本发明涉及莫维诺林衍生物、它们的制备方法、它们作为药物的用 途和含有它们的药物制剂。
更确切地，本发明提供游离形式或盐形式的式I化合物
其中
a---b和α---β各自独立地是单键或双键；
R1是 烷基或
其中Ra是H；可选被OH或C1-4烷氧基取代的C1-6烷基；C2-6烯基； 或芳基-C1-4烷基；
R2是OH；-O-CO-R5，其中R5是C1-8烷基、C3-7环烷基、C3-7环烷基 -C1-4烷基、芳基或芳基-C1-4烷基；或-O-R6，其中R6是通过其羰基残基 或-CHR7-COR8与O连接的α-氨基酸残基，其中R7是H、C1-4烷基、杂C1-4烷基、C3-7环烷基、C3-7环烷基-C1-4烷基、芳基或芳基-C1-4烷基，R8是 OH、C1-4烷氧基或NR9R10，其中R9和R10各自独立地是H、C1-4烷基，或 者R9和R10与它们所结合的氮一起形成杂芳基；
R3是取代的内酰胺、哌啶基、线性氨基醇或环状氨基甲酸酯，或式
(i)残基
其中
R13是OH；C1-6烷氧基；-O-CO-C1-6烷基；或-O-CO-NHC1-6烷基；
R14是OH；C1-4烷氧基；C1-4烷基；C1-4烷氧基-羰基-C1-4烷氧基；羟 基-C1-5烷氧基；C1-4烷氧基-C1-5烷氧基；C1-4烷氧基-羰基-C1-4烷基；或 NR9aR10a-C1-5烷氧基，其中R9a和R10a各自独立地具有关于R9和R10所给 出的含义之一；
R15是H或C1-4烷基；
R16是CONR17R18，其中R17和R18之一是H，另一个是C1-5烷基、羟基 -C1-6烷基、C3-7环烷基-C1-4烷基或芳基-C1-4烷基；或C1-6烷氧基-羰基；
当每个R13或R14是OH时，每个a---b和α---β是单键；
R4是H或OR19，其中R19是C1-6烷基、羟基C1-6烷基、C1-4烷氧基-C1-6烷基、芳基-C1-4烷基或C1-4烷氧基羰基-C1-4烷基，
上述定义中，无论“芳基”是单独出现的还是出现在“芳基-C1-4烷基”中，它是“苯基”或“萘基”，可选地被卤素、OH、NR11R12、COOH、 CF3、C1-4烷氧基、C1-4烷基、羟基-C1-4烷基、羟基-C1-4烷氧基、C1-4烷 氧基-羰基、氰基或CONR11R12取代，R11和R12各自独立地是H、C1-4烷基、 苯基、萘基、苯基-C1-4烷基或萘基-C1-4烷基，或者R11和R12与它们所 结合的氮一起形成杂芳基；无论“杂芳基”出现在何处，它是5-或6- 元杂环残基，可选地与苯环稠合。
烷基或烷基部分可以是支链或直链。环烷基或部分优选为环戊基或 环己基。杂烷基例如包括卤代烷基，例如CF3。多羟基-C1-4烷基可以包 含多达6个羟基。
优选地，当被取代时，芳基或芳基-C1-4烷基中的苯基或萘基部分携 带多达3个如上所述的取代基，更优选地选自C1-4烷氧基(例如甲氧基 或乙氧基)、羟基-C1-4烷氧基、羟基-C1-4烷基和OH。当苯基部分被二 取代时，这2个取代基优选地位于间位和对位。芳基-C1-4烷基优选为苄 基、苯乙基或萘基-CH2-，苯基或萘基部分可选地如上所述被取代。
杂芳基的实例包括吡咯基、咪唑基、呋喃基、噻吩基、吡咯烷基、 哌啶基、哌嗪基、吗啉代、吡啶基、吲哚基或喹啉基。由R9和R10与它 们所连接的氮一起形成的杂芳基可以包含其它杂原子，例如O或N，优 选为吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基或吗啉代。在杂芳基-C1-4烷基中，烷基 部分优选为C1或C2烷基。
上述关于“芳基”和“杂芳基”所给出的含义也适用于下文式(a)、 (b)、(c1)或(c2)原子团。
当R6是α氨基酸残基时，它可以是天然或非天然α-氨基酸的残基， 例如Ala、Leu、Ile、Val、Pro，其中末端氨基可以是取代的或未取 代的，例如被氨基保护基团取代。
当R3是取代的内酰胺残基时，它优选为6-元环，其中内酰胺的氮 可以是取代的，和/或在环上包含其它取代基，例如在与氮相对的碳原 子上。优选地，内酰胺残基是二取代的。适合作为R3的取代的内酰胺 实例例如包括式(a)原子团
其中
R30是C1-8烷基；C3-7环烷基；芳基；C3-7环烷基-C1-4烷基；芳基-C1-4烷基；杂芳基；或杂芳基-C1-4烷基；
R31是OH；C1-4烷氧基；C1-4烷基；C1-4烷氧基-羰基-C1-4烷氧基；羟 基-C1-5烷氧基；C1-4烷氧基-C1-5烷氧基；C1-4烷氧基-羰基-C1-4烷基；氨 基-C1-4烷氧基；HOOC-C1-4烷氧基；HOOC-C1-4烷基；或NR9aR10a-C1-5烷氧 基，其中R9a和R10a各自独立地具有关于R9和R10所给出的含义之一。
当R3是取代的哌啶基时，哌啶基的氮可以是取代的，和/或环上可 以存在其它取代基，例如在与氮相对的碳原子上。优选地，哌啶基是二 取代的。适合的取代的哌啶基实例例如包括式(b)原子团
其中
R40具有关于R30所给出的含义之一；
R41具有关于R31所给出的含义之一或者是-O-CO-C1-8烷基。
当R3是取代的氨基醇残基时，其氨基可以是单取代的，例如被诸如 芳基-C1-4烷基或芳基-C1-4烷基-羰基等取代基取代，和/或链上可以存 在其它取代基，例如在与醇或氨基相邻的碳原子上。取代的氨基醇残基 的环化生成对应的取代的环状氨基甲酸酯。适合的取代的氨基醇和对应 的取代的环状氨基甲酸酯的实例例如包括式(c1)或(c2)原子团
或
其中
每个X和Y是H，或者X和Y一起形成
每个R50彼此独立地是H；C1-8烷基；C3-7环烷基；芳基；C3-7环烷基 -C1-4烷基；芳基-C1-4烷基；杂芳基；杂芳基-C1-4烷基；C1-4烷基-羰基； 芳基-羰基；杂芳基-羰基；芳基-C1-4烷基-羰基或杂芳基-C1-4烷基-羰 基，
每个R51彼此独立地是H；C1-4烷基；羟基-C1-4烷基；氨基-C1-4烷基； C1-4烷氧基-C1-4烷基；C1-4烷氧基-羰基-C1-4烷基，其中C1-4烷氧基可选 地被氨基、C1-4烷基-氨基或二-(C1-4烷基)-氨基取代；HOOC-C1-4烷基； 或R23R24N-CO-C1-4烷基，其中R23是H、C1-4烷基、羟基-C1-4烷基、多羟 基-C1-8烷基、杂芳基、杂芳基-C1-4烷基、氨基-C1-4烷基、C1-4烷基氨基 -C1-4烷基、二-(C1-4烷基)氨基-C1-4烷基或芳基-C1-4烷基，R24是H、C1-4烷基或羟基-C1-4烷基，
R50和R51至少有一个不是H。
优选的式I化合物中，R3是取代的内酰胺、取代的线性氨基醇、取 代的环状氨基甲酸酯，优选为取代的内酰胺或取代的环状氨基甲酸酯， 例如上述，更优选为式(a)或其中X和Y是-CO-的式(c1)或(c2)原子团。
式I化合物中，下列单独或在任意子级组合中的含义是优选的：
1.R1是H或CH3，优选为CH3；
2.R2是-O-CO-R5，优选地其中R5是C4-8烷基，确切为 -CH(CH3)-CH2-CH3-、-CH(CH2-CH2-CH3)2、-CH(CH2-CH3)2、 -C(CH3)2-CH2-CH3或-CH(CH2-CH3)-CH2-CH2-CH3，
3.a---b是双键；
4.α---β是双键；
5.R4是H；
6.R3是式(i)原子团；
7.R16是CO-NR17R18，优选地R17和R18之一是H；
8.每个R13和R14是OH，每个a---b和α---β是单键；
9.每个R13和R14不是OH；
10.R3是式(a)原子团；
11.(a)中的R30是芳基-C1-4烷基或杂芳基-C1-4烷基，优选为苄基或 萘甲基，其中苯基或萘基环可选地被OH、C1-4烷氧基、羟基-C1-4烷氧基 或羟基-C1-4烷基取代，或吗啉代、吡啶基、吲哚基或喹啉基；
12.(a)中的R31是OH、C1-4烷氧基、羟基-C1-4烷氧基、C1-4烷氧基- 羰基-C1-4烷氧基或HOOC-C1-4烷氧基；
13.R3是式(c1)或(c2)原子团，其中X和Y一起形成-CO-；
14.其中X和Y一起形成-CO-的(c1)或(c2)中的R50是芳基-C1-4烷基 或杂芳基-C1-4烷基，优选为苄基或萘甲基，其中苯基或萘基环可选地被 OH、C1-4烷氧基、羟基-C1-4烷氧基或羟基-C1-4烷基取代；
15.其中X和Y一起形成-CO-的(c1)或(c2)中的R51是羟基-C1-4烷 基；氨基-C1-4烷基；C1-4烷氧基-C1-4烷基；C1-4烷氧基-羰基-C1-4烷基； HOOC-C1-4烷基；或R23R24N-CO-C1-4烷基。
式I化合物可以以游离形式或盐的形式存在，例如与有机或无机酸 所形成的酸加成盐，例如氢氯化物，或者当含有COOH时，与碱形成碱 盐，例如钠盐或钾盐，或者取代或未取代的铵盐。
不言而喻，式(i)、(a)、(b)、(c1)和(c2)原子团可以包含至少一 个不对称碳原子，例如分别携带R15和R16、R31、R41或R51的碳原子，例 如
在没有指明本发明化合物任意部分的立体化学的情况下，不言而喻 的是本发明涵盖各对映异构体和它们的混合物。相似的考虑适用于展现 上述不对称碳原子的原料。在本发明化合物以上述异构形式存在的情况 下，各异构体可以按常规方式获得，例如采用旋光活性原料或者最初得 到的混合物，例如利用常规的色谱工艺。
本发明还包括式I化合物的制备方法，包括
a)关于其中R3是式(i)残基的式I化合物的制备，使莫维诺林或 compactin或对应的四氢-莫维诺林或-compactin进行开环作用，例如 通过与对应的胺反应，例如芳胺；或者
b)关于其中R3是式(c1)(其中每个X和Y是H)原子团的式I化合 物的制备，使式IV化合物中R”3中的羰基官能进行还原性胺化作用
其中R1、R2、R4、a---b、α---β和R1是如上所定义的，R”3是式 (c1A)原子团
其中R51是如上所定义的；或者
c)关于其中R3是式(c2)(其中每个X和Y是H)残基的式I化合物 的制备，使其中内酯环已经转化为共轭的α，β不饱和内酯的莫维诺林或 compactin与一种胺进行1，4-加成作用，例如藜芦基胺，同时与一种 醇进行开环作用，例如甲醇；或者
d)关于其中R3是式(c1)或(c2)(其中每个X和Y是-CO-)残基的式 I化合物的制备，使其中R3是式(c1)或(c2)(其中每个X和Y是H)残 基的式I化合物进行环化作用；或者
e)关于其中R3是取代的内酰胺(例如式(a)残基)的式I化合物的 制备，使其中R3是式(i)残基(其中R13是氧化为酮的OH，R16是CONHR18) 的式I化合物进行还原性胺化作用，同时进行闭环作用；或者
将其中R3是式(i)残基(其中R16是CONHR18)的式I化合物中R3中的游离OH基转化为离去基团，例如通过甲磺酰基化作用，然后对所 得化合物进行碱处理；或者
f)关于其中R3是取代的哌啶基(例如式(b)残基)的式I化合物的 制备，还原其中R3是取代的内酰胺(例如式(a)残基)的式I化合物；
如果需要的话，除去所存在的保护基团，将所得式I化合物转化为 游离形式或盐的形式。
在不参与反应的起始产物中存在OH基的情况下，它们可以按照已 知方法加以保护。OH保护基团是本领域已知的，例如叔丁基-二甲基- 硅烷基。
方法步骤(a)至(f)可以类似于本领域已知方法或者如下列实施例 所述加以进行。步骤(d)中的环化适宜在环化剂的存在下进行，例如羰 基二咪唑。
式IV化合物可以这样制备，按照已知操作打开OH被保护的内酯环， 例如通过与胺的反应，然后将所得羟基氧化为酮。在不确切描述原料制 备的限度内，化合物是已知的或者可以类似于本领域已知方法或如WO 99/11258所述加以制备，例如从莫维诺林或compactin或四氢-莫维 诺林或-compactin开始。莫维诺林、compactin或四氢-莫维诺林或 -compactin的-O-CO-CH(CH3)-C2H5也可以还原为OH，然后酯化为另一 种-O-CO-R5基团。
下列实施例是本发明的例证。用到了下列缩写：
Boc＝叔丁氧基-羰基
rt＝室温
OMe＝甲氧基
THF＝四氢呋喃
DMF＝二甲基甲酰胺
DCC＝N，N’-二环己基碳二亚胺
Pro＝脯氨酸
TBDMS＝叔丁基二甲基甲硅烷基
DMAP＝二甲氨基吡啶
CDI＝羰基二咪唑
TBME＝叔丁基甲基醚
CHX＝环己烷
实施例1：(S)-2-甲基-丁酸 (S)-(3R，7S，8aR)-8-{(S)-2-[(4R，6R)-3-(4-羟基-3-甲氧基-苄 基)-4-[(2-羟基-乙基氨基甲酰基)-甲基]-2-酮基-[1，3]噁嗪烷-6- 基]-乙基}-3，7-二甲基-1，2，3，7，8，8a-六氢-萘-1-基酯
a)向40.4g 莫维诺林((S)-2-甲基-丁酸 (1S，3R，7S，8S，8aR)-8-[2-((1R，3R)-4-羟基-6-酮基-四氢-吡喃-2- 基)-乙基]-3，7-二甲基-1，2，3，7，8，8a-六氢-萘-1-基酯)的100ml CH2Cl2溶液中加入24.4g DMAP，然后缓慢加入15.0g Ac2O。混合物在 rt下搅拌过夜。反应受TLC控制，TBME/CHX，3∶2。反应混合物用TBME 稀释，连续用水、约15％柠檬酸、盐水洗涤，然后经硫酸钠干燥。有机 相浓缩，加入二异丙醚使产物结晶。沉淀过滤，用二异丙醚洗涤，干燥， 得到α，β不饱和的内酯衍生物(S)-2-甲基-丁酸(S)-(3R，7S，8aR)-7- 甲基-3-甲基-8-[(S)-2-((R)-6-酮基-3，6-二氢-2H-吡喃-2-基)-乙 基]-1，2，3，7，8，8a-六氢-萘-1-基酯。
MS(FAB-MS)，387(MH+)
b)向15.5g化合物a)的250ml MeOH溶液中加入14.4g 4-(叔丁 基-二甲基-硅烷氧基)-3-甲氧基-苄胺，混合物搅拌过夜。TLC控制反 应，TBME。反应混合物充分蒸发，粗产物用硅胶快速色谱法分离 (CHX->TBME->MeOH)。得到所需的甲基酯(S)-2-甲基-丁酸 (S)-(3R，7S，8aR)-8-{(R)-(3R，5R)-5-[4-(叔丁基-二甲基-硅烷氧 基)-3-甲氧基-苄氨基]-3-羟基-6-甲基氨基甲酰基-己基}-7-甲基-3- 甲基-1，2，3，7，8，8a-六氢-萘-1-基酯。
MS(ESI)，686.5(MH+)
c)将12.5g b)中所得化合物的25ml DMF溶液用4.1g CDI处理， 在rt下搅拌约5小时。TLC控制反应，TBME/CHX，3∶2。反应混合物 用TBME稀释，用水、再用盐水萃取，有机相经硫酸钠干燥，蒸发。粗 产物用RP-18色谱法纯化，MeOH/H2O->MeOH。再次用硅胶色谱法纯化， TBME/CHX->TBME，得到环状氨基甲酸酯(S)-2-甲基-丁酸 (S)-(3R，7S，8aR)-8-((S)-2-{(4R，6R)-3-[4-(叔丁基-二甲基-硅烷 氧基)-3-甲氧基-苄基]-4-甲基氨基甲酰基甲基-2-酮基-[1，3]噁嗪 烷-6-基}-乙基)-7-甲基-3-甲基-1，2，3，7，8，8a-六氢-萘-1-基酯，为 泡沫。
MS(ESI)，712.5(MH+)
d)向6.0g c)中所得化合物的25ml MeOH溶液中加入总量为5.5g 的2-氨基乙醇，混合物在回流下加热约40小时，直到反应完全(TLC 控制，含水乙酸乙酯)。反应混合物用乙酸乙酯稀释，用柠檬酸和盐水 萃取，然后经硫酸钠干燥，蒸发。粗产物如上先用RP-18色谱法、再 用硅胶色谱法纯化。得到标题化合物，为白色泡沫。
MS(ESI)：627.4(MH+)
实施例2：(S)-2-甲基-丁酸 (S)-(3R，7S，8aR)-8-{(S)-2-[(4R，6R)-3-(4-羟基-3-甲氧基-苄 基)-4-甲基氨基甲酰基甲基-2-酮基-[1，3]噁嗪烷-6-基]-乙基}-7- 甲基-3-甲基-1，2，3，7，8，8a-六氢-萘-1-基酯
将3.6g实施例1c)中所得化合物溶于100ml约30％甲胺的MeOH溶 液，在rt下搅拌约24小时(TLC控制，含水乙酸乙酯)。反应混合物 蒸发，粗产物用硅胶色谱法纯化(TMBE/CHX->乙酸乙酯)。纯的部分合 并，蒸发，得到标题化合物，为泡沫。
MS(ESI)：597.4(MH+)[α]20D＝+234.7°(c＝1，甲醇)
进行相同的操作，但是使用适当的原料，还得到非对映异构体，其 中氨基甲酸酯环具有构型
进行实施例1和2所述操作，可以制备式X化合物
其中R50和R51是如下表1所定义的。
表1 例 R50 R51 M.S.(ESI) 3* 3-OMe-4-OH-苄基 -CH2-CO-NH-CH2-(4’-OH-3’-OMe-苯基) 717[M-H]
4 3-OMe-4-(2-羟基-乙 -CH2-CO-NH-CH2-[3’-OMe-4’-(β-羟基- 851
氧基)-苄基 乙氧基)-苯基] [M+HCOO-]
5 3，4-二-OMe-苄基 -CH2-CO-NHCH3 611[MH+]
6 3，4-二-OMe-苄基 -CH2-COOH 596[M-H]
7 3-OMe-4-OH-苄基 -CH2-CO-OCH3 596[M-H]
8 3-OMe-4-OH-苄基 -CH2-COOH 582[M-H]
9 3-OMe-4-OH-苄基 -CH2-CO-N(CH3)2 609[M-H]
10 3-OMe-4-OH-苄基 -CH2-CH2-OH 570[MH+]
11 3，4-二-OH-苄基 -CH2-CO-NH-CH2-(3’，4’-二-OH-苯基) 689[M-H]
12 3，4-二-OMe-苄基 -CH2-CO-N-CH(CH2OH)2 669[M-H]
13 3-OMe-4-(2-羟基-乙 -CH2-CO-NHCH3 639[M-H]
氧基)-苄基
14 3-OMe-4-OH-苄基 -CH2-CO-NH-CH2-CH(OH)-CH2OH 655[M-H]
15 3，4-二-OH-苄基 -CH2-CO-OCH3 582[M-H]
16 3，4-二-OH-苄基 -CH2-CO-NHCH2CH2OH 611[M-H]
17 3-OMe-4-OH-苄基 -CH2-CO-NH-CH(CH2OH)2 655[M-H]
18 3，4-二-OMe-苄基 -CH2-CO-NH-CH2-CH2OH 640[M-H]
19 -CH2-CO-NH-CH2-CH2OH 689[M-H]
20 3-OMe-4-OH-苄基 -CH2-CO-NH-CH2-(CHOH)4-CH2OH 745[M-H]
21 3-OMe-4-OH-苄基 -CH2-CO-N-(CH2CH2OH)2 669[M-H]
22 3-OMe-4-OH-苄基 -CH2-CO-NH-(CH2)2-N(CH3)2 654[MH+]
23 4-OMe-3-OH-苄基 -CH2-CO-NH-CH2-CH2OH 671
[M+HCOO-]
24 3，4-二-OMe-苄基 -CH2-CO-NH-(3，4-二-OMe-苄基) 721[MH+]
*进行相同操作还制备实施例3化合物的非对映异构体，其中环状 氨基甲酸酯残基具有构型
进行下列操作可以制备式X1化合物。莫维诺林或compactin的OH被保护的内酯环还可以进行开环作用，例如通过与胺的反应，然后将所 得羟胺用羰基二咪唑处理，得到氨基甲酸酯。
其中R50和R51是如下表2所定义的。
表2 例 R50 R51 M.S.(ESI) 25* 3，4-二-OMe-苄基 -CH2-CO-NHCH3 611(M+H) 26 3，4-二-OMe-苄基 -CH2-CO-O-(CH2)2-N(CH3)2 668(M+H)
*进行相同操作还制备实施例25化合物的非对映异构体，其中环状 氨基甲酸酯残基具有构型
实施例27：(S)-2-甲基丁酸 (S)-(3S，4aS，7S，5S，8S，8aS)-8-{(S)-2-[(4R，6R)-3-(4-羟基-3-甲 氧基-苄基)-4-[(2-羟基-乙基氨基甲酰基)-甲基]-2-酮基-[1，3]噁 嗪烷-6-基]-乙基}-3，7-二甲基-十氢-萘-1-基酯
进行第一步操作制备实施例28(得到反式四氢莫维诺林)，然后 进行如实施例1所述操作步骤a)至d)得到下式化合物
MS(ESI)：629[M-H]
实施例28：(S)-2-甲基丁酸 (S)-(3S，4aS，7S，8S，8aS)-8-[(3R，5R)-6-(3，4-二甲氧基-苄基氨基 甲酰基)-3，5-二羟基-己基]-3，7-二甲基-十氢-萘-1-基酯
a)向40g(0.098mol)莫维诺林的31乙酸乙酯溶液中加入10g Pt/Al2O3。混合物在H2气氛、2.6巴压力下氢化16小时。混合物过 滤，蒸发溶剂。残余物用硅胶色谱法纯化，用乙酸乙酯/环己烷8/2作 为溶剂。首先洗脱的是不需要的顺式异构体，然后是具有一条双键的副 产物。最后洗脱所需的反式异构体。若干次结晶后，得到所需的反式四 氢莫维诺林((S)-2-甲基丁酸 (S)-(3S，4aS，7S，5S，8S，8aS)-8-[2-((2R，4R)-4-羟基-6-酮基-四氢 -吡喃-2-基)-乙基]-3-甲基-7-甲基-十氢-萘-1-基酯)。
b)向2g(5.0mmol)a)中所得反式四氢莫维诺林的12ml乙醇溶液 中加入3.7ml(25.0mmol)3，4-二甲氧基苄胺。反应混合物在rt下 搅拌20小时，然后用300ml二乙醚稀释，用100ml水洗涤。有机萃取 液用MgSO4干燥，蒸发。残余物用硅胶色谱法纯化，用乙酸乙酯作为洗 脱剂，得到标题化合物。
MS(ESI)：598(M+Na)，574(M-H)
按照常规方法甲硅烷基化莫维诺林、进行实施例28步骤b)操作、 与异氰酸乙酯反应和脱甲硅烷基化，得到实施例29化合物。使莫维诺 林与重氮基乙酸乙酯和乙酸铑反应，然后进行实施例28步骤b)操作， 得到实施例30化合物。
实施例29： 实施例30：
MS(ESI)：613(M+H) MS(ESI)：658(M+H)
进行实施例1步骤a)和b)操作，然后脱甲硅烷基化步骤b)所得化 合物，制备实施例31化合物。使适当的原料进行步骤a)和改进版本的 步骤b)(在没有甲醇的存在下)，得到实施例32和33化合物。
实施例31： 实施例32和33：
MS(ESI)：571[MH+] Ex.32 R＝H MS(ESI)：693[MH+]
Ex.33 R＝CH3MS(ESI)：791[M+HCOO]
实施例34：(S)-2-甲基丁酸 (1S，3R，7S，8S，8aR)-8-{2-[(2S，4R)-4-羟基-1-(5-羟甲基-6-甲氧 基-萘-2-基甲基)-6-酮基-哌啶-2-基]-乙基}-3，7-二甲基 -1，2，3，7，8，8a-六氢-萘-1-基酯
a)在rt下，向搅拌着的22g(37mmol)甲硅烷基化的莫维诺林(通 过莫维诺林的4位标准甲硅烷基化作用获得)((S)-2-甲基丁酸 (3R，7S，8S，8aR)-8-{2-[(2S，4R)-4-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-6- 酮基-四氢-吡喃-2-基]-乙基}-3，7-二甲基-1，2，3，7，8，8a-六氢-萘 -1-基酯)的65ml THF溶液中加入18g(56mmol)C-[5-(叔丁基-二 甲基-硅烷氧基甲基)-6-甲氧基-萘-2-基]-甲胺(从2-溴-6-甲氧基- 萘制备)。18小时后，反应混合物用250ml甲基-叔丁基醚稀释，连续 用10％含水柠檬酸、饱和含水碳酸氢钠和盐水洗涤。有机相经硫酸钠干 燥，蒸发溶剂。粗产物用硅胶色谱法纯化(己烷/乙酸乙酯4/1至3/2)， 得到羟基酰胺2-甲基丁酸8-(5-(叔丁基-二甲基-硅烷氧 基)-6-{[5-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基甲基)-6-甲氧基-萘-2-基甲 基]-氨基甲酰基}-3-羟基-己基)-3，7-二甲基-1，2，3，7，8，8a-六氢- 萘-1-基酯，为白色泡沫。
MS(ESI，-Q1MS)894.6；884.3；848.5
b)向搅拌着的、冷却(0℃)的4.3g(5.0mmol)上述34a)下所得化 合物与1.4ml(10mmol)三乙胺的40ml THF溶液中加入0.51ml (6.6mmol)甲磺酰氯。30分钟后，加入6.5ml(13mmol)2M双(三甲 基甲硅烷基)氨基化钠的THF溶液。混合物在0℃下搅拌1小时。反应 用10％含水柠檬酸终止，用甲基-叔丁基醚稀释。分离各相，含水相用 甲基-叔丁基醚萃取两次。有机相合并，连续用饱和含水碳酸氢钠和盐 水洗涤，经硫酸钠干燥，蒸发溶剂。粗产物用硅胶色谱法纯化(己烷/ 乙酸乙酯95/5至4/1)，得到内酰胺2-甲基丁酸8-(5-{4-(叔丁基-二 甲基-硅烷氧基)-1-[5-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基甲基)-6-甲氧基-萘 -2-基甲基]-6-酮基-哌啶-2-基}-乙基)-3，7-二甲基-1，2，3，7，8，8a- 六氢-萘-1-基酯，为白色泡沫。
MS(ESI，+Q1MS)832.6；598.4
c)在室温下，向搅拌着的106mg(0.13mmol)上述34b)下所得化合 物的2ml THF溶液中加入606μl(0.62mmol)1N含水HCl溶液。18 小时后，反应用饱和含水碳酸氢钠终止，用甲基-叔丁基醚稀释。分离 各相，含水相用甲基-叔丁基醚萃取两次。合并后的有机相用盐水洗涤， 经硫酸钠干燥，蒸发溶剂。粗产物用硅胶色谱法纯化(己烷∶乙酸乙酯 1∶1至1∶4)，得到纯的标题化合物，为白色泡沫。
MS(ESI，-Q1MS)：648.4；602.5 [α]20D＝+119.3°(c＝1，甲 醇)
m.p.≈145℃
类似于实施例34所述操作制备式X2化合物
其中R30和R31具有表3中给出的含义。
表3
*在这些化合物中，内酰胺部分具有下列构型：
**得到两种非对映异构体，每种都可以分离。
实施例61至64*化合物的合成另外包括用重氮基乙酸乙酯和乙酸 铑处理，关于实施例62*和63*化合物，再进行还原。
进行实施例34操作，但是使用对应的四氢-莫维诺林衍生物和3，4- 二甲氧基-苄胺作为原料，得到下列化合物：
实施例65：
MS(ESI)：558[MH+]
如下可以从莫维诺林得到实施例66和67化合物：莫维诺林的酯裂 解和新生成的羟基位置氧化为酮基化合物。然后经由亚甲硅醇化物的生 成和用间氯过苯甲酸处理，引入相邻的羟基取代基。用米尔温盐处理， 进行新生成的羟基位置的选择性烷基化。经由它的酐引入酯基。然后进 行如实施例34所述操作。
实施例66：
MS(ESI)598(M+H)
实施例67：
MS(ESI)598(M+H)
实施例68：(S)-2-甲基丁酸(1S，3R，7S，8S，8aR)-8-[2-((R)-1- 苄基-4-甲基-6-酮基-哌啶-2-基)-乙基]-3，7-二甲基 -1，2，3，7，8，8a-六氢-萘-1-基酯
将莫维诺林用乙酸酐处理，得到α，β-不饱和的内酯。将其用溴化 亚铜二甲基硫配合物和甲基锂处理，进行共轭加成。将甲基化的内酯化 合物用甲醇和二氮杂二环十一烷处理，得到开环的甲基化羟基酯。然后 将其羟基用三氧化硫吡啶配合物氧化为对应的酮。将该酮还原性胺化 (如实施例76b所述)，得到标题化合物。MS(EI)：491(M)
进行实施例68的操作，但是使用适当的原料，可以制备式X3化合 物
其中R1和Y-Z是如下表4所定义的：
表4
实施例71：(S)-2-甲基丁酸 (1S，3R，7S，8S，8aR)-8-{2-[(2S，4S)-1-(3，4-二甲氧基-苄基)-4-羟 基-6-酮基-哌啶-2-基]-乙基}-3，7-二甲基-1，2，3，7，8，8a-六氢-萘 -1-基酯
a)在rt下，向搅拌着的600mg(1.1mmol)2-甲基丁酸 8-{2-[1-(3，4-二甲氧基-苄基)-4-羟基-6-酮基-哌啶-2-基]-乙 基}-3，7-二甲基-1，2，3，7，8，8a-六氢-萘-1-基酯的15ml THF溶液中 加入2ml 65％RedAl的甲苯溶液。3小时后，加入1ml甲醇以终止反 应。有机相用15ml 2N HCl萃取两次。含水相合并，用1N NaOH调至 pH 12，用乙酸乙酯萃取三次。有机相合并，经硫酸钠干燥，蒸发溶剂。 残余物用硅胶色谱法纯化(叔丁基甲基醚/甲醇9/1)，得到纯的 1-(3，4-二甲氧基-苄基)-2-[2-(8-羟基-2，6-二甲基 -1，2，6，7，8，8a-六氢-萘-1-基)-乙基]-哌啶-4-醇，为白色泡沫。
MS(ESI)456(M+H)
b)在rt下，在二氯甲烷中，在催化量的4-二甲氨基吡啶的存在下， 将上述化合物用二乙基乙酸酐处理16小时，得到二酰基化的化合物。 在55℃下与甲醇进行酯基转移作用5小时，裂解内酯部分上的不需要 的酰基，得到标题化合物。
MS(ESI)：554(M+H)。参见表5中的下式。
进行实施例71的操作，但是使用适当的原料，可以制备式X4化合 物
其中R1-R3和Y-Z是如下表5所定义的。
表5
从实施例47化合物开始，从实施例71化合物得到实施例73化合 物。从实施例50**非对映异构体开始，从实施例72化合物得到实施例 74化合物。
实施例76：(S)-2-甲基丁酸 (1S，3R，7S，8S，8aR)-8-[(3R，5R)-3-(3，4-二甲氧基-苄氨基)-5-羟 基-6-甲基氨基甲酰基-己基]-3，7-二甲基-1，2，3，7，8，8a-六氢-萘 -1-基酯
a)向900mg(1.65mmol)2-甲基丁酸8-[5-(叔丁基-二甲基-硅烷 氧基)-6-甲基氨基甲酰基-3-酮基-己基]-3，7-二甲基 -1，2，3，7，8，8a-六氢-萘-1-基酯的5ml THF溶液中加入700mg (11.7mmol)乙酸和1.0g(3.2mmol)四丁基氟化铵三水合物。反应混合 物在rt下搅拌3小时。然后用30ml乙酸乙酯稀释，连续用饱和含水 碳酸氢钠溶液和水洗涤。有机相经硫酸钠干燥，蒸发溶剂。残余物从二 乙醚中结晶，得到所需产物2-甲基丁酸8-(5-羟基-6-甲基氨基甲酰基 -3-酮基-己基)-3，7-二甲基-1，2，3，7，8，8a-六氢-萘-1-基酯，为白色 晶体。
MS(FAB)440(M+Li)
b)向300mg(0.69mmol)式76a)化合物的2ml二氯乙烷溶液中加入 200mg(1.2mmol)藜芦基胺、244mg(1.15mmol)三乙酰氧基硼氢化钠 和60mg(1.0mmol)乙酸。反应混合物在室温下搅拌过夜。然后用20ml 乙酸乙酯稀释，连续用饱和含水碳酸氢钠溶液、水和盐水洗涤。有机相 经硫酸钠干燥，蒸发溶剂。残余物用硅胶色谱法纯化(叔丁基甲基醚/ 甲醇/NH4OHaq90/9/1)，得到标题化合物，为白色泡沫。
MS(ESI)585(M+H)
进行实施例76的操作，但是使用适当的原料，可以制备式X5化合 物
其中R1和R2是如下表6所定义的。
表6 实施例 R1 R2 MS(ESI) 76 CH3 -(3，4-二甲氧基)-苄基 见上 77 CH3 苄基 525(M+H) 78 CH3 二苯基-甲基 601(M+H) 79 CH3 CH(CH3)-苯基 539(M+H)
游离形式或药学上可接受的盐形式的式I化合物表现出可贵的药理 学性质，例如抑制LFA-1/ICAM-1的活性或ICAM-3的相互作用，或者 抑制炎症，例如体外和体内试验所述，因此预示可用于治疗。
A、体外：
i)细胞游离测定
本测定法测量可溶性人ICAM-1与固定化人LFA-1的结合。LFA-1 是从JY细胞纯化的，后者是一种人淋巴母细胞B类细胞系，纯化采用 如Dustin等所述的免疫亲合色谱法(《免疫学杂志》148，2654-2663， 1992)。ICAM-1小鼠Cκ融合蛋白(ICAM-1)是利用杆状病毒系统产生 的，如Weitz-Schmidt等所述(《分析生物化学》238，184-190，1996)。
将纯化后的LFA-1按1∶20稀释在含有2mM MgCl2的磷酸盐缓冲盐 水(PBS)，pH7.4中，在37℃下涂在微量滴定皿(Nunc)上达3小时。 在37℃下将平皿用1％热处理过的BSA的PBS溶液封闭2小时，然后用 含有2mM MgCl2、1％胎牛血清的PBS，pH7.4(测定缓冲液)洗涤。将 10mM化合物的DMSO溶液稀释在测定缓冲液中，加入到平皿中。加入生 物素基化的重组ICAM-1的测定缓冲液溶液(6μg/ml)，在37℃下结合 一小时。恒温后，小孔用测定缓冲液洗涤。加入按1∶5000稀释在测定 缓冲液中的抗生蛋白链菌素-过氧化酶，在37℃下恒温45分钟。平皿 然后用测定缓冲液洗涤，向每孔中加入2，2’-连氮基-双(3-乙基苯并噻 唑啉-6-磺酸)二铵盐底物溶液。反应在20分钟后停止，通过在微板读 数器中测量405nm下的光密度，测定所结合的ICAM-1。
本测定法中，式I化合物抑制LFA-1与ICAM-1的粘连，IC50≤30μM， 优选为0.05至30μM。
ii)人混合淋巴细胞反应(MLR)
从人血沉棕黄层离析外周血液单核细胞(PBMC)。在每次实验中，来 自三种不同供体(A、B和C)的PBMC分别进行三种双向反应(A-B，A-C， B-C)。将细胞共同培养六天，通过用3H-胸苷对细胞进行脉冲调制，测 定增殖。计算引起50％细胞增殖抑制的式I化合物浓度(IC50)。本测定 法中，式I化合物抑制MLR的IC50在0.2至4μM范围内。
B、体内：
i)鼠巯基乙酸盐诱发的腹膜炎
将巯基乙酸盐i.p.注射给小鼠，随后立即s.c.给以供试化合物。4 小时后杀死小鼠，灌洗腹腔，测定灌洗液中的嗜中性白细胞总数。
本测定法中，当按0.001-50μg/kg的剂量s.c.给药时，式I化合 物抑制巯基乙酸盐诱发的嗜中性白细胞移行。
ii)变应性接触性皮炎(ACD)
噁唑酮致敏组小鼠右耳内表面上给以10μl 0.2或2.0％噁唑酮， 引发ACD。低浓度噁唑酮用于试验化合物对全身活性的作用，而高浓度 用于局部试验。未给药的左耳充当正常对照，耳廓重量的个体差异取作 造模后24小时炎性肿胀增加的量度，据此评价皮炎。评价试验组的皮 炎，并与对照组比较。将试验组用供试化合物处理，方式为口服(两次， 造模前2小时和即将造模时)、皮下(即将造模时)或局部(造模后 30分钟，在引起ACD的部位)；将对照组单用载体作类似处理。关于 口服和皮下给药，化合物是水包油的乳剂，关于局部给药，化合物在乙 醇、丙酮与二甲基乙酰胺的混合物中。试验组和载体对照组的数据先用 ANOVA、再用Dunnet T-检验(正常分布或数据)或分别用H和U检验 进行统计学分析。当按0.1至10mg/kg的剂量p.o.给药时，式I化合 物抑制变应性接触性皮炎的引发阶段。
iii)移植：异位小鼠心脏同种移植物
所用品种的组合：BALB/c＝>C3H(H-2d＝>H-2k)包含MHC和非-MHC 错配。使雌性动物吸入异荧烷进行麻醉。通过腹部下腔静脉肝素化供体 BALB/c小鼠，同时经由主动脉放血，然后打开胸腔，将心脏迅速冷却。 结扎主动脉，分割第一分支的远侧，在第一个分叉分割头臂干线。结扎 左肺动脉，分割，右侧也分割，但是保持开放。切开所有其它血管，结 扎，分割，取出供体心脏，放入冰盐水中。
切开并交叉夹住肾下腹部主动脉和腔静脉，制备受体C3H。利用端 -到-侧吻合术，植入移植物，在供体头臂干线与受体主动脉之间和供体 右肺动脉与受体腔静脉之间采用11/0单丝缝合。除去夹子，将移植物 从腹部后栓住，腹部内容物用温盐水洗涤，缝合动物，在加热灯下恢复。 每天通过腹壁拍打供体心脏，触诊监测移植物的存活。若心跳停止，则 认为完全排斥。式I化合物按30mg/kg的每日剂量口服给药，改善移 植物的功能。当式I化合物按10mg/kg的每日剂量与免疫抑制剂、例 如环孢菌素A一起给药时，则获得显著的改善。
式I化合物因此可用于治疗和/或预防由LFA-1/ICAM-1或ICAM-3 相互作用介导的疾病或病症，例如缺血性/再灌注损伤，例如心肌梗塞、 中风、肠缺血、肾衰或出血性休克；器官或组织同种或异种移植物的急 性或慢性排斥，例如心、肺、心-肺联合、肾、肝、肠、骨髓或胰岛； 传染病，例如脓毒性休克、成人呼吸窘迫综合征或外伤性休克。式I化 合物也可用于治疗和/或预防急性或慢性炎性疾病或病症或自体免疫疾 病，例如类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、桥本氏甲状腺肿、多发性 硬化、重症肌无力、I型糖尿病和眼色素层炎；免疫介导疾病的皮肤表 现；炎性和过度增殖性皮肤疾病(例如牛皮癣、特应性皮炎、斑形脱发、 变应性接触性皮炎、刺激性接触性皮炎和其它湿疹性皮炎、皮脂溢性皮 炎、扁平苔癣、天疱疮、大疱性类天疱疮、大疱性表皮松解、荨麻疹、 血管性水肿、血管炎、多形性红斑、皮肤嗜曙红细胞过多、红斑狼疮、 痤疮、环形肉芽肿、坏疽性脓皮病、晒伤或毒性表皮坏死溶离)；炎性 肠疾病；眼部炎性疾病或免疫介导的眼部状况，例如自体免疫疾病，例 如角膜成形术和慢性角膜炎，变应性状况，例如春季结膜炎、炎性状况 和角膜移植。式I化合物可用作免疫抑制剂。
关于上述用途，所需剂量当然将因给药方式、所治疗的特定状况和 所需作用而异。一般来说，在约0.1至约10mg/kg体重的每日剂量下 预示获得令人满意的全身结果。对更大哺乳动物所预示的每日剂量从约 0.5mg至约80mg，例如适宜每天分多达四次或以延迟方式给药。
关于局部应用，将浓度为1-3％的活性物质每日分若干次、例如每 日2至5次给药，可获得令人满意的结果。
式I化合物可以全身或局部给药，通过任意常规的途径，特别是肠 内途径，例如口服给药，例如以片剂或胶囊剂的形式，或者局部给药， 例如以洗剂、凝胶剂、软膏剂或霜剂的形式，或者以鼻用制剂或栓剂的 形式。经由贴剂或其它释放系统的经皮给药也可以是预防或治疗上述疾 病的可能途径。
包含式I化合物以及至少一种药学上可接受的载体或稀释剂的药物 组合物可以按常规方式、通过混合药学上可接受的载体或稀释剂加以制 备。单位剂型例如含有约0.1mg至约40mg活性物质。
局部给药例如是对针对皮肤的。局部给药的其它方式是针对眼睛 的。
式I化合物可以以游离形式或药学上可接受的盐形式给药，例如上 述。这样的盐可以按常规方式制备，表现与游离化合物相同级别的活性。
按照上述，本发明进一步提供：
1.1预防或治疗需要接受治疗的受治疗者由LFA-1/ICAM-1相互 作用介导的病症或疾病(例如上述)的方法，该方法包括将有效量的式 I化合物或其药学上可接受的盐对所述受治疗者给药。
1.2预防或治疗需要接受治疗的受治疗者急性或慢性炎性疾病或 病症或自体免疫疾病(例如上述)的方法，该方法包括将有效量的式I 化合物或其药学上可接受的盐对所述受治疗者给药。
2.游离形式或药学上可接受的盐形式的式I化合物，用作药 物，例如在上述1.1和1.2下所述的任意方法中。
3.药物组合物，用在上述1.1和1.2中的任意方法中，包含 游离形式或药学上可接受的盐形式的式I化合物以及药学上可接受的 赋形剂或载体。
4.式I化合物或其药学上可接受的盐，用于药物组合物的制 备，该药物组合物用在上述1.1和1.2中的任意方法中。
式I化合物可以作为单独的活性成分给药，或者结合其它免疫调制 方案中的药物或其它抗炎剂作为辅药而给药，用于治疗或预防同种或异 种移植物的急性或慢性排斥或者炎性或自体免疫病症。例如，可以结合 使用式I化合物和环孢菌素、雷怕霉素或子囊霉素，或它们的免疫抑制 性类似物，例如环孢菌素A、环孢菌素G、FK-506、ABT-281、ASM981、 雷怕霉素、40-O-(2-羟基)乙基-雷怕霉素等；皮质甾类；环磷酰胺； 硫唑嘌呤；甲氨蝶呤；FTY720；来氟米物；咪唑立宾；霉酚酸；霉酚 酸mofetil；15-脱氧精胍菌素；免疫抑制性单克隆抗体，例如白细胞 受体的单克隆抗体，例如MHC、CD2、CD3、CD4、CD7、CD25、CD28、 B7、CD40、CD45或CD58或它们的配体；或其它免疫调制性化合物， 例如CTLA41g，或其它粘连分子抑制剂，例如mAbs或小分子量抑制剂， 包括选择蛋白拮抗剂和VLA-4拮抗剂。优选的组成是与环孢菌素A、 FK506、雷怕霉素或40-O-(2-羟基)乙基-雷怕霉素。
在式I化合物结合其它免疫抑制性/免疫调制性或抗炎疗法的情况 下，例如用于预防或治疗如上文指明的慢性排斥，共同给药的免疫抑制 剂、免疫调制性或抗炎化合物的剂量当然将因所用辅助药物的类型而 异，例如它是甾族化合物还是环孢菌素，还因所用的具体药物、所治疗 的状况等而异。按照上述，本发明在进一方面提供：
5.如上所定义的方法，包括治疗学上有效量的游离形式或药 学上可接受的盐形式的式I化合物和第二种药用物质的共同给药，例如 同时或按顺序给药，所述第二种药用物质是免疫抑制剂、免疫调制性或 抗炎药物，例如上述。
6.治疗的组合，例如试剂盒，用在如上述1.1或1.2下所定 义的任意方法中，包含游离形式或药学上可接受的盐形式的式I化合物 以及至少一种包含免疫抑制剂、免疫调制性或抗炎药物的药物组合物。 该试剂盒可以包含给药说明书。
实施例2、28和34化合物是优选的，特别是用于治疗炎性皮肤疾 病，例如上述。在一次试验中，得到下列结果：实施例2、28和34化 合物在试验Ai)中的IC50分别是0.05、0.79和0.19μM；实施例2化 合物在MLR试验Aii)中的IC50是0.2μM；实施例2化合物在试验Bi) 中的p.o.ED50是0.1μg/kg；在Bii)中，当按2×3mg/kg的剂量p.o. 给药时，实施例2化合物具有41％的抑制作用，当按2×1mg/kg的剂 量p.o.给药时，实施例34化合物抑制41％的炎性肿胀。
优选的式I化合物是在如WO 99/11258所述体外微粒体测定中抑 制HMG CoA还原酶活性且IC50≥1μM、例如≥50μM的那些。