一种黑米皮生产无农残黑米花青素的方法技术领域
本发明为一种通过酶法辅助提取黑米皮中花青素的提取方法，并通过一定方法处理除去花青素中农药残留的方法。
背景技术
2013年年底，浙江绍兴地区突现多批输美植物提取物因农药残留超标遭退运事件，我国植物提取物出口量近几年来不断增长，美国等国家对植物提取物的关注度提高，技术性贸易措施日益严格，黑米农残主要成分为稻瘟灵、苯菌灵及其他成分，随着欧美国家对苯菌灵及多菌灵等农残标准降低，严重阻碍了黑米提取物的出口。
发明内容
本发明的目的在于提供一种黑米皮生产无农残黑米花青素的方法。
本发明采用如下技术方案：
黑米皮生产无农残黑米花青素的方法，包括以下内容：
（1）取一定量黑米皮，向其中加入8-10倍量含有蛋白酶的酸溶液，40-45℃保温提取2小时，过滤；向其滤渣中加入上述酸溶液8-10倍量，于40-45℃保温1小时，过滤；向其滤渣中再加入上述酸溶液8-10倍量，于40-45℃保温提取1小时，过滤，合并三次提取液；所述酸溶液的制作方法为：先配置pH值为3.0-4.0的柠檬酸、盐酸、硫酸水溶液，再加入蛋白酶，溶液中蛋白酶浓度为0.20-0.25%。
（2）过滤：将上述提取液通过微波震荡的方法灭去溶液中残留的酶，然后用助滤剂过滤；
（3）层析：将过滤后的滤液通过LS-305大孔树脂吸附，收集树脂流出液；
（4）水洗：用纯净水水洗至树脂流出液颜色变淡；
（5）解析：水洗后用60%的乙醇解析；
（6）浓缩：将上述解析液于50-60℃温度下采用离心薄膜浓缩至相对密度1.05-1.1；
（7）二次层析：将上述浓缩液以0.5-1BV/h的流速通过LX系列大孔吸附树脂，控制浓缩液pH值2.0-3.0，树脂用量为浓缩液体积的三分之一，收集流出液；
（8）水洗：用1-1.5BV的水洗柱，对上述层析液水洗，流速0.5-1BV/h，收集水洗液；
（9）浓缩：将上述水洗液于50-60℃温度下浓缩至相对密度1.05-1.1；
（10）干燥：上述浓缩后的液体采用喷雾干燥机喷雾干燥，进风温度170-175℃，出风温度70-75℃，即可得到除去农残后的花青素，花青素含量大于30%。
所述的步骤（2）中的助滤剂采用红白硅藻土。
所述的步骤（3）中的LS-305大孔树脂为西安蓝晓公司生产。
本发明的有益效果：
1、提高了黑米皮加工的效率及黑米花青素的收率；
2、有效除去了黑米提取物中的农药残留，对于花青素在食品中的使用及出口欧美国家提供良好的保证，从而促进黑米花青素更好的发展，并在脱农残的过程中有效地提高了花青素的含量。
具体实施方式
实施例1：取黑米皮1kg，加10倍量酸水（柠檬酸、盐酸、硫酸调节pH=3.0-4.0，加入酸水质量比0.2%的蛋白酶）,40-45℃保温提取2小时，过滤，渣中再加酸水8倍量，40-45℃保温1小时，过滤，渣中再加酸水8倍量，40-45℃保温提取1小时，过滤，合并三次提取液，并采用微波震荡灭去溶液中残留的酶，用助滤剂过滤，过滤液通过LS-305大孔树脂吸附，用纯净水洗至流出液颜色变浅，再用60%乙醇解析，解析液在50-60℃离心薄膜浓缩至比重1.05-1.1，得到花青素含量为25-30%的浓缩液。
将浓缩液以0.5-1BV/h的流速通过LX-N1树脂，要求浓缩液pH=2-3，树脂用量为浓缩液体积的三分之一，并用1-1.5BV的纯化水洗柱，流速0.5-1BV/h，收集流出液和水洗液，50-60℃离心薄膜浓缩至比重1.05-1.1，170℃喷雾干燥，可得花青素44.4g，收率为原料重量的4.44%，花青素含量为31.5%，农药残留经欧陆检测中心检测200项农残均未检出，达到欧美出口标准；农药残留及部分杂质被树脂柱吸附，经处理后树脂可再次使用。
实施例2：取黑米皮1kg，加10倍量酸水（柠檬酸、盐酸、硫酸调节pH=3.0-4.0，加入酸水质量比0.2%的蛋白酶），40-45℃保温提取2小时，过滤，渣中再加酸水8倍量，40-45℃保温1小时，过滤，渣中再加酸水8倍量，40-45℃保温提取1小时，过滤，合并三次提取液，并采用微波震荡灭去溶液中残留的酶，用助滤剂过滤，过滤液通过LS-305大孔树脂吸附，用纯净水洗至流出液颜色变浅，再用60%乙醇解析，解析液在50-60℃离心薄膜浓缩至比重1.05-1.1，得到花青素含量为25-30%的浓缩液。
将浓缩液以0.5-1BV/h的流速通过NC-100树脂，要求浓缩液pH=2-3，树脂用量为浓缩液体积的三分之一，并用1-1.5BV的纯化水洗柱，流速0.5-1BV/h，收集流出液和水洗液，50-60℃离心薄膜浓缩至比重1.05-1.1，170℃喷雾干燥，可得花青素42.0g，收率为原料重量的4.20%，花青素含量为33.3%，农药残留经欧陆检测中心检测200项农残均未检出，达到欧美出口标准；农药残留及部分杂质被树脂柱吸附，经处理后树脂可再次使用。
实施例3：取黑米皮1kg，加10倍量酸水（柠檬酸、盐酸或硫酸调节PH=3.0-4.0，加入酸水质量比0.2%的蛋白酶）,40-45℃保温提取2小时，过滤，渣中再加酸水8倍量，40-45℃保温1小时，过滤，渣中再加酸水8倍量，40-45℃保温提取1小时，过滤，合并三次提取液，并采用微波震荡灭去溶液中残留的酶，用助滤剂过滤，过滤液通过LS-305大孔树脂吸附，用纯净水洗至流出液颜色变浅，再用60%乙醇解析，解析液在50-60℃离心薄膜浓缩至比重1.05-1.1，得到花青素含量为25-30%的浓缩液。
将浓缩液以0.5-1BV/h的流速通过NC-500树脂，要求浓缩液pH=2-3，树脂用量为浓缩液体积的三分之一，并用1-1.5BV的纯化水洗柱，流速0.5-1BV/h，收集流出液和水洗液，50-60℃离心薄膜浓缩至比重1.05-1.1，170℃喷雾干燥，可得花青素40.5g，收率为原料重量的4.05%，花青素含量为34.5%，农药残留经欧陆检测中心检测200项农残均未检出，达到欧美出口标准；农药残留及部分杂质被树脂柱吸附，经处理后树脂可再次使用。