与茄子果色的上位性基因Y紧密连锁的InDel分子标记与应用.pdf

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1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 202010824618.5 (22)申请日 2020.08.17 (71)申请人 广东省农业科学院蔬菜研究所 地址 510640 广东省广州市天河区金颖路 66号省农科院蔬菜所 (72)发明人 孙保娟任璇李植良李涛 衡周宫超 (74)专利代理机构 广州嘉权专利商标事务所有 限公司 44205 代理人 胡辉 (51)Int.Cl. C12Q 1/6895(2018.01) C12N 15/11(2006.01) C12N 15/82(2006.01) A01H 5/08(2018。

2、.01) A01H 6/82(2018.01) (54)发明名称 与茄子果色的上位性基因Y紧密连锁的 InDel分子标记与应用 (57)摘要 本发明公开了与茄子果色的上位性基因Y紧 密连锁的InDel分子标记与应用， 所述上位性基 因Y与InDel分子标记均定位于茄子的2号染色体 上， 所述InDel分子标记的序列如SEQ ID NO.1所 示， 在父本中与上位基因Y的遗传距离为0.65cM； 用于检测该InDel分子标记的引物对的序列如 SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示。 该InDel分子 标记及分子标记检测引物可以简便、 快速、 高通 量地应用于茄子果色选育实践中， 同时。

3、为克隆茄 子果色上位性基因Y及其功能研究奠定了良好的 基础。 权利要求书1页 说明书6页 序列表2页 附图1页 CN 111926098 A 2020.11.13 CN 111926098 A 1.与茄子果色的上位性基因Y紧密连锁的InDel分子标记， 其特征在于： 所述InDel分子 标记为具有长度为18bp的插入缺失片段， 其序列如SEQ ID NO.1所示。 2.用于检测如权利要求1所述的InDel分子标记的引物对。 3.根据权利要求2所述的引物对， 其特征在于： 所述引物对的序列为： 72621614F： 5-TTCCTTTTGAAGATCCACTATTT-3， 72621614R： 。

4、5-ATGTTGGTTTGATTGGACCTTTT-3。 4.权利要求1所述的InDel分子标记或权利要求2或3所述的引物对在茄子果色筛选中 的应用。 5.一种茄子果色筛选的方法， 其特征在于： 包括以下步骤： 检测茄子2号染色体上与茄 子果色的上位性基因Y紧密连锁的InDel分子标记的插入缺失情况， 根据所述InDel分子标 记的插入缺失情况确定茄子果色； 其中， InDel分子标记如权利要求1所述。 6.根据权利要求5所述的方法， 其特征在于： 使用PCR法检测茄子2号染色体上所述 InDel分子标记的插入缺失情况。 7.根据权利要求6所述的方法， 其特征在于： 所述PCR法使用的引物对的。

5、序列为： 72621614F： 5-TTCCTTTTGAAGATCCACTATTT-3， 72621614R： 5-ATGTTGGTTTGATTGGACCTTTT-3。 8.根据权利要求6或7所述的方法， 其特征在于： 如果扩增产物中仅有230bp片段， 则样 本的基因型为yy； 如果扩增产物中仅有248bp片段， 则样本的基因型为YY； 如果扩增产物中 同时有230bp和248bp两个片段， 则基因型为Yy。 9.一种培育不同果色茄子的方法， 其特征在于： 包括以下步骤： 在茄子2号染色体上引 入或敲除与茄子果色的上位性基因Y紧密连锁的InDel分子标记； 其中， InDel分子标记如权 利。

6、要求1所述。 10.一种用于茄子果色筛选的试剂盒， 其特征在于： 包含如权利要求2或3所述的引物 对。 权利要求书 1/1 页 2 CN 111926098 A 2 与茄子果色的上位性基因Y紧密连锁的InDel分子标记与应用 技术领域 0001 本发明属于分子生物学领域， 特别涉及分子遗传学领域， 具体涉及与茄子果色的 上位性基因Y紧密连锁的InDel分子标记与应用。 背景技术 0002 茄子的果色直接影响茄子的品相， 是果实重要的商品外观品质。 茄子的果色丰富， 有紫黑、 紫红、 绿色和白色等。 不同地区由于消费习惯不同， 对茄子的果色有着不同的偏好。 因此， 茄子果色是重要的育种目标。 0。

7、003 茄子果色遗传是多基因控制的复杂性状(庞文龙， 刘富中， 陈钰辉等.茄子果色性 状的遗传研究J.园艺学报， 2008， 35(7)： 979-986.)， 研究茄子果色相关基因， 寻找与果皮 颜色相关基因连锁的标记， 不仅有利于研究性状本身的遗传机理， 也可以通过分子标记来 辅助育种， 提高选择效率。 0004 InDel(Insertion-deletion， 插入缺失序列)分子标记是指同一物种个体之间或 是近缘物种发生碱基序列缺失或插入。 在基因组中InDel的密度仅次于SNPs， 其数目多且分 布广泛。 由于InDel分子标记本身的丰富性， 随着高通量测序的发展使其适用于全基因组，。

8、 具有以下优点： 其多态性分布在种间和种内， 具有通用性； 其检测方法便捷且技术要求低 等， 现在普遍被应用于分子辅助遗传育种、 群体遗传分析和遗传图谱构建等方面。 在InDel 分子标记技术通常基于聚合酶链式反应(PCR)扩增技术， 本质上属于长度多态性标记。 InDel分子标记技术具有共显性、 操作简便和稳定性好等特点， 是一种较理想的分子标记技 术。 0005 目前有关茄子果色上位性基因位点的染色体定位及其相关分子标记的研究尚不 完善。 因此， 进一步开展茄子果色上位性基因及其分子标记研究， 可以为茄子果色上位性基 因分子标记辅助选择育种及基因精细定位克隆奠定基础。 发明内容 0006 。

9、本发明的目的在于提供一种与茄子果色上位基因Y紧密连锁的InDel分子标记与 应用。 0007 本发明所采用的技术方案是： 0008 在本发明的第一方面， 提供了与茄子果色的上位性基因Y紧密连锁的InDel分子标 记， 所述InDel分子标记为具有长度为18bp的插入缺失片段， 所述InDel分子标记的序列如 SEQ ID NO.1所示。 0009 在本发明中， 所述InDel分子标记为插入缺失片段， 在母本(基因型为YY)中的核苷 酸序列比父本(基因型为yy)多了18bp的碱基插入， 序列为： 5-TACTTAAATAAGGAAAGA-3 (SEQ ID NO.1)。 0010 在本发明中， 。

10、所述Y基因定位于茄子的2号染色体上， 关联区域为86.4-88.2cM之 间。 基于重测序结果， 在关联区域附近得到与茄子果色上位性基因Y紧密连锁的InDel分子 说明书 1/6 页 3 CN 111926098 A 3 标记， InDel分子标记与上位基因Y的遗传距离为0.65cM。 0011 在本发明的第二方面， 提供了用于检测上述与茄子果色的上位性基因Y紧密连锁 的InDel分子标记的引物对。 0012 根据发明的一些实施方式， 所述引物对的序列为： 0013 72621614 F： 5-TTCCTTTTGAAGATCCACTATTT-3(SEQ ID NO.2)， 0014 72621。

11、614 R： 5-ATGTTGGTTTGATTGGACCTTTT-3(SEQ ID NO.3)。 0015 在本发明的第三方面， 提供了上述与茄子果色上位基因Y紧密连锁的InDel分子标 记与用于检测所述InDel分子标记的引物对在茄子果色筛选中的应用。 0016 在本发明中， 通过将InDel分子标记应用于茄子果色筛选中以进行辅助育种， 在下 述技术方案中， 进一步提供了在辅助育种和果色筛选中的应用： 0017 一种茄子果色筛选的方法， 包括以下步骤： 检测茄子2号染色体上InDel分子标记 的插入缺失情况， 根据所述InDel分子标记的插入缺失情况确定茄子果色； 其中， InDel分子 标。

12、记的序列如SEQ ID NO.1所示。 0018 根据本发明的一些实施方式， 使用PCR法检测茄子2号染色体上所述InDel分子标 记的插入缺失情况； 其中， 所述PCR法使用上述用于检测所述InDel分子标记的引物对。 0019 进一步地， 所述引物对的序列为： 0020 72621614 F： 5-TTCCTTTTGAAGATCCACTATTT-3(SEQ ID NO.2)， 0021 72621614 R： 5-ATGTTGGTTTGATTGGACCTTTT-3(SEQ ID NO.3)。 0022 根据本发明的一些实施方式， 如果扩增产物中仅有230bp片段， 则所检测植株样本 的基因。

13、型为yy； 如果扩增产物中仅有248bp片段， 则样本的基因型为YY； 同时有230bp和 248bp两个片段的则基因型为Yy。 0023 进一步地， 所述扩增产物为如SEQ ID NO.4和SEQ ID NO.5所示的序列。 0024 进一步地， 母本(基因型YY)扩增序列如SEQ ID NO.4所示， 长度为248bp； 父本(基 因型yy)扩增序列如SEQ ID NO.5所示， 扩增长度为230bp； 二者杂交F1代(基因型Yy)扩增为 248bp和230bp两条带。 SEQ ID NO.4序列比SEQ ID NO.5序列多1个18bp的插入片段， 所述插 入片段位于SEQ ID NO.。

14、4的第121-138bp处。 0025 进一步地， 植株基因型为yy时， 果色为绿色； 植株基因型为YY或Yy时， 果色还取决 于另一个上位基因位点P的基因型： 1)当P的基因型为pp时， 果色为绿色， 2)当P的基因型为 Pp或PP时， 果色为紫色。 0026 一种培育不同果色茄子的方法， 在茄子2号染色体上引入或敲除与茄子果色的上 位性基因Y紧密连锁的InDel分子标记； 其中， 所述InDel分子标记的序列如SEQ ID NO.1所 示。 0027 一种用于茄子果色筛选的试剂盒， 所述试剂盒包含用于检测所述InDel分子标记 的引物对。 0028 进一步地， 所述引物对的序列为： 002。

15、9 72621614 F： 5-TTCCTTTTGAAGATCCACTATTT-3(SEQ ID NO.2)， 0030 72621614 R： 5-ATGTTGGTTTGATTGGACCTTTT-3(SEQ ID NO.3)。 0031 上述用于茄子果色筛选的试剂或试剂盒的使用方法， 包括以下步骤： 0032 (1)利用所述引物对PCR扩增待检植株DNA； 说明书 2/6 页 4 CN 111926098 A 4 0033 (2)如果扩增产物中仅有230bp片段， 则所检测植株样本的基因型为yy； 如果扩增 产物中仅有248bp片段， 则样本的基因型为YY； 如果扩增产物中同时有230bp和。

16、248bp两个片 段， 则基因型为Yy。 0034 进一步地， 植株基因型为yy时， 果色为绿色； 植株基因型为YY或Yy时， 果色还取决 于另一个上位基因位点P的基因型： 1)当P的基因型为pp时， 果色为绿色， 2)当P的基因型为 Pp或PP时， 果色为紫色。 0035 本发明的有益效果是： 0036 本发明将控制茄子果色的1个上位性基因Y定位于茄子的2号染色体上的较小关联 区域内。 提供了与茄子果色上位性基因Y紧密连锁的InDel分子标记， 该InDel分子标记距离 目标基因Y的遗传距离为0.65cM， 可直接用于茄子果色上位性基因Y分子标记辅助育种体系 的建立； 本发明的分子标记及分子。

17、标记扩增引物可以简便、 快速和高通量地应用于茄子果 色选育实践中， 同时为克隆茄子果色上位性基因Y及其功能研究奠定了良好的基础。 0037 本发明的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出， 部分将从下面的描述中变 得明显， 或通过本发明的实践了解到。 附图说明 0038 图1为本发明实施例1中为实验材料父本、 母本、 F1代花及果实和部分F2代的果实； 其中， 母本材料果色为绿色， 而且在整个生育期， 下胚轴、 叶脉、 花和萼片都观察不到花青素 的合成； 父本果色为绿色， 在整个生育期， 下胚轴、 叶脉、 花和萼片也都观察不到花青素的合 成， F1代材料下胚轴、 叶脉、 花色和果色都呈现紫红色。

18、； 0039 图2为本发明实施例2中InDel72621614标记在F2父本、 母本、 F1和F2不同单株中的 PCR扩增结果； M为DNA marker； 母本扩增长度为248bp(基因型YY)、 父本扩增长度为230bp (基因型yy)， 二者杂交F1代扩增带型为248bp和230bp两条带(基因型Yy)； 1-24为F2代分离 群体单株。 具体实施方式 0040 为详细说明本发明的技术内容、 所实现目的及效果， 以下结合实施方式并配合附 图予以说明。 0041 在已有参考文献(Tigchelaar E C,Janick J,Erichson H T.The genetics of ant。

19、hocyanin coloration in eggplant(Solanum melongena L.).Genetics,1968,60: 475-491)中把控制茄子果色的3个上位性基因分别定义为D、 P和Y基因， 本研究根据亲本材 料表型特征及遗传规律沿用该基因命名。 0042 以下实施例中所采用的分子生物学实验技术包括DNA提取、 PCR扩增、 PAGE凝胶电 泳等实验， 如无特殊说明， 通常按照常规方法操作， 具体可参见 分子克隆实验指南 (第三 版)(Sambrook J,Russell DW， Janssen K,Argentine J.黄培堂等译， 2002， 北京： 科学出。

20、版 社)， 或按照制造厂商所建议的条件。 0043 实施例1： 与茄子果色上位性基因Y紧密连锁的InDel分子标记 0044 本发明实施例中基因定位及InDel分子标记确定的方法为： 采用SLAF-seq技术和 HighMap软件对茄子F2代遗传分离群体(2个亲本重测序和154个子代SLAF简化基因组测序) 说明书 3/6 页 5 CN 111926098 A 5 开发高密度分子标记， 进行遗传图谱构建和相关性状的QTL定位分析， 将控制茄子果皮花青 素合成上位性遗传的2个基因(Y和P)分别定位到相应的两个较小的区域。 结合基因组重测 序结果， 在茄子第2号染色体上位性基因Y关联区域内开发得到。

21、InDel分子标记。 具体过程如 下： 0045 一、 遗传群体的构建及遗传分析 0046 1、 供试材料 0047 植物材料： 以广东省农业科学院蔬菜研究所经多代严格套袋自交选育的2份绿果 色的茄子纯化自交系(命名为茄子09008-7-3-2)为父本(基因型为PPyy)和母本(基因型为 pwpwYY)， 配制杂交组合F1， F1单株自交得到F2。 图1为本实施例中实验材料父本、 母本、 F1代和 部分F2代的花及果实(图中E4453为实验编号)； 母本和父本材料果色均为绿色， 而且在整个 生育期， 下胚轴、 叶脉、 花和萼片都观察不到花青素的合成； 果F1代材料下胚轴、 叶脉、 花色 和果色。

22、都呈现紫红色； F2分离世代紫红和绿果色植株的分离比经卡方检验符合9： 7。 0048 2、 遗传分析 0049 在F2代分离群体果色分为紫红果色(有花青素)和绿果色(无花青素)。 154个单株 组成的F2群体中， 紫红果色单株和绿果色单株分别为92株和62株， 卡方检验(X2检验)是否符 合9： 7比率， 结果X20.76(P0.38)， 小于X20.053.84(df1)， 所以紫红果色单株总数和 绿果色单株总数符合9： 7比率。 2个纯合的绿果色茄子杂交后， F1代果色为紫红色， F2代紫红 果色和绿果色植株分离比为9： 7， 说明其果皮花青素合成受到上位性的2个基因位点控制 的， 2个。

23、绿果色茄子是由于控制花青素生物合成过程的2个独立而又互补的基因位点(Y基因 和P基因)分别失活引起的。 因此， 明确了本研究中所用的茄子材料果色遗传是受2个相互作 用的上位性基因(P和Y)控制的。 0050 二、 茄子果色上位基因定位 0051 1、 亲本及F2紫红果色池和绿果色池DNA制备 0052 2个绿茄父、 母本各取10株苗期叶片， 分别提取叶片DNA， 每株取等量DNA混合， 构成 父本池和母本池； F2分离群体， 苗期单株取叶片， 分别提取DNA， 坐果期进行果色调查。 0053 2、 SLAF-seq技术构建遗传图谱及茄子果色上位性基因定位 0054 本研究前期委托北京百迈客生物。

24、科技有限公司利用其自主研发的SLAF-seq技术 进行简化基因组测序(Sun et al.， 2013)。 通过与参考基因组的定位将SNP分为12个连锁 群， 通过两两标记之间计算MLOD值， 过滤掉与其他SNP的MLOD值均低于3的标记， 共得到2017 个SNP位点， 定位为标记(Marker)。 采用High Map软件分析获得连锁群内Marker的线性排 列， 并估算相邻Marker间的遗传距离， 最终得到总图距为1176.5cM的遗传图谱。 采用 lciMapping定位软件进行QTL定位分析， 阈值为2.5， 通过定位分析结果得到关联区域相关 信息如下表1所示， 可知控制茄子果色的。

25、1个上位性基因Y定位于茄子的2号染色体上。 0055 表1.关联区域的基本信息 0056 说明书 4/6 页 6 CN 111926098 A 6 0057 3、 分子标记InDel72621614开发 0058 Y基因定位于茄子的2号染色体上86.4-88.2cM之间， 基于父、 母本基因组重测序结 果， 在关联区域86.4-88.2cM附近寻找InDel分子标记， 在茄子2号染色体的第72621614位点 找到了一个InDel标记， 命名为InDel72621614。 其在母本(基因型为pwpwYY)中比父本(基因 型为PPyy)中多了1个18个碱基的插入， 插入片段的序列为： 5-TAC。

26、TTAAATAAGGAAAGA-3 (SEQ ID NO.1)。 0059 根据F2群体紫红果色单株(基因型有PPYY、 PpwYY、 PPYy和PpwYy)及F2群体绿果色单 株(基因型有pwpwYY、 pwpwYy、 PPyy和Ppwyy)基因型分布情况计算InDel72621614分子标记交 换律， 确定该InDel标记距离目标基因的遗传距离为0.65cM。 0060 根据上述InDel分子标记InDel72621614及其位置设计了一组特异性引物对， 该引 物对的序列如SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示， 用于检测该InDel分子标记。 其引物组序列 为： 0061 S。

27、EQ ID NO.2： 72621614F： 5-TTCCTTTTGAAGATCCACTATTT-3， 0062 SEQ ID NO.3： 72621614R： 5-ATGTTGGTTTGATTGGACCTTTT-3。 0063 使用上述引物对可在母本(基因型YY)中扩增出长度为248bp的片段， 母本中核苷 酸序列如SEQ ID NO.4所示； 上述引物可在父本(基因型yy)中扩增出长度为230bp的片段， 在父本中核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示。 0064 SEQ ID NO.4： 0065 0066 SEQ ID NO.5： 0067 TTCCTTTTGAAGATCCACTATT。

28、TTATAAACATTAAATGAATATGGTTCTTATTTAAAGCCTTCCCTTT TTGCTAACCATAAAATGGAATCAAACAAAATCTTCTCATCAACATAGATACTTAATATATGACAATTTTTTCTCAA TATGCCTAATATTTGGTTTGTTAAACCAATTATAAGGGAGTAACAAAAAAACAAATTTAACTAAAAAGGTCCAATC AAACCAACAT。 0068 实施例2： InDel分子标记的应用 0069 1、 F2单株DNA制备 0070 以广东省农业科学院蔬菜研究所经多代严格套袋自交选育的2份绿果色的茄子纯 化自交系。

29、为父本(基因型为PPyy)和母本(基因型为pwpwYY)， 配制杂交组合F1， F1单株自交得 到F2， F2分离群体共154株。 父本、 母本、 F2单株苗期取叶片， 分别提取DNA， 坐果期进行果色调 查。 0071 2、 分子标记InDel72621614在父本、 母本、 F2分离群体单株中PCR扩增检测 0072 扩增体系为20L： ddH2O 5L， PCR mix10L(广州展晨生物科技有限公司)， 72621614F引物(10 mol/L)1.5 L， 72621614R引物(10 mol/L)1.5 L， DNA模板(500ng/ L)2 L。 PCR反应程序为： 94预变性2。

30、min； 94变性30s， 56退火30s， 72延伸30s， 循环35次； 说明书 5/6 页 7 CN 111926098 A 7 72再延伸5min。 反应结束后， 分别取1 L产物在8变性聚丙烯酰氨凝胶电泳检测。 0073 3、 PAGE胶电泳及显色 0074 PCR产物检测利用8变性聚丙烯酰氨凝胶电泳检测， 上样量为1 L， 采用160V恒电 压电泳2h。 PAGE胶染色采用快速银染法， 具体为： (1)从玻璃板上拆下胶置于蒸馏水中漂洗， 并重复一次； (2)0.1AgNO3溶液中染色10min； (3)蒸馏水漂洗2次； (4)1x显色液200ml+800 L甲醛中显色10分钟； (。

31、5)自来水漂洗2次后读带。 0075 4、 检测结果 0076 检测结果如图2所示。 图2中， M为DNA marker； 特异性引物对对母本的扩增长度为 248bp的片段(基因型YY)、 父本的扩增长度为230bp的片段(基因型yy)； 二者杂交F1代单株 的扩增带型为248bp和230bp(基因型Yy)； 1-24为F2代分离群体单株。 0077 1、 9、 14、 18、 19、 21和22为F2绿果色单株， 基因型为yy； F2单株4、 7、 8、 16和23基因型 为YY， 果色取决于另一基因位点P(基因型PPYY， PpwYY为紫红果色， pwpwYY为绿果色)； F2单株 2、 。

32、3、 5、 6、 10、 11、 12、 13、 15、 17、 20和24基因型Yy， 果色取决于另一基因位点P(基因型PPYy， PpwYy为紫红果色， pwpwYy为绿果色)。 0078 InDel标记检测结果符合F2分离世代的果色分离与基因型的对应关系， 说明本方 法准确性高， 可应用于茄子果色上位性基因Y分子标记的果色鉴定和辅助育种。 0079 综合以上， 本发明公开了1个茄子果色上位基因Y的定位结果， Y基因定位于茄子的 2号染色体上86.4-88.2cM之间。 基于父、 母本重测序结果， 在2号染色体关联区域附近得到 与茄子果色上位性基因Y紧密连锁的InDel分子标记， 命名为I。

33、nDel72621614， 该标记与上位 性基因Y遗传距离为0.65cM。 所述分子标记InDel72621614在母本中核苷酸序列比父本多了 1个18碱基的InDel。 同时， 本发明提供了对茄子果色上位基因Y的定位结果， 为茄子果色上 位基因的精细定位和克隆奠定了基础； InDel72621614分子标记及分子标记扩增引物可以 简便、 快速、 高通量地应用于茄子果色选育实践中， 加速茄子果色性状改良进程。 0080 以上所述仅为本发明的实施例， 并非因此限制本发明的专利范围， 凡是利用本发 明说明书及附图内容所作的等同变换， 或直接或间接运用在相关的技术领域， 均同理包括 在本发明的专利保。

34、护范围内。 说明书 6/6 页 8 CN 111926098 A 8 序列表 广东省农业科学院蔬菜研究所 与茄子果色的上位性基因Y紧密连锁的InDel分子标记与应用 5 SIPOSequenceListing 1.0 1 18 DNA 茄子(Solanum melongena) 1 tacttaaata aggaaaga 18 2 23 DNA 人工序列(Artificial Sequence) 2 ttccttttga agatccacta ttt 23 3 23 DNA 人工序列(Artificial Sequence) 3 atgttggttt gattggacct ttt 23 4 2。

35、48 DNA 茄子(Solanum melongena) 4 ttccttttga agatccacta ttttataaac attaaatgaa tatggttctt atttaaagcc 60 ttcccttttt gctaaccata aaatggaatc aaacaaaatc ttctcatcaa catagatact 120 tacttaaata aggaaagata atatatgaca attttttctc aatatgccta atatttggtt 180 tgttaaacca attataaggg agtaacaaaa aaacaaattt aactaaaaag gtcca。

36、atcaa 240 accaacat 248 5 230 DNA 茄子(Solanum melongena) 5 序列表 1/2 页 9 CN 111926098 A 9 ttccttttga agatccacta ttttataaac attaaatgaa tatggttctt atttaaagcc 60 ttcccttttt gctaaccata aaatggaatc aaacaaaatc ttctcatcaa catagatact 120 taatatatga caattttttc tcaatatgcc taatatttgg tttgttaaac caattataag 180 ggagtaacaa aaaaacaaat ttaactaaaa aggtccaatc aaaccaacat 230 序列表 2/2 页 10 CN 111926098 A 10 图1 图2 说明书附图 1/1 页 11 CN 111926098 A 11 。