抗衣原体剂 技术领域
本发明涉及含有茶多酚的抗衣原体剂。
背景技术
衣原体属细菌是大小为0.2-1.5μm的球形或椭圆形细菌，并且
是专有性地寄生在真核细胞中的独特细菌。
宿主细胞外部的生态型—传染体通过吞噬作用进入宿主细胞的空
泡中，并在其中转化成称为网状结构体的颗粒。网状结构体的数目通
过分裂而增加，在感染后期发育成传染体。
已知衣原体是引起沙眼和包涵体结膜炎的病原体(沙眼衣原体
(Chlamydia trachomatis))、引起鹦鹉热的病原体(鹦鹉热衣原体
(Chlamydia psittaci))、还是引起肺炎(肺炎)、咽喉痛(咽炎)、
支气管炎、鼻窦炎、中耳炎的病原体(肺炎衣原体(Chlamydia
pneumoniae))或其它儿童疾病的病原体。沙眼衣原体(Chlamydia
trachomatis)是引起在全世界范围内广为流行的性传播疾病的主要
病原微生物。
通常使用口服抗生素来治疗衣原体传染病、尤其是沙眼衣原体传
染病。在这种情况下，可使用的抗生素包括四环素类的多西环素和
mynocycline，大环内酯类的克拉霉素，新喹诺酮类的氧氟沙星、托
氟沙星和司氟沙星。为了进行治疗，口服给药通常持续约2周。然而，
当用抗生素治疗时，会伴随副作用问题。因此，孕妇不能使用四环素
类抗生素和新喹诺酮类抗生素。此外，使用抗生素总伴有出现耐药菌
株的危险。
因此，本发明的目的是从天然物质中发现并提供既没有任何副作
用、也不用担心出现耐药菌株的抗衣原体剂。
为了实现上述目的，本发明者们已经作了大量研究工作，最终发
现，茶叶中含有的茶多酚具有显著的抗衣原体属细菌的增殖抑制活
性，因此，基于此发现，完成了本发明。
本发明所用茶叶从很早以前就已经被用作饮料，并且在其安全性
方面没有任何问题。
本发明的公开
本发明提供了含茶多酚的抗衣原体剂。
此外，本发明还提供了治疗衣原体传染病的方法，包括将衣原体
传染病治疗有效量的含茶多酚的组合物给药到病人的感染部位。
实施本发明的最佳实施方式
在本发明中，茶表示从茶树(茶(Camellia sinensis))上获得
的叶子、茎、木质部、根、种子或它们的混合物。一般使用饮用茶叶
作为原料。
饮用茶叶包括各种取决于其生产方法的茶叶，例如发酵茶如红茶
和普洱茶，半发酵茶如乌龙茶和包种(paochong)茶，和非发酵茶如
绿茶等。在本发明中，可使用上述任一种茶叶。
可用于本发明的茶多酚包括含有所述茶多酚的茶本身，用水、热
水、有机溶剂、含水有机溶剂等从上述茶中提取的提取物或上述提取
物的混合物。此外，可使用通过有机溶剂分离或吸收树脂色谱法将茶
提取物纯化到所需纯度而获得的高茶多酚含量的制备物。这些方法描
述在特公平1-44234、特公平2-12474、特开平2-22755，特开平4-
20589、特开平5-260907、和特开平8-109178等中。
由此获得的茶提取物和高茶多酚含量的制备物中含有的茶多酚具
体包括儿茶素，其中有(+)-儿茶素、(-)-儿茶素、(+)-没食子儿
茶素、(+)-表没食子儿茶素、(+)-没食子儿茶素没食子酸酯、(+)
-表没食子儿茶素没食子酸酯、(-)-表儿茶素、(-)-表儿茶素没食
子酸酯、(-)-儿茶素没食子酸酯、(-)-表没食子儿茶素、(-)-没
食子儿茶素、(-)-表没食子儿茶素没食子酸酯、(-)-没食子儿茶素
没食子酸酯等，和茶黄素，其中有茶黄素单没食子酸酯A、茶黄素单
没食子酸酯B、茶黄素二没食子酸酯、游离茶黄素等。它们单独使用
或联合使用。
上述茶多酚可以是市售产品，例如，含有儿茶素作为主成分的产
品，例如商品名：Polyphenon 60(由三井农林株式会社生产，茶多
酚含量：60％或60％以上)，商品名：Polyphenon 30(由三井农林
株式会社生产，茶多酚含量：30％或30％以上)，商品名：Polyphenon
70S(由三井农林株式会社生产，茶多酚含量：70％或70％以上)，
商品名：Polyphenon E(由三井农林株式会社生产，茶多酚含量：80
％或80％以上)等。含有茶黄素作为主成分的产品包括商品名：
Polyphenon TF(由三井农林株式会社生产，组分：16.8％的茶黄素、
19.5％的茶黄素单没食子酸酯A、16.1％的茶黄素单没食子酸酯B、
31.4％的茶黄素二没食子酸酯)等。
本发明抗衣原体剂可用于抗衣原体属细菌，除沙眼衣原体外，例
如肺炎衣原体、鹦鹉热衣原体、猫心衣原体(Chlamydia pecorum)等。
在本发明中，上述茶多酚与合适的增溶剂、悬浮剂、基质材料等
一起使用，并且用作呈霜剂、糊剂、凝胶剂、乳液剂、液体等剂型的
组合物。例如，可将茶多酚和/或含茶多酚的材料溶解和/或悬浮在纯
化水、生理盐水、含水乙醇等溶剂中，并将其喷到和/或涂在受感染部
位例如呼吸道粘膜上。为了治疗沙眼、包涵体结膜炎等，可将茶多酚
溶解在纯化水、缓冲溶液等溶剂中，以用作点眼剂，或将其与眼膏基
质材料混合来制成用作眼药膏的软膏。还可以将茶多酚与霜剂、糊剂、
凝胶剂、软膏等混合，来将其涂在受感染部位如子宫颈管的上皮上。
用于本发明霜剂、糊剂、凝胶剂和软膏的基质包括，例如，烃类
物质如白凡士林、黄凡士林、石蜡、液体石蜡、角鲨烷和纯地蜡；高
级脂肪酸如月桂酸、硬脂酸、肉豆蔻酸、棕榈酸、油酸、和亚油酸；
高级脂肪醇如硬脂醇、油醇、月桂醇、鲸蜡醇、和羊毛脂醇；脂肪酸
酯如脱水山梨醇倍半油酸酯、肉豆蔻酸异丙酯、棕榈酸异丙酯、和甘
油单硬脂酸酯；蜡如蜂蜡、白蜂蜡、和羊毛脂；油和脂如鳄梨油、橄
榄油、椰子油、芝麻油、大豆油、蓖麻油、澳洲坚果油、貂油、卵黄
油、牛油和猪油；高分子量化合物如阿拉伯胶、黄蓍胶、瓜尔胶、刺
梧桐胶、糊精、明胶、角叉菜胶、虫胶、松香、酪蛋白、羧甲基纤维
素钠、甲基纤维素、乙基纤维素、藻酸钠、硝酸纤维素、聚乙烯醇、
聚乙烯吡咯烷酮、聚丙烯酸钠、聚乙烯甲醚、月桂酸聚乙二醇
(lauromacrogol)、聚酰胺树脂、和硅油，可适当选择一种或多种
上述基质来使用。
如果需要，可将湿润剂，例如甘油、丙二醇、1，3-丁二醇、聚乙
二醇、消旋-吡咯烷酮甲酸钠、乳酸钠、山梨醇、透明质酸钠；无机
物质，例如膨润土、高龄土、氧化锌、和氧化钛；稳定剂，例如对羟
基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、和对羟基苯
甲酸丁酯；抗菌剂，例如苯扎氯铵、氯化苄乙氧铵、柠檬酸、柠檬酸
钠、对羟基苯甲酸、和硼酸；表面活性剂，例如聚氧乙烯氢化蓖麻油，
和已知的透皮吸收剂等加到上述制剂中。
在这些情况下，茶多酚在药物中的浓度可随患者的症状和年龄、
施药部位、给药方法等不同而不同，并且没有特别限制。当以液体、
乳液剂等剂型使用时，茶多酚的浓度一般是0.2-50mg/ml、优选1.6
-10mg/ml。当以霜剂、糊剂、凝胶剂、软膏等剂型使用时，茶多酚
的浓度一般是0.2-200mg/g、优选10-100mg/g。
当使用本发明抗衣原体剂时，考虑到衣原体独特的生长周期以及
防止复发，持续治疗一定时间例如2-4周是可取的。虽然本发明抗衣
原体剂在治疗期间的给药频率可随患者的症状、施药部位、给药方法、
所用茶多酚的浓度等因素的不同而不同，但是可每天给药1-10次。
因为本发明抗衣原体剂中的活性组分茶多酚的安全性非常好，因
此其可用于预防疾病。
下面用实施例来更具体地描述本发明。然而，本发明并不限于此。
实施例1
使用沙眼衣原体菌株作为测试衣原体。将能形成104个包涵体的衣
原体在含有不同浓度茶多酚(商品名：Polyphenon 70S，由三井农林
株式会社生产，茶多酚含量：(-)-表没食子儿茶素18.3％、(-)-
表儿茶素8.6％、(-)-表没食子儿茶素没食子酸酯35.9％、(-)-
表儿茶素没食子酸酯11.2％、(-)-没食子儿茶素没食子酸酯3.5
％)的SPG(磷酸谷氨酸蔗糖)溶液中于37℃孵育30分钟、60分钟
或90分钟。将衣原体在不含任何茶多酚的SPG溶液中培养以作对照。
孵育完毕后，将各溶液接种到单层培养并通过在1500rpm转速下
离心60分钟而吸附的HeLa 229细胞上。然后除去接种物，加入衣原
体培养基(含有1μg/ml环己酰亚胺的Eagle最小必须培养基)，在
37℃培养72小时。培养完毕后，除去培养基，用甲醇将细胞固定，然
后用荧光素异硫氰酸酯(FITC)标记的抗沙眼衣原体单克隆抗体染色，
然后计数沙眼衣原体包涵体的数目。
所得结果如表1所示。在该表中，每一处理组包涵体的数目是以
相对于对照组包涵体数目的相对值表示的。从表中可明显看出，除了
用0.2mg/ml浓度的茶多酚处理30分钟的处理组之外，其它各茶多
酚处理组中的沙眼衣原体包涵体数目都减少了。尤其是，当用1.6
mg/ml或1.6mg/ml以上浓度的茶多酚处理90分钟时，沙眼衣原体的
生长被完全抑制。
表1
培养时间 茶多酚的浓度(mg/ml)
(分钟) 0 0.2 0.4 0.8 1.6 3.2 6.4
30 1.00 1.00 0.58 0.34 0.18 0.10 0.05
60 1.00 0.87 0.41 0.18 0.06 0.02 0.02
90 1.00 0.55 0.07 0.03 0 0 0
实施例2
使用沙眼衣原体菌株作为测试衣原体。将能形成104个包涵体的衣
原体在含有不同浓度(-)-表儿茶素没食子酸酯或(-)-表没食子儿茶
素没食子酸酯的SPG溶液中于37℃孵育。
孵育完毕后，将各溶液接种到单层培养并通过在1500rpm转速下
离心60分钟而吸附的HeLa 229细胞上。然后除去接种物，加入衣原
体培养基(含有1μg/ml环己酰亚胺的Eagle最小必须培养基)，在
37℃培养72小时。培养完毕后，除去培养基，用甲醇将细胞固定，然
后用FITC标记的抗沙眼衣原体单克隆抗体染色，然后计数沙眼衣原体
包涵体的数目。
结果发现，(-)-表儿茶素没食子酸酯和(-)-表没食子儿茶素没
食子酸酯在0.8mg/ml和1.6mg/ml的浓度下分别将沙眼衣原体的生
长完全抑制。
实施例3
以下述配方制备抗衣原体剂。用作茶多酚的“Polyphenon E”的
组成分析值如下所述：
(-)-表没食子儿茶素 12％
(-)-表儿茶素 9％
(-)-表没食子儿茶素没食子酸酯 53％
(-)-没食子儿茶素没食子酸酯 6％
(-)-表儿茶素没食子酸酯 4％
处方例1
氧化锌 200g
液体石蜡 30g
白蜂蜡 32.5g
脱水山梨醇倍半油酸酯 13g
白凡士林 604.5g
“Polyphenon E” 120g
总量 1000g
处方例2
白凡士林 200g
鲸蜡醇 100g
白蜂蜡 50g
脱水山梨醇倍半油酸酯 50g
月桂酸聚乙二醇 5g
(lauromacrogol)
对羟基苯甲酸乙酯 1g
(或对羟基苯甲酸甲酯)
对羟基苯甲酸丁酯 1g
(或对羟基苯甲酸丙酯)
“Polyphenon E” 120g
纯化水 273g
总量 1000g
处方例3
白凡士林 250g
硬脂醇 200g
丙二醇 120g
聚氧乙烯氢化蓖麻油60 40g
甘油单硬脂酸酯 10g
对羟基苯甲酸甲酯 1g
对羟基苯甲酸丙酯 1g
“Polyphenon E” 120g
纯化水 258g
总量 1000g
处方例4
蜂蜡 330g
植物油 550g
“Polyphenon E” 120g
总量 1000g
处方例5
白蜂蜡 50g
脱水山梨醇倍半油酸酯 20g
白凡士林 810g
“Polyphenon E” 120g
总量 1000g
处方例6
Macrogol(聚乙二醇)4000 440g
Macrogol(聚乙二醇)400 440g
“Polyphenon E” 120g
总量 1000g
处方例7
硬脂酸 200g
氢氧化钾 13g
甘油 100g
对羟基苯甲酸甲酯 1g
对羟基苯甲酸丙酯 1g
“Polyphenon E” 120g
纯化水 565
总量 1000g
处方例8
硬脂酸 150g
棕榈酸异丙酯 20g
羊毛脂 10g
山梨醇 56g
氢氧化钾 10g
对羟基苯甲酸甲酯 1g
对羟基苯甲酸丙酯 1g
“Polyphenon E” 120g
纯化水 632g
总量 1000g
处方例9
硬脂酸 180g
液体石蜡 20g
羊毛脂 5g
脱水山梨醇倍半油酸酯 20g
氢氧化钾 8g
山梨醇 35g
对羟基苯甲酸甲酯 1g
对羟基苯甲酸丙酯 1g
“Polyphenon E” 120g
纯化水 610
总量 1000g
处方例10
硼酸 20mg
对羟基苯甲酸甲酯 0.26mg
对羟基苯甲酸丙酯 0.14mg
“Polyphenon E” 250mg
纯化水 加至总量为1000ml
处方例11
无水磷酸二氢钠 5.6mg
无水磷酸氢二钠 2.84mg
对羟基苯甲酸甲酯 0.26mg
对羟基苯甲酸丙酯 0.14mg
“Polyphenon E” 250mg
纯化水 加至总量为1000ml
处方例12
对羟基苯甲酸甲酯 0.26mg
对羟基苯甲酸丙酯 0.14mg
“Polyphenon E” 250mg
纯化水 加至总量为1000ml
工业实用性
本发明提供了能有效治疗衣原体传染病并且具有很好安全性的药
物。该药物既没有任何副作用，也没有如使用抗生素所产生的出现耐
药菌株的危险性。