技术领域
本发明涉及具有多种抗癌活性的二-(杂)芳基取代的叔胺类化合物或其可药用盐，其制备方法，含有所述化合物的药物组合物及其在制备抗肿瘤药物中的应用。
背景技术
恶性肿瘤是严重威胁人类健康的常见病和多发病。全世界60多亿人口中，每年新发病例约900万例，因肿瘤而死亡者达700万人，且每年还有增加的趋势。近年来随着治疗药物数量的增加和治疗手段的提高，在发达国家中癌症的死亡率有了一定下降。例如美国2009年发布的癌症统计报告显示从1990年到2005年，男性癌症死亡率下降了19.2％，女性下降了11.4％。然而，在发展中国家中的癌症发生率和死亡率却仍然处于一个明显的上升期。例如中国癌症的死亡率已跃居到疾病死亡率的首位。肺癌，肝癌，食道癌和乳腺癌等的发病率明显上升。根据世界卫生组织报告，在恶性肿瘤的三大疗法(手术，化疗，放疗)中，药物治疗占有重要地位。近年来随着分子生物学的发展和人们对癌症的发生，发展的分子水平机制的进一步认识，抗肿瘤药物研究正从传统的细胞毒性药物转向针对机制的多环节作用的新型抗肿瘤药物。以细胞信号转导分子为靶点或新生血管为靶点的抑制剂，抗转移或抗耐药性的药物，分化诱导剂，导向治疗，提高或调节机体免疫功能以及基因治疗等多种途径成为研发新型抗癌药物的关注点。已有多个以细胞信号转导分子为靶点的抗癌药物相继上市，如蛋白酪氨酸激酶抑制剂伊马替尼(Gleevec)，吉非替尼(Iressa)，厄洛替尼(Tarceva)和索拉非尼(Nexavar)。尽管如此，现有抗肿瘤药物仍远远不能满足临 床需求。对危害人类生命健康最严重的，占恶性肿瘤90％以上的实体瘤的治疗也未能达到满意的效果。因此继续寻找新的高效低毒的抗肿瘤药物仍是药物研究领域的热点。
发明内容
本发明人通过对合成的小分子化合物进行多种人癌细胞株(如：A459，DU145，KB，KB-VIN，K562)的抑制活性试验，发现了系列二-(杂)芳基取代的叔胺类化合物有明显的抗癌活性，并显示出广谱性或良好的选择性(部分数据见表1)，并以已知上市药高三尖杉酯碱、紫杉醇和伊马替尼为阳性对照。该类化合物的抗癌活性未曾见报导，且提示对该类化合物的深入研究将有可能发现新结构类型、与上述对照药有类似作用靶点的抗癌新药。
因此，本发明的第一个方面涉及具有下列通式I结构的二-(杂)芳基取代的叔胺类化合物或其可药用盐：
其中，
X，Y和Z各自独立地为N或者CR4，所述R4为H，卤素，-NO2，-CN，-NH2，-N3，烷基，烷氧基，烷氨基，烯基，炔基，-OH，卤代烷基，卤代烷氧基，-C(O)OH，-C(O)OR′，-OCOR′，-CONR′R″，-SO3H，-SO2NR′R″，芳基，杂芳基，被-OH取代的烷基，被-OH取代的烷氧基，被-OH取代的烷氨基，被-NR′R″取代的烷基，被-NR′R″取代的烷氧基，被-NR′R″取代的烷氨基，被-C(O)OH取代的烷基，被-C(O)OH取代的烷氧基，被-C(O)OH取代的烷氨基，被-C(O)OR′取代的烷基，被-C(O)OR′取代的 烷氧基，被-C(O)OR′取代的烷氨基，酰氨基或烷硫基，其中R′和R″各自独立地为H，C1-4烷基，C2-4烯基或C2-4炔基，并且所述芳基和杂芳基可以被选自-CHO，-OH，-COOH，-CN和-NH2的取代基取代；
R1为烷基，烯基，炔基，环烷基，杂环烷基，酰基，未取代或取代的芳基或未取代或取代的杂芳基，其中芳基或杂芳基上的取代基可以为C1-6烷基，C1-6烷氧基，C2-6烯基，C2-6炔基，卤素，-NO2，-CN，-NH2，-N3，-OH，-CF3，-OCF3，-OCHF2，-C(O)OH，-C(O)OR′，-OCOR′，-CONR′R″，-SO3H或-SO2NR′R″；其中R′和R″各自独立地为H或C1-4烷基；
R2和R3各自独立地为A环可利用位置上的H，卤素，-NO2，-CN，-NH2，-N3，烷基，烷氧基，烷氨基，烯基，炔基，-OH，-CF3，-OCF3，-OCHF2，-C(O)OH，-C(O)OR′，-OCOR′，-CONR′R″，-SO3H，-SO2NR′R″，芳基，杂芳基，被-OH取代的烷基，被-OH取代的烷氧基，被-OH取代的烷氨基，被-NR′R″取代的烷基，被-NR′R″取代的烷氧基，被-NR′R″取代的烷氨基，被-C(O)OH取代的烷基，被-C(O)OH取代的烷氧基，被-C(O)OH取代的烷氨基，被-C(O)OR′取代的烷基，被-C(O)OR′取代的烷氧基，被-C(O)OR′取代的烷氨基，酰氨基或烷硫基，其中R′和R″各自独立地为H，C1-4烷基，并且所述芳基和杂芳基可以被选自-CHO，-OH，-COOH，-CN和-NH2的取代基取代；或者
当X，Y或Z为CH时，R2和R3可以独立地取代H而与X，Y或Z连接，并且R2和R3可以与它们所连接的原子一起形成与A环稠合的脂族环，芳环或杂芳环，所述脂族环可以包含一个，两个或更多个独立地选自O，N和S的杂原子，非共轭双键或叁键，其中所述脂族环，芳环或杂芳环的任意位置可以被独立地选自卤素，-OH，-NH2，C1-4烷基和C1-4烷氧基的取代基取代；
L为(CR5R6)n，其中R5和R6各自独立地为H，烷基，烯基或炔基，其中n为0，1或2；和
Ar为未取代或被R7单-或多-取代的芳基或杂芳基，其中不同取代位置上的基团R7的定义与上述R2和R3的定义相同；R7优选为H，卤素，-OH，-NO2，-CN，-NH2，-N3，-CF3，-OCF3，C1-4烷基，C1-4烷氧基，C1-4 烷硫基，C2-4烯基，C2-4炔基，-C(O)OR′或-CONR′R″；其中R′和R″各自独立地为H或C1-4烷基；
条件是，通式I的化合物中不包括以下化合物：
5-氯-2，4-二硝基-N-(4′-甲基苯基)-苯胺；
5-氯-2，4-二硝基-N-(4′-甲氧基苯基)-苯胺；和
6-氯-2-(N-苯基氨基)-3-硝基吡啶。
本发明的第二个方面涉及上述通式I化合物的制备方法。
本发明的第三个方面涉及包含至少一种本发明通式I化合物以及一种或多种药用载体或赋形剂的药物组合物。
本发明的第四个方面涉及本发明通式I化合物用于制备治疗肿瘤的药物的用途。优选地，所述肿瘤选自肺癌，前列腺癌，鼻咽癌细胞和耐药性鼻咽癌。
本发明的第五个方面涉及用作治疗肿瘤的药物的本发明通式I化合物。优选地，所述肿瘤选自肺癌，前列腺癌，鼻咽癌细胞和耐药性鼻咽癌。
本发明的第六个方面涉及治疗肿瘤的方法，所述方法包括给予需要这种治疗的患者治疗有效量的本发明通式I化合物。优选地，所述肿瘤选自肺癌，前列腺癌，鼻咽癌细胞和耐药性鼻咽癌。
取代基定义
本文中使用的术语“烷基”是指饱和的直链或支链烃基，具有1-12个碳原子，优选具有1-10，1-8，1-6，1-4或1-3个碳原子。“烷基”的典型实例包括但不限于甲基，乙基，正丙基，异丙基，正丁基，异丁基，叔丁基，正戊基，叔戊基，新戊基，己基，庚基，辛基等。
本文中使用的术语“烯基”是指含有至少一个碳碳双键(-C＝C-)的烯属不饱和直链或支链烃基，具有2-12个碳原子，优选具有2-10，2-8，2-6，2-4或2-3个碳原子。“烯基”的典型实例包括但不限于乙烯基，丙烯基，烯丙基，丁烯-1-基，丁烯-2-基，戊烯-1-基，戊烯 -2-基，1，3-戊二烯基，己烯-1-基，己烯-2-基，1，3-己二烯基，庚烯基，辛烯基等。
本文中使用的术语“炔基”是指含有至少一个碳碳三键(-C≡C-)的炔属不饱和直链或支链烃基，具有2-12个碳原子，优选具有2-10，2-8，2-6，2-4或2-3个碳原子。“炔基”的典型实例包括但不限于乙炔基，丙炔基，炔丙基，丁炔基，戊炔基，己炔基，庚炔基，辛炔基等。
本文中使用的术语“烷氨基”为烷基-NR8R9，其中R8和R9各自独立地选自氢和如本文所定义的烷基。“烷氨基”的典型实例包括但不限于甲氨基，二甲氨基，二乙氨基，丙氨基，丁氨基等。
本文中使用的术语“酰氨基”意指基团-NR10C(O)R11，其中R10和R11各自独立地选自氢，如本文所定义的烷基，杂烷基，环烷基，杂环烷基，芳基和杂芳基。“酰氨基”的典型实例包括但不限于甲酰氨基，乙酰氨基，环己基羰基氨基，苯甲酰氨基，苄基羰基氨基等。
本文中使用的术语“烷硫基”意指基团-SR12，其中R12为如本文定义的烷基或环烷基。“烷硫基”的典型实例包括但不限于甲硫基，乙硫基，丙硫基，丁硫基等。
本文中使用的术语“环烷基”意指具有3-10个碳原子并且具有单环或多个稠合环(包括稠合和桥连环系)的饱和环状烃基，优选具有3-8，5-8，3-6或5-6个碳原子。“环烷基”的典型实例包括但不限于单环结构，诸如环丙基，环丁基，环戊基，环辛基，1-甲基环丙基，2-甲基环戊基，2-甲基环辛基等；和多环结构，诸如二环[2.2.1]庚基，金刚烷基等。
本文所用的术语“杂环烷基”意指包含一个，两个或更多个独立地选自N，O和S的杂原子的如本文所定义的环烷基。“杂环烷基”的典型实例包括但不限于四氢呋喃基，四氢噻吩基，吡咯烷基，哌嗪基，哌啶基和吗啉基等。
本文所用的术语“环烯基”意指3-10个碳原子的具有单环或多个稠合环(包括稠合和桥连环系)并且具有至少一个碳碳双键(-C＝C-)的 烯属不饱和环状烃基，优选具有3-8，5-8，3-6或5-6个碳原子。“环烯基”的典型实例包括但不限于单环结构，诸如环己烯基，环戊烯基，环丙烯基等。
本文所用的术语“杂环烯基”表示如本文所定义的环烯基，其中一个，两个或更多个碳原子被一个，两个或更多个选自O，S或N的杂原子替代。“杂环烯基”的典型实例包括但不限于3，4-二氢-2H-吡喃基，1，2，3，4-四氢-吡啶基等。
本文所用的术语“芳基”意指具有一个单环或多个稠合环的5-14个碳原子的不饱和芳族碳环基。所述芳基优选具有5-10，5-8或5-6个碳原子。“芳基”的典型实例包括但不限于苯基，萘基和蒽基等。
本文所用的术语“杂芳基”表示如本文所定义的芳基，其中一个，两个或更多个碳原子被一个，两个或更多个选自O，S或N的杂原子替代。所述杂芳基为5-14元杂芳基，优选5-10元杂芳基，更优选5-或6元杂芳基。“杂芳基”的典型实例包括但不限于呋喃基，噻吩基，噁唑基，咪唑基，吡啶基，嘧啶基，三唑基，四唑基，三嗪基，喹啉基，异喹啉基，喹唑啉基等。
本文所用的术语“烷氧基”意指基团-OR13，其中R13为如本文所定义的烷基。“烷氧基”的典型实例包括但不限于甲氧基，乙氧基，正丙氧基，异丙氧基，正丁氧基，叔丁氧基，仲丁氧基，正戊氧基，正己氧基，1，2-二甲基丁氧基等。
本文所用的术语“酰基”意指基团-C(O)R14，其中R14为氢和如本文所定义的烷基，杂烷基，环烷基，杂环烷基，芳基或杂芳基。“酰基”的典型实例包括但不限于甲酰基，乙酰基，环己基羰基，苯甲酰基等。
本文所用的术语“卤素”意指氟，氯，溴或碘。优选的卤素基团为氟，氯或溴。
本文所用的术语“卤代烷基”意指被本文所定义的卤素单或多取代的如本文所定义的烷基。“卤代烷基”的典型实例包括但不限于-CF3，-CF2CF3，-CH2CCl3等。
本文所用的术语“卤代烷基”意指被本文所定义的卤素单或多取代的如本文所定义的烷氧基。“卤代烷氧基”的典型实例包括但不限于-OCF3，-OCHF2，-OCH2CCl3等。
上述基团可以任选地被-OH，-NH2，C1-4烷基，C1-4烷氧基或卤素单或多取代。
本发明通式I的化合物优选为以下通式II，III或IV的化合物：
通式II-IV中，X，Y，R1，R2，R3，R4，R7的定义与通式I中的定义相同；或者A环上的R2与R3可以与它们所连接的原子一起形成与A环稠合的C5-8芳环，5-8元杂芳环或C5-8脂族环，所述脂族环可以包含一个，两个或更多个独立地选自O，N和S的杂原子，非共轭双键或叁键，其中所述脂族环，芳环或杂芳环的任意位置可以被独立地选自卤素，-OH，-NH2，C1-4烷基和C1-4烷氧基的取代基取代。
通式II-IV中，取代基R7优选为H，C1-4烷基，C2-4烯基，C2-4炔基，C1-4烷氧基或C1-4烷硫基；更优选为C1-4烷基，C1-4烷氧基或C1-4烷硫基。通式II中R7可在苯环(B环)上的任意位置。
根据本发明的一个优选实施方式，通式I中X，Y，Z均为N。
根据本发明的另一个优选实施方式，通式I中X，Y，Z中任意两个为N，另一个为CH；
根据本发明的另一个优选实施方式，通式I中X，Y，Z中任意两个为CH，另一个为N。
根据本发明的另一个优选实施方式，通式I中X，Y，Z均为CH。
根据本发明的另一个优选实施方式，通式I中A环上的R2与R3可以与它们所连接的原子一起形成与A环稠合的5元或6元芳环，5元或6元杂芳环或5元或6元脂族环，所述脂族环可以包含一个，两个或更多个独立地选自O，N和S的杂原子，非共轭双键或叁键。其中所述脂族环，芳环或杂芳环的任意位置可以被独立地选自卤素，-OH，-NH2，C1-4烷基和C1-4烷氧基的取代基取代。
根据本发明的另一个优选实施方式，在通式I中，
R2和R3各自独立地为氟，氯，溴，碘，-NO2，-CN，-NH2，-N3，C1-6烷基，C1-6烷氧基，C1-6-烷氨基，C2-6烯基，C2-6炔基，-OH，-CF3，-OCF3，-OCHF2，-C(O)OH，-C(O)OR′，-OCOR′，-CONR′R″，-SO3H，-SO2NR′R″，HO-C1-6烷基，HO-C1-6烷氧基，HO-C1-6烷氨基，NR′R″-C1-6烷基，NR′R″-C1-6烷氧基，NR′R″-C1-6烷氨基，HOOC-C1-6烷基，HOOC-C1-6烷氧基，HOOC-C1-6烷氨基，R′OOC-C1-6烷基，R′OOC-C1-6烷氧基或R′OOC-C1-6烷氨基；
R4为H，卤素，C1-6烷基，C1-6烷氧基，C1-6-烷氨基，-NO2，-CN，-COOMe或-CONR′R″；和
R7为H，C1-6烷基，C2-6烯基，C2-6炔基，C1-6烷氧基，C1-6-烷氨基，C1-6烷硫基，羟基，氨基，-COOR′或-CONR′R″；其中R′和R″为H或C1-4烷基。
根据本发明的另一个优选实施方式，在通式I中，
R2和R3各自独立地为氟，氯，溴，碘，-NO2，-CN，-NH2，-N3，C1-4烷基，C1-4烷氧基，C1-4-烷氨基，C2-4烯基，C2-4炔基，-OH，-CF3，-OCF3，-OCHF2，-C(O)OH，-C(O)OR′，-OCOR′，-CONR′R″，-SO 3H，-SO2NR′R″，HO-C1-4烷基，HO-C1-4烷氧基，HO-C1-4烷氨基，NR′R″-C1-4烷基，NR′R″-C1-4烷氧基，NR′R″-C1-4烷氨基，HOOC-C1-4烷基，HOOC-C1-4烷氧基，HOOC-C1-4烷氨基，R′OOC-C1-4烷基，R′OOC-C1-4烷氧基或R′OOC-C1-4烷氨基；
R4为H，卤素，C1-4烷基，C1-4烷氧基，C1-4-烷氨基，-NO2，-CN，-COOMe或-CONR′R″；和
R7为C1-4烷基，C1-4烷氧基，C1-4烷硫基，C1-4-烷氨基，C1-4-烷氨基，羟基，氨基，-C(O)OR′或-CONR′R″。
优选地，本发明的通式I化合物选自：
2-氯-4-[N-(4′-甲氧基苯基)-N-甲基]氨基-嘧啶(化合物1)，
2，6-二氯-4-[N-(4′-甲氧基苯基)-N-甲基]氨基-嘧啶(化合物2)，
4，6-二氯-2-[N-(4′-甲氧基苯基)-N-甲基]氨基-嘧啶(化合物3)，
2-氨基-6-氯-4-[N-(4′-甲氧基苯基)-N-甲基]氨基-嘧啶(化合物4)，
6-氨基-2-氯-4-[N-(4′-甲氧基苯基)-N-甲基]氨基-嘧啶(化合物5)，
6-氯-2-[N-(4′-甲氧基苯基)-N-甲基]氨基-3-硝基吡啶(化合物6)，
6-氯-2-[N-烯丙基-N-(4′-甲氧基苯基)]氨基-3-硝基吡啶(化合物7)，
6-氯-2-[N-环戊基-N-(4′-甲氧基苯基)]氨基-3-硝基吡啶(化合物8)，
6-甲氧基-2-[N-(4′-甲氧基苯基)-N-甲基]氨基-3-硝基吡啶(化合物9)，
2-[N-(4′-甲氧基苯基)-N-甲基]氨基-6-甲基-3-硝基吡啶(化合物10)，
6-氯-3-氰基-2-[N-(4′-甲氧基苯基)-N-甲基]氨基-吡啶(化合物11)，
2-氯-3-氰基-6-[N-(4′-甲氧基苯基)-N-甲基]氨基-吡啶(化合物12)，
2-[N-(4′-甲氧基苯基)-N-甲基]氨基-6-(N-甲氨基)-3-硝基吡啶(化合物13)，
6-氯-2-[N-(4′-甲氧基苯基)-N-甲基]氨基-吡啶-3-甲酸甲酯(化合物14)，
6-氯-2-[N-(4′-甲氧基苯基)-N-乙酰基]氨基-3-硝基吡啶(化合物15)，
6-甲氧基-2-[N-(4′-甲氧基苯基)-N-甲基]氨基-吡啶-3-甲酸甲酯(化合物16)，
N-(5-氯-2-硝基苯基)-N-(4′-甲氧基苯基)-N-甲基胺(化合物17)，
N-(3-氯-4-硝基苯基)-N-(4′-甲氧基苯基)-N-甲基胺(化合物18)，
3-溴-4-甲氧基-5-[N-甲基-N-(4-甲氧基苯基)]氨基-苯甲酸甲酯(化合物19)，
N，N-二甲基-3-溴-4-甲氧基-5-[N-(4-甲氧基苯基)-N-甲基)]氨基-苯甲酰胺(化合物20)，
3-溴-5-[N-甲基-N-(4-甲氧基苯基)]氨基-苯甲酸甲酯(化合物21)，
N-(3-溴-5-氰基-2-甲氧基)苯基-N-(4-甲氧基苯基)甲基胺(化合物22)，
3，4-二甲氧基-5-[N-甲基-(4-甲氧基苯基)]氨基-苯甲酸甲酯(化合物23)，
3，4-二甲氧基-5-[N-甲基-(3-羟基-4-甲氧基苯基)氨基]苯甲酸甲酯(化合物24)，
N，N-二甲基-3-(5-甲酰基-2-呋喃基)-5-[N′-(4′-甲氧基)苯基-N′-甲基]氨基-苯甲酰胺(化合物25)，
6-氯-3-氰基-2-[N-(4′-甲氧基苯基)-N-乙酰基]氨基-吡啶(化合物26)，
1-甲氧基-2-[N-(4-甲氧基苯基)-N-甲基]氨基-4-硝基萘(化合物27)，
6-甲氧基-2-[N-(4′-甲氧基苯基)-N-甲基-]氨基-吡啶-3-甲酰 胺，
6-甲氧基-2-[N-(4′-甲氧基苯基)-N-甲基]氨基-吡啶-3-(N，N-二甲基)甲酰胺，
6-甲氨基-2-[N-(4′-甲氧基苯基)-N-甲基-)氨基吡啶-3-甲酸甲酯，
2-(4′-甲氧基苯基甲基氨基)-6-甲氨基吡啶-3-(N-甲基)甲酰胺，
2-(4′-甲氧基苯基甲基氨基)-6-甲氨基吡啶-3-(N，N-二甲基)甲酰胺，
6-(5-羟甲基-2-呋喃基)-2-[N-(4′-甲氧基苯基)-N-甲基]氨基-吡啶-3-甲酸甲酯，
6-(5-甲基-2-吡咯基)-2-[N-(4′-甲氧基苯基)-N-甲基]氨基-吡啶-3-甲酸甲酯，
N-甲基-3-(4-甲氧基苯基)氨基-4-甲氧基萘甲酸甲酯，
N-甲基-3-(4-甲氧基苯基甲基)氨基-4-甲氧基萘甲酰胺，
7-(4-甲氧基苯基甲基氨基)-1-甲基-6-硝基-2，3-二氢-1，8-萘啶-4-酮，和
7-(4-甲氧基苯基甲基氨基)-1-甲基-4-羰基-2，3-二氢-1，8-萘啶-6-羧酸甲酯。
本发明式I化合物可通过以下反应路线制备得到：
其中R1，R2，R3，L，Ar，X，Y和Z的定义如上述通式I中所述。
在碱的存在下，使通式V的取代的卤代物与通式VI的取代的胺类化合物在溶剂中反应，生成通式I化合物。
更具体地说，在氢化钾，氢化钠，碳酸铯，三乙胺，吡啶，N，N-二甲氨基吡啶，或碳酸钾/卤代亚铜，碳酸钾/双二苯基膦基二茂铁二氯化钯/1，1′-双二苯基膦基二茂铁，叔丁醇钠/双二苯基膦基二茂铁二氯化钯/1，1′-双二苯基膦基二茂铁，碳酸铯/双二苯基膦基二茂铁二氯化钯/1，1′-双二苯基膦基二茂铁，碳酸钾/醋酸钯/X-Phos，碳酸铯/醋酸钯/X-Phos，叔丁醇钠/醋酸钯/X-Phos存在下，使取代的卤代物(通式II)与取代的胺类化合物(通式III)在溶剂例如DMF，乙腈，THF，甲苯，1，4-二氧六环或DMSO中，冰浴至220℃以下，反应5分钟-24小时，反应物V/VI投料摩尔比为1∶1.1-1∶4。
该反应也可在微波条件下进行，碱和反应物投料量比例同上所述，在溶剂例如DMF，DMSO，叔丁醇，甲醇，乙醇，乙腈或1，4-二氧六环中，反应5-60分钟。
本发明化合物在多种癌细胞试验中显示出强抑制活性。如下文所述，化合物在肺癌细胞(A549)，前列腺癌细胞(DU145)，鼻咽癌细胞(KB)耐药性鼻咽癌细胞(KB-VIN)和白血病癌细胞的抑制活性试验中显示出与阳性对照药物[高三尖杉酯(Homoharringtonine)，紫杉醇(Paclitaxel)，伊马替尼(Gleevec)]相当或更好的抑制活性。特别值得注意的是其中一些化合物对具有耐药性的KB-VIN细胞也显示出很强的抑制活性。这些数据提示我们对本发明化合物进行深入研究将有望开发出新抗癌药物，或有与上述阳性对照药类似的作用机制或作用靶点的。
本发明化合物既可以其本身也可以其可药用盐或溶剂化物的形式使用。通式I化合物的可药用盐包括与药学上可接受的无机酸或有机酸，或者与可药用的无机碱或有机碱形成的盐。合适的酸加成盐的例子包括与盐酸，氢溴酸，硫酸，磷酸，硝酸，高氯酸，富马酸，乙酸，丙酸，琥珀酸，羟基乙酸，甲酸，乳酸，马来酸，酒石酸，柠檬酸，扑酸，丙二酸，羟基马来酸，苯乙酸，谷氨酸，苯甲酸，水杨酸，富马酸，甲苯磺酸，甲磺酸，萘-2-磺酸，苯磺酸，羟基萘甲酸，氢碘酸， 苹果酸，鞣酸等形成的盐。合适的碱加成盐的例子包括与钠，锂，钾，镁，铝，钙，锌，N，N′-二苄基乙二胺，氯代普鲁卡因，胆碱，二乙醇胺，乙二胺，N-甲基葡糖胺和普鲁卡因等形成的盐。本文中涉及到本发明化合物时，包括通式I化合物及其可药用盐或溶剂化物。
根据本发明，本发明通式I化合物可与常规药用载体或赋形剂组成药物组合物。该药物组合物可通过例如口服或非肠道等途径给药。本发明的药物组合物可按本领域常规方法制备成各种剂型，包括但不限于片剂，胶囊，溶液，悬浮液，颗粒剂或注射剂等，经例如口服或非肠道等途径给药。
另外需要指出，本发明化合物使用剂量和使用方法取决于诸多因素，包括患者的年龄，体重，性别，自然健康状况，营养状况，化合物的活性强度，服用时间，代谢速率，病症的严重程度以及诊治医师的主观判断。优选的使用剂量介于0.01-100mg/kg体重/天。
具体实施方式
下面的实施例用于进一步说明本发明，但其不意味着本发明仅限于此。
方法一：将NaH(2.3mmol，60％)分批加入到N-烷基-单或多取代基苯胺(2.3mmol)的1，4-二氧六环(2.5ml)溶液中，室温搅拌5分钟后加入N-甲基吡咯烷酮(NMP，2.5ml)，并继续搅拌10分钟，然后加入取代嘧啶(1.5mmol)。将该混合物加热到120℃，搅拌4小时。将反应物倒入冰水中，调pH至3，抽滤，红外灯干燥，粗品经硅胶柱色谱(洗脱液∶二氯甲烷；或石油醚∶乙酸乙酯梯度洗脱，石油醚为5％-80％)分离。
方法二：将取代嘧啶(1.0mmol)，N-烷基单或多取代的苯胺(1.2mmol)，盐酸(2N，0.75ml)和乙醇(3.0ml)/水(6.0ml)的混合液回流4小时。然后将反应物倒入冰水中，滴加饱和NaHCO3溶液直至不再有沉淀物析出，抽滤，红外灯干燥。粗品经硅胶柱色谱(洗脱液∶二氯甲烷；或石油醚∶乙酸乙酯梯度洗脱，石油醚为5％-80％)分离。
方法三：2-氯-6-取代基-3-取代基吡啶(0.5mmol)，N-烷基单或多取代的苯胺(0.75mmol)和无水碳酸钾(1.0mmol)加入到t-BuOH(3ml)中，微波条件140-180℃反应15-30分钟。反应结束后加入少量水，用2N盐酸调pH至3，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥。减压除去溶剂，粗品硅胶柱色谱(洗脱液∶二氯甲烷；或石油醚∶乙酸乙酯梯度洗脱，石油醚为5％-80％)分离。
方法四：将溴取代的通式V化合物(1.0mmol)，单或多取代的苯胺(1.2mmol)，1，1′-双二苯基膦基二茂铁二氯化钯(39mg，0.05mmol))和1，1′-双二苯基膦基二茂铁(84mg，0.15mmol)在8ml甲苯中，在氮气保护下加入t-BuONa(165mg，1.56mmol)或Cs2CO3(456mg，1.4mmol)，常温加热至100℃反应24h。加入少量石油醚，通过少量硅胶除去不溶物，用二氯甲烷洗脱。浓缩后粗品经硅胶柱色谱分离得中间产物。取该中间产物(0.50mmol)和碘甲烷0.28ml(1.5mmol)溶于7ml DMF中，冰浴冷却到0℃，分批加入60mg氢化钠(60％，1.5mmol)，在此温度下搅1小时。将反应物倒入冰水中，析出固体，抽滤，粗品经硅胶柱色谱(洗脱液∶二氯甲烷；或石油醚∶乙酸乙酯梯度洗脱，石油醚为5％-80％)分离得纯品。
方法五：将溴取代的通式V化合物(1.0mmol)，(1.0mmol)，单或多取代的苯胺(1.2mmol)，醋酸钯(6mg，0.03mmol))，X-Phos(17mg，0.04mmol)，硅藻土(228mg)，t-BuONa(165mg，1.56mmol)或Cs2CO3(456mg，1.4mmol)，加入到2.5ml甲苯和0.5ml叔丁醇中。微波条件下反应30-60分钟。粗品经硅胶柱色谱分离得中间产物。取该中间产物(0.50mmol)和碘甲烷0.28ml(1.5mmol)溶于7ml DMF中，冰浴冷却到0℃，分批加入60mg氢化钠(60％，1.5mmol)，在此温度下搅1小时。将反应物倒入冰水中，析出固体，抽滤，粗品经硅胶柱色谱(洗脱液∶二氯甲烷；或石油醚∶乙酸乙酯梯度洗脱，石油醚为5％-80％)分离得纯品。
实施例1：2-氯-4-[N-(4′-甲氧基苯基)-N-甲基]氨基-嘧啶(化合 物1)
2，4-二氯嘧啶(150mg，1.0mmol)，N-甲基-4-甲氧基苯胺(165mg，1.2mmol)，NaHCO3(2N，0.75ml)在乙醇(4.0ml)中回流2小时。减压除去乙醇，将反应物倒入冰水中，用2N盐酸调pH至3，AcOEt萃取，饱和盐水洗涤，无水硫酸钠干燥。过滤且减压除去溶剂得到粗品，经硅胶柱色谱分离得到产物176mg，产率70％；白色固体，熔点：119-121℃。
1H NMR δppm 3.45(3H，s，NCH3)，3.85(3H，s，OCH3)，6.08(1H，d，J＝6.0Hz，PyH-5)，6.98(2H，d，J＝8.8Hz，ArH-2′，6′)，7.14(2H，d，J＝8.8Hz，ArH-3′，5′)，7.85(1H，d，J＝6.0Hz，PyH-4)。
LCMS-ESI m/z(％)：250(M+1+，100)，252(M+3+，33)。
实施例2：2，6-二氯-4-[N-(4′-甲氧基苯基)-N-甲基]氨基-嘧啶(化合物2，方法一)
产率74％，产物为白色固体，熔点123-124℃。1H NMR δppm 3.45(3H，s，NCH3)，3.86(3H，s，OCH3)，6.07(1H，s，PyH-5)，7.00(2H，d，J＝8.8Hz，ArH-2′，6′)，7.13(2H，d，J＝8.8Hz，ArH-3′，5′)。MS m/z(％)：284(M+1+，100)，286(M+3+，70)，288(M+5+，10)。
实施例3：4，6-二氯-2-[N-(4′-甲氧基苯基)-N-甲基]氨基-嘧啶(化合物3，方法一)
白色固体37mg，产率：14％，熔点：91-92℃。
1H NMR δppm 3.48(3H，s，NCH 3)，3.83(3H，s，OCH3)，6.61(1H，s，PyH-5)，6.93(2H，d，J＝8.8Hz，ArH-2′，6′)，7.18(2H，d，J＝8.8Hz，ArH-3′，5′)。
MS m/z(％)：284(M+1+，100)，286(M+3+，65)，288(M+5+，10)。
实施例4：2-氨基-6-氯-4-[N-(4′-甲氧基苯基)-N-甲基]氨基-嘧啶(化合物4，方法二)
淡灰色固体160mg，产率：60％，熔点：208-211℃。
1H NMR(DMSO)δppm 3.29(3H，s，NCH 3)，3.78(3H，s，OCH3)，5.33(1H，s，PyH-5)，6.63(2H，s，NH2)，7.02(2H，d，J＝9.2Hz，ArH-2′，6′)，7.22(2H，d，J＝9.2Hz，ArH-3′，5′)。
MS-ESI m/z(％)：265(M+H+，100)，267(M+3+，34)。
实施例5：6-氨基-2-氯-4-[N-(4′-甲氧基苯基)-N-甲基]氨基-嘧啶(化合物5，方法二)
淡灰色固体177mg，产率：80％，熔点：223-225℃。
1H NMR(DMSO)δppm 3.28(3H，s，NCH 3)，3.78(3H，s，OCH3)，5.33(1H，s，PyH-5)，6.64(2H，s，NH2)，7.02(2H，d，J＝9.2Hz，ArH-2′，6′)，7.22(2H，d，J＝9.2Hz，ArH-3′，5′)。
MS m/z(％)：265(M+H+，100)，267(M+3+，34)。
实施例6：6-氯-2-[N-(4′-甲氧基苯基)-N-甲基]氨基-3-硝基吡啶(化合物6，方法三)
橙色固体，重113mg，产率：77％；熔点：86-88℃。
1H NMR(CDCl3)δppm 3.54(3H，s，NCH3)，3.78(3H，s，OCH3)，6.76(1H，d，J＝8.4Hz，PyH-5)，6.83(2H，d，J＝9.2Hz，ArH-2′，6′)，7.00(2H，d，J＝9.2Hz，ArH-3′，5′)，7.88(1H，d，J＝8.4Hz，PyH-4)。
MS m/z(％)：294(M+H+，100)，296(M+3+，32)。
实施例7：6-氯-2-[N-烯丙基-N-(4′-甲氧基苯基)]氨基-3-硝基吡啶(化合物7，方法三)
红色油状物，重99mg，产率：58％。
1H NMR(CDCl3)：δppm 3.77(3H，s，OCH3)，4.63(2H，d，J＝5.6Hz，NCH2CHCH2)，5.16(1H，dd，J＝17.6和1.2Hz，＝CH)，5.18(1H，dd，J＝17.2和1.2Hz，＝CH)，5.99(1H，m，NCH2CHCH2)，6.76(1H，d，J＝8.4Hz，PyH-5)，6.81(2H，d，J＝9.2Hz，ArH-2′，6′)，6.98(2H，d，J＝9.2Hz，ArH-3′，5′)，7.87(1H，d，J＝8.4Hz，PyH-4)。
MS m/z(％)：320(M+1+，100)，322(M+3+，25)。
实施例8：6-氯-2-[N-环戊基-N-(4′-甲氧基苯基)]氨基-3-硝基吡啶(化合物8，方法三)
桔黄色固体，重88mg，产率：50％，熔点：92-93℃。
1H NMR(CDCl3)：δppm 1.49-1.61(6H，m，3*CH2)，2.02(2H，m，CH2)，3.79(1H，s，OCH3)，4.93(1H，m，CH)，6.70(1H，d，J＝8.0Hz，PyH-5)，6.83(2H，d，J＝9.2Hz，ArH-2′，6′)，6.93(2H，d，J＝8.8Hz，ArH-3′，5′)，7.69(1H，d，J＝8.0Hz，PyH-4)。
MS m/z(％)：348(M+，100)，350(M+3+，32)。
实施例9：6-甲氧基-2-[N-(4′-甲氧基苯基)-N-甲基]氨基-3-硝基吡啶(化合物9)
N-甲基-6-氯-2-(4′-甲氧基苯基氨基)-3-硝基吡啶(114mg，0.4mmol)，甲醇钠(53mg，1.0mmol)和MeOH(3ml)室温搅拌2小时，倒入冰水中，析出黄色固体，过滤干燥得105mg化合物10，产率：72％；熔点：52-54℃。
1H NMR(CDCl3)δppm 3.54(3H，s，NCH3)，3.78(3H，s，OCH3)，3.99(3H，s，OCH 3)，6.19(1H，d，J＝8.8Hz，PyH-5)，6.83(2H，d，J＝8.8Hz，ArH-2′，6′)，7.02(2H，d，J＝9.2Hz，ArH-3′，5′)，8.03(1H，d，J＝8.8Hz，PyH-4)。
MS m/z(％)：290(M+H+，100)。
实施例10：2-[N-(4′-甲氧基苯基)-N-甲基]氨基-6-甲基-3-硝基吡啶(化合物10，方法三)
黄色固体，重77mg，产率：56％；熔点：97-98℃。
1H NMR(CDCl3)：δppm 2.53(3H，s，CH 3)，3.53(3H，s，NCH3)，3.77(3H，s，OCH3)，6.64(1H，d，J＝8.0Hz，PyH-5)，6.82(2H，d，J＝9.2Hz，ArH-2′，6′)，6.99(2H，d，J＝9.2Hz，ArH-3′，5′)，7.86(1H，d，J＝8.0Hz，PyH-4)。
MS m/z(％)：274(M+，100)。
实施例11：6-氯-3-氰基-2-[N-(4′-甲氧基苯基)-N-甲基]氨基-吡啶(化合物11，方法三)
白色固体，32mg，产率：24％，熔点：137-138℃。
1H NMR(CDCl3)δppm 3.47(3H，s，NCH3)，3.85(3H，s，OCH3)，6.18(1H，d，J＝8.0Hz，PyH-5)，6.99(2H，d，J＝8.8Hz，ArH-2′，6′)，7.14(2H，d，J＝8.8Hz，ArH-3′，5′)，7.38(1H，d，J＝8.8Hz，PyH-4)。
MS m/z(％)：274(M+1+，100)，276(M+3+，31)。
实施例12：2-氯-3-氰基-6-[N-(4′-甲氧基苯基)-N-甲基]氨基-吡啶(化合物12，方法三)
白色固体，40mg，产率：32％，熔点：135-136℃。
1H NMR(CDCl3)δppm 3.45(3H，s，NCH3)，3.84(3H，s，OCH3)，6.66(1H，d，J＝8.0Hz，PyH-5)，6.69(2H，d，J＝8.8Hz，ArH-2′，6′)，7.19(2H，d，J＝8.8Hz，ArH-3′，5′)，7.55(1H，d，J＝8.0Hz，PyH-4)。
MS m/z(％)：274(M+H+，100)，276(M+3+，36)；
实施例13：2-[N-(4′-甲氧基苯基)-N-甲基]氨基-6-(N-甲氨基)-3-硝基吡啶(化合物13)
化合物6(200mg，0.68mmol)，甲醇胺(2.5ml，30％醇溶液)和MeOH(3ml)回流反应5小时，冷却析出固体，过滤干燥得到产物。红色固体，重145mg，产率：74％；熔点：169-170℃。
1H NMR(CDCl3)ppm 3.03(3H，d，J＝5.2Hz，NHCH3)，3.49(3H，s，NCH3)，3.76(3H，s，OCH3)，5.01(1H，s，NH)，5.87(1H，d，J＝8.8Hz，PyH-5)，6.81(2H，d，J＝8.8Hz，ArH-2′，6′)，7.02(2H，d，J＝8.8Hz，ArH-3′，5′)，8.00(1H，d，J＝9.2Hz，PyH-4)。
MS m/z(％)：289(M+H+，100)。
实施例14：6-氯-2-[N-(4′-甲氧基苯基)-N-甲基]氨基-吡啶-3-甲酸甲酯(化合物14，方法三)
淡黄色固体，重93mg，产率：60％，熔点：97-98℃。
1H NMR(CDCl3)ppm 3.28(3H，s，NCH3)，3.47(3H，s，OCH3)，3.78(3H，s，OCH3)，6.74(1H，d，J＝8.0Hz，PyH-5)，6.84(2H，d，J＝9.2Hz，ArH-2′，6′)，7.02(2H，d，J＝8.8Hz，ArH-3′，5′)，7.61(1H，d，J＝8.0Hz，PyH-4)。
MS m/z(％)：275(M-31，100)，277(M+2-31，26)，307(M+H+，81)，309(M+3+，23)。
实施例15：6-氯-2-[N-(4′-甲氧基苯基)-N-乙酰基]氨基-3-硝基吡啶(化合物15)
将N-甲基-4-甲氧基苯基氨基-3-硝基-6-氯吡啶(281mg，1.0mmol)溶解到8.0ml乙酸酐中，加入1滴浓硫酸，加热到90℃，18小时。将反应物倒入冰水中，氢氧化钠水液调至中性，析出沉淀物，抽滤干燥，柱色谱分离得到产物。
黄色固体，重249mg，产率77％，熔点：146-147℃。
1H NMR δppm 2.01(3H，s，CH3)，3.86(3H，s，OCH3)，6.99(2H，d，J＝8.8Hz，ArH-2′，6′)，7.31(1H，d，J＝8.4Hz，PyH-5)，7.49(2H，d，J＝8.8Hz，ArH-3′，5′)，8.22(1H，d，J＝8.4Hz，PyH-4)。
MS m/z(％)：322(M+，100)，324(M+2+，28)。
实施例16：6-甲氧基-2-[N-(4′-甲氧基苯基)-N-甲基]氨基-吡啶-3-甲酸甲酯(化合物16)
6-甲氧基-2-N-(4′-甲氧基苯基)氨基吡啶-3-甲酸甲酯(60mg，0.21mmol)和碘甲烷0.04ml(0.63mmol)溶于3ml DMF中，冰浴冷却到0℃，分批加入25mg氢化钠(60％，0.63mmol)，在此温度下搅1小时。将反应物倒入冰水中，析出固体，抽滤，柱层析分离得纯品。
白色固体，重62mg，产率：98％，熔点：78-80℃。
1H NMR(CDCl3)δppm 3.28(3H，s，NCH3)，3.48(3H，s，OCH3)，3.78(3H，s，OCH3)，3.96(3H，s，OCH3)，6.18(1H，d，J＝8.4Hz，PyH-5)，6.83(2H，d，J＝8.8Hz，ArH-2′，6′)，7.03(2H，d，J＝ 9.2Hz，ArH-3′，5′)，7.71(1H，d，J＝8.0Hz，PyH-4)。
MS m/z(％)：271(M-31，100)，303(M+H+，19).
实施例17：N-(5-氯-2-硝基苯基)-N-(4′-甲氧基苯基)-N-甲基胺(化合物17)
1，5-二氯-3-硝基-苯(98mg，0.5mmol)，N-甲基-4-甲氧基苯胺(104mg，0.75mmol)和无水碳酸钾(138mg，1.0mmol)在DMF(3ml)中，微波180℃，15分钟。加入少量水，2N盐酸调pH至3，二氯甲烷萃取，饱和盐水洗，无水硫酸钠干燥。过滤除去溶剂得粗品，经制备层析色谱分离得产物。
红色油状物，重50mg，产率34％。
1H NMR(CDCl3)δppm 3.29(3H，s，NCH3)，3.78(3H，s，OCH3)，6.82(2H，d，J＝8.8Hz，ArH-2′，6′)，6.92(2H，d，J＝8.8Hz，ArH-3′，5′)，6.96(1H，dd，J＝2.4Hz和8.4Hz，ArH-4)，7.17(1H，d，J＝2.4Hz，ArH-6)，7.67(1H，d，J＝8.4Hz，ArH-3)。
MS m/z(％)：293(M+1+，100)，295(M+3+，27)。
实施例18：N-(3-氯-4-硝基苯基)-N-(4′-甲氧基苯基)-N-甲基胺(化合物18)
1，5-二氯-3-硝基-苯(197mg，0.5mmol)，N-甲基-4-甲氧基苯胺(208mg，0.75mmol)加入到少量DMF中，冰浴冷却下分批加入t-BuOK(134mg，1.2mmol)，之后在冰浴下搅拌30min。加入少量水，2N盐酸调pH至3，二氯甲烷萃取，饱和盐水洗，无水硫酸钠干燥。过滤除去溶剂得粗品，制备层析色谱分离后用甲醇重结晶得目标产物。
黄色固体，重164mg，产率：56％；熔点102-103℃。
1H NMR(CDCl3)：δppm 3.34(3H，s，NCH3)，3.86(3H，s，OCH3)，6.49(1H，dd，J＝5.6Hz和9.6Hz，ArH-4)，6.64(1H，d，J＝5.6Hz，ArH-6)，6.98(2H，d，J＝8.8Hz，ArH-2′，6′)，7.12(2H，d，J＝8.8Hz，ArH-3′，5′)，7.97(1H，d，J＝9.6Hz，ArH-5)。
MS m/z(％)：293(M+1+，100)，295(M+3+，35)。
实施例19：3-溴-4-甲氧基-5-[N-甲基-N-(4-甲氧基苯基)]氨基-苯甲酸甲酯(化合物19，方法四)
黄色油状物，重75mg，产率：59％。
1H NMR(CDCl3)：δppm 3.23(3H，s，NCH3)，3.73(3H，s，OCH3)，3.78(3H，s，COOCH3)，3.79(3H，s，OCH3)，3.87(3H，s，OCH3)，6.78(2H，d，J＝9.2Hz，ArH-2′，6′)，6.82(2H，d，J＝9.2Hz，ArH-3′，5′)，7.75(1H，d，J＝2.0Hz，ArH-2)，7.99(1H，d，J＝2.0Hz，ArH-5)。
MS m/z(％)：380(M+1+，95)，382(M+3+，100)。
实施例20：N，N-二甲基-3-溴-4-甲氧基-5-[N-(4-甲氧基苯基)-N-甲基)]氨基-苯甲酰胺(化合物20)，
将化合物19(139mg，0.4mmol)溶于10ml乙醇中，加入H2O2(30％，0.16ml)和NaOH(6N，0.06ml)。将混合物加热至40-50℃，4小时， 倒入冰水中，调PH至4-5，乙酸乙酯萃取，饱和盐水洗，无水硫酸钠干燥。减压除去溶剂后得黄褐色固体。将其溶于5ml DMF中，加入碘甲烷(0.06ml，0.98mmol)，冰浴0℃时分批加入氢化钠(60％，50mg，1.25mmol)，在此温度下继续反应1小时。将反应物倒入冰水中，乙酸乙酯萃取，饱和盐水洗，无水硫酸钠干燥。减压除去溶剂后粗品经柱层析得产物。
黄色油状物，重118mg，产率75％；
1H NMR(CDCl3)：δppm 2.98(3H，s，CONCH3)，3.05(3H，s，CONCH3)，3.22(3H，s，NCH3)，3.72(3H，s，OCH3)，3.77(3H，s，OCH3)，6.81(4H，s，ArH-2′，3′，5′，6′)，7.10(1H，d，J＝2.0Hz，ArH-2)，7.37(1H，d，J＝2.0Hz，ArH-5)。
MS m/z(％)：393(M+H+，93)，395(M+3+，100)。
实施例21：3-溴-5-[N-甲基-N-(4-甲氧基苯基)]氨基-苯甲酸甲酯(化合物21，方法四)
黄色油状物，重151mg，产率：58％。
1H NMR(CDCl3)：δppm 3.27(3H，s，NCH3)，3.84(3H，s，OCH3)，3.87(3H，s，OCH3)，6.94(2H，d，J＝9.2Hz，ArH-2′，6′)，6.95(1H，s，ArH-4)，7.10(2H，d，J＝8.8Hz，ArH-3′，5′)，7.29(1H，s，ArH-6)，7.50(1H，s，ArH-5)。
MS m/z(％)：350(M+1+，100)，352(M+3+，90)。
实施例22：N-(3-溴-5-氰基-2-甲氧基)苯基-N-(4-甲氧基苯基)甲基胺(化合物22，方法四)
白色固体，重187mg，产率58％，熔点78-80℃；
1H NMR(CDCl3)：δppm(3H，s，NCH3)，3.73(3H，s，OCH3)，3.79(3H，s，OCH3)，6.84(4H，s，ArH-2′，3′，5′，6′)，7.28(1H，d，J＝2.0Hz，ArH-2)，7.53(1H，d，J＝2.0Hz，ArH-5)。
MS m/z(％)：347(M+H+，92)，349(M+3+，100)。
实施例23：3，4-二甲氧基-5-[N-甲基-(4-甲氧基苯基)]氨基-苯甲酸甲酯(化合物23，方法五)
淡黄色固体，重282mg，产率：85％，熔点：57-59℃。
1H NMR(CDCl3)：δppm 3.22(3H，s，NCH3)，3.71(3H，s，OCH3)，3.77(3H，s，OCH3)，3.87(3H，s，OCH3)，3.90(3H，s，OCH3)，5.57(1H，s，OH)，6.74(2H，d，J＝9.2Hz ArH-2′，6′)，6.80(1H，d，J＝9.2Hz，ArH-3′，5′)，7.40(1H，d，J＝2.0Hz，ArH-6)，7.48(1H，d，J＝2.0Hz，ArH-2)。
LCMS-ESI m/z(％)：332(M+H+，100)。
实施例24：3，4-二甲氧基-5-[N-甲基-(3-羟基-4-甲氧基苯基)氨基]苯甲酸甲酯(化合物24，方法五)
依据方法五得到的3，4-二甲氧基-5-[N-(3′-甲氧基亚甲氧基-4′-甲氧基)苯基-N-甲基]氨基-苯甲酸甲酯加入到异丙醇中，室温下搅拌24h。将反应物倒入冰水中，乙酸乙酯萃取(3×20ml)，有机相用饱和食盐水洗，加入无水硫酸钠干燥。减压除去溶剂后粗品经柱层析得产物。
黄色油状物，重173mg，产率：61％。
1H NMR(CDCl3)：δppm 3.19(3H，s，NCH3)，3.73(3H，s，OCH3)，3.83(3H，s，OCH3)，3.87(3H，s，OCH3)，3.93(3H，s，OCH3)，5.57(1H，s，0H)，6.22(1H，dd，J＝8.4Hz和2.8Hz，ArH-6′)，6.41(1H，d，J＝3.2Hz，ArH-2′)，6.73(1H，d，J＝8.8Hz，ArH-5′)，7.42(1H，d，J＝2.0Hz，ArH-2)，7.50(1H，d，J＝2.0Hz，ArH-5)。
LCMS-ESI m/z(％)：348(M+H+，100)。
实施例25：N，N-二甲基-3-(5-甲酰基-2-呋喃基)-5-[N′-(4′-甲氧基)苯基-N′-甲基]氨基-苯甲酰胺(化合物25)
将依据方法四得到的化合物N，N-二甲基-3-溴-5-[N-(4-甲氧基苯基)-N-甲基]氨基-苯甲酰胺(111mg，0.31mmol)，5-甲酰基-2-呋喃硼酸(56mg，0.40mmol)，碳酸氢钠(81mg，0.97mmol)，四(三苯基膦)化钯(18mg，5％mmol)，N，N-二甲基甲酰胺(1.5ml)和水(1.5ml)氮气保护下140℃微波反应10分钟。将反应物倒入冰水中，乙酸 乙酯萃取(3×20ml)，有机相用饱和食盐水洗，加入无水硫酸钠干燥。减压除去溶剂后粗品经柱层析得产物。
黄色油状物，重71mg，产率60％。
1H NMR(CDCl3)：δppm 2.97(3H，s，C(O)NCH3)，3.08(3H，s，C(O)NCH3)，3.33(3H，s，NCH3)，3.84(3H，s，OCH3)，3.87(3H，s，OCH3)，6.73(1H，dd，J＝1.2Hz和1.2Hz，ArH-4)，6.77(1H，d，J＝3.6Hz，FuH-3)，6.93(2H，d，J＝8.8Hz，ArH-2′，6′)，7.13(2H，d，J＝8.8Hz，ArH-3′，5′)，7.17(1H，m，ArH-6)，7.19(1H，m，ArH-5)，7.30(1H，s，FuH-3)。
MS m/z(％)：379(M+1+，100)
实施例26：6-氯-3-氰基-2-[N-(4′-甲氧基苯基)-N-乙酰基]氨基-吡啶(化合物26)
将N-甲基-4-甲氧基苯基氨基-3-硝基-6-氯吡啶(281mg，1.0mmol)溶解到8.0ml乙酸酐中，加入1滴浓硫酸，加热到90℃，18小时。将反应物倒入冰水中，氢氧化钠水液调至中性，析出沉淀物，抽滤干燥，柱色谱分离得到纯产物249mg，产率77％，熔点：146-147℃。
1H NMRδppm 2.01(3H，s，CH3)，3.86(3H，s，OCH3)，6.99(2H，d，J＝8.8Hz，ArH-2′，6′)，7.31(1H，d，J＝8.4Hz，PyH-5)，7.49(2H，d，J＝8.8Hz，ArH-3′，5′)，8.22(1H，d，J＝8.4Hz，PyH-4)。
MS m/z(％)：322(M+，100)，324(M+2+，28)。
实施例27：1-甲氧基-2-[N-(4-甲氧基苯基)-N-甲基]氨基-4-硝基萘(化合物27，方法四)
红色油状物，重166mg，产率49％。
1H NMR δppm 3.37(3H，s，NCH3)，3.75(3H，s，OCH3)，4.16(3H，s，OCH3)，3.79(3H，s，OCH3)，3.87(3H，s，OCH3)，6.69(2H，d，J＝9.2Hz，ArH-2′，6′)，6.78(2H，d，J＝9.2Hz，ArH-3′，5′)，7.61(2H，m，ArH-6，7)，7.71(1H，s，ArH-3)，7.97(1H，d，J＝8.0Hz，ArH-8)，8.34(1H，d，J＝8.4Hz，ArH-5)。
MS m/z(％)：361(M+H+，100)。
实施例28.抑制癌细胞生长试验
所用的人体癌细胞(A549，MCF-7，KB，KB-VIN等)被置于单一培养基(RPMI-1640含10％(v/v)小牛血清)中，用显微镜对细胞在培养液中的形态特征和生长状况进行检查。细胞置于2.5cm的培养皿中，37℃，含5％CO2潮湿空气中培养。细胞系贴壁生长。样品配制和稀释及将其接种于细胞液中的过程应为无菌操作。测试样品通常用DMSO溶解，-70℃保存。在96孔培养板中，每个孔置于不同浓度的测试样品和约5000-20000个细胞，放置72小时。抑制癌细胞生长的GI50值由SRB(磺酰罗丹明B)方法确定。抗癌药物高三尖杉酯碱和VP16作为阳性对照。
A549：肺癌细胞；DU145：前列腺癌细胞；KB：鼻咽癌细胞；KB-VIN：有抗药性的鼻咽癌细胞。GI50值为抑制半数癌细胞生长的有效剂量，表示抗癌活性。本发明涉及的化合物的部分抗癌活性测试结果见表1。
表1.通式I化合物及其抗癌活性数据
说明：A549：肺癌细胞；DU145：前列腺癌细胞；KB：鼻咽癌细胞；KB-VIN：有抗药性的鼻咽癌细胞；K562：人粒细胞性白血病细胞。抑制半数癌细胞生长的有效剂量(GI50)表示抗癌活性。NA：无抑制活性。