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1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利 (10)授权公告号 (45)授权公告日 (21)申请号 201710176855.3 (22)申请日 2017.03.23 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 106831840 A (43)申请公布日 2017.06.13 (73)专利权人 合肥医工医药有限公司 地址 230038 安徽省合肥市高新区长江西 路669号 专利权人 合肥恩瑞特药业有限公司 南京医工医药技术有限公司 (72)发明人 何广卫储昭兴许勤龙莫佳佳 赵炎林高峰陈娟郭敬 李家明徐云根朱启华 (74)专利代理机构 南京苏科专利代理有限责任 公司 3210。
2、2 代理人 孙立冰 (51)Int.Cl. C07F 5/02(2006.01) A61K 31/69(2006.01) A61P 29/00(2006.01) A61P 19/02(2006.01) A61P 17/00(2006.01) A61P 19/10(2006.01) A61P 19/06(2006.01) A61P 19/00(2006.01) A61P 37/02(2006.01) A61P 11/06(2006.01) 审查员 王建芳 (54)发明名称 一类具有抗炎活性的小分子化合物、 制备方 法及其药物用途 (57)摘要 本发明涉及药物化学领域， 具体涉及一类具 有抗炎活性。
3、的化合物(I)及制备方法。 药效学试 验证明， 本发明的化合物具有PDE-4抑制活性， 可 用于治疗和预防炎症相关疾病。 权利要求书2页 说明书11页 CN 106831840 B 2018.11.27 CN 106831840 B 1.通式(I)的化合物或其药学上可接受的盐： 其中R1代表CF3 R2代表卤素、 取代或者未取代的C1-6的烷基， 其中取代基是氨基、 卤素或羟基； Y、 Z各自独立地代表N或CH。 2.通式(II)的化合物或其药学上可接受的盐： 其中R2代表H、 卤素、 取代或者未取代的C1-6的烷基， 其中取代基是氨基、 卤素或羟基。 3.通式(III)的化合物或其药学上可接。
4、受的盐： R2代表H或者取代或者未取代的C1-6的烷基， 其中取代基是氨基、 卤素或羟基。 4.通式(IV)的化合物或其药学上可接受的盐： 其中R1、 R2、 R3各自独立地代表H或者取代或未取代的C1-6的烷基， 其中取代基是氨基、 卤 素或羟基。 5.权利要求1至4中任一的化合物或其药学上可接受的盐， 其中药学上可接受的盐是钾 盐、 钠盐、 铵盐、 盐酸盐、 硫酸盐、 枸橼酸盐、 马来酸或琥珀酸盐。 6.一种药物组合物， 其中含有权利要求1至4中任一的化合物或其药学上可接受的盐及 药学上可接受的载体。 7.权利要求1至4中任一的化合物或其药学上可接受的盐用于制备磷酸二酯酶抑制剂 的用途。 。
5、权利要求书 1/2 页 2 CN 106831840 B 2 8.权利要求7的用途， 其中磷酸二酯酶抑制剂是治疗炎症性疾病的药物。 9.权利要求8的用途， 其中炎症性疾病是特应性皮炎、 关节炎或类风湿性关节炎。 权利要求书 2/2 页 3 CN 106831840 B 3 一类具有抗炎活性的小分子化合物、 制备方法及其药物用途 技术领域 0001 本发明涉及药物化学领域， 具体涉及一类具有抗炎活性的化合物、 制备方法及含 有该衍生物的药物组合物以及其作为治疗剂特别是作为PDE-4抑制剂和在制备治疗和预防 炎症相关疾病的药物中的用途。 背景技术 0002 具有血管系统的活体组织对损伤因子的防御性。
6、反应称为炎症。 炎症是十分常见而 又重要的基本病理过程， 体表的外伤感染和各器官的大部分常见病和多发病(如疖、 痈、 肺 炎、 肝炎、 肾炎等)都属于炎症性疾病Cruz-Migoni S,J .Fat-Associated Lymphoid Clusters in Inflammation and ImmunityJ.Front Immunol.2016,7:612。 0003 磷酸二酯酶(phosphodiesterases,PDEs)是一个能够催化cAMP和/或cGMP水解的 超家族Murthy VS,Mangot AG.Psychiatric aspects of phosphodies。
7、terases:An overviewJ.Indian J Pharmacol.2015,47(6):594-599。 环腺苷酸(cAMP)可以抑制炎症 和炎症细胞的多种功能， 在许多疾病和病症中起着重要作用。 在这些细胞中， cAMP特异性的 PDE4是主要的PDE形式， PDE4抑制剂能增加cAMP的水平， 可用于但不限于炎症、 哮喘以及其 他病症Parikh N,Chakraborti AK.Phosphodiesterase 4(PDE4)Inhibitors in the Treatment of COPD:Promising Drug Candidates and Future D。
8、irectionsJ.Curr Med Chem.2016,23(2):129-41。 0004 PDE-4抑制剂的抗炎作用机制主要涉及： 抑制多种炎症介质/细胞因子的释放， 能够抑制TH-2细胞IL-4、 IL-5基因的表达。 抑制白细胞的激活(呼吸爆发)， 抑制白细胞游 走。 抑制细胞粘附因子(CAM)的表达或上调。 诱导产生具有抑制活性的细胞因子， 如IL- 6。 诱导细胞凋亡。 刺激内源性激素和儿茶酚胺类物质的释放Mazur M,Karczewski J, Lodyga M,et al.Inhibitors of phosphodiesterase 4(PDE 4):A new the。
9、rapeutic option in the treatment of psoriasis vulgaris and psoriatic arthritisJ.J Dermatolog Treat.2015,26(4):326-328。 它对于关节炎、 相关的关节炎病症(例如骨关节 炎和类风湿性关节炎)、 骨质疏松症、 类风湿性脊椎炎、 骨吸收病、 特应性皮炎、 接触性皮炎、 银屑病、 系统性红斑狼疮、 自身免疫性疾病、 囊样纤维化、 多发性硬化、 脓毒病、 哮喘、 慢性阻 塞性肺病、 慢性肺炎等疾病均有治疗效果。 0005 尽管目前已经公开了一系列具有抑制PDE-4作用的药物品种， 例如Cr。
10、isaborole， 但开发新的具有更好药效的化合物依然具有重要的应用价值。 发明内容 0006 本发明设计并合成了一系列化合物， 药效学试验表明本发明的化合物具有PDE-4 抑制活性， 具有优良的抗炎活性。 0007 本发明的化合物结构式如下： 说明书 1/11 页 4 CN 106831840 B 4 0008 0009 其中R1代表H或CF3； 0010 R2代表H、 卤素、 取代或者未取代的C1-6的烷基， 其中取代基是氨基、 卤素或羟基； 0011 Y、 Z各自独立地代表N或CR3， R3代表H、 OCH3或COCH3。 0012 优选下列任一结构的化合物： 0013 0014 其中。
11、R2代表H、 卤素、 取代或者未取代的C1-6的烷基， 其中取代基是氨基、 卤素或羟 基。 0015 还优选下列任一结构的化合物： 0016 0017 R2代表H或者取代或者未取代的C1-6的烷基， 其中取代基是氨基、 卤素或羟基。 0018 还优选下列任一结构的化合物： 0019 0020 其中R1、 R2、 R3各自独立地代表H或者取代或未取代的C1-6的烷基， 其中取代基是氨 基、 卤素或羟基。 0021 更优选的化合物如下： 0022 表1优选化合物 说明书 2/11 页 5 CN 106831840 B 5 0023 0024 本发明部分化合物可以用以下方法制备得到： 0025 00。
12、26 步骤1： 在碱催化剂和氮气保护存在下， 缩合化合物1和2-溴-5羟基苯甲醛， 所用碱 例如碳酸钾、 碳酸铯、 碳酸钠、 氢化钠、 叔丁醇钾等。 溶剂可用DMF、 DMA等， 反应温度80 120。 0027 步骤2： 将化合物2用二氧六环溶解， 然后加入频那醇硼酸酯、 乙酸钾、 钯试剂， 氮气 氛围下100搅拌2小时反应完全得到化合物3 0028 步骤3： 将化合物3用甲醇溶解， 缓慢加入硼氢化钠， 室温搅拌0.5h。 再加入3M盐酸， 白色固体析出， 得到化合物4。 说明书 3/11 页 6 CN 106831840 B 6 0029 本发明化合物及其药用盐可以是碱金属或者碱土金属， 。
13、氨基酸或者含有氨基的碱 性化合物形成的盐， 或者医药上允许的无机酸或者有机酸形成的盐， 优选化合物(I)的钾 盐、 钠盐、 铵盐、 盐酸盐、 硫酸盐、 枸橼酸盐、 马来酸或琥珀酸。 0030 本发明还公开了一种药物组合物， 其中含有化合物(I)或其药学上可接受的盐及 药学上可接受的载体。 所述药物组合物可以是普通片剂或胶囊、 缓控释制剂、 口服液、 注射 剂、 透皮制剂等制剂学上常规的制剂形式。 0031 本发明化合物作为磷酸二酯酶抑制剂是治疗炎症性疾病的药物， 其中炎症性疾病 是关节炎或类风湿性关节炎、 特应性皮炎。 0032 本发明化合物用于治疗时， 人用剂量范围为1mg1000mg/天。。
14、 也可根据剂型的不 同和疾病严重程度， 使用剂量超出该范围。 0033 下面是本发明化合物的药效学试验及结果： 0034 一、 化合物对PDE-4A酶的抑制作用 0035 使用从Sf9昆虫细胞中由N-末端GST标记由杆状病毒表达的PDE-4A酶。 在新制备的 pH7.5Tris缓冲液中加入指定的PDE-4A酶和1mM cAMP， 将酶溶液输送到反应孔中， 将化合物 在DMSO中超声溶解然后加入至酶溶液中， 在室温下孵育10分钟， 将底物溶液倒入反应孔中 以引发反应， 在室温下孵育1小时， 加入检测示踪剂(AMP2/GMP2AlexaFluor 633 Tracer)和 抗体(AMP2/GMP2。
15、Antibody)以终止反应， 并混合孵育90分钟(37)。 在Ex/Em 620/688处测量荧光偏振， 8、 0.8、 0.08 M， 测试实验物。 酶活性小于50， 视作具有显著抑制 活性。 0036 实验结果见表2， 可知各化合物及Crisaborole在三个浓度下酶活性均小于50， 表明具有显著的酶抑制活性， 其中本发明化合物PD-1、 PD-2、 PD-3、 PD-4、 PD-5的酶抑制活性 优于Crisaborole。 0037 表2本发明化合物对PDE-4A酶的抑制活性 0038 0039 二、 化合物对LPS诱导BALB/C小鼠炎症因子释放的影响 0040 取雌性BALB/C。
16、小鼠， 体重18-22g， 适应性饲养7天， 随机分为空白组、 模型组、 阳性 对照地塞米松10mg/kg组、 阳性对照Crisaborole 2mg/kg组、 5个化合物2mg/kg组， 每组6只。 各组小鼠口服给予相应化合物及对照药物， 空白组、 模型组给予相应溶媒。 给药0.5h后除空 白组外， 其余各组LPS腹腔注射0.2ml造模， 2h采血， 3,500rpm 10min离心后分装保存， ELISA 试剂盒检测血清TNF-a含量。 0041 实验结果见表3。 根据结果可知， 与模型组比较， 各化合物及阳性药地塞米松、 Crisaborole能极显著性降低血清中TNF- 的含量(P0.。
17、01)。 与Crisaborole比较， 本发明化 说明书 4/11 页 7 CN 106831840 B 7 合物PD-2能极显著降低血清中TNF-的含量(P0.01)， PD-1、 PD-3、 PD-4、 PD-5能显著降低 TNF-的含量(P0.05)， 表明所发明的化合物抑制炎症因子释放作用强于Crisaborole。 0042 表3本发明化合物对LPS诱导BALB/C小鼠炎症因子释放的影响(MeanSD， n6) 0043 0044 注： P0.05， P0.01vs空白组；P0.05， P0.01vs模型组；*P0.05，*P 0.01vs Crisaborole 0045 三、 。
18、本发明化合物对佛波醇脂诱导的小鼠耳水肿模型的抗炎作用 0046 取雄性ICR小鼠， 体重18-22g， 适应性饲养7天， 随机分为9组， 每组8只， 即空白组、 模型组、 阳性对照地塞米松组、 阳性对照Crisaborole组、 5个化合物组， 于佛波醇脂(5ug/ 20ul/耳朵)涂抹前30min及涂抹后15min， 各组大鼠右耳分别均匀涂抹相应化合物或阳性对 照药物1mg/20ul/耳朵， 左耳均涂抹溶媒20ul(丙酮+乙醇)， 空白组及模型组两耳均涂抹等 剂量的溶媒20ul(丙酮+乙醇)。 在造模后6h， 通过测厚仪测量耳朵肿胀作为炎症指标， 计算 公式计算肿胀度及抑制率肿胀度(右耳平均。
19、厚度左耳平均厚度)/右耳平均厚度* 100； 抑制率()(模型组平均肿胀度给药组平均肿胀度)/模型组平均肿胀度* 100。 0047 实验结果见表4， 与空白组相比， 模型组涂抹佛波醇脂造模后， 肿胀度达到22.55* 10-2mm， 表明造模效果明显。 与模型组相比， 阳性药地塞米松组、 Crisaborole组及各化合物 组均能极显著降低耳肿胀度(P0.01)。 与Crisaborole组比较， 本发明化合物PD-1PD-5能 显著降低耳肿胀度(P0.05)， 作用强于Crisaborole。 0048 表4.化合物对佛波醇脂致小鼠耳廓肿胀度及肿胀抑制率的影响(MeanSD， n8) 00。
20、49 0050 注： P0.05， P0.01vs模型；*P0.05，*P0.01vs Crisaborole 说明书 5/11 页 8 CN 106831840 B 8 0051 综上所述， 本发明化合物具有磷酸二酯酶抑制活性， 可用于治疗炎症性疾病， 炎症 相关疾病例如关节炎、 关节炎病症(例如骨关节炎和类风湿性关节炎)、 骨质疏松症、 类风湿 性脊椎炎、 骨吸收病、 特应性皮炎、 接触性皮炎、 银屑病、 系统性红斑狼疮、 自身免疫性疾病、 囊样纤维化、 多发性硬化、 脓毒病、 哮喘、 慢性阻塞性肺病、 慢性肺炎。 具体实施方式 0052 实施例1 0053 PD-1的合成 0054 步骤。
21、1中间体2的合成 0055 0056 100mL单口瓶加入1(5g,0.016mol)， 樟脑磺酸(350mg,1.5mmol)， 加入50mL二氯甲 烷溶解。 缓慢加入THP-OH(3ml,0.032mol)， 搅拌40分钟， TLC检测反应完全， 直接浓缩， 柱层 析得中间体2(3g,收率47)。 0057 步骤2中间体4的合成 0058 0059 50mL单口瓶加入3(1g,6mmol)， 2(2g,5mmol)， 加入20mL吡啶溶解。 再加入碳酸铯 (3g,9mmol)， 氧化亚铜(572mg,4mmol)， 氮气氛围下130搅拌过夜， TLC检测反应完全， 乙酸 乙酯萃取， 饱和食。
22、盐水洗涤三次， 有机层干燥， 过滤， 浓缩， 柱层析得中间体4(1.3g,收率 60)。 0060 步骤3中间体5的合成 0061 0062 50mL单口瓶加入4(1g,2.28mmol)， 频那醇硼酸酯(0.69g,2.74mmol)， 加入10mL二 氧六环溶解。 再加入乙酸钾(782mg,8mmol)， 钯试剂(160mg,0.23mmol)， 氮气氛围下100搅 拌2小时， TLC检测反应完全， 乙酸乙酯萃取， 饱和食盐水洗涤三次， 有机层干燥， 过滤， 浓缩， 柱层析得化合物5(1.1g,收率98)。 0063 步骤4PD-1的合成 0064 说明书 6/11 页 9 CN 1068。
23、31840 B 9 0065 50mL单口瓶加入5(1.1g,2.28mmol)， 加入10mL乙醇溶解。 再加入3M盐酸， 0搅拌 0.5小时， 缓慢升至室温， 反应3小时。 TLC检测反应完全， 加入饱和碳酸氢钠调PH至7， 析出白 色固体， 抽滤， 水洗三遍烘干得PD-1(460mg,收率67)。 1HNMR 400MHz(DMSO-d6) :9.17(s, 1H),7.84-7.86(d,J4.01Hz,1H),7.76-7.78(d,J8.03Hz,1H),7.03(s,2H),6.88-6.90 (s,1H),6.53(s,1H),4.96(s,2H),3.77(s,3H),2.4。
24、8(s,3H)。 0066 实施例2 0067 PD-2的合成 0068 步骤1中间体1的合成 0069 0070 化合物SM(1.5g， 8.26mmol)溶于DMF(25mL)， 搅拌下加入2-溴-5-羟基苯甲醛 (1.66g， 8.26mmol)和K2CO3(1.71g， 12.4mmol)。 氮气保护下， 80C反应过夜。 TLC显示反应完 成。 冷却至室温， 加入H2O(40mL)， EA萃取(25mLx3)。 合并有机相， 饱和氯化钠洗涤(25mLx3)， 无水硫酸钠干燥， 过滤、 浓缩并纯化(SiO2， PE:EA100:1)得到目标化合物(2.3g， 80.4)。 0071 步。
25、骤2中间体2的合成 0072 0073 化合物1(1 .3g， 3.76mmol)溶于dioxane(20mL)， 搅拌下加入B2pin2(1 .14g， 4.51mmol)， AcOK(1.11g， 11.27mmol)和Pd(dppf)Cl2(137.6mg， 0.188mmol)。 氮气保护下， 105C反应1小时。 TLC显示反应完成。 冷却至室温， 过滤、 浓缩并纯化(SiO2， PE:EA20:1) 得到目标化合物(1.13g， 76.5)。 0074 步骤3PD-2的合成 0075 0076 化合物2(550.0mg， 1.40mmol)溶于MeOH(5mL)， 0C， 搅拌下加。
26、入NaBH4(63.5mg， 1.68mmol)， 反应5分钟。 加入1M HCl溶液， 调节pH值到3-4， 室温反应过夜。 加入饱和的 NaHCO3溶液， 调节pH值到6-7， 加入H2O(15mL)， EA萃取(15mLx3)。 合并有机相， 无水硫酸钠干 燥， 过滤、 浓缩并纯化(SiO2， PE:EA5:1)得到目标化合物PD-2(185.0mg， 44.8)。 1HNMR 400MHz(DMSO-d6)： 9.21(s,1H)， 8.58(s,1H)， 8.25(dd,J8.66,2.38Hz,1H)， 7.79(d,J 说明书 7/11 页 10 CN 106831840 B 1。
27、0 8.03Hz,1H)， 7.24-7.32(m,2H)， 7.16(dd,J7.78,1.76Hz,1H)， 4.99(s,2H)。 0077 实施例3 0078 PD-3的合成 0079 步骤1中间体1的合成 0080 0081 化合物2-溴-5-羟基苯甲醛(494.0mg， 2.46mmol)溶于DMF(12mL)， 搅拌下加入 Bu4NBr(79.4mg， 0.24mmol)和K2CO3(680.3mg， 4.92mmol)。 氮气保护下， 室温反应10分钟。 SM (420.0mg， 2.46mmol)加入反应瓶中， 60C反应2小时。 TLC显示反应完成。 冷却至室温， 加入 H。
28、2O(40mL)， EA萃取(15mLx3)。 合并有机相， 饱和氯化钠洗涤(20mLx3)， 无水硫酸钠干燥， 过 滤、 浓缩并纯化(SiO2， PE:EA8:1)得到目标化合物(660.0mg， 80.5)。 步骤2中间体2的合 成 0082 0083 中间体1(300.0mg， 0.89mmol)溶于dioxane(6mL)， 搅拌下加入B2pin2(272.7mg， 1.07mmol)， AcOK(263.5mg， 2.68mmol)和Pd(dppf)Cl2(32.5mg， 0.005mmol)。 氮气保护下， 105C反应1小时。 TLC显示反应完成。 冷却至室温， 过滤、 浓缩并纯。
29、化(SiO2， PE:EA10:1) 得到目标化合物(254.0mg， 74.2)。 0084 步骤3PD-3的合成 0085 0086 中间体2(390.0mg， 1.02mmol)溶于MeOH(5mL)， 0C， 搅拌下加入NaBH4(50.2mg， 1.33mmol)， 反应5分钟。 加入2M HCl溶液， 调节pH值到2-3， 室温反应2小时。 加入饱和的 NaHCO3溶液， 调节pH值到6-7， 过滤， 滤饼水洗(5mLx2)， 烘干得到目标化合物PD-3(216.0mg， 74.5)。 1HNMR 400MHz(DMSO-d6)： 7.63(d,J8.28Hz,1H)， 7.08(。
30、s,1H)， 6.99(dd,J 8.03,1.76Hz,1H)， 5.18(s,2H)， 4.93(s,2H)， 2.49(br.s.,3H)， 2.46(d,J2.51Hz,6H)。 0087 实施例4 说明书 8/11 页 11 CN 106831840 B 11 0088 PD-4的合成 0089 步骤1中间体1的合成 0090 0091 化合物SM(2.5g， 21.2mmol)溶于CCl4(40mL)， 搅拌下加入NBS(3.77g， 21.2mmol)和 AIBN(347.5mg， 2.12mmol)。 氮气保护下， 85C反应2小时。 TLC显示还有原料没有反应完， 加 入AI。
31、BN(347.5mg， 2.12mmol)， 85C继续反应2小时。 冷却至室温， 加入H2O(100mL)， DCM萃取 (25mLx3)。 合并有机相， 无水硫酸钠干燥， 过滤、 浓缩并纯化(SiO2， PE:EA30:1)得到目标 化合物(1.42g， 34.1)。 0092 步骤2中间体2的合成 0093 0094 中间体1(1.42g， 7.22mmol)溶于DMF(25mL)， 搅拌下加入2-溴-5-羟基苯甲醛 (1.21g， 6.02mmol)和K2CO3(998.0mg， 7.22mmol)。 氮气保护下， 室温反应2.5小时。 TLC显示反 应完成。 加入H2O(60mL)，。
32、 EA萃取(25mLx4)。 合并有机相， 饱和氯化钠洗涤(25mLx3)， 无水硫 酸钠干燥， 过滤、 浓缩并纯化(SiO2， PE:EA10:1)得到目标化合物(1.75g， 91.7)。 步骤3 中间体3的合成 0095 0096 中间体2(500.0mg， 1.58mmol)溶于dioxane(10mL)， 搅拌下加入B2pin2(480.4mg， 1.89mmol)， AcOK(464.2mg， 4.73mmol)和Pd(dppf)Cl2(57.8mg， 0.079mmol)。 氮气保护下， 105C反应1小时。 TLC显示反应完成。 冷却至室温， 过滤、 浓缩并纯化(SiO2， P。
33、E:EA5:1)得 到目标化合物(380.0mg， 66.2)。 0097 步骤4PD-4的合成 说明书 9/11 页 12 CN 106831840 B 12 0098 0099 中间体3(300.0mg， 0.82mmol)溶于MeOH(3mL)和THF(3mL)， 搅拌下加入NaBH4 (37.4mg， 0.99mmol)， 室温反应10分钟。 加入H2O(0.5mL)， 2M HCl溶液调节pH值到2-3， 室温 反应过夜。 加入饱和的NaHCO3溶液， 调节pH值到5-6， 过滤， 滤饼水洗(10mLx3)。 溶解到EA (50mL)中， 无水硫酸钠干燥， 过滤、 浓缩。 固体用叔丁。
34、基甲醚洗涤得到目标化合物PD-4 (100.0mg， 45.6)。 1HNMR 400MHz(DMSO-d6)： 9.04(d,J1.00Hz,1H)， 9.01(s,1H)， 8.36 (dd,J8.16,1.88Hz,1H)， 7.72(d,J8.03Hz,1H)， 7.64(d,J8.03Hz,1H)， 7.06(s,1H)， 7.02(dd,J8.16,1.88Hz,1H)， 5.33(s,2H)， 4.92(s,2H)。 0100 实施例5 0101 PD-5的合成 0102 步骤1中间体1的合成 0103 0104 化合物SM(1 .0g， 4 .87mmol)溶于MeOH(15m。
35、L)。 0C， 搅拌下分批加入NaBH4 (368.9mg， 9.75mmol)。 室温反应1小时。 TLC显示反应完成。 1M HCl溶液调节pH值到5-6， EA萃 取(20mLx3)。 合并有机相， 无水硫酸钠干燥， 过滤、 浓缩得到目标化合物(710.0mg， 82.2)。 0105 步骤2中间体2的合成 0106 0107 中间体1(390.0mg， 2.2mmol)溶于DCM(10mL)。 0C， 滴加PBr3(387.0mg， 1.43mmol) 的DCM溶液(2mL)。 室温反应3小时。 TLC显示反应完成。 饱和NaHCO3溶液调节pH值到6-7， 加入 H2O(15mL)，。
36、 DCM萃取(15mLx3)。 合并有机相， 无水硫酸钠干燥， 过滤、 浓缩得到目标化合物 (450.0mg， 80.0purity， 68.1yield)。 0108 步骤3中间体3的合成 说明书 10/11 页 13 CN 106831840 B 13 0109 0110 中间体2(447.8mg， 1.49mmol)溶于DMF(6mL)， 搅拌下加入2-溴-5-羟基苯甲醛 (250.0mg， 1.24mmol)和K2CO3(206.3mg， 1.49mmol)。 氮气保护下， 室温反应1.5小时， TLC显示 反应完成。 加入H2O(15mL)， EA萃取(15mLx3)。 合并有机相，。
37、 饱和氯化钠洗涤(15mLx3)， 无水 硫酸钠干燥， 过滤、 浓缩并纯化(SiO2， PE:EA40:1)得到目标化合物(420.0mg， 93.8)。 0111 步骤4中间体4的合成 0112 0113 中间体3(410.0mg， 1.14mmol)溶于dioxane(6mL)， 搅拌下加入B2pin2(361.4mg， 1.42mmol)， AcOK(335.2mg， 3.42mmol)和Pd(dppf)Cl2(41.7mg， 0.057mmol)。 氮气保护下， 100C反应1小时。 TLC显示反应完成。 冷却至室温， 过滤、 浓缩并纯化(SiO2， PE:EA20:1) 得到目标化合。
38、物(298.0mg， 64.3)。 0114 步骤5PD-5的合成 0115 0116 中间体4(290.0mg， 0.71mmol)溶于MeOH(5mL)和THF(1mL)。 0C， 搅拌下加入NaBH4 (32.3mg， 0.85mmol)， 室温反应10分钟。 加入H2O(0.5mL)， 3M HCl溶液调节pH值到2-3， 室温 反应30分钟。 过滤， 滤饼水洗(10mLx3)。 溶解到EA(50mL)中， 无水硫酸钠干燥， 过滤、 浓缩并 纯化得到目标化合物PD-5(63.0mg， 28.6)。 1HNMR 400MHz(DMSO-d6) ： 8.96-9.04(m,2 H)， 8.27(dd,J8.41,2.13 Hz,1 H)， 7.75(d,J8.28 Hz,1 H)， 7.65(d,J8.03 Hz,1 H)， 7.08(d,J1.76 Hz,1 H)， 7.02(dd,J8.16,2.13 Hz,1 H)， 5.35(s,2 H)， 4.92(s,2 H)。 说明书 11/11 页 14 CN 106831840 B 14 。