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1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201611175238.3 (22)申请日 2016.12.19 (71)申请人 杨凌萃健生物工程技术有限公司 地址 712100 陕西省咸阳市杨凌示范区新 桥南路5号 (72)发明人 季亚飞周凯范冰舵 (74)专利代理机构 余姚德盛专利代理事务所 (普通合伙) 33239 代理人 吴晓微 (51)Int.Cl. C08B 37/00(2006.01) (54)发明名称 一种枸杞多糖提取物及其制备方法 (57)摘要 本发明公开了一种枸杞多糖提取物的制备 方法, 包括以下步骤: 。
2、(1)碱提: 取干燥枸杞, 加入 68倍干燥枸杞质量的pH为1012的碱水, 75 85浸提23次, 每次12小时, 合并得到提取 液, 调pH至中性, 将提取液浓缩成比重为1.08 1.10的浸膏; (2)醇沉1: 将步骤(1)所得浸膏加入 质量分数为9095乙醇进行醇沉, 上清浓缩回 收乙醇; (3)醇沉2: 将步骤(2)所得沉淀加水复 溶, 再加入质量分数为9095乙醇进行醇沉, 上清浓缩回收乙醇, 沉淀待挥去乙醇, 加水溶解, 冷冻干燥, 即得本发明所述枸杞多糖提取物。 本 发明利用碱水浸提断裂糖肽键的原理分离得到 枸杞多糖, 再通过两次醇沉获得高含量枸杞多 糖, 含量稳定、 疗效高,。
3、 制备工艺简单。 权利要求书1页 说明书3页 CN 106632715 A 2017.05.10 CN 106632715 A 1.一种枸杞多糖提取物的制备方法, 其特征在于, 所述方法包括以下步骤: 步骤(1)碱提: 取干燥枸杞, 加入68倍干燥枸杞质量的pH为1012的碱水, 7585 浸提23次, 每次12小时, 合并得到提取液, 调pH至中性, 将提取液浓缩成比重为1.08 1.10的浸膏; 步骤(2)醇沉1: 将步骤(1)所得浸膏加入质量分数为9095乙醇进行醇沉, 上清浓缩 回收乙醇; 步骤(3)醇沉2: 将步骤(2)所得沉淀加水复溶, 再加入质量分数为9095乙醇进行醇 沉, 上。
4、清浓缩回收乙醇, 沉淀待挥去乙醇, 加水溶解, 冷冻干燥, 即得所述枸杞多糖提取物。 2.如权利要求1所述的一种枸杞多糖提取物的制备方法, 其特征在于: 所述步骤(1)中, 所述碱水为NaOH水溶液。 3.如权利要求1所述的一种枸杞多糖提取物的制备方法, 其特征在于, 所述步骤(3)制 得的枸杞多糖提取物枸杞多糖含量大于等于30。 4.如权利要求1所述的一种枸杞多糖提取物的制备方法, 其特征在于, 步骤(1)中, 浸提 温度为75。 5.如权利要求1所述的一种枸杞多糖提取物的制备方法, 其特征在于, 步骤(2)中, 加入 的乙醇的质量分数为95。 6.一种枸杞多糖提取物, 其特征在于, 采用权。
5、利要求13任意一项所述方法制备得到。 权利要求书 1/1 页 2 CN 106632715 A 2 一种枸杞多糖提取物及其制备方法 技术领域 0001 本发明属于一种植物多糖的提取方法, 尤其涉及一种从中药材枸杞中提取多糖的 方法。 背景技术 0002 枸杞子(lycium chinense mill)为茄科植物, 是我国传统的药食兼用的名贵中药 材, 能滋补肝肾、 益精明目。 枸杞提取物主要活性成分为一种水溶性多糖, 即枸杞多糖(LBP, Lycium barbarum polysaccharides), 该多糖是一种蛋白多糖, 分子量为2225kD, 由阿拉 伯糖、 葡萄糖、 半乳糖、 甘。
6、露糖、 木糖、 鼠李糖6种单糖成分组成, 具有增强免疫力、 抗肿瘤、 防 衰老、 降血压、 降血糖和抗疲劳方面的药理作用, 具有广阔的开发前景。 枸杞多糖既可以作 为药物使用, 也可以作为食品加工。 0003 现有提取纯化枸杞多糖的方法有水提法, 酶解法, 微波法等, 水提法提取过程需要 多次浸提, 操作时间长, 提取率低, 并且费时费料。 酶解法提取成本较高, 不利于工业化大规 模生产。 微波技术在提取时间方面不宜过长, 功率不宜太高, 会降低反应的活化能, 使分子 之间形成新的作用力, 导致多糖分子溶出受阻。 枸杞多糖进一步纯化大多应用Sevage法除 蛋白, 柱层析等, 但其工艺繁琐, 。
7、有机溶剂用量多, 能耗大。 0004 目前使用的枸杞多糖有效成分含量低, 含色素、 蛋白质和小分子杂质等, 枸杞多糖 含量不稳定, 因此急需找到一种有效成分含量高, 工艺简单, 枸杞多糖含量稳定的枸杞多糖 提取物的制备方法。 发明内容 0005 本发明所要解决的问题是提供一种枸杞多糖提取物的制备方法, 该方法克服目前 制得的枸杞多糖含量低, 枸杞多糖纯化工艺长、 能耗高、 污染大的缺点, 制备得到的枸杞多 糖提取物有效成分含量高, 枸杞多糖含量稳定、 疗效高。 0006 本发明解决上述技术问题所采用的技术方案如下: 一种枸杞多糖提取物的制备方 法, 所述方法包括以下步骤: 0007 (1)碱提。
8、: 取干燥枸杞, 加入68倍干燥枸杞质量的pH为1012的碱水, 7585 浸提23次, 每次12小时, 合并得到提取液, 调pH至中性, 将提取液浓缩成比重为1.08 1.10的浸膏; 0008 (2)醇沉1: 将步骤(1)所得浸膏加入质量分数为9095乙醇进行醇沉, 上清浓缩 回收乙醇; 0009 (3)醇沉2: 将步骤(2)所得沉淀加水复溶, 再加入质量分数为9095乙醇进行醇 沉, 上清浓缩回收乙醇, 沉淀待挥去乙醇, 加水溶解, 冷冻干燥, 即得所述枸杞多糖提取物。 0010 上述技术方案中, 所述步骤(1)中, 所述碱水为氢氧化钠水溶液。 0011 上述技术方案中, 所述步骤(3)。
9、制得的枸杞多糖提取物枸杞多糖含量大于等于 30。 说明书 1/3 页 3 CN 106632715 A 3 0012 作为优选, 步骤(1)中, 浸提温度为75。 0013 作为优选, 步骤(2)中, 加入的乙醇的质量分数为95。 0014 与现有技术相比, 本发明的技术方案具有如下优点: 利用碱水浸提断裂糖肽键的 原理分离得到枸杞多糖, 再通过两次醇沉获得高含量枸杞多糖, 含量稳定、 疗效高, 制备工 艺简单。 具体实施方式 0015 下面结合实施例, 对本发明的具体实施方式作进一步详细描述。 以下实施例用于 说明本发明, 但不用来限制本发明的范围。 0016 实施例1 0017 一种枸杞多。
10、糖提取物的制备方法, 包括如下步骤: 0018 (1)碱提1: 取干燥枸杞200g, 加入1600g的pH为12的NaOH水溶液, 在75浸提2小 时, 过滤, 得第一滤液和枸杞残渣; 0019 (2)碱提2: 在步骤(1)所得枸杞残渣中加入1200g的pH为12的NaOH水溶液, 在75 浸提1小时, 过滤, 得第二滤液; 0020 (3)滤液浓缩: 将步骤(1)所得第一滤液与步骤(2)所得第二滤液合并, 得提取液, 调pH至中性, 浓缩成比重为1.08的浸膏; 0021 (4)醇沉1: 在步骤(3)所得浸膏中加入质量分数为95乙醇进行醇沉, 上清浓缩回 收乙醇。 0022 (5)醇沉2: 。
11、将步骤(4)所得沉淀加水复溶, 加质量分数为95乙醇再次醇沉, 上清 浓缩回收乙醇, 沉淀待挥去乙醇, 加水溶解, 冷冻干燥, 制得的提取物枸杞多糖含量为 31.1。 0023 本案例中枸杞多糖含量由下述公式计算得出: 枸杞多糖含量()(提取物中枸 杞多糖质量)/(枸杞多糖提取物质量)100。 0024 本案例中枸杞多糖含量按照苯酚-硫酸法测定得出, 具体如下: 0025 (1)标准曲线的绘制: 准确吸取D-葡萄糖标准使用液0、 0.10、 0.20、 0.40、 0.60、 0.80、 1.00ml, 置于25ml比色管中, 补水至2.0ml, 加入质量分数为5苯酚硫酸溶液1.0ml, 在漩。
12、涡混匀器上混匀, 小心加入浓硫酸10ml, 在漩涡混匀器上小心混匀, 置沸水浴中加热2 分钟, 取出, 冷却至室温, 用分光光度计在485nm波长处以试剂空白为参比, 1cm比色皿测定 吸光值。 以D-葡萄糖质量为横坐标, 吸光度值为纵坐标, 绘制标准曲线。 0026 (2)样品含量的测定: 0027 a.样品提取: 称取混合均匀的固体样品1.02.0g, 置于100ml容量瓶, 加水80ml左 右, 于沸水浴中加热1小时, 冷却至室温后补水加水至刻度, 混匀后过滤, 弃去初滤液, 收集 余下滤液供沉淀粗多糖。 0028 b.沉淀粗多糖: 准确吸取上述滤液5.0ml, 置于50ml离心管中, 。
13、加入无水乙醇20ml, 混匀, 于4冰箱静止4小时以上, 以4000r/min离心5min, 弃去上清液, 残渣用数毫升质量分 数为80乙醇溶液洗涤, 离心后弃去上清液, 反复操作3次。 残渣用水溶解并定容至10 25ml。 0029 c.样品测定: 准确吸取上液适量置于25ml比色管中, 补水加至2.0ml, 于485nm波长 说明书 2/3 页 4 CN 106632715 A 4 下测定吸光度值, 从标准曲线上求出枸杞多糖含量。 0030 实施例2 0031 一种枸杞多糖提取物的制备方法, 包括如下步骤: 0032 (1)碱提1: 取干燥枸杞200g, 加入1600g的pH为10的NaO。
14、H水溶液, 在75浸提2小 时, 过滤, 得第一滤液和枸杞残渣; 0033 (2)碱提2: 在步骤(1)所得枸杞残渣中加入1200g的pH为10的NaOH水溶液, 在75 浸提1小时, 过滤, 得第二滤液; 0034 (3)滤液浓缩: 将步骤(1)所得第一滤液与步骤(2)所得第二滤液合并, 得提取液, 调pH至中性, 浓缩成比重为1.20的浸膏; 0035 (4)醇沉1: 在步骤(3)所得浸膏中加入质量分数为95乙醇进行醇沉, 上清浓缩回 收乙醇。 0036 (5)醇沉2: 将步骤(4)所得沉淀加水复溶, 加质量分数为95乙醇再次醇沉, 上清 浓缩回收乙醇, 沉淀待挥去乙醇, 加水溶解, 冷冻干燥, 制得的提取物枸杞多糖含量为 30.2。 0037 提取物中枸杞多糖含量计算方法同上一案例。 0038 以上所述仅是本发明的优选实施方式, 应当指出, 对于本技术领域的普通技术人 员来说, 在不脱离本发明技术原理的前提下, 还可以做出若干改进和润饰, 这些改进和润饰 也应视为本发明的保护范围。 说明书 3/3 页 5 CN 106632715 A 5 。