一株铜绿假单孢菌及其培养方法与应用.pdf

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1、(10)授权公告号 CN 102533602 B (45)授权公告日 2013.04.24 CN 102533602 B *CN102533602B* (21)申请号 201210001607.2 (22)申请日 2012.01.05 CGMCC No.5243 2011.09.09 C12N 1/20(2006.01) C12P 19/02(2006.01) C09K 8/582(2006.01) C09K 8/584(2006.01) C12R 1/385(2006.01) (73)专利权人 陕西延长石油 （集团） 有限责任公 司研究院 地址 710075 陕西省西安市西安市科技二路 75。

2、 号 (72)发明人 李世强 王香增 高瑞民 赵丽 薛媛 梁凯强 (74)专利代理机构 西安新思维专利商标事务所 有限公司 61114 代理人 韩翎 (54) 发明名称 一株铜绿假单孢菌及其培养方法与应用 (57) 摘要 本 发 明 涉 及 一 株 铜 绿 假 单 孢 菌 YM4CGMCCNo.5243 及其培养方法与应用。铜绿假 单孢菌 YM4 的培养方法是将铜绿假单孢菌 YM4 接 种到发酵培养基， 在 35或 55的温度条件下， 摇床转速120或80转/分， 培养24或48小时 ； 发 酵培养基的配方为 ： 葡萄糖、 蛋白胨、 玉米浆、 硝 酸钠、 磷酸氢二钠、 磷酸二氢钾、 硫酸镁、 。

3、氯化钙、 pH 值 6.5-7.4。本发明所述的铜绿假单孢菌 YM4 所产生的生物表面活性剂在油田上可降低油水界 面张力， 作用后原油流变性明显变好， 粘度降低， 可有效地降低注水压力， 提高注水效率和原油采 收率， 在油田驱油过程中有较在的应用前景。 (83)生物保藏信息 (51)Int.Cl. 审查员 彭海航 权利要求书 1 页 说明书 6 页 序列表 2 页 附图 2 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利 权利要求书1页 说明书6页 序列表2页 附图2页 (10)授权公告号 CN 102533602 B CN 102533602 B *CN102533602B* 1。

4、/1 页 2 1. 一株铜绿假单孢菌 （Pseudomonas aeruginosa） YM4， 于 2011 年 09 月 09 日保藏于中 国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心， 保藏号为CGMCC No.5243， 其16S rDNA基因 序列为 ： GGTACCGTCCCCCTTGCGGTTAGACTAGCTACTTCTGGAGCAACCCACTCCCATGGTGTGACGGGCGGTGTG TACAAGGCCCGGGAACGTATTCACCGTGACATTCTGATTCACGATTACTAGCGATTCCGACTTCACGCAGTCGAGTT GCAGACTGCGATCCGGAC。

5、TACGATCGGTTTTATGGGATTAGCTCCACCTCGCGGCTTGGCAACCCTTTGTACCGACC ATTGTAGCACGTGTGTAGCCCTGGCCGTAAGGGCCATGATGACTTGACGTCATCCCCACCTTCCTCCGGTTTGTCAC CGGCAGTCTCCTTAGAGTGCCCACCCGAGGTGCTGGTAACTAAGGACAAGGGTTGCGCTCGTTACGGGACTTAACCC AACATCTCACGACACGAGCTGACGACAGCCATGCAGCACCTGTGTCTGAGTTCCCGAAGGCACCAATCCATCTCTGG AAAGTT。

6、CTCAGCATGTCAAGGCCAGGTAAGGTTCTTCGCGTTGCTTCGAATTAAACCACATGCTCCACCGCTTGTGC GGGCCCCCGTCAATTCATTTGAGTTTTAACCTTGCGGCCGTACTCCCCAGGCGGTCGACTTATCGCGTTAGCTGCGC CACTAAGATCTCAAGGATCCCAACGGCTAGTCGACATCGTTTACGGCGTGGACTACCAGGGTATCTAATCCTGTTTG CTCCCCACGCTTTCGCACCTCAGTGTCAGTATCAGTCCAGGTGGTCGCCTTCGCCACTGGTGTTCCTTCCTA。

7、TATCT ACGCATTTCACCGCTACACAGGAAATTCCACCACCCTCTACCGTACTCTAGCTCAGTAGTTTTGGATGCAGTTCCCA GGTTGAGCCCGGGGATTTCACATCCAACTTGCTGAACCACCTACGCGCGCTTTACGCCCAGTAATTCCGATTAACGC TTGCACCCTTCGTATTACCGCGGCTGCTGGCACGAAGTTAGCCGGTGCTTATTCTGTTGGTAACGTCAAAACAGCAA GGTATTAACTTACTGCCCTTCCTCCCAACTTAAAGTGCTTTACAATCCGAAGACCTTCTT。

8、CACACACGCGGCATGGC TGGATCAGGCTTTCGCCCATTGTCCAATATTCCCCACTGCTGCCTCCCGTAGGAGTCTGGACCGTGTCTCAGTTCCA GTGTGACTGATCATCCTCTCAGACCAGTTACGGATCGTCGCCTTGGTAGGCCTTTACCCCACCAACTAGCTAATCCG ACCTAGGCTCATCTGATAGCGTGAGGTCCGAAGATCCCCCACTTTCTCCCTCAGGACGTATGCGGTATTAGCGCCCG TTTCCGGACGTTATCCCCCACTACCAGGCAGATTCCTAGGCATTACTC。

9、ACCCGTCCGCCGCTGAATCCAGGAGCAAG CTCCCTTCATCCGCTCGACTG ； 上述 16S rDNA 基因序列的长度为 1402 个核苷酸。 2. 权利要求 1 所述的一株铜绿假单孢菌 （Pseudomonas aeruginosa） YM4 在提高油田 采收率中的应用。 3. 权利要求 1 所述的一株铜绿假单孢菌 （Pseudomonas aeruginosa） YM4 在制备油田 开发生物表面活性剂中的应用。 权 利 要 求 书 CN 102533602 B 1/6 页 3 一株铜绿假单孢菌及其培养方法与应用 技术领域 0001 本发明涉及一株菌种及其培养方法。

10、与应用， 具体涉及一株铜绿假单孢菌及其培养 方法与应用。 背景技术 0002 铜绿假单孢菌 （Pseudomonas aeruginosa） 是近年来研究得较多的一种生物表面 活性剂产生菌。其分泌的鼠李糖脂 （RL） 生物表面活性剂具有乳化、 增溶、 降低表界面张力 等功能， 同时毒性低， 在自然界容易降解， 与合成表面活性剂相比 , 生物表面活性剂具有如 下突出优点: 原料在自然界广泛存在且价廉， 不受石油价格的影响， 发酵生产是典型的 “绿 色” 工艺 ； 化学结构的多样性为特定应用的需要提供了更为广泛的选择 , 而这些特定基团 一般用化学方法难以合成， 同时在极端温度、 p H 值、 盐。

11、浓度下具有较好的稳定性 ； 在油田 采油及环保中越来越重视生物表面活性剂的应用。 生物表面活性剂在油层中能大大降低油 水界面张力， 使油类乳化， 改变油层岩石的润湿性， 并籍此达到驱油、 提高石油采收率的目 的， 也可以用来降低油水界面张力， 以利于油污的清除。 0003 铜绿假单孢菌是研究得较多的， 可用于产生生物表面活性剂， 但研究领域相对较 小， 产生的表面活性剂应用于油田， 用以降低油水界面张力的研究相对较为滞后， 制约了铜 绿假单孢菌再油田开采领域的应用。 发明内容 0004 本发明的目的是提供一株能利用葡萄糖等糖源产生鼠李糖脂类表面活性剂、 降低 油水界面张力， 提高石油采收率的铜。

12、绿假单孢菌及其培养方法与应用。 0005 本发明所采用的技术方案是 ： 0006 一株铜绿假单孢菌 （Pseudomonas aeruginosa） YM4 CGMCC No.5243， 其 16S rDNA 基因序列为 ： 0007 GGTACCGTCCCCCTTGCGGTTAGACTAGCTACTTCTGGAGCAACCCACTCCCATGGTGTGACGGGCGGT GTGTACAAGGCCCGGGAACGTATTCACCGTGACATTCTGATTCACGATTACTAGCGATTCCGACTTCACGCAGTCGA GTTGCAGACTGCGATCCGGACTACGATCGGTTTT。

13、ATGGGATTAGCTCCACCTCGCGGCTTGGCAACCCTTTGTACCG ACCATTGTAGCACGTGTGTAGCCCTGGCCGTAAGGGCCATGATGACTTGACGTCATCCCCACCTTCCTCCGGTTTGT CACCGGCAGTCTCCTTAGAGTGCCCACCCGAGGTGCTGGTAACTAAGGACAAGGGTTGCGCTCGTTACGGGACTTAA CCCAACATCTCACGACACGAGCTGACGACAGCCATGCAGCACCTGTGTCTGAGTTCCCGAAGGCACCAATCCATCTC TGGAAAGTTCTCAGCATGTCAA。

14、GGCCAGGTAAGGTTCTTCGCGTTGCTTCGAATTAAACCACATGCTCCACCGCTTG TGCGGGCCCCCGTCAATTCATTTGAGTTTTAACCTTGCGGCCGTACTCCCCAGGCGGTCGACTTATCGCGTTAGCTG CGCCACTAAGATCTCAAGGATCCCAACGGCTAGTCGACATCGTTTACGGCGTGGACTACCAGGGTATCTAATCCTGT TTGCTCCCCACGCTTTCGCACCTCAGTGTCAGTATCAGTCCAGGTGGTCGCCTTCGCCACTGGTGTTCCTTCCTATA TCTACGCATT。

15、TCACCGCTACACAGGAAATTCCACCACCCTCTACCGTACTCTAGCTCAGTAGTTTTGGATGCAGTTC CCAGGTTGAGCCCGGGGATTTCACATCCAACTTGCTGAACCACCTACGCGCGCTTTACGCCCAGTAATTCCGATTAA 说 明 书 CN 102533602 B 2/6 页 4 CGCTTGCACCCTTCGTATTACCGCGGCTGCTGGCACGAAGTTAGCCGGTGCTTATTCTGTTGGTAACGTCAAAACAG CAAGGTATTAACTTACTGCCCTTCCTCCCAACTTAAAGTGCTTTACA。

16、ATCCGAAGACCTTCTTCACACACGCGGCAT GGCTGGATCAGGCTTTCGCCCATTGTCCAATATTCCCCACTGCTGCCTCCCGTAGGAGTCTGGACCGTGTCTCAGTT CCAGTGTGACTGATCATCCTCTCAGACCAGTTACGGATCGTCGCCTTGGTAGGCCTTTACCCCACCAACTAGCTAAT CCGACCTAGGCTCATCTGATAGCGTGAGGTCCGAAGATCCCCCACTTTCTCCCTCAGGACGTATGCGGTATTAGCGC CCGTTTCCGGACGTTATCCCCCACTACCAGGCAGA。

17、TTCCTAGGCATTACTCACCCGTCCGCCGCTGAATCCAGGAGC AAGCTCCCTTCATCCGCTCGACTG ； 0008 上述 16S rDNA 基因序列的长度为 1402 个核苷酸。 0009 一株铜绿假单孢菌 （Pseudomonas aeruginosa） YM4 CGMCC No.5243 的培养方法， 是将铜绿假单孢菌 （Pseudomonas aeruginosa） YM4 CGMCC No.5243 接种到发酵培养基， 在 35或 55的温度条件下， 摇床转速 120 或 80 转 / 分， 培养 24 或 48 小时 ； 0010 所述的发酵培养基的。

18、配方为 ： 0011 葡萄糖 4.0g-6.0g、 蛋白胨 1.0g-3.0g、 玉米浆 1.6g-3.0g、 硝酸钠 0.3g-1.0g、 磷 酸 氢 二 钠 0.1g-0.5g、磷 酸 二 氢 钾 0.05g-0.1g、硫 酸 镁 0.05g-0.1g、氯 化 钙 0.005g-0.01g、 pH 值 6.5-7.4。 0012 所述的一株铜绿假单孢菌 （Pseudomonas aeruginosa） YM4 CGMCC No.5243在提高 油田采收率中的应用。 0013 所述的一株铜绿假单孢菌 （Pseudomonas aeruginosa） YM4 CGMCC No.5243在制备 。

19、油田开发生物表面活性剂中的应用。 0014 本发明具有以下优点 ： 0015 本发明所述的铜绿假单孢菌 YM4 所产生的生物表面活性剂在油田上可降低油水 界面张力， 作用后原油流变性明显变好， 粘度降低。注入铜绿假单孢菌 YM4 菌液后注水压力 降低 5%， 在水驱油基础上提高驱油效率 5%， 可有效地降低注水压力， 提高注水效率和原油 采收率， 在油田驱油过程中有较在的应用前景。 0016 铜绿假单孢菌 YM4， 能够以葡萄糖等糖类为碳源高产鼠李糖脂类生物表面活性剂， 其发酵液最低表面张力达 26mN/m， 界面张力最你达 0.049 mN/m。该菌种的发酵液能很好地 降低油水表界面张力， 。

20、增加原油与水的乳化率， 增加地层原油的流动性， 物模实验表明铜绿 假单孢菌 YM4 及其表面活性剂可应用于油田注水采油尤其是提高注水效率及降低注水压 力， 增加注水量方面具有很好的应用前景。 0017 同时， 该菌培养方法简单易操作， 生长繁殖迅速， 具有扩大化生产的可行性。 附图说明 0018 图 1 为 1 号岩心中 0.1PV 铜绿假单孢菌 （Pseudomonas aeruginosa） YM4 发酵液采 收率与压力曲线。 0019 图 2 为 2 号岩心中 0.3PV 铜绿假单孢菌 （Pseudomonas aeruginosa） YM4 发酵液采 收率与压力曲线。 0020 图 3。

21、 为 3 号岩心中 0.5PV 铜绿假单孢菌 （Pseudomonas aeruginosa） YM4 发酵液采 收率与压力曲线。 0021 图 4 为 4 号岩心中 0.7PV 铜绿假单孢菌 （Pseudomonas aeruginosa） YM4 发酵液采 说 明 书 CN 102533602 B 3/6 页 5 收率与压力曲线。 具体实施方式 0022 下面结合具体实施方式对本发明进行详细的说明。 0023 本发明所涉及的铜绿假单孢菌 （Pseudomonas aeruginosa） YM4， 已于2011年09月 09 日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心， 保藏单位地址。

22、为北京市朝阳 区北辰西路 1 号院 3 号， 保藏编号为 CGMCC No.5243。 0024 下述实施例中的实验方法， 如无特殊说明， 均为常规方法 ； 下述实施例中所用的实 验材料， 如无特殊说明， 均为常规生化试剂。 0025 以下实施例中所涉及的培养基为 ： 0026 牛肉膏培养基 ： 0027 蛋白胨 1.0g、 牛肉膏 0.3g、 NaCl 0.5g、 琼脂 2.0g、 100mL 水、 pH 值 7.2-7.4。 0028 葡萄糖培养基 ： 0029 葡萄糖 2.0g、 玉米桨 0.4g、 硝酸钠 0.2g、 磷酸氢二钠 0.05g、 磷酸二氢钾 0.05g、 氯化钙 0.00。

23、5g、 硫酸镁 0.05g、 琼脂 2.0g、 pH 值 7.2。 0030 蓝色凝胶培养基 ： 0031 十六烷基三甲基溴化铵 5 g、 次甲基蓝 0.02 g、 牛肉膏 5 g、 蛋白胨 10 g, NaCl 5 g、 琼脂 20 g、 去离子水定容至 1 L、 pH 值为 7.2-7.4。 0032 种子瓶培养基一 ： 0033 葡 萄 糖 2.0g-4.0g、 蛋 白 胨 1.0g-3.0g、 玉 米 浆 0.4g-2.0g、 磷 酸 氢 二 钠 0.1g-0.2g、 磷酸二氢钾 0.05g-0.1g、 硝酸钠 0.2g-0.5g、 硫酸镁 0.05g-0.2g、 氯化钙 0.005g。

24、-0.01g、 pH 值 7.2-7.4。 0034 种子瓶培养基二 ： 0035 葡萄糖 2.0g-4.0g、 蛋白胨 1.0g-3.0g、 玉米浆 0.4g、 硝酸铵 0.2g、 磷酸氢二钠 0.1g、 磷酸二氢钾 0.05g-0.1g、 硫酸镁 0.05g-0.1g、 氯化钙 0.005g-0.1g、 pH 值 6.8-7.4。 0036 发酵培养基一 ： 0037 葡萄糖 4.0g-6.0g、 蛋白胨 1.0g-3.0g、 玉米浆 1.6g-3.0g、 硝酸钠 0.3g-1.0g、 磷 酸 氢 二 钠 0.1g-0.5g、磷 酸 二 氢 钾 0.05g-0.1g、硫 酸 镁 0.05g。

25、-0.1g、氯 化 钙 0.005g-0.01g、 pH 值 6.5-7.4。 0038 发酵培养基二 ： 0039 葡萄糖 4.0g-8.0g、 蛋白胨 1.0g-3.0g、 玉米浆 1.6g-3.0g、 硝酸铵 0.3g-0.6g、 磷 酸 氢 二 钠 0.1g-0.3g、磷 酸 二 氢 钾 0.05g-0.2g、硫 酸 镁 0.05g-0.2g、氯 化 钙 0.005g-0.01g、 pH 值 6.5-7.4。 0040 一、 铜绿假单孢菌 （Pseudomonas aeruginosa） YM4 的分离、 纯化 ： 0041 取适量延长油田长 2 及长 6 油藏的油水样， 经稀释划线分。

26、别接种于葡萄糖培养基 平板及牛肉膏培养基平板， 分别于 35和 50恒温培养 48 小时。将培养出的单菌落接种 于蓝色凝胶平板上， 在相同条件下培养 48 小时， 挑选蓝色变色圈较大的菌株， 接种于牛肉 膏培养基斜面， 共分离出 4 株蓝色变色圈较大的菌株， 保藏于 4， 备用。 0042 二、 铜绿假单孢菌 （Pseudomonas aeruginosa） YM4 的筛选与培养 ： 说 明 书 CN 102533602 B 4/6 页 6 0043 挑取通过上述方法得到的纯培养接种于发酵培养基一及发酵培养基二， 利用 250ml三角瓶， 装液量100ml， 35或55120或80r/min摇。

27、床培养。 24h和48h分别取发酵 液， 利用表界面张力仪测其表界面张力。 经测量， 铜绿假单孢菌 （Pseudomonas aeruginosa） YM4 发酵液表界面张力最低。 0044 三、 铜绿假单孢菌 （Pseudomonas aeruginosa） YM4 的菌种鉴定 ： 0045 1、 菌落特征 ： 0046 所筛的铜绿假单孢菌 （Pseudomonas aeruginosa） YM4在普通琼脂培养基上生长良 好， 菌落大小不一， 生长过程中产生黄色色素， 菌种呈黄色圆形菌落。 0047 2、 细胞形态和理化试验结果 ： 0048 0049 注 ：“十” 号表示反应阳性，“一” 。

28、号表示不生长或反应为阴性。 0050 3、 铜绿假单孢菌 （Pseudomonas aeruginosa） YM4 的 16S rRNA 基因序列 ： 0051 将铜绿假单孢菌 （Pseudomonas aeruginosa） YM4 接种于葡萄糖培养基， 35摇床 120r/min 培养 24 小时， 离心收集菌体细胞， 进行 16S rRNA 测序如下， 在 Genbank 数据库中 BLAST 比对， 菌株与 Pseudomonas aeruginosa 菌株的最高同源性为 99.9%。 0052 GGTACCGTCCCCCTTGCGGTTAGACTAGCTACTTCTGGAGCAACC。

29、CACTCCCATGGTGTGACGGGCGGT GTGTACAAGGCCCGGGAACGTATTCACCGTGACATTCTGATTCACGATTACTAGCGATTCCGACTTCACGCAGTCGA GTTGCAGACTGCGATCCGGACTACGATCGGTTTTATGGGATTAGCTCCACCTCGCGGCTTGGCAACCCTTTGTACCG ACCATTGTAGCACGTGTGTAGCCCTGGCCGTAAGGGCCATGATGACTTGACGTCATCCCCACCTTCCTCCGGTTTGT CACCGGCAGTCTCCTTAGAGTGCCCACCCGAGGTGCTGGTA。

30、ACTAAGGACAAGGGTTGCGCTCGTTACGGGACTTAA CCCAACATCTCACGACACGAGCTGACGACAGCCATGCAGCACCTGTGTCTGAGTTCCCGAAGGCACCAATCCATCTC 说 明 书 CN 102533602 B 5/6 页 7 TGGAAAGTTCTCAGCATGTCAAGGCCAGGTAAGGTTCTTCGCGTTGCTTCGAATTAAACCACATGCTCCACCGCTTG TGCGGGCCCCCGTCAATTCATTTGAGTTTTAACCTTGCGGCCGTACTCCCCAGGCGGTCGACTTATCGCGTTAGCTG 。

31、CGCCACTAAGATCTCAAGGATCCCAACGGCTAGTCGACATCGTTTACGGCGTGGACTACCAGGGTATCTAATCCTGT TTGCTCCCCACGCTTTCGCACCTCAGTGTCAGTATCAGTCCAGGTGGTCGCCTTCGCCACTGGTGTTCCTTCCTATA TCTACGCATTTCACCGCTACACAGGAAATTCCACCACCCTCTACCGTACTCTAGCTCAGTAGTTTTGGATGCAGTTC CCAGGTTGAGCCCGGGGATTTCACATCCAACTTGCTGAACCACCTACGCGCGCTTTACGCCCAGTA。

32、ATTCCGATTAA CGCTTGCACCCTTCGTATTACCGCGGCTGCTGGCACGAAGTTAGCCGGTGCTTATTCTGTTGGTAACGTCAAAACAG CAAGGTATTAACTTACTGCCCTTCCTCCCAACTTAAAGTGCTTTACAATCCGAAGACCTTCTTCACACACGCGGCAT GGCTGGATCAGGCTTTCGCCCATTGTCCAATATTCCCCACTGCTGCCTCCCGTAGGAGTCTGGACCGTGTCTCAGTT CCAGTGTGACTGATCATCCTCTCAGACCAGTTACGGATCGTCGCCTTGGTAGGC。

33、CTTTACCCCACCAACTAGCTAAT CCGACCTAGGCTCATCTGATAGCGTGAGGTCCGAAGATCCCCCACTTTCTCCCTCAGGACGTATGCGGTATTAGCGC CCGTTTCCGGACGTTATCCCCCACTACCAGGCAGATTCCTAGGCATTACTCACCCGTCCGCCGCTGAATCCAGGAGC AAGCTCCCTTCATCCGCTCGACTG 0053 四、 铜绿假单孢菌 （Pseudomonas aeruginosa） YM4 在不同培养基及培养条件下发 酵液表界面张力。 0054 表 1铜绿假单孢菌 （Pseudomonas 。

34、aeruginosa） YM4 不同条件下发酵液性能 0055 0056 由上表可见， 本微生物在 35时， 在培养基 2 上生长代谢微生物表面活性剂能力 最强， 发酵液的表界面张力最低。 0057 五、 检测铜绿假单孢菌 （Pseudomonas aeruginosa） YM4 在油田生产过程中降低油 水界面张力， 提高采收率的效果 ： 0058 1、 实验材料 0059 实验用水 ： 按照矿化度 4000mg/l 80000mg/l 配制的模拟水 ； 0060 实验岩心 ： 延长油田天然岩心 ； 0061 实验用微生物 ： 铜绿假单孢菌 （Pseudomonas aeruginosa） Y。

35、M4 发酵液， 浓度均为 10%， 其浓度指数为 106 109 个 /mL。 0062 2、 实验步骤 0063 恒温箱恒温 35 55， 岩心模型抽空 4h， 饱和模拟水， 放置 8h ； 0064 再用岩心水测渗透率， 使用模拟水以 0.1mL/min 的速度进行水驱实验， 至压力稳 定， 记录压力 P1、 出液量等数据 ； 0065 然后使用配制好的菌液以 0.1mL/min 的速度进行微生物驱至压力稳定， 记录压力 P2、 出液量等数据 ； 说 明 书 CN 102533602 B 6/6 页 8 0066 接着模拟水以 0.1mL/min 的速度驱替至压力稳定， 记录压力 P3、 。

36、出液量等数据 ； 判断铜绿假单孢菌 （Pseudomonas aeruginosa） YM4发酵液在低渗透岩心中降压增注的注入 能力及提高采收率效果。 0067 3、 实验结果 0068 研究低渗透率条件下， 渗透率对铜绿假单孢菌 （Pseudomonas aeruginosa） YM4 发 酵液在驱油模型中的注入压力的影响， 研究其注入能力及对采收率的影响。实验结果如下 表 2， 图 2 7 ： 0069 （1） 水驱含水98%后， 研究浓度为10%的铜绿假单孢菌 （Pseudomonas aeruginosa） YM4 发酵液用量为 0.1、 0.3、 0.5、 0.7PV 时在驱油物模中。

37、的降压增注及驱油效果， 实验结果 如下表 1 及图。 0070 表 2铜绿假单孢菌 （Pseudomonas aeruginosa） YM4 发酵液降压增注及提高采收 率物模实验 0071 0072 如图 14 中的压力曲线显示， 在低渗透驱油模型中， 渗透率相同的条件下， 随着铜 绿假单孢菌 （Pseudomonas aeruginosa） YM4 发酵液用量的增大， 后续水驱的压力不断的降 低，“漏斗” 范围不断的扩大。实验结果表明， 微生物在试验区油藏条件下代谢活动剧烈， 产 生代谢产物， 能很好地降低油水界面张力， 具有很好地降低注入压力的效果 , 同时其采收 率曲线显示， 在低渗透驱。

38、油模型中， 随着铜绿假单孢菌 （Pseudomonas aeruginosa） YM4发酵 液用量的增大， 后续水驱采收率值也相应的增加， 增加水驱油效果。 说 明 书 CN 102533602 B 1/2 页 9 SEQUENCE LISTING 陕西延长石油 （集团） 有限责任公司研究院 一株铜绿假单孢菌及其培养方法与应用 2012-3 1 PatentIn version 3.3 1 1402 DNA 铜绿假单孢菌 （Pseudomonas aeruginosa） 1 ggtaccgtcc cccttgcggt tagactagct acttctggag caacccactc ccatg。

39、gtgtg 60 acgggcggtg tgtacaaggc ccgggaacgt attcaccgtg acattctgat tcacgattac 120 tagcgattcc gacttcacgc agtcgagttg cagactgcga tccggactac gatcggtttt 180 atgggattag ctccacctcg cggcttggca accctttgta ccgaccattg tagcacgtgt 240 gtagccctgg ccgtaagggc catgatgact tgacgtcatc cccaccttcc tccggtttgt 300 caccggcagt 。

40、ctccttagag tgcccacccg aggtgctggt aactaaggac aagggttgcg 360 ctcgttacgg gacttaaccc aacatctcac gacacgagct gacgacagcc atgcagcacc 420 tgtgtctgag ttcccgaagg caccaatcca tctctggaaa gttctcagca tgtcaaggcc 480 aggtaaggtt cttcgcgttg cttcgaatta aaccacatgc tccaccgctt gtgcgggccc 540 ccgtcaattc atttgagttt taaccttgc。

41、g gccgtactcc ccaggcggtc gacttatcgc 600 gttagctgcg ccactaagat ctcaaggatc ccaacggcta gtcgacatcg tttacggcgt 660 ggactaccag ggtatctaat cctgtttgct ccccacgctt tcgcacctca gtgtcagtat 720 序 列 表 CN 102533602 B 2/2 页 10 cagtccaggt ggtcgccttc gccactggtg ttccttccta tatctacgca tttcaccgct 780 acacaggaaa ttccaccacc。

42、 ctctaccgta ctctagctca gtagttttgg atgcagttcc 840 caggttgagc ccggggattt cacatccaac ttgctgaacc acctacgcgc gctttacgcc 900 cagtaattcc gattaacgct tgcacccttc gtattaccgc ggctgctggc acgaagttag 960 ccggtgctta ttctgttggt aacgtcaaaa cagcaaggta ttaacttact gcccttcctc 1020 ccaacttaaa gtgctttaca atccgaagac cttcttc。

43、aca cacgcggcat ggctggatca 1080 ggctttcgcc cattgtccaa tattccccac tgctgcctcc cgtaggagtc tggaccgtgt 1140 ctcagttcca gtgtgactga tcatcctctc agaccagtta cggatcgtcg ccttggtagg 1200 cctttacccc accaactagc taatccgacc taggctcatc tgatagcgtg aggtccgaag 1260 atcccccact ttctccctca ggacgtatgc ggtattagcg cccgtttccg gacgttatcc 1320 cccactacca ggcagattcc taggcattac tcacccgtcc gccgctgaat ccaggagcaa 1380 gctcccttca tccgctcgac tg 1402 序 列 表 CN 102533602 B 1/2 页 11 图 1 图 2 说 明 书 附 图 CN 102533602 B 2/2 页 12 图 3 图 4 说 明 书 附 图 CN 102533602 B 。