾油的应用需求； 该工艺技术南极磷虾油提取率高， 所得南极磷虾 油生物制品中磷脂、 虾青素、 。

3、DHA、 EPA等功能性伴 随物的含量高， 流动性好， 较好的实现了磷虾油 的脱腥； 本发明方法生产工艺简单， 制备过程不 发生化学变化， 不改变DHA、 EPA和虾青素化学结 构， 使整个反应过程绿色环保、 耗能低， 并提高了 南极磷虾资源的综合利用度， 利于工业化推广。 权利要求书2页 说明书10页 CN 111607460 A 2020.09.01 CN 111607460 A 1.一种营养无腥味南极磷虾油的制备方法， 其特征在于主要包括如下步骤： （1） 粉碎： 以南极磷虾粉为原料， 将南极磷虾粉粉碎， 过100目筛； （2） 溶解： 将步骤(1)所得南极磷虾粉加入3倍的纯净水， 搅拌。

4、混匀； （3） 灭菌： 将溶解后的南极磷虾粉通过高压蒸锅灭菌， 冷却后待用； （4） 复合酶解： 向灭菌后的浆液中加入质量比2%的复合酶制剂， 在4060条件下搅拌 酶解30min； （5） 好氧发酵： 向酶解后的酶解液中加入酶解液质量比3%的复合微生物菌剂， 在2835 条件下好氧发酵8h； （6） 厌氧发酵： 好氧发酵结束后加入2%的乳酸杆菌粉， 在2835条件下厌氧发酵12h； （7） 过滤： 进行粗过滤除去发酵菌体； （8） 灭酶： 在100条件下灭酶10min； （9） 离心： 以10000r/min速率离心分离， 去除不溶性成分； （10） 干燥： 分离后的离心液经喷雾干燥或冷冻干。

5、燥或减压干燥， 使其中的水分含量低 于10%， 得到粗提取物； （11） 粗提物的浸提： 向步骤 （10） 中粗提物加入体积比1:120倍的提取剂， 在1060 条件下进行提取， 提取时间为25h， 得浸提液； 所述提取剂为乙醇和乙酸乙酯的混合液， 其 中乙酸乙酯的体积分数为2040%； （12） 一级浓缩、 冷却、 分离和二级浓缩： 将步骤 （11） 得到的浸提液经减压浓缩至其中含 油量大于30%， 得到一级浓缩液； 将一级浓缩液于216条件下静置12h， 经过滤或离心 进行分离， 将收集的液体再经二级减压浓缩至无溶剂残留， 即得到高品质南极磷虾油。 2.根据权利要求1所述的一种营养无腥味南。

6、极磷虾油的制备方法， 其特征在于所述步 骤 （4） 中复合酶制剂为蛋白酶、 脂肪酶和柚苷酶的中的一种或几种的混合物。 3.根据权利要求1所述的一种营养无腥味南极磷虾油的制备方法， 其特征在于所述蛋 白酶、 脂肪酶和柚苷酶的质量比为3:1:1。 4.根据权利要求1所述的一种营养无腥味南极磷虾油的制备方法， 其特征在于所述蛋 白酶为胃蛋白酶、 中性蛋白酶、 菠萝蛋白酶、 胰蛋白酶、 木瓜蛋白酶、 风味蛋白酶中的一种或 几种的混合物。 5.根据权利要求1所述的一种营养无腥味南极磷虾油的制备方法， 其特征在于所述脂 肪酶脂肪酶为假丝酵母酯酶、 曲霉酯酶、 假单胞菌酯酶和根霉酯酶中的一种或几种的混合 物。

7、。 6.根据权利要求1所述的一种营养无腥味南极磷虾油的制备方法， 其特征在于所述脂 肪酶为假丝酵母酯酶和假单胞菌酯酶的混合物， 其质量比为2:1。 7.根据权利要求1所述的一种营养无腥味南极磷虾油的制备方法， 其特征在于所述步 骤 （5） 中所述复合微生物菌剂为产朊假丝酵母、 枯草芽孢杆菌和冷解糖芽孢杆菌的混合菌 剂， 其质量比组成为3:2:1。 8.根据权利要求1所述的一种营养无腥味南极磷虾油的制备方法， 其特征在于所述述 步骤 （5） 中好氧发酵过程在发酵罐中进行时通风量为0.20.3m3/m3.min。 9.根据权利要求1所述的一种营养无腥味南极磷虾油的制备方法， 其特征在于所述产 朊假。

8、丝酵母种子液制备方法为： 在无菌操作条件下， 从酵母菌YDP斜面上用接种环挑取两环 权利要求书 1/2 页 2 CN 111607460 A 2 菌种， 接种到500mL装300mLPDA液体培养基的三角瓶内， 2832， 140r/min振荡培养24h 后， 然后按照上述工艺接种种子罐扩大培养制备酵母菌种子液， 要求种子液的有效活菌数 109cfu/mL。 10.根据权利要求1所述的一种营养无腥味南极磷虾油的制备方法， 其特征在于所述枯 草芽孢杆菌和冷解糖芽孢杆菌种子液制备方法为： 在无菌条件下， 采用LB培养基在2832 条件下培养24h， 制得液体枯草芽孢杆菌和冷解糖芽孢杆菌种子液， 要。

9、求种子液的有效活 菌数109cfu/mL。 权利要求书 2/2 页 3 CN 111607460 A 3 一种营养无腥味南极磷虾油的制备方法 技术领域 0001 本发明涉及一种营养无腥味南极磷虾油的制备方法， 尤其是一种利用南极磷虾粉 为原料通过微生物协同发酵制备高抗衰老功效的南极磷虾油生物制品， 属于海洋生物技术 领域。 背景技术 0002 南极洲是地球上唯一没有受到污染的大陆， 曾被誉为 “洁白无瑕” 的世界， 是地球 上的最后一块 “净土” 。 南极大陆周围的海洋被称为富饶、 洁净的 “海上牧场” ， 海洋里充满了 生机， 那里有海藻、 珊瑚、 海星和海绵， 大海里还有许许多多叫做磷虾的。

10、微小生物， 它是南极 洲众多的鱼类、 海鸟、 海豹、 企鹅以及鲸类赖以生存的食物， 它在南大洋食物链中起着十分 重要的作用。 南极磷虾是继粮食、 石油、 煤炭之后的地区第四大资源。 南极磷虾的蕴藏量十 分惊人， 而且营养价值极高。 它是人们今天已经发现的含蛋白质最高的生物， 蛋白质含量达 百分之五十以上， 而且还含有极为丰富的人体组织所必需的氨基酸和维生素A。 0003 目前南极磷虾在医药、 食品中的应用以南极磷虾油为主。 南极磷虾油利用专利超 低温萃取的方式提取， 是大自然馈赠给人类的天然健康食品， 含有其他食品不能替代的功 效。 美国临床证实， 磷虾油具有超强的降血脂， 降血糖， 降血压，。

11、 穿越血脑屏障营养及活化脑 部细胞和神经， 起到预防和治疗脑血管疾病； 同时， 预防和治疗冠状动脉粥样硬化， 冠心病， 预防发生心梗、 支架、 搭桥及二次复发等心血管疾病； 此外， 南极磷虾油还可以起到抗菌消 炎， 预防癌症的发生发展， 延缓疲劳， 调节内分泌等多重功效。 0004 目前现有技术中关于南极磷虾油的制备多采用酶解或物理方法制备， 如专利 201810078300.X公开了一种南极磷虾油的制备方法， 该方法以南极磷虾粉为原料， 通过在 特定的体系条件下， 采用多级研磨协同酶解的方法， 将南极磷虾中富含脂质的粗组分进行 富集， 然后经分离、 干燥工艺， 得到粗提物； 粗提取经乙醇和乙。

12、酸乙酯混合溶剂进行浸提， 浸 提液再经一级浓缩、 冷却、 分离、 二级浓缩处理后， 即可得到高品质南极磷虾油； 专利 201811290847.2公开了一种低不皂化物南极磷虾油的制备方法， 包括： 向粗提南极磷虾油 中加入浓度7599的乙醇溶液并搅拌均匀得到混合液； 向混合液中加入环糊精和/或环 糊精的衍生物， 搅拌并过滤得到滤液； 对滤液进行减压蒸馏除去乙醇得到低不皂化物南极 磷虾油。 本发明还提供了如上所述的制备方法制备得到的低不皂化物南极磷虾油。 比较现 有技术发现现有技术中并没有通过微生物发酵协同酶解方法制备南极磷虾油的报道。 发明内容 0005 为了克服上述现有技术的不足， 满足南极。

13、磷虾油高效提取及高值化利用， 本申请 提供一种营养无腥味南极磷虾油的制备方法， 集成现代生物分离技术、 生物酶解技术、 混菌 微生物发酵技术， 研制开发出高抗衰老功效的南极磷虾油生物制品， 满足保健、 医疗、 食品 等领域对南极磷虾油的应用需求； 该工艺技术南极磷虾油提取率高， 所得南极磷虾油生物 制品中磷脂、 虾青素、 DHA、 EPA等功能性伴随物的含量高， 流动性好， 较好的实现了磷虾油的 说明书 1/10 页 4 CN 111607460 A 4 脱腥， 且便于工业化规模生产。 0006 本发明通过下述技术方案实现上述技术效果： 一种营养无腥味南极磷虾油的制备方法， 主要包括如下步骤：。

14、 （1） 粉碎： 以南极磷虾粉为原料， 将南极磷虾粉粉碎， 过100目筛； （2） 溶解： 将步骤(1)所得南极磷虾粉加入3倍的纯净水， 搅拌混匀； （3） 灭菌： 将溶解后的南极磷虾粉通过高压蒸锅灭菌， 冷却后待用； （4） 复合酶解： 向灭菌后的浆液中加入质量比2%的复合酶制剂， 在4060条件下搅拌 酶解30min； （5） 好氧发酵： 向酶解后的酶解液中加入酶解液质量比3%的复合微生物菌剂， 在2835 条件下好氧发酵8h； （6） 厌氧发酵： 好氧发酵结束后加入2%的乳酸杆菌粉， 在2835条件下厌氧发酵12h； （7） 过滤： 进行粗过滤除去发酵菌体； （8） 灭酶： 在100条件。

15、下灭酶10min； （9） 离心： 以10000r/min速率离心分离， 去除不溶性成分； （10） 干燥： 分离后的离心液经喷雾干燥或冷冻干燥或减压干燥， 使其中的水分含量低 于10%， 得到粗提取物； （11） 粗提物的浸提： 向步骤 （10） 中粗提物加入体积比1:120倍的提取剂， 在1060 条件下进行提取， 提取时间为25h， 得浸提液； 所述提取剂为乙醇和乙酸乙酯的混合液， 其 中乙酸乙酯的体积分数为2040%； （12） 一级浓缩、 冷却、 分离和二级浓缩： 将步骤 （11） 得到的浸提液经减压浓缩至其中含 油量大于30%， 得到一级浓缩液； 将一级浓缩液于216条件下静置12。

16、h， 经过滤或离心 进行分离， 将收集的液体再经二级减压浓缩至无溶剂残留， 即得到高品质南极磷虾油。 0007 优选的， 上述步骤 （4） 中复合酶制剂为蛋白酶、 脂肪酶和柚苷酶的中的一种或几种 的混合物。 0008 优选的， 上述蛋白酶、 脂肪酶和柚苷酶的质量比为3:1:1。 0009 优选的， 上述蛋白酶为胃蛋白酶、 中性蛋白酶、 菠萝蛋白酶、 胰蛋白酶、 木瓜蛋白 酶、 风味蛋白酶中的一种或几种的混合物。 0010 优选的， 上述脂肪酶脂肪酶为假丝酵母酯酶、 曲霉酯酶、 假单胞菌酯酶和根霉酯酶 中的一种或几种的混合物。 0011 优选的， 上述脂肪酶为假丝酵母酯酶和假单胞菌酯酶的混合物，。

17、 其质量比为2:1。 0012 优选的， 上述步骤 （5） 中所述复合微生物菌剂为产朊假丝酵母、 枯草芽孢杆菌和冷 解糖芽孢杆菌的混合菌剂， 其质量比组成为3:2:1。 0013 优选的， 上述述步骤 （5） 中好氧发酵过程在发酵罐中进行时通风量为0.20.3m3/ m3.min。 0014 上述产朊假丝酵母种子液制备方法为： 在无菌操作条件下， 从酵母菌YDP斜面上用 接种环挑取两环菌种， 接种到500mL装300mLPDA液体培养基的三角瓶内， 2832， 140r/ min振荡培养24h后， 然后按照上述工艺接种种子罐扩大培养制备酵母菌种子液， 要求种子 液的有效活菌数109cfu/mL。

18、。 0015 上述枯草芽孢杆菌和冷解糖芽孢杆菌种子液制备方法为： 在无菌条件下， 采用LB 说明书 2/10 页 5 CN 111607460 A 5 培养基在2832条件下培养24h， 制得液体枯草芽孢杆菌和冷解糖芽孢杆菌种子液， 要求 种子液的有效活菌数109cfu/mL。 0016 本发明提供一种营养无腥味南极磷虾油的制备方法， 与现有技术相比， 具有以下 显著优势： （1） 本申请以南极磷虾粉为原料， 集成现代生物分离技术、 生物酶解技术、 混菌微生物 发酵技术， 显著提升了南极磷虾油提取得率和DHA、 EPA等的含量； 其中复合酶制剂对南极磷 虾油的提取得率和活性物质含量影响显著， 。

19、尤其是尽管柚苷酶对提升南极磷虾油提取制备 影响不显著， 但对提高南极磷虾取得率和DHA、 EPA等的含量影响显著； （2） 本申请利用好氧菌 （产朊假丝酵母、 枯草芽孢杆菌、 冷解糖芽孢杆菌） 共同发酵南极 磷虾粉提取南极磷虾油， 充分利用微生物间的协同作用， 提升南极磷虾油提取得率和DHA、 EPA等的含量， 其中： 产朊假丝酵母在发酵过程中会产生各种降解细胞壁的酶类， 使得更多 的南极磷虾油从细胞壁中释放出来， 且酵母是产生能够释放结合态酚酸的酶类， 有利于提 升南极磷虾油的活性物质含量； 枯草芽孢杆菌在高温发酵过程中能够杀灭发酵液中的致病 菌， 并具有较强的产蛋白酶、 蛋白酶等能力， 可。

20、以将大分子淀粉、 蛋白物质降解为微生物所 利用， 从而提高南极磷虾油的提取得率； 冷解糖芽孢杆菌的加入则可以显著提升南极磷虾 油中DHA、 EPA等的含量； （3） 本发明方法生产工艺简单， 制备过程不发生化学变化， 不改变DHA、 EPA和虾青素化 学结构， 使整个反应过程绿色环保、 耗能低， 并提高了南极磷虾资源的综合利用度， 利于工 业化推广。 具体实施方式 0017 在本申请中， 产朊假丝酵母、 枯草芽孢杆菌和冷解糖芽孢杆菌的活化方法如下： （1） 产朊假丝酵母种子液制备方法为： 在无菌操作条件下， 从酵母菌YDP斜面上用接种 环挑取两环菌种， 接种到500mL装300mLPDA液体培。

21、养基的三角瓶内， 2832， 140r/min 振荡培养24h后， 然后按照上述工艺接种种子罐扩大培养制备酵母菌种子液， 要求种子液的 有效活菌数109cfu/mL； （2） 上述枯草芽孢杆菌和冷解糖芽孢杆菌种子液制备方法为： 在无菌条件下， 采用LB培 养基在2832条件下培养24h， 制得液体枯草芽孢杆菌和冷解糖芽孢杆菌种子液， 要求种 子液的有效活菌数109cfu/mL。 0018 实施例1 一种营养无腥味南极磷虾油的制备方法， 主要包括如下步骤： （1） 粉碎： 以南极磷虾粉为原料， 将南极磷虾粉粉碎， 过100目筛； （2） 溶解： 将步骤(1)所得南极磷虾粉加入3倍的纯净水， 搅拌。

22、混匀； （3） 灭菌： 将溶解后的南极磷虾粉通过高压蒸锅灭菌， 冷却后待用； （4） 复合酶解： 向灭菌后的浆液中加入质量比2%的复合酶制剂， 在4060条件下搅拌 酶解30min； 所述复合酶制剂为蛋白酶、 脂肪酶和柚苷酶的混合物， 其中蛋白酶、 脂肪酶和柚 苷酶的质量比为3:1:1； 所述蛋白酶为胰蛋白酶、 木瓜蛋白酶和风味蛋白酶的等质量混合 物； 所述脂肪酶为假丝酵母酯酶和假单胞菌酯酶的混合物， 其质量比为2:1； （5） 好氧发酵： 向酶解后的酶解液中加入酶解液质量比3%的复合微生物菌剂， 在2835 说明书 3/10 页 6 CN 111607460 A 6 条件下好氧发酵8h； 所。

23、述复合微生物菌剂为产朊假丝酵母、 枯草芽孢杆菌和冷解糖芽孢 杆菌的混合菌剂， 其质量比组成为3:2:1； （6） 厌氧发酵： 好氧发酵结束后加入2%的乳酸杆菌粉， 在2835条件下厌氧发酵12h； （7） 过滤： 进行粗过滤除去发酵菌体； （8） 灭酶： 在100条件下灭酶10min； （9） 离心： 以10000r/min速率离心分离， 去除不溶性成分； （10） 干燥： 分离后的离心液经喷雾干燥或冷冻干燥或减压干燥， 使其中的水分含量低 于10%， 得到粗提取物； （11） 粗提物的浸提： 向步骤 （10） 中粗提物加入体积比1:120倍的提取剂， 在1060 条件下进行提取， 提取时间为。

24、25h， 得浸提液； 所述提取剂为乙醇和乙酸乙酯的混合液， 其 中乙酸乙酯的体积分数为2040%； （12） 一级浓缩、 冷却、 分离和二级浓缩： 将步骤 （11） 得到的浸提液经减压浓缩至其中含 油量大于30%， 得到一级浓缩液； 将一级浓缩液于216条件下静置12h， 经过滤或离心 进行分离， 将收集的液体再经二级减压浓缩至无溶剂残留， 即得到高品质南极磷虾油。 0019 实施例2 一种营养无腥味南极磷虾油的制备方法， 主要包括如下步骤： （1） 粉碎： 以南极磷虾粉为原料， 将南极磷虾粉粉碎， 过100目筛； （2） 溶解： 将步骤(1)所得南极磷虾粉加入3倍的纯净水， 搅拌混匀； （3。

25、） 灭菌： 将溶解后的南极磷虾粉通过高压蒸锅灭菌， 冷却后待用； （4） 复合酶解： 向灭菌后的浆液中加入质量比2%的复合酶制剂， 在4060条件下搅拌 酶解30min； 所述复合酶制剂为蛋白酶； 所述蛋白酶为胰蛋白酶、 木瓜蛋白酶和风味蛋白酶 的等质量混合物； （5） 好氧发酵： 向酶解后的酶解液中加入酶解液质量比3%的复合微生物菌剂， 在2835 条件下好氧发酵8h； 所述复合微生物菌剂为产朊假丝酵母、 枯草芽孢杆菌和冷解糖芽孢 杆菌的混合菌剂， 其质量比组成为3:2:1； （6） 厌氧发酵： 好氧发酵结束后加入2%的乳酸杆菌粉， 在2835条件下厌氧发酵12h； （7） 过滤： 进行粗过。

26、滤除去发酵菌体； （8） 灭酶： 在100条件下灭酶10min； （9） 离心： 以10000r/min速率离心分离， 去除不溶性成分； （10） 干燥： 分离后的离心液经喷雾干燥或冷冻干燥或减压干燥， 使其中的水分含量低 于10%， 得到粗提取物； （11） 粗提物的浸提： 向步骤 （10） 中粗提物加入体积比1:120倍的提取剂， 在1060 条件下进行提取， 提取时间为25h， 得浸提液； 所述提取剂为乙醇和乙酸乙酯的混合液， 其 中乙酸乙酯的体积分数为2040%； （12） 一级浓缩、 冷却、 分离和二级浓缩： 将步骤 （11） 得到的浸提液经减压浓缩至其中含 油量大于30%， 得到一。

27、级浓缩液； 将一级浓缩液于216条件下静置12h， 经过滤或离心 进行分离， 将收集的液体再经二级减压浓缩至无溶剂残留， 即得到高品质南极磷虾油。 0020 实施例3 一种营养无腥味南极磷虾油的制备方法， 主要包括如下步骤： 说明书 4/10 页 7 CN 111607460 A 7 （1） 粉碎： 以南极磷虾粉为原料， 将南极磷虾粉粉碎， 过100目筛； （2） 溶解： 将步骤(1)所得南极磷虾粉加入3倍的纯净水， 搅拌混匀； （3） 灭菌： 将溶解后的南极磷虾粉通过高压蒸锅灭菌， 冷却后待用； （4） 复合酶解： 向灭菌后的浆液中加入质量比2%的复合酶制剂， 在4060条件下搅拌 酶解30。

28、min； 所述复合酶制剂为脂肪酶； 所述脂肪酶为假丝酵母酯酶和假单胞菌酯酶的混合 物， 其质量比为2:1； （5） 好氧发酵： 向酶解后的酶解液中加入酶解液质量比3%的复合微生物菌剂， 在2835 条件下好氧发酵8h； 所述复合微生物菌剂为产朊假丝酵母、 枯草芽孢杆菌和冷解糖芽孢 杆菌的混合菌剂， 其质量比组成为3:2:1； （6） 厌氧发酵： 好氧发酵结束后加入2%的乳酸杆菌粉， 在2835条件下厌氧发酵12h； （7） 过滤： 进行粗过滤除去发酵菌体； （8） 灭酶： 在100条件下灭酶10min； （9） 离心： 以10000r/min速率离心分离， 去除不溶性成分； （10） 干燥： 。

29、分离后的离心液经喷雾干燥或冷冻干燥或减压干燥， 使其中的水分含量低 于10%， 得到粗提取物； （11） 粗提物的浸提： 向步骤 （10） 中粗提物加入体积比1:120倍的提取剂， 在1060 条件下进行提取， 提取时间为25h， 得浸提液； 所述提取剂为乙醇和乙酸乙酯的混合液， 其 中乙酸乙酯的体积分数为2040%； （12） 一级浓缩、 冷却、 分离和二级浓缩： 将步骤 （11） 得到的浸提液经减压浓缩至其中含 油量大于30%， 得到一级浓缩液； 将一级浓缩液于216条件下静置12h， 经过滤或离心 进行分离， 将收集的液体再经二级减压浓缩至无溶剂残留， 即得到高品质南极磷虾油。 0021。

30、 实施例4 一种营养无腥味南极磷虾油的制备方法， 主要包括如下步骤： （1） 粉碎： 以南极磷虾粉为原料， 将南极磷虾粉粉碎， 过100目筛； （2） 溶解： 将步骤(1)所得南极磷虾粉加入3倍的纯净水， 搅拌混匀； （3） 灭菌： 将溶解后的南极磷虾粉通过高压蒸锅灭菌， 冷却后待用； （4） 复合酶解： 向灭菌后的浆液中加入质量比2%的复合酶制剂， 在4060条件下搅拌 酶解30min； 所述复合酶制剂为柚苷酶； （5） 好氧发酵： 向酶解后的酶解液中加入酶解液质量比3%的复合微生物菌剂， 在2835 条件下好氧发酵8h； 所述复合微生物菌剂为产朊假丝酵母、 枯草芽孢杆菌和冷解糖芽孢 杆菌的。

31、混合菌剂， 其质量比组成为3:2:1； （6） 厌氧发酵： 好氧发酵结束后加入2%的乳酸杆菌粉， 在2835条件下厌氧发酵12h； （7） 过滤： 进行粗过滤除去发酵菌体； （8） 灭酶： 在100条件下灭酶10min； （9） 离心： 以10000r/min速率离心分离， 去除不溶性成分； （10） 干燥： 分离后的离心液经喷雾干燥或冷冻干燥或减压干燥， 使其中的水分含量低 于10%， 得到粗提取物； （11） 粗提物的浸提： 向步骤 （10） 中粗提物加入体积比1:120倍的提取剂， 在1060 条件下进行提取， 提取时间为25h， 得浸提液； 所述提取剂为乙醇和乙酸乙酯的混合液， 其 说。

32、明书 5/10 页 8 CN 111607460 A 8 中乙酸乙酯的体积分数为2040%； （12） 一级浓缩、 冷却、 分离和二级浓缩： 将步骤 （11） 得到的浸提液经减压浓缩至其中含 油量大于30%， 得到一级浓缩液； 将一级浓缩液于216条件下静置12h， 经过滤或离心 进行分离， 将收集的液体再经二级减压浓缩至无溶剂残留， 即得到高品质南极磷虾油。 0022 实施例5 一种营养无腥味南极磷虾油的制备方法， 主要包括如下步骤： （1） 粉碎： 以南极磷虾粉为原料， 将南极磷虾粉粉碎， 过100目筛； （2） 溶解： 将步骤(1)所得南极磷虾粉加入3倍的纯净水， 搅拌混匀； （3） 灭。

33、菌： 将溶解后的南极磷虾粉通过高压蒸锅灭菌， 冷却后待用； （4） 复合酶解： 向灭菌后的浆液中加入质量比2%的复合酶制剂， 在4060条件下搅拌 酶解30min； 所述复合酶制剂为蛋白酶和脂肪酶的混合物， 其中蛋白酶、 脂肪酶的质量比为 3:1； 所述蛋白酶为胰蛋白酶、 木瓜蛋白酶和风味蛋白酶的等质量混合物； 所述脂肪酶为假 丝酵母酯酶和假单胞菌酯酶的混合物， 其质量比为2:1； （5） 好氧发酵： 向酶解后的酶解液中加入酶解液质量比3%的复合微生物菌剂， 在2835 条件下好氧发酵8h； 所述复合微生物菌剂为产朊假丝酵母、 枯草芽孢杆菌和冷解糖芽孢 杆菌的混合菌剂， 其质量比组成为3:2:。

34、1； （6） 厌氧发酵： 好氧发酵结束后加入2%的乳酸杆菌粉， 在2835条件下厌氧发酵12h； （7） 过滤： 进行粗过滤除去发酵菌体； （8） 灭酶： 在100条件下灭酶10min； （9） 离心： 以10000r/min速率离心分离， 去除不溶性成分； （10） 干燥： 分离后的离心液经喷雾干燥或冷冻干燥或减压干燥， 使其中的水分含量低 于10%， 得到粗提取物； （11） 粗提物的浸提： 向步骤 （10） 中粗提物加入体积比1:120倍的提取剂， 在1060 条件下进行提取， 提取时间为25h， 得浸提液； 所述提取剂为乙醇和乙酸乙酯的混合液， 其 中乙酸乙酯的体积分数为2040%； 。

35、（12） 一级浓缩、 冷却、 分离和二级浓缩： 将步骤 （11） 得到的浸提液经减压浓缩至其中含 油量大于30%， 得到一级浓缩液； 将一级浓缩液于216条件下静置12h， 经过滤或离心 进行分离， 将收集的液体再经二级减压浓缩至无溶剂残留， 即得到高品质南极磷虾油。 0023 实施例6 一种营养无腥味南极磷虾油的制备方法， 主要包括如下步骤： （1） 粉碎： 以南极磷虾粉为原料， 将南极磷虾粉粉碎， 过100目筛； （2） 溶解： 将步骤(1)所得南极磷虾粉加入3倍的纯净水， 搅拌混匀； （3） 灭菌： 将溶解后的南极磷虾粉通过高压蒸锅灭菌， 冷却后待用； （4） 复合酶解： 向灭菌后的浆液。

36、中加入质量比2%的复合酶制剂， 在4060条件下搅拌 酶解30min； 所述复合酶制剂为蛋白酶和柚苷酶的混合物， 其中蛋白酶和柚苷酶的质量比为 3:1； 所述蛋白酶为胰蛋白酶、 木瓜蛋白酶和风味蛋白酶的等质量混合物； （5） 好氧发酵： 向酶解后的酶解液中加入酶解液质量比3%的复合微生物菌剂， 在2835 条件下好氧发酵8h； 所述复合微生物菌剂为产朊假丝酵母、 枯草芽孢杆菌和冷解糖芽孢 杆菌的混合菌剂， 其质量比组成为3:2:1； 说明书 6/10 页 9 CN 111607460 A 9 （6） 厌氧发酵： 好氧发酵结束后加入2%的乳酸杆菌粉， 在2835条件下厌氧发酵12h； （7） 过。

37、滤： 进行粗过滤除去发酵菌体； （8） 灭酶： 在100条件下灭酶10min； （9） 离心： 以10000r/min速率离心分离， 去除不溶性成分； （10） 干燥： 分离后的离心液经喷雾干燥或冷冻干燥或减压干燥， 使其中的水分含量低 于10%， 得到粗提取物； （11） 粗提物的浸提： 向步骤 （10） 中粗提物加入体积比1:120倍的提取剂， 在1060 条件下进行提取， 提取时间为25h， 得浸提液； 所述提取剂为乙醇和乙酸乙酯的混合液， 其 中乙酸乙酯的体积分数为2040%； （12） 一级浓缩、 冷却、 分离和二级浓缩： 将步骤 （11） 得到的浸提液经减压浓缩至其中含 油量大于3。

38、0%， 得到一级浓缩液； 将一级浓缩液于216条件下静置12h， 经过滤或离心 进行分离， 将收集的液体再经二级减压浓缩至无溶剂残留， 即得到高品质南极磷虾油。 0024 实施例7 一种营养无腥味南极磷虾油的制备方法， 主要包括如下步骤： （1） 粉碎： 以南极磷虾粉为原料， 将南极磷虾粉粉碎， 过100目筛； （2） 溶解： 将步骤(1)所得南极磷虾粉加入3倍的纯净水， 搅拌混匀； （3） 灭菌： 将溶解后的南极磷虾粉通过高压蒸锅灭菌， 冷却后待用； （4） 复合酶解： 向灭菌后的浆液中加入质量比2%的复合酶制剂， 在4060条件下搅拌 酶解30min； 所述复合酶制剂为蛋白酶、 脂肪酶和柚。

39、苷酶的混合物， 其中蛋白酶、 脂肪酶和柚 苷酶的质量比为3:1:1； 所述蛋白酶为胰蛋白酶、 木瓜蛋白酶和风味蛋白酶的等质量混合 物； 所述脂肪酶为假丝酵母酯酶； （5） 好氧发酵： 向酶解后的酶解液中加入酶解液质量比3%的复合微生物菌剂， 在2835 条件下好氧发酵8h； 所述复合微生物菌剂为产朊假丝酵母、 枯草芽孢杆菌和冷解糖芽孢 杆菌的混合菌剂， 其质量比组成为3:2:1； （6） 厌氧发酵： 好氧发酵结束后加入2%的乳酸杆菌粉， 在2835条件下厌氧发酵12h； （7） 过滤： 进行粗过滤除去发酵菌体； （8） 灭酶： 在100条件下灭酶10min； （9） 离心： 以10000r/m。

40、in速率离心分离， 去除不溶性成分； （10） 干燥： 分离后的离心液经喷雾干燥或冷冻干燥或减压干燥， 使其中的水分含量低 于10%， 得到粗提取物； （11） 粗提物的浸提： 向步骤 （10） 中粗提物加入体积比1:120倍的提取剂， 在1060 条件下进行提取， 提取时间为25h， 得浸提液； 所述提取剂为乙醇和乙酸乙酯的混合液， 其 中乙酸乙酯的体积分数为2040%； （12） 一级浓缩、 冷却、 分离和二级浓缩： 将步骤 （11） 得到的浸提液经减压浓缩至其中含 油量大于30%， 得到一级浓缩液； 将一级浓缩液于216条件下静置12h， 经过滤或离心 进行分离， 将收集的液体再经二级减。

41、压浓缩至无溶剂残留， 即得到高品质南极磷虾油。 0025 实施例8 一种营养无腥味南极磷虾油的制备方法， 主要包括如下步骤： （1） 粉碎： 以南极磷虾粉为原料， 将南极磷虾粉粉碎， 过100目筛； 说明书 7/10 页 10 CN 111607460 A 10 （2） 溶解： 将步骤(1)所得南极磷虾粉加入3倍的纯净水， 搅拌混匀； （3） 灭菌： 将溶解后的南极磷虾粉通过高压蒸锅灭菌， 冷却后待用； （4） 复合酶解： 向灭菌后的浆液中加入质量比2%的复合酶制剂， 在4060条件下搅拌 酶解30min； 所述复合酶制剂为蛋白酶、 脂肪酶和柚苷酶的混合物， 其中蛋白酶、 脂肪酶和柚 苷酶的质。

42、量比为3:1:1； 所述蛋白酶为胰蛋白酶、 木瓜蛋白酶和风味蛋白酶的等质量混合 物； 所述脂肪酶为假单胞菌酯酶； （5） 好氧发酵： 向酶解后的酶解液中加入酶解液质量比3%的复合微生物菌剂， 在2835 条件下好氧发酵8h； 所述复合微生物菌剂为产朊假丝酵母、 枯草芽孢杆菌和冷解糖芽孢 杆菌的混合菌剂， 其质量比组成为3:2:1； （6） 厌氧发酵： 好氧发酵结束后加入2%的乳酸杆菌粉， 在2835条件下厌氧发酵12h； （7） 过滤： 进行粗过滤除去发酵菌体； （8） 灭酶： 在100条件下灭酶10min； （9） 离心： 以10000r/min速率离心分离， 去除不溶性成分； （10） 干。

43、燥： 分离后的离心液经喷雾干燥或冷冻干燥或减压干燥， 使其中的水分含量低 于10%， 得到粗提取物； （11） 粗提物的浸提： 向步骤 （10） 中粗提物加入体积比1:120倍的提取剂， 在1060 条件下进行提取， 提取时间为25h， 得浸提液； 所述提取剂为乙醇和乙酸乙酯的混合液， 其 中乙酸乙酯的体积分数为2040%； （12） 一级浓缩、 冷却、 分离和二级浓缩： 将步骤 （11） 得到的浸提液经减压浓缩至其中含 油量大于30%， 得到一级浓缩液； 将一级浓缩液于216条件下静置12h， 经过滤或离心 进行分离， 将收集的液体再经二级减压浓缩至无溶剂残留， 即得到高品质南极磷虾油。 0。

44、026 实施例9 一种营养无腥味南极磷虾油的制备方法， 主要包括如下步骤： （1） 粉碎： 以南极磷虾粉为原料， 将南极磷虾粉粉碎， 过100目筛； （2） 溶解： 将步骤(1)所得南极磷虾粉加入3倍的纯净水， 搅拌混匀； （3） 灭菌： 将溶解后的南极磷虾粉通过高压蒸锅灭菌， 冷却后待用； （4） 复合酶解： 向灭菌后的浆液中加入质量比2%的复合酶制剂， 在4060条件下搅拌 酶解30min； 所述复合酶制剂为蛋白酶、 脂肪酶和柚苷酶的混合物， 其中蛋白酶、 脂肪酶和柚 苷酶的质量比为3:1:1； 所述蛋白酶为胰蛋白酶、 木瓜蛋白酶和风味蛋白酶的等质量混合 物； 所述脂肪酶为假丝酵母酯酶和假。

45、单胞菌酯酶的混合物， 其质量比为1:2； （5） 好氧发酵： 向酶解后的酶解液中加入酶解液质量比3%的复合微生物菌剂， 在2835 条件下好氧发酵8h； 所述复合微生物菌剂为产朊假丝酵母、 枯草芽孢杆菌和冷解糖芽孢 杆菌的混合菌剂， 其质量比组成为3:2:1； （6） 厌氧发酵： 好氧发酵结束后加入2%的乳酸杆菌粉， 在2835条件下厌氧发酵12h； （7） 过滤： 进行粗过滤除去发酵菌体； （8） 灭酶： 在100条件下灭酶10min； （9） 离心： 以10000r/min速率离心分离， 去除不溶性成分； （10） 干燥： 分离后的离心液经喷雾干燥或冷冻干燥或减压干燥， 使其中的水分含量低。

46、 于10%， 得到粗提取物； 说明书 8/10 页 11 CN 111607460 A 11 （11） 粗提物的浸提： 向步骤 （10） 中粗提物加入体积比1:120倍的提取剂， 在1060 条件下进行提取， 提取时间为25h， 得浸提液； 所述提取剂为乙醇和乙酸乙酯的混合液， 其 中乙酸乙酯的体积分数为2040%； （12） 一级浓缩、 冷却、 分离和二级浓缩： 将步骤 （11） 得到的浸提液经减压浓缩至其中含 油量大于30%， 得到一级浓缩液； 将一级浓缩液于216条件下静置12h， 经过滤或离心 进行分离， 将收集的液体再经二级减压浓缩至无溶剂残留， 即得到高品质南极磷虾油。 0027 。

47、对比实施例1 一种营养无腥味南极磷虾油的制备方法， 主要包括如下步骤： （1） 粉碎： 以南极磷虾粉为原料， 将南极磷虾粉粉碎， 过100目筛； （2） 溶解： 将步骤(1)所得南极磷虾粉加入3倍的纯净水， 搅拌混匀； （3） 灭菌： 将溶解后的南极磷虾粉通过高压蒸锅灭菌， 冷却后待用； （4） 复合酶解： 将灭菌后的浆液在4060条件下搅拌酶解30min； （5） 好氧发酵： 向酶解后的酶解液中加入酶解液质量比3%的复合微生物菌剂， 在2835 条件下好氧发酵8h； 所述复合微生物菌剂为产朊假丝酵母、 枯草芽孢杆菌和冷解糖芽孢 杆菌的混合菌剂， 其质量比组成为3:2:1； （6） 厌氧发酵：。

48、 好氧发酵结束后加入2%的乳酸杆菌粉， 在2835条件下厌氧发酵12h； （7） 过滤： 进行粗过滤除去发酵菌体； （8） 灭酶： 在100条件下灭酶10min； （9） 离心： 以10000r/min速率离心分离， 去除不溶性成分； （10） 干燥： 分离后的离心液经喷雾干燥或冷冻干燥或减压干燥， 使其中的水分含量低 于10%， 得到粗提取物； （11） 粗提物的浸提： 向步骤 （10） 中粗提物加入体积比1:120倍的提取剂， 在1060 条件下进行提取， 提取时间为25h， 得浸提液； 所述提取剂为乙醇和乙酸乙酯的混合液， 其 中乙酸乙酯的体积分数为2040%； （12） 一级浓缩、 冷。

49、却、 分离和二级浓缩： 将步骤 （11） 得到的浸提液经减压浓缩至其中含 油量大于30%， 得到一级浓缩液； 将一级浓缩液于216条件下静置12h， 经过滤或离心 进行分离， 将收集的液体再经二级减压浓缩至无溶剂残留， 即得到高品质南极磷虾油。 0028 对比实施例2 一种营养无腥味南极磷虾油的制备方法， 主要包括如下步骤： （1） 粉碎： 以南极磷虾粉为原料， 将南极磷虾粉粉碎， 过100目筛； （2） 溶解： 将步骤(1)所得南极磷虾粉加入3倍的纯净水， 搅拌混匀； （3） 灭菌： 将溶解后的南极磷虾粉通过高压蒸锅灭菌， 冷却后待用； （4） 复合酶解： 向灭菌后的浆液中加入质量比2%的复。

50、合酶制剂， 在4060条件下搅拌 酶解30min； 所述复合酶制剂为蛋白酶、 脂肪酶和柚苷酶的混合物， 其中蛋白酶、 脂肪酶和柚 苷酶的质量比为3:1:1； 所述蛋白酶为胰蛋白酶、 木瓜蛋白酶和风味蛋白酶的等质量混合 物； 所述脂肪酶为假丝酵母酯酶和假单胞菌酯酶的混合物， 其质量比为2:1； （5） 粗提物的浸提： 向步骤 （4） 中粗提物加入体积比1:120倍的提取剂， 在1060条 件下进行提取， 提取时间为25h， 得浸提液； 所述提取剂为乙醇和乙酸乙酯的混合液， 其中 乙酸乙酯的体积分数为2040%； 说明书 9/10 页 12 CN 111607460 A 12 （6） 一级浓缩、 。