多囊卵巢综合征诊断的化合物及应用.pdf

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1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 202010723812.4 (22)申请日 2020.07.24 (71)申请人 中山大学 地址 510000 广东省广州市海珠区新港西 路135号 (72)发明人 谢智勇杨占东叶思敏 (74)专利代理机构 深圳市创富知识产权代理有 限公司 44367 代理人 李思坪 (51)Int.Cl. G01N 30/02(2006.01) G01N 30/86(2006.01) (54)发明名称 多囊卵巢综合征诊断的化合物及应用 (57)摘要 本发明公开了一种用于多囊卵巢综合征诊 断中。

2、的化合物， 所述化合物为雄甾酮葡糖苷酸或 鞘磷脂(d17:1/24:1)中的一种， 或者所述化合为 雄甾酮葡糖苷酸与鞘磷脂(d17:1/24:1)的组合。 本发明的有益效果在于， 通过超高压液相串联飞 行时间质谱进行多囊卵巢综合征尿液的非靶标 代谢组学研究， 获得雄甾酮葡糖苷酸、 鞘磷脂脂 (d17:1/24:1)及他们的组合对多囊卵巢综合征 有较好的诊断价值。 实现了简单快速诊断多囊卵 巢综合征的目的， 同时降低了检测成本。 权利要求书1页 说明书3页 附图3页 CN 111830169 A 2020.10.27 CN 111830169 A 1.一种用于多囊卵巢综合征诊断中的化合物， 其特。

3、征在于， 所述化合物为雄甾酮葡糖 苷酸或鞘磷脂(d17:1/24:1)中的一种， 或者所述化合为雄甾酮葡糖苷酸与鞘磷脂(d17:1/ 24:1)的组合。 2.一种化合物雄甾酮葡糖苷酸和/或化合物鞘磷脂(d17:1/24:1)对多囊卵巢综合征进 行诊断的用途。 3.化合物雄甾酮葡糖苷酸检测试剂或化合物鞘磷脂检测试剂(d17:1/24:1)， 或者化合 物雄甾酮葡糖苷酸检测试剂联合化合物鞘磷脂检测试剂(d17:1/24:1)， 在制备用于诊断多 囊卵巢综合征的试剂中的用途。 4.根据权利要求3所述的用途， 其特征在于， 所述雄甾酮葡糖苷酸检测试剂检测生物样 本中得出曲线下面积、 灵敏度、 特异性和。

4、95置信区间； 所述鞘磷脂检测试剂(d17:1/24:1) 检测生物样本中得出曲线下面积、 灵敏度、 特异性和95置信区间。 5.根据权利要求3所述的用途， 其特征在于， 所述生物样本为尿液。 权利要求书 1/1 页 2 CN 111830169 A 2 多囊卵巢综合征诊断的化合物及应用 技术领域 0001 本发明涉及生物医疗技术领域， 具体涉及一种多囊卵巢综合征诊断的化合物及应 用。 背景技术 0002 多囊卵巢综合征(Polycystic ovary syndrome,PCOS)是一种常见的代谢紊乱和 内分泌失调性疾病。 0003 据流行病学显示， 其在育龄期女性中的患病率为520。 多囊。

5、卵巢综合征的临 床特点主要包括高雄激素血症、 月经失调和多囊性卵巢等。 此外， 多囊卵巢综合征患者还常 常伴随着不孕不育、 肥胖、 胰岛素抵抗、 二型糖尿病或心血管疾病等， 严重影响患者及其家 人的生活， 更为社会带来巨大的经济负担。 0004 目前关于多囊卵巢综合征的分析方法主要有三种： 0005 1、 鹿特丹共识(2003版)， 其要求至少满足以下三个条件中的两个： 高雄激素血症、 多囊性卵巢和月经失调； 0006 2、 美国国立卫生研究院的标准； 0007 3、 国际高雄激素和多囊卵巢综合征协会的标准。 0008 以上标准具有异质性、 侵入性和价格昂贵等缺点， 极大阻碍了多囊卵巢综合征发。

6、 病机制、 精确诊断及个性化治疗的研究。 0009 进一步的说， PCOS涉及的病理机制非常复杂， 而对于PCOS已有体内代谢方面的研 究， 发现P C O S主要与甾体激素代谢和氨基酸代谢有关。 虽然在这几类代谢中都有定性定 量分析， 但是有的研究只关注部分化合物， 还有的研究仅仅是涉及到一些化合物的变化， 并 没有重点关注， 因此， 有必要建立整合生物标志物系统， 从而来探讨发病机制以及指导临床 诊断和治疗。 发明内容 0010 针对现有技术的不足， 本发明旨在提供一种用于多囊卵巢综合征诊断的化合物及 其应用， 希望以此解决现有技术中诊断复杂、 成本高的临床问题。 0011 为了实现上述目。

7、的， 本发明采用如下技术方案： 0012 本发明的第一个目的在于提供一种用于多囊卵巢综合征诊断中的化合物， 所述化 合物为雄甾酮葡糖苷酸或鞘磷脂(d17:1/24:1)中的一种， 或者所述化合为雄甾酮葡糖苷酸 与鞘磷脂(d17:1/24:1)的组合。 0013 本发明的第二个目的在于提供一种化合物雄甾酮葡糖苷酸和/或化合物鞘磷脂 (d17:1/24:1)作多囊卵巢综合征进行诊断的用途。 0014 本发明的第三个目的在于提供一种化合物雄甾酮葡糖苷酸检测试剂或化合物鞘 磷脂检测试剂(d17:1/24:1)， 或者化合物雄甾酮葡糖苷酸检测试剂联合化合物鞘磷脂检测 试剂(d17:1/24:1)， 在制。

8、备用于诊断多囊卵巢综合征的试剂中的用途。 说明书 1/3 页 3 CN 111830169 A 3 0015 优选的， 所述雄甾酮葡糖苷酸检测试剂检测生物样本中得出曲线下面积、 灵敏度、 特异性和95置信区间； 所述鞘磷脂检测试剂(d17:1/24:1)检测生物样本中得出曲线下面 积、 灵敏度、 特异性和95置信区间。 0016 优选的， 所述生物样本为尿液。 0017 本发明的有益效果在于， 通过超高压液相串联飞行时间质谱进行多囊卵巢综合征 尿液的非靶标代谢组学研究， 获得雄甾酮葡糖苷酸、 鞘磷脂脂(d17:1/24:1)及他们的组合 对多囊卵巢综合征有较好的诊断价值。 实现了简单快速诊断多。

9、囊卵巢综合征的目的， 同时 降低了检测成本。 附图说明 0018 图1A-1D为基于SIMCA V14.1软件对数据进行多元统计分析和建立正交偏最小二 乘判别分析模型的示意图； 0019 图2为66种差异代谢物进行代谢物通路富集分析示意图； 0020 图3为受试者工作曲线分析示意图。 具体实施方式 0021 以下将结合附图对本发明作进一步的描述， 需要说明的是， 本实施例以本技术方 案为前提， 给出了详细的实施方式和具体的操作过程， 但本发明的保护范围并不限于本实 施例。 0022 本发明为本发明的第一个目的在于提供一种用于多囊卵巢综合征诊断中的化合 物， 所述化合物为雄甾酮葡糖苷酸或鞘磷脂(。

10、d17:1/24:1)中的一种， 或者所述化合为雄甾 酮葡糖苷酸与鞘磷脂(d17:1/24:1)的组合。 0023 本发明的第二个目的在于提供一种化合物雄甾酮葡糖苷酸和/或化合物鞘磷脂 (d17:1/24:1)作多囊卵巢综合征进行诊断的用途。 0024 本发明的第三个目的在于提供一种化合物雄甾酮葡糖苷酸检测试剂或化合物鞘 磷脂检测试剂(d17:1/24:1)， 或者化合物雄甾酮葡糖苷酸检测试剂联合化合物鞘磷脂检测 试剂(d17:1/24:1)， 在制备用于诊断多囊卵巢综合征的试剂中的用途。 0025 优选的， 所述雄甾酮葡糖苷酸检测试剂检测生物样本中得出曲线下面积、 灵敏度、 特异性和95置信。

11、区间； 所述鞘磷脂检测试剂(d17:1/24:1)检测生物样本中得出曲线下面 积、 灵敏度、 特异性和95置信区间。 0026 优选的， 所述生物样本为尿液。 0027 实施例 0028 本发明以鹿特丹共识(2003版)为筛选纳入对象的标准， 共有51个参与者， 其中包 括26位多囊卵巢综合征患者和25位健康人。 0029 具体的说， 收集参与者早晨第一次小便时尿液中段样本10mL并立即放入-80冰 箱保存至分析。 分析时， 分别取出50 L尿液样本， 并加入200 L冰水涡旋2min至充分混合， 随 后超声2min,最后于4， 13000rpm离心10min， 取上清于进样小瓶中用UPLC-。

12、Q/TOF-MS进行 非靶标代谢组学分析。 用MassLynx V4.1软件收取数据， 并导入Progenesis QI V2.0软件中 对数据进行去除背景噪音、 峰对齐和化合物鉴定。 说明书 2/3 页 4 CN 111830169 A 4 0030 随后基于SIMCA V14.1软件对数据进行多元统计分析和建立正交偏最小二乘判别 分析模型， 建模结果及模型可靠性分析： 负离子模式(R2X0.232,R2Y0.886,Q2 0.389)， 图1A所示和正离子模式(R2X0.184,R2Y0.795,Q20.412)， 如图1B所示,。 0031 为进一步验证模型可靠性， 分别对正负离子模式模。

13、型进行200次置换检验和交叉 验证检验， 结果为图1C所示,负离子模式下模型置换检验:R20.803,Q2-0.347和交叉验 证检验0.00095； 如图1D所示， 正离子模式下模型置换检验： R20.642,Q2-0.265和交 叉验证检验5.19e-005。 0032 以上结果表明， 正交偏最小二乘判别分析模型显示患病组和健康组具有明显的分 离趋势。 正负离子模式下模型参数、 200次置换检验及交叉验证检验参数均表明正负离子模 式下的模型是可靠的。 0033 以多元统计模型(正交偏最小二乘判别分析模型)中离子对两组分离趋势贡献值 1.5以及单变量统计分析中的变化倍数2和差异性0.05为标。

14、准筛选差异代谢物， 并与 公共数据库中信息进行匹配以鉴定代谢物。 结果表明， 负离子模式鉴定出54个差异代谢物 和正离子模式下鉴定出12个差异代谢物。 基于这66种差异代谢物进行代谢物通路富集分 析， 结果如图2所示， 共有18个代谢物参与15条代谢通路， 其中甘油磷脂代谢通路和色氨酸 代谢通路具有显著性(p0.05)。 0034 随后对18个差异代谢物进行受试者工作曲线分析， 结果如图3所示， 雄甾酮葡糖苷 酸的曲线下面积、 灵敏度、 特异性和95置信区间分别0.849， 73.1， 88.0和0.744- 0.955； 鞘磷脂脂(d17:1/24:1)的曲线下面积、 灵敏度、 特异性和95。

15、置信区间分别是 0.809， 100， 64和0.683-0.935； 而它们的联合的曲线下面积、 灵敏度、 特异性和95置 信区间分别是0.898， 80.0， 92.3和0.809-0.988。 0035 根据上述结果得知， 本发明中的化合物雄甾酮葡糖苷酸、 化合物鞘磷脂脂(d17:1/ 24:1)， 或它们的组合对多囊卵巢综合征均具有较高的诊断价值。 0036 对于本领域的技术人员来说， 可以根据以上的技术方案和构思， 给出各种相应的 改变和变形， 而所有的这些改变和变形， 都应该包括在本发明权利要求的保护范围之内。 说明书 3/3 页 5 CN 111830169 A 5 图1 说明书附图 1/3 页 6 CN 111830169 A 6 图2 说明书附图 2/3 页 7 CN 111830169 A 7 图3 说明书附图 3/3 页 8 CN 111830169 A 8 。