《自体皮肤成纤维细胞体外培养试剂盒.pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《自体皮肤成纤维细胞体外培养试剂盒.pdf（7页完整版）》请在专利查询网上搜索。
1、(10)授权公告号 (45)授权公告日 (21)申请号 201620077086.2 (22)申请日 2016.01.26 C12M 3/00(2006.01) (73)专利权人 李建业 地址 518172 广东省深圳市龙岗区龙城街道 五联社区规划路 15 号 501 (72)发明人 李建业 (74)专利代理机构 深圳市威世博知识产权代理 事务所 ( 普通合伙 ) 44280 代理人 何青瓦 (54) 实用新型名称 自体皮肤成纤维细胞体外培养试剂盒 (57) 摘要 本实用新型公开了一种自体皮肤成纤维细胞 体外培养试剂盒， 该试剂盒包括 ： 盒体， 设置有一 开口 ； 盒盖， 可开启地设置在所述。
2、盒体的所述开 口上， 以密封所述盒体 ； 体外培养存储元件， 设置 在所述盒体内部， 均是无菌且密封的， 用于实现用 户自体的皮肤成纤维细胞的体外培养， 以获得激 活的皮肤成纤维细胞， 其包括 ： 细胞培养基存储 元件、 细胞培养因子冻干粉存储元件、 细胞存储元 件以及细胞培养系统元件。 通过这种方式， 能够提 高细胞培养效率。 (51)Int.Cl. (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)实用新型专利 权利要求书1页 说明书4页 附图1页 CN 205329070 U 2016.06.22 CN 205329070 U 1.一种自体皮肤成纤维细胞体外培养试剂盒， 其特征在于， 所述试。
3、剂盒包括： 盒体， 设置有一开口； 盒盖， 可开启地设置在所述盒体的所述开口上， 以密封所述盒体； 体外培养存储元件， 设置在所述盒体内部， 均是无菌且密封的， 用于实现用户自体的皮 肤成纤维细胞的体外培养， 以获得激活的皮肤成纤维细胞， 其包括： 细胞培养基存储元件、 细胞培养因子冻干粉存储元件、 细胞存储元件以及细胞培养系统元件。 2.根据权利要求1所述的试剂盒， 其特征在于， 所述试剂盒还包括： 固定泡沫， 设置在所述盒体内部， 用于固定所述体外培养存储元件。 3.根据权利要求2所述的试剂盒， 其特征在于， 所述固定泡沫上设置有多个用于放置所 述体外培养存储元件的孔或凹槽。 4.根据权利。
4、要求3所述的试剂盒， 其特征在于， 所述孔或凹槽包括第一孔或凹槽、 第二 孔或凹槽、 第三孔或凹槽以及第四孔或凹槽， 其中， 所述第一孔或凹槽用于放置所述细胞培 养基存储元件， 所述第二孔或凹槽用于放置细胞培养因子冻干粉存储元件， 所述第三孔或 凹槽用于放置细胞存储元件， 所述第四孔或凹槽用于放置细胞培养系统元件。 5.根据权利要求1所述的试剂盒， 其特征在于， 所述细胞培养基存储元件用于存储皮肤 成纤维细胞培养基； 所述细胞培养因子冻干粉存储元件用于存储细胞培养因子； 所述细胞 存储元件用于分别存储皮肤成纤维细胞和间充质干细胞； 所述细胞培养系统元件包括细胞 培养板、 与所述细胞培养板对应的。
5、细胞共培养小室以及细胞培养皿。 6.根据权利要求5所述的试剂盒， 其特征在于， 所述细胞培养基存储元件的数量为1-2 个， 容量为30-150mL； 所述细胞培养因子冻干粉存储元件的数量为2-4个， 容量为3-10mL； 所 述细胞存储元件的数量为2-6个， 容量为2-5mL； 所述细胞培养板的数量为1个， 所述细胞培 养小室的数量为3-6个， 所述细胞培养皿的数量为1个。 7.根据权利要求6所述的试剂盒， 其特征在于， 所述细胞培养基存储元件的数量为1个， 容量为100mL； 所述细胞培养因子冻干粉存储元件的数量为2个， 容量为3mL； 所述细胞存储 元件的数量为4个， 容量为2mL， 其中。
6、， 两个所述细胞存储元件存储所述皮肤成纤维细胞， 另 外两个所述细胞存储元件存储所述间充质干细胞； 所述细胞培养小室的数量为6个。 8.根据权利要求6所述的试剂盒， 其特征在于， 所述细胞培养因子冻干粉存储元件用于 分别存储细胞因子冻干粉和富血小板血浆因子冻干粉。 9.根据权利要求1所述的试剂盒， 其特征在于， 所述细胞培养基存储元件、 细胞培养因 子冻干粉存储元件以及细胞存储元件均为试剂瓶。 权利要求书 1/1 页 2 CN 205329070 U 2 自体皮肤成纤维细胞体外培养试剂盒 技术领域 0001 本实用新型涉及试剂盒技术领域， 特别是涉及一种自体皮肤成纤维细胞体外培养 试剂盒。 背。
7、景技术 0002 细胞因子在面部皮肤保养方面的功能已为人们所熟悉， 目前已有多种相关产品上 市， 比如含有成纤维细胞生长因子(FibroblastGrowthFactor， 简写FGF)、 表皮细胞生长 因子(EpidermalGrowthFactor， 简写EGF)等类型的单类型重组细胞因子冻干粉。 这种类 型的产品将冻干粉和溶媒配合使用， 多用于创面修复领域。 0003 研究发现， 脐带和脂肪来源的间充质干细胞培养液可促进皮肤成纤维细胞的增 殖， 提升胶原蛋白合成量。 因此， 也有采集间充质干细胞培养上清或将间充质干细胞培养液 和裂解液制作成冻干粉的技术， 或者将培养上清制作成脂质体， 添。
8、加到护肤品中的技术， 以 作为皮肤美容用途。 同时， 富血小板血浆(Platelet-richPlasma， 简写PRP)在美容方面也 被广泛应用； 也有多种采用手动离心或者仪器自动离心的方法进行PRP富集制作， 并将PRP 制作成冻干粉的技术。 0004 但是， 上述采用来源于脐带间充质干细胞的因子、 富血小板血浆或直接采用重组 的细胞因子进行皮肤保养， 其细胞因子配比， 很难真正反映人体的皮肤需求， 且没有现成的 用于自体皮肤成纤维细胞体外培养的试剂盒。 实用新型内容 0005 本实用新型主要解决的技术问题是提供一种自体皮肤成纤维细胞体外培养试剂 盒， 能够为自体皮肤成纤维细胞体外培养提供。
9、便利， 且提高细胞培养效率。 0006 为解决上述技术问题， 本实用新型采用的一个技术方案是： 提供一种自体皮肤成 纤维细胞体外培养试剂盒， 所述试剂盒包括： 盒体， 设置有一开口； 盒盖， 可开启地设置在所 述盒体的所述开口上， 以密封所述盒体； 体外培养存储元件， 设置在所述盒体内部， 均是无 菌且密封的， 用于实现用户自体的皮肤成纤维细胞的体外培养， 以获得激活的皮肤成纤维 细胞， 其包括： 细胞培养基存储元件、 细胞培养因子冻干粉存储元件、 细胞存储元件以及细 胞培养系统元件。 0007 其中， 所述试剂盒还包括： 固定泡沫， 设置在所述盒体内部， 用于固定所述体外培 养存储元件。 0。
10、008 其中， 所述固定泡沫上设置有多个用于放置所述体外培养存储元件的孔或凹槽。 0009 其中， 所述孔或凹槽包括第一孔或凹槽、 第二孔或凹槽、 第三孔或凹槽以及第四孔 或凹槽， 其中， 所述第一孔或凹槽用于放置所述细胞培养基存储元件， 所述第二孔或凹槽用 于放置细胞培养因子冻干粉存储元件， 所述第三孔或凹槽用于放置细胞存储元件， 所述第 四孔或凹槽用于放置细胞培养系统元件。 0010 其中， 所述细胞培养基存储元件用于存储皮肤成纤维细胞培养基； 所述细胞培养 说明书 1/4 页 3 CN 205329070 U 3 因子冻干粉存储元件用于存储细胞培养因子； 所述细胞存储元件用于分别存储皮肤。
11、成纤维 细胞和间充质干细胞； 所述细胞培养系统元件包括细胞培养板、 与所述细胞培养板对应的 细胞共培养小室以及细胞培养皿。 0011 其中， 所述细胞培养基存储元件的数量为1-2个， 容量为30-150mL； 所述细胞培养 因子冻干粉存储元件的数量为2-4个， 容量为3-10mL； 所述细胞存储元件的数量为2-6个， 容 量为2-5mL； 所述细胞培养板的数量为1个， 所述细胞培养小室的数量为3-6个， 所述细胞培 养皿的数量为1个。 0012 其中， 所述细胞培养基存储元件的数量为1个， 容量为100mL； 所述细胞培养因子冻 干粉存储元件的数量为2个， 容量为3mL； 所述细胞存储元件的数。
12、量为4个， 容量为2mL， 其中， 两个所述细胞存储元件存储所述皮肤成纤维细胞， 另外两个所述细胞存储元件存储所述间 充质干细胞； 所述细胞培养小室的数量为6个。 0013 其中， 所述细胞培养因子冻干粉存储元件用于分别存储细胞因子冻干粉和富血小 板血浆因子冻干粉。 0014 其中， 所述细胞培养基存储元件、 细胞培养因子冻干粉存储元件以及细胞存储元 件均为试剂瓶。 0015 本实用新型的有益效果是： 区别于现有技术的情况， 本实用新型试剂盒包括： 盒 体， 设置有一开口； 盒盖， 可开启地设置在所述盒体的所述开口上， 以密封所述盒体； 体外培 养存储元件， 设置在所述盒体内部， 均是无菌且密。
13、封的， 用于实现用户自体的皮肤成纤维细 胞的体外培养， 以获得激活的皮肤成纤维细胞， 其包括： 细胞培养基存储元件、 细胞培养因 子冻干粉存储元件、 细胞存储元件以及细胞培养系统元件。 由于试剂盒中的体外培养存储 元件有助于便利实现用户自体的皮肤成纤维细胞的体外培养， 通过这种方式， 能够提高细 胞培养效率。 附图说明 0016 图1是本实用新型自体皮肤成纤维细胞体外培养试剂盒一实施方式的结构示意 图； 0017 图2是本实用新型自体皮肤成纤维细胞体外培养试剂盒另一实施方式的结构示意 图。 具体实施方式 0018 下面结合附图和实施方式对本实用新型进行详细说明。 0019 参阅图1和图2， 图。
14、1是本实用新型自体皮肤成纤维细胞体外培养试剂盒一实施方 式的结构示意图。 0020 该试剂盒1包括： 盒体10、 盒盖20以及体外培养存储元件30。 0021 盒体10设置有一开口； 盒盖20可开启地设置在盒体10的开口上， 以密封盒体10； 体 外培养存储元件30设置在盒体10内部， 均是无菌且密封的， 用于实现用户自体的皮肤成纤 维细胞的体外培养， 以获得激活的皮肤成纤维细胞， 其包括： 细胞培养基存储元件301、 细胞 培养因子冻干粉存储元件302、 细胞存储元件303以及细胞培养系统元件304。 0022 其中， 试剂盒1还包括： 固定泡沫40， 固定泡沫40设置在盒体10内部， 用于。
15、固定体外 说明书 2/4 页 4 CN 205329070 U 4 培养存储元件30。 由于泡沫很轻， 因此， 用泡沫固定体外培养存储元件30， 能够减轻试剂盒 的重量， 并且对盒体10承重的要求也降低。 0023 进一步地， 固定泡沫40上设置有多个用于放置体外培养存储元件的孔或凹槽(图 未示)。 其中， 孔或凹槽包括第一孔或凹槽、 第二孔或凹槽、 第三孔或凹槽以及第四孔或凹 槽， 其中， 第一孔或凹槽用于放置细胞培养基存储元件301， 第二孔或凹槽用于放置细胞培 养因子冻干粉存储元件302， 第三孔或凹槽用于放置细胞存储元件303， 第四孔或凹槽用于 放置细胞培养系统元件304。 0024。
16、 其中， 细胞培养基存储元件301用于存储皮肤成纤维细胞培养基； 细胞培养因子冻 干粉存储元件302用于存储细胞培养因子； 细胞存储元件303用于分别存储皮肤成纤维细胞 和间充质干细胞； 细胞培养系统元件304包括细胞培养板3041、 与细胞培养板3041对应的细 胞共培养小室3042以及细胞培养皿3043。 0025 其中， 细胞培养基存储元件301、 细胞培养因子冻干粉存储元件302以及细胞存储 元件303均为试剂瓶。 0026 细胞培养基存储元件301用于存放皮肤成纤维细胞培养基。 细胞培养基存储元件 301可以是试剂瓶， 该试剂瓶可以为平底瓶， 密封无菌。 细胞培养基存储元件301的容。
17、量为30 150mL， 数量为12个。 在一实施方式中， 细胞培养基存储元件301的数量为1个， 容量为 100mL。 皮肤成纤维细胞培养基是一种已知的材料， 可以从市售的渠道获得， 比如可以购自 Gibco。 0027 细胞培养因子冻干粉存储元件302可以包括细胞因子冻干粉存储元件、 富血小板 血浆因子冻干粉存储元件。 可以是试剂瓶， 且密封无菌。 容量为310mL， 数量为24个。 在 一实施方式中， 数量为2个， 容量为3mL。 在操作时， 用细胞培养基溶解细胞培养因子冻干粉， 得到细胞培养因子溶液， 并将细胞培养因子溶液添加到细胞培养基中， 形成高效的皮肤成 纤维细胞完全培养基。 00。
18、28 细胞存储元件303包括皮肤成纤维细胞存储元件和间充质干细胞存储元件， 皮肤 成纤维细胞存储元件用于存储冻存的自体皮肤成纤维细胞， 间充质干细胞存储元件用于存 储冻存的、 用于与自体皮肤成纤维细胞共培养的间充质干细胞。 其中， 自体皮肤成纤维细胞 经由专业医护人员取样、 组织分离培养获得。 间充质干细胞可从市售的渠道获得。 细胞存储 元件303均是密封无菌的， 容量为25mL， 数量为26个， 在一实施方式中， 数量为4个， 容量 为2mL。 细胞存储元件303可以是试剂瓶。 0029 细胞培养系统元件304包括细胞培养板3041、 和细胞培养板3041对应的细胞培养 小室3042以及细胞。
19、培养皿3043。 0030 细胞培养板3041用于培养自体皮肤成纤维细胞， 细胞培养小室3042用于培养间充 质干细胞， 两种细胞的共培养可有效促进皮肤成纤维细胞培养效率， 提升皮肤成纤维细胞 的增殖功能。 0031 细胞培养皿3043用于在非共培养的条件下利用试剂盒内的细胞培养因子冻干粉， 进行皮肤成纤维细胞的培养， 多种因子的协同作用可有效促进皮肤成纤维细胞培养效率， 提升皮肤成纤维细胞的增殖功能。 0032 细胞培养板3041为密封无菌。 细胞培养小室3042单个独立包装， 密封无菌。 细胞培 养小室3042的大小与细胞培养板3041的孔相对应。 细胞培养皿3043为密封无菌。 说明书 。
20、3/4 页 5 CN 205329070 U 5 0033 细胞培养板3041数量为1个， 细胞培养小室3042数量为36个， 在一实施方式中， 数量为6个， 细胞培养皿3043数量为1个。 0034 在一实施方式中， 细胞培养基存储元件301中存储80mL皮肤成纤维细胞培养基(标 记为 “试剂1” )； 细胞培养因子冻干粉存储元件302存储细胞培养因子冻干粉0.2gx2支(标 记为 “试剂2” ， 溶解于3mL细胞培养基中， 按1:10的比例加入皮肤成纤维细胞培养系统中)； 细胞存储单元303存储自体皮肤成纤维细胞(标记为 “试剂3” )， 规格是1mLx2支； 以及间充 质干细胞， 规格是。
21、1mLx2支。 0035 下面介绍上述试剂盒的使用方法： 0036 方法一： 0037 1、 复苏试剂3中的1支自体皮肤成纤维细胞， 用试剂1调整细胞悬液浓度为1x105/ mL， 用移液枪吸取1mL细胞悬液至细胞培养板3041的六孔板中； 0038 2、 复苏试剂3中的1支间充质干细胞， 用试剂1调整细胞悬液浓度为2x105/mL， 用移 液枪吸取500uL细胞悬液至细胞培养小室3042的transwell中， 并将transwell放入对应的 细胞培养板3041的六孔板内； 0039 3、 持续培养4872小时， 取出transwell， 收集细胞培养板3041的六孔板内的皮肤 成纤维细胞。
22、进行功能鉴定， 并用作后续相应用途。 0040 方法二： 0041 1、 复苏试剂3中的1支自体皮肤成纤维细胞， 用试剂1调整细胞悬液浓度为1x105/ mL， 用移液枪吸取10mL细胞悬液至细胞培养皿3043中； 0042 2、 将3mL试剂1加入一瓶试剂2中， 混合均匀， 取1mL加入正在培养皮肤成纤维细胞 的细胞培养皿3043中； 0043 3、 持续培养4872小时， 收集细胞培养皿3043中的皮肤成纤维细胞进行功能鉴 定， 并用作后续相应用途。 0044 本实用新型自体皮肤成纤维细胞体外培养试剂盒为一种改良型的皮肤成纤维细 胞体外培养试剂盒， 该该试剂盒采用的技术， 主要是采用了一种。
23、间充质干细胞/皮肤成纤维 细胞共培养系统， 或相应的多种细胞因子冻干粉培养试剂。 应用本试剂盒， 可有效增强皮肤 成纤维细胞培养效率和效果， 具体表现为增殖能力变强、 迁移速度增高、 胶原蛋白分泌能力 变强、 抗紫外损伤能力增强、 SOD酶活性增加、 与细胞功能活性相关基因表达量增高， 镜下染 色发现衰老细胞比例减少。 1)本试剂盒提供细胞培养小室， 可方便用户进行间充质细胞与 皮肤成纤维细胞的共培养， 提升细胞培养效率和效果； 2)本试剂盒通过细胞培养因子冻干 粉存储元件存储细胞培养因子冻干粉， 可有效规避现有培养系统中因子单一化以及难于存 储的缺点。 0045 以上所述仅为本实用新型的实施方式， 并非因此限制本实用新型的专利范围， 凡 是利用本实用新型说明书及附图内容所作的等效结构或等效流程变换， 或直接或间接运用 在其他相关的技术领域， 均同理包括在本实用新型的专利保护范围内。 说明书 4/4 页 6 CN 205329070 U 6 图1 图2 说明书附图 1/1 页 7 CN 205329070 U 7 。