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1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201711101715.6 (22)申请日 2017.11.10 (71)申请人 丁爱军 地址 224100 江苏省盐城市大丰区大丰港 经济区日月湖大道北, 青岛港路西海 洋产业研究院 (72)发明人 丁宣中丁爱军 (74)专利代理机构 无锡互维知识产权代理有限 公司 32236 代理人 王爱伟陈军 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C12R 1/01(2006.01) (54)发明名称 利用互花米草培养双歧杆菌液体的方法 (57)摘要 本发明提供了。
2、一种利用互花米草培养双歧 杆菌液体的方法, 其采用配方为蛋白胨、 酵母粉、 葡萄糖、 氯化钠、 吐温-80、 K2HPO4、 KH2PO4、 MgSO47H2O、 MnSO44H2O、 互花草浸提液的双歧 杆菌培养液。 本发明具有操作简单、 成本低、 菌生 长速度, 适宜大规模培养等优点。 权利要求书1页 说明书2页 CN 107603926 A 2018.01.19 CN 107603926 A 1.一种利用互花米草培养双歧杆菌液体的方法, 其特征在于: 其包括如下步骤: A制备互花草浸提液: 选取优质无霉变的去根整株互花米草, 将其切成17厘米段块, 用双蒸水浸泡后, 再煮一段时间, 冷却。
3、后过滤、 离心, 将上清液进行浓缩, 蒽酮硫酸法测定多 糖值5。 B配制双歧杆菌培养液: 配制1升培养剂, 配方为蛋白胨、 酵母粉、 葡萄糖、 氯化钠、 吐温- 80、 K2HPO4、 KH2PO4、 MgSO47H2O、 MnSO44H2O、 互花草浸提液, 先称取固体药品, 充分溶解, 再 添加液体药品, 调节PH值6.46.8, 定容, 高压灭菌, 冷却后备用。 C培养双歧杆菌: 市面上购置丽珠肠乐胶囊, 无菌条件下从胶囊中取出内容物, 溶解于 10ml浓度为0.9的无菌生理盐水, 搅拌均匀, 用BS固体培养基平板划线, 37厌氧培养48 72小时, 挑取色泽淡黄、 圆滑突起的单菌落, 。
4、接入2.5ml双歧杆菌培养液, 37厌氧培养48 72小时, 再吸取100500微升滴入1升液体培养液中, 37摇培1248小时, 测得菌液浓 度为1.03.0108个/毫升。 2.根据权利要求1所述的利用互花米草培养双歧杆菌液体的方法, 其特征在于: 所述步 骤A中, 用双蒸水浸泡1224小时, 每升浸泡100250克, 再煮0.51.5小时。 3.根据权利要求1所述的利用互花米草培养双歧杆菌液体的方法, 其特征在于: 所述步 骤B中双歧杆菌培养液的配方含量为蛋白胨1015克、 酵母粉25克、 葡萄糖513克、 氯化 钠0.95克、 吐温-80 1毫升、 K2HPO4 0.12克、 KH2P。
5、O40.12克、 MgSO47H2O 0.2克、 MnSO44H2O 0.05克、 互花草浸提液138425毫升。 权利要求书 1/1 页 2 CN 107603926 A 2 利用互花米草培养双歧杆菌液体的方法 技术领域 0001 本发明属于双歧杆菌培养领域, 特别关于一种利用互花米草培养双歧杆菌液体的 方法。 背景技术 0002 双歧杆菌具有抗肿瘤、 抗衰老、 降血压等多重功效, 尤其是对肠胃病效果神奇, 它 能有效阻断胃肠病源, 快速杀灭致病菌, 并增强胃肠功能, 提高胃肠免疫力。 但双歧杆菌的 培养方法较复杂, 并且成长速度慢, 导致其培养成本较高, 且不适宜大范围培养。 发明内容 0。
6、003 本发明的目的是提供一种操作简单、 成本低、 菌生长速度, 适宜大规模培养的利用 互花米草培养双歧杆菌液体的方法。 0004 为达成上述目的, 本发明采用如下技术方案: 一种利用互花米草培养双歧杆菌液 体的方法, 其包括如下步骤: 0005 A制备互花草浸提液: 选取优质无霉变的去根整株互花米草, 将其切成17厘米段 块, 用双蒸水浸泡后, 再煮一段时间, 冷却后过滤、 离心, 将上清液进行浓缩, 蒽酮硫酸法测 定多糖值5。 0006 B配制双歧杆菌培养液: 配制1升培养剂, 配方为蛋白胨、 酵母粉、 葡萄糖、 氯化钠、 吐温-80、 K2HPO4、 KH2PO4、 MgSO47H2O、。
7、 MnSO44H2O、 互花草浸提液, 先称取固体药品, 充分溶 解, 再添加液体药品, 调节PH值6.46.8, 定容, 高压灭菌, 冷却后备用。 0007 C培养双歧杆菌: 市面上购置丽珠肠乐胶囊, 无菌条件下从胶囊中取出内容物, 溶 解于10ml浓度为0.9的无菌生理盐水, 搅拌均匀, 用BS固体培养基平板划线, 37厌氧培 养4872小时, 挑取色泽淡黄、 圆滑突起的单菌落, 接入2.5ml双歧杆菌培养液, 37厌氧培 养4872小时, 再吸取100500微升滴入1升液体培养液中, 37摇培1248小时, 测得菌 液浓度为1.03.0108个/毫升。 0008 进一步地, 所述步骤A中。
8、, 用双蒸水浸泡1224小时, 每升浸泡100250克, 再煮 0.51.5小时。 0009 进一步地, 所述步骤B中双歧杆菌培养液的配方含量为蛋白胨1015克、 酵母粉2 5克、 葡萄糖513克、 氯化钠0.95克、 吐温-80 1毫升、 K2HPO4 0.12克、 KH2PO40.12 克、 MgSO47H2O 0.2克、 MnSO44H2O 0.05克、 互花草浸提液138425毫升。 0010 与现有技术相比, 本发明具有如下有益效果: 0011 1.操作方法简单, 适于大范围推广和应用。 0012 2.成本低, 互花米草种植方便, 原料价格便宜。 0013 3.菌生长速度快, 生长期。
9、短, 见效快。 0014 4.适宜大规模培养, 提高培养效率, 降低生产成本。 说明书 1/2 页 3 CN 107603926 A 3 具体实施方式 0015 为进一步阐述本发明所采用的技术手段和达到的技术效果, 以下结合实施例做详 细说明。 0016 本发明提供了一种利用互花米草培养双歧杆菌液体的方法, 其包括如下步骤: 0017 A制备互花草浸提液: 选取优质无霉变的去根整株互花米草, 将其切成17厘米段 块, 用双蒸水浸泡124小时, 每升浸泡100250克, 再煮0.51.5小时, 冷却后过滤、 离心, 将上清液进行浓缩, 蒽酮硫酸法测定多糖值5。 0018 B配制双歧杆菌培养液: 。
10、配制1升培养剂, 配方为蛋白胨1015克、 酵母粉25克、 葡萄糖513克、 氯化钠0.95克、 吐温-80 1毫升、 K2HPO4 0.12克、 KH2PO40.12克、 MgSO47H2O 0.2克、 MnSO44H2O 0.05克、 互花草浸提液138425毫升, 先称取固体药品, 充分溶解, 再添加液体药品, 调节PH值6.46.8, 定容, 高压灭菌, 冷却后备用。 0019 C培养双歧杆菌: 市面上购置丽珠肠乐胶囊, 无菌条件下从胶囊中取出内容物, 溶 解于10ml浓度为0.9的无菌生理盐水, 搅拌均匀, 用BS固体培养基平板划线, 37厌氧培 养4872小时, 挑取色泽淡黄、 圆滑突起的单菌落, 接入2.5ml双歧杆菌培养液, 37厌氧培 养4872小时, 再吸取100500微升滴入1升液体培养液中, 37摇培1248小时, 测得菌 液浓度为1.03.0108个/毫升。 说明书 2/2 页 4 CN 107603926 A 4 。