一种基于酶复合改性的大豆多糖及其制备方法.pdf

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1、(10)授权公告号 CN 102776257 B (45)授权公告日 2014.05.28 CN 102776257 B (21)申请号 201210242606.7 (22)申请日 2012.07.13 C12P 19/04(2006.01) C08B 37/00(2006.01) A23C 9/13(2006.01) (73)专利权人 华东师范大学 地址 200062 上海市普陀区中山北路 3663 号 专利权人 平顶山天晶植物蛋白有限责任公 司 (72)发明人 常忠义 谭静 高红亮 张亦澜 吕远 黄橙子 崔红亮 (74)专利代理机构 上海麦其知识产权代理事务 所 ( 普通合伙 ) 312。

2、57 代理人 董红曼 谭永辉 . 水溶性大豆多糖的高效提取及 改性研究 .中国优秀硕士学位论文全文数据 库 .2008, 全文 . (54) 发明名称 一种基于酶复合改性的大豆多糖及其制备方 法 (57) 摘要 本发明公开了一种基于酶复合改性的大豆多 糖制备方法， 在大豆多糖溶液中， 边搅拌边加入谷 氨酰胺转胺酶， 进行糖蛋白交联反应， 然后加热灭 酶 ； 经冷却， 边搅拌边加入氯化钠或氯化钙和去 酯化酶， 进行去酯化反应， 然后加入酸终止反应， 加热灭酶 ； 用乙醇沉淀干燥后得到改性大豆多 糖。用本发明方法通过酶复合改性改变大豆多糖 组分和结构， 赋予大豆多糖较高的对蛋白的分散 稳定特性， 。

3、在乳酸清凉饮料的制备中起到较好的 稳定效果。 (51)Int.Cl. (56)对比文件 审查员 张蕊 权利要求书 1 页 说明书 6 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利 权利要求书1页 说明书6页 (10)授权公告号 CN 102776257 B CN 102776257 B 1/1 页 2 1. 一种基于酶复合改性的大豆多糖制备方法， 其特征在于， 在大豆多糖溶液中， 边搅拌 边加入谷氨酰胺转胺酶， 进行糖蛋白交联反应， 然后加热灭酶 ； 冷却后， 边搅拌边加入氯化 钠或氯化钙和去酯化酶， 进行去酯化反应， 然后加入酸终止反应， 加热灭酶 ； 用乙醇沉淀后 干燥得到改。

4、性大豆多糖 ； 其中， 所述谷氨酰胺转胺酶的酶活单位为 50 200U/g， 加酶量 0.02 0.1%， 酶解 pH 为 5.0 7.0， 酶解温度 40 70， 反应时间 30 120min ； 所述去酯化酶为黑曲霉果胶甲酯酶 ； 所述去酯化酶的加酶量 10 20ml， 酶活单位 0.01U/mL， 酶解 pH 为 5.2 7.0， 酶解温度 40 70， 反应时间 30 120min。 2. 根据权利要求 1 所述的基于酶复合改性的大豆多糖制备方法， 其特征在于， 所述大 豆多糖溶液的浓度为 1% 10%。 3. 根据权利要求 1 所述的基于酶复合改性的大豆多糖制备方法， 其特征在于， 。

5、所述谷 氨酰胺转胺酶酶促反应后加热至 100 150灭酶， 所述去酯化反应后加热至 80 120 灭酶。 4. 根据权利要求 1 所述的基于酶复合改性的大豆多糖制备方法， 其特征在于， 所述氯 化钠或氯化钙的浓度为 0.1 0.15mol/L。 5. 根据权利要求 1 所述的基于酶复合改性的大豆多糖制备方法， 其特征在于， 所述方 法中用 0.01mol/L 氢氧化钠维持反应过程 pH， 根据添加量监控反应程度 ； 反应结束后， 用 0.01mol/l 盐酸调节 pH4 终止所述的去酯化反应。 权 利 要 求 书 CN 102776257 B 2 1/6 页 3 一种基于酶复合改性的大豆多糖及。

6、其制备方法 技术领域 0001 本发明涉及一种改性技术制备大豆多糖的方法， 采用的改性技术是酶复合改性， 用于稳定乳酸清凉饮料。 背景技术 0002 随着我国居民的消费水平不断提高， 人们消费饮料的观念正在从嗜好型饮料向保 健型饮料转变， 由于消费者对健康体魄和优美身材的追求， 使得市场上各种低脂、 脱脂、 低 蛋白酸奶深受欢迎， 通过强化各种营养素 （维生素、 矿物质） 和益生素而得到的高附加值酸 奶更为深受广大消费者欢迎。 因而开发研制酸性乳饮料的市场潜力很大， 社会效益显著。 乳 酸清凉饮料是以脱脂奶粉为主要原料， 通过发酵或不发酵， 再添加其他配料调制而成的低 蛋白含乳饮料， 乳蛋白含。

7、量一般在 0.1-0.3% ； 在 PH 值小于 4.5 的高酸环境下， 含乳的基料 粘度如水一样低。但是这类饮料最常见的质量问题即沉淀和分层问题， 也就是如何解决蛋 白质粒子稳定化的问题。开发这种新的功能性饮料， 则能填补我国饮料市场上缺乏低蛋白 饮料的空白， 也因而受到广泛关注。 0003 大豆多糖是从大豆皮和大豆子叶部分所得到的水溶性膳食纤维。 在豆制品加工业 中， 每年都有大量的加工副产物豆渣被直接废弃或者被用作动物饲料， 而很少有厂家回收 利用。实际上， 干豆渣中含有近 35% 的水溶性大豆多糖。水溶性大豆多糖不仅具有膳食纤 维的减肥、 通便、 调节胃肠中微生物营养的平衡和类胆固醇的。

8、代谢以及抑制免疫血清中脂 质的氧化的作用， 还具有其他优越的食品功能特性， 例如乳化及乳化稳定性、 抗氧化性、 抑 菌性、 抗黏结性及耐热、 耐酸、 耐盐的特性等等。 基于以上特性， 水溶性大豆多糖可以作为乳 化剂、 分散剂、 稳定剂等。 0004 大豆水溶性多糖作为优良的酸乳饮料蛋白稳定剂， 不仅能够稳定蛋白颗粒， 还因 其膳食纤维的多功能性极大提高了酸乳饮料的附加营养价值， 因而是一种越来越受到人们 的青睐的新型食品添加剂。这些良好的功能性与大豆多糖的组成成分、 结构和分子构成有 很大的关系。研究表明大豆多糖是一种酸性杂多糖， 结构与果胶类似， 其含有总量近 9% 的 结合蛋白 （肽） 和。

9、游离蛋白 （肽） ， 结合蛋白 （肽） 约 3% 和游离蛋白 （肽） 6%， 随着离心分离自由 的游离蛋白会被分离出去， 连接于大豆多糖上的结合蛋白能够促进大豆多糖主链快速结合 到酪蛋白表面， 并能在酪蛋白表面形成厚层， 提高大豆多糖侧链间的空间排斥力， 在某种程 度上， 大豆多糖上连接的结合蛋白 （肽） 还能够提高其乳化能力。 0005 另外， 大豆多糖含有近 20% 的半乳糖醛酸的酸性多糖， 其分子质量为 5 0001 000 000 u， 由半乳糖 （Gal） 、 阿拉伯糖 （Ara） 、 半乳糖醛酸、 鼠李糖 （Rha） 、 岩藻糖 （Fuc） 、 木糖 （Xyl） 、 葡萄糖 （Gl。

10、c） 等组成。其主链由聚半乳糖醛酸 （GN） 和聚鼠李糖半乳糖 （RG） 组成， 在主链上结合有半乳聚糖侧链和阿拉伯糖侧链。 其侧链在稳定酸性乳饮料时起着重要的作 用。酸性基团缔合到酪蛋白表面上再通过中性糖侧链形成覆盖在蛋白质颗粒表面的厚层 所产生的空间位阻来稳定蛋白颗粒。避免了酪蛋白在酸性条件下沉淀， 以此稳定酪蛋白颗 粒。目前的研究表明， 大豆多糖在应用性及功能性上均优于果胶、 瓜尔胶、 阿拉伯胶等常用 说 明 书 CN 102776257 B 3 2/6 页 4 胶体。 0006 大豆多糖链上的自由羧基沿着聚合链的分布情况及大豆多糖链上的结合蛋白含 量决定其在酸性饮料中的稳定性， 且某些。

11、半乳糖醛酸的残基会被甲基酯化， 酯化发生在半 乳糖醛酸残基聚合之后 ； 而大豆多糖稳定酸乳中酪蛋白的能力与其链上自由羧基嵌段的结 构和长度有关。自由羧基嵌段太长会使悬吊链太短或者无法产生， 使多糖与酪蛋白结合物 的空间排斥力减小， 同样也会与酸乳饮料中的钙离子反应造成凝胶沉淀 ； 自由羧基嵌段太 短会导致多糖无法准确地结合到酪蛋白上。普通商用大豆多糖中， 通常结合蛋白 （肽） 含量 约 23%， 酯化程度在 4050%， 根据研究发现， 高稳定性的大豆多糖的结合蛋白 （肽） 在 46%， 酯化度通常在 2030% 之间。 0007 专利 CN1927033 研究了果胶酯酶、 果胶反排除酶、 聚。

12、半乳糖酶对大豆碎粒酵素处 理形成大豆粉末和大豆浆液， 该专利仅仅从解碎的角度使用了果胶酯酶， 但并没有深入研 究果胶酯酶对大豆浆液中的具体成分造成的影响 ； 已有文献报道了用双酶法处理提取大豆 多糖， 探讨酶种类、 双酶组合、 酶解时间、 pH、 固液比等对提取率的影响以及大豆多糖对氧自 由基的清除能力 （宋慧， 苗敬芝， 董玉玮 . 双酶法提取大豆多糖及其抗氧化性研究 J中 国食品添加剂， 2011,(5) ： 8993.） ； 另有文献报道了果胶甲酯酶对大豆皮的脱脂影响， 考 察酶解温度、 酶解时间、 pH 和酶的加入量对果胶产品酯化度和果胶提取率的影响， 提出酯 化度对大豆多糖稳定性存在。

13、影响， 但对于大豆多糖上蛋白质的作用未作研究 （刘贺 , 郭晓 飞 , 刘昊东等 . 大豆皮果胶酶法脱脂参数研究 J食品工业科技 ,2011,32(5) ： 273 464.) ； 另有文献报道了可溶性大豆多糖在功能性低蛋白饮料中的应用， 在该研究中从感官 和沉淀率对比了以可溶性大豆多糖， CMC、 果胶、 PGA 为乳化稳定剂， 大豆多糖表现出最佳稳 定效果的乳化剂 （李小林， 何莹 . 可溶性大豆多糖在功能性低蛋白饮料中的应用 J现代 食品科技， 2010,26(3) ： 303305.)。 目前人们对大豆多糖的提取工艺从不同的方面做了很 多的研究， 对大豆多糖的化学、 物理及生物改性进行。

14、了一些研究， 但是有关用于稳定乳酸清 凉饮料的大豆多糖的作用机理并没有系统的研究， 大豆多糖中组分和分子结构对其稳定性 的影响也未见报道， 因此如何提高大豆多糖在低蛋白饮料中的高稳定性一直是研发热点。 本发明在对大豆多糖的现有研究基础上， 提出一种对大豆多糖的组分和分子结构进行改性 的方法。 发明内容 0008 本发明的目的在于提供一种基于酶复合改性的大豆多糖制备方法， 所制得的大豆 多糖是一种在乳酸清凉饮料中具高稳定性的水溶性大豆多糖， 可用于制备稳定的乳酸清凉 饮料。本发明中 “酶复合改性” 方法， 是指在大豆多糖溶液中， 依次加入谷氨酰胺转胺酶和 去酯化酶， 分别对大豆多糖进行酶化学反应。

15、。 0009 本发明的目的主要通过以下技术方案实现 ： 一种基于酶复合改性的大豆多糖制备 方法， 主要包括以下步骤 ： 0010 在大豆多糖溶液中， 首先边搅拌边加入谷氨酰胺转胺酶， 在适宜的温度和 pH 条件 下进行糖蛋白交联反应， 一段时间后加热灭酶 ； 然后冷却至时宜温度， 边搅拌边加入氯化钠 或氯化钙和去酯化酶， 在适宜的温度和 pH 条件下对大豆多糖进行去酯化处理， 一段时间后 加入酸终止反应， 加热灭酶 ； 用乙醇沉淀后干燥得到酶改性大豆多糖。 说 明 书 CN 102776257 B 4 3/6 页 5 0011 其中， 所述大豆多糖溶液的浓度为 1%10%。 0012 其中， 。

16、所述谷氨酰胺转胺酶的酶活单位为 50200U/g， 加酶量 0.020.1%， 酶解 pH 为 5.07.0。酶解温度 4070， 反应时间 30120min。反应结束后加热至 100150灭酶。 0013 其中， 所述氯化钠或氯化钙的浓度为 0.10.15mol/L。 0014 其中， 所述去酯化酶为黑曲霉果胶甲酯酶， 柑橘果胶甲酯酶， 大豆果胶甲酯酶， 优选黑曲霉果胶甲酯酶。去酯化反应的加酶量 1020mL, 酶解 pH 为 5.27.0， 酶解温度 4070， 反应时间 30120min。 0015 其中， 所述方法中用 0.01mol/L 氢氧化钠维持反应过程 pH， 根据添加量监控反。

17、应 程度。 0016 其中， 通过加入0.01mol/L盐酸调节至pH4终止所述去酯化反应， 加热至80120 灭酶。 0017 本发明方法中， 通过采用乙醇沉淀后经干燥得到沉淀物， 制备得到改性大豆多糖。 0018 本发明创新之处在于， 本发明首次提出对大豆多糖进行酶法复合改性， 制备具高 稳定性的水溶性大豆多糖。通过向大豆多糖溶液中添加谷氨酰胺转胺酶和去酯化酶， 提高 结合蛋白 （肽） 的含量及降低大豆多糖的酯化度， 使酸性多糖半乳糖链上的结合蛋白 （肽） 含 量达到 5% 左右， 同时自由羧基半乳糖醛酸上的自由羧基成嵌段均匀分布。使大豆多糖能够 准确而稳固地结合在酪蛋白表面， 并增加其厚。

18、层， 提高酪蛋白颗粒的空间排斥力。 用本发明 方法通过酶复合改性改变大豆多糖组分和结构， 赋予大豆多糖较高的对蛋白的分散稳定特 性， 在乳酸清凉饮料的制备中起到较好的稳定效果。 0019 采用本发明酶法改性得到的大豆多糖的结合蛋白 （肽） 的含量在 46%， 酯化度通常 在 2030% 之间， 对乳酸清凉饮料的稳定性效果好。 具体实施方式 0020 结合以下具体实施例， 对本发明作进一步的详细说明。实施本发明的过程、 条件、 试剂、 实验方法等， 除以下专门提及的内容之外， 均为本领域的普遍知识和公知常识， 本发 明没有特别限制内容。 0021 实施例 1 0022 本实施例以市面上普通商用大。

19、豆多糖为原料， 首先称取 10g 大豆多糖， 然后溶解 到490mL蒸馏水中， 搅拌均匀， 边搅拌边加入100U/g谷氨酰胺转胺酶0.25g(加酶量0.05%) 维持反应 pH 为 6， 反应温度 55， 反应时间 60min。酶反应结束后， 加热至 100灭酶。 0023 冷却至 30， 将 04的乙醇 1:1.5 添加到多糖溶液中混合均匀后， 5000rpm、 10min 两次离心分离得到沉淀。经真空冷冻干燥 （例如 ： -50冷凝， 10pa 条件下 -10一 次升华， 30二次升华） ， 得到改性大豆多糖。测定样品蛋白含量、 酯化度和酸乳中沉淀率。 0024 实施例 2 0025 本实。

20、施例以市面上普通商用大豆多糖为原料， 首先称取 10g 大豆多糖， 然后溶解 到 490mL 蒸馏水中， 搅拌均匀， 边搅拌边添加氯化钠 4.39g（0. 15mol/L） ， 和黑曲霉果胶酯 酶 16mL（酶活单位为 0.01U/mL） ， 维持反应 pH 为 5.8， 反应温度 60， 反应时间 60min。在 反应过程中不断加入 0.01mol/L 氢氧化钠维持反应 pH。酶反应结束后， 用 0.01mol/L 盐酸 调节 pH4 终止反应， 加热至 100灭酶。 说 明 书 CN 102776257 B 5 4/6 页 6 0026 冷却至 30， 将 04的乙醇 1:1.5 添加到多。

21、糖溶液中混合均匀后， 5000rpm、 10min 两次离心分离得到沉淀。经真空冷冻干燥 （例如 ： -50冷凝， 10pa 条件下 -10一 次升华， 30二次升华） ， 得到改性大豆多糖。测定样品蛋白含量、 酯化度和酸乳中沉淀率。 0027 实施例 3 0028 本实施例以市面上普通商用大豆多糖为原料， 首先称取 10g 大豆多糖， 然后溶解 到 490mL 蒸馏水中， 搅拌均匀， 边搅拌边 100U/g 谷氨酰胺转胺酶 0.25g(0.05%), 维持反应 pH 为 6， 反应温度 55， 反应时间 60min。酶反应结束后， 加热至 100灭酶。 0029 其中， 适用的谷氨酰胺转胺酶。

22、的酶活单位为 50200U/g， 加酶量 0.020.1%， 酶解 pH 为 5.07.0， 酶解温度 4070， 反应时间 30120min。进一步优选地， 谷氨酰胺转胺酶的 加酶量 0.040.06%， 酶解 pH 为 5.56.5。酶解温度 5060。在本发明制备方法中， 随着蛋 白含量提高， 所制备的改性大豆多糖酯化度含量也升高， 导致最终沉淀率升高， 乳酸清凉饮 料的稳定性下降。经实验获得本发明优选糖蛋白酶促交联反应条件下， 所制备的大豆多糖 的蛋白含量 4.04.5%， 酯化度 6777%， 沉淀率 1.92.3%。 0030 冷却至 60， 边搅拌边添加氯化钠 4.39g（浓度为。

23、 0. 15mol/L） ， 和去酯化酶黑 曲霉果胶酯酶 16mL（酶活单位为 0.01U/mL） ， 维持反应 pH 为 5.8， 反应温度 60， 反应时 间 60min。在反应过程中不断加入 0.01mol/L 氢氧化钠维持反应 pH。酶反应结束后， 用 0.01mol/L 盐酸调节 pH4 终止反应， 加热至 100灭酶。 0031 其中， 适用的去酯化酶的加酶量1020ml， 酶活单位0.01U/mL， 酶解pH为5.27.0， 酶解温度 4070， 反应时间 30120min。进一步优选地， 去酯化酶的加酶量 1216mL， 酶解 pH 为 5.46.2， 酶解温度 5060。在优。

24、选去酯化反应的条件下， 所制备的大豆多糖的蛋白 含量2.83.3%， 酯化度29%32%， 沉淀率0.71%。 在经过本发明实验研究摸索得到的优选条 件处理下， 产物改性大豆多糖的酯化度明显减低， 但是该酶对蛋白含量的影响不大， 最终沉 淀率主要受到酯化度影响。 0032 冷却至 30， 将 04的乙醇 1:1.5 添加到多糖溶液中混合均匀后， 5000rpm、 10min 两次离心分离得到沉淀。经真空冷冻干燥 （例如 ： -50冷凝， 10pa 条件下 -10一 次升华， 30二次升华） ， 得到改性大豆多糖。测定样品蛋白含量、 酯化度和酸乳中沉淀率。 0033 参照国标蛋白含量测定方法， 。

25、对市售普通大豆多糖和以上实施例 13 制备得到的 水溶性大豆多糖蛋的白含量进行测定。 0034 蛋白含量的检测过程为 ： 称取大豆多糖粉末 0.20g 2.00g 固体试样 , 移入干燥 的消化管中， 加入0.2g硫酸铜， 6g硫酸钾及20ml浓硫酸， 置于消化炉上小心加热， 待内容物 全部炭化， 泡沫完全消失后， 加大火力， 并保持管内液体内微沸， 至液体呈蓝绿色澄清透明 后， 再继续 0.5h 1h。取下放冷待蒸馏用。 0035 在消化管托盘上换上已消化冷却好的样品， 锥形瓶托盘上换上装硼酸 （浓度 2%， 1520mL） 的 250ml 锥形瓶， 调整托盘高度并使氨气回流玻璃嘴浸泡在硼酸。

26、液面以下。然后 先打开加碱按钮， 加到自己所需要的碱的用量后， 关闭加碱按钮。然后再打开蒸馏按钮。蒸 馏即将完成时， 将容量瓶下移， 使氨气回流玻璃嘴离开液面， 用蒸馏水冲洗玻璃嘴外壁， 继 续蒸馏半分钟后， 关闭蒸馏按钮， 取下锥形瓶待滴定用。蒸馏完成。 0036 用 0.05mol/LHCL 滴定接收瓶内的溶液， 滴定至 （暗） 灰色时为止， 记下消耗 HCL 的 毫升数， 按下列公式计算蛋白含量 ： 说 明 书 CN 102776257 B 6 5/6 页 7 0037 X=(V1-V2)* N *0.014*F*100/m 0038 X样品中蛋白质的含量， % ； 0039 V1样品消。

27、耗硫酸或盐酸标准液的体积， ml ； 0040 V2试剂空白消耗硫酸或盐酸标准液的体积， ml ； 0041 N硫酸或盐酸标准溶液的当量浓度 ； 0042 0.0141N 硫酸或盐酸标准溶液 1ml 相当于氮克数 ； 0043 m样品的质量 ( 体积 )， g(ml) ； 0044 F蛋白质系数， 按 16% 计算乘以 6.25 即为蛋白质。 0045 将市售普通大豆多糖和以上实施例 13 中的水溶性大豆多糖酯化度测定参照果 胶酯化度国家标准测定。 0046 酯化度的检测过程为 ： 精确称取 5.00g 样品， 用少量盐酸与异丙醇混合试剂浸湿 后， 搅拌 10 分钟， 用混合试剂将样品移至砂芯。

28、漏斗中， 用 6 份混合试剂冲洗， 再用 60% 异丙 醇洗至滤液不含氯离子为止， 移至 105烘箱中干燥 1 小时， 冷却后称量。 0047 称取 1/10 冷却后的干燥样品， 移入 250mL 锥形瓶中， 用 2mL 酒精浸湿， 加入 100mL 经煮沸后冷却并除去二氧化碳的水， 不断搅动使样品完全溶解。加入 5 滴 1% 的酚酞指示 剂， 用 0.1mol/L 氢氧化钠滴定， 记录消耗氢氧化钠溶液的毫升数 (V1), 即为样品的原始滴 定度。向样液中继续加入 20mL0.5mol/L 氢氧化钠溶液， 经强烈震动后， 静置 15 分钟， 加入 20mL0.5mol/L 盐酸溶液， 不断的摇。

29、动使溶液中粉红色消失， 然后再加入 3 滴酚酞指示剂， 继 续用0.1mol/L氢氧化钠溶液滴定至样液显微红色。 记录所消耗氢氧化钠的毫升数 （V2)， 即 为样品的皂化滴定度。按下列公式计算酯化度 ： 0048 酯化度 （%） = V2/(V1+V2)*100%。 0049 将市售普通大豆多糖和以上实施例 13 中得到的水溶性大豆多糖按照以下配方 制备乳酸清凉饮料。配方如下 ： 0050 糖酸液配制 ： 准确称取 16g 精制白砂糖和 0.35g 柠檬酸充分溶解到 13g 70的蒸 馏水中， 使其完全溶解， 然后在磁力搅拌器上 2400rpm 搅拌 10min。冷却至室温待用。 0051 乳。

30、液配制 ： 准确称取 2.5g 脱脂乳粉和 0.5g 的普通大豆多糖和以上实施例 13 中水溶性大豆多糖溶解至 15g60的蒸馏水中， 完全溶解后在在磁力搅拌器上 2400rpm 搅 10min， 然后在 20Mpa 的压力下均质， 冷却至室温待用。 0052 在磁力搅拌器上一边搅拌糖酸液同时缓慢加入乳液， 然后将 153g 蒸馏水缓慢加 入混合液中， 2400rpm 计时 10min。然后将混合液在 20mpa 压力下均质。90、 15min 灭菌后 制备得到乳酸清凉饮料。 0053 沉淀率即根据其值的大小判定稳定性的优劣， 沉淀率越高， 稳定性越差 ； 测定方法 即吸取灭菌后的乳酸清凉饮料。

31、 10ml 于离心管中， 3000rmp 15min 离心弃去上清液乳酸清凉 饮料。 0054 按照以下公式计算沉淀率 ： 沉淀率 % = 沉淀物质 （g） /10 mL 饮料重量 （g） 100%。 0055 实例 13 所制得的大豆多糖和市面上普通商用大豆多糖的蛋白含量、 酯化度及沉 淀率测定结果， 如下表 1 所示 ： 0056 表 1 说 明 书 CN 102776257 B 7 6/6 页 8 0057 普通多糖实施例 1 实施例 2 实施例 3 蛋白含量 % 2.8%4.26%3.1%4.43% 酯化度 %65%70%31%25% 沉淀率 %1.45%2.01%0.89%0.24%。

32、 0058 从以上表 1 所示实验结果可以看出， 以上实施例所得到的经酶连续改性处理的样 品的结合蛋白含量、 酯化度和沉淀率明显优于市售普通大豆多糖样品， 具体的， 本发明制备 的改性大豆多糖其蛋白含量提高、 酯化度降低、 沉淀率降低。 在实施例中经谷氨酰胺转胺酶 处理过的大豆多糖中的结合蛋白含量均高于未经处理的。 0059 实施例 1 中， 由于谷氨酰胺转胺酶可以缓慢促进多糖酯化， 所以经添加了谷氨酰 胺转胺酶却未添加果胶酯酶制备得到的大豆多糖的酯化度有稍微的增高， 沉淀率较大。 0060 实施例 2 中， 经果胶酯酶处理的酯化度明显低于未如此处理的大豆多糖， 而且沉 淀率也降低。 0061 实施例 3 中谷氨酰胺转胺酶及果胶酯酶的连续处理的样品具有显著提高的蛋白 含量、 降低的酯化度以及显著降低的沉淀率， 由此可见本发明中经酶连续改性的明显优于 未经改性处理的和由谷氨酰胺转胺酶或者果胶酯酶分别单独处理制备的大豆多糖， 因此采 用本发明方法进行酶连续改性处理得到的改性大豆多糖的品质更优。 0062 本发明的保护内容不局限于以上实施例。在不背离发明构思的精神和范围下， 本 领域技术人员能够想到的变化和优点都被包括在本发明中， 并且以所附的权利要求书为保 护范围。 说 明 书 CN 102776257 B 8 。