增强下肢动脉硬化超声诊断的靶向超声造影剂及其制备方法.pdf

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1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 202010797627.X (22)申请日 2020.08.10 (71)申请人 黑龙江中医药大学 地址 150040 黑龙江省哈尔滨市香坊区和 平路24号 申请人 牡丹江医学院 (72)发明人 石光煜赵芳园王书惠白吉祥 夏燕杰徐颖刘海英赵志轩 宋静何春艳 (74)专利代理机构 北京中和立达知识产权代理 事务所(普通合伙) 11756 代理人 张攀 (51)Int.Cl. A61K 49/22(2006.01) (54)发明名称 一种增强下肢动脉硬化超声诊断的靶向超 声造影剂及。

2、其制备方法 (57)摘要 本发明涉及一种增强下肢动脉硬化超声诊 断的靶向超声造影剂及其制备方法， 所述增强下 肢动脉硬化超声诊断的靶向超声造影剂由氨基 修饰脂膜的超声造影剂、 纤维蛋白靶向多肽制备 而成， 实现了造影剂在下肢动脉硬化患处的富 集， 明显延长了造影持续时间， 显著增强了下肢 动脉硬化的超声显像效果。 权利要求书1页 说明书4页 CN 111686263 A 2020.09.22 CN 111686263 A 1.一种增强下肢动脉硬化超声诊断的靶向超声造影剂， 其特征在于， 由氨基修饰脂膜 的超声造影剂、 纤维蛋白靶向多肽制备而成。 2.根据权利要求1所述的增强下肢动脉硬化超声诊断。

3、的靶向超声造影剂， 其特征在于， 所述氨基修饰脂膜的超声造影剂为脂膜中包含PEG氨基的超声造影剂。 3.根据权利要求2所述的增强下肢动脉硬化超声诊断的靶向超声造影剂， 其特征在于， 所述脂膜中包含PEG氨基的超声造影剂与纤维蛋白靶向多肽的重量比为90-99:1。 4.根据权利要求2-3任一项所述的增强下肢动脉硬化超声诊断的靶向超声造影剂， 其 特征在于， 所述脂膜中包含PEG氨基的超声造影剂为脂膜中包含DSPE-PEG(2000)Amine、 4 臂-氨基-聚乙二醇或6臂-氨基-聚乙二醇的声诺维。 5.根据权利要求4所述的增强下肢动脉硬化超声诊断的靶向超声造影剂， 其特征在于， 所述脂膜中包含。

4、DSPE-PEG(2000)Amine、 4臂-氨基-聚乙二醇或6臂-氨基-聚乙二醇的声诺 维中DSPE-PEG(2000)Amine、 4臂-氨基-聚乙二醇或6臂-氨基-聚乙二醇的含量为脂膜的 0.05-10。 6.根据权利要求1-5任一项所述的增强下肢动脉硬化超声诊断的靶向超声造影剂， 其 特征在于， 所述纤维蛋白靶向多肽选自： 胸腺五肽、 胸腺肽 1、 RGD肽或其混合物。 7.根据权利要求6所述的增强下肢动脉硬化超声诊断的靶向超声造影剂， 其特征在于， 所述纤维蛋白靶向多肽为胸腺五肽。 8.根据权利要求6所述的增强下肢动脉硬化超声诊断的靶向超声造影剂， 其特征在于， 所述纤维蛋白靶向多。

5、肽为胸腺五肽与RGD肽的混合物。 9.权利要求1-8任一项所述的增强下肢动脉硬化超声诊断的靶向超声造影剂的制备方 法， 其特征在于包括以下步骤： (1)制备氨基修饰脂膜的超声造影剂； (2)制备靶向超声造影剂： 将步骤1所制备的氨基修饰脂膜的超声造影剂、 纤维蛋白靶 向多肽加入注射用水， 在20-30下震荡5-15min， 即得。 10.根据权利要求9所述的制备方法， 其特征在于， 所述氨基修饰脂膜的超声造影剂经 在脂膜配料中添加配方量的DSPE-PEG(2000)Amine、 4臂-氨基-聚乙二醇或6臂-氨基-聚乙 二醇制备而得。 权利要求书 1/1 页 2 CN 111686263 A 2。

6、 一种增强下肢动脉硬化超声诊断的靶向超声造影剂及其制备 方法 技术领域 0001 本发明属于诊断试剂领域， 具体涉及一种增强下肢动脉硬化超声诊断的靶向超声 造影剂及其制备方法。 背景技术 0002 超声诊断是指利用超声声束扫描组织结构， 将接收到的信号处理后获得组织器官 的形态图像， 用于疾病诊断的方法， 具有无创、 直观、 无辐射等其他检查方法所无可比拟的 优点。 由于在部分组织中超声组织定征并不理想， 超声造影剂由此应运而生。 超声造影剂是 指可在超声诊断中增强图像对比度的物质， 能提高超声诊断的敏感性和特异性， 现有的超 声造影剂包括Optison、 Sonazoid、 Sonovue、。

7、 Definity、 Imagen、 雪瑞欣等。 0003 下肢动脉硬化即下肢动脉硬化闭塞症， 是由于下肢动脉粥样硬化斑块形成， 引起 下肢动脉狭窄、 闭塞， 从而导致组织的慢性缺血。 虽然已经有报道在下肢动脉硬化的超声诊 断中应用超声造影剂， 如吴冬梅等报道了在超声造影中应用声诺维(SonoVue)评价下肢静 脉硬化闭塞症骨骼肌灌注障碍； 王薇等也报道了声诺维对下肢动脉硬化的诊断价值， 但在 下肢静脉诊断过程中由于声诺维并不能靶向与下肢动脉硬化的患处， 因此， 造影剂的所需 剂量高， 且造影持续时间非常短， 一般仅5分钟作用， 检测窗口期短， 而持续大量施用造影剂 不仅患者依从性低， 且成本。

8、高昂、 存在一定的副作用， 无法有效适应临床超声详细检查的需 要。 0004 本发明的目的即是致力于提供一种造影持续时间长、 且用量更低的可靶向增强下 肢动脉硬化超声诊断的超声造影剂。 发明内容 0005 本发明的目的是提供一种增强下肢动脉硬化超声诊断的靶向超声造影剂及其制 备方法。 0006 一方面， 本发明提供了一种增强下肢动脉硬化超声诊断的靶向超声造影剂， 所述 靶向超声造影剂由氨基修饰脂膜的超声造影剂、 纤维蛋白靶向多肽制备而成 0007 优选的， 所述氨基修饰脂膜的超声造影剂为脂膜中包含PEG氨基的超声造影剂。 0008 优选的， 所述脂膜中包含PEG氨基的超声造影剂与纤维蛋白靶向多。

9、肽的重量比为 90-99:1； 更优选的， 所述脂膜中包含PEG氨基的超声造影剂与纤维蛋白靶向多肽的重量比 为92-97:1； 最优选的， 所述脂膜中包含PEG氨基的超声造影剂与纤维蛋白靶向多肽的重量 比为95:1。 0009 优选的， 所述脂膜中包含PEG氨基的超声造影剂为脂膜中包含DSPE-PEG(2000) Amine、 4臂-氨基-聚乙二醇或6臂-氨基-聚乙二醇的声诺维； 更优选的， 所述脂膜中包含 DSPE-PEG(2000)Amine、 4臂-氨基-聚乙二醇或6臂-氨基-聚乙二醇的声诺维中DSPE-PEG (2000)Amine、 4臂-氨基-聚乙二醇或6臂-氨基-聚乙二醇的含量为。

10、脂膜的0.05-10； 最优 说明书 1/4 页 3 CN 111686263 A 3 选的， 所述脂膜中包含DSPE-PEG(2000)Amine、 4臂-氨基-聚乙二醇或6臂-氨基-聚乙二醇的 声诺维中DSPE-PEG(2000)Amine、 4臂-氨基-聚乙二醇或6臂-氨基-聚乙二醇的含量为脂膜 的2。 0010 优选的， 所述纤维蛋白靶向多肽选自： 胸腺五肽、 胸腺肽 1或RGD肽， 更优选的， 所 述维蛋白靶向多肽为胸腺五肽； 最优选的， 所述纤维蛋白靶向多肽为胸腺五肽与RGD肽的混 合物， 优选的， 所述胸腺五肽与RGD肽的重量比为1-5:1； 更优选的， 所述胸腺五肽与RGD肽的。

11、 重量比为2-4:1； 最优选的， 所述胸腺五肽与RGD肽的重量比为3:1。 0011 另一方面， 本发明提供了一种增强下肢动脉硬化超声诊断的靶向超声造影剂的制 备方法， 包括以下步骤： 0012 (1)制备氨基修饰脂膜的超声造影剂； 0013 (2)制备靶向超声造影剂： 将步骤1所制备的制备氨基修饰脂膜的超声造影剂、 纤 维蛋白靶向多肽加入注射用水， 在20-30下震荡5-15min， 即得本发明所述的靶向超声造 影剂。 0014 优选的， 所述氨基修饰脂膜的超声造影剂经在脂膜配料中添加配方量的DSPE-PEG (2000)Amine、 4臂-氨基-聚乙二醇或6臂-氨基-聚乙二醇制备而得。 。

12、0015 本发明有益效果 0016 本发明通过对超声造影剂脂膜表面的修饰， 使其能够结合纤维蛋白靶向多肽， 从 而实现了可靶向下肢动脉硬化患处的靶向超声造影剂， 实现了造影剂在下肢动脉硬化患处 的富集， 明显延长了造影持续时间， 显著增强了下肢动脉硬化的超声显像效果。 0017 由于本发明所述靶向超声造影剂实现了造影剂在下肢动脉硬化患处的富集， 因 此， 显著降低了超声造影剂的造影所需剂量， 即有利于降低成本， 也有利于避免造影剂副作 用的发生。 具体实施方式 0018 在下文中更详细地描述了本发明以有助于对本发明的理解。 0019 实施例1： 一种增强下肢动脉硬化超声诊断的靶向超声造影剂 0。

13、020 DSPE-PEG(2000)Amine含量为脂膜2的声诺维95份、 胸腺五肽1份、 注射用水适 量， 按照以下步骤制备： 0021 (1)制备脂膜中包含DSPE-PEG(2000)Amine的超声造影剂： 在脂膜配料中添加配方 量的DSPE-PEG(2000)Amine， 制备得到脂膜中包含DSPE-PEG(2000)Amine的超声造影剂； 0022 (2)制备靶向超声造影剂： 将步骤1所制备的脂膜中包含DSPE-PEG(2000)Amine的 超声造影剂、 胸腺五肽加入注射用水， 在25下震荡10min， 即得本发明所述的靶向超声造 影剂。 0023 实施例2： 一种增强下肢动脉硬。

14、化超声诊断的靶向超声造影剂 0024 DSPE-PEG(2000)Amine含量为脂膜2的声诺维95份、 胸腺肽 1份、 注射用水适量， 按照实施例1方法制备即得。 0025 实施例3： 一种增强下肢动脉硬化超声诊断的靶向超声造影剂 0026 DSPE-PEG(2000)Amine含量为脂膜2的声诺维95份、 RGD肽1份、 注射用水适量， 按 照实施例1方法制备即得。 说明书 2/4 页 4 CN 111686263 A 4 0027 实施例4： 一种增强下肢动脉硬化超声诊断的靶向超声造影剂 0028 DSPE-PEG(2000)Amine含量为脂膜2的声诺维95份、 胸腺五肽0.75份、 。

15、RGD肽0.25 份、 注射用水适量， 按照实施例1方法制备即得。 0029 实施例5： 一种增强下肢动脉硬化超声诊断的靶向超声造影剂 0030 DSPE-PEG(2000)Amine含量为脂膜2的声诺维95份、 胸腺五肽0.5份、 RGD肽0.5 份、 注射用水适量， 按照实施例1方法制备即得。 0031 实施例6： 一种增强下肢动脉硬化超声诊断的靶向超声造影剂 0032 DSPE-PEG(2000)Amine含量为脂膜2的声诺维95份、 胸腺五肽0.25份、 RGD肽0.75 份、 注射用水适量， 按照实施例1方法制备即得。 0033 实施例7、 一种增强下肢动脉硬化超声诊断的靶向超声造影。

16、剂 0034 DSPE-PEG(2000)Amine含量为脂膜2的声诺维97份、 胸腺五肽1份、 注射用水适 量， 按照实施例1方法制备即得。 0035 实施例8： 一种增强下肢动脉硬化超声诊断的靶向超声造影剂 0036 DSPE-PEG(2000)Amine含量为脂膜3的声诺维95份、 胸腺五肽1份、 注射用水适 量， 按照实施例1方法制备即得。 0037 实施例9： 一种增强下肢动脉硬化超声诊断的靶向超声造影剂 0038 4臂-氨基-聚乙二醇含量为脂膜2的声诺维95份、 胸腺五肽1份、 注射用水适量， 按照实施例1方法制备即得。 0039 实施例10： 一种增强下肢动脉硬化超声诊断的靶向超。

17、声造影剂 0040 6臂-氨基-聚乙二醇含量为脂膜2的声诺维95份、 胸腺五肽1份、 注射用水适量， 按照实施例1方法制备即得。 0041 对比例1： 一种下肢动脉硬化超声造影剂 0042 声诺维95份、 胸腺五肽1份、 注射用水适量， 按照实施例1方法制备即得。 0043 对比例2： 一种下肢动脉硬化超声造影剂 0044 DSPE-PEG(2000)Amine含量为脂膜2的声诺维95份， 注射用水适量， 按照实施例1 方法制备即得。 0045 效果例1： 本发明靶向超声造影剂对下肢动脉硬化超声诊断的影响 0046 1.1实验物质： 0047 实施例1-10及对比例1-2所述超声造影剂及声诺维。

18、， 均调整为2.0 x108个微气泡/ mL。 0048 1.2实验方法： 0049 10周龄雄性SD大鼠28只， 体重370-380g， 适应性饲养1天后， 随机分为实施例1-10 组、 对比例1-2组及对照1-2组， 大鼠均高脂饮食三周， 高脂饮食的第1、 7、 14天在大鼠左、 右 后肢肌肉内注射维生素D300万u/kg， 于大鼠左、 右后肢股-腘动脉内注射无菌纯净水0.2mL， 高脂饮食第21天于大鼠尾静脉注射超声造影剂， 其中实施例1-10、 对比例1-2组注射对应超 声造影剂0.1mL， 对照1组注射声诺维0.1mL， 对照2组注射声诺维0.2mL， 使用Philip iE33 M。

19、atrix超声诊断仪， 探头频率8MHz， 记录各组大鼠左右后肢的超声造影持续时间及峰值强 度比， 具体实验结果见表1， 其中： 0050 造影持续时间为造影开始增强至增强消失的时间； 说明书 3/4 页 5 CN 111686263 A 5 0051 峰值强度比实验组平均峰值强度/对照1组平均峰值强度。 0052 1.3实验结果 0053 表1实验结果显示了声诺维的造影持续时间约为6min， 持续时间短， 且其中还包含 了造影初期及造影后期造影增强效果较弱的时间， 因此， 单纯施用声诺维无法有效适应临 床超声详细检查的需要， 即使加倍施用， 其造影持续时间也并不能加倍延长， 仅延长了约 24。

20、.04， 峰值强度也仅增加了约46。 因此， 单纯增加声诺维的施用剂量， 不仅会显著增加 检测成本， 降低患者的依从性， 也无法显著改善声诺维造影持续时间短的问题。 0054 表1.本发明靶向超声造影剂对下肢动脉硬化造影持续时间和峰值强度的影响 0055 组别造影持续时间(min)峰值强度比 对照1组5.990.221 对照2组7.430.30*1.46 实施例118.322.09*1.84 实施例214.181.29*1.61 实施例318.551.82*1.68 实施例430.382.26*2.16 实施例524.681.66*1.73 实施例619.621.50*1.65 实施例717.。

21、401.34*1.90 实施例818.011.56*1.68 实施例918.231.64*1.85 实施例1019.351.70*1.92 对比例16.040.561.08 对比例25.790.530.98 0056 与对照1组相比， *， P0.05； *,P0.01； *,P0.001. 0057 本发明通过对超声造影剂脂膜表面的修饰结合纤维蛋白靶向多肽后， 在施用剂量 相同的情况下， 造影持续时间显著延长， 尤其以实施例4组造影剂效果最为明显， 其造影持 续时间相对于声诺维延长了4.07倍， 峰值强度更是增加了2.16倍， 从而可有效保证临床详 细检查的需要。 0058 以上描述了本发明优选实施方式， 然其并非用以限定本发明。 本领域技术人员对 在此公开的实施方案可进行并不偏离本发明范畴和精神的改进和变化。 说明书 4/4 页 6 CN 111686263 A 6 。