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1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201610706196.5 (22)申请日 2016.08.23 (71)申请人 安徽天达谱申生物科技有限公司 地址 239001 安徽省滁州市乌衣镇安宁路 155号 （滁州市天达汽车部件有限公司 内） (72)发明人 张殿甫孙振朱玮贺笑笑 (51)Int.Cl. C07K 1/06(2006.01) C07K 1/04(2006.01) (54)发明名称 一种高效自动化的多肽合成方法 (57)摘要 本发明公开了一种高效自动化的多肽合成 方法， 涉及化学合成领域。 本发明按如下。
2、步骤进 行： 使用树脂作为不溶性的固相载体； 将一个氨 基被封闭基团保护的氨基酸溶剂通过合成仪自 动加入到反应器中， 使得一个氨基被封闭基团保 护的氨基酸共价连接在固相载体上； 完成后， 通 过合成仪中蠕动泵注入加入相应序列氨基酸； 将 完成后的废液排出； 合成半成品加入溶剂进行清 洗， 清洗后将废液排出； 循环添加、 反应、 合成过 程， 直至达到所需要的肽链长度； 通过加入相应 的溶剂反应脱去保护基， 并进行清洗， 得到了合 成好的氨基酸多肽产品。 本发明操作简单， 合成 速度快， 合成效率高。 权利要求书1页 说明书2页 CN 106317163 A 2017.01.11 CN 1063。
3、17163 A 1.一种高效自动化的多肽合成方法， 其特征在于， 按如下步骤进行合成反应： 步骤 （1） 、 使用树脂作为不溶性的固相载体， 将其投入合成仪反应器中， 并启动合成仪； 步骤 （2） 、 将一个氨基被封闭基团保护的氨基酸溶剂通过合成仪自动加入到反应器中， 使得一个氨基被封闭基团保护的氨基酸共价连接在固相载体上； 通过加入相应的溶剂反应 脱掉氨基的保护基， 将第一个氨基酸接到了固相载体上； 步骤 （3） 、 在步骤 （2） 反应完成后， 通过合成仪中蠕动泵注入相应序列氨基酸溶液， 并吹 入氮气鼓泡混合， 合成过程中采用微波加热， 提高合成速度； 固相载体上的氨基酸中的氨基 被封闭的。
4、第二个氨基酸的羧基通过活化反应被活化， 羧基被活化的第二个氨基酸再与已接 在固相载体的第一个氨基酸的氨基反应形成肽键， 使得固相载体上生成一个带有保护基的 氨基酸肽链； 步骤 （4） 、 通过合成仪废液排放系统将步骤 （3） 完成后的废液排出； 步骤 （5） 、 通过合成仪的清洗管路对步骤 （4） 反应后的合成半成品加入溶剂进行清洗， 清洗后将废液排出； 步骤 （6） 、 将步骤 （5） 完成后的反应器中通过合成仪加入相关溶剂脱掉多肽合成物上氨 基的保护基， 然后进行废液排放， 废液排放完成后加入溶剂进行清洗操作； 步骤 （7） 、 将步骤 （6） 完成后的反应器中通过加料系统加入对应序列的合。
5、成氨基酸， 控 制加入量及合成温度， 完成合成反应后， 将废液排出； 步骤 （8） 、 循环重复步骤 （4） 、（5） 、（6） 、（7） ， 使肽链从C端向N端生长， 直至达到所需要长 度的肽链； 步骤 （9） 、 通过加入相应的溶剂反应脱去保护基并水解肽链和固相载体之间的酯键， 并 进行清洗， 得到了合成好的氨基酸多肽产品。 2.根据权利要求1所述的一种高效自动化的多肽合成方法， 其特征在于： 在多肽合成加 料过程中， 采用蠕动泵进行加料， 通过蠕动泵高精度控制加料量， 大大减少了反应因加料不 精确所导致的反应不充分， 副反应增多所导致的杂质过多及分离提纯困难； 在合成多肽的 反应过程中，。
6、 通过微波设备通入微波， 提高反应瓶内试剂的温度， 在反应器内布置多个反应 瓶同时进行合成反应， 采用转盘带动多个反应瓶绕微波发生器旋转， 达到均衡温度下进行 合成反应， 采用红外温度传感器进行检测反应环境温度， 根据实测反应环境温度对微波进 行调整以控制温度在合理反应内。 权利要求书 1/1 页 2 CN 106317163 A 2 一种高效自动化的多肽合成方法 技术领域 0001 本发明涉及化学合成领域， 尤其涉及一种多肽合成方法。 背景技术 0002 多肽合成通过在合成仪中依次加入合成物质， 对氨基酸进行加肽链合成， 形成所 需序列的多肽产物。 传统多肽合成工艺中， 采用普通合成仪， 通。
7、过简单控制实现依次加料合 成， 合成效率低， 产量小。 发明内容 0003 本发明的目的是解决上述不足， 提供一种高效自动化的多肽合成方法。 0004 本发明提供的一种高效自动化的多肽合成方法， 其具体步骤如下： 步骤 （1） 、 使用树脂作为不溶性的固相载体， 将其投入合成仪反应器中， 并启动合成仪。 0005 步骤 （2） 、 将一个氨基被封闭基团保护的氨基酸溶剂通过合成仪自动加入到反应 器中， 使得一个氨基被封闭基团保护的氨基酸共价连接在固相载体上。 通过加入相应的溶 剂反应脱掉氨基的保护基， 将第一个氨基酸接到了固相载体上。 0006 步骤 （3） 、 在步骤 （2） 反应完成后， 通。
8、过合成仪中蠕动泵注入相应序列氨基酸溶液， 并吹入氮气鼓泡混合， 合成过程中采用微波加热， 提高合成速度； 固相载体上的氨基酸中的 氨基被封闭的第二个氨基酸的羧基通过活化反应被活化， 羧基被活化的第二个氨基酸再与 已接在固相载体的第一个氨基酸的氨基反应形成肽键， 使得固相载体上生成一个带有保护 基的氨基酸肽链。 0007 步骤 （4） 、 通过合成仪废液排放系统将步骤 （3） 完成后的废液排出。 0008 步骤 （5） 、 通过合成仪的清洗管路对步骤 （4） 反应后的合成半成品加入溶剂进行清 洗， 清洗后将废液排出。 0009 步骤 （6） 、 将步骤 （5） 完成后的反应器中通过合成仪加入相关。
9、溶剂脱掉多肽合成物 上氨基的保护基， 然后进行废液排放， 废液排放完成后加入溶剂进行清洗操作。 0010 步骤 （7） 、 将步骤 （6） 完成后的反应器中通过合成仪蠕动泵加料系统加入对应序列 的合成氨基酸， 控制加入量及合成温度， 完成合成反应后， 将废液排出。 0011 步骤 （8） 、 循环重复步骤 （4） 、（5） 、（6） 、（7） ， 使肽链从C端向N端生长， 直至达到所需 要肽链的长度。 0012 步骤 （9） 、 通过加入相应的溶剂反应脱去保护基并水解肽链和固相载体之间的酯 键， 并进行清洗， 得到了合成好的氨基酸多肽产品。 0013 本发明在多肽合成加料过程中， 采用蠕动泵进。
10、行加料， 通过蠕动泵高精度控制加 料量， 大大减少了反应因加料不精确所导致的反应不充分， 副反应增多所导致的杂质过多 及分离提纯困难， 提高了合成产品质量。 本发明在合成多肽的反应过程中， 通过微波设备通 入微波， 提高反应瓶内试剂的温度， 提高反应速度， 在反应器内布置多个反应瓶同时进行合 成反应， 采用转盘带动多个反应瓶绕微波发生器旋转， 达到均衡温度下进行合成反应， 采用 说明书 1/2 页 3 CN 106317163 A 3 红外温度传感器进行检测反应环境温度， 根据实测反应环境温度对微波进行调整以控制温 度在合理反应内； 通过微波加热提高反应环境温度以及在反应器中布置多个反应瓶实现。
11、了 反应高效及批量化生产， 大大提升了合成的效率， 此合成方法是普通多肽合成设备的10倍 以上， 并且微波环境下能合成部分难合成的多肽链。 0014 本发明具有如下有益效果： 生产工艺简单， 操作方便； 合成过程中通过微波加温， 提高合成速度， 合成效率高； 通过蠕动泵高精度控制加料， 合成充分， 杂质少， 合成产品纯度 高， 产量大。 具体实施方式 0015 本发明提供的一种高效自动化的多肽合成方法， 其具体步骤如下： 步骤 （1） 、 使用树脂作为不溶性的固相载体， 将其投入合成仪反应器中， 并启动合成仪。 0016 步骤 （2） 、 将一个氨基被封闭基团保护的氨基酸溶剂通过合成仪自动加入。
12、到反应 器中， 使得一个氨基被封闭基团保护的氨基酸共价连接在固相载体上。 通过加入相应的溶 剂反应脱掉氨基的保护基， 将第一个氨基酸接到了固相载体上。 0017 步骤 （3） 、 在步骤 （2） 反应完成后， 通过合成仪中蠕动泵注入相应序列氨基酸溶液， 并吹入氮气鼓泡混合， 合成过程中采用微波加热， 提高合成速度； 固相载体上的氨基酸中的 氨基被封闭的第二个氨基酸的羧基通过活化反应被活化， 羧基被活化的第二个氨基酸再与 已接在固相载体的第一个氨基酸的氨基反应形成肽键， 使得固相载体上生成一个带有保护 基的氨基酸肽链。 0018 步骤 （4） 、 通过合成仪废液排放系统将步骤 （3） 完成后的废。
13、液排出。 0019 步骤 （5） 、 通过合成仪的清洗管路对步骤 （4） 反应后的合成半成品加入溶剂进行清 洗， 清洗后将废液排出。 0020 步骤 （6） 、 将步骤 （5） 完成后的反应器中通过合成仪加入相关溶剂脱掉多肽合成物 上氨基的保护基， 然后进行废液排放， 废液排放完成后加入溶剂进行清洗操作。 0021 步骤 （7） 、 将步骤 （6） 完成后的反应器中通过合成仪蠕动泵加料系统加入对应序列 的合成氨基酸， 控制加入量及合成温度， 完成合成反应后， 将废液排出。 0022 步骤 （8） 、 循环重复步骤 （4） 、（5） 、（6） 、（7） ， 使肽链从C端向N端生长， 直至达到所需。
14、 要的肽链长度。 0023 步骤 （9） 、 通过加入相应的溶剂反应脱去保护基并水解肽链和固相载体之间的酯 键， 并进行清洗， 得到了合成好的氨基酸多肽产品。 0024 本发明在多肽合成加料过程中， 采用蠕动泵进行加料， 通过蠕动泵高精度控制加 料量， 大大减少了反应因加料不精确所导致的反应不充分， 副反应增多所导致的杂质过多 及分离提纯困难， 提高了合成产品质量。 本发明在合成多肽的反应过程中， 通过微波设备通 入微波， 提高反应瓶内试剂的温度， 提高反应速度， 在反应器内布置多个反应瓶同时进行合 成反应， 采用转盘带动多个反应瓶绕微波发生器旋转， 达到均衡温度下进行合成反应， 采用 红外温度传感器进行检测反应环境温度， 根据实测反应环境温度对微波进行调整以控制温 度在合理反应内； 通过微波加热提高反应环境温度以及在反应器中布置多个反应瓶实现了 反应高效及批量化生产， 大大提升了合成的效率， 此合成方法是普通多肽合成设备的10倍 以上， 并且微波环境下能合成部分难合成的多肽链。 说明书 2/2 页 4 CN 106317163 A 4 。