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利用互花米草培养双歧杆菌液体的方法.pdf

  • 上传人:罗明
  • 文档编号:8898711
  • 上传时间:2021-01-10
  • 格式:PDF
  • 页数:4
  • 大小:235.20KB
  • 摘要
    申请专利号:

    CN201711101715.6

    申请日:

    20171110

    公开号:

    CN107603926A

    公开日:

    20180119

    当前法律状态:

    有效性:

    审查中

    法律详情:

    IPC分类号:

    C12N1/20,C12R1/01

    主分类号:

    C12N1/20,C12R1/01

    申请人:

    丁爱军

    发明人:

    丁宣中,丁爱军

    地址:

    224100 江苏省盐城市大丰区大丰港经济区日月湖大道北,青岛港路西海洋产业研究院

    优先权:

    CN201711101715A

    专利代理机构:

    无锡互维知识产权代理有限公司

    代理人:

    王爱伟;陈军

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    内容摘要

    本发明提供了一种利用互花米草培养双歧杆菌液体的方法,其采用配方为蛋白胨、酵母粉、葡萄糖、氯化钠、吐温‑80、K2HPO4、KH2PO4、MgSO4·7H2O、MnSO4·4H2O、互花草浸提液的双歧杆菌培养液。本发明具有操作简单、成本低、菌生长速度,适宜大规模培养等优点。

    权利要求书

    1.一种利用互花米草培养双歧杆菌液体的方法,其特征在于:其包括如下步骤:A制备互花草浸提液:选取优质无霉变的去根整株互花米草,将其切成1~7厘米段块,用双蒸水浸泡后,再煮一段时间,冷却后过滤、离心,将上清液进行浓缩,蒽酮硫酸法测定多糖值>5%。B配制双歧杆菌培养液:配制1升培养剂,配方为蛋白胨、酵母粉、葡萄糖、氯化钠、吐温-80、KHPO、KHPO、MgSO·7HO、MnSO·4HO、互花草浸提液,先称取固体药品,充分溶解,再添加液体药品,调节PH值6.4~6.8,定容,高压灭菌,冷却后备用。C培养双歧杆菌:市面上购置丽珠肠乐胶囊,无菌条件下从胶囊中取出内容物,溶解于10ml浓度为0.9%的无菌生理盐水,搅拌均匀,用BS固体培养基平板划线,37℃厌氧培养48~72小时,挑取色泽淡黄、圆滑突起的单菌落,接入2.5ml双歧杆菌培养液,37℃厌氧培养48~72小时,再吸取100~500微升滴入1升液体培养液中,37℃摇培12~48小时,测得菌液浓度为1.0~3.0×108个/毫升。 2.根据权利要求1所述的利用互花米草培养双歧杆菌液体的方法,其特征在于:所述步骤A中,用双蒸水浸泡12~24小时,每升浸泡100~250克,再煮0.5~1.5小时。 3.根据权利要求1所述的利用互花米草培养双歧杆菌液体的方法,其特征在于:所述步骤B中双歧杆菌培养液的配方含量为蛋白胨10~15克、酵母粉2~5克、葡萄糖5~13克、氯化钠0.9~5克、吐温-801毫升、KHPO0.1~2克、KHPO0.1~2克、MgSO·7HO0.2克、MnSO·4HO0.05克、互花草浸提液138~425毫升。

    说明书

    技术领域

    本发明属于双歧杆菌培养领域,特别关于一种利用互花米草培养双歧杆菌液体的方法。

    背景技术

    双歧杆菌具有抗肿瘤、抗衰老、降血压等多重功效,尤其是对肠胃病效果神奇,它能有效阻断胃肠病源,快速杀灭致病菌,并增强胃肠功能,提高胃肠免疫力。但双歧杆菌的培养方法较复杂,并且成长速度慢,导致其培养成本较高,且不适宜大范围培养。

    发明内容

    本发明的目的是提供一种操作简单、成本低、菌生长速度,适宜大规模培养的利用互花米草培养双歧杆菌液体的方法。

    为达成上述目的,本发明采用如下技术方案:一种利用互花米草培养双歧杆菌液体的方法,其包括如下步骤:

    A制备互花草浸提液:选取优质无霉变的去根整株互花米草,将其切成1~7厘米段块,用双蒸水浸泡后,再煮一段时间,冷却后过滤、离心,将上清液进行浓缩,蒽酮硫酸法测定多糖值>5%。

    B配制双歧杆菌培养液:配制1升培养剂,配方为蛋白胨、酵母粉、葡萄糖、氯化钠、吐温-80、K2HPO4、KH2PO4、MgSO4·7H2O、MnSO4·4H2O、互花草浸提液,先称取固体药品,充分溶解,再添加液体药品,调节PH值6.4~6.8,定容,高压灭菌,冷却后备用。

    C培养双歧杆菌:市面上购置丽珠肠乐胶囊,无菌条件下从胶囊中取出内容物,溶解于10ml浓度为0.9%的无菌生理盐水,搅拌均匀,用BS固体培养基平板划线,37℃厌氧培养48~72小时,挑取色泽淡黄、圆滑突起的单菌落,接入2.5ml双歧杆菌培养液,37℃厌氧培养48~72小时,再吸取100~500微升滴入1升液体培养液中,37℃摇培12~48小时,测得菌液浓度为1.0~3.0×108个/毫升。

    进一步地,所述步骤A中,用双蒸水浸泡12~24小时,每升浸泡100~250克,再煮0.5~1.5小时。

    进一步地,所述步骤B中双歧杆菌培养液的配方含量为蛋白胨10~15克、酵母粉2~5克、葡萄糖5~13克、氯化钠0.9~5克、吐温-80 1毫升、K2HPO4 0.1~2克、KH2PO40.1~2克、MgSO4·7H2O 0.2克、MnSO4·4H2O 0.05克、互花草浸提液138~425毫升。

    与现有技术相比,本发明具有如下有益效果:

    1.操作方法简单,适于大范围推广和应用。

    2.成本低,互花米草种植方便,原料价格便宜。

    3.菌生长速度快,生长期短,见效快。

    4.适宜大规模培养,提高培养效率,降低生产成本。

    具体实施方式

    为进一步阐述本发明所采用的技术手段和达到的技术效果,以下结合实施例做详细说明。

    本发明提供了一种利用互花米草培养双歧杆菌液体的方法,其包括如下步骤:

    A制备互花草浸提液:选取优质无霉变的去根整株互花米草,将其切成1~7厘米段块,用双蒸水浸泡1~24小时,每升浸泡100~250克,再煮0.5~1.5小时,冷却后过滤、离心,将上清液进行浓缩,蒽酮硫酸法测定多糖值>5%。

    B配制双歧杆菌培养液:配制1升培养剂,配方为蛋白胨10~15克、酵母粉2~5克、葡萄糖5~13克、氯化钠0.9~5克、吐温-80 1毫升、K2HPO4 0.1~2克、KH2PO40.1~2克、MgSO4·7H2O 0.2克、MnSO4·4H2O 0.05克、互花草浸提液138~425毫升,先称取固体药品,充分溶解,再添加液体药品,调节PH值6.4~6.8,定容,高压灭菌,冷却后备用。

    C培养双歧杆菌:市面上购置丽珠肠乐胶囊,无菌条件下从胶囊中取出内容物,溶解于10ml浓度为0.9%的无菌生理盐水,搅拌均匀,用BS固体培养基平板划线,37℃厌氧培养48~72小时,挑取色泽淡黄、圆滑突起的单菌落,接入2.5ml双歧杆菌培养液,37℃厌氧培养48~72小时,再吸取100~500微升滴入1升液体培养液中,37℃摇培12~48小时,测得菌液浓度为1.0~3.0×108个/毫升。

    关 键  词:
    利用 互花米草 培养 杆菌 液体 方法
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