植物转基因鉴别装置及方法.pdf

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1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201711099077.9 (22)申请日 2017.11.09 (71)申请人 江苏嘉特朗达环保科技有限公司 地址 226000 江苏省南通市崇川区工农南 路100号 (72)发明人 樊璠 (51)Int.Cl. C12M 1/34(2006.01) C12M 1/00(2006.01) C12Q 1/6816(2018.01) (54)发明名称 植物转基因鉴别装置及方法 (57)摘要 本发明公开植物转基因鉴别装置及方法， 包 括发泡载板， 所述发泡载板上表面和下表面均设 置。

2、有指槽， 所述发泡载板上表面设置有嵌入槽， 所述嵌入槽内设置有正电荷薄膜， 所述嵌入槽的 槽壁上镶嵌有连接链母链， 所述正电荷薄膜的边 沿上均设置有翻边形成槽状， 所述翻边上均设置 有与连接链母链相配对的连接链子链， 所述正电 荷薄膜上设置有储物槽， 所述储物槽呈矩形阵列 分布， 所述储物槽内设置有外源基因探针， 所述 发泡载板上设置有用于盖住嵌入槽的护罩， 所述 护罩为透明设置， 所述护罩上设置有插入部； 该 鉴别植物转基因和非转基因的装置可以对多种 转基因的外源性基因作出快速、 准确和定性的判 断分析， 可以有效的满足市场的需求。 权利要求书1页 说明书5页 附图2页 CN 1079041。

3、57 A 2018.04.13 CN 107904157 A 1.植物转基因鉴别装置， 其特征在于： 包括发泡载板， 所述发泡载板上表面和下表面均 设置有指槽， 所述发泡载板上表面设置有嵌入槽， 所述嵌入槽内设置有正电荷薄膜， 所述嵌 入槽的槽壁上镶嵌有连接链母链， 所述正电荷薄膜的边沿上均设置有翻边形成槽状， 所述 翻边上均设置有与连接链母链相配对的连接链子链， 所述正电荷薄膜上设置有储物槽， 所 述储物槽呈矩形阵列分布， 所述储物槽内设置有外源基因探针， 所述发泡载板上设置有用 于盖住嵌入槽的护罩， 所述护罩为透明设置， 所述护罩上设置有插入部， 所述发泡载板上设 置有与插入部相契合的插入。

4、孔， 所述插入孔为通孔， 所述插入部插入插入孔内， 所述发泡载 板和护罩通过插入部和插入孔可拆卸连接， 所述发泡载板由按重量份数配比的绿碳化硅 15-17份、 碳纤维丝44-48份、 玻璃纤维丝57-75份、 空心玻璃微珠5-11份、 铜纤维15-20份、 萜 烯树脂18-28份、 松香90-133份、 柯巴树脂44-53份、 硬脂酸钠1-4份、 酒石酸1-3份、 气相白炭 黑13-15份、 阿拉伯胶19-23份和碳酸氢钠6-9份组成,所述连接链母链和连接链子链分别为 PE双牙密封链母链和PE双牙密封链子链,所述外源基因探针为35S启动子或FMV35S启动子 或Nos终止子或NPTII基因或C。

5、ryI(AC)基因或Cry9c基因或改造的CP4-EPSPS基因或35s- CTP2或CP4-EPSPS基因或GOX基因或Bar基因或Barnase基因或Barstar基因或CryIA(a)基因 中的一种或多种。 2.根据权利要求1所述的植物转基因鉴别装置， 其特征在于： 所述插入孔的孔壁上设置 有橡胶垫， 所述橡胶垫与插入孔的孔壁粘合， 所述橡胶垫设置有一个以上， 所述橡胶垫呈环 形阵列分布。 3.植物转基因鉴方法， 其特征在于， 包括以下步骤： 1)将35S启动子、 FMV35S启动子、 Nos终止子、 NPTII基因、 CryI(AC)基因、 Cry9c基因、 改 造的CP4-EPSPS。

6、基因、 35s-CTP2、 CP4-EPSPS基因、 GOX基因、 Bar基因、 Barnase基因、 Barstar 基因、 CryIA(a)基因进行点制处理， 点入储物槽内， 制得外源基因探针。 2)将5 g聚合酶链式反应扩增产物用于100的纯水煮5min进行变性后， 直接放入冰上 冷却3-5min， 制得预杂交液以备外源基因探针杂交用； 将外源基因探针用0.25M的磷酸缓冲 液进行润湿后， 往外源基因探针加入预杂交液在60进行预杂交10-12小时， 用洗膜液洗涤 2次， 每次20min； 然后进行染色5-10min； 用TE缓冲液漂洗5-10min， 重复2次； 在254nm紫外光 下或。

7、荧光显微镜下进行信号检测， 得出结果。 权利要求书 1/1 页 2 CN 107904157 A 2 植物转基因鉴别装置及方法 技术领域 0001 本发明涉及基因检验械技术领域， 具体来说， 涉及植物转基因鉴别装置及方法。 背景技术 0002 转基因技术的原理是将人工分离和修饰过的优质基因， 导入到生物体基因组中， 从而达到改造生物的目的。 这一技术称之为人工转基因技术， 人工转基因技术就是把一个 生物体的基因转移到另一个生物体DNA中的生物技术。 具有不确定性。 常用的方法和工具包 括显微注射、 基因枪、 电破法、 脂质体等。 转基因最初用于研究基因的功能， 即把外源基因导 入受体生物体基因。

8、组内， 观察生物体表现出的性状， 达到揭示基因功能的目的。 0003 目前市面上有大量的转基因植物， 但是相应的鉴别装置却少之又少， 本领域的技 术人员希望可以研发出鉴别植物转基因和非转基因的装置， 以满足市场上的需要。 发明内容 0004 本发明要解决的技术问题是提供一种的鉴别植物转基因和非转基因的装置。 0005 为解决上述问题， 本发明采用如下技术方案： 0006 植物转基因鉴别装置， 包括发泡载板， 所述发泡载板上表面和下表面均设置有指 槽， 所述发泡载板上表面设置有嵌入槽， 所述嵌入槽内设置有正电荷薄膜， 所述嵌入槽的槽 壁上镶嵌有连接链母链， 所述正电荷薄膜的边沿上均设置有翻边形成。

9、槽状， 所述翻边上均 设置有与连接链母链相配对的连接链子链， 所述正电荷薄膜上设置有储物槽， 所述储物槽 呈矩形阵列分布， 所述储物槽内设置有外源基因探针， 所述发泡载板上设置有用于盖住嵌 入槽的护罩， 所述护罩为透明设置， 所述护罩上设置有插入部， 所述发泡载板上设置有与插 入部相契合的插入孔， 所述插入孔为通孔， 所述插入部插入插入孔内， 所述发泡载板和护罩 通过插入部和插入孔可拆卸连接； 0007 所述发泡载板由按重量份数配比的绿碳化硅15-17份、 碳纤维丝44-48份、 玻璃纤 维丝57-75份、 空心玻璃微珠5-11份、 铜纤维15-20份、 萜烯树脂18-28份、 松香90-13。

10、3份、 柯 巴树脂44-53份、 硬脂酸钠1-4份、 酒石酸1-3份、 气相白炭黑13-15份、 阿拉伯胶19-23份和碳 酸氢钠6-9份组成。 0008 作为优选， 所述插入孔的孔壁上设置有橡胶垫， 所述橡胶垫与插入孔的孔壁粘合， 所述橡胶垫设置有一个以上， 所述橡胶垫呈环形阵列分布， 通过设置有橡胶垫， 可以有效的 防止插入部轻易的脱离插入孔。 0009 作为优选， 所述护罩与插入部为一体式设置， 护罩与插入部结构稳定， 连接可靠。 0010 作为优选， 所述所说正电荷薄膜为氨基硅烷膜。 0011 作为优选， 所述连接链母链和连接链子链均呈波浪状设置， 采用了波浪状的设计， 可以在有限的空。

11、间内极大的增加连接面积， 提升连接稳定性。 0012 作为优选， 所述翻边与连接链子链为一体式设置， 翻边与连接链子链整体性好， 结 构稳定。 说明书 1/5 页 3 CN 107904157 A 3 0013 作为优选， 所述连接链母链和连接链子链分别为PE双牙密封链母链和PE双牙密封 链子链， PE双牙密封链母链和PE双牙密封链子链具有良好的密封效果， 而且连接稳定。 0014 作为优选， 所述外源基因探针为35S启动子或FMV35S启动子或Nos终止子或NPTII 基因或CryI(AC)基因或Cry9c基因或改造的CP4-EPSPS基因或35s-CTP2或CP4-EPSPS基因或 GOX。

12、基因或Bar基因或Barnase基因或Barstar基因中的一种或多种。 0015 本发明要解决的另一技术问题是提供植物转基因鉴方法， 包括以下步骤： 0016 1)将35S启动子、 FMV35S启动子、 Nos终止子、 NPTII基因、 CryI(AC)基因、 Cry9c基 因、 改造的CP4-EPSPS基因、 35s-CTP2、 CP4-EPSPS基因、 GOX基因、 Bar基因、 Barnase基因、 Barstar基因、 CryIA(a)基因、 Lectin基因、 Napin基因、 Zein基因、 Sad1基因进行点制处理， 点入储物槽内， 制得外源基因探针。 0017 2)将5 g聚。

13、合酶链式反应扩增产物用于100的纯水煮5min进行变性后， 直接放入 冰上冷却3-5min， 制得预杂交液以备外源基因探针杂交用； 将外源基因探针用0.25M的磷酸 缓冲液进行润湿后， 往外源基因探针加入预杂交液在60进行预杂交10-12小时1用洗膜液 洗涤2次， 每次20min； 然后进行染色5-10min； 用TE缓冲液漂洗5-10min， 重复2次； 在254nm紫 外光下或荧光显微镜下进行信号检测， 得出结果。 0018 发泡载板的制备方法， 包括以下步骤： 0019 1)将碳纤维丝44-48份编织成网， 制得碳纤维网； 0020 2)将玻璃纤维丝57-75份编织成网， 制得玻璃纤维网。

14、； 0021 3)将萜烯树脂18-28份、 松香90-133份、 柯巴树脂44-53份和阿拉伯胶19-23份一起 倒入到粉碎机中进行粉碎处理， 制得混合粉末。 备用； 0022 4)将步骤3制得的混合粉末倒入到反应釜中进行加热处理， 加热温度为120-155 ， 使得混合粉末熔化成粘稠液体， 制得粘稠液体， 备用； 0023 5)将绿碳化硅15-17份、 空心玻璃微珠5-11份、 铜纤维15-20份、 硬脂酸钠1-4份、 酒 石酸1-3份、 气相白炭黑13-15份和碳酸氢钠6-9份一起倒入到粘稠液体中， 进行搅拌处理， 搅拌均匀， 制得粘稠的悬浊液； 0024 6)将步骤5)制得的悬浊液分成A。

15、、 B和C份； 0025 7)将步骤5)的A份悬浊液倒入到模具中， 然后自然冷却至70-90， 然后铺上步骤 1)制得的碳纤维网， 然后将步骤5)制得的B份悬浊液倒入到模具中， 自然冷却至70-90， 继 而铺上步骤2)制得的玻璃纤维网并将步骤5)的C份悬浊液倒入到模具中， 再以5-9mpa进行 加压处理， 使表面压平， 冷却并脱模， 抛光， 即得发泡载板。 0026 以下是发泡载板的原料的特点： 0027 绿碳化硅： 硬度大， 具有较好的导热性与半导体特性； 0028 碳纤维丝： 是一种含碳量在95以上的高强度、 高模量纤维的新型纤维材料； 0029 玻璃纤维丝： 通常用作复合材料中的增强材。

16、料； 0030 空心玻璃微珠： 具有抗压强度高、 熔点高、 电阻率高、 热导系数和热收缩系数小等 特点， 是性能优异的填充材料； 0031 铜纤维： 作为增强剂； 0032 萜烯树脂： 萜烯树脂是一些热塑性嵌段共聚物具有色浅、 低气味、 高硬度、 高附着 力、 抗氧化性和热稳定性好， 相容性和溶解性好等优点 说明书 2/5 页 4 CN 107904157 A 4 0033 松香： 非挥发性天然树脂； 0034 柯巴树脂： 是一种琥珀色的坚硬且透明的物质 0035 硬脂酸钠： 主要用作润滑剂、 抗粘剂、 助流剂 0036 酒石酸： 用作抗氧化增效剂， 可以与碳酸氢钠产生协同性作用生成并释放大量。

17、的 二氧化碳气体； 0037 气相白炭黑： 比表面积大， 表面吸附力强， 表面能大， 化学纯度高、 分散性能好、 热 阻、 电阻等方面具有特异的性能， 以其优越的稳定性、 补强性、 增稠性和触变性， 在众多学科 及领域内独具特性， 有着不可取代的作用。 0038 阿拉伯胶： 天然胶， 可以起到乳化作用， 而且遇到碳酸盐后成让水分子的表面张力 更易被突破， 以惊人的速度释放更多的二氧化碳， 与碳酸氢钠起到协同的作用， 有效的提升 发泡效果； 0039 碳酸氢钠： 作为发泡剂。 0040 本发明的有益效果为： 装置整体结构简单， 而且采用了发泡载板， 重量较轻， 可以 对多种转基因的外源性基因作出。

18、快速、 准确和定性的判断分析， 可以有效的满足市场的需 求， 此外， 插入孔的孔壁上设置有橡胶垫， 橡胶垫与插入孔的孔壁粘合， 橡胶垫设置有一个 以上， 橡胶垫呈环形阵列分布， 通过设置有橡胶垫， 可以有效的防止插入部轻易的脱离插入 孔。 护罩与插入部为一体式设置， 护罩与插入部结构稳定， 连接可靠。 正电荷薄膜为氨基硅 烷膜。 连接链母链和连接链子链均呈波浪状设置， 采用了波浪状的设计， 可以在有限的空间 内极大的增加连接面积， 提升连接稳定性。 翻边与连接链子链为一体式设置， 翻边与连接链 子链整体性好， 结构稳定。 连接链母链和连接链子链分别为PE双牙密封链母链和PE双牙密 封链子链， 。

19、PE双牙密封链母链和PE双牙密封链子链具有良好的密封效果， 而且连接稳定。 附图说明 0041 为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案， 下面将对实施例中所 需要使用的附图作简单地介绍， 显而易见地， 下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施 例， 对于本领域普通技术人员来讲， 在不付出创造性劳动的前提下， 还可以根据这些附图获 得其他的附图。 0042 图1为本发明植物转基因鉴别装置的局部剖面图； 0043 图2为本发明植物转基因鉴别发泡载板的俯视图。 0044 图中： 0045 1、 发泡载板； 2、 指槽； 3、 嵌入槽； 4、 正电荷薄膜； 5、 连接链母链； 6、 翻边； 。

20、7、 连接链 子链； 8、 储物槽； 9、 外源基因探针； 10、 护罩； 11、 插入部； 12、 插入孔。 具体实施方式 0046 下面将结合本发明实施例中的附图， 对本发明实施例中的技术方案进行清楚、 完 整地描述， 显然， 所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例， 而不是全部的实施例。 基于 本发明中的实施例， 本领域普通技术人员所获得的所有其他实施例， 都属于本发明保护的 范围。 0047 如图1-2所示， 植物转基因鉴别装置， 包括发泡载板1， 所述发泡载板1上表面和下 说明书 3/5 页 5 CN 107904157 A 5 表面均设置有指槽2， 所述发泡载板1上表面设置有嵌入槽。

21、3， 所述嵌入槽3内设置有正电荷 薄膜4， 所述嵌入槽3的槽壁上镶嵌有连接链母链5， 所述正电荷薄膜4的边沿上均设置有翻 边6形成槽状， 所述翻边6上均设置有与连接链母链5相配对的连接链子链7， 所述正电荷薄 膜4上设置有储物槽8， 所述储物槽8呈矩形阵列分布， 所述储物槽8内设置有外源基因探针 9， 所述发泡载板1上设置有用于盖住嵌入槽的护罩10， 所述护罩10为透明设置， 所述护罩10 上设置有插入部11， 所述发泡载板1上设置有与插入部11相契合的插入孔12， 所述插入孔12 为通孔， 所述插入部11插入插入孔12内， 所述发泡载板1和护罩10通过插入部11和插入孔12 可拆卸连接； 0。

22、048 在本实施例中， 所述插入孔12的孔壁上设置有橡胶垫(未图示)， 所述橡胶垫与插 入孔12的孔壁粘合， 每个插入孔12设置有4个橡胶垫， 所述橡胶垫呈环形阵列分布， 通过设 置有橡胶垫， 可以有效的防止插入部11轻易的脱离插入孔12。 0049 在本实施例中， 所述护罩10与插入部11为一体式设置， 护罩10与插入部11结构稳 定， 连接可靠。 0050 在本实施例中， 所述所说正电荷薄膜4为氨基硅烷膜。 0051 在本实施例中， 所述连接链母链5和连接链子链7均呈波浪状设置， 采用了波浪状 的设计， 可以在有限的空间内极大的增加连接面积， 提升连接稳定性。 0052 在本实施例中， 所。

23、述翻边6与连接链子链7为一体式设置， 翻边6与连接链子链7整 体性好， 结构稳定。 0053 在本实施例中， 所述连接链母链5和连接链子链7分别为PE双牙密封链母链和PE双 牙密封链子链， PE双牙密封链母链和PE双牙密封链子链具有良好的密封效果， 而且连接稳 定。 0054 在本实施例中， 所述外源基因探针9为35S启动子、 FMV35S启动子、 Nos终止子、 NPTII基因、 CryI(AC)基因、 Cry9c基因、 改造的CP4-EPSPS基因、 35s-CTP2、 CP4-EPSPS基因、 GOX基因、 Bar基因、 Barnase基因、 Barstar基因、 CryIA(a)基因、。

24、 Lectin基因、 Napin基因、 Zein基因、 Sad1基因和Lat52基因。 0055 本实施例要解决的另一技术问题是提供植物转基因鉴方法， 包括以下步骤： 0056 1)将35S启动子、 FMV35S启动子、 Nos终止子、 NPTII基因、 CryI(AC)基因、 Cry9c基 因、 改造的CP4-EPSPS基因、 35s-CTP2、 CP4-EPSPS基因、 GOX基因、 Bar基因、 Barnase基因、 Barstar基因进行点制处理， 点入储物槽内， 制得外源基因探针。 0057 2)将5 g聚合酶链式反应扩增产物用于100的纯水煮5min进行变性后， 直接放入 冰上冷却。

25、5min， 制得预杂交液以备外源基因探针杂交用； 将外源基因探针用0.25M的磷酸缓 冲液进行润湿后， 往外源基因探针加入预杂交液在60进行预杂交12小时； 用洗膜液洗涤2 次， 每次20min； 然后进行染色10min； 用TE缓冲液漂洗5min， 重复2次； 在254nm紫外光下或荧 光显微镜下进行信号检测， 得出结果。 0058 所述发泡载板由按重量份数配比的绿碳化硅17份、 碳纤维丝48份、 玻璃纤维丝75 份、 空心玻璃微珠11份、 铜纤维20份、 萜烯树脂28份、 松香133份、 柯巴树脂53份、 硬脂酸钠4 份、 酒石酸3份、 气相白炭黑15份、 阿拉伯胶23份和碳酸氢钠9份组成。

26、， 发泡载板的制备方法， 包括以下步骤： 0059 1)将碳纤维丝48份编织成网， 制得碳纤维网； 说明书 4/5 页 6 CN 107904157 A 6 0060 2)将玻璃纤维丝75份编织成网， 制得玻璃纤维网； 0061 3)将萜烯树脂28份、 松香133份、 柯巴树脂53份和阿拉伯胶23份一起倒入到粉碎机 中进行粉碎处理， 制得混合粉末。 备用； 0062 4)将步骤3)制得的混合粉末倒入到反应釜中进行加热处理， 加热温度为155， 使 得混合粉末熔化成粘稠液体， 制得粘稠液体， 备用； 0063 5)将绿碳化硅17份、 空心玻璃微珠11份、 铜纤维20份、 硬脂酸钠4份、 酒石酸3。

27、份、 气 相白炭黑15份和碳酸氢钠9份一起倒入到粘稠液体中， 进行搅拌处理， 搅拌均匀， 制得粘稠 的悬浊液； 0064 6)将步骤5)制得的悬浊液分成A、 B和C份； 0065 7)将步骤5)的A份悬浊液倒入到模具中， 然后自然冷却至80， 然后铺上步骤1)制 得的碳纤维网， 然后将步骤5)制得的B份悬浊液倒入到模具中， 自然冷却至80， 继而铺上 步骤2)制得的玻璃纤维网并将步骤5)的C份悬浊液倒入到模具中， 再以5mpa进行加压处理， 使表面压平， 冷却并脱模， 抛光， 即得发泡载板。 0066 本实施例的有益效果为： 装置整体结构简单， 而且采用了发泡载板， 重量较轻， 可 以对多种转。

28、基因的外源性基因作出快速、 准确和定性的判断分析， 可以有效的满足市场的 需求， 此外， 插入孔的孔壁上设置有橡胶垫， 橡胶垫与插入孔的孔壁粘合， 橡胶垫设置有一 个以上， 橡胶垫呈环形阵列分布， 通过设置有橡胶垫， 可以有效的防止插入部轻易的脱离插 入孔。 护罩与插入部为一体式设置， 护罩与插入部结构稳定， 连接可靠。 正电荷薄膜为氨基 硅烷膜。 连接链母链和连接链子链均呈波浪状设置， 采用了波浪状的设计， 可以在有限的空 间内极大的增加连接面积， 提升连接稳定性。 翻边与连接链子链为一体式设置， 翻边与连接 链子链整体性好， 结构稳定。 连接链母链和连接链子链分别为PE双牙密封链母链和PE双牙 密封链子链， PE双牙密封链母链和PE双牙密封链子链具有良好的密封效果， 而且连接稳定。 0067 以上所述仅为本发明的较佳实施例而已， 并不用以限制本发明， 凡在本发明的精 神和原则之内， 所作的任何修改、 等同替换、 改进等， 均应包含在本发明的保护范围之内。 说明书 5/5 页 7 CN 107904157 A 7 图1 说明书附图 1/2 页 8 CN 107904157 A 8 图2 说明书附图 2/2 页 9 CN 107904157 A 9 。