山萝花的制备Α葡萄糖苷酶抑制剂用途.pdf

本发明涉中药领域，特别涉及一种山萝花的制备α-葡萄糖苷酶抑制剂用途。该山萝花α-葡萄糖苷酶抑制剂对α-葡萄糖苷酶具有较强的抑制能力，可进一步开发为用于治疗及辅助治疗Ⅱ型糖尿病的食品、保健食品或药品。

1.  山萝花在制备α-葡萄糖苷酶抑制剂中的用途。

山萝花的制备α-葡萄糖苷酶抑制剂用途
技术领域
本发明涉及中药领域，特别涉及α-葡萄糖苷酶抑制剂。
背景技术
由于现代生活节奏的加快和生活水平的不断提高，导致各种疾病的发病率不断上升，如肥胖，心脏疾病和糖尿病等。据调查显示，全球到2030年在中低水平收入的国家将有4.38亿人次患上糖尿病，其中绝大多数属于Ⅱ型糖尿病。糖尿病是因代谢紊乱引起的，其特征是餐后血糖的不正常升高。因此控制餐后高血糖，在预防或治疗糖尿病过程中就显得特别重要。
α-葡萄糖苷酶位于肠绒毛膜上，能将碳水化合物降解，从而使餐后血糖升高，而α-葡萄糖苷酶抑制剂能够竞争性地减缓碳水化合物的降解和被吸收。目前已有α-葡萄糖苷酶抑制剂如阿卡波糖和伏格列多糖作为口服降糖药被应用于糖尿病的临床治疗，其能有效的控制餐后血糖水平，但这类α-葡萄糖苷酶抑制剂在市售方面毕竟只是少数，而且其大都含有糖基，合成步骤也及其繁琐，此外，在临床方面其具有一定的副作用如会引起胃肠胀气及腹泻等。因此，越来越多的学者开始青睐于从食物或药用植物中寻找天然产物代替人工合成的α-葡萄糖苷酶抑制，以保证其安全行和有效性。
我们在对长白山地区的近百种植物活性筛选过程中，发现了几种具有较强α-葡萄糖苷酶抑制活性的植物，其中就包括山萝花。
玄参科山萝花Melampyrum roseum Maxim.，以全草、根入药。分布于东北、华东及河北、山西、陕西、甘肃、河南、湖北、湖南等地。生于山坡、疏林、灌丛和高草丛中。《新华本草纲要》中记载其全草有清热解毒的功能，用于痈肿疮毒。根：泡茶，有清凉的功效。目前关于山萝花的化学成分、生物活性、产品开发的文献报道较少，关于山萝花的α-葡萄糖苷酶抑制活性的研究更是空白。
发明内容
基于以上原因，本发明的目的之一是提供山萝花或其提取物的新应用，该应用解决了α-葡萄糖苷酶的抑制问题。
为了实现上述目的，本发明的技术方案为：
山萝花或山萝花提取物用于抑制α-葡萄糖苷酶的应用。
本发明的目的之二是提供山萝花或山萝花提取物的另一种应用，该应用为治疗Ⅱ型糖尿病提供一种新的食品、保健食品、药品。
为了实现上述目的，本发明的技术方案为：
山萝花或山萝花提取物用于制备治疗Ⅱ型糖尿病的食品、保健食品、药品的应用。
所述的山萝花或山萝花提取物用于制备α-葡萄糖苷酶抑制剂治疗Ⅱ型糖尿病的食品、保健食品、药品的应用，可以通过下述方法制备：
1. 取山萝花，干燥，粉碎，制成片剂、胶囊剂、散剂、丸剂等药学上可以接受的剂型。
2. 取山萝花，以水或乙醇等溶剂提取，浓缩至干，得到山萝花提取物，以该提取物为原料，附加药学可以接受的辅料，制成片剂、胶囊剂、散剂、丸剂、软胶囊等药学上可以接受的剂型。
3. 取山萝花，以水、乙醇等提取，浓缩至干，得到山萝花提取物，以该提取物为原料制成液体饮料、固体饮料等食品、保健食品可以接受的形式。
具体实施方式
为了更详细的说明本发明，给出下述制备实例。但本发明的范围并不局限于此。
实施例1：山萝花抑制α-葡萄糖苷酶的应用
1. 山萝花α-葡萄糖苷酶抑制剂的制备
收取新鲜山萝花，阴干，以75%乙醇超声提取三次，每次30分钟，过滤，合并滤液，蒸干，粉碎，制成硬胶囊制剂。
2. 山萝花α-葡萄糖苷酶抑制活性研究
2.1 材料和方法
2.1.1 实验材料
原料：山萝花α-葡萄糖苷酶抑制剂。
试剂：阿卡波糖；α-葡萄糖苷酶（≧5000u/g）；DMSO(二甲基亚砜)、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾等试剂均为分析纯。
仪器：电子天平，旋涡混合仪，数控超声波清洗器，自动酶标仪。
2.1.2 实验方法
2.1.2.1供试品溶液的制备
取山萝花α-葡萄糖苷酶抑制剂内容物4 mg，精密称定，加200 μL DMSO(体积分数为20 %)，使其溶解，其浓度为20 mg·mL^-1，备用。
2.1.2.2 α-葡萄糖苷酶抑制活性测定
蔗糖在α-葡萄糖苷酶的作用下分解为葡萄糖，通过葡萄糖氧化酶法测定反应体系中葡萄糖的生成量，计算供试品对α-葡萄糖苷酶活性的抑制作用。取供试品溶液，稀释成系列浓度。试验时，分别取系列浓度的供试品溶液10 μL，加入0.5 u·mL^-1 α-葡萄糖苷酶溶液10 μL，再加入25 mmol·L^-1 蔗糖10 μL，在37 ℃温育15 分钟，该反应于96 孔培养板上完成，采用葡萄糖氧化酶法，用酶标仪，在490 nm 波长下测定吸光度值（A），以葡萄糖的生成量作为指标计算抑制率；选取阿卡波糖作为阳性对照药，同时设定空白对照，阴性对照及样品对照。酶活性抑制率（%）计算如下：
酶活性抑制率% = [A_阴性- (A_样品 - A_样品对照)]/ (A_阴性- A_空白)×100%
式中：A_阴性为不加入样品溶液反应体系的吸光度；A_样品为加入样品溶液反应体系的吸光度；A_样品对照为加入样品溶液但不加入α-葡萄糖苷酶反应体系的吸光度；A_空白为缓冲溶液的吸光度。
样品的α-葡萄糖苷酶抑制活性用IC₅₀表示，IC₅₀ 为对α-葡萄糖苷酶抑制率达到50%时供试品溶液的浓度。
2.1.2.3 数据统计分析
运用ORIGIN软件计算IC₅₀值，IC₅₀值越小，表示其对α-葡萄糖苷酶的抑制能力越强。
2.2 结果与分析
通过以上实验，测定的山萝花α-葡萄糖苷酶抑制剂内容物对α-葡萄糖苷酶抑制率的IC₅₀为0.17 mg·mL^-1，而相同条件下阿卡波糖对α-葡萄糖苷酶抑制率的IC₅₀仅为1.35 mg·mL^-1，山萝花α-葡萄糖苷酶抑制剂对α-葡萄糖苷酶的抑制能力是阿卡波糖的近8倍。
2.3 结论
山萝花α-葡萄糖苷酶抑制剂对α-葡萄糖苷酶具有较强的抑制能力，作为天然植物，以山萝花为原料可进一步开发用于治疗Ⅱ型糖尿病的食品、保健食品或药品，其对α-葡萄糖苷酶的抑制能力远超阿卡波糖。
实施例2：山萝花软胶囊的制备
收取新鲜山萝花，阴干，以乙醇超声提取三次，每次30分钟，过滤，合并滤液，蒸干，以大豆油作为溶解超声混悬复溶，制成软胶囊。
实施例3：山萝花袋泡茶的制备
收取新鲜山萝花，阴干，粉碎、过40目筛，24目筛筛选，紫外线灯杀菌，机械装袋，包装，喷印日期，塑封，入库。