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1、10申请公布号CN104145711A43申请公布日20141119CN104145711A21申请号201410156608322申请日20140418A01G1/0420060171申请人湖南省春华生物科技有限公司地址410000湖南省长沙市高新技术产业开发区双塘路107号72发明人胡汝晓王春晖彭运祥黄晓辉李新菊姜性坚74专利代理机构湘潭市汇智专利事务所普通合伙43108代理人颜昌伟54发明名称一种灰树花三级菌种制作方法57摘要本发明一种灰树花三级菌种制作方法。包括一、二级菌种制作，三级菌种制作，菌包制作，接种培菌，催蕾，育菇，所述三级菌种制作包括培养基配方、培养基制作、装袋、灭菌、接种、。
2、培菌、养菌，其特征在于所述培养基配方分为木条培养基配方和麦粒培养基配方，所述培养基制作包括木条培养基制作和麦粒培养基制作。与木屑菌种相比，本发明的菌种接种效率高58，菌种最大生长距离短50100，培菌效率高2060，且菌包上下菌龄较为一致，利于营养集中释放，首批菇产量可增加1530；与液体菌种相比，本发明的菌种适用于我国现有菌种生产、检测及接种设备及技术人员，且其可降低培菌感染率25。51INTCL权利要求书2页说明书13页19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书2页说明书13页10申请公布号CN104145711ACN104145711A1/2页21一种灰树花三级菌种制作方。
3、法，包括一、二级菌种制作，三级菌种制作，菌包制作，接种培菌，催蕾，育菇，所述三级菌种制作包括培养基配方、培养基制作、装袋、灭菌、接种、培菌、养菌，其特征在于所述培养基配方分为木条培养基配方和麦粒培养基配方，所述木条培养基配方为按干重计，栗木木条8088、麸皮1018、熟石膏粉053；所述麦粒培养基配方为按干重计，麦粒8088、细杂木屑1018、熟石膏粉053；所述培养基制作包括木条培养基制作和麦粒培养基制作，所述木条培养基制作为将栗木木条用1石灰水浸泡预湿120130H，捞出木条，并用清水洗净不溶性石灰，沥干至无水流出，再先将麸皮与熟石膏粉干拌均匀，撒到湿木条上，混匀待用；所述麦粒培养基制作为。
4、将麦粒用1石灰水浸泡预湿7280H,捞出麦粒，并用清水洗净不溶性石灰，沥干至无水流出；再将细杂木屑与熟石膏粉干拌均匀，撒到湿麦粒上，再拌均匀，待用。2根据权利要求1所述的灰树花三级菌种制作方法，其特征在于所述一级菌种制作包括培养基配制，装试管，121灭菌30MIN，冷却，无菌接种，24和相对湿度65条件下培养至菌丝满管；所述培养基采用加富PDA培养基，配方为麦粒50G土豆200G混合煮汁、葡萄糖20G、琼脂20G、PH值自然、制作培养基1000ML；所述二级菌种制作包括培养基配制，装瓶，125灭菌90MIN，冷却，无菌接种，24和相对湿度65条件下培养至菌丝满瓶；所述培养基采用木屑培养基，配方。
5、为杂木屑75，麸皮15、玉米粉8、熟石膏粉1、石灰1，含水量60。3根据权利要求1所述的灰树花三级菌种制作方法，其特征在于所述的装袋操作为选用规格为1316CM2735CM00040007CM的袋子，先将麦粒培养基在袋底垫053CM厚的一层，再将木条培养基整理成4070根的小捆，并用橡皮筋固定，然后竖直放到袋内的一边，接着再将麦粒培养基填充到另一边，麦粒培养基高出木条培养基052CM并覆盖木条培养基，整平麦粒培养基，然后用套环及盖封袋。4根据权利要求1所述的灰树花三级菌种制作方法，其特征在于所述的灭菌条件为高压149105帕，126灭菌354H，放入冷却室冷却至常温。5根据权利要求1所述的灰树。
6、花三级菌种制作方法，其特征在于所述的接种操作为在接种箱内按无菌操作接入二级菌种。6根据权利要求1所述的灰树花三级菌种制作方法，其特征在于所述的培菌方法为温度2224，湿度6070，空气清新，无光培养2535天，至菌丝长满菌种袋，期间每隔510D检杂一次；所述的养菌方法为温度2022，湿度6070，空气清新，无光养菌2025天，得到灰树花三级菌种。7根据权利要求2所述的灰树花三级菌种制作方法，其特征在于所述的菌包制作方法为按配方配制灰树花培养料，装包，包中央打直径1525CM,深度大于木条长度053CM的接种孔，用套环封口，灭菌。8根据权利要求1所述的灰树花三级菌种制作方法，其特征在于所述的接种。
7、培菌方法为将灭菌完毕的菌包冷却至室温，按无菌操作接入灰树花三级菌种，木条菌种插入接种孔，麦粒菌种盖面，放入培菌室培养2530天至菌丝长满菌包。权利要求书CN104145711A2/2页39根据权利要求1所述的灰树花三级菌种制作方法，其特征在于所述的催蕾包括瓦片制作和原基分化，所述的瓦片制作方法为瓦片展平为半椭圆形，椭圆形长径为菌袋直径的3/41倍，短径为菌袋直径的3/81/2，短径为长径的1/32/3，将椭圆弯为瓦片形，瓦片圆孤直径为菌袋直径的1/24/5，即将瓦片覆于菌袋上，瓦片与菌袋间因为直径差会形成一空间，菌丝长满后经后熟培养510天，将菌包移入出菇房，在菌袋侧壁菌丝浓密处开直径225C。
8、M的圆孔作为出菇孔，将孔内培养料剐去23MM，将菌包平放于地面或架子上，在孔上盖瓦，温度控制在1719，湿度控制在7580，CO2浓度控制在1500MG/KG以下，并给予200800LUX的光照；所述的原基分化方法为覆瓦催蕾810天，出菇孔长出脑状原基，去掉覆瓦，温度控制在1820，湿度控制在8590，CO2浓度控制在1000MG/KG以下，并给予4001000LUX的光照。10根据权利要求1所述的灰树花三级菌种制作方法，其特征在于所述的育菇方法为覆瓦催蕾1516天，温度控制在1624，湿度控制在85左右，CO2浓度控制在1500MG/KG以下，并给予4001000LUX的光照，直至采收。权利。
9、要求书CN104145711A1/13页4一种灰树花三级菌种制作方法技术领域0001本发明属于灰树花菌种技术领域，特别涉及一种灰树花三级菌种制作方法。背景技术0002灰树花GRIFOLAFRONDOSADICKSEXFRSFGRAY，又名舞茸，属担子菌亚门、层菌纲、非褶菌目、多孔菌科、树花菌属。是WHO和FAO组织向发展中国家推荐的名贵经济品种，是一种膳、药兼用的高档珍稀食用菌。0003我国从20世纪80年代初开始对灰树花进行人工驯化栽培，目前栽培规模较大省份有河北和浙江，其它省份如辽宁、山东、山西、陕西、安微、江苏、湖北、福建等也有灰树花的人工栽培，但规模都不大。灰树花的工厂化生产技术研究我。
10、国起步较晚，目前仍处于初始阶段。0004灰树花与大多数食用菌相比，其菌丝萌发定植较缓慢、前期较稀疏、抗杂能力较弱，同等情况下，培菌期较长。0005在灰树花生产中，尤其工厂化生产中，高纯度、易于检测菌种质量、可快速定植、盖面、利于防止感杂、缩短菌包培菌期的三级菌种，是生产成功的关键技术之一。本发明在菌种质量检测难度、盖面速度、防止感杂及缩短菌包培菌期上与现有三级菌种相比，优势显著，且可在现有工厂化接种设备上实现高效率接种作业，适合工厂化生产。0006现有的灰树花木屑菌种配方为杂木屑73、麦麸25、糖1、石膏粉1、含水量60,PH7。高压149105帕，126灭菌152H。按无菌要求接入二级种，培。
11、养至菌丝满瓶，养菌2025天，即得到灰树花木屑菌种。其缺点在于菌种最大生长距离较大，培菌期较长，不适合工厂化生产高效培菌要求；菌种打碎较困难，影响接种速度。0007中国专利CN2009102019868记载了二级液体菌种制作方法培养液中装入发酵罐中，培养液与发酵罐的通气设备一起来菌，灭菌后冷却至25以下，接入一级液体菌种，培养1215D，即得到灰树花液体菌种。其缺点在于菌种生产技术要求高，需要先进的培养设备及专业的制种人员，难以适应我国灰树花生产现状；菌种检测技术要求高，需要先进的检测设备及专业的检测人员，难以适应我国灰树花生产现状；菌种接种技术要求高，需要先进的接种设备设施及专业的接种人员，。
12、难以适应我国灰树花生产现状；菌种培养基与生产培养料成分差异较大，接种后定植、盖面较慢，培菌前1周易于感染杂菌。0008中国专利2011104400122公开了一种杏鲍菇菌种生产方法，包括麦粒处理、枝条处理、培养基调配、装瓶、灭菌、接种、菌种培养。该枝条麦粒菌种在杏鲍菇、金针菇生产，尤其工厂化生产上得到较好应用，但尚未有用于灰树花栽培的报道，且由于灰树花与杏鲍菇和金针菇生物学特性存在较大差异，该枝条麦粒菌种直接应用到灰树花栽培上效果极差，几乎不能应用，主要表现在以下几个方面1）软质枝条在灰树花菌种适期，腐烂较严重，顶部用镊子一夹就碎，难以夹取，中上部易断折，导致接种废种率较高，影响接种效率，影响。
13、程度视木条材质而异；2）灰树花菌丝在无杂木屑的麦粒培养基上生长较弱，接种后麦粒菌种上易感染杂菌，易污染培菌和出菇环境；3）无杂木屑的麦粒培养基与生产培养料成分说明书CN104145711A2/13页5存在较大差异，接种后定植、盖面较慢，培菌前1周易于感染杂菌。发明内容0009针对现有的灰树花生产所用的木屑固体菌种接种效率低、发菌慢（菌种最大生长距离大）和液体菌种需要选进的制种、检测及接种设备和专业化检测接种人员等问题，本发明提供一种适合我国现阶段灰树花生产的灰树花三级菌种制作方法。0010本发明解决上述技术问题的技术方案为一种灰树花三级菌种制作方法，包括一、二级菌种制作，三级菌种制作，菌包制作。
14、，接种培菌，催蕾，育菇，所述三级菌种制作包括培养基配方、培养基制作、装袋、灭菌、接种、培菌、养菌，其特征在于所述培养基配方分为木条培养基配方和麦粒培养基配方，所述木条培养基配方为按干重计，栗木木条规格0408CM0408CM1018CM，木条长度应比出菇菌包高度短15CM8088、麸皮1018、熟石膏粉053；所述麦粒培养基配方为按干重计，麦粒8088、细杂木屑（松、杉、柏、樟木屑除外，粒径3MM）1018、熟石膏粉053；所述培养基制作包括木条培养基制作和麦粒培养基制作，所述木条培养基制作为将栗木木条用1石灰水浸泡预湿120130H，捞出木条，并用清水洗净不溶性石灰，沥干至无水流出，再将麸皮。
15、与熟石膏粉干拌均匀，撒到湿木条上，混匀待用；所述麦粒培养基制作为将麦粒用1石灰水浸泡预湿7280H,捞出麦粒，并用清水洗净不溶性石灰，沥干至无水流出；再将细杂木屑与熟石膏粉干拌均匀，撒到湿麦粒上，再拌均匀，待用。0011上述的灰树花三级菌种制作方法，所述的装袋操作为选用规格为1316CM2735CM00040007CM的袋子，先将麦粒培养基在袋底垫053CM厚的一层，再将木条培养基整理成4070根的小捆，并用橡皮筋固定，然后竖直放到袋内的一边，接着再将麦粒培养基填充到另一边，麦粒培养基高出木条培养基052CM并覆盖木条培养基，整平麦粒培养基，然后用套环及盖封袋。0012上述的灰树花三级菌种制作。
16、方法，所述的灭菌条件为高压149105帕，126灭菌354H，放入冷却室冷却至常温。0013上述的灰树花三级菌种制作方法，所述的接种操作为在接种箱内按无菌操作接入二级菌种。0014上述的灰树花三级菌种制作方法，所述的培菌方法为温度2224，湿度6070，空气清新，无光培养2535天，至菌丝长满菌种袋，期间每隔510D检杂一次。0015上述的灰树花三级菌种制作方法，所述的养菌方法为温度2022，湿度6070，空气清新，无光养菌2025天，得到灰树花三级菌种。0016上述的灰树花三级菌种制作方法，所述一、二级菌种制作方法为一级菌种制作包括培养基配制，装试管，121灭菌30MIN，冷却，无菌接种，2。
17、4和相对湿度65条件下培养至菌丝满管；所述培养基采用加富PDA培养基配方，具体为麦粒50G土豆200G混合煮汁、葡萄糖20G、琼脂20G、PH值自然、制作培养基1000ML；说明书CN104145711A3/13页6二级菌种制作包括培养基配制，装瓶，125灭菌90MIN，冷却，无菌接种，24和相对湿度65条件下培养至菌丝满瓶；所述培养基采用木屑培养基配方，具体为杂木屑75，麸皮15、玉米粉8、熟石膏粉1、石灰1，含水量60。0017上述的灰树花三级菌种制作方法，所述的菌包制作方法为按配方配制灰树花培养料，装包，包中央打直径1525CM,深度大于木条长度053CM的接种孔，用套环封口，灭菌。00。
18、18上述的灰树花三级菌种制作方法，所述的接种培菌方法为将灭菌完毕的菌包冷却至室温，按无菌操作接入灰树花三级菌种，木条菌种插入接种孔，麦粒菌种盖面（略大于套环即可），放入培菌室培养2530天至菌丝长满菌包。0019上述的灰树花三级菌种制作方法，所述的催蕾包括瓦片制作和原基分化，其方法参照本申请人已有的中国专利CN102511310B，具体如下瓦片制作方法为瓦片展平为半椭圆形，椭圆形长径为菌袋直径的3/41倍，短径为菌袋直径的3/81/2，短径为长径的1/32/3，将椭圆弯为瓦片形，瓦片圆孤直径为菌袋直径的1/24/5，即将瓦片覆于菌袋上，瓦片与菌袋间因为直径差会形成一空间，菌丝长满后经后熟培养5。
19、10天，将菌包移入出菇房，在菌袋侧壁菌丝浓密处开直径225CM的圆孔作为出菇孔，将孔内培养料剐去23MM，将菌包平放于地面或架子上，在孔上盖瓦，温度控制在1719，湿度控制在7580，CO2浓度控制在1500MG/KG以下，并给予200800LUX的光照；原基分化方法为覆瓦催蕾810天，出菇孔长出脑状原基，去掉覆瓦，温度控制在1820，湿度控制在8590，CO2浓度控制在1000MG/KG以下，并给予4001000LUX的光照。0020上述的灰树花三级菌种制作方法，所述的育菇方法为覆瓦催蕾1516天，温度控制在1624，湿度控制在85左右，CO2浓度控制在1500MG/KG以下，并给予4001。
20、000LUX的光照，直至采收。0021本发明所采用的上述技术方案以菌种袋作为容器，但也可使用适当大小的菌种瓶作为容器，亦可达到相同的技术效果。0022术语释义菌种最大生长距离培菌过程中，菌丝长满菌包需要延伸的最远距离。0023本发明的有益效果在于1、本发明通过限定木条材质，可降低废种率815，提高接种效率1020。00242、本发明通过优化麦粒培养基组成，可提高菌丝活率，杜绝麦粒菌种接种后再次感染杂菌。00253、本发明通过往麦粒培养基内添加适量细杂木屑，可提前激活菌丝纤维素和木质素降解酶类，加快菌种定植、盖面速度，可使得培菌前1周感染杂菌的可能性大大降低。00264、本发明的菌种与木屑菌种相。
21、比接种效率高58，菌种最大生长距离短50100，培菌效率高2060，且使用本菌种，菌包上下菌龄较为一致，利于菌包营养集中释放，首批菇产量可增加1530；本发明的菌种与液体菌种相比适用于我国现有的菌种生产、检测及接种设备及技术人员，培菌效率相当，但其定植、盖面较快，且菌种本身具有较好的抗菌、隔菌效果，同等情况下，可降低培菌感染率25。说明书CN104145711A4/13页7具体实施方式0027下面结合实施例对本发明做进一步详细说明，但本发明并不限于此。0028实施例1一种灰树花三级菌种制作方法，包括如下步骤（1）一、二级菌种制作一级菌种制作包括培养基配制，装试管，121灭菌30MIN，冷却，无。
22、菌接种，24和相对湿度65条件下培养至菌丝满管；所述培养基采用加富PDA培养基配方，具体为麦粒50G土豆200G混合煮汁、葡萄糖20G、琼脂20G、PH值自然、制作培养基1000ML；二级菌种制作包括培养基配制，装瓶，125灭菌90MIN，冷却，无菌接种，24和相对湿度65条件下培养至菌丝满瓶；所述培养基采用木屑培养基配方，具体为杂木屑75，麸皮15、玉米粉8、熟石膏粉1、石灰1，含水量60。0029（2）三级菌种制作培养基配方分为木条培养基配方和麦粒培养基配方；木条培养基配方为按干重计，栗木木条规格0408CM0408CM1018CM，木条长度应比菌袋高度短15CM80、麸皮18、熟石膏粉2。
23、；麦粒培养基配方为按干重计，麦粒80、细杂木屑（松、杉、柏、樟木屑除外，粒径3MM）18、熟石膏粉2；培养基制作包括木条培养基制作和麦粒培养基制作；木条培养基制作为将栗木木条用1石灰水浸泡预湿120H，捞出木条，并用清水洗净不溶性石灰，沥干至无水流出。先将麸皮与熟石膏粉干拌均匀，撒到湿木条上，混匀待用；麦粒培养基制作为将麦粒用1石灰水浸泡预湿72H,捞出麦粒，并用清水洗净不溶性石灰，沥干至无水流出；再将细杂木屑与熟石膏粉干拌均匀，撒到湿麦粒上，再拌均匀，待用。0030装袋选用规格为1316CM2735CM00040007CM的袋子，先将麦粒培养基在袋底垫05CM厚的一层，再将木条培养基整理成4。
24、0根的小捆，并用橡皮筋固定，然后竖直放到袋内的一边，接着再将麦粒培养基填充到另一边，麦粒培养基高出木条培养基05CM并覆盖木条培养基，整平麦粒培养基，然后用套环及盖封袋。0031灭菌高压149105帕，126灭菌35H，放入冷却室冷却至常温。0032接种在接种箱内按无菌操作接入二级菌种。0033培菌温度22，湿度60，空气清新，无光培养25天，至菌丝长满菌种袋，期间每隔5D检杂一次。0034养菌说明书CN104145711A5/13页8温度20，湿度60，空气清新，无光养菌20天，得到灰树花三级菌种。0035（3）菌包制作按配方配制灰树花培养料，装包，包中央打直径15CM,深度大于木条长度05。
25、CM的接种孔，用套环封口，灭菌。0036（4）接种培菌将灭菌完毕的菌包冷却至室温，按无菌操作接入灰树花三级菌种，木条菌种插入接种孔，麦粒菌种盖面（略大于套环即可），放入培菌室培养25天至菌丝长满菌包。0037（5）催蕾包括瓦片制作和原基分化；瓦片制作瓦片展平为半椭圆形，椭圆形长径为菌袋直径的3/4倍，短径为菌袋直径的3/8，短径为长径的1/3，将椭圆弯为瓦片形，瓦片圆孤直径为菌袋直径的1/2，即将瓦片覆于菌袋上，瓦片与菌袋间因为直径差会形成一空间，菌丝长满后经后熟培养5天，将菌包移入出菇房，在菌袋侧壁菌丝浓密处开直径2CM的圆孔作为出菇孔，将孔内培养料剐去2MM，将菌包平放于地面或架子上，在孔。
26、上盖瓦，温度控制在17，湿度控制在75，CO2浓度控制在1100MG/KG，并给予200LUX的光照；原基分化覆瓦催蕾8天，出菇孔长出脑状原基，去掉覆瓦，温度控制在18，湿度控制在85，CO2浓度控制在800MG/KG，并给予400LUX的光照。0038（6）育菇覆瓦催蕾15天，温度控制在16，湿度控制在85左右，CO2浓度控制在1500MG/KG，并给予400LUX的光照，直至采收。0039与木屑菌种相比，本菌种接种效率高5，菌种最大生长距离短50，培菌效率高20，且使用本菌种，菌包上下菌龄较为一致，利于菌包营养集中释放，首批菇产量可增加20；与液体菌种相比，本菌种适用于我国现有的菌种生产、。
27、检测及接种设备及技术人员，培菌效率相当，但其定植、盖面较快，且菌种本身具有较好的抗菌、隔菌效果，同等情况下，可降低培菌感染率2。0040实施例2一种灰树花三级菌种制作方法，包括如下步骤（1）一、二级菌种制作一级菌种制作包括培养基配制，装试管，121灭菌30MIN，冷却，无菌接种，24和相对湿度65条件下培养至菌丝满管；所述培养基采用加富PDA培养基配方，具体为麦粒50G土豆200G混合煮汁、葡萄糖20G、琼脂20G、PH值自然、制作培养基1000ML；二级菌种制作包括培养基配制，装瓶，125灭菌90MIN，冷却，无菌接种，24和相对湿度65条件下培养至菌丝满瓶；所述培养基采用木屑培养基配方，具。
28、体为杂木屑75，麸皮15、玉米粉8、熟石膏粉1、石灰1，含水量60。0041（2）三级菌种制作培养基配方分为木条培养基配方和麦粒培养基配方；说明书CN104145711A6/13页9木条培养基配方为按干重计，栗木木条规格0408CM0408CM1018CM，木条长度应比菌袋高度短15CM88、麸皮115、熟石膏粉05；麦粒培养基配方为按干重计，麦粒88、细杂木屑（松、杉、柏、樟木屑除外，粒径3MM）115、熟石膏粉05；培养基制作包括木条培养基制作和麦粒培养基制作；木条培养基制作为将栗木木条用1石灰水浸泡预湿130H，捞出木条，并用清水洗净不溶性石灰，沥干至无水流出。先将麸皮与熟石膏粉干拌均匀。
29、，撒到湿木条上，混匀待用；麦粒培养基制作为将麦粒用1石灰水浸泡预湿80H,捞出麦粒，并用清水洗净不溶性石灰，沥干至无水流出；再将细杂木屑与熟石膏粉干拌均匀，撒到湿麦粒上，再拌均匀，待用。0042装袋选用规格为1316CM2735CM00040007CM的袋子，先将麦粒培养基在袋底垫3CM厚的一层，再将木条培养基整理成70根的小捆，并用橡皮筋固定，然后竖直放到袋内的一边，接着再将麦粒培养基填充到另一边，麦粒培养基高出木条培养基2CM并覆盖木条培养基，整平麦粒培养基，然后用套环及盖封袋。0043灭菌高压149105帕，126灭菌4H，放入冷却室冷却至常温。0044接种在接种箱内按无菌操作接入二级菌。
30、种。0045培菌温度24，湿度70，空气清新，无光培养35天，至菌丝长满菌种袋，期间每隔10D检杂一次。0046养菌温度22，湿度70，空气清新，无光养菌25天，得到灰树花三级菌种。0047（3）菌包制作按配方配制灰树花培养料，装包，包中央打直径25CM,深度大于木条长度3CM的接种孔，用套环封口，灭菌。0048（4）接种培菌将灭菌完毕的菌包冷却至室温，按无菌操作接入灰树花三级菌种，木条菌种插入接种孔，麦粒菌种盖面（略大于套环即可），放入培菌室培养30天至菌丝长满菌包。0049（5）催蕾包括瓦片制作和原基分化；瓦片制作瓦片展平为半椭圆形，椭圆形长径为菌袋直径的1倍，短径为菌袋直径的1/2，短径。
31、为长径的2/3，将椭圆弯为瓦片形，瓦片圆孤直径为菌袋直径的4/5，即将瓦片覆于菌袋上，瓦片与菌袋间因为直径差会形成一空间，菌丝长满后经后熟培养10天，将菌包移入出菇房，在菌袋侧壁菌丝浓密处开直径25CM的圆孔作为出菇孔，将孔内培养料剐去3MM，将菌包平放于地面或架子上，在孔上盖瓦，温度控制在19，湿度控制在80，CO2浓度控制在说明书CN104145711A7/13页101200MG/KG，并给予800LUX的光照；原基分化覆瓦催蕾10天，出菇孔长出脑状原基，去掉覆瓦，温度控制在20，湿度控制在90，CO2浓度控制在900MG/KG，并给予1000LUX的光照。0050（6）育菇覆瓦催蕾16天。
32、，温度控制在24，湿度控制在85左右，CO2浓度控制在1000MG/KG，并给予1000LUX的光照，直至采收。0051与木屑菌种相比，本菌种接种效率高8，菌种最大生长距离短80，培菌效率高50，且使用本菌种，菌包上下菌龄较为一致，利于菌包营养集中释放，首批菇产量可增加15；与液体菌种相比，本菌种适用于我国现有的菌种生产、检测及接种设备及技术人员，培菌效率相当，但其定植、盖面较快，且菌种本身具有较好的抗菌、隔菌效果，同等情况下，可降低培菌感染率5。0052实施例3一种灰树花三级菌种制作方法，包括如下步骤（1）一、二级菌种制作一级菌种制作包括培养基配制，装试管，121灭菌30MIN，冷却，无菌接。
33、种，24和相对湿度65条件下培养至菌丝满管；所述培养基采用加富PDA培养基配方，具体为麦粒50G土豆200G混合煮汁、葡萄糖20G、琼脂20G、PH值自然、制作培养基1000ML；二级菌种制作包括培养基配制，装瓶，125灭菌90MIN，冷却，无菌接种，24和相对湿度65条件下培养至菌丝满瓶；所述培养基采用木屑培养基配方，具体为杂木屑75，麸皮15、玉米粉8、熟石膏粉1、石灰1，含水量60。0053（2）三级菌种制作培养基配方分为木条培养基配方和麦粒培养基配方；木条培养基配方为按干重计，栗木木条规格0408CM0408CM1018CM，木条长度应比菌袋高度短15CM87、麸皮10、熟石膏粉3；麦。
34、粒培养基配方为按干重计，麦粒87、细杂木屑（松、杉、柏、樟木屑除外，粒径3MM）10、熟石膏粉3；培养基制作包括木条培养基制作和麦粒培养基制作；木条培养基制作为将栗木木条用1石灰水浸泡预湿125H，捞出木条，并用清水洗净不溶性石灰，沥干至无水流出。先将麸皮与熟石膏粉干拌均匀，撒到湿木条上，混匀待用；麦粒培养基制作为将麦粒用1石灰水浸泡预湿73H,捞出麦粒，并用清水洗净不溶性石灰，沥干至无水流出；再将细杂木屑与熟石膏粉干拌均匀，撒到湿麦粒上，再拌均匀，待用。0054装袋选用规格为1316CM2735CM00040007CM的袋子，先将麦粒培养基在袋底垫1CM厚的一层，再将木条培养基整理成50根的。
35、小捆，并用橡皮筋固定，然后竖直放到袋内的一边，接着再将麦粒培养基填充到另一边，麦粒培养基高出木条培养基1CM并覆盖说明书CN104145711A108/13页11木条培养基，整平麦粒培养基，然后用套环及盖封袋。0055灭菌高压149105帕，126灭菌36H，放入冷却室冷却至常温。0056接种在接种箱内按无菌操作接入二级菌种。0057培菌温度23，湿度65，空气清新，无光培养30天，至菌丝长满菌种袋，期间每隔6D检杂一次。0058养菌温度205，湿度65，空气清新，无光养菌23天，得到灰树花三级菌种。0059（3）菌包制作按配方配制灰树花培养料，装包，包中央打直径20CM,深度大于木条长度25。
36、CM的接种孔，用套环封口，灭菌。0060（4）接种培菌将灭菌完毕的菌包冷却至室温，按无菌操作接入灰树花三级菌种，木条菌种插入接种孔，麦粒菌种盖面（略大于套环即可），放入培菌室培养28天至菌丝长满菌包。0061（5）催蕾包括瓦片制作和原基分化；瓦片制作瓦片展平为半椭圆形，椭圆形长径为菌袋直径的4/5倍，短径为菌袋直径的7/16，短径为长径的1/2，将椭圆弯为瓦片形，瓦片圆孤直径为菌袋直径的3/5，即将瓦片覆于菌袋上，瓦片与菌袋间因为直径差会形成一空间，菌丝长满后经后熟培养6天，将菌包移入出菇房，在菌袋侧壁菌丝浓密处开直径23CM的圆孔作为出菇孔，将孔内培养料剐去25MM，将菌包平放于地面或架子上。
37、，在孔上盖瓦，温度控制在18，湿度控制在78，CO2浓度控制在800MG/KG，并给予600LUX的光照；原基分化覆瓦催蕾9天，出菇孔长出脑状原基，去掉覆瓦，温度控制在19，湿度控制在87，CO2浓度控制在600MG/KG以下，并给予600LUX的光照。0062（6）育菇覆瓦催蕾16天，温度控制在18，湿度控制在85左右，CO2浓度控制在900MG/KG，并给予800LUX的光照，直至采收。0063与木屑菌种相比，本菌种接种效率高6，菌种最大生长距离短100，培菌效率高40，且使用本菌种，菌包上下菌龄较为一致，利于菌包营养集中释放，首批菇产量可增加25；与液体菌种相比，本菌种适用于我国现有的菌。
38、种生产、检测及接种设备及技术人员，培菌效率相当，但其定植、盖面较快，且菌种本身具有较好的抗菌、隔菌效果，同等情况下，可降低培菌感染率4。0064实施例4一种灰树花三级菌种制作方法，包括如下步骤（1）一、二级菌种制作说明书CN104145711A119/13页12一级菌种制作包括培养基配制，装试管，121灭菌30MIN，冷却，无菌接种，24和相对湿度65条件下培养至菌丝满管；所述培养基采用加富PDA培养基配方，具体为麦粒50G土豆200G混合煮汁、葡萄糖20G、琼脂20G、PH值自然、制作培养基1000ML；二级菌种制作包括培养基配制，装瓶，125灭菌90MIN，冷却，无菌接种，24和相对湿度6。
39、5条件下培养至菌丝满瓶；所述培养基采用木屑培养基配方，具体为杂木屑75，麸皮15、玉米粉8、熟石膏粉1、石灰1，含水量60。0065（2）三级菌种制作培养基配方分为木条培养基配方和麦粒培养基配方；木条培养基配方为按干重计，栗木木条规格0408CM0408CM1018CM，木条长度应比菌袋高度短15CM85、麸皮125、熟石膏粉25；麦粒培养基配方为按干重计，麦粒85、细杂木屑（松、杉、柏、樟木屑除外，粒径3MM）125、熟石膏粉25；培养基制作包括木条培养基制作和麦粒培养基制作；木条培养基制作为将栗木木条用1石灰水浸泡预湿127H，捞出木条，并用清水洗净不溶性石灰，沥干至无水流出。先将麸皮与熟。
40、石膏粉干拌均匀，撒到湿木条上，混匀待用；麦粒培养基制作为将麦粒用1石灰水浸泡预湿75H,捞出麦粒，并用清水洗净不溶性石灰，沥干至无水流出；再将细杂木屑与熟石膏粉干拌均匀，撒到湿麦粒上，再拌均匀，待用。0066装袋选用规格为1316CM2735CM00040007CM的袋子，先将麦粒培养基在袋底垫15CM厚的一层，再将木条培养基整理成60根的小捆，并用橡皮筋固定，然后竖直放到袋内的一边，接着再将麦粒培养基填充到另一边，麦粒培养基高出木条培养基15CM并覆盖木条培养基，整平麦粒培养基，然后用套环及盖封袋。0067灭菌高压149105帕，126灭菌4H，放入冷却室冷却至常温。0068接种在接种箱内按。
41、无菌操作接入二级菌种。0069培菌温度235，湿度66，空气清新，无光培养28天，至菌丝长满菌种袋，期间每隔7D检杂一次。0070养菌温度21，湿度68，空气清新，无光养菌24天，得到灰树花三级菌种。0071（3）菌包制作按配方配制灰树花培养料，装包，包中央打直径22CM,深度大于木条长度2CM的接种孔，用套环封口，灭菌。0072（4）接种培菌将灭菌完毕的菌包冷却至室温，按无菌操作接入灰树花三级菌种，木条菌种插入接种说明书CN104145711A1210/13页13孔，麦粒菌种盖面（略大于套环即可），放入培菌室培养30天至菌丝长满菌包。0073（5）催蕾包括瓦片制作和原基分化；瓦片制作瓦片展平。
42、为半椭圆形，椭圆形长径为菌袋直径的5/6倍，短径为菌袋直径的5/12，短径为长径的5/12，将椭圆弯为瓦片形，瓦片圆孤直径为菌袋直径的3/4，即将瓦片覆于菌袋上，瓦片与菌袋间因为直径差会形成一空间，菌丝长满后经后熟培养8天，将菌包移入出菇房，在菌袋侧壁菌丝浓密处开直径22CM的圆孔作为出菇孔，将孔内培养料剐去23MM，将菌包平放于地面或架子上，在孔上盖瓦，温度控制在18，湿度控制在76，CO2浓度控制在1400MG/KG，并给予700LUX的光照；原基分化覆瓦催蕾10天，出菇孔长出脑状原基，去掉覆瓦，温度控制在20，湿度控制在89，CO2浓度控制在1000MG/KG，并给予800LUX的光照。。
43、0074（6）育菇覆瓦催蕾15天，温度控制在20，湿度控制在85左右，CO2浓度控制在1200MG/KG，并给予700LUX的光照，直至采收。0075与木屑菌种相比，本菌种接种效率高7，菌种最大生长距离短70，培菌效率高60，且使用本菌种，菌包上下菌龄较为一致，利于菌包营养集中释放，首批菇产量可增加30；与液体菌种相比，本菌种适用于我国现有的菌种生产、检测及接种设备及技术人员，培菌效率相当，但其定植、盖面较快，且菌种本身具有较好的抗菌、隔菌效果，同等情况下，可降低培菌感染率3。0076实施例5一种灰树花三级菌种制作方法，包括如下步骤（1）一、二级菌种制作一级菌种制作包括培养基配制，装试管，12。
44、1灭菌30MIN，冷却，无菌接种，24和相对湿度65条件下培养至菌丝满管；所述培养基采用加富PDA培养基配方，具体为麦粒50G土豆200G混合煮汁、葡萄糖20G、琼脂20G、PH值自然、制作培养基1000ML；二级菌种制作包括培养基配制，装瓶，125灭菌90MIN，冷却，无菌接种，24和相对湿度65条件下培养至菌丝满瓶；所述培养基采用木屑培养基配方，具体为杂木屑75，麸皮15、玉米粉8、熟石膏粉1、石灰1，含水量60。0077（2）三级菌种制作培养基配方分为木条培养基配方和麦粒培养基配方；木条培养基配方为按干重计，栗木木条规格0408CM0408CM1018CM，木条长度应比菌袋高度短15CM。
45、84、麸皮14、熟石膏粉2；麦粒培养基配方为按干重计，麦粒84、细杂木屑（松、杉、柏、樟木屑除外，粒径3MM）14、熟石膏粉2；培养基制作包括木条培养基制作和麦粒培养基制作；说明书CN104145711A1311/13页14木条培养基制作为将栗木木条用1石灰水浸泡预湿128H，捞出木条，并用清水洗净不溶性石灰，沥干至无水流出。先将麸皮与熟石膏粉干拌均匀，撒到湿木条上，混匀待用；麦粒培养基制作为将麦粒用1石灰水浸泡预湿78H,捞出麦粒，并用清水洗净不溶性石灰，沥干至无水流出；再将细杂木屑与熟石膏粉干拌均匀，撒到湿麦粒上，再拌均匀，待用。0078装袋选用规格为1316CM2735CM0004000。
46、7CM的袋子，先将麦粒培养基在袋底垫2CM厚的一层，再将木条培养基整理成45根的小捆，并用橡皮筋固定，然后竖直放到袋内的一边，接着再将麦粒培养基填充到另一边，麦粒培养基高出木条培养基1CM并覆盖木条培养基，整平麦粒培养基，然后用套环及盖封袋。0079灭菌高压149105帕，126灭菌38H，放入冷却室冷却至常温。0080接种在接种箱内按无菌操作接入二级菌种。0081培菌温度225，湿度69，空气清新，无光培养32天，至菌丝长满菌种袋，期间每隔8D检杂一次。0082养菌温度22，湿度70，空气清新，无光养菌22天，得到灰树花三级菌种。0083（3）菌包制作按配方配制灰树花培养料，装包，包中央打直。
47、径15CM,深度大于木条长度1CM的接种孔，用套环封口，灭菌。0084（4）接种培菌将灭菌完毕的菌包冷却至室温，按无菌操作接入灰树花三级菌种，木条菌种插入接种孔，麦粒菌种盖面（略大于套环即可），放入培菌室培养26天至菌丝长满菌包。0085（5）催蕾包括瓦片制作和原基分化；瓦片制作瓦片展平为半椭圆形，椭圆形长径为菌袋直径的1倍，短径为菌袋直径的1/2，短径为长径的2/3，将椭圆弯为瓦片形，瓦片圆孤直径为菌袋直径的1/2，即将瓦片覆于菌袋上，瓦片与菌袋间因为直径差会形成一空间，菌丝长满后经后熟培养9天，将菌包移入出菇房，在菌袋侧壁菌丝浓密处开直径24CM的圆孔作为出菇孔，将孔内培养料剐去22MM，。
48、将菌包平放于地面或架子上，在孔上盖瓦，温度控制在19，湿度控制在75，CO2浓度控制在1500MG/KG，并给予400LUX的光照；原基分化覆瓦催蕾8天，出菇孔长出脑状原基，去掉覆瓦，温度控制在18，湿度控制在86，CO2浓度控制在800MG/KG，并给予500LUX的光照。0086（6）育菇覆瓦催蕾15天，温度控制在22，湿度控制在85左右，CO2浓度控制在600MG/KG，并说明书CN104145711A1412/13页15给予900LUX的光照，直至采收。0087与木屑菌种相比，本菌种接种效率高6，菌种最大生长距离短50，培菌效率高30，且使用本菌种，菌包上下菌龄较为一致，利于菌包营养集。
49、中释放，首批菇产量可增加20；与液体菌种相比，本菌种适用于我国现有的菌种生产、检测及接种设备及技术人员，培菌效率相当，但其定植、盖面较快，且菌种本身具有较好的抗菌、隔菌效果，同等情况下，可降低培菌感染率3。0088实施例6一种灰树花三级菌种制作方法，包括如下步骤（1）一、二级菌种制作一级菌种制作包括培养基配制，装试管，121灭菌30MIN，冷却，无菌接种，24和相对湿度65条件下培养至菌丝满管；所述培养基采用加富PDA培养基配方，具体为麦粒50G土豆200G混合煮汁、葡萄糖20G、琼脂20G、PH值自然、制作培养基1000ML；二级菌种制作包括培养基配制，装瓶，125灭菌90MIN，冷却，无菌接种，24和相对湿度65条件下培养至菌丝满瓶；。