技术领域
本发明涉及有机化学领域，尤其涉及一种如式1所示的氮杂环六肽或其盐 的纯化方法。
背景技术
由于侵入性医疗程序和广谱抗生素的广泛使用，以及癌症和器官移植患者 的化疗，恶性血液病，和艾滋病所导致的免疫缺陷的患者数量的急剧增加，使 得严重和威胁生命的真菌感染在过去的几十年显著增加。由于毒性，药物相互 作用和耐受性使为数不多的抗菌药的使用受到限制。
1974年，人们发现了棘球白素类的化合物具有良好的抗菌活性。其作用机 理为：通过阻滞病原真菌β-(1，3)-D-葡聚糖的合成，从而阻碍病原真菌的细 胞壁的合成，起到抗真菌效果。直至2001年，卡泊芬净正式得到美国FDA的 批准上市，人们对抗真菌的药物的研究得到了突破性的进展。卡泊芬净是一个 作用位点独特，广谱且低毒的药物，其最初由默克公司作为广谱抗真菌/抗肺 囊虫病药物开发而得，化学结构如式1所示。
1994年，欧洲专利EP0620232公开了以棘白菌素B0为原料的卡泊芬净的合 成和纯化方法。随后美国专利US5552521继续公开了改进了的卡泊芬净合成纯 化方法。两篇专利报道的有关中间体和纯品的纯化方法均采用C18硅胶制备柱 进行柱层析分离纯化，收集液采用冷冻干燥的方法，但是，在中间体和成品的 纯化和干燥过程中采用C18硅胶柱和冷冻干燥，不仅使得工艺本身的操作难度 增大，能耗和对设备要求也都非常高，而且对设备的损坏非常严重，并无法规 模化生产。
因此，本领域迫切需要提供一种新的如式1所示的氮杂环六肽或其盐的纯 化方法。
发明内容
本发明旨在提供一种新的如式1所示的氮杂环六肽或其盐的纯化方法。
在本发明的第一方面，提供了一种如式1所示化合物的纯化方法，所述的方 法包括步骤：
(1)将化合物1的粗品上样至大孔吸附树脂；
(2)用水溶液、有机溶剂、或有机溶剂与水的混合溶液洗涤大孔吸附树脂；
(3)用水溶液、有机溶剂、或有机溶剂与水的混合溶液进行洗脱，得到纯化 的如式1所示化合物；
所述的大孔吸附树脂选自由苯乙烯与二乙烯苯聚合而成的非极性的芳香 吸附树脂；或具有甲基丙烯酸酯单元结构的中等极性的甲基丙烯酸吸附树脂； 较佳地，所述的大孔吸附树脂选自下述树脂的一种或一种以上：XAD-1、XAD-2、 XAD-3、XAD-4、XAD-5、XAD-16、XAD-16HP；或下述树脂的一种或一种以上： HP-10、HP-20、HP-20ss、HP-21、HP-30、HP-40、HP-50、SP-825、SP-850、 SP-70、SP-700、SP-207；或下述树脂的一种或一种以上：XAD-6、XAD-7、XAD-7HP、 XAD-8；或是HP-2MG。
所述有机溶剂选自C1-C4醇、C1-C4酮、乙腈或四氢呋喃；较佳地，所述 C1-C4醇选自下述的一种或一种以上：甲醇、乙醇、丙醇、丁醇；所述C1-C4 酮选自下述的一种或一种以上：丙酮、丁酮。
所述水溶液、有机溶剂、或有机溶剂与水的混合溶液pH≤7。
较佳地，步骤(3)中使用水溶液、有机溶剂、或有机溶剂与水的混合溶 液进行洗脱时有机溶剂浓度(v/v％)由低到高分梯度进行洗脱。
在另一优选例中，所述步骤(3)后还包括步骤：
(4)将纯化的如式1所示化合物进行结晶得到纯度大于99％的如式1所 示化合物。
在本发明的第二方面，提供了一种上所述的本发明提供的纯化方法得到的 纯度大于99％的如式1所示化合物。
在本发明的第三方面，提供了一种如上所述的纯度大于99％的如式1所示 化合物的晶体，所述化合物晶体X-射线粉末衍射(XRPD)图上在下述2θ衍射 角有特征峰：2.940±0.2°，5.061±0.2°，5.880±0.2°和8.960±0.2°； 较佳地，所述化合物晶体X-射线粉末衍射(XRPD)图上在下述2θ衍射角还有 特征峰：6.661±0.2°，10.299±0.2°和17.900±0.2°。
同时，所述的化合物晶体具有如图5所示的红外光谱图。并且所述化合物 晶体的差示扫描量热法图(DSC)上140-146℃有最大吸热峰。
据此，本发明提供了一种新的如式1所示的氮杂环六肽或其盐的纯化方法。
附图说明
图1显示了采用US5552521A合成路线合成的化合物1粗品的HPLC图谱。
图2显示了采用CN101648994A合成路线合成的化合物1粗品的HPLC图谱。
图3显示了由本发明实施例3制备得到的卡泊芬净醋酸盐的HPLC图谱。
图4显示了本发明实施例3制备得到的卡泊芬净醋酸盐的XRPD图谱。
图5显示了本发明实施例3制备得到的卡泊芬净醋酸盐的红外光谱。
图6显示了本发明实施例3制备得到的卡泊芬净醋酸盐的DSC图谱。
图7显示了本发明实施例4制备得到的卡泊芬净醋酸盐的HPLC图谱。
上述HPLC图谱表格中的文字说明如下：
RT表示保留时间；Area表示峰面积；％Area表示峰面积占总峰面积的百 分比；Height表示峰高。
具体实施方式
发明人发现在一定条件下，使用大孔吸附树脂便能对化合物1有相当好的 分离、纯化作用。
如本文所用，“如式1所示化合物”或“化合物1”可以互换使用，都是 指具有以下结构式的化合物或其药学上可接受的盐：
如本文所用，“药学上可接受的盐”是指同选自下述酸形成的盐类：盐酸、 氢溴酸、磷酸、硫酸、马来酸、柠檬酸、醋酸、酒石酸、琥珀酸、酢浆草酸、苹 果酸、谷氨酸、或其它同列于Journal of Pharmaceutical Science，66：2(1977) 上的药学上可接受的盐有关的酸。
如本文所用，“如式1所示化合物的纯度”、“化合物1的纯度”或“化合 物1的HPLC纯度”可以互换使用，都是指在本发明提供的高效液相色谱(HPLC) 检测条件下，测得的化合物1的峰面积和所有峰的峰面积之和的百分比。
如本文所用，“如式1所示化合物的粗品”或“化合物1的粗品”可以互 换使用，都是指在本发明提供的高效液相色谱(HPLC)检测条件下，化合物1的 含量＜90％的混合物。可以使用本领域现有的方法得到化合物1的粗品，例如但 不限于，以微生物发酵产物纽莫康定B0为起始原料，通过多步化学反应得到化 合物1的粗品，参见US5552521A实施例1和CN101648994A实施例1-7中描述 的方法。
如本文所用，“含有如式1所示化合物的粗品的溶液”或“含有化合物1 的粗品的溶液”可以互换使用，是指含有目标化合物1和一种或多种非目标化 合物的溶液，可以是化合物1的粗品溶解于水或者PH≤7的缓冲溶液获得，也 可以是任何过程得到的化合物1的反应液，通过与水或者PH≤7的缓冲溶液混 合所得的含有有机溶剂的混合溶液。可以使用本领域现有的制备化合物1的方法 所获得的化合物1的反应液，例如但不限于，以微生物发酵产物纽莫康定B0为 起始原料，通过多步化学反应得到的反应液。比如：US5552521A报道其的合成 方法，纽莫康定B0上的活泼酰胺基用硼烷还原成胺，该胺上的活泼羟基与强离 去基团化合物，如苯硫酚，反应得到苯硫醚化合物，苯硫醚化合物在甲醇溶液 中经乙二胺氨解得到化合物1的甲醇反应液(如下路线)：
也可以是中国专利申请CN101648994A中所描述的方法，即以微生物发酵 产物纽莫康定B0为起始原料，纽莫康定B0上的活泼羟基与强离去基团化合物， 如苯硫酚，反应得到苯硫醚化合物，苯硫醚化合物在甲醇溶液中经乙二胺氨解 得到胺，该胺在四氢呋喃中与硼烷作用，还原得到化合物1的四氢呋喃反应液 (如下路线)：
。
以上化合物1的反应液仅是举例，本发明所述的化合物1的反应液应当不 受此限制。
如本文所用，“大孔吸附树脂”主要包括：a、由苯乙烯与二乙烯苯聚合而 成的非极性的芳香吸附树脂，可以举例的是美国罗门哈斯(Rohmhaas)公司生 产的XAD系列吸附树脂中的：XAD-1、XAD-2、XAD-3、XAD-4、XAD-5、XAD-16、 XAD-16HP、或它们的混合物，以及日本三菱化学公司生产Diaion HP系列吸附 树脂中的HP-10、HP-20、HP-20ss、HP-21、HP-30、HP-40、HP-50、SP-825、 SP-850、SP-70、SP-700、SP-207、或它们的混合物；b、具有甲基丙烯酸酯单 元结构的中等极性的甲基丙烯酸吸附树脂，可以举例的是美国罗门哈斯 (Rohmhaas)公司生产XAD系列吸附树脂中的：XAD-6、XAD-7、XAD-7HP、XAD-8， 或它们的混合物，也可以是日本三菱化学公司生产Diaion HP系列吸附树脂中 的HP-2MG。
如本文所用，“上样”是指将含有化合物1的粗品的溶液和大孔吸附树脂 接触，使化合物1的粗品吸附到大孔吸附树脂上的过程。所述的接触包括将大 孔吸附树脂直接投入溶液中，然后搅拌吸附；还有将大孔吸附树脂装入层析装 置中，使溶液流过层析柱。
“洗涤”大孔吸附树脂，指使合适的缓冲液在大孔吸附树脂中或上通过。
如本文所用，“洗涤缓冲液”指在洗脱目标化合物1之前，用来洗涤(主 要是有机相)大孔吸附树脂的缓冲液。方便的，洗涤缓冲液和加样缓冲液可以 是同一pH值，但这不是必须的。
将分子从大孔吸附树脂上“洗脱”下来，指通过改变大孔吸附树脂周围的 缓冲液极性从大孔吸附树脂上除下该分子，该极性能使缓冲液与分子竞争大孔 吸附树脂上的吸附位点。
如本文所用，“洗脱缓冲液”用来将目标化合物1从固相上洗脱下来。洗 脱缓冲液的pH能使目标化合物1从大孔吸附树脂上洗脱下来。
从含有目标化合物1和一种或多种非目标化合物的组合物中“纯化”化合 物1，指通过从组合物中(完全或部分的)除去至少一种非目标化合物来提高 组合物中化合物1的纯度。
本发明提供的如式1所示化合物的纯化方法，所述的方法包括步骤：
(1)将化合物1的粗品上样至大孔吸附树脂；
(2)用水溶液、有机溶剂、或有机溶剂与水的混合溶液洗涤大孔吸附树脂；
(3)用水溶液、有机溶剂、或有机溶剂与水的混合溶液进行洗脱，得到 纯化的化合物1(纯度≥90％)。
上述纯化方法的步骤(3)后还包括结晶步骤以得到高纯度化合物1(纯度 ≥99％)。
在本发明的一个实施例中，所述的纯化方法包括步骤：
第一步，将化合物1的粗品上样至大孔吸附树脂；
第二步，用大量的水溶液洗涤大孔吸附树脂，除去有机相；
第三步，用有机溶剂与水的混合溶液进行梯度洗脱，洗脱时有机溶剂浓度 (v/v％)在5％-95％之间，由低到高分两个或两个以上浓度梯度进行，收集合格 的流出液(化合物1纯度≥90％)，合并合格的流出液，得到纯化的化合物1 (纯度≥90％)。
上述纯化方法的第三步后还包括第四步：将纯化的化合物1(纯度≥90％) 和溶解液(乙醇/水/醋酸)混合后，滴加乙酸乙酯进行结晶，过滤，得到高纯 度化合物1(纯度≥99％)。
在第一步中，所述的上样是将含有化合物1的粗品的溶液和大孔吸附树脂 接触，所述的含有化合物1的粗品的溶液pH≤7，优选pH 4.5-6.0，更佳地 pH 5.0-5.5。所述的含有化合物1的粗品的溶液可以将化合物1的反应液， 直接用水稀释，配置成含有机溶剂10％以下的溶液，然后用常用的酸，如醋酸、 盐酸等调节pH到pH≤7。
在本发明的另一实施例中，所述的纯化方法包括步骤：
A，使含有化合物1粗品的溶液与大孔吸附树脂接触；
B，使含有化合物1粗品的溶液与所述树脂分离；
C，用选自水溶液、有机溶剂或它们的混合物的洗涤液洗涤步骤B中留下 的大孔吸附树脂；
D，用选自水溶液、有机溶剂或它们的混合液的洗脱液与步骤C中得到的 洗涤过的吸附树脂接触，然后收集含有化合物1的洗脱液；
E，将收集的洗脱液减压浓缩干，结晶后得到高纯度的化合物1(纯度≥99 ％)。
步骤B中所述的分离包括过滤。
化合物1由于本身的性质不太稳定，所以对纯化工艺的要求相当严格；化 合物1是作为醋酸盐的形式用于临床，所以本发明举例提供其醋酸盐的纯化方 法：
首先将化合物1的反应液，直接用水稀释，配置成含有机剂10％以下的溶 液，用醋酸调节pH到pH≤7，用事先处理好的大孔吸附树脂进行吸附，用大量 的pH≤7的醋酸水溶液洗涤，除去有机相。然后按照pH≤7的醋酸水溶液，有 机溶剂含量在5％-95％分梯度，依次进行洗脱，并收集合格流分，合并收集液。 浓缩，结晶并可以得到白色结晶粉末，为高纯度化合物1的醋酸盐(纯度≥99 ％)。
所述卡泊芬净醋酸盐晶体在其X-射线粉末衍射(XRPD)图上下述2θ衍射 角有特征峰：2.940±0.2°，5.061±0.2°，5.880±0.2°±0.2°和 8.960±0.2°。更优的，在其X-射线粉末衍射(XRPD)图上下述20衍射角还 有特征峰：6.661±0.2°，10.299±0.2°和17.900±0.2°。
在本发明提供的所有纯化方法中，所述的水溶液pH≤7，优选pH 4.5- 6.0，更佳地pH 5.0-5.5；包括醋酸溶液、盐酸溶液等。
在本发明提供的所有纯化方法中，所述的有机溶剂与水的混合溶液以总体 积计，含有有机溶剂5％-95％，优选10％-60％(v/v)。
在本发明提供的所有纯化方法中，所述的有机溶剂选自C1-C4醇、C1-C4 酮、乙腈或四氢呋喃；所述C1-C4醇选自下述的一种或一种以上：甲醇、乙醇、 丙醇、丁醇；所述C1-C4酮选自下述的一种或一种以上：丙酮、丁酮。
本发明提到的上述特征，或实施例提到的特征可以任意组合。本案说明书所 揭示的所有特征可与任何组合物形式并用，说明书中所揭示的各个特征，可以任何 可提供相同、均等或相似目的的替代性特征取代。因此除有特别说明，所揭示的特 征仅为均等或相似特征的一般性例子。
本发明的主要优点在于：
1、本发明提供了一种成本低廉的纯化氮杂环六肽，特别是棘白菌素类化 合物的纯化新方法。
2、本发明提供的方法所经过的纯化步骤具有路线短、条件温和、纯化收 率高、处理简单等特点，在很大程度上减轻了工艺操作和对设备要求，降低了 生产成本。
3、本发明提供的方法能得到较稳定的目标产物，有利于终产品的质量控 制，有利于工业化大生产。
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说 明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方 法，通常按照常规条件或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则所 有的百分数、比率、比例、或份数按重量计。
本发明中的重量体积百分比中的单位是本领域技术人员所熟知的，例如是 指在100毫升的溶液中溶质的重量。
除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟 悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于 本发明方法中。文中所述的较佳实施方法与材料仅作示范之用。
本发明样品(化合物1)检测的高效液相色谱条件：
色谱仪：waters高效液相色谱系统
色谱柱：Kromasil ODS 250*4.6mm，5μm
流动相A：0.1％(V/V)高氯酸水溶液
流动相B：乙腈
程序
时间(min) 流动相A(％) 流动相B(％) 0 65.5 34.5 6 65.5 34.5 26 50 50 28 100 0 29 65.5 34.5
进样量：10μl
柱温：35℃
检测波长：220nm
流速：1.0ml/min
实施例1
采用US5552521A合成路线合成化合物1
以B0(45.0g，42.24mmol)为原料，按照US5552521A合成路线合成，得 到化合物1的反应液500ml，HPLC检测纯度为78.64％(图1)，待纯化。
实施例2
采用CN101648994A合成路线合成化合物1
以B0(50.0g，47mmol)，按照CN101648994A合成路线合成，得到化合物 1的反应液1.6L，HPLC检测纯度为47.09％(图2)，待纯化。
实施例3
化合物1的纯化
将化合物1(由实施例1所得)的反应液30ml，在20℃以下，加入纯化水 250ml稀释，用醋酸调节PH到5.0-5.5，控制流速为1L/h，用事先处理好的 HP20ss树脂100ml进行吸附，用300ml的PH在5-5.5之间的0.016％(V/V)的 醋酸溶液洗涤，除去有机相。然后按照PH为5-5.5之间醋酸水溶液，丙酮含 量在10％，20％和25％的0.016％(V/V)的醋酸溶液，分3个梯度，依次进行洗脱， 并收集合格流份(纯度≥90％)，合并收集液，共收集约4个柱体积，浓缩干。
用乙醇/水/醋酸＝207.8/19.4/1(v/v/v)溶解液7.3ml将纯度≥90％的化合 物1溶解，室温条件下，开始滴加乙酸乙酯结晶，滴加完毕，保温搅拌1小时， 过滤，滤饼用(水∶乙醇∶乙酸乙酯＝1.0∶10.7∶17.1)溶液洗涤，得到白色 结晶固体即卡泊芬净醋酸盐(0.73g，纯度为99.85％)(图3)。
使用型号为RIGAKU D/max 2550VB/PC的X-射线衍射仪，对该白色卡泊芬 净醋酸盐粉末进行X射线衍射测定，测定时以2°每分钟的扫描速度获得图谱。 使用铜辐射靶，结果获得如图4所示的X射线粉末衍射图谱。
使用型号为PE SPEGRUM 1B的红外光谱仪，对该白色卡泊芬净醋酸盐粉 末进行红外光谱测定，获得如图5所示的红外光谱图。
使用型号为WATERS Q20的示差扫描量热仪，对该白色卡泊芬净醋酸盐粉 末进行差热测定，获得如图6所示的DSC图谱。
实施例4
化合物1的纯化
将化合物1(由实施例1所得)的反应液30ml，在20℃以下，加入纯化水 250ml稀释，用醋酸调节PH到5.0-5.5，控制流速为1L/h，用事先处理好的 HP20ss树脂100ml进行吸附，用300ml的PH在5-5.5之间的0.016％(V/V)的 醋酸溶液洗涤，除去有机相。然后按照PH为5-5.5之间醋酸水溶液，甲醇含 量在25％，30％和50％的0.016％(V/V)的醋酸溶液，分3个梯度，依次进行洗脱， 并收集合格流分(纯度≥90％)，合并收集液，共收集约3个柱体积，浓缩干。
按照实施例3的结晶方法结晶，得到白色结晶固体即卡泊芬净醋酸盐 (0.41g，纯度为99.81％)(图7)。
实施例5
化合物1的纯化
将化合物1(由实施例1所得)的反应液30ml，在20℃以下，加入纯化水 250ml稀释，用醋酸调节PH到5.0-5.5，控制流速为1L/h，用事先处理好的 XAD-1600树脂100ml进行吸附，用300ml的PH在5-5.5之间的0.016％(V/V) 的醋酸溶液洗涤，除去有机相。然后按照PH为5-5.5之间醋酸水溶液，丙酮 含量在20％，30％和40％的0.016％(V/V)的醋酸溶液，分3个梯度，依次进行洗 脱，并收集合格流分(纯度≥90％)，合并收集液，共收集约3个柱体积，浓 缩干。
按照实施例3的结晶方法结晶，得到白色结晶固体即卡泊芬净醋酸盐 (0.51g，纯度为99.46％)。
实施例6
化合物1的纯化
将化合物1(由实施例1所得)的反应液30ml，在20℃以下，加入纯化水 250ml稀释，用醋酸调节PH到5.0-5.5，控制流速为1L/h，用事先处理好的 HZ-803树脂100ml进行吸附，用300ml的PH在5-5.5之间的0.016％(V/V)的 醋酸溶液洗涤，除去有机相。然后按照PH为5-5.5之间醋酸水溶液，丙酮含 量在30％，40％和50％的0.016％(V/V)的醋酸溶液，分3个梯度，依次进行洗脱， 并收集合格流分(纯度≥90％)，合并收集液，共收集约3个柱体积，浓缩干。
按照实施例3的结晶方法结晶，得到白色结晶固体即卡泊芬净醋酸盐 (0.58g，纯度为99.88％)。
实施例7
化合物1的纯化
将化合物l(由实施例1所得)的反应液30ml，在20℃以下，加入纯化水 250ml稀释，用醋酸调节PH到5.0-5.5，控制流速为1L/h，用事先处理好的 LD-605树脂100ml进行吸附，用300ml的PH在5-5.5之间的0.016％(V/V)的 醋酸溶液洗涤，除去有机相。然后按照PH为5-5.5之间醋酸水溶液，丙酮含 量在20％，40％和50％的0.016％(V/V)的醋酸溶液，分3个梯度，依次进行洗脱， 并收集合格流分(纯度≥90％)，合并收集液，共收集约3个柱体积，浓缩干。
按照实施例3的结晶方法结晶，得到白色结晶固体即卡泊芬净醋酸盐 (0.65g，纯度为99.90％)。
实施例8
化合物1的纯化
将化合物1(由实施例2所得)的反应液160ml，在20℃以下，加入纯化 水1440ml稀释，控制流速为1L/h，用事先处理好的HP20ss树脂170ml进行吸 附，用500ml的PH在5-5.5之间的0.016％(V/V)的醋酸溶液洗涤，除去有机相。 然后按照PH为5-5.5之间醋酸水溶液，丙酮含量在10％，20％和25％的0.016％(V/V) 的醋酸溶液，分3个梯度，依次进行洗脱，并收集合格流分(纯度≥90％)， 合并收集液，共收集约4个柱体积，浓缩干。
按照实施例3的结晶方法结晶，得到白色结晶固体即卡泊芬净醋酸盐 (1.76g，纯度为99.71％)。
实施例9
化合物1的纯化
将化合物1(由实施例2所得)的反应液160ml，在20℃以下，加入纯化 水1440ml稀释，控制流速为1L/h，用事先处理好的HP20ss树脂170ml进行吸 附，用500ml的PH在5-5.5之间的0.016％(V/V)的醋酸溶液洗涤，除去有机相。 然后按照PH为5-5.5之间醋酸水溶液，甲醇含量在25％，30％和50％的0.016％(V/V) 的醋酸溶液，分3个梯度，依次进行洗脱，并收集合格流分(纯度≥90％)， 合并收集液，共收集约3个柱体积，浓缩干。
按照实施例3的结晶方法结晶，得到白色结晶固体即卡泊芬净醋酸盐 (1.69g，纯度为99.61％)。
实施例10
化合物1的纯化
将化合物1(由实施例2所得)的反应液160ml，在20℃以下，加入纯化 水1440ml稀释，控制流速为1L/h，用事先处理好的XAD-1600树脂170ml进行 吸附，用500ml的PH在5-5.5之间的0.016％(V/V)的醋酸溶液洗涤，除去有机 相。然后按照PH为5-5.5之间醋酸水溶液，丙酮含量在20％，30％和40％的 0.016％(V/V)的醋酸溶液，分3个梯度，依次进行洗脱，并收集合格流分(纯 度≥90％)，合并收集液，共收集约3个柱体积，浓缩干。
按照实施例3的结晶方法结晶，得到白色结晶固体即卡泊芬净醋酸盐 (1.63g，纯度为99.01％)。
实施例11
化合物1的纯化
将化合物1(由实施例2所得)的反应液160ml，在20℃以下，加入纯化 水1440m1稀释，控制流速为1L/h，用事先处理好的HZ-803树脂170ml进行吸 附，用500ml的PH在5-5.5之间的0.016％(V/V)的醋酸溶液洗涤，除去有机相。 然后按照PH为5-5.5之间醋酸水溶液，丙酮含量在30％，40％和50％的0.016％(V/V) 的醋酸溶液，分3个梯度，依次进行洗脱，并收集合格流分(纯度≥90％)， 合并收集液，共收集约3个柱体积，浓缩干。
按照实施例3的结晶方法结晶，得到白色结晶固体即卡泊芬净醋酸盐 (1.70g，纯度为99.71％)。
实施例12
化合物1的纯化
将化合物1(由实施例2所得)的反应液160ml，在20℃以下，加入纯化 水1440ml稀释，用醋酸调节PH到5.0-5.5，控制流速为1L/h，用事先处理好 的LD-605树脂170ml进行吸附，用500ml的PH在5-5.5之间的0.016％(V/V) 的醋酸溶液洗涤，除去有机相。然后按照PH为5-5.5之间醋酸水溶液，丙酮 含量在20％，40％和50％的0.016％(V/V)的醋酸溶液，分3个梯度，依次进行洗 脱，并收集合格流分(纯度≥90％)，合并收集液，共收集约3个柱体积，浓 缩干。
按照实施例3的结晶方法结晶，得到白色结晶固体即卡泊芬净醋酸盐 (1.68g，纯度为99.88％)。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并非用以限定本发明的实质技术 内容范围，本发明的实质技术内容是广义地定义于申请的权利要求范围中，任 何他人完成的技术实体或方法，若是与申请的权利要求范围所定义的完全相 同，也或是一种等效的变更，均将被视为涵盖于该权利要求范围之中。