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1、(10)申请公布号 CN 102168025 A (43)申请公布日 2011.08.31 CN 102168025 A *CN102168025A* (21)申请号 201110031394.3 (22)申请日 2011.01.28 C12N 1/14(2006.01) C12R 1/645(2006.01) (71)申请人 丽江映华生物药业有限公司 地址 674100 云南省丽江市工业园区丽江映 华生物药业有限公司 (72)发明人 杨晓亮 周德群 赵月华 杨毅 王钱钢 (74)专利代理机构 昆明今威专利代理有限公司 53115 代理人 赵云 (54) 发明名称 一种用于金龟子绿僵菌生产的培。
2、养基 (57) 摘要 本发明涉及一种用于金龟子绿僵菌培养中使 用的培养基新配方， 该金龟子绿僵菌主要用在甾 体生物发酵过程中将沃氏氧化物转化为霉菌氧 化物， 属于工业真菌发酵技术领域。本培养基新 配方为每 1000ml 培养基中含有， 葡萄糖 2.0 4.5wt%， 蛋白胨 0.4 0.7wt%， 硫酸镁 0.03 0.07wt%， 菜 籽 油 饼 0.2 0.6wt%， 青 刺 果 粉 0.1 0.3wt%， 棉籽粉 0.1 0.3wt%， 余量为水。 本发明培养基所培养的绿僵菌生长迅速而均匀， 菌体一般不容易结球 ； 此外， 采用的培养基原料 很多为工业生产废料， 其来源广， 产量大， 且。
3、常年 可供应， 生产成本低廉， 同时也体现了低碳和循环 生产的特点。 (51)Int.Cl. (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书 1 页 说明书 3 页 CN 102168030 A1/1 页 2 1. 一种用于金龟子绿僵菌生产的培养基， 其特征在于 ： 每 1000ml 培养基中含有， 葡萄 糖 2.0 4.5wt%， 蛋白胨 0.4 0.7wt%， 硫酸镁 0.03 0.07wt%， 菜籽油饼 0.2 0.6wt%， 青刺果粉 0.1 0.3wt%， 棉籽粉 0.1 0.3wt%， 余量为水。 2. 按照权利要求 1 所述的用于金龟子绿僵菌生产的培养基，。
4、 其特征在于 ： 青刺果粉的 原料为新鲜的榨油剩下的青刺果废料的粉料， 且青刺果废料、 菜籽油饼和棉籽的破碎粒度 为 1 2mm， 三者应加水在 50 55下加热溶解并灭菌后再与其他原料混合。 权 利 要 求 书 CN 102168025 A CN 102168030 A1/3 页 3 一种用于金龟子绿僵菌生产的培养基 技术领域 0001 本发明涉及一种用于金龟子绿僵菌培养中使用的培养基新配方， 该金龟子绿僵菌 主要用在甾体生物发酵过程中将沃氏氧化物转化为霉菌氧化物， 属于工业真菌发酵技术领 域。 背景技术 0002 甾体是一类含有环戊烷多氢菲核的化合物， 在医药上具有广泛的用途。在甾体化 合。
5、物生产过程中， 羟化反应是甾体微生物转化中最重要的反应。由于微生物能在甾体的任 何位置进行羟基化反应， 而化学方法除了较易在 C17 引入羟基外， 在其他位置都很难引入， 所以采用真菌， 比如用绿僵菌来催化甾体化合物的转化是一种比较先进可行的生产工艺。 在发酵工业生产中， 筛选合适的、 而且成本相对较低的培养基用来培养绿僵菌就显得至关 重要。 0003 然而经查新检索， 关于金龟子绿僵菌培养基方面的技术文献很少， 特别是将金龟 子绿僵菌作为甾体发酵生产的工业真菌培养的培养基配方尚未见报道。 文献中所报道的金 龟子绿僵菌的培养基配方大多为固体培养基， 比如 PDA 培养基 ； 其液体发酵的培养基。
6、采用 以各种化学原料提供微量元素， 以葡萄糖、 蔗糖、 马铃薯淀粉、 乳糖、 麦芽糖、 D- 果糖、 D- 山 梨糖、 甘露醇等为碳源和以花生饼粉、 豆饼粉、 麦麸、 鱼粉、 KNO 等为氮源， 这些培养基对金龟 子绿僵菌的培养研究主要是将金龟子绿僵菌作为农林害虫生物防治的病原真菌进行培养， 不适合用于作为甾体生物发酵过程中将沃氏氧化物转化为霉菌氧化物。 发明内容 0004 本发明的目的是提供一种提供一种用于发酵生产金龟子绿僵菌的培养基配方， 可 对金龟子绿僵菌进行一级种子液、 二级种子液生产和大规模发酵罐生产， 其金龟子绿僵菌 适合以沃氏氧化物为底物转化为霉菌氧化物， 金龟子绿僵菌在此培养基。
7、配制的营养液中生 长迅速， 菌体不容易结球， 而且生产成本相对低廉。 0005 实现本发明目的所采取的技术方案如下 ： 该发酵生产金龟子绿僵菌的培养基配 方由葡萄糖、 蛋白胨、 硫酸镁、 菜籽油饼粉、 青刺果粉、 棉籽粉和普通自来水等为原料配制而 成， 每 1000ml 培养基中含有， 葡萄糖 2.0 4.5wt%， 蛋白胨 0.4 0.7wt%， 硫酸镁 0.03 0.07wt%， 菜籽油饼 0.2 0.6wt%， 青刺果粉 0.1 0.3wt%， 棉籽粉 0.1 0.3wt%， 余量为 水。 0006 青刺果粉的原料为新鲜的榨油剩下的青刺果废料的粉料， 且青刺果废料、 菜籽油 饼和棉籽的破。
8、碎粒度为 1 2mm， 三者应加水在 50 55下加热溶解并灭菌后再与其他原 料混合。 0007 本发明的有益效果是 ： 与现有技术比较， 其明显的特点是由本培养基所培养的绿 僵菌生长迅速而均匀， 菌体一般不容易结球 ； 此外， 本发明所采用的培养基原料很多为工业 生产废料， 其来源广， 产量大， 且常年可供应， 生产成本低廉， 同时也体现了低碳和循环生产 说 明 书 CN 102168025 A CN 102168030 A2/3 页 4 的特点。 具体实施方式 0008 以下三个表中例举了本发明培养基的几组实施例。 0009 表 1 采用新配方培养基生产金龟子绿僵菌实例对照表 * 表 2 6t 种子罐发酵金龟子绿僵菌实例对照表 * 表 3 30t 发酵罐发酵金龟子绿僵菌实例对照表 * 说 明 书 CN 102168025 A CN 102168030 A3/3 页 5 说 明 书 CN 102168025 A 。