一种脂溶性地塞米松衍生物的纯化方法.pdf

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1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利 (10)授权公告号 (45)授权公告日 (21)申请号 201610065324.2 (22)申请日 2016.01.29 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 105732756 A (43)申请公布日 2016.07.06 (73)专利权人 首都师范大学 地址 100048 北京市海淀区西三环北路105 号 (72)发明人 邓玉恒吴文化杜琳 (74)专利代理机构 北京鸿元知识产权代理有限 公司 11327 代理人 黄丽娟陈英俊 (51)Int.Cl. C07J 5/00(2006.01) (56)对比文件 CN 1014。

2、10098 A,2009.04.15,全文， 尤其是 说明书第28页第2-3段. CN 20120328 A,2012.03.28,全文. US 4427649 A,1984.01.24,全文. H. Benameur 等.Liposome-incorporated dexamethasone palmitate:Chemical and physical properties. International Journal of Pharmaceutics .1993,第89卷(第3 期),第157-167页. Y.MIZUSHIMA 等.Use of a lipid emulsion as 。

3、a novel carrier for corticosteroids. J. Pharm. Pharmacol. .1981,第34卷第49-50页. 李春钢 等.地塞米松棕榈酸酯的合成工艺 改进. 中国城乡企业卫生 .2012, (第1期),第 85-86页， 尤其是第85页左栏倒数第一段以及第 86页3.2方法与结果. 张兰英 等.地塞米松棕榈酸酯的合成. 山 东医药工业 .2001,第20卷(第1期),第1页. 审查员 蒋薇薇 (54)发明名称 一种脂溶性地塞米松衍生物的纯化方法 (57)摘要 本发明涉及脂溶性地塞米松衍生物的纯化 方法， 该方法包括： 采用200300目硅胶， 进行湿。

4、 法装柱； 将地塞米松衍生物粗品上样， 采用比重 为0.79000.8000之间的第一环己烷-乙酸乙酯 混合液洗脱， 除去杂质； 然后采用比重为0.8100 0.8300的第二环己烷-乙酸乙酯混合液洗脱， 收集地塞米松衍生物斑点的接收液， 该接收液经 浓缩后， 加入丙酮， 地塞米松衍生物晶体析出。 本 发明的方法是环境友好、 操作简便、 工艺可控性 好和成本降低的有效的脂溶性地塞米松衍生物 的纯化方法， 两种特定比重的环己烷-乙酸乙酯 混合液配合洗脱， 使杂质与地塞米松衍生物充分 分离， 且洗脱液在减压蒸馏回收后， 经比重调配 在规定范围后， 可以方便地重复使用。 权利要求书1页 说明书5页 。

5、CN 105732756 B 2017.11.03 CN 105732756 B 1.一种脂溶性地塞米松衍生物的纯化方法， 所述地塞米松衍生物为16 -甲基-11,17 ,21-三羟基-9 -氟孕甾-1,4-二烯-3,20-二酮-21-棕榈酸酯， 其特征是， 该方法包括： 采用 200300目硅胶， 进行湿法装柱； 将地塞米松衍生物粗品上样， 采用比重为0.79000.8000 之间的第一环己烷-乙酸乙酯混合液洗脱， 除去杂质； 然后采用比重为0.81000.8300的第 二环己烷-乙酸乙酯混合液洗脱， 收集地塞米松衍生物斑点的接收液， 该接收液经浓缩后， 加入丙酮， 地塞米松衍生物晶体析出，。

6、 其中， 所述比重为0.79000.8000之间的第一环己烷-乙酸乙酯混合液、 比重为0.8100 0.8300的第二环己烷-乙酸乙酯混合液的配制， 是向环己烷中逐渐加入乙酸乙酯达到所 需要的比重， 或者是， 向乙酸乙酯中逐渐加入环己烷达到所需要的比重， 该比重是使用比重 计来测量的。 2.根据权利要求1所述的纯化方法， 其特征是， 所述第一环己烷-乙酸乙酯混合液的比 重为0.79200.7950。 3.根据权利要求1所述的纯化方法， 其特征是， 所述第二环己烷-乙酸乙酯混合液的比 重为0.81600.8250。 4.根据权利要求1至3中任一项所述的纯化方法， 其特征是， 所述第一环己烷-乙酸。

7、乙酯 混合液的用量为13.5个柱体积， 以充分洗脱出杂质。 5.根据权利要求1至3中任一项所述的纯化方法， 其特征是， 所述地塞米松衍生物斑点Rf 0.6， 其中展开液为第二环己烷-乙酸乙酯混合液。 6.根据权利要求1所述的纯化方法， 其特征是， 该方法还包括采用丙酮对地塞米松衍生 物晶体进行重结晶。 7.根据权利要求1至3中任一项所述的纯化方法， 其特征是， 所述地塞米松衍生物粗品 为地塞米松与十六酰氯反应生成的16 -甲基-11 ,17 ,21-三羟基-9 -氟孕甾-1,4-二烯- 3,20-二酮-21-棕榈酸酯粗品。 8.根据权利要求7所述的纯化方法， 其特征是， 所述地塞米松与十六酰氯。

8、反应按如下步 骤进行： 在08的温度下， 在吡啶和氯代烷烃存在下， 地塞米松与十六酰氯进行酯化反 应； 在反应完成后加入水， 分出有机层， 然后用盐酸洗涤该有机层； 洗涤后的有机层， 经浓缩 得到粘稠的膏状物， 即地塞米松衍生物粗品。 9.根据权利要求8所述的纯化方法， 其特征是， 所述地塞米松与十六酰氯反应按如下步 骤进行： 将地塞米松溶解于吡啶中， 将十六酰氯均匀分散于氯代烷烃中， 然后向地塞米松吡 啶溶液中以滴加的方式加入十六酰氯氯代烷烃溶液； 在地塞米松与十六酰氯的反应中， 采 用TLC跟踪反应， 当地塞米松几乎或完全消失时， 向反应液中加入冰水， 在静置分层后， 分离 去除水相， 然。

9、后用2至10(按体积比)的盐酸洗涤下层有机层， 洗涤后的有机层， 减压蒸 馏除去有机溶剂， 得到粘稠的膏状物。 10.根据权利要求8或9所述的纯化方法， 其特征是， 所述氯代烷烃为二氯乙烷、 二氯甲 烷、 三氯甲烷或其混合物。 权利要求书 1/1 页 2 CN 105732756 B 2 一种脂溶性地塞米松衍生物的纯化方法 技术领域 0001 本发明属于药物化学领域， 涉及脂溶性地塞米松衍生物的纯化方法， 更具体而言， 涉及地塞米松经过一步合成而转化为脂溶性药用原料即脂溶性地塞米松衍生物的纯化方 法。 背景技术 0002 地塞米松是一种人工合成的肾上腺皮质激素， 常被用作抑制剂或预防过敏反应的。

10、 药物， 可作为危重疾病的急救和各类炎症的治疗用药。 但是长期或大量应用可引起物质代 谢和水盐代谢紊乱， 出现类肾上腺皮质功能亢进综合征等副反应。 地塞米松是水溶性药物， 现代医学发现将地塞米松修饰为某些脂溶性成分后， 可以作为活性物质的前体在人体内经 酶缓慢水解， 释放出地塞米松， 在病灶部位显示更高的药物浓度， 比水溶性地塞米松制剂的 活性高出56倍， 而水溶性地塞米松在肌肉注射部位显示更高的浓度(Annals of the Rheumatic Diseases,1982,41,263-267)。 说明地塞米松修饰为脂溶性成分， 制成脂溶性制 剂后， 药物靶向作用更强， 用量可以更少， 从。

11、而减少各种副反应发生。 0003 16 -甲基-11,17 ,21-三羟基-9 -氟孕甾-1,4-二烯-3,20-二酮-21-棕榈酸酯 (也称为地塞米松棕榈酸酯)为脂溶性的地塞米松衍生物， 在医学上用作类风湿性关节炎的 治疗。 现有的合成方法(J.Pharm.Pharmacol.,1982,34,49-50)是地塞米松与棕榈酰氯在15 下进行合成反应， 温度高， 容易产生副反应， 引入很多的杂质， 使后续产物精制工作难度 增加； 且使用乙醚溶解棕榈酰氯， 容易对操作人员和环境产生污染。 0004 中国专利文献CN102391342B公开了一种地塞米松棕榈酸酯化合物的精制方法， 包 括如下步骤：。

12、 将地塞米松棕榈酸酯粗品溶解于异丙醇有机溶剂中， 经活性炭脱色后， 加入水 析出地塞米松棕榈酸酯沉淀， 然后将该沉淀用乙醇/乙酸乙酯混合溶剂溶解后进行大孔吸 附树脂吸附分离， 达到精制纯化的目的。 该方法经过溶解、 脱色、 沉淀、 溶解、 吸附、 洗脱等步 骤， 而且其中包括两次溶剂溶解， 地塞米松棕榈酸酯有所损失， 这将不利于高收率。 0005 本发明人致力于地塞米松衍生物的研究， 对地塞米松衍生物的合成、 纯化进行了 不断的改进和创新， 使工艺参数严格可控， 是符合现代环保意识下生产、 低污染、 人员劳动 保护性好的合成、 纯化工艺， 是生产企业降低生产成本、 缩短生产周期、 生产管理可控。

13、的好 的工艺方案， 特别是， 简化和优化了纯化工艺。 发明内容 0006 因此， 本发明的目的在于提供一种环境友好、 操作简便、 工艺可控性好和成本降低 的有效的脂溶性地塞米松衍生物的纯化方法。 0007 根据本发明， 本发明提供的脂溶性地塞米松衍生物的纯化方法， 所述地塞米松衍 生物为16 -甲基-11 ,17 ,21-三羟基-9 -氟孕甾-1,4-二烯-3,20-二酮-21-棕榈酸酯， 其 特征是， 该方法包括： 采用200300目硅胶， 进行湿法装柱； 将地塞米松衍生物粗品上样， 采 用比重为0.79000.8000之间的第一环己烷-乙酸乙酯混合液洗脱， 除去杂质； 然后采用比 说明书 。

14、1/5 页 3 CN 105732756 B 3 重为0.81000.8300的第二环己烷-乙酸乙酯混合液洗脱， 收集地塞米松衍生物斑点的接 收液， 该接收液经浓缩后， 加入丙酮， 地塞米松衍生物晶体析出。 0008 下面， 更具体地描述本发明的脂溶性地塞米松衍生物的纯化方法。 0009 根据本发明， 本发明采用柱层析法对地塞米松衍生物粗品进行纯化， 所述地塞米 松衍生物粗品可以为化学合成所制备的、 尚没有经过纯化的地塞米松衍生物粗产物， 特别 是， 地塞米松与十六酰氯(又称为棕榈酰氯)反应， 生成的16 -甲基-11,17 ,21-三羟基-9 -氟孕甾-1,4-二烯-3,20-二酮-21-棕。

15、榈酸酯， 反应式如下： 0010 0011 具体地， 在08的温度下， 在吡啶和氯代烷烃存在下， 地塞米松与十六酰氯进 行酯化反应； 在反应完成后加入水， 分出有机层， 然后用盐酸洗涤该有机层； 洗涤后的有机 层， 经浓缩得到粘稠的膏状物， 即地塞米松衍生物粗品。 0012 地塞米松与十六酰氯的反应在08的温度下进行， 优选在03的温度下 进行， 在该温度范围的温度下反应， 副反应少， 从而杂质少， 便于后续精制。 0013 优选的是， 将地塞米松溶解于吡啶中， 将十六酰氯均匀分散于氯代烷烃中， 然后向 地塞米松吡啶溶液中缓慢加入十六酰氯氯代烷烃溶液， 优选以滴加的方式加入十六酰氯氯 代烷烃溶。

16、液。 对于吡啶和氯代烷烃的用量不作限定， 只要是地塞米松完全溶解于吡啶中， 十 六酰氯完全均匀分散于氯代烷烃中， 均形成均一的溶液即可。 0014 所述氯代烷烃可以为二氯乙烷、 二氯甲烷、 三氯甲烷或其混合物， 且优选二氯甲 烷。 0015 在地塞米松与十六酰氯的反应中， 地塞米松与十六酰氯的用量比优选为1： 11： 2， 按摩尔计。 0016 在地塞米松与十六酰氯的反应中， 采用TLC跟踪反应， 当地塞米松几乎或完全消失 时， 向反应液中加入水， 优选加入冰水， 例如加入约1倍反应液体积的冰水， 搅拌， 以终止反 说明书 2/5 页 4 CN 105732756 B 4 应。 在静置分层后，。

17、 分离去除水相， 然后用2至10(按体积比)的盐酸(约12倍反应液体 积)洗涤下层有机层， 洗涤后的有机层， 减压蒸馏除去有机溶剂， 得到粘稠的膏状物。 0017 在采用柱层析法对地塞米松衍生物粗品进行纯化中， 使用200300目硅胶， 按照 本领域的常规方法进行湿法装柱， 例如， 可以采用所述第一环己烷-乙酸乙酯混合液浸润硅 胶进行湿法装柱。 0018 本发明的纯化方法的特征在于， 在湿法装柱之后， 将地塞米松衍生物粗品上样， 采 用两种特定比重的环己烷-乙酸乙酯混合液配合洗脱， 使杂质与地塞米松衍生物充分分离， 方便地得到高纯度的地塞米松衍生物。 而且， 洗脱液在蒸馏回收之后， 在调整比重。

18、之后， 可 以重复使用。 0019 更具体地， 采用比重为0.79000.8000之间的第一环己烷-乙酸乙酯混合液， 优选 比重为0.79200.7950之间的第一环己烷-乙酸乙酯混合液先行洗脱， 以除去杂质。 对所述 第一环己烷-乙酸乙酯混合液的用量不作限定， 优选为13.5个柱体积， 以充分洗脱出杂 质。 0020 然后采用比重为0.81000.8300的第二环己烷-乙酸乙酯混合液洗脱， 优选比重 为0.81600.8250的第二环己烷-乙酸乙酯混合液洗脱， 收集地塞米松衍生物斑点(Rf约 0.6， 展开液为第二环己烷-乙酸乙酯混合液)的接收液， 该接收液经浓缩后， 加入丙酮， 地塞 米松。

19、衍生物晶体析出。 特别是， 接受液经减压蒸干溶剂， 趁热转入烧杯内， 加入丙酮， 静置， 晶体析出， 过滤、 干燥， 得到地塞米松衍生物晶体。 根据需要， 还可以进一步采用丙酮进行重 结晶。 0021 比重为0.79000.8000之间的第一环己烷-乙酸乙酯混合液、 比重为0.8100 0.8300的第二环己烷-乙酸乙酯混合液的配制， 例如， 可以向环己烷中逐渐加入乙酸乙酯达 到所需要的比重， 使用比重计可以测量比重； 也可以向乙酸乙酯中逐渐加入环己烷达到所 需要的比重。 0022 有益效果 0023 与现有技术相比， 本发明的优点在于： 0024 (1)硅胶柱分离纯化： 采用毒害小的常规化学。

20、试剂， 特别是混合溶剂洗脱， 而且混 合溶剂根据计算， 可以调整并循环使用； 减少有机溶剂的消耗， 降低生产成本， 减少人员的 伤害， 保护环境。 0025 所用的洗脱溶剂： 现有技术的洗脱剂含有苯， 本发明采用环己烷-乙酸乙酯混合 液为流动相进行洗脱， 且优选比重为0.7920-0.7950之间的第一环己烷-乙酸乙酯混合液先 行洗脱， 之后改用比重为0.8160-0.8250的第二环己烷-乙酸乙酯混合液洗脱， 两种特定比 重的环己烷-乙酸乙酯混合液配合洗脱， 使杂质与地塞米松衍生物充分分离， 方便地得到高 纯度的地塞米松衍生物； 在柱层析过程中， 采用TLC跟踪。 0026 洗脱溶剂的循环使。

21、用： 由于混合溶剂经减压蒸发后， 组成比例发生改变， 从而极 性也相应变化。 以体积比配制的混合溶剂无法重复使用， 生产中浪费很大。 特别是当待分离 物质极性相差不大， 分离效果受洗脱液极性的细微变化影响很大的情况时， 按体积比配制 的洗脱液回收后会出现明显的极性差异， 从而影响分离效果， 以致无法达到分离的目的。 本 发明将洗脱液混合比例按照混合后比重加以确认， 用组分试剂予以调整， 严格控制洗脱液 极性范围， 使柱层析精制具有很好的可控性、 重现性， 便于生产管理和生产一线工人操作， 说明书 3/5 页 5 CN 105732756 B 5 同时使回收的混合试剂可以重复使用， 节约了大量生。

22、产成本。 0027 (2)合成反应控制反应温度： 现有技术是采用地塞米松与棕榈酰氯在15下进行 合成反应， 温度高， 容易产生副反应， 引入很多的杂质， 使后续精制工作难度增加； 本发明是 地塞米松与棕榈酰氯反应， 在08的温度下缓慢混合、 反应， 避免上述不利情况发生， 提高产量。 0028 (3)合成反应使用的溶剂： 现有技术是使用乙醚溶解棕榈酰氯， 而本发明采用棕榈 酰氯氯代烷烃(例如二氯乙烷、 二氯甲烷或三氯甲烷)溶液， 毒性小， 降低对操作人员和环境 的污染。 0029 (4)合成反应后去除反应溶剂： 本发明在反应完成后， 使用2-10的盐酸洗涤反 应有机层， 以清除吡啶等化学试剂的。

23、残留。 具体实施方式 0030 下文， 结合具体实施例来对本发明做进一步的说明， 下面各实施例仅用于举例说 明本发明， 而本发明的范围不局限于此。 0031 实施例1 0032 1.脂溶性地塞米松衍生物的合成 0033 称取50g地塞米松， 量取150ml吡啶， 分别倒入合成反应瓶中， 搅拌使地塞米松充分 溶解， 开启冷却塔使溶液降温在2-4； 量取十六酰氯65ml、 二氯甲烷200ml混合， 搅匀， 向反 应瓶中缓慢滴加加入十六酰氯二氯甲烷溶液， 该反应液保持在2-4的温度下， 在匀速搅拌 下进行反应。 0034 采用TLC跟踪检测， 当地塞米松几乎或完全消失时， 向反应瓶中加入冰水， 搅拌。

24、， 以 终止反应； 分离弃除水相， 用2的盐酸(约1-2倍反应液体积)洗涤下层有机层； 洗涤后的有 机层， 减压蒸馏除去有机试剂， 得到粘稠的膏状物。 0035 2.柱层析纯化 0036 用200300目硅胶1000g填充6.5100cm的玻璃柱， 用流动相浸润硅胶并装柱， 将 上述步骤得到的膏状物直接上样， 流动相为比重0.7935的第一环己烷-乙酸乙酯混合液， 然 后用该流动相进行洗脱， 共使用6.8升； 换用比重为0.8200的第二环己烷-乙酸乙酯混合液 洗脱， 使用6.7升， 层析过程采用TLC跟踪， 收集并合并具有单一斑点的接收液(Rf约0.6， 展开液为第二环己烷-乙酸乙酯混合液)。

25、， 减压浓缩至小体积， 趁热转入烧杯中， 倒入10ml丙 酮， 静置， 使晶体析出； 析出后的晶体再用丙酮重结晶， 过滤， 减压干燥， 得到无色粉末状晶 体62g， 纯度98.5(HPLC)， 总收率77.5。 0037 1H NMR(CDCl3， 500MHz)： 0.88(t,3H),0.92(d,3H),1.04(s,3H),1.25(m,24H), 1.55(m,3H),1.63(m,2H),1.67(m,2H),1.82(m,2H),2.17(m,1H),2.21(m,2H),2.40(m,2H), 2.42(m,1H),2.44(m,2H),2.60(m,1H),4.35(m,1H。

26、),4.89(s,2H),6.10(s,1H),6.33(d,1H), 7.22(d,1H)。 0038 上述两种洗脱液减压蒸馏后得到比重为0.8100左右的混合液4.2升、 0.7900左右 的混合液4.5升， 经调配至规定范围后， 可以重复使用。 并且， (4.2+4.5)/(6.8+6.7) 64.4， 即64.4的流动相得到回收可以重复使用。 0039 实施例2 说明书 4/5 页 6 CN 105732756 B 6 0040 1.脂溶性地塞米松衍生物的合成 0041 称取500g地塞米松， 量取1500ml吡啶， 分别倒入合成反应罐中， 搅拌使充分溶解， 开启冷却循环塔使溶液降温在。

27、2-4。 量取十六酰氯700ml、 二氯甲烷2300ml混合， 搅匀， 向 反应罐中缓慢滴加加入十六酰氯二氯甲烷溶液， 该反应液保持在2-4的温度下， 在匀速搅 拌下进行反应。 0042 采用TLC跟踪检测， 当地塞米松几乎或完全消失时， 向反应罐中加入冰水， 搅拌， 以 终止反应。 分离弃除水相， 用6的盐酸(4000ml)洗涤下层有机层， 洗涤后的有机层减压蒸 馏除去有机试剂， 得到粘稠的膏状物。 0043 2.柱层析纯化 0044 用200300目硅胶8000g填充18.5100cm的玻璃柱， 用流动相(即第一环己烷-乙 酸乙酯混合液)浸润硅胶并装柱； 将上述步骤得到的膏状物直接上样， 。

28、配制比重0.7920- 0.7950范围内的第一环己烷-乙酸乙酯混合液洗脱液(配制后比重分别为0.7940、 0.7935)， 然后用该洗脱液进行洗脱， 共使用36升； 换用比重0.8160-0.8250范围内的第二环己烷-乙 酸乙酯混合液洗脱液(三次配制后比重分别为0.8220、 0.8215、 0.8190的环己烷-乙酸乙酯 混合液)洗脱， 共使用50升， 层析过程采用TLC跟踪， 收集并合并具有单一斑点的接收液(Rf 约0.6， 展开液为第二环己烷-乙酸乙酯混合液)， 减压浓缩至小体积， 趁热转入烧杯中， 倒 入120ml丙酮， 静置， 使晶体析出； 析出后的晶体再用丙酮重结晶， 过滤， 减压干燥， 得到无色 粉末状产品478g， 纯度98.8(HPLC测得)， 总收率59.8。 0045 上述两种洗脱液减压蒸馏后得到比重为0.8100左右的混合液38升、 0.7900左右的 混合液24升， 经调配至规定范围后， 可以重复使用。 并且， (38+24)/(36+50)72.1， 说明 有72.1的混合有机试剂得到回收， 经过调配到规定比重范围内重复使用。 说明书 5/5 页 7 CN 105732756 B 7 。