邻苯二酚腙衍生物及其制备方法以及 含该衍生物的药物组合物 【发明领域】
本发明涉及新的邻苯二酚腙衍生物，该化合物可抑制磷酸二酯酶IV或肿瘤坏死因子的酶活性。这些化合物可以用于预防或治疗支气管哮喘、关节炎、支气管炎、慢性呼吸道闭锁、牛皮癣、过敏性鼻炎、皮炎、AIDS、Crohn氏疾病、败血病、脓毒性休克、诸如恶病质的其它炎性疾病、TNF相关疾病等。本发明还涉及所说化合物的生产方法和含有所说化合物的药物组合物。发明背景
磷酸二酯酶IV是一种将cAMP(环状腺苷3′，5′-一磷酸)特异性水解成失活腺苷3′，5′-一磷酸的酶。据显示，cAMP是传递外部刺激细胞响应的第二信使并且起舒张或收缩支气管肌的作用。
磷酸二酯酶IV的抑制可通过维持cAMP的浓度来防止支气管痉挛并且还引发抗炎性。因此，抑制磷酸二酯酶IV的化合物应当在治疗哮喘等疾病中是有效的。
已知肿瘤坏死因子(TNF)与传染性疾病，如恶病质和自身免疫性疾病有关。而且，TNF似乎起炎性反应如败血病和脓毒性休克的主要传递质介体作用。
因此，人们期望具有磷酸二酯酶IV或TNF抑制活性的化合物是具有药用价值的并且始终需要开发新的化合物来抑制磷酸二酯酶IV和TNF。
已提出了作为磷酸二酯酶IV和TNF抑制剂的很多化合物。例如，EP470,805(American Home Product)描述了下式的肟氨基甲酸酯(oximcarbamate)和肟碳酸酯(oximcarbonate)：其中R是C3-7烷基或C3-7环烷基，R1是卤素或低级烷基，并且R2是氨基、低级烷基氨基，芳基氨基，低级烷氧基或芳氧基。
US专利5,393,788(SmithKline Beecham公司)描述了下式地苯烷基草酰胺化合物：其中R1是C4-6环烷基，X是YR2卤素，其中Y是氧或硫或低级烷基，R3和R5独立地是OR7，R4是氢或C1-2烷基，R6是OR7或NR7OR7，并且R7是氢或C1-3烷基。发明概述
本发明提供下式I所示的新的邻苯二酚(cathecol)腙衍生物：或其可药用盐，其中
R1是C1-7烷基或C3-7环烷基；
R2是氢、羟基、C1-5烷基或-CH2CH2C(＝O)NH2；
R3和R4独立地是氢、C1-7烷基、-C(＝X)-R5或带有一个或两个取代基的2-、3-或4-吡啶基、嘧啶基或苯基，所说的取代基选自卤素、C1-6烷氧基、硝基、三氟甲基、C1-6烷基和羧基；或者R3和R4直接被含氧、硫或氮的C3-4键合形成杂环；X是氧、硫或NH，并且R5是C1-7烷基、-NHR6、CONH2或带有一个取代基的2-、3-或4-吡啶基、嘧啶基或苯基，所说的取代基选自卤素、C1-6烷氧基、腈、三氟甲基、C1-6烷基和羧基，并且R6是氢、羟基、NH2、C1-5烷氧基、C1-5烷基、吡啶基或苯基。发明详述
式I的化合物可以是其光学异构体或立体异构体的形式。因此，本发明包括这些异构体及其混合物。
本发明提供一种用于抑制磷酸二酯酶IV或TNF的药物组合物，该组合物含有式I的化合物和可药用载体。
式I的化合物可以通过以下反应路径I来制备：反应路径I其中R1，R2，R3和R4如上定义。
一些衍生物通过已知方法来合成(J.Med.Chem.，1994，37，1696)。使用酸催化剂在醇溶剂中合成的肼化合物的产率为60％-90％(Tetrahedron Lett.1994，35，3711)。
下面将通过参考以下示例性实施例描述本发明。实施例参考例1
3-环戊氧基-4-甲氧基苯甲醛
将100g(0.66mol)异香草醛、136.2g(0.99mol)无水碳酸钾和3g碘化钾在650ml无水二甲基甲酰胺的溶液在65℃下搅拌。使用1小时的时间向溶液缓慢滴加127.3g(0.85mol)环戊基溴。将该溶液在65℃下搅拌1天，然后将其温度降至室温。用2.0L甲苯稀释并且用1M氢氧化钠(2×1.5L)洗涤。用0.5L甲苯萃取含水层，并且用蒸馏水洗涤有机层(2×1.5L)。将有机层干燥并且浓缩，获得117g浅褐色油状标题化合物。
1H NMR(CDCl3，d)：9.84(s，1H)7.42(m，2H)6.95(d，1H，J＝9Hz)4.87(m，1H)3.93(s，3H)2.1-1.6(m，8H)实施例1
(E)-3-环戊氧基-4-甲氧基苯甲醛异烟腙
向0.44g(2.0mmole)参考例1制备的化合物于30ml乙醇中的溶液添加催化量的浓硫酸，并且将混合物在室温下搅拌10分钟。向反应溶液添加0.33g异烟酰肼。将溶液在50℃下搅拌4小时并且减压浓缩。将残余物溶解于二氯甲烷并且用50ml蒸馏水洗涤两次。将分离的有机层经无水硫酸镁干燥并且减压蒸馏。将所得白色晶体在二氯甲烷中重结晶，获得0.67g(88.45％)白色标题化合物。m.p.170-171℃
1H NMR(DMSO-d6)：1.60(2H，m)1.75(4H，m)1.92(2H，m)3.81(3H，s)4.85(1H，m)7.04(1H，dJ＝8.4Hz)7.24(1H，dd，J＝8.4，1.8Hz)7.33(1H，dJ＝1.8Hz)7.81(2H，dd，J＝4.5，1.6Hz)8.39(1H，s)8.78(2H，dd，J＝4.5，1.6Hz)11.92(1H，s)实施例2
(E)-[(3-环戊氧基-4-甲氧基苯基)亚甲基]肼基甲酸乙酯
向1.00g(4.54mmole)参考例1制备的化合物于80ml乙醇中的溶液添加催化量的浓盐酸，并且将混合物在室温下搅拌10分钟。向反应溶液添加0.73g肼基甲酸乙酯。将溶液在50℃下搅拌4小时并且减压浓缩。将残余物溶解于二氯甲烷并且用50ml蒸馏水洗涤两次。将分离的有机层经无水硫酸镁干燥并且减压蒸馏。将所得的白色晶体在二氯甲烷中重结晶，获得1.25g(89.87％)白色标题化合物。m.p.146-147℃
1H NMR(DMSO-d6)：1.23(3H，t，J＝7.1Hz)1.58(2H，m)1.73(4H，m)1.88(2H，m)3.77(3H，s)4.13(2H，q，J＝7.1Hz)4.80(1H，m)6.98(1H，dJ＝8.4Hz)7.07(1H，dd，J＝8.4，1.9Hz)7.20(1H，dJ＝1.9Hz)7.93(1H，s)10.92(1H，s)实施例3
(E)-3-环戊氧基-4-甲氧基苯甲醛苯基腙
向0.50g(2.27mmole)参考例1制备的化合物于60ml乙醇中的溶液添加催化量的浓盐酸，并且将混合物在室温下搅拌10分钟。向反应溶液添加0.34ml苯基肼。将溶液在50℃下搅拌10小时。将所得的沉淀物过滤并且用20ml乙醇洗涤，获得0.63g(89.41％)白色标题化合物。m.p.138-140℃
1H NMR(DMSO-d6)：1.60(2H，m)1.75(4H，m)1.92(2H，m)3.77(3H，s)4.85(1H，m)6.72(1H，m)6.95(1H，dJ＝8.2Hz)7.03(2H，d，J＝7.6Hz)7.09(1H，dd，J＝8.2，1.8Hz)7.20(2H，t)7.26(1H，dJ＝1.8Hz)7.78(1H，s)10.12(1H，s)实施例4
(E)-3-环戊氧基-4-甲氧基苯甲醛乙酰腙
向0.50g(2.27mmole)参考例1制备的化合物于60ml乙醇中的溶液添加催化量的浓盐酸，并且将混合物在室温下搅拌10分钟。向反应溶液添加0.26g乙酰肼。将溶液在25℃下搅拌10小时并且减压浓缩。将残余物溶解于二氯甲烷并且用50ml蒸馏水洗涤两次。将分离的有机层经无水硫酸镁干燥并且减压蒸馏。将所得的白色晶体在二氯甲烷中重结晶，获得0.59g(94.06％)白色标题化合物。m.p.155-156℃
1H NMR(DMSO-d6)：1.58(2H，m)1.71(4H，m)1.88(2H，m)2.18(3H，s)3.78(3H，s)4.81(1H，m)6.99(1H，dJ＝8.4Hz)7.14(1H，dd，J＝8.4，1.8Hz)7.24(1H，dJ＝1.8Hz)7.88(1H，s)11.12(1H，s)实施例5
(E)-3-环戊氧基-4-甲氧基苯甲醛7-氯喹啉-4-基腙
向0.50g(2.27mmole)参考例1制备的化合物于60ml乙醇中的溶液添加催化量的浓盐酸，并且将混合物在室温下搅拌10分钟。向反应溶液添加0.67g7-氯-4肼基喹啉。将溶液在45℃下搅拌10小时。将所得的沉淀物过滤并且用20ml乙醇洗涤，获得0.55g(61.20％)白色标题化合物。m.p.210-212℃
1H NMR(DMSO-d6)：1.61(2H，m)1.78(4H，m)1.94(2H，m)3.81(3H，s)4.89(1H，m)7.04(1H，dJ＝8.3Hz)7.28(1H，dd，J＝8.3，1.8Hz)7.36(1H，dJ＝5.2Hz)7.42(1H，dJ＝1.8Hz)7.61(1H，d)7.86(1H，s)8.39(1H，s)8.44(2H，dJ＝9.1Hz)实施例6
(E)-3-环戊氧基-4-甲氧基苯甲醛2-咪唑啉腙
向0.50g(2.27mmole)参考例1制备的化合物于50ml乙醇中的溶液添加催化量的浓盐酸，并且将混合物在室温下搅拌10分钟。向反应溶液添加0.63g肼基-2咪唑啉氢溴酸盐。将溶液在45℃下搅拌8小时并且减压浓缩。将残余物溶解于二氯甲烷并且用50ml蒸馏水洗涤两次。将分离的有机层经无水硫酸镁干燥并且减压蒸馏。将所得的淡黄色油通过快速色谱法纯化(硅胶，7.5％甲醇-二氯甲烷作为展开液)，获得0.45g(65.56％)白色标题化合物。m.p.87-90℃
1H NMR(DMSO-d6)：1.61(2H，m)1.72(4H，m)1.89(2H，m)3.70(4H，s)3.79(3H，s)4.89(1H，m)7.01(1H，dJ＝8.4Hz)7.24(1H，dd，J＝8.4，1.8Hz)7.44(1H，dJ＝1.8Hz)8.06(1H，s)实施例7
(E)-2-[(3-环戊氧基-4-甲氧基苯基)亚甲基]肼碳酰胺
使用0.50g(2.27mmole)参考例1制备的化合物作为起始原料进行如实施例6的反应，获得0.47g(74.66％)白色标题化合物。m.p.144-146℃
1H NMR(DMSO-d6)：1.58(2H，m)1.71(4H，m)1.89(2H，m)3.76(3H，s)4.92(1H，m)6.44(2H，brs)6.93(1H，dJ＝8.3Hz)7.09(1H，dd，J＝8.3，1.9Hz)7.36(1H，dJ＝1.9Hz)7.75(1H，s)10.08(1H，s)实施例8
(E)-3-环戊氧基-4-甲氧基苯甲醛2-硝基苯基腙
使用0.50g(2.27mmole)参考例1制备的化合物作为起始原料进行如实施例3的反应，获得0.63g(78.09％)红黄色标题化合物。m.p.135℃(分解)
1H NMR(DMSO-d6)：1.61(2H，m)1.77(4H，m)1.94(2H，m)3.80(3H，s)4.88(1H，m)6.89(1H，m)7.03(1H，dJ＝8.4Hz)7.22(1H，dd，J＝8.4，1.9Hz)7.35(1H，dJ＝1.9Hz)7.66(1H，tJ＝1.6Hz)7.95(1H，dJ＝8.7Hz)8.11(1H，ddJ＝8.5，1.4Hz)8.39(1H，s)11.15(1H，s)实施例9
(E)-2-[(3-环戊氧基-4-甲氧基苯基)亚甲基]肼硫代甲酰胺
使用1.00g(4.54mmole)参考例1制备的化合物作为起始原料进行如实施例6的反应，获得0.94g(70.57％)白色标题化合物。m.p.112-114℃
1H NMR(DMSO-d6)：1.57(2H，m)1.71(4H，m)1.88(2H，m)3.76(3H，s)4.91(1H，m)6.44(2H，brs)6.93(1H，dJ＝8.4Hz)7.09(1H，dd，J＝8.4，1.9Hz)7.36(1H，dJ＝1.9Hz)7.74(1H，s)10.06(1H，s)实施例10
(E)-3-环戊氧基-4-甲氧基苯甲醛4-氯苯基腙
使用1.50g(6.81mmole)参考例1制备的化合物作为起始原料进行如实施例6的反应，获得1.65g(70.26％)白色标题化合物。m.p.133-135℃
1H NMR(DMSO-d6)：1.60(2H，m)1.76(4H，m)1.91(2H，m)3.78(3H，s)4.86(1H，m)6.97(1H，dJ＝8.4Hz)7.04(2H，ddJ＝6.8，2.1Hz)7.12(1H，dd，J＝8.4，1.9Hz)7.24(2H，dd，J＝6.8，2.1Hz)7.27(1H，dJ＝1.9Hz)7.87(1H，s)10.27(1H，s)实施例11
(E)-2-[(3-环戊氧基-4-甲氧基苯基)亚甲基]肼羰基甲基(三甲基)氯化铵
使用1.50g(6.81mmole)参考例1制备的化合物和1.03g(羧甲基)三甲基氯化铵酰肼作为起始原料进行如实施例6的反应，获得1.73g(68.68％)白色标题化合物。m.p.178-179℃
1H NMR(DMSO-d6)：1.60(2H，m)1.73(4H，m)1.90(2H，m)3.30(9H，s)3.79(3H，s)4.33(2Ha，s)4.79(2Ha，s)4.84(1H，m)7.03(1H，dJ＝8.4Hz)7.23(1H，dd，J＝8.4，1.8Hz)7.29(1H，dJ＝1.8Hz)8.01(1Ha′，s)8.26(1Ha′，s)12.05(1H，brs)实施例12
(E)-N-(1，4-噁嗪-4-基)-3-环戊氧基-4-甲氧基苯基甲亚胺
将5.0g(22.7mmole)参考例1制备的化合物1溶解于60ml乙醇中并且将所得的溶液在室温下搅拌10分钟。向反应溶液添加2.91mlN-氨基吗啉。将溶液在5℃下搅拌14小时。将所得的沉淀物过滤并且用20ml乙醇洗涤，获得白色固体。将该固体在异丙醚中重结晶，获得6.37g(92.19％)标题化合物。m.p.108-109℃
1H NMR(DMSO-d6)：1.56(m，2H)1.70(m，4H)1.88(m，2H)3.03(m，4H)3.67(m，7H)4.77(m，1H)6.88(d，1H)7.04(dd，1H)7.18(d，1H)7.62(s，1H)实施例13
(E)-N-哌啶子基-3-环戊氧基-4-甲氧基苯基甲亚胺
使用0.50g(2.27mmole)参考例1制备的化合物和0.31ml N-氨基哌啶作为起始原料进行如实施例12的反应，获得0.65g(94.68％)白色标题化合物。m.p.81-82℃
1H NMR(DMSO-d6)：1.52(m，4H)1.67(m，8H)1.90(m，2H)3.04(m，4H)3.70(s，3H)4.76(m，1H)6.89(d，1H)7.04(dd，1H)7.18(d，1H)7.57(s，1H)实施例14
(E)-2-[(3-环戊氧基-4-甲氧基苯基)亚甲基]肼碳亚氨酰胺
使用1.50g(6.81mmole)参考例1制备的化合物和0.73g氨基胍盐酸盐作为起始原料进行如实施例6的反应，获得1.60g(85.02％)白色标题化合物。m.p.100-103℃
1H NMR(DMSO-d6)：1.62-1.64(2H，m)1.74-1.78(4H，m)1.94-1.97(2H，m)3.84(3H，s)4.95-4.98(1H，m)7.05(1H，dJ＝8.4Hz)7.33(1H，dd，J＝8.4，2.0Hz)7.54(1H，dJ＝1.9Hz)7.7(1H，brs)8.36(1H，s)11.69(1H，s)实施例15
(E)-3-环戊氧基-4-甲氧基苯甲醛2-吡啶基腙
使用0.80g(3.63mmole)参考例1制备的化合物和0.39g of 2-肼基嘧啶作为起始原料进行如实施例6的反应，获得0.96g(84.89％)白色标题化合物。m.p.142-143℃
1H NMR(DMSO-d6)：1.58-1.61(2H，m)1.71-1.75(4H，m)1.89-1.94(2H，m)3.77(3H，s)4.84-4.87(1H，m)6.73-6.74(1H，m)6.97(1H，dJ＝8.3Hz)7.10(1H，dd，J＝8.3，1.8Hz)7.20(1H，dJ＝8.4Hz)7.27(1H，dJ＝1.8Hz)7.62-7.63(1H，m)7.94(1H，s)8.09(1H，ddJ＝4.9，1.0Hz)10.67(1H，s)实施例16
(E)-3-环戊氧基-4-甲氧基苯甲醛2-羧基苯基腙使用0.80g(3.63mmole)参考例1制备的化合物和0.66g2-肼基苯甲酸盐酸盐作为起始原料进行如实施例6的反应，获得1.05g(81.57％)白色标题化合物。m.p.174-176℃
1H NMR(DMSO-d6)：1.59-1.60(2H，m)1.71-1.76(4H，m)1.92-1.93(2H，m)3.78(3H，s)4.85(1H，m)6.78(1H，ddJ＝7.0，1.0Hz)6.99(1H，dJ＝8.4Hz)7.20(1H，dd，J＝8.4，1.9Hz)7.32(1H，dJ＝1.9Hz)7.50(1H，ddJ＝7.0，1.6Hz)7.68(1H，ddJ＝8.5，0.8Hz)7.84(1H，ddJ＝8.0，1.4Hz)8.05(1H，s)8.79(1H，dJ＝4.9Hz)11.17(1H，s)实施例17
(E)-3-环戊氧基-4-甲氧基苯甲醛4-三氟甲基嘧啶-2-基腙
使用0.80g(3.63mmole)参考例1制备的化合物和0.63g2-肼基-4-(三氟甲基)嘧啶作为起始原料进行如实施例6的反应，获得1.10g(79.62％)白色标题化合物。m.p.73-75℃
1H NMR(DMSO-d6)：1.58-1.59(2H，m)1.72-1.76(4H，m)1.89(2H，m)3.79(3H，s)4.81-4.84(1H，m)7.01(1H，dJ＝8.4Hz)7.19(1H，dd，J＝8.4，2.0Hz)7.21(1H，dJ＝4.9Hz)7.27(1H，dJ＝2.0Hz)8.11(1H，s)8.79(1H，dJ＝4.9Hz)1.67(1H，s)实施例18
(E)-2-[(3-环戊氧基-4-甲氧基苯基)亚甲基]肼碳酰肼
向1.0g(4.54mmol)参考例1制备的化合物于50ml甲醇中的溶液添加催化量的冰醋酸，并且将混合物在室温下搅拌10分钟，并且使用20分钟的时间滴加到1.0g碳酰肼的50ml蒸馏水溶液中。将反应混合物在室温下搅拌1小时并且将沉淀的固体过滤，获得0.89g(67.06％)白色标题化合物。m.p.179-181℃
1H NMR(DMSO-d6)：1.61(2H，m)1.72(4H，m)1.89(2H，m)3.76(3H，s)4.05(2H，brs)4.94(1H，m)6.92(1H，dJ＝8.3Hz)7.07(1H，dd，J＝8.3，1.7Hz)7.42(1H，dJ＝1.6Hz)7.74(1H，s)8.03(1H，s)10.23(1H，s)实施例19
(E)-2-[(3-环戊氧基-4-甲氧基苯基)亚甲基]肼二碳酰胺
向1.0g(4.54mmol)参考例1制备的化合物于50ml甲醇中的溶液添加催化量的冰醋酸，并且将混合物在室温下搅拌10分钟，并且使用30分钟的时间滴加到1.17g草氨酰肼的60ml蒸馏水溶液中。将反应混合物在室温下搅拌2小时并且将沉淀的固体过滤，获得1.12g(80.80％)白色标题化合物。m.p.233-235℃
1H NMR(DMSO-d6)：1.57(2H，m)1.71(4H，m)1.87(2H，m)3.76(3H，s)4.11(2H，brs)4.95(1H，m)6.91(1H，dJ＝8.5Hz)7.28(1H，dd，J＝8.5，2.2Hz)7.42(1H，dJ＝2.1Hz)7.83(1H，s)9.32(1H，s)实施例20
(E)-2-[(3-环戊氧基-4-甲氧基苯基)亚甲基]肼基乙酸
使用0.80g(3.63mmole)参考例1制备的化合物和0.63g肼基乙酸乙酯作为起始原料进行如实施例6的反应，获得0.98g白色(E)-2-[3-环戊氧基-4-甲氧基苯基亚甲基]肼基乙酸乙酯。将制备的酯化合物在甲醇和1.0N氢氧化钠水溶液的混合物中水解，得到0.75g(70.77％)白色标题固体。m.p.165℃(分解)
1H NMR(DMSO-d6)：1.59(2H，m)1.71(4H，m)1.87(2H，m)3.74(3H，s)3.83(2H，brs)4.77(1H，m)6.90(1H，dJ＝8.5Hz)6.96(1H，dd，J＝8.3，1.7Hz)7.09(1H，dJ＝1.7Hz)7.57(1H，s)实验例
磷酸二酯酶IV活性的抑制
测试实施例1-16制备的化合物和作为对照的环戊苯吡酮对磷酸二酯酶IV的抑制效果。
从人U937细胞中部分纯化磷酸二酯酶IV，将测试用化合物和1.0μM cAMP(含0.01μM[3H]cAMP)在30℃下培养20分钟。通过将反应溶液沸腾2分钟完成PDE反应将cAMP转化成AMP。通过添加蛇毒液核苷酸酶并且将反应溶液在30℃下培养10分钟，将AMP转化成腺苷。将未水解的cAMP结合到AG1-X2树脂上，通过闪烁计数来定量测定水溶液中的[3H]腺苷。结果示于下表I，其中数值表示每种测试化合物的PDE IV抑制率(％)。
表I 测试化合物 浓度(μM) 抑制率(％) 环戊苯吡酮(对照) 20 70.1 2 62.5 实施例1 20 66.7 2 38.4 实施例2 20 63.7 2 46.7 实施例3 20 80.4 2 46.6 实施例4 20 72.1 2 51.7 实施例5 20 64.9 2 37.9 实施例6 20 58.3 2 31.7 实施例7 20 89.7 2 66.2 实施例9 20 81.0 2 69.0 实施例10 20 70.7 2 39.3 实施例11 20 45.1 2 43.3 实施例12 20 79.4 2 62.9 实施例13 20 73.3 2 31.4 实施例14 20 57.7 2 14.7 实施例15 20 63.6 2 49.4 实施例16 20 76.6 2 42.3