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1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利 (10)授权公告号 (45)授权公告日 (21)申请号 201510967465.9 (22)申请日 2015.12.21 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 105595326 A (43)申请公布日 2016.05.25 (83)生物保藏信息 CGMCC No.10064 2014.11.26 (73)专利权人 光明乳业股份有限公司 地址 201103 上海市闵行区吴中路578号 (72)发明人 韩瑨吴正钧高彩霞刘振民 鄢明辉 (74)专利代理机构 上海弼兴律师事务所 31283 代理人 朱水平沈利 (51)Int.C。
2、l. C12N 1/04(2006.01) A23L 33/00(2016.01) A23L 19/00(2016.01) A23L 33/10(2016.01) (56)对比文件 CN 104651232 A,2015.05.27, CN 104643094 A,2015.05.27, 鄢明辉等.DsrY介导的明串珠菌胞外多糖合 成及其在氧损伤应答中的功能研究. 第十一次 全国基因功能与表观遗传调控学术研讨会论文 集 .2015,第57页. 审查员 唐亚楠 (54)发明名称 一种富含水不溶性葡聚糖的膳食补充剂及 其制备方法 (57)摘要 本发明公开了一种富含水不溶性葡聚糖的 膳食补充剂及其制。
3、备方法。 所述制备方法包括以 下步骤： 1 )将肠膜明串珠菌( Leuconostoc mesenteroides)BD3749发酵菌种接种于番茄汁 蔗糖培养基中， 发酵培养获得发酵液； 2)将步骤 1)所得发酵液冷冻干燥即得。 制备方法所用培养 基来源广、 成本低， 发酵菌种单一， 上述组合有利 于产品及其品质的标准化、 工业大规模生产的成 本控制以及食品安全性的保障。 采用本发明制备 的膳食补充剂打破了现有市场上稀缺以水不溶 性葡聚糖作为功能性成分的膳食补充剂的现状， 由于其中含有大量不易被消化的水不溶性葡聚 糖， 因此作为一种饱腹感强， 低卡路里的膳食补 充剂被应用于食品中， 其应用前景。
4、十分广阔。 权利要求书2页 说明书8页 附图1页 CN 105595326 B 2018.11.20 CN 105595326 B 1.一种富含水不溶性葡聚糖的膳食补充剂的制备方法， 其特征在于， 所述制备方法包 括以下步骤： 1)将肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)BD3749的发酵菌种接种于番茄汁蔗 糖培养基中， 发酵培养获得发酵液； 2)将步骤1)所得发酵液冷冻干燥即得； 步骤1)所述的番茄汁蔗糖培养基由包括以下步骤的方法制备： 番茄榨汁， 将所得榨汁 过滤后煮沸， 离心取上清液， 与蔗糖混合后加热冷却， 调节pH值， 灭菌后冷却即得； 所述离心的速度为4。
5、,00012,000g， 所述离心的时间为812分钟， 所述蔗糖的加入量 为515， 所述灭菌的温度为110135， 所述灭菌的时间为1030分钟， 所述pH值为5 8， 所述百分比为质量百分比； 步骤1)所述的发酵菌种的接种量为15， 所述百分比为体积百分比； 步骤1)所述发酵培养的温度为1537； 步骤1)所述发酵培养的时间为2496小时。 2.如权利要求1所述的制备方法， 其特征在于， 所述过滤的方法为利用80120目纱布 过滤取汁， 所述煮沸的时间为110分钟。 3.如权利要求2所述的制备方法， 其特征在于， 所述煮沸的时间为38分钟， 所述离心 的速度为6,00010,000g， 所。
6、述离心的时间为911分钟， 所述蔗糖的加入量为812， 所 述灭菌的温度为115125， 所述灭菌的时间为1525分钟， 所述pH值为67。 4.如权利要求3所述的制备方法， 其特征在于， 所述煮沸的时间为5分钟， 所述离心的速 度为8,000g， 所述离心的时间为10分钟， 所述蔗糖的加入量为10， 所述灭菌的温度为121 ， 所述灭菌的时间为20分钟。 5.如权利要求1所述的制备方法， 其特征在于， 步骤1)所述的发酵菌种的接种量为2 4。 6.如权利要求5所述的制备方法， 其特征在于， 步骤1)所述的发酵菌种的接种量为3。 7.如权利要求1所述的制备方法， 其特征在于， 步骤1)所述发酵。
7、培养为振荡发酵培养， 振荡的速度为100300rpm。 8.如权利要求7所述的制备方法， 其特征在于， 振荡的速度为150250rpm。 9.如权利要求8所述的制备方法， 其特征在于， 振荡的速度为200rpm。 10.如权利要求1所述的制备方法， 其特征在于， 步骤1)所述发酵培养的温度为2533 。 11.如权利要求10所述的制备方法， 其特征在于， 步骤1)所述发酵培养的温度为30。 12.如权利要求1所述的制备方法， 其特征在于， 步骤1)所述发酵培养的时间为4884 小时。 13.如权利要求12所述的制备方法， 其特征在于， 步骤1)所述发酵培养的时间为72小 时。 14.如权利要求。
8、1所述的制备方法， 其特征在于， 步骤2)所述的冷冻干燥之前还包括调 节步骤1)所得发酵液的pH值的步骤。 15.如权利要求14所述的制备方法， 其特征在于， 步骤1)所得发酵液的pH值为68。 16.如权利要求15所述的制备方法， 其特征在于， 步骤1)所得发酵液的pH值为6.5 权利要求书 1/2 页 2 CN 105595326 B 2 7.5。 17.如权利要求16所述的制备方法， 其特征在于， 步骤1)所得发酵液的pH值为7。 18.一种如权利要求117任一项所述的制备方法制得的富含水不溶性葡聚糖的膳食 补充剂。 19.如权利要求18所述的富含水不溶性葡聚糖的膳食补充剂在制备食品中的。
9、用途。 权利要求书 2/2 页 3 CN 105595326 B 3 一种富含水不溶性葡聚糖的膳食补充剂及其制备方法 技术领域 0001 本发明属于生物技术领域， 具体涉及一种富含水不溶性葡聚糖的膳食补充剂及其 制备方法。 背景技术 0002 膳食补充剂是一种日常营养补充剂， 其可通过维生素、 矿物质、 氨基酸等营养成分 的补充， 来提高机体健康水平和降低疾病发生风险， 现有的膳食补充剂基本都是通过多种 营养成分的组合制备而成的， 复杂的配方大大增加了膳食补充剂在制备过程中被污染的风 险， 进而对消费者形成了潜在的威胁。 水不溶性葡聚糖是一种不易被人体消化的微生物多 糖， 因此， 若将其与与传。
10、统膳食补充剂配合使用势必相得益彰， 不仅能获得基本的益生物质 (如维生素、 矿物质等)， 而且可增强食用者饱腹感， 并减少食物在体内因分解所产生的卡路 里， 然而， 目前既能增强饱腹感又含有基本的益生物质的膳食补充剂市面上几乎没有， 因 此， 利用安全性更高的微生物来生产一种饱腹感强， 低卡路里并含有基本益生物质的膳食 补充剂将是膳食补充剂的重要研究方向之一。 发明内容 0003 本发明为了解决目前市场饱腹感强， 低卡路里并含有基本益生物质的膳食补充剂 严重匮乏的问题， 提供了一种富含水不溶性葡聚糖的膳食补充剂及其制备方法。 0004 本发明人发现利用保藏编号为CGMCC No.10064肠膜。
11、明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)菌株代谢番茄汁蔗糖培养基后获得的发酵液中含有大量水不溶性葡聚糖， 利用该发酵液制备得到了富含水不溶性葡聚糖的膳食补充剂， 从而完成了本发明。 0005 为解决上述技术问题， 本发明采取的技术方案之一是： 一种富含水不溶性葡聚糖 的膳食补充剂的制备方法， 所述制备方法包括以下步骤： 0006 1)将肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)BD3749的发酵菌种接种于番茄 汁蔗糖培养基中， 发酵培养获得发酵液； 0007 2)将步骤1)所得发酵液冷冻干燥即得。 0008 本发明步骤1)为： 将肠膜明串珠菌(Le。
12、uconostoc mesenteroides)BD3749的发酵 菌种接种于番茄汁蔗糖培养基中， 发酵培养获得发酵液。 0009 本发明步骤1)所述的肠膜明串珠菌BD3749已于2014年11月26日保藏在中国微生 物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)， 保藏地址： 北京市朝阳区北辰西路1号院3 号 ， 邮 编 ： 100101。 该菌株的建议的分类命 名为 ： 肠膜明串珠菌Leuconostoc mesenteroides， 该菌株的保藏编号为： CGMCC No.10064， 所保藏的培养物名称为： BD3749。 0010 本发明步骤1)所述的番茄汁蔗糖培养基为常规的， 较。
13、佳地由包括以下步骤的方法 制备： 番茄榨汁， 将所得榨汁过滤后煮沸， 离心取上清液， 加入蔗糖加热溶解后冷却， 调节pH 值， 灭菌后冷却即得。 其中， 所述过滤的方法为常规的， 较佳地为利用80120目纱布过滤取 汁； 所述煮沸的时间为常规的， 较佳地为110分钟(min)， 更佳地为38分钟， 最佳地为5分 说明书 1/8 页 4 CN 105595326 B 4 钟； 所述离心为常规的， 离心的速度较佳地为4,00012,000g， 更佳地为6,00010,000g， 最佳地为8,000g， 离心的时间较佳地为812分钟， 更佳地为911分钟， 最佳地为10分钟； 蔗糖的加入量较佳地为5。
14、15， 更佳地为812， 最佳地为10； 所述灭菌为常规的， 灭 菌的温度较佳地为110135， 更佳地为115125， 最佳地为121， 灭菌的时间较佳地 为1030分钟， 更佳地为1525分钟， 最佳地为20分钟； 所述pH值的调节方法为本领域常规 的调节方法， 较佳地为加入食品级碱调节pH值， 所述食品级碱较佳地是： Na2CO3、 NaHCO3和 NaOH中的一种或多种； 所述pH值为本领域常规的， 较佳地为58， 更佳地为67， 最佳地为 7。 0011 本发明步骤1)所述的发酵培养为常规的， 所述发酵菌种的接种量较佳地为1 5， 更佳地为24， 最佳地为3， 所述百分比为体积百分比。
15、。 所述的发酵培养较佳地 为振荡发酵培养， 所述振荡的速度较佳地为100300rpm， 更佳地为150250rpm， 最佳地为 200rpm； 发酵培养的温度较佳地为1537， 更佳地为2533， 最佳地为30； 发酵培 养的时间较佳地为2496小时(h)， 更佳地为4884小时， 最佳地为72小时。 0012 本发明步骤2)为： 将步骤1)所得发酵液冷冻干燥即得。 0013 本发明膳食补充剂的制备方法， 较佳地， 在步骤2)所述的冷冻干燥之前还包括调 节步骤1)所得发酵液的pH值的步骤， 其中， 所述的调节使用的为本领域常规方法， 较佳地为 利用食品级碱来调节， 所述食品级碱为本领域常规， 。
16、较佳地是Na2CO3、 NaHCO3和NaOH中的一 种或多种； 所述的pH值较佳地为68， 更佳地6.57.5， 最佳地为7。 0014 本发明步骤2)所述的冷冻干燥为本领域常规的冻干(即冷冻干燥)方法， 较佳地为 真空冷冻干燥， 所述真空冷冻干燥条件为常规的， 较佳地为： 板层极限温度-60， 冷阱极 限温度-70， 板层装料厚度0.52.0mm， 真空度1030Pa。 0015 为解决上述技术问题， 本发明采取的技术方案之二是： 一种如本发明所述的制备 方法制得的富含水不溶性葡聚糖的膳食补充剂。 0016 较佳地， 所述膳食补充剂中水不溶性葡聚糖的含量3， 所述百分比为质量百分 比。 0。
17、017 为解决上述技术问题， 本发明采取的技术方案之三是： 如本发明所述的富含水不 溶性葡聚糖的膳食补充剂在制备食品中的用途。 0018 本发明所述的用途为本领域常规用途， 较佳地为将本发明所得富含水不溶性葡聚 糖的膳食补充剂作为保健食品或食品添加剂的用途。 0019 在符合本领域常识的基础上， 上述各优选条件， 可任意组合， 即得本发明各较佳实 例。 0020 本发明所用试剂和原料均市售可得。 0021 本发明的积极进步效果在于： 0022 1、 本发明采用的肠膜明串珠菌是乳酸菌的一种， 与其他产水不溶性葡聚糖的菌株 如文氏曲霉(Aspergillus wentii)、 产黄青霉(Penic。
18、illium chrysogenum)、 芽孢杆菌 (Bacillus sp.)相比， 其代谢产物来自安全性更高的微生物， 从而具有更高的食品安全性。 0023 2、 本发明提供的膳食补充剂， 其制备所过程采用的发酵培养基原料来源广泛、 成 本低廉、 天然安全、 发酵菌种单一， 在降低物料成本的同时， 提高了食品的安全性， 并有利于 产品及其品质的标准化和工业大规模生产的成本控制。 说明书 2/8 页 5 CN 105595326 B 5 0024 3、 本发明利用产水不溶性葡聚糖的肠膜明串珠菌发酵天然的发酵培养基， 结合冷 冻干燥以及优选调节pH值等步骤的制备方法生产可直接食用的功能性膳食补。
19、充剂， 改善了 现有市场上稀缺富含水不溶性葡聚糖以此提高饱腹感、 降低卡路里的功能性膳食补充剂的 现状， 得到了一种安全健康， 可食用， 生产成本低， 适合于产业化生产， 并受现代消费者欢迎 的膳食补充剂。 附图说明 0025 图1为肠膜明串珠菌BD3749水不溶性多糖的单糖组成色谱测定结果。 具体实施方式 0026 下面通过实施例的方式进一步说明本发明， 但并不因此将本发明限制在所述的实 施例范围之中。 下列实施例中未注明具体条件的实验方法， 按照常规方法和条件， 或按照商 品说明书选择。 0027 本发明中所述的 “室温” 是指进行试验的操作间的温度， 一般为1525， 实施例 中所使用的。
20、试剂若未加说明， 均为分析纯试剂， 购买自国药集团。 0028 实施例1 富含水不溶性葡聚糖的膳食补充剂的制备 0029 1、 富含水不溶性葡聚糖的膳食补充剂的制备 0030 番茄汁蔗糖培养基的制备： 成熟番茄清洗， 去皮， 榨汁机压榨， 80目纱布过滤取汁， 煮沸5min， 8000g离心10min取上清， 加入10(w/v)蔗糖加热溶解后冷却至室温， 以Na2CO3调 节pH至7， 121灭菌20min， 冷却至室温， 即得无菌的番茄汁蔗糖培养基。 0031 种子(发酵菌种)的制备： 将肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)BD3749 的冻干粉用少量无菌蒸馏水。
21、溶解， 用接种环取一环划线于含2(w/v)蔗糖的M17琼脂培养 基(购自Merck Co.德国)上， 28好氧培养24h后取出， 用接种环挑取单菌落放入20mL含2 (w/v)蔗糖的M17液体培养基(购自Merck Co.德国)， 28180rpm摇床培养24h后取出， 将培 养物9,000rpm离心10min， 弃去上清， 菌体用无菌蒸馏水洗涤2次后， 用原培养体积的无菌蒸 馏水悬浮， 得到发酵用的种子。 所述肠膜明串珠菌BD3749的冻干粉由以下方法制备： 挑取2 个菌落， 接种于300mL的10(w/w)的脱脂乳溶液里30培养4h， -80预冻过夜， -20冷冻 干燥。 0032 (1)。
22、将所得的肠膜明串珠菌BD3749种子以接种量3(v/v)无菌接种于蔗糖百分比 含量为10的番茄汁蔗糖培养基， 30， 200rpm振荡培养72h， 发酵结束后取发酵液， 按照下 述测定方法， 测得该发酵液中水不溶性葡聚糖的质量百分比含量为0.92。 0033 发酵液中水不溶性葡聚糖的质量百分比含量的测定方法： 分别称取发酵液中水不 溶性葡聚糖与发酵液冻干粉末的质量， 并计算二者的质量比； 其中发酵液中水不溶性葡聚 糖按照下述制备方法制备， 发酵液冻干粉末即为用于制备水不溶性葡聚糖的发酵液冻干后 所得粉末。 冻干条件为： 板层初始温度-35， 冷阱温度-55， 板层装料厚度2.0mm， 真空度 。
23、20Pa， 冻干时间3天。 0034 发酵液中水不溶性葡聚糖的制备方法： 将发酵液冻干(即冷冻干燥)后， 将冻干粉 末与2M的NaOH溶液以1g 3mL的比例混合室温浸提2h， 12,000rpm离心8min， 取上清， 用2M的 HCl溶液调节pH至7， 15,000rpm离心8min取沉淀， 冷冻干燥即得水不溶性葡聚糖。 说明书 3/8 页 6 CN 105595326 B 6 0035 (2)将发酵液pH调节至7， 冷冻干燥后得本实施例的膳食补充剂A。 0036 按照下述测定方法， 测得本实施例生产的膳食补充剂A中水不溶性葡聚糖的质量 百分比含量为6.43。 0037 膳食补充剂中水不溶。
24、性葡聚糖的质量百分比含量的测定方法： 分别称取膳食补充 剂中水不溶性葡聚糖与膳食补充剂的质量， 并计算二者的质量比； 其中， 膳食补充剂中水不 溶性葡聚糖由下述方法制备而得。 0038 膳食补充剂中水不溶性葡聚糖的制备方法： 将膳食补充剂与2M的NaOH溶液以1g 3mL的比例混合室温浸提2h， 12,000rpm离心8min， 取上清， 用2M的HCl溶液调节pH至7， 15, 000rpm离心8min取沉淀， 冷冻干燥即得水不溶性葡聚糖。 0039 2、 肠膜明串珠菌BD3749发酵液中水不溶性胞外多糖的单糖组成测定 0040 (a)多糖水解 0041 称取3mg由本实施例所得发酵液制备的。
25、水不溶性葡聚糖与2mL 4mol/L TFA(三氟 乙酸， 购自Sigma-Aldrich Co.LLC， 美国)充分混合， 充N2封管， 110烘箱中水解20h； 冷却 后打开盖， 加200 L甲醇后用N2吹干， 如此重复加甲醇并用N2吹3次， 去除TFA， 将其残渣用水 溶解定容至5mL， 用0.45 m微孔膜过滤后供进样分析。 0042 (b)色谱条件 0043 色谱柱： CarboPacPA203mmi.d.150mm； 0044 流动相： A、 H2O； B、 250mmol/L NaOH； C、 1mol/L CH3COONa； 0045 三元梯度洗脱： 流速： 0.5mL/min。
26、； 积分脉冲安培检测器； 0046 Au工作电极： Ag/AgCl参比电极； 0047 进样体积： 20 L； 柱温： 30。 0048 肠膜明串珠菌BD3749水不溶性胞外多糖的糖基组成的色谱分析结果见图1， 该多 糖在5.875min有单一吸收峰， 且该吸收峰的保留时间与葡萄糖标品保留时间一致。 0049 结论： 肠膜明串珠菌BD3749水不溶性胞外多糖是由葡萄糖单一糖基组成， 是一种 葡聚糖。 0050 实施例2 富含水不溶性葡聚糖的膳食补充剂的制备 0051 种子(发酵菌种)的制备方法、 发酵液中水不溶性葡聚糖的制备方法、 番茄汁发酵 饮品中水不溶性葡聚糖的制备方法： 同实施例1。 0。
27、052 番茄汁蔗糖培养基的制备： 成熟番茄清洗， 去皮， 榨汁机压榨， 100目纱布过滤取 汁， 煮沸10min， 4000g离心12min取上清， 加入质量百分比为15的蔗糖加热溶解后冷却至 室温， 以NaHCO3调节pH至8， 135灭菌10min， 冷却至室温， 即得无菌的番茄汁蔗糖培养基。 0053 (1)将所得的肠膜明串珠菌BD 3749种子以接种量5(v/v)无菌接种于蔗糖质量 百分比含量为15的番茄汁蔗糖培养基， 15， 300rpm振荡培养24h， 发酵结束后取发酵液， 按照实施例1中的测定方法， 测得该发酵液中水不溶性葡聚糖的质量百分比含量为0.86。 0054 (2)将发酵。
28、液pH调节至8， 冷冻干燥后得本实施例的膳食补充剂B。 0055 按照实施例1中的测定方法， 测得本实施例生产的膳食补充剂B中水不溶性葡聚糖 的质量百分比含量为4.46。 0056 实施例3 富含水不溶性葡聚糖的膳食补充剂的制备 0057 种子(发酵菌种)的制备方法、 发酵液中水不溶性葡聚糖的制备方法、 番茄汁发酵 说明书 4/8 页 7 CN 105595326 B 7 饮品中水不溶性葡聚糖的制备方法： 同实施例1。 0058 番茄汁蔗糖培养基的制备： 成熟番茄清洗， 去皮， 榨汁机压榨， 120目纱布过滤取 汁， 煮沸1min， 12000g离心8min取上清， 加入质量百分比含量为5蔗糖。
29、加热溶解后冷却至 室温， 以NaOH调节pH至5， 110灭菌30min， 冷却至室温， 即得无菌的番茄汁蔗糖培养基。 0059 (1)将所得的肠膜明串珠菌BD 3749种子以接种量1(v/v)无菌接种于蔗糖质量 百分比含量为5的番茄汁蔗糖培养基， 37， 100rpm振荡培养96h， 发酵结束后取发酵液， 按照实施例1中的测定方法， 测得该发酵液中水不溶性葡聚糖的质量百分比含量为0.38。 0060 (2)将发酵液pH调节至6， 冷冻干燥后得本实施例的膳食补充剂C。 0061 按照实施例1中的测定方法， 测得本实施例生产的膳食补充剂C中水不溶性葡聚糖 的质量百分比含量为4.09。 0062 。
30、实施例4 富含水不溶性葡聚糖的膳食补充剂的制备 0063 种子(发酵菌种)的制备方法、 发酵液中水不溶性葡聚糖的制备方法、 番茄汁发酵 饮品中水不溶性葡聚糖的制备方法： 同实施例1。 0064 番茄汁蔗糖培养基的制备： 成熟番茄清洗， 去皮， 榨汁机压榨， 100目纱布过滤取 汁， 煮沸8min， 10,000g离心9min取上清， 加入质量百分比含量为12的蔗糖加热溶解后冷 却至室温， 以Na2CO3和NaHCO3调节pH至6， 115灭菌25min， 冷却至室温， 即得无菌的番茄汁 蔗糖培养基。 0065 (1)将所得的肠膜明串珠菌BD3749种子以接种量2(v/v)无菌接种于蔗糖质量百 。
31、分比含量为12的番茄汁蔗糖培养基， 25， 250rpm振荡培养48h， 发酵结束后取发酵液， 按 照实施例1中的测定方法， 测得该发酵液中水不溶性葡聚糖的质量百分比含量为0.64。 0066 (2)将发酵液pH调节至6.5， 冷冻干燥后得本实施例的膳食补充剂D。 0067 按照实施例1中的测定方法， 测得本实施例生产的膳食补充剂D中水不溶性葡聚糖 的质量百分比含量为3.93。 0068 实施例5 富含水不溶性葡聚糖的膳食补充剂的制备 0069 种子(发酵菌种)的制备方法、 发酵液中水不溶性葡聚糖的制备方法、 番茄汁发酵 饮品中水不溶性葡聚糖的制备方法： 同实施例1。 0070 番茄汁蔗糖培养。
32、基的制备： 成熟番茄清洗， 去皮， 榨汁机压榨， 80目纱布过滤取汁， 煮沸3min， 6000g离心11min取上清， 加入质量百分比含量为8的蔗糖加热溶解后冷却至室 温， 以Na2CO3、 NaHCO3和NaOH调节pH至6.5， 125灭菌15min， 冷却至室温， 即得无菌的番茄汁 蔗糖培养基。 0071 (1)将所得的肠膜明串珠菌BD3749种子以接种量4(v/v)无菌接种于蔗糖质量百 分比含量为8的番茄汁蔗糖培养基， 33， 150rpm振荡培养84h， 发酵结束后取发酵液， 按 照实施例1中的测定方法， 测得该发酵液中水不溶性葡聚糖的质量百分比含量为0.84。 0072 (2)将。
33、发酵液pH调节至7.5， 冷冻干燥后得本实施例的膳食补充剂E。 0073 按照实施例1中的测定方法， 测得本实施例生产的膳食补充剂E中水不溶性葡聚糖 的质量百分比含量为6.83。 0074 效果实施例1 产品口味与喜好程度测试 0075 以实施例1-5制备的膳食补充剂A、 B、 C、 D和E为实验对象， 进行产品的口味测试。 测 试时间为成品完成后20环境下存放2周， 感官检查项目为： 色泽、 酸甜比、 风味、 口感、 营 说明书 5/8 页 8 CN 105595326 B 8 养， 感官评分标准如表1所示。 参加本实验人数为50人， 感官评分项目取平均值， 分数越高， 表示越贴近产品的最佳。
34、特征， 并统计被测试人员对产品的喜爱度， 感官评分的结果如表2所 示。 0076 表1感官评分标准 0077 0078 表2感官评定结果 0079 0080 从产品口味测试和喜好程度统计结果可以看出， 总体而言， 本发明的富含水不溶 性葡聚糖的膳食补充剂在产品风味、 口感、 营养方面可被大部分消费者所接受。 0081 效果实施例2 膳食补充剂中水不溶性葡聚糖的稳定性 0082 将实施例1-5制备的膳食补充剂A、 B、 C、 D和E， 分装入无菌的铝箔袋， 常温(25)保 存6个月、 9个月和12个月后取出， 按照实施例1中的测定方法， 分别测定其中的水不溶性葡 聚糖的质量百分比含量， 结果如表。
35、3所示。 0083 表3膳食补充剂中水不溶性葡聚糖在常温保存条件下的稳定性 说明书 6/8 页 9 CN 105595326 B 9 0084 0085 对比实施例1 0086 将实施例1中的接种量， 培养基pH， 培养温度， 发酵时间， 发酵振荡的速度以及蔗糖 浓度逐一进行调整， 获得了以下一组不同方法制备的发酵液， 各组中的水不溶性葡聚糖含 量如表4所示。 0087 表4不同方法制备所得水不溶性葡聚糖产量 0088 0089 0090 从表4所示的结果中可以得出， 将所述发酵液的制备方法中接种量， 培养基pH， 培 养温度， 发酵时间， 发酵振荡的速度以及蔗糖浓度调整到本发明之外的时候， 所得水不溶性 葡聚糖的产量显著降低。 0091 应理解， 在阅读了本发明的上述内容之后， 本领域技术人员可以对本发明作各种 说明书 7/8 页 10 CN 105595326 B 10 改动或修改， 这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。 说明书 8/8 页 11 CN 105595326 B 11 图1 说明书附图 1/1 页 12 CN 105595326 B 12 。