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1、(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201510765755.5 (22)申请日 2015.11.11 C12M 1/24(2006.01) (71)申请人 深圳市达科为生物工程有限公司 地址 518000 广东省深圳市南山区桃源街道 光前工业区 20 栋 4 楼 C 区 (72)发明人 周翔 吴庆军 (74)专利代理机构 深圳新创友知识产权代理有 限公司 44223 代理人 刘莉 (54) 发明名称 一种细胞分离管 (57) 摘要 本发明公开了一种细胞分离管, 包括管体, 还 包括置于所述管体内的细胞分离胶体, 所述细胞 分离胶体与所述管体底部之间形成一空腔, 所述 细胞。
2、分离胶体在 25时的比重为 1.06-1.09, 所 述细胞分离胶体在 600g-1000g 的离心力作用下 能触变成液体。 在加入血液进行细胞分离的时候, 在特定大小的离心力作用下, 本发明的细胞分离 管中的细胞分离胶体发生触变形成液体, 在分离 管中向上移动, 把高于和低于细胞分离胶体密度 的细胞隔开。 (51)Int.Cl. (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书1页 说明书3页 附图1页 CN 105420088 A 2016.03.23 CN 105420088 A 1/1 页 2 1.一种细胞分离管, 包括管体, 其特征在于 : 还包括置于所述管体内。
3、的细胞分离胶体, 所述细胞分离胶体与所述管体底部之间形成一空腔, 所述细胞分离胶体在 25时的比重为 1.06-1.09, 所述细胞分离胶体在 600g-1000g 的离心力作用下能触变成液体。 2.如权利要求 1 所述的细胞分离管, 其特征在于 : 所述细胞分离胶体的厚度为 1.0cm-2.0cm。 3.如权利要求 1 所述的细胞分离管, 其特征在于 : 所述细胞分离胶体具有疏水性, 由以 下重量份数的各组分组成 : 双环戊二烯树脂 : 90-100 份 ; 海藻糖 : 3-4 份 ; 山梨糖醇 : 0.8-1.2 份 ; 细颗粒二氧化硅 : 2-2.5 份 ; 聚乙二醇 : 0.5-0.8。
4、 份 ; 聚氧乙烯 - 聚氧丙烯嵌段共聚物 : 8-12 份 ; 有机膨润土 : 5-7 份。 4.如权利要求 3 所述的细胞分离管, 其特征在于 : 所述细胞分离胶体由以下重量份数 的各组分组成 : 双环戊二烯树脂 : 95.00 份 ; 海藻糖 : 3.20 份 ; 山梨糖醇 : 0.90 份 ; 细颗粒二氧化硅 : 2.25 份 ; 聚乙二醇 : 0.60 份 ; 聚氧乙烯 - 聚氧丙烯嵌段共聚物 : 10 份 ; 有机膨润土 : 5.5 份。 5.如权利要求 1 所述的细胞分离管, 其特征在于 : 所述细颗粒二氧化硅的平均粒度为 0.05-1m。 权 利 要 求 书 CN 105420。
5、088 A 2 1/3 页 3 一种细胞分离管 技术领域 0001 本发明涉及生物医学领域的细胞分离技术, 特别是涉及一种细胞分离管。 背景技术 0002 在临床医学检验中, 针对特定细胞功能和生物学特性的检查常常涉及到细胞的分 离技术, 从外周血液和各种体液 ( 胸水、 腹水、 心包积液等 ) 中分离单个核细胞是体外进行 淋巴细胞免疫学研究和细胞学实验的重要前处理步骤, 分离的目的细胞的质和量是保证后 续实验可靠性的重要环节。 0003 外周血单个核细胞 (peripheral blood mononuclear cells, PBMCs) 是参与机体 免疫应答反应的一类重要免疫细胞群。PB。
6、MCs 主要包含淋巴细胞和单核细胞, PBMCs 中大部 分(8090)为淋巴细胞, 对不同淋巴细胞的分离、 鉴别以及功能的研究对疾病的诊断 乃至治疗都有十分重要的临床意义。 0004 目前, 普遍采用的是淋巴细胞分离液通过密度梯度法实现细胞分离, 但是分离过 程中, 特别是大批量样本处理时, 血液样品加入淋巴细胞分离液时, 二者界面很容易发生混 合, 造成分离效果差, 效率低。 发明内容 0005 本发明提出一种细胞分离管, 其结构简单便于制造, 安全无毒且成本低廉。 0006 本发明的技术问题通过以下的技术方案予以解决 : 0007 一种细胞分离管, 包括管体和置于所述管体内的细胞分离胶体。
7、, 所述细胞分离胶 体与所述管体底部之间形成一空腔, 所述细胞分离胶体在 25时比重为 1.06-1.09, 所述 细胞分离胶体在 600g-1000g 的离心力作用下能触变成液体。 0008 优选地 : 0009 所述细胞分离胶体的厚度为 1.0cm-2.0cm。 0010 所述细胞分离胶体具有疏水性, 由以下重量份数的各组分组成 : 0011 双环戊二烯树脂 : 90-100 份 ; 0012 海藻糖 : 3-4 份 ; 0013 山梨糖醇 : 0.8-1.2 份 ; 0014 细颗粒二氧化硅 : 2-2.5 份 ; 0015 聚乙二醇 : 0.5-0.8 份 ; 0016 聚氧乙烯 - 。
8、聚氧丙烯嵌段共聚物 : 8-12 份 ; 0017 有机膨润土 : 5-7 份。 0018 进一步优选地 : 0019 所述细胞分离胶体由以下重量份数的各组分组成 : 0020 双环戊二烯树脂 : 95.00 份 ; 0021 海藻糖 : 3.20 份 ; 说 明 书 CN 105420088 A 3 2/3 页 4 0022 山梨糖醇 : 0.90 份 ; 0023 细颗粒二氧化硅 : 2.25 份 ; 0024 聚乙二醇 : 0.60 份 ; 0025 聚氧乙烯 - 聚氧丙烯嵌段共聚物 : 10 份 ; 0026 有机膨润土 : 5.5 份。 0027 所述细颗粒二氧化硅的平均粒度为 0.。
9、05-1m。 0028 本发明的有益效果是 : 本发明中的细胞分离胶体的触变性好、 稳定性强、 材料相容 性好, 生物毒性小, 耐辐照。由于细胞分离胶体本身具有伸缩性和触变性, 可以依靠其自身 的伸缩性而固定在管体下方, 不需要任何的胶水来粘合, 也可以不需要对管体做任何特殊 的结构, 在加入血液进行细胞分离的时候, 在特定大小的离心力作用下, 细胞分离胶体发生 触变形成液体, 在分离管中向上移动, 把高于和低于细胞分离胶体密度的细胞隔开。 附图说明 0029 图 1 是采用本发明的细胞分离管分离 PBMCs 细胞的过程示意图。 具体实施方式 0030 下面对照附图并结合优选的实施方式对本发明。
10、作进一步说明。 0031 如图 1 所示, 本发明提供一种细胞分离管, 在一个优选实施例中, 该细胞分离管包 括管体 1 和细胞分离胶体 2, 细胞分离胶体 2 具有伸缩性, 依靠自身的伸缩性置于管体 1 内, 无外力作用时, 不会移动, 将细胞分离胶体2置于管体1的中下部位置较适宜, 在细胞分 离胶体 2 与管体 1 的底部之间形成一空腔, 细胞分离胶体在 25时比重为 1.06-1.09, 在 600g-1000g 的离心力作用下能触变成液体, 细胞分离胶体的厚度为 1.0cm-2.0cm。 0032 本发明所用的管体, 可以根据需要采用常见的各种容量规格的离心管。在优选的 实施例中, 细。
11、胞分离胶体具有疏水性, 并由以下重量份数的各组分组成 : 双环戊二烯树脂 (DCPD 树脂 ) : 90-100 份 ; 海藻糖 : 3-4 份 ; 山梨糖醇 : 0.8-1.2 份 ; 细颗粒二氧化硅 : 2-2.5 份 ; 聚乙二醇 : 0.5-0.8份 ; 聚氧乙烯-聚氧丙烯嵌段共聚物 : 8-12份 ; 有机膨润土 : 5-7份。 其中, 所述的细颗粒二氧化硅的平均粒度为 0.05-1m。 0033 以分离淋巴细胞为例, 本发明的细胞分离管工作时的具体操作过程如图 1 所示, 其中 1 表示管体, 2 表示细胞分离胶体, 3 表示血液样品, 4 表示细胞分离液, 5 表示红细胞, 6 。
12、表示 PBMCs 细胞, 7 表示血浆。图 1 中, 左图 : 将细胞分离液倒入细胞分离管内, 细胞分离液 最好紧贴细胞分离胶体, 不能有气泡 ; 图 1 中的中图 : 然后将血液样品倒入细胞分离管, 此 时, 由于细胞分离胶体的隔离, 血液样品与细胞分离液不会混合, 旋紧盖子, 放入离心机, 设 置常规的离心力 (600g-1000g 之间的任意离心力 ) 和常规的离心时间进行离心 ; 图 1 中的 右图 : 在离心力场的作用下, 细胞分离胶体触变成液体, 细胞分离管内形成具有梯度的液体 体系, 根据密度的大小不同, 细胞分离管内的液体分成清晰的五层, 从下到上依次是 : 红细 胞 5、 细。
13、胞分离液 4、 细胞分离胶体 2、 PBMCs 细胞 6 以及血浆 7。然后取出细胞分离管, 吸去 最上层的血浆层, 吸出 PBMCs 细胞层, 清洗, 离心, 染色, 计数。 0034 采用本发明的细胞分离管经过多次实验, 发现分离血液淋巴细胞的效果非常理 想, 与传统的直接使用细胞分离液进行淋巴细胞分离作了对比, 具体的实验数据见下方的 说 明 书 CN 105420088 A 4 3/3 页 5 表一, 其中, 本实施例中所用的细胞分离胶体由以下重量份数的各组分组成 : 双环戊二烯树 脂 : 95.00 份 ; 海藻糖 : 3.20 份 ; 山梨糖醇 : 0.90 份 ; 细颗粒二氧化硅。
14、 : 2.25 份 ; 聚乙二醇 : 0.60 份 ; 聚氧乙烯 - 聚氧丙烯嵌段共聚物 : 10 份 ; 有机膨润土 : 5.5 份。 0035 表一 : 本发明的细胞分离管、 传统的细胞分离液分离全血得到的淋巴细胞得率 0036 样品血样体积细胞得率 细胞总数 本实施例细胞分离管3mL170w/mL520w 传统技术细胞分离液3mL145w/mL430w 0037 实验表明, 分离相同量的血液, 本发明的细胞分离管的分离效果比传统的细胞分 离液的分离效果好。 0038 以上内容是结合具体的优选实施方式对本发明所作的进一步详细说明, 不能认定 本发明的具体实施只局限于这些说明。对于本发明所属技术领域的技术人员来说, 在不脱 离本发明构思的前提下, 还可以做出若干等同替代或明显变型, 而且性能或用途相同, 都应 当视为属于本发明的保护范围。 说 明 书 CN 105420088 A 5 1/1 页 6 图 1 说 明 书 附 图 CN 105420088 A 6 。