技术领域
本发明属于医药领域，涉及一种丙烯酸类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用。特别地，本发明涉及通式(I)所示的丙烯酸类衍生物、其制备方法及含有该衍生物的药物组合物，以及其作为雌激素受体调节剂治疗雌激素受体介导的或依赖性的疾病或病症的用途，所述的疾病特别优选乳腺癌。
背景技术
经过长期的基础研究和临床监测，人们发现乳腺癌、卵巢癌、骨质疏松、精神分裂症和老年痴呆症等疾病与雌激素信号通路的异常有密切的联系。雌激素是一种由内分泌系统分泌的类固醇类激素，在生殖系统、骨组织、心血管、免疫系统和中枢神经系统中都发挥着重要的作用。雌激素信号传递系统在调节细胞生长、分化和凋亡过程中起着重要的作用。雌激素依赖性肿瘤如乳腺癌、卵巢癌、和子宫内膜癌等的发生与发展均与雌激素有着密切的关系。目前乳腺癌主要的化学疗法是用抗雌激素剂例如他莫昔芬(Tamoxifen)，但他莫昔芬在子宫中表现出雌激素激动剂的性质，对子宫的癌细胞有刺激作用。由于这些严重的副作用，寻求新的安全有效的治疗方法势在必行。
雌激素信号通路的一个重要蛋白是雌激素受体(ER)，ER是甾体激素受体，属于核受体超家族的由配体激活的转录因子，包含两种亚型：分别由不同基因编码的ERα(1950年发现)和ERβ(1996年发现)。ERα和ERβ在氨基酸水平上显现高度的相似性，其在DNA结合结构域的相似度高达97％，配体结合结构域的相似度达56％，然而，在N末端仅有24％的低同源性。ER包含6个结构域(A-F)，组成4个主要的功能区，N端A/B域的功能区具有非配体依赖的转录激活功能区AF-1，AF-1具有组成性激活活性，通过与基础转录因子、复活因子和其它转录因子的作用激活靶标基因的转录，该区域有多个磷酸化位点，有文献报导AF-1的作用依赖于蛋白的磷酸化。C域组成的DNA结合结构域(DBD)具有高度的保守性，包含2个锌指结构域，能特异性地结合到靶标DNA上，同时该结构域对受体的二聚化具有重要的作用。D域为铰链区，连接DBD和配体结构域(LBD)，保守性较低(两亚型间的同源性仅30％)。C端的E域组成配体结合结构域(LBD)，该结构域决定ER与雌激素、SERM(选择性雌激素受体调节剂)、SERD(选择性雌激素受体下调剂)等配体的特异性结合。LBD具有配体依赖的转录激活功能区AF-2，与AF-1协同作用发挥ER受体激活靶基因转录的功能。同时，LBD具有很强的二聚化界面，并在没有配体的情况下仍能发挥作用，因此，LBD是受体发生二聚化的关键部位。
ERα主要分布在子宫、卵巢、睾丸、垂体、肾、附睾和肾上腺中，而ERβ主要分布在前列腺、卵巢、肺、膀胱、脑和血管中。由于全激动剂或全拮抗剂都有较严重的副作用，SERM的研究应运而生。其“选择性”是指SERM在某些组织如骨、肝、心血管系统ERβ集中区中表现为激动剂，而在另外一些组织如乳腺中表现为拮抗剂。其在子宫(ERα较显著区)中可以是激动剂，也可以是拮抗剂。目前已上市的SERM包括他莫昔芬(Tamoxifen)、雷洛昔芬(Raloxifene)、苯卓昔芬(Bazedoxifene)、托瑞米芬(Toremifene)等，但研究发现目前已上市的SERM仍有严重的副作用，如他莫昔芬和托瑞米芬长期服用会引起子宫内膜增生、息肉和子宫内膜癌等，而雷洛昔芬常见的副作用包括潮热、腿痛、乳房触痛和静脉栓塞等。因此研究并开发新型的化合物仍是亟需解决的问题。
SERD与SERM一样可以与雌激素竞争结合雌激素受体，阻断ER受体激活下游基因启动子，同时，SERD还能促进组织中ER受体的快速定量降解，加剧ER受体信号通路的阻滞。与SERM相比，SERD还具有特定的基因表达谱，在乳腺癌中表现拮抗剂的作用。
公开的选择性雌激素受体介导的调节剂专利申请包括WO2014165723、WO2014151899、WO2014141292、WO2014135834和WO2014106848。
为了达到更好的治疗效果的目的，更好的满足市场需求，我们希望能开发出新一代的高效低毒的针对雌激素信号通路的SERD。本发明将提供一种新型结构的SERD，并发现具有此类结构的化合物具有良好的活性，并表现出优异的ER受体拮抗作用。
发明内容
本发明的目的在于提供一种通式(I)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，
其中：
环A选自环烷基、稠环烷基、桥环烷基和杂环基；
R1各自相同或不同，其各自独立地选自氢原子、烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、卤素、氨基、硝基、羟基、氰基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、-OR5、-C(O)R5、-C(O)OR5、-S(O)mR5和-NR6R7；其中所述的烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基任选进一步被选自烷基、卤代烷基、卤素、氨基、硝基、氰基、羟基、烷氧基、卤代烷氧基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
R2各自相同或不同，其各自独立地选自氢原子、烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、卤素、氨基、硝基、羟基、氰基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、-OR5、-C(O)R5、-C(O)OR5、-S(O)mR5和-NR6R7；其中所述的烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基任选进一步被选自烷基、卤代烷基、卤素、氨基、硝基、氰基、羟基、烷氧基、卤代烷氧基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
R3选自氢原子、烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、卤素、氨基、硝基、羟基、氰基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、-OR5、-C(O)R5、-C(O)OR5、-S(O)mR5和-NR6R7；其中所述烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基任选进一步被选自烷基、卤代烷基、卤素、氨基、硝基、氰基、羟基、烷氧基、卤代烷氧基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
R4选自氢原子、烷基、卤代烷基、羟基、氨基、烷氧基、卤代烷氧基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、-C(O)R5、-C(O)OR5和-NR6R7；其中所述的烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基任选进一步被选自烷基、卤素、氨基、硝基、氰基、羟基、羟烷基、烷氧基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
R5选自氢原子、烷基、烷氧基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基，其中所述的烷基、烷氧基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基任选进一步被选自烷基、卤素、羟基、氨基、硝基、氰基、烷氧基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
R6和R7各自相同或不同，其各自独立地选自氢原子、烷基、烷氧基、羟烷基、羟基、氨基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基，其中所述的烷基、烷氧基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基任选进一步被选自烷基、卤素、羟基、氨基、硝基、氰基、烷氧基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
m为0、1或2；且
n为0、1、2、3、4或5；
q为0、1、2、3或4。
在本发明的一个优选的实施方案中，通式(I)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用盐，其中R1选自氢原子和烷基。
在本发明的一个优选的实施方案中，通式(I)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用盐，其中R2选自氢原子和卤素。
在本发明的一个优选的实施方案中，通式(I)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用盐，其中R3选自氢原子和卤素。
在本发明的一个优选的实施方案中，通式(I)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用盐，其中R4选自氢原子。
在本发明的一个优选的实施方案中，通式(I)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用盐，其中A环选自优选
在本发明的一个优选的实施方案中，通式(I)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用盐，其为通式(II)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用盐，
其中：
X选自碳原子和氧原子；
R1～R4、n和q如通式(I)中所定义。
通式(I)的典型化合物，包括但不限于：
或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用盐。
本发明进一步提供通式(III)所示的化合物：
或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用的盐，
其中：
R选自烷基和环烷基；
环A、R1～R4、q和n如通式(I)中所定义。
本发明另外提供一种制备根据通式(I)化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐的方法，该方法包括：
通式(III)化合物在碱性条件下水解得到通式(I)化合物；
其中：
环A、R、R1～R4、q和n如通式(III)中所述定义。
本发明的另一方面涉及一种药物组合物，其含有治疗有效剂量的上述各通式所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐，以及一种或多种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。本发明还涉及一种制备上述药物组合物的方法，其包括将各通式所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐与药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂混合。
本发明进一步涉及通式(I)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式、或其可药用盐或包含其的药物组合物，在制备雌激素受体调节剂中的用途。
本发明进一步涉及通式(I)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式、或其可药用盐，或包含其的药物组合物，在制备治疗雌激素受体介导的或依赖性的疾病或病症的药物中的用途。其中所述雌激素受体介导的或依赖性的疾病或病症选自癌症、中枢神经系统(CNS)缺陷、心血管系统缺陷、血液系统缺陷、免疫及炎症疾病、感染易感性、代谢缺陷、神经缺陷、精神缺陷和生殖缺陷。其中所述癌症可以为乳腺癌、子宫内膜癌、宫颈癌、皮肤癌、前列腺癌、卵巢癌、输卵管肿瘤、卵巢瘤、血友病和白血病；优选乳腺癌、卵巢癌、子宫内膜癌、前列腺癌或宫颈癌；更优选乳腺癌；所述中枢神经系统(CNS)缺陷可以为酒精中毒或偏头痛；所述心血管系统缺陷可以为主动脉瘤、心肌梗死易感性、主动脉瓣硬化、心血管疾病、冠状动脉疾病、高血压；所述血液系统缺陷可以为深静脉血栓形成；所述免疫及炎症疾病可以为格雷夫斯病、关节炎、多发性硬化、肝硬化；所述感染易感性可以为乙型肝炎、慢性肝病；所述代谢缺陷可以为胆汁淤积、尿道下裂、肥胖症、骨关节炎、骨质减少、骨质疏松症；所述神经缺陷可以为阿尔茨海默病、帕金森病、偏头痛、眩晕；所述精神缺陷可以为神经性厌食、注意力缺陷伴多动障碍(ADHD)、痴呆、严重抑郁障碍、精神病；和所述生殖缺陷可以为子宫内膜异位症、不育症等。
本发明进一步涉及一种本发明的通式(I)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式、或其可药用盐，其作为治疗雌激素受体介导的或依赖性的疾病或病症的药物。其中所述雌激素受体介导的或依赖性的疾病或病症选自癌症、中枢神经系统(CNS)缺陷、心血管系统缺陷、血液系统缺陷、免疫及炎症疾病、感染易感性、代谢缺陷、神经缺陷、精神缺陷和生殖缺陷。其中所述癌症可以为乳腺癌、子宫内膜癌、宫颈癌、皮肤癌、前列腺癌、卵巢癌、输卵管肿瘤、卵巢瘤、血友病和白血病；优选乳腺癌、卵巢癌、子宫内膜癌、前列腺癌或宫颈癌；更优选乳腺癌；所述中枢神经系统(CNS)缺陷可以为酒精中毒或偏头痛；所述心血管系统缺陷可以为主动脉瘤、心肌梗死易感性、主动脉瓣硬化、心血管疾病、冠状动脉疾病、高血压；所述血液系统缺陷可以为深静脉血栓形成；所述免疫及炎症疾病可以为格雷夫斯病、关节炎、多发性硬化、肝硬化；所述感染易感性可以为乙型肝炎、慢性肝病；所述代谢缺陷可以为胆汁淤积、尿道下裂、肥胖症、骨关节炎、骨质减少、骨质疏松症；所述神经缺陷可以为阿尔茨海默病、帕金森病、偏头痛、眩晕；所述精神缺陷可以为神经性厌食、注意力缺陷伴多动障碍(ADHD)、痴呆、严重抑郁障碍、精神病；和所述生殖缺陷可以为子宫内膜异位症、不育症等。
本发明进一步涉及一种治疗雌激素受体介导的或依赖性的疾病或病症的方法，该方法包括向需要其的患者施用治疗有效剂量的本发明的通式(I)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式、或其可药用盐。该方法表现出突出的疗效和较少的副作用。其中所述雌激素受体介导的或依赖性的疾病或病症选自癌症、中枢神经系统(CNS)缺陷、心血管系统缺陷、血液系统缺陷、免疫及炎症疾病、感染易感性、代谢缺陷、神经缺陷、精神缺陷和生殖缺陷。其中所述癌症可以为乳腺癌、子宫内膜癌、宫颈癌、皮肤癌、前列腺癌、卵巢癌、输卵管肿瘤、卵巢瘤、血友病和白血病；优选乳腺癌、卵巢癌、子宫内膜癌、前列腺癌或宫颈癌；更优选乳腺癌；所述中枢神经系统(CNS)缺陷可以为酒精中毒或偏头痛；所述心血管系统缺陷可以为主动脉瘤、心肌梗死易感性、主动脉瓣硬化、心血管疾病、冠状动脉疾病、高血压；所述血液系统缺陷可以为深静脉血栓形成；所述免疫及炎症疾病可以为格雷夫斯病、关节炎、多发性硬化、肝硬化；所述感染易感性可以为乙型肝炎、慢性肝病；所述代谢缺陷可以为胆汁淤积、尿道下裂、肥胖症、骨关节炎、骨质减少、骨质疏松症；所述神经缺陷可以为阿尔茨海默病、帕金森病、偏头痛、眩晕；所述精神缺陷可以为神经性厌食、注意力缺陷伴多动障碍(ADHD)、痴呆、严重抑郁障碍、精神病；和所述生殖缺陷可以为子宫内膜异位症、不育症等。
本发明另一方面涉及一种作为治疗癌症的药物的本发明的通式(I)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式、或其可药用盐。其在治疗癌症方面表现出突出的疗效和较少的副作用，其中所述的癌症可以选自乳腺癌、子宫内膜癌、宫颈癌、皮肤癌、前列腺癌、卵巢癌、输卵管肿瘤、卵巢瘤、血友病和白血病；优选乳腺癌、卵巢癌、子宫内膜癌、前列腺癌或宫颈癌；更优选乳腺癌。
本发明另一方面涉及一种治疗癌症的方法，该方法包括向需要其的患者施用治疗有效剂量的本发明的通式(I)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式、或其可药用盐。该方法表现出突出的疗效和较少的副作用，其中所述的癌症可以选自乳腺癌、子宫内膜癌、宫颈癌、皮肤癌、前列腺癌、卵巢癌、输卵管肿瘤、卵巢瘤、血友病和白血病；优选乳腺癌、卵巢癌、子宫内膜癌、前列腺癌或宫颈癌；更优选乳腺癌。
含活性成分的药物组合物可以是适用于口服的形式，例如片剂、糖锭剂、锭剂、水或油混悬液、可分散粉末或颗粒、乳液、硬或软胶囊，或糖浆剂或酏剂。可按照本领域任何已知制备药用组合物的方法制备口服组合物，此类组合物可含有一种或多种选自以下的成分：甜味剂、矫味剂、着色剂和防腐剂，以提供悦目和可口的药用制剂。片剂含有活性成分和用于混合的适宜制备片剂的无毒的可药用的赋形剂。这些赋形剂可以是惰性赋形剂，如碳酸钙、碳酸钠、乳糖、磷酸钙或磷酸钠；造粒剂和崩解剂，例如微晶纤维素、交联羧甲基纤维素钠、玉米淀粉或藻酸；粘合剂，例如淀粉、明胶、聚乙烯吡咯烷酮或阿拉伯胶；和润滑剂，例如硬脂酸镁、硬脂酸或滑石粉。这些片剂可以不包衣或可通过掩盖药物的味道或在胃肠道中延迟崩解和吸收，因而在较长时间内提供缓释作用的已知技术将其包衣。例如，可使用水溶性味道掩蔽物质，例如羟丙基甲基纤维素或羟丙基纤维素，或延长时间物质例如乙基纤维素、醋酸丁酸纤维素。
也可用其中活性成分与惰性固体稀释剂例如碳酸钙、磷酸钙或高岭土混合的硬明胶胶囊，或其中活性成分与水溶性载体例如聚乙二醇或油溶媒例如花生油、液体石蜡或橄榄油混合的软明胶胶囊提供口服制剂。
水悬浮液含有活性物质和用于混合的适宜制备水悬浮液的赋形剂。此类赋形剂是悬浮剂，例如羧基甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮和阿拉伯胶；分散剂或湿润剂可以是天然产生的磷脂例如卵磷脂，或烯化氧与脂肪酸的缩合产物例如聚氧乙烯硬脂酸酯，或环氧乙烷与长链脂肪醇的缩合产物，例如十七碳亚乙基氧基鲸蜡醇，或环氧乙烷与由脂肪酸和己糖醇衍生的部分酯的缩合产物，例如聚环氧乙烷山梨醇单油酸酯，或环氧乙烷与由脂肪酸和己糖醇酐衍生的偏酯的缩合产物，例如聚环氧乙烷脱水山梨醇单油酸酯。水混悬液也可以含有一种或多种防腐剂例如尼泊金乙酯或尼泊金正丙酯、一种或多种着色剂、一种或多种矫味剂和一种或多种甜味剂，例如蔗糖、糖精或阿司帕坦。
油混悬液可通过使活性成分悬浮于植物油如花生油、橄榄油、芝麻油或椰子油，或矿物油例如液体石蜡中配制而成。油悬浮液可含有增稠剂，例如蜂蜡、硬石蜡或鲸蜡醇。可加入上述的甜味剂和矫味剂，以提供可口的制剂。可通过加入抗氧化剂例如丁羟茴醚或α-生育酚保存这些组合物。
通过加入水可使适用于制备水混悬也的可分散粉末和颗粒提供活性成分和用于混合的分散剂或湿润剂、悬浮剂或一种或多种防腐剂。适宜的分散剂或湿润剂和悬浮剂可说明上述的例子。也可加入其他赋形剂例如甜味剂、矫味剂和着色剂。通过加入抗氧化剂例如抗坏血酸保存这些组合物。
本发明的药物组合物也可以是水包油乳剂的形式。油相可以是植物油例如橄榄油或花生油，或矿物油例如液体石蜡或其混合物。适宜的乳化剂可以是天然产生的磷脂，例如大豆卵磷脂和由脂肪酸和己糖醇酐衍生的酯或偏酯例如山梨坦单油酸酯，和所述偏酯和环氧乙烷的缩合产物，例如聚环氧乙烷山梨醇单油酸酯。乳剂也可以含有甜味剂、矫味剂、防腐剂和抗氧剂。可用甜味剂例如甘油、丙二醇、山梨醇或蔗糖配制糖浆和酏剂。此类制剂也可含有缓和剂、防腐剂、着色剂和抗氧剂。
本发明的药物组合物可以是无菌注射水溶液形式。可以使用的可接受的溶媒或溶剂有水、林格氏液和等渗氯化钠溶液。无菌注射制剂可以是其中活性成分溶于油相的无菌注射水包油微乳。例如将活性成分溶于大豆油和卵磷脂的混合物中。然后将油溶液加入水和甘油的混合物中处理形成微乳。可通过局部大量注射，将注射液或微乳注入患者的血流中。或者，最好按可保持本发明化合物恒定循环浓度的方式给予溶液和微乳。为保持这种恒定浓度，可使用连续静脉内递药装置。这种装置的实例是Deltec CADD-PLUS.TM.5400型静脉注射泵。
本发明的药物组合物可以是用于肌内和皮下给药的无菌注射水或油混悬液的形式。可按已知技术，用上述那些适宜的分散剂或湿润剂和悬浮剂配制该混悬液。无菌注射制剂也可以是在肠胃外可接受的无毒稀释剂或溶剂中制备的无菌注射溶液或混悬液，例如1,3-丁二醇中制备的溶液。此外，可方便地用无菌固定油作为溶剂或悬浮介质。为此目的，可使用包括合成甘油单或二酯在内的任何调和固定油。此外，脂肪酸例如油酸也可以制备注射剂。
可按用于直肠给药的栓剂形式给予本发明化合物。可通过将药物与在普通温度下为固体但在直肠中为液体，因而在直肠中会溶化而释放药物的适宜的无刺激性赋形剂混合来制备这些药物组合物。此类物质包括可可脂、甘油明胶、氢化植物油、各种分子量的聚乙二醇和聚乙二醇的脂肪酸酯的混合物。
如本领域技术人员所熟知的，药物的给药剂量依赖于多种因素，包括但并非限定于以下因素：所用具体化合物的活性、患者的年龄、患者的体重、患者的健康状况、患者的行被、患者的饮食、给药时间、给药方式、排泄的速率、药物的组合等；另外，最佳的治疗方式如治疗的模式、通式化合物(I)的日用量或可药用的盐的种类可以根据传统的治疗方案来验证。
发明的详细说明
除非有相反陈述，在说明书和权利要求书中使用的术语具有下述含义。
术语“烷基”指饱和脂肪族烃基团，其为包含1至20个碳原子的直链或支链基团，优选含有1至12个碳原子的烷基，更优选含有1至6个碳原子的烷基。非限制性实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1,1,2-三甲基丙基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2,3-二甲基丁基、正庚基、2-甲基己基、3-甲基己基、4-甲基己基、5-甲基己基、2,3-二甲基戊基、2,4-二甲基戊基、2,2-二甲基戊基、3,3-二甲基戊基、2-乙基戊基、3-乙基戊基、正辛基、2,3-二甲基己基、2,4-二甲基己基、2,5-二甲基己基、2,2-二甲基己基、3,3-二甲基己基、4,4-二甲基己基、2-乙基己基、3-乙基己基、4-乙基己基、2-甲基-2-乙基戊基、2-甲基-3-乙基戊基、正壬基、2-甲基-2-乙基己基、2-甲基-3-乙基己基、2,2-二乙基戊基、正癸基、3,3-二乙基己基、2,2-二乙基己基，及其各种支链异构体等。更优选的是含有1至6个碳原子的低级烷基，非限制性实施例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1,1,2-三甲基丙基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2,3-二甲基丁基等。烷基可以是取代的或非取代的，当被取代时，取代基可以在任何可使用的连接点上被取代，所述取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、氧代基、羧基或羧酸酯基。
术语“环烷基”指饱和或部分不饱和单环或多环环状烃取代基，环烷基环包含3至20个碳原子，优选包含3至12个碳原子，更优选包含3至6个碳原子。单环环烷基的非限制性实例包括环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯基、环己基、环己烯基、环己二烯基、环庚基、环庚三烯基、环辛基等；多环环烷基包括螺环、稠环和桥环的环烷基。
术语“螺环烷基”指5至20元的单环之间共用一个碳原子(称螺原子)的多环基团，其可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统。优选为6至14元，更优选为7至10元。根据环与环之间共用螺原子的数目将螺环烷基分为单螺环烷基、双螺环烷基或多螺环烷基，优选为单螺环烷基和双螺环烷基。更优选为4元/4元、4元/5元、4元/6元、5元/5元或5元/6元单螺环烷基。螺环烷基的非限制性实例包括：
术语“稠环烷基”指5至20元，系统中的每个环与体系中的其他环共享毗邻的一对碳原子的全碳多环基团，其中一个或多个环可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统。优选为6至14元，更优选为7至10元。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环稠环烷基，优选为双环或三环，更优选为5元/5元或5元/6元双环烷基。稠环烷基的非限制性实例包括：
术语“桥环烷基”指5至20元，任意两个环共用两个不直接连接的碳原子的全碳多环基团，其可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统。优选为6至14元，更优选为7至10元。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环桥环烷基，优选为双环、三环或四环，更有选为双环或三环。桥环烷基的非限制性实例包括：
所述环烷基环可以稠合于芳基、杂芳基或杂环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为环烷基，非限制性实例包括茚满基、四氢萘基、苯并环庚烷基等；优选苯基并环戊基、四氢萘基。环烷基可以是任选取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、氧代基、羧基或羧酸酯基。
术语“杂环基”指饱和或部分不饱和单环或多环环状烃取代基，其包含3至20个环原子，其中一个或多个环原子为选自氮、氧或S(O)m(其中m是整数0至2)的杂原子，但不包括-O-O-、-O-S-或-S-S-的环部分，其余环原子为碳。优选包含3至12个环原子，其中1～4个是杂原子；最优选包含3至8个环原子，其中1～3是杂原子；最优选包含3至6个环原子，其中1～2是杂原子。单环杂环基的非限制性实例包括吡咯烷基、咪唑烷基、四氢呋喃基、四氢吡喃基、四氢噻吩基、二氢咪唑基、二氢呋喃基、二氢吡唑基、二氢吡咯基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、硫代吗啉基、高哌嗪基等，优选四氢吡喃基、哌啶基、吡咯烷基。多环杂环基包括螺环、稠环和桥环的杂环基。
术语“螺杂环基”指5至20元的单环之间共用一个原子(称螺原子)的多环杂环基团，其中一个或多个环原子为选自氮、氧或S(O)m(其中m是整数0至2)的杂原子，其余环原子为碳。其可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统。优选为6至14元，更优选为7至10元。根据环与环之间共用螺原子的数目将螺杂环基分为单螺杂环基、双螺杂环基或多螺杂环基，优选为单螺杂环基和双螺杂环基。更优选为4元/4元、4元/5元、4元/6元、5元/5元或5元/6元单螺杂环基。螺杂环基的非限制性实例包括：
术语“稠杂环基”指5至20元，系统中的每个环与体系中的其他环共享毗邻的一对原子的多环杂环基团，一个或多个环可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统，其中一个或多个环原子为选自氮、氧或S(O)m(其中m是整数0至2)的杂原子，其余环原子为碳。优选为6至14元，更优选为7至10元。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环稠杂环基，优选为双环或三环，更优选为5元/5元或5元/6元双环稠杂环基。稠杂环基的非限制性实例包括：
术语“桥杂环基”指5至14元，任意两个环共用两个不直接连接的原子的多环杂环基团，其可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统，其中一个或多个环原子为选自氮、氧或S(O)m(其中m是整数0至2)的杂原子，其余环原子为碳。优选为6至14元，更优选为7至10元。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环桥杂环基，优选为双环、三环或四环，更有选为双环或三环。桥杂环基的非限制性实例包括：
所述杂环基环可以稠合于芳基、杂芳基或环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为杂环基，其非限制性实例包括：
等。
杂环基可以是任选取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、氧代基、羧基或羧酸酯基。
术语“芳基”指具有共轭的π电子体系的6至14元全碳单环或稠合多环(也就是共享毗邻碳原子对的环)基团，优选为6至10元，例如苯基和萘基。所述芳基环可以稠合于杂芳基、杂环基或环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为芳基环，其非限制性实例包括：
芳基可以是取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、羧基或羧酸酯基。
术语“杂芳基”指包含1至4个杂原子、5至14个环原子的杂芳族体系，其中杂原子选自氧、硫和氮。杂芳基优选为5至10元，含1至3个杂原子；更优选为5元或6元，含1至2个杂原子；优选例如咪唑基、呋喃基、噻吩基、噻唑基、吡唑基、噁唑基、吡咯基、四唑基、吡啶基、嘧啶基、噻二唑、吡嗪基等，优选为咪唑基、吡唑基或嘧啶基、噻唑基；更有选吡唑基。所述杂芳基环可以稠合于芳基、杂环基或环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为杂芳基环，其非限制性实例包括：
杂芳基可以是任选取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、羧基或羧酸酯基。
术语“烷氧基”指-O-(烷基)和-O-(非取代的环烷基)，其中烷基的定义如上所述。烷氧基的非限制性实例包括：甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、环丙氧基、环丁氧基、环戊氧基、环己氧基。烷氧基可以是任选取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、羧基或羧酸酯基。
术语“羟烷基”指被羟基取代的烷基，其中烷基如上所定义。
术语“羟基”指-OH基团。
术语“卤素”指氟、氯、溴或碘。
术语“氨基”指-NH2。
术语“氰基”指-CN。
术语“硝基”指-NO2。
术语“羧基”指-C(O)OH。
术语“卤代烷基”指烷基中，氢原子被一个或者多个卤素原子取代。
术语“卤代烷氧基”指烷氧基中，氢原子被一个或者多个卤素原子取代。
术语“羧酸酯基”指-C(O)O(烷基)或-C(O)O(环烷基)，其中烷基、环烷基如上所定义。
术语“酰卤”指含有-C(O)-卤素的基团的化合物。
“任选”或“任选地”意味着随后所描述的事件或环境可以但不必发生，该说明包括该事件或环境发生或不发生的场合。例如，“任选被烷基取代的杂环基团”意味着烷基可以但不必须存在，该说明包括杂环基团被烷基取代的情形和杂环基团不被烷基取代的情形。
“取代的”指基团中的一个或多个氢原子，优选为最多5个，更优选为1～3个氢原子彼此独立地被相应数目的取代基取代。不言而喻，取代基仅处在它们的可能的化学位置，本领域技术人员能够在不付出过多努力的情况下确定(通过实验或理论)可能或不可能的取代。例如，具有游离氢的氨基或羟基与具有不饱和(如烯属)键的碳原子结合时可能是不稳定的。
“药物组合物”表示含有一种或多种本文所述化合物或其生理学上/可药用的盐或前体药物与其他化学组分的混合物，以及其他组分例如生理学/可药用的载体和赋形剂。药物组合物的目的是促进对生物体的给药，利于活性成分的吸收进而发挥生物活性。
“可药用盐”是指本发明化合物的盐，这类盐用于哺乳动物体内时具有安全性和有效性，且具有应有的生物活性。
本发明化合物的合成方法
为了完成本发明的目的，本发明采用如下技术方案：
本发明通式(I)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式、或其可药用的盐制备方法，包括以下步骤：
方案一
在低温碱性条件下，通式(I-A)化合物与醛类衍生物发生反应，得到通式(I-B)化合物，该反应的碱试剂优选正丁基锂；得到的通式(I-B)化合物在常温下发生氧化反应，得到通式(I-C)化合物，该条件下的氧化剂优选戴斯-马丁氧化剂；得到的通式(I-C)化合物在加热条件下，与锌粉、四氧化钛和环酮类衍生物一起发生交叉型McMurry偶联反应，得到通式(I-D)化合物；得到的通式(I-D)化合物在高温碱性条件下，与丙烯酸酯反应，得到通式(III)化合物，该反应的碱性试剂优选三乙胺，该反应的催化剂优选醋酸钯和三(邻甲苯基)膦；得到的通式(III)化合物在碱性条件下水解得到通式(I)化合物，该反应的碱试剂优选氢氧化锂和氢氧化钠。
本发明通式(I)所示的化合物还可以如下制备：
方案二
在低温碱性条件下，通式(I-A)化合物与醛类衍生物发生反应，得到通式(I-E)化合物，该反应的碱试剂优选正丁基锂；得到的通式(I-E)化合物在常温下发生氧化反应，得到通式(I-F)化合物，该条件下的氧化剂优选戴斯-马丁氧化剂；得到的通式(I-F)化合物在加热条件下脱去苄基，得到通式(I-G)化合物，该反应的还原剂优选氢气和钯碳；得到的通式(I-G)化合物，在加热条件下，与锌粉、四氧化钛和环酮类衍生物一起发生交叉型McMurry偶联反应，得到通式(I-H)化合物；得到的通式(I-H)化合物在冰浴碱性条件下，与三氟甲磺酸酐反应，得到通式(I-I)化合物，该反应的碱性试剂优选三乙胺；得到通式(I-I)化合物，与丙烯酸酯反应，得到通式(III)化合物，该反应的碱性试剂优选三乙胺，该反应的催化剂优选醋酸钯和三(邻甲苯基)膦；得到的通式(III)化合物在碱性条件下水解得到通式(I)化合物，该反应的碱试剂优选氢氧化锂和氢氧化钠。
提供碱性条件的试剂包括有机碱和无机碱类，所述有机碱类包括但不限于三乙胺、N,N-二异丙基乙胺、正丁基锂、二异丙基氨基锂、醋酸钾、叔丁醇钠或叔丁醇钾，所述的无机碱类包括但不限于氢化钠、磷酸钾、碳酸钠、碳酸钾或碳酸铯、氢氧化钠和氢氧化锂。
提供酸性的条件包括但不限于甲酸、乙酸、盐酸、硫酸、甲磺酸。
所用的还原剂包括但不限于Fe粉、Zn粉、H2、硼氢化钠、三乙酰氧基硼氢化钠、腈基硼氢化钠或氢化铝锂。
所用的氧化剂包括但不限于双氧水、高锰酸钾、戴斯-马丁氧化剂、氧气、臭氧、重铬酸钾和二氧化锰。
所用溶剂包括但不限于：醋酸、甲醇、乙醇、甲苯、四氢呋喃、二氯甲烷、二甲基亚砜、1,4-二氧六环、水或N,N-二甲基甲酰胺。
其中：
X选自卤素；
环A、R1～R4、R、q和n如通式(I)中所述定义。
具体实施方式
以下结合实施例进一步描述本发明，但这些实施例并非限制着本发明的范围。
实施例
化合物的结构是通过核磁共振(NMR)或/和质谱(MS)来确定的。NMR位移(δ)以10-6(ppm)的单位给出。NMR的测定是用Bruker AVANCE-400核磁仪，测定溶剂为氘代二甲基亚砜(DMSO-d6)，氘代氯仿(CDCl3)，氘代甲醇(CD3OD)，内标为四甲基硅烷(TMS)。
MS的测定用FINNIGAN LCQAd(ESI)质谱仪(生产商：Thermo，型号：Finnigan LCQ advantage MAX)。
HPLC的测定使用安捷伦1200DAD高压液相色谱仪(Sunfire C18 150×4.6mm色谱柱)和Waters 2695-2996高压液相色谱仪(Gimini C18 150×4.6mm色谱柱)。
激酶平均抑制率及IC50值的测定用NovoStar酶标仪(德国BMG公司)。
薄层层析硅胶板使用烟台黄海HSGF254或青岛GF254硅胶板，薄层色谱法(TLC)使用的硅胶板采用的规格是0.15mm～0.2mm，薄层层析分离纯化产品采用的规格是0.4mm～0.5mm。
柱层析一般使用烟台黄海硅胶200～300目硅胶为载体。
本发明的已知的起始原料可以采用或按照本领域已知的方法来合成，或可购买自ABCR GmbH&Co.KG、Acros Organics、Aldrich Chemical Company、韶远化学科技(Accela ChemBio Inc)、达瑞化学品等公司。
实施例中无特殊说明，反应能够均在氩气氛或氮气氛下进行。
氩气氛或氮气氛是指反应瓶连接一个约1L容积的氩气或氮气气球。
氢气氛是指反应瓶连接一个约1L容积的氢气气球。
加压氢化反应使用Parr 3916EKX型氢化仪和清蓝QL-500型氢气发生器或HC2-SS型氢化仪。
氢化反应通常抽真空，充入氢气，反复操作3次。
微波反应使用CEM Discover-S 908860型微波反应器。
实施例中无特殊说明，溶液是指水溶液。
实施例中无特殊说明，反应的温度为室温，为20℃～30℃。
实施例中的反应进程的监测采用薄层色谱法(TLC)，反应所使用的展开剂的体系有：A：二氯甲烷和甲醇体系，B：正己烷和乙酸乙酯体系，C：石油醚和乙酸乙酯体系，D：丙酮，溶剂的体积比根据化合物的极性不同而进行调节。纯化化合物采用的柱层析的洗脱剂的体系和薄层色谱法的展开剂体系包括：A：二氯甲烷和甲醇体系，B：正己烷和乙酸乙酯体系，C：二氯甲烷和丙酮体系，溶剂的体积比根据化合物的极性不同而进行调节，也可以加入少量的三乙胺和醋酸等碱性或酸性试剂进行调节。
实施例1
(E)-3-(4-(亚环己基(1H-吲唑-5-基)甲基)苯基)丙烯酸
第一步
(4-溴苯基)(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)甲醇
将5-溴-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑1a(500mg，1.8mmol，采用公知的方法“Journal of Organic Chemistry,2009,74(16),6331-6334”制备而得)溶于20mL四氢呋喃中，冷却至-78℃，滴加正丁基锂(0.8mL，1.98mmol)，搅拌反应5分钟，滴加预制的3mL对溴苯甲醛(300mg，1.62mmol)的四氢呋喃溶液，于-78℃搅拌反应2小时。反应结束后，加10mL饱和氯化铵溶液淬灭反应，用乙酸乙酯(50mL×2)萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系B纯化所得残留物，得到标题产物(4-溴苯基)(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)甲醇1b(200mg，无色油状物)，产率：28.7％。
MS m/z(ESI):387.0[M+1]
第二步
(4-溴苯基)(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)甲酮
将(4-溴苯基)(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)甲醇1b(200mg，0.52mmol)溶解于10mL二氯甲烷中，加入戴斯-马丁氧化剂(657mg，1.55mmol)，于25℃反应12小时，反应结束后，加入10mL水，用乙酸乙酯萃取(30mL×2)，有机层用水洗涤(20mL×2)，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系B纯化所得残留物，得到标题产物(4-溴苯基)(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)甲酮1c(160mg，白色固体)，产率80％。
MS m/z(ESI):301.0[M+1]
第三步
5-((4-溴苯基)(亚环己基)甲基)-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑
将锌粉(135mg，2.08mmol)分散于10mL四氢呋喃中，滴加四氯化钛(190mg，1.04mmol)，加热回流2小时，滴加预制的10mL(4-溴苯基)(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)甲酮1c(100mg，0.26mmol)和环己酮(77mg，0.78mmol)的四氢呋喃溶液，搅拌反应1小时。反应结束后，自然冷却，将反应液倒入10％的碳酸钾水溶液中，用乙酸乙酯萃取(50mL×3)，有机层用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系B纯化所得残留物，得到标题产物5-((4-溴苯基)(亚环己基)甲基)-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑1d(45mg，黄色固体)，产率：38.5％。
MS m/z(ESI):453.0[M+1]
第四步
(E)-3-(4-(亚环己基(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)甲基)苯基)丙烯酸甲酯
将5-((4-溴苯基)(亚环己基)甲基)-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑1d(45mg，0.1mmol)、丙烯酸甲酯(26mg，0.3mmol)、三(邻甲苯基)膦(3mg，0.011mmol)、三乙胺(30mg，0.3mmol)、醋酸钯(2mg，0.006mmol)溶于1mL N,N-二甲基甲酰胺中，于140℃微波反应1小时，反应结束后，自然冷却，加入20mL水，用乙酸乙酯萃取(30mL×2)，有机层用水洗涤(10mL×3)，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，得粗品标题产物(E)-3-(4-(亚环己基(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)甲基)苯基)丙烯酸甲酯1e(45mg，黄色油状物)，产品不经纯化直接用于下一步反应。
MS m/z(ESI):457.2[M+1]
第五步
(E)-3-(4-(亚环己基(1H-吲唑-5-基)甲基)苯基)丙烯酸甲酯
将粗品(E)-3-(4-(亚环己基(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)甲基)苯基)丙烯酸甲酯1e(45mg，0.1mmol)溶解于2mL乙醇中，加入0.2mL 5N的氯化氢二氧六环溶液，于70℃搅拌反应30分钟。反应结束后，将反应液减压浓缩，用饱和碳酸氢钠溶液调节pH≈9，用乙酸乙酯萃取(30mL×2)，有机层用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，得到粗品标题产物(E)-3-(4-(亚环己基(1H-吲唑-5-基)甲基)苯基)丙烯酸甲酯1f(37mg，黄色油状物)，产品不经纯化直接进行下一步反应。
MS m/z(ESI):373.1[M+1]
第六步
(E)-3-(4-(亚环己基(1H-吲唑-5-基)甲基)苯基)丙烯酸
将粗品(E)-3-(4-(亚环己基(1H-吲唑-5-基)甲基)苯基)丙烯酸甲酯1f(37mg，0.1mmol)溶解于6mL四氢呋喃和乙醇(V:V＝1:1)的混合溶液中，加入一水合氢氧化锂(80mg，2mmol)，于25℃搅拌反应12小时，反应结束后，将反应液减压浓缩，用1N盐酸调节pH≈3，用乙酸乙酯萃取(30mL×3)，有机层用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，用薄层色谱法以展开剂体系A纯化所得残余物，得标题产物(E)-3-(4-(亚环己基(1H-吲唑-5-基)甲基)苯基)丙烯酸1(10mg，白色固体)，收率28.6％。
MS m/z(ESI):359.2[M+1]
1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ13.02(brs,1H),12.32(brs,1H),8.05(s,1H),7.65-7.61(m,2H),7.57-7.53(m,2H),7.45(d,1H),7.24(d,2H),7.14(dd,1H),6.48(d,1H),2.53-2.43(m,2H),2.33-2.24(m,2H),1.96-1.89(m,2H),1.59-1.55(m,2H),1.50-1.41(m,2H).
实施例2
(E)-3-(4-((1H-吲唑-5-基)(3,3,5,5-四甲基亚环己基)甲基)-2,6-二氟苯基)丙烯酸
第一步
(4-(苄氧基)-3,5-二氟苯基)(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)甲醇
将5-溴-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑1a(1.87g，6.65mmol)溶于30mL四氢呋喃中，于-78℃滴加2.5M的正丁基锂(3.0mL，7.32mmol)，滴加完毕搅拌10分钟，滴加预制的5mL 4-(苄氧基)-3,5-二氟苯甲醛2a(1.65g，6.65mmol，采用专利申请“WO2014069963”公开的方法制备而得)的四氢呋喃溶液，自然升至25℃，搅拌反应12小时。反应结束后，加入20mL饱和氯化铵溶液淬灭反应，乙酸乙酯萃取(20mL×3)，有机相减压浓缩，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系B纯化所得残留物，得到标题产物(4-(苄氧基)-3,5-二氟苯基)(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)甲醇2b(1.78g，黄色粘稠物)，产率：59.3％。
第二步
(4-(苄氧基)-3,5-二氟苯基)(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)甲酮
将(4-(苄氧基)-3,5-二氟苯基)(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)甲醇2b(1.78g，3.95mmol)溶解于40mL二氯甲烷中，加入戴斯-马丁氧化剂(3.35g，7.90mmol)，于25℃反应12小时，反应结束后，将反应液减压浓缩，加入30mL饱和碳酸氢钠溶液，用乙酸乙酯萃取(30mL×3)，有机相减压浓缩，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系B纯化所得残留物，得到标题产物(4-(苄氧基)-3,5-二氟苯基)(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)甲酮2c(1.17g，黄色固体)，产率66％。
第三步
(3,5-二氟-4-羟基苯基)(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)甲酮
将(4-(苄氧基)-3,5-二氟苯基)(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)甲酮2c(1.17g，3.3mmol)加入45mL乙醇中，加入150mg 10％的钯碳，氢气置换三次，于40℃搅拌反应60小时。反应结束后，过滤反应液，将滤液减压浓缩，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系B纯化所得残留物，得到标题产物(3,5-二氟-4-羟基苯基)(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)甲酮2d(540mg，白色固体)，产率：46.0％。
第四步
2,6-二氟-4-((1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)(3,3,5,5-四甲基亚环己基)甲基)苯酚
将锌粉(1.04g，16mmol)加入20mL四氢呋喃中，加入四氯化钛(0.88mL，8mmol)，回流反应2小时，冷却至0℃，加入四氢铝锂(152mg，4mmol)，冰浴下搅拌10分钟，加入三乙胺(0.56mL，4mmol)，回流反应1小时，加入预制的5mL(3,5-二氟-4-羟基苯基)(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)甲酮2d和3,3,5,5-四甲基环己酮(469mg，3mmol)的四氢呋喃溶液，回流反应2小时。反应结束后，加入20mL水，用乙酸乙酯萃取(20mL×2)，有机相减压浓缩，残留物用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系B纯化，得标题产物2,6-二氟-4-((1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)(3,3,5,5-四甲基亚环己基)甲基)苯酚2e(350mg，淡黄色固体)，产率72.9％。
第五步
2,6-二氟-4-((1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)(3,3,5,5-四甲基亚环己基)甲基)苯基三氟甲磺酸酯
将2,6-二氟-4-((1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)(3,3,5,5-四甲基亚环己基)甲基)苯酚2e(210mg，0.437mmol)溶解于10mL二氯甲烷中，加入三乙胺(88mg，0.874mmol)，冰浴下加入三氟甲磺酸酐(185mg，0.656mmol)，于25℃搅拌反应12小时，反应结束后，加入10mL水，用二氯甲烷萃取(10mL×2)，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系B纯化所得残留物，得到标题产物2,6-二氟-4-((1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)(3,3,5,5-四甲基亚环己基)甲基)苯基三氟甲磺酸酯2f(260mg，白色固体)，产率：97.4％。
第六步
(E)-3-(2,6-二氟-4-((1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)(3,3,5,5-四甲基亚环己基)甲基)苯基)丙烯酸甲酯
将2,6-二氟-4-((1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)(3,3,5,5-四甲基亚环己基)甲基)苯基三氟甲磺酸酯2f(130mg，0.2mmol)、0.3mL丙烯酸甲酯、三乙胺(101mg，1mmol)、双(三苯基膦)二氯化钯(15mg，0.02mmol)加入1mL N,N-二甲基甲酰胺中，氩气氛下，于140℃微波反应1.5小时。反应结束后，将反应液减压浓缩，加入10mL水，用乙酸乙酯萃取(10mL×3)，有机相减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系B纯化，得标题产物(E)-3-(2,6-二氟-4-((1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)(3,3,5,5-四甲基亚环己基)甲基)苯基)丙烯酸甲酯2g(30mg，黄色固体)，产率27.2％。
第七步
(E)-3-(4-((1H-吲唑-5-基)(3,3,5,5-四甲基亚环己基)甲基)-2,6-二氟苯基)丙烯酸甲酯
将(E)-3-(2,6-二氟-4-((1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)(3,3,5,5-四甲基亚环己基)甲基)苯基)丙烯酸甲酯2g(30mg，0.05mmol)溶解于5mL乙醇中，加入0.5mL4M的氯化氢1,4-二氧六环溶液，于60℃搅拌反应1小时。反应结束后，将反应液减压浓缩，加入10mL饱和碳酸氢钠溶液，用乙酸乙酯萃取(10mL×3)，有机层用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，得粗品标题产物(E)-3-(4-((1H-吲唑-5-基)(3,3,5,5-四甲基亚环己基)甲基)-2,6-二氟苯基)丙烯酸甲酯2h(25mg，白色固体)，产品不经纯化直接进行下一步反应。
第八步
(E)-3-(4-((1H-吲唑-5-基)(3,3,5,5-四甲基亚环己基)甲基)-2,6-二氟苯基)丙烯酸
将粗品(E)-3-(4-((1H-吲唑-5-基)(3,3,5,5-四甲基亚环己基)甲基)-2,6-二氟苯基)丙烯酸甲酯2h(25mg，0.05mmol)溶解于4mL甲醇，加入1mL 2N的氢氧化钠溶液，于25℃搅拌反应12小时，反应结束后，将反应液减压浓缩，加入10mL水，用1N盐酸调节pH为2～3，用乙酸乙酯萃取(10mL×3)，有机层用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，用薄层色谱法以展开剂体系A纯化所得残余物，得标题产物(E)-3-(4-((1H-吲唑-5-基)(3,3,5,5-四甲基亚环己基)甲基)-2,6-二氟苯基)丙烯酸2(20mg，白色固体)，收率83.3％。
MS m/z(ESI):451.4[M+1]
1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ13.05(bs,2H),8.15(s,1H),7.29-7.50(m,6H),6.65(d,1H),2.01(s,2H),1.88(s,2H),1.27(s,2H),0.91(d,12H).
实施例3
(E)-3-(4-((1H-吲唑-5-基)(3,3,5,5-四甲基亚环己基)甲基)-3,5-二氟苯基)丙烯酸
第一步
(4-溴-2,6-二氟苯基)(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)甲醇
将5-溴-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑1a(560mg，2mmol)溶于10mL乙醚中，于-78℃滴加2.5M的正丁基锂(1.7mL，2.2mmol)，滴加完毕搅拌10分钟，滴加预制的2mL 4-溴-2,6-二氟苯甲醛(442mg，2mmol)的乙醚溶液，自然升至25℃，搅拌反应60小时。反应结束后，加入10mL饱和氯化铵溶液淬灭反应，乙酸乙酯萃取(10mL×3)，有机相减压浓缩，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系B纯化所得残留物，得到标题产物(4-溴-2,6-二氟苯基)(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)甲醇3a(500mg，白色固体)，产率：59.1％。
第二步
(4-溴-2,6-二氟苯基)(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)甲酮
将(4-溴-2,6-二氟苯基)(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)甲醇3a(470mg，1.11mmol)溶解于10mL二氯甲烷中，加入戴斯-马丁氧化剂(942mg，2.22mmol)，于25℃反应12小时。反应结束后，将反应液减压浓缩，加入10mL饱和碳酸氢钠溶液，用乙酸乙酯萃取(10mL×3)，有机相减压浓缩，残留物用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系B纯化，得到标题产物(4-溴-2,6-二氟苯基)(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)甲酮3b(350mg，白色固体)，产率75.6％。
第三步
5-((4-溴-2,6-二氟苯基)(3,3,5,5-四甲基亚环己基)甲基)-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑
将锌粉(839mg，12.9mmol)加入20mL四氢呋喃中，加入四氯化钛(0.71mL，6.46mmol)，回流反应2小时，冷却至0℃，加入四氢铝锂(123mg，3.23mmol)，冰浴下搅拌10分钟，加入三乙胺(0.45mL，3.23mmol)，回流反应1小时，加入预制的5mL(4-溴-2,6-二氟苯基)(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)甲酮3b(340mg，0.807mmol)和3,3,5,5-四甲基环己酮(374mg，2.42mmol)的四氢呋喃溶液，回流反应2小时。反应结束后，加入20mL水淬灭反应，用乙酸乙酯萃取(10mL×3)，有机相减压浓缩，残留物用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系B纯化，得标题产物5-((4-溴-2,6-二氟苯基)(3,3,5,5-四甲基亚环己基)甲基)-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑3c(120mg，无色粘稠)，产率27.3％。
第四步
(E)-3-(3,5-二氟-4-((1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)(3,3,5,5-四甲基亚环己基)甲基)苯基)丙烯酸甲酯
将5-((4-溴-2,6-二氟苯基)(3,3,5,5-四甲基亚环己基)甲基)-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑3c(120mg，0.221mmol)、0.25mL丙烯酸甲酯、三乙胺(67mg，0.663mmol)、醋酸钯(2.98mg，0.0133mmol)、三(邻甲苯基)膦(8.07mg，0.0265mmol)加入0.5mL N,N-二甲基甲酰胺中，氩气氛下，于150℃微波反应1.5小时。反应结束后，加入10mL水，用乙酸乙酯萃取(10mL×3)，有机相减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系B纯化，得标题产物(E)-3-(3,5-二氟-4-((1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)(3,3,5,5-四甲基亚环己基)甲基)苯基)丙烯酸甲酯3d(50mg，无色粘稠物)，产率41.7％。
第五步
(E)-3-(4-((1H-吲唑-5-基)(3,3,5,5-四甲基亚环己基)甲基)-3,5-二氟苯基)丙烯酸甲酯
将(E)-3-(3,5-二氟-4-((1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)(3,3,5,5-四甲基亚环己基)甲基)苯基)丙烯酸甲酯3d(50mg，0.1mmol)溶解于5mL乙醇中，加入0.5mL4M的氯化氢1,4-二氧六环溶液，于60℃搅拌反应1小时。反应结束后，将反应液减压浓缩，加入10mL饱和碳酸氢钠溶液，用乙酸乙酯萃取(10mL×3)，有机层用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，得粗品标题产物(E)-3-(4-((1H-吲唑-5-基)(3,3,5,5-四甲基亚环己基)甲基)-3,5-二氟苯基)丙烯酸甲酯3e(46mg，白色固体)，产品不经纯化直接进行下一步反应。
第六步
(E)-3-(4-((1H-吲唑-5-基)(3,3,5,5-四甲基亚环己基)甲基)-3,5-二氟苯基)丙烯酸
将粗品(E)-3-(4-((1H-吲唑-5-基)(3,3,5,5-四甲基亚环己基)甲基)-3,5-二氟苯基)丙烯酸甲酯3e(46mg，0.1mmol)溶解于5mL甲醇，加入0.5mL 15％的氢氧化钠溶液，于25℃搅拌反应12小时，反应结束后，将反应液减压浓缩，加入10mL水，用2N盐酸调节pH为2～3，用乙酸乙酯萃取(10mL×3)，有机相减压浓缩，用高效液相色谱法纯化所得残余物，得标题产物(E)-3-(4-((1H-吲唑-5-基)(3,3,5,5-四甲基亚环己基)甲基)-3,5-二氟苯基)丙烯酸3(40mg，白色固体)，产率88.9％。
MS m/z(ESI):451.4[M+1]
1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ13.07(bs,2H),8.05(s,1H),7.41-7.56(m,5H),7.18(d,1H),6.60(d,1H),1.99(s,2H),1.84(s,2H),1.30(s,2H),0.90(d,12H).
实施例4
(E)-3-(4-((3-氟-1H-吲唑-5-基)(3,3,5,5-四甲基亚环己基)甲基)苯基)丙烯酸
第一步
(4-溴苯基)(3-氟-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)甲醇
将5-溴-3-氟-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑4a(600mg，2mmol，采用专利申请“WO2012037411”公开的方法制备而得)加入8mL无水乙醇中，于-78℃加入2.5M的正丁基锂(0.8mL，2mmol)，于-78℃搅拌10分钟，滴加预制的2mL对溴苯甲醛(388mg，2.1mmol)的无水乙醇溶液，自然升至25℃后搅拌12小时。反应结束后，加入10mL水淬灭反应，用乙酸乙酯萃取(10mL×3)，有机相减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系B纯化，得到标题产物(4-溴苯基)(3-氟-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)甲醇4b(590mg，白色固体)，产率：72.8％。
第二步
(4-溴苯基)(3-氟-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)甲酮
将(4-溴苯基)(3-氟-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)甲醇4b(1.34g，3.31mmol)溶解于25mL二氯甲烷中，加入戴斯-马丁氧化剂(2.81g，6.61mmol)，于25℃反应12小时。反应结束后，将反应液减压浓缩，加入10mL饱和碳酸氢钠溶液，用乙酸乙酯萃取(10mL×3)，有机相减压浓缩，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系B纯化所得残留物，得到标题产物(4-溴苯基)(3-氟-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)甲酮4c(950mg，白色固体)，产率71.2％。
第三步
5-((4-溴苯基)(3,3,5,5-四甲基亚环己基)甲基)-3-氟-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑
将锌粉(520mg，8mmol)加入10mL四氢呋喃中，加入四氯化钛(0.44mL，4mmol)，回流反应2小时，冷却至0℃，加入四氢铝锂(0.44mL，4mmol)，冰浴下搅拌10分钟，加入三乙胺(0.28mL，2mmol)，回流反应1小时，加入预制的2mL(4-溴苯基)(3-氟-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)甲酮4c(200mg，0.5mmol)和3,3,5,5-四甲基环己酮(231mg，1.5mmol)的四氢呋喃溶液，回流反应1小时。反应结束后，加入10mL水淬灭反应，用乙酸乙酯萃取(10mL×3)，有机相减压浓缩，得粗品标题产物5-((4-溴苯基)(3,3,5,5-四甲基亚环己基)甲基)-3-氟-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑4d(270mg，无色粘稠物)，产品不经纯化直接进行下一步反应。
第四步
(E)-3-(4-((3-氟-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)(3,3,5,5-四甲基亚环己基)甲基)苯基)丙烯酸甲酯
将5-((4-溴苯基)(3,3,5,5-四甲基亚环己基)甲基)-3-氟-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑4d(210mg，0.5mmol)，0.75mL丙烯酸甲酯，三乙胺(151mg，1.5mmol)，醋酸钯(6.75mg，0.03mmol)，三(邻甲苯基)膦(18.25mg，0.06mmol)加入1.5mL N,N-二甲基甲酰胺中，于150℃微波反应1.5小时。反应结束后，加入10mL水，用乙酸乙酯萃取(10mL×3)，有机相减压浓缩，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系B纯化所得残留物，得标题产物(E)-3-(4-((3-氟-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)(3,3,5,5-四甲基亚环己基)甲基)苯基)丙烯酸甲酯4e(140mg，白色固体)，产率52.8％。
第五步
(E)-3-(4-((3-氟-1H-吲唑-5-基)(3,3,5,5-四甲基亚环己基)甲基)苯基)丙烯酸甲酯
将(E)-3-(4-((3-氟-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)(3,3,5,5-四甲基亚环己基)甲基)苯基)丙烯酸甲酯4e(140mg，0.264mmol)溶解于4.5mL乙醇中，加入0.5mL 4N的氯化氢1,4-二氧六环溶液，于50℃搅拌反应60小时。反应结束后，将反应液减压浓缩，加入10mL饱和碳酸氢钠溶液，用乙酸乙酯萃取(10mL×3)，有机层用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得粗品标题产物(E)-3-(4-((3-氟-1H-吲唑-5-基)(3,3,5,5-四甲基亚环己基)甲基)苯基)丙烯酸甲酯4f(150mg，无色粘稠物)，产品不经纯化直接进行下一步反应。
第六步
(E)-3-(4-((3-氟-1H-吲唑-5-基)(3,3,5,5-四甲基亚环己基)甲基)苯基)丙烯酸
将粗品(E)-3-(4-((3-氟-1H-吲唑-5-基)(3,3,5,5-四甲基亚环己基)甲基)苯基)丙烯酸甲酯4f(150mg，0.336mmol)溶解于5mL甲醇，加入1mL 2N的氢氧化钠溶液，于25℃搅拌反应12小时，反应结束后，将反应液减压浓缩，加入10mL水，用1N盐酸调节pH为2～3，用乙酸乙酯萃取(10mL×3)，有机相减压浓缩，用薄层色谱法以展开剂体系A纯化所得残余物，得标题产物(E)-3-(4-((3-氟-1H-吲唑-5-基)(3,3,5,5-四甲基亚环己基)甲基)苯基)丙烯酸4(60mg，黄色固体)，收率41.3％。
MS m/z(ESI):433.4[M+1]
1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ12.50(s,1H),12.35(bs,1H),7.61(d,2H),7.46-7.52(m,2H),7.40(m,1H),7.20-7.26(m,3H),6.47(m,1H),1.93(d,4H),1.28(s,2H),0.90(d,12H).
实施例5
(E)-3-(4-((1H-吲唑-5-基)(3,3,5,5-四甲基亚环己基)甲基)苯基)丙烯酸
第一步
5-((4-溴苯基)(3,3,5,5-四甲基亚环己基)甲基)-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑
将锌粉(270mg，4.16mmol)加入10mL四氢呋喃中，加入四氯化钛(394mg，2.08mmol)，回流反应2小时，冷却至0℃，加入四氢铝锂(39mg，1.04mmol)，冰浴下搅拌10分钟，加入三乙胺(101mg，1.04mmol)，回流反应1小时，加入预制的2mL(4-溴苯基)(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)甲酮1c(100mg，0.26mmol)和3,3,5,5-四甲基环己酮(111mg，0.72mmol)的四氢呋喃溶液，回流反应1小时。反应结束后，加入10mL水淬灭反应，过滤，用乙酸乙酯萃取(10mL×3)，有机相减压浓缩，残留物用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系B纯化，得标题产物5-((4-溴苯基)(3,3,5,5-四甲基亚环己基)甲基)-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑5a(150mg，白色固体)，产率76.5％。
MS m/z(ESI):507.1[M+1]
第二步
(E)-3-(4-((1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)(3,3,5,5-四甲基亚环己基)甲基)苯基)丙烯酸甲酯
将5-((4-溴苯基)(3,3,5,5-四甲基亚环己基)甲基)-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑5a(150mg，0.3mmol)、丙烯酸甲酯(127mg，1.48mmol)、三乙胺(91mg，0.9mmol)、醋酸钯(4mg，0.016mmol)、三(邻甲苯基)膦(1.0mg，0.033mmol)加入1mL N,N-二甲基甲酰胺中，于150℃微波反应1.5小时。反应结束后，加入10mL水，用乙酸乙酯萃取(30mL×2)，有机相用水洗涤(10mL×3)，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系B纯化，得标题产物(E)-3-(4-((1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)(3,3,5,5-四甲基亚环己基)甲基)苯基)丙烯酸甲酯5b(80mg，白色固体)，产率52.3％。
MS m/z(ESI):513.3[M+1]
第三步
(E)-3-(4-((1H-吲唑-5-基)(3,3,5,5-四甲基亚环己基)甲基)苯基)丙烯酸甲酯
将(E)-3-(4-((1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)(3,3,5,5-四甲基亚环己基)甲基)苯基)丙烯酸甲酯5b(80mg，0.156mmol)溶解于4mL乙醇中，加入0.5mL 4M的氯化氢1,4-二氧六环溶液，于60℃搅拌反应1小时。反应结束后，将反应液减压浓缩，得粗品标题产物(E)-3-(4-((1H-吲唑-5-基)(3,3,5,5-四甲基亚环己基)甲基)苯基)丙烯酸甲酯5c(67mg，黄色油状物)，产品不经纯化直接进行下一步反应。
第四步
(E)-3-(4-((1H-吲唑-5-基)(3,3,5,5-四甲基亚环己基)甲基)苯基)丙烯酸
将粗品(E)-3-(4-((1H-吲唑-5-基)(3,3,5,5-四甲基亚环己基)甲基)苯基)丙烯酸甲酯5c(67mg，0.156mmol)溶解于2mL甲醇和2mL四氢呋喃中，加入0.78mL 1N的氢氧化锂，于25℃搅拌反应12小时，反应结束后，将反应液减压浓缩，用1N盐酸调节pH为5，用乙酸乙酯萃取(30mL×3)，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，用薄层色谱法已展开剂体系A纯化所得残余物，得标题产物(E)-3-(4-((1H-吲唑-5-基)(3,3,5,5-四甲基亚环己基)甲基)苯基)丙烯酸5(20mg，白色固体)，收率31.3％。
MS m/z(ESI):415.4[M+1]
1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ13.02(brs,1H),12.32(brs,1H),8.03(s,1H),7.62(d,2H),7.57-7.53(m,2H),7.46(d,1H),7.24(d,2H),7.14(dd,1H),6.48(d,1H),1.97(d,4H),1.30(s,2H),0.92(d,12H).
实施例6
(E)-3-(4-((1H-吲唑-5-基)(1H-茚-2(3H)-亚基)甲基)苯基)丙烯酸
第一步
5-((4-溴苯基)(1H-茚-2(3H)-亚基)甲基)-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑
将锌粉(416mg，6.4mmol)加入15mL四氢呋喃中，加入四氯化钛(0.35mL，3.2mmol)，回流反应2小时，冷却至0℃，加入四氢铝锂(61mg，1.6mmol)，冰浴下搅拌10分钟，加入三乙胺(0.22mL，1.6mmol)，回流反应1小时，加入预制的3mL(4-溴苯基)(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)甲酮1c(154.1mg，0.4mmol)和2-茚酮(158mg，1.2mmol)的四氢呋喃溶液，回流反应1小时。反应结束后，将反应液冷却至0℃，加入20mL水淬灭反应，用乙酸乙酯萃取(80mL×2)，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系B纯化所得残留物，得标题产物5-((4-溴苯基)(1H-茚-2(3H)-亚基)甲基)-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑6a(100mg，无色固体)，产率50％。
MS m/z(ESI):487.1[M+1]
第二步
(E)-3-(4-((1H-茚-2(3H)-亚基)(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)甲基)苯基)丙烯酸甲酯
将5-((4-溴苯基)(1H-茚-2(3H)-亚基)甲基)-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑6a(100mg，0.2mmol)、1mL丙烯酸甲酯、三乙胺(0.3mL，2.0mmol)、醋酸钯(4.5mg，0.02mmol)、三(邻甲苯基)膦(6.2mg，0.02mmol)加入2mL N,N-二甲基甲酰胺中，于150℃微波反应1.5小时。反应结束后，加入30mL水，用乙酸乙酯萃取(60mL×2)，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系B纯化所得残留物，得标题产物(E)-3-(4-((1H-茚-2(3H)-亚基)(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)甲基)苯基)丙烯酸甲酯6b(65mg，无色油状)，产率35％。
MS m/z(ESI):491.2[M+1]
第三步
(E)-3-(4-((1H-吲唑-5-基)(1H-茚-2(3H)-亚基)甲基)苯基)丙烯酸甲酯
将(E)-3-(4-((1H-茚-2(3H)-亚基)(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)甲基)苯基)丙烯酸甲酯6b(35mg，0.071mmol)溶解于4mL乙醇中，加入0.5mL 4M氯化氢1,4-二氧六环溶液，于60℃搅拌反应1小时。反应结束后，将反应液减压浓缩，加入20mL二氯甲烷溶解，减压浓缩，加20mL二氯甲烷，加三滴三乙胺，减压浓缩得粗品标题产物(E)-3-(4-((1H-吲唑-5-基)(1H-茚-2(3H)-亚基)甲基)苯基)丙烯酸甲酯6c(25mg，棕色油状)，产品不经纯化直接进行下一步反应。
MS m/z(ESI):407.3[M+1]
第四步
(E)-3-(4-((1H-吲唑-5-基)(1H-茚-2(3H)-亚基)甲基)苯基)丙烯酸
将粗品(E)-3-(4-((1H-吲唑-5-基)(1H-茚-2(3H)-亚基)甲基)苯基)丙烯酸甲酯6c(25mg，0.06mmol)溶解于3mL甲醇中，加入0.5mL 2N的氢氧化钠溶液，于25℃搅拌反应12小时，反应结束后，将反应液减压浓缩，加入10mL水，用2N盐酸调节pH约为3，用乙酸乙酯萃取(30mL×2)，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系A纯化所得残留物，得标题产物(E)-3-(4-((1H-吲唑-5-基)(1H-茚-2(3H)-亚基)甲基)苯基)丙烯酸6(10mg，白色固体)，收率41％。
MS m/z(ESI):393.3[M+1]
1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ13.40(bs,1H),12.36(bs,1H),8.27(d,1H),8.23(s,1H),7.89(s,1H),7.45(d,1H),7.41-7.43(m,4H),7.33-7.40(m,5H),6.33(d,1H),3.21-3.26(m,4H).
实施例7
(E)-3-(4-((1r,3r)-金刚烷-2-亚基(1H-吲唑-5-基)甲基)苯基)丙烯酸酯
第一步
5-((1r,3r)-金刚烷-2-亚基(4-溴苯基)甲基)-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑
将锌粉(520mg，8mmol)加入20mL四氢呋喃中，加入四氯化钛(0.44mL，4mmol)，回流反应2小时，冷却至0℃，加入四氢铝锂(76mg，2mmol)，冰浴下搅拌10分钟，加入三乙胺(0.28mL，2mmol)，回流反应1小时，加入预制的5mL(4-溴苯基)(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)甲酮1c(193mg，0.5mmol)和(1r,3r,5r,7r)-金刚烷-2-酮(220mg，1.5mmol)的四氢呋喃溶液，回流反应1小时。反应结束后加入20mL水淬灭反应，用乙酸乙酯萃取(10mL×3)，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系B纯化所得残留物，得标题产物5-((1r,3r)-金刚烷-2-亚基(4-溴苯基)甲基)-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑7a(200mg，白色固体)，产率80％。
第二步
(E)-3-(4-((1r,3r)-金刚烷-2-亚基(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)甲基)苯基)丙烯酸甲酯
将5-((1r,3r)-金刚烷-2-亚基(4-溴苯基)甲基)-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑7a(200mg，0.4mmol)、0.5mL丙烯酸甲酯、三乙胺(121mg，1.2mmol)、醋酸钯(5.4mg，0.024mmol)、三(邻甲苯基)膦(13.4mg，0.044mmol)加入1.5mL N,N-二甲基甲酰胺中，于150℃微波反应1.5小时。反应结束后，将反应液减压浓缩，加入10mL水，用乙酸乙酯萃取(10mL×3)，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系B纯化所得残留物，得标题产物(E)-3-(4-((1r,3r)-金刚烷-2-亚基(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)甲基)苯基)丙烯酸甲酯7b(150mg，白色固体)，产率73.9％。
第三步
(E)-3-(4-((1r,3r)-金刚烷-2-亚基(1H-吲唑-5-基)甲基)苯基)丙烯酸甲酯
将(E)-3-(4-((1r,3r)-金刚烷-2-亚基(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)甲基)苯基)丙烯酸甲酯7b(150mg，0.29mmol)溶解于5mL乙醇中，加入0.5mL 4N氯化氢1,4-二氧六环溶液，于60℃搅拌反应2小时。反应结束后，将反应液减压浓缩得粗品标题产物(E)-3-(4-((1r,3r)-金刚烷-2-亚基(1H-吲唑-5-基)甲基)苯基)丙烯酸甲酯7c(140mg，白色固体)，产品不经纯化直接进行下一步反应。
第四步
(E)-3-(4-((1r,3r)-金刚烷-2-亚基(1H-吲唑-5-基)甲基)苯基)丙烯酸
将粗品(E)-3-(4-((1r,3r)-金刚烷-2-亚基(1H-吲唑-5-基)甲基)苯基)丙烯酸甲酯7c(120mg，0.28mmol)溶解于5mL甲醇中，加入1mL 2N的氢氧化钠溶液，于25℃搅拌反应12小时，反应结束后，将反应液减压浓缩，加入10mL水，用1N盐酸调节pH为2～3，用乙酸乙酯萃取(10mL×3)，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，用高效液相色谱法纯化所得残留物，得标题产物(E)-3-(4-((1r,3r)-金刚烷-2-亚基(1H-吲唑-5-基)甲基)苯基)丙烯酸7(100mg，白色固体)，收率86.2％。
MS m/z(ESI):411.4[M+1]
1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ12.75(bs,2H),8.01(s,1H),7.44-7.60(m,5H),7.13(d,2H),7.05(d,1H),2.69(d,2H),1.95(s,2H),1.77-1.83(m,10H).
实施例8
(E)-3-(4-(双环[3.3.1]壬烷-9-亚基(1H-吲唑-5-基)甲基)苯基)丙烯酸
第一步
5-(双环[3.3.1]壬烷-9-亚基(4-溴苯基)甲基)-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑
将锌粉(270mg，4.16mmol)加入10mL四氢呋喃中，加入四氯化钛(394mg，2.08mmol)，回流反应2小时，冷却至0℃，加入四氢铝锂(39mg，1.04mmol)，冰浴下搅拌10分钟，加入三乙胺(101mg，1.04mmol)，回流反应1小时，加入预制的2mL(4-溴苯基)(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)甲酮1c(100mg，0.26mmol)和双环[3.3.1]壬烷-9-酮(107mg，0.78mmol，Aldrich Chemical Company)的四氢呋喃溶液，回流反应1小时。反应结束后加入10mL水淬灭反应，过滤，用乙酸乙酯萃取(30mL×3)，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系B纯化所得残留物，得标题产物5-(双环[3.3.1]壬烷-9-亚基(4-溴苯基)甲基)-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑8a(100mg，白色固体)，产率78％。
MS m/z(ESI):493.1[M+1]
第二步
(E)-3-(4-(双环[3.3.1]壬烷-9-亚基(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)甲基)苯基)丙烯酸甲酯
将5-(双环[3.3.1]壬烷-9-亚基(4-溴苯基)甲基)-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑8a(100mg，0.2mmol)、丙烯酸甲酯(86mg，1.0mmol)、三乙胺(61mg，0.6mmol)、醋酸钯(3mg，0.012mmol)、三(邻甲苯基)膦(7mg，0.022mmol)加入1mL N,N-二甲基甲酰胺中，于140℃微波反应1.5小时。反应结束后，将反应液减压浓缩，加入10mL水，用乙酸乙酯萃取(20mL×3)，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系B纯化所得残留物，得标题产物(E)-3-(4-(双环[3.3.1]壬烷-9-亚基(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)甲基)苯基)丙烯酸甲酯8b(100mg，黄色油状物)，产率98.7％。
MS m/z(ESI):497.3[M+1]
第三步
(E)-3-(4-(双环[3.3.1]壬烷-9-亚基(1H-吲唑-5-基)甲基)苯基)丙烯酸甲酯
将(E)-3-(4-(双环[3.3.1]壬烷-9-亚基(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)甲基)苯基)丙烯酸甲酯8b(100mg，0.2mmol)溶解于2mL乙醇中，加入0.2mL 5N氯化氢1,4-二氧六环溶液，于70℃搅拌反应0.5小时。反应结束后，将反应液减压浓缩，得粗品标题产物(E)-3-(4-(双环[3.3.1]壬烷-9-亚基(1H-吲唑-5-基)甲基)苯基)丙烯酸甲酯8c(100mg，黄色油状物)，产品不经纯化直接进行下一步反应。
MS m/z(ESI):413.2[M+1]
第四步
(E)-3-(4-(双环[3.3.1]壬烷-9-亚基(1H-吲唑-5-基)甲基)苯基)丙烯酸
将粗品(E)-3-(4-(双环[3.3.1]壬烷-9-亚基(1H-吲唑-5-基)甲基)苯基)丙烯酸甲酯8c(100mg，0.2mmol)溶解于2mL四氢呋喃和4mL甲醇中，加入0.6mL 1N的氢氧化锂溶液，于25℃搅拌反应12小时，反应结束后，将反应液减压浓缩，用1N盐酸调节pH为5，用乙酸乙酯萃取(30mL×3)，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，用薄层色谱法以洗脱剂A纯化所得残留物，得标题产物(E)-3-(4-(双环[3.3.1]壬烷-9-亚基(1H-吲唑-5-基)甲基)苯基)丙烯酸8(10mg，白色固体)，收率12.5％。
MS m/z(ESI):399.3[M+1]
1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ1.30-1.37(m,3H),1.42-1.46(m,2H),1.61-1.68(m,3H),1.76-1.85(m,4H),2.43-2.47(m,2H),6.48(d,1H),7.12(d,1H),7.27(d,2H),7.45(d,1H),7.51-7.54(m,2H),7.59-7.63(m,2H),8.01(s,1H),12.35(brs,1H),13.00(brs,1H).
实施例9
(E)-3-(4-((1H-吲唑-5-基)(2,2,6,6-四甲基二氢-2H-吡喃-4(3H)-亚基)甲基)-3,5-二氟苯基)丙烯酸
第一步
5-((4-溴-2,6-二氟苯基)(2,2,6,6-四甲基二氢-2H-吡喃-4(3H)-亚基)甲基)-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑
将锌粉(1.04g，16mmol)加入20mL四氢呋喃中，加入四氯化钛(0.88mL，8mmol)，回流反应2小时，冷却至0℃，加入四氢铝锂(152mg，4mmol)，冰浴下搅拌10分钟，加入三乙胺(0.56mL，4mmol)，回流反应1小时，加入预制的5mL(4-溴-2,6-二氟苯基)(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)甲酮3b(421mg，1mmol)和2,2,6,6-四甲基二氢-2H-吡喃-4(3H)-酮(469mg，3mmol，采用专利申请“WO2012068589”公开的方法制备而得)的四氢呋喃溶液，回流反应1小时。反应结束后，加入20mL水淬灭反应，用乙酸乙酯萃取(10mL×3)，有机相减压浓缩，残留物用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系B纯化，得标题产物5-((4-溴-2,6-二氟苯基)(2,2,6,6-四甲基二氢-2H-吡喃-4(3H)-亚基)甲基)-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑9a(220mg，白色固体)，产率40.4％。
第二步
(E)-3-(3,5-二氟-4-((1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)(2,2,6,6-四甲基二氢-2H-吡喃-4(3H)-亚基)甲基)苯基)丙烯酸甲酯
将5-((4-溴-2,6-二氟苯基)(2,2,6,6-四甲基二氢-2H-吡喃-4(3H)-亚基)甲基)-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑9a(120mg，0.22mmol)、0.25mL丙烯酸甲酯、三乙胺(67mg，0.66mmol)、醋酸钯(2.98mg，0.0133mmol)、三(邻甲苯基)膦(8.07mg，0.0265mmol)加入0.5mL N,N-二甲基甲酰胺中，于150℃微波反应1.5小时。反应结束后，加入10mL水，用乙酸乙酯萃取(10mL×3)，有机相减压浓缩，残余物用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系B纯化，得标题产物(E)-3-(3,5-二氟-4-((1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)(2,2,6,6-四甲基二氢-2H-吡喃-4(3H)-亚基)甲基)苯基)丙烯酸甲酯9b(88mg，无色粘稠物)，产率72.7％。
第三步
(E)-3-(4-((1H-吲唑-5-基)(2,2,6,6-四甲基二氢-2H-吡喃-4(3H)-亚基)甲基)-3,5-二氟苯基)丙烯酸甲酯
将(E)-3-(3,5-二氟-4-((1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)(2,2,6,6-四甲基二氢-2H-吡喃-4(3H)-亚基)甲基)苯基)丙烯酸甲酯9b(88mg，0.16mmol)溶解于5mL乙醇中，加入0.5mL 4M的氯化氢1,4-二氧六环溶液，于60℃搅拌反应1小时。反应结束后，将反应液减压浓缩，加入10mL饱和碳酸氢钠溶液，用乙酸乙酯萃取(10mL×3)，有机层用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得粗品标题产物(E)-3-(4-((1H-吲唑-5-基)(2,2,6,6-四甲基二氢-2H-吡喃-4(3H)-亚基)甲基)-3,5-二氟苯基)丙烯酸甲酯9c(80mg，白色固体)，产品不经纯化直接进行下一步反应。
第四步
(E)-3-(4-((1H-吲唑-5-基)(2,2,6,6-四甲基二氢-2H-吡喃-4(3H)-亚基)甲基)-3,5-二氟苯基)丙烯酸
将粗品(E)-3-(4-((1H-吲唑-5-基)(2,2,6,6-四甲基二氢-2H-吡喃-4(3H)-亚基)甲基)-3,5-二氟苯基)丙烯酸甲酯9c(80mg，0.17mmol)溶解于5mL甲醇，加入0.5mL15％的氢氧化钠溶液，于25℃搅拌反应12小时，反应结束后，将反应液减压浓缩，加入10mL水，用2N盐酸调节pH为2～3，用乙酸乙酯萃取(10mL×3)，有机相减压浓缩，用高效液相色谱法纯化所得残余物，得标题产物(E)-3-(4-((1H-吲唑-5-基)(2,2,6,6-四甲基二氢-2H-吡喃-4(3H)-亚基)甲基)-3,5-二氟苯基)丙烯酸9(40mg，白色固体)，收率51.5％。
MS m/z(ESI):453.4[M+1]
1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ13.08(bs,1H),12.60(bs,1H),8.06(s,1H),7.49-7.58(m,5H),7.18(d,1H),6.65(d,1H),2.24(s,2H),2.05(s,2H),1.14(d,12H).
实施例10
(E)-3-(4-((1H-吲唑-5-基)(2,2,6,6-四甲基二氢-2H-吡喃-4(3H)-亚基)甲基)苯基)丙烯酸
第一步
5-((4-溴苯基)(2,2,6,6-四甲基二氢-2H-吡喃-4(3H)-亚基)甲基)-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑
将锌粉(520mg，8mmol)加入20mL四氢呋喃中，加入四氯化钛(0.44mL，4mmol)，回流反应2小时，冷却至0℃，加入四氢铝锂(76mg，2mmol)，冰浴下搅拌10分钟，加入三乙胺(0.28mL，2mmol)，回流反应1小时，加入预制的5mL(4-溴苯基)(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)甲酮1c(193mg，0.5mmol)和2,2,6,6-四甲基二氢-2H-吡喃-4(3H)-酮(200mg，1.28mmol)的四氢呋喃溶液，回流反应1小时。反应结束后，加入10mL水淬灭反应，用乙酸乙酯萃取(10mL×3)，有机相减压浓缩，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系B纯化所得残留物，得标题产物5-((4-溴苯基)(2,2,6,6-四甲基二氢-2H-吡喃-4(3H)-亚基)甲基)-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑10a(190mg，白色固体)，产率74.5％。
第二步
(E)-3-(4-((1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)(2,2,6,6-四甲基二氢-2H-吡喃-4(3H)-亚基)甲基)苯基)丙烯酸甲酯
将5-((4-溴苯基)(2,2,6,6-四甲基二氢-2H-吡喃-4(3H)-亚基)甲基)-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑10a(140mg，0.275mmol)、0.5mL丙烯酸甲酯、三乙胺(108mg，1.06mmol)、醋酸钯(4.8mg，0.0213mmol)、三(邻甲苯基)膦(12mg，0.039mmol)加入1.5mL N,N-二甲基甲酰胺中，于150℃微波反应1.5小时。反应结束后，加入10mL水，用乙酸乙酯萃取(10mL×3)，有机相减压浓缩，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系B纯化所得残留物，得标题产物(E)-3-(4-((1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)(2,2,6,6-四甲基二氢-2H-吡喃-4(3H)-亚基)甲基)苯基)丙烯酸甲酯10b(60mg，白色固体)，产率42.5％。
第三步
(E)-3-(4-((1H-吲唑-5-基)(2,2,6,6-四甲基二氢-2H-吡喃-4(3H)-亚基)甲基)苯基)丙烯酸甲酯
将(E)-3-(4-((1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)(2,2,6,6-四甲基二氢-2H-吡喃-4(3H)-亚基)甲基)苯基)丙烯酸甲酯10b(100mg，0.19mmol)溶解于5mL乙醇中，加入0.5mL 4N氯化氢1,4-二氧六环溶液，于60℃搅拌反应2小时。反应结束后，将反应液减压浓缩，加入10mL饱和碳酸氢钠溶液，乙酸乙酯萃取(10mL×3)，有机相减压浓缩，得粗品标题产物(E)-3-(4-((1H-吲唑-5-基)(2,2,6,6-四甲基二氢-2H-吡喃-4(3H)-亚基)甲基)苯基)丙烯酸甲酯10c(100mg，黄色固体)，产品不经纯化直接进行下一步反应。
第四步
(E)-3-(4-((1H-吲唑-5-基)(2,2,6,6-四甲基二氢-2H-吡喃-4(3H)-亚基)甲基)苯基)丙烯酸
将粗品(E)-3-(4-((1H-吲唑-5-基)(2,2,6,6-四甲基二氢-2H-吡喃-4(3H)-亚基)甲基)苯基)丙烯酸甲酯10c(100mg，0.232mmol)溶解于10mL甲醇和10mL二氯甲烷中，加入3mL 2N的氢氧化钠溶液，于25℃搅拌反应48小时，反应结束后，将反应液减压浓缩，加入10mL水，用1N盐酸调节pH为2～3，用乙酸乙酯萃取(10mL×3)，有机相减压浓缩，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系B纯化所得残留物，得标题产物(E)-3-(4-((1H-吲唑-5-基)(2,2,6,6-四甲基二氢-2H-吡喃-4(3H)-亚基)甲基)苯基)丙烯酸10(50mg，白色固体)，收率51.5％。
MS m/z(ESI):417.4[M+1]
1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ13.03(bs,1H),12.37(bs,1H),8.03(s,1H),7.46-7.63(m,5H),7.25(d,1H),7.14(d,1H),6.47(d,1H),2.18(d,4H),1.15(d,12H).
实施例11
(E)-3-(4-((E)-(3,4-二氢萘-1(2H)-亚基)(1H-吲唑-5-基)甲基)苯基)丙烯酸
第一步
(E)-5-((4-溴苯基)(3,4-二氢萘-1(2H)-亚基)甲基)-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑
将锌粉(832mg，12.8mmol)加入30mL四氢呋喃中，加入四氯化钛(0.70mL，6.4mmol)，回流反应2小时，冷却至0℃，加入四氢铝锂(122mg，3.2mmol)，冰浴下搅拌10分钟，加入三乙胺(0.44mL，3.2mmol)，回流反应1小时，加入预制的6mL(4-溴苯基)(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)甲酮1c(308.2mg，0.8mmol)和3,4-二氢萘-1(2H)-酮(350mg，2.4mmol，韶远化学科技)的四氢呋喃溶液，回流反应1小时。反应结束后，加入10mL水淬灭反应，用乙酸乙酯萃取(10mL×2)，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系B纯化所得残留物，得标题产物(E)-5-((4-溴苯基)(3,4-二氢萘-1(2H)-亚基)甲基)-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑11a(200mg，白色粘稠状物)，产率50％。
MS m/z(ESI):499.3[M+1]
第二步
(E)-3-(4-((E)-(3,4-二氢萘-1(2H)-亚基)(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)甲基)苯基)丙烯酸甲酯
将(E)-5-((4-溴苯基)(3,4-二氢萘-1(2H)-亚基)甲基)-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑11a(150mg，0.3mmol)、1.5mL丙烯酸甲酯、0.9mL三乙胺、醋酸钯(6.6mg，0.01mmol)、三(邻甲苯基)膦(9.3mg，0.03mmol)加入2mL N,N-二甲基甲酰胺中，于140℃微波反应1.5小时。反应结束后，加入30mL水，用乙酸乙酯萃取(60mL×2)，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系B纯化所得残留物，得标题产物(E)-3-(4-((E)-(3,4-二氢萘-1(2H)-亚基)(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)甲基)苯基)丙烯酸甲酯11b(52mg，无色油状)，产率35％。
MS m/z(ESI):505.3[M+1]
第三步
(E)-3-(4-((E)-(3,4-二氢萘-1(2H)-亚基)(1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)丙烯酸甲酯
将(E)-3-(4-((E)-(3,4-二氢萘-1(2H)-亚基)(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)甲基)苯基)丙烯酸甲酯11b(60mg，0.12mmol)溶解于4mL乙醇中，加入0.5mL 4M氯化氢1,4-二氧六环溶液，于60℃搅拌反应1小时。反应结束后，将反应液减压浓缩得粗品标题产物(E)-3-(4-((E)-(3,4-二氢萘-1(2H)-亚基)(1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)丙烯酸甲酯11c(50mg，无色油状)，产品不经纯化直接进行下一步反应。
第四步
(E)-3-(4-((E)-(3,4-二氢萘-1(2H)-亚基)(1H-吲唑-5-基)甲基)苯基)丙烯酸
将粗品(E)-3-(4-((E)-(3,4-二氢萘-1(2H)-亚基)(1H-吲哚-5-基)甲基)苯基)丙烯酸甲酯11c(50mg，0.12mmol)溶解于5mL甲醇中，加入1mL 2N的氢氧化钠溶液，于25℃搅拌反应3小时，反应结束后，将反应液减压浓缩，加入10mL水，用1N盐酸调节pH为2～3，用乙酸乙酯萃取(10mL×3)，有机相减压浓缩，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系B纯化所得残留物，得标题产物(E)-3-(4-((E)-(3,4-二氢萘-1(2H)-亚基)(1H-吲唑-5-基)甲基)苯基)丙烯酸11(15mg，黄色固体)，收率31.2％。
MS m/z(ESI):407.3[M+1]
1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ13.40(bs,1H),12.35(bs,1H),8.32(d,1H),8.24(s,1H),8.01(s,1H),7.45-7.56(m,5H),7.25-7.38(m,5H),6.37(d,1H),2.76-2.79(t,2H),1.91-1.97(t,2H),1.86-1.89(m,2H).
实施例12
(E)-3-(4-((3-氟-1H-吲唑-5-基)(2,2,6,6-四甲基二氢-2H-吡喃-4(3H)-亚基)甲基)苯基)丙烯酸
第一步
5-((4-溴苯基)(2,2,6,6-四甲基二氢-2H-吡喃-4(3H)-亚基)甲基)-3-氟-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑
将锌粉(5.20g，80mmol)加入100mL四氢呋喃中，加入四氯化钛(4.4mL，40mmol)，回流反应2小时，冷却至0℃，加入四氢铝锂(750mg，20mmol)，冰浴下搅拌10分钟，加入三乙胺(2.8mL，20mmol)，回流反应1小时，加入预制的10mL(4-溴苯基)(3-氟-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)甲酮4c(2.02g，5mmol)和2,2,6,6-四甲基二氢-2H-吡喃-4(3H)-酮(2.34g，15mmol)的四氢呋喃溶液，回流反应1小时。反应结束后，加入50mL水淬灭反应，用乙酸乙酯萃取(50mL×3)，有机相减压浓缩，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系B纯化所得残留物，得标题产物5-((4-溴苯基)(2,2,6,6-四甲基二氢-2H-吡喃-4(3H)-亚基)甲基)-3-氟-1-(四氢化-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑12a(2.35g，黄色粘稠物)，产率89.0％。
第二步
(E)-3-(4-((3-氟-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)(2,2,6,6-四甲基二氢-2H-吡喃-4(3H)-亚基)甲基)苯基)丙烯酸甲酯
将5-((4-溴苯基)(2,2,6,6-四甲基二氢-2H-吡喃-4(3H)-亚基)甲基)-3-氟-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑12a(2.25g，4.28mmol)、4mL丙烯酸甲酯、三乙胺(1.79mL，12.84mmol)、醋酸钯(58mg，0.256mmol)、三(邻甲苯基)膦(156mg，0.513mmol)加入10mL N,N-二甲基甲酰胺中，于150℃微波反应1.5小时。反应结束后，将反应液减压浓缩，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系B纯化所得残留物，得标题产物(E)-3-(4-((3-氟-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)(2,2,6,6-四甲基二氢-2H-吡喃-4(3H)-亚基)甲基)苯基)丙烯酸甲酯12b(1.15g，淡黄色固体)，产率50％。
第三步
(E)-3-(4-((3-氟-1H-吲唑-5-基)(2,2,6,6-四甲基二氢-2H-吡喃-4(3H)-亚基)甲基)苯基)丙烯酸甲酯
将(E)-3-(4-((3-氟-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-5-基)(2,2,6,6-四甲基二氢-2H-吡喃-4(3H)-亚基)甲基)苯基)丙烯酸甲酯12b(1.15g，2.16mmol)溶解于15mL乙醇中，加入3mL 4N的氯化氢1,4-二氧六环溶液，于60℃搅拌反应12小时。反应结束后，将反应液减压浓缩，加入10mL饱和碳酸氢钠溶液，用乙酸乙酯萃取(10mL×3)，有机层用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得粗品标题产物(E)-3-(4-((3-氟-1H-吲唑-5-基)(2,2,6,6-四甲基二氢-2H-吡喃-4(3H)-亚基)甲基)苯基)丙烯酸甲酯12c(1.10g，黄色固体)，产品不经纯化直接进行下一步反应。
第四步
(E)-3-(4-((3-氟-1H-吲唑-5-基)(2,2,6,6-四甲基二氢-2H-吡喃-4(3H)-亚基)甲基)苯基)丙烯酸
将粗品(E)-3-(4-((3-氟-1H-吲唑-5-基)(2,2,6,6-四甲基二氢-2H-吡喃-4(3H)-亚基)甲基)苯基)丙烯酸甲酯12c(1.10g，2.16mmol)溶解于10mL甲醇和2mL二氯甲烷中，加入2mL 4N的氢氧化钠溶液，于25℃搅拌反应12小时，反应结束后，将反应液减压浓缩，加入20mL水，用6N盐酸调节pH为2～3，用乙酸乙酯萃取(10mL×3)，有机相减压浓缩，用薄层色谱法以展开剂体系A纯化所得残余物，得标题产物(E)-3-(4-((3-氟-1H-吲唑-5-基)(2,2,6,6-四甲基二氢-2H-吡喃-4(3H)-亚基)甲基)苯基)丙烯酸12(350mg，白色固体)，收率37.3％。
MS m/z(ESI):435.4[M+1]
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.54(s,1H),7.63(d,2H),7.55(d,1H),7.50(s,1H),7.42(d,1H),7.26(d,2H),7.22(d,1H),6.48(d,1H),2.16(d,4H),1.14(d,12H).
生物学评价
以下结合测试例进一步说明本发明，但这些实施例并非意味着限制本发明的范围。
测试例1本发明化合物对ER活性的抑制作用
1、实验目的
本发明化合物对ER(雌激素受体)的活性具有抑制作用，从而阻断E和ER的复合物与ERE(雌激素应答元件)结合，继而阻断了下游的荧光素酶蛋白的表达。
体外化合物对E与ER结合作用的抑制效果通过以下的方法进行测试。
本实验的目的是为了测试化合物对E与ER结合的抑制作用，根据IC50大小评价化合物的体外活性。
2、实验材料及仪器
2.1实验仪器
仪器名称 供货公司 型号 Victor3 PE 1420-012 微量振荡器 海门市其林贝尔 MH-I 96孔板 Corning 3599 Votex Corning LSE Reinin Mettle Toledo EDP3-plus 50ml离心管 Corning 430828
2.2实验材料
试剂名称 供货公司 货号 ONE-GloTM荧光素酶分析系统 Promega E6110 Steady-Glo荧光素酶分析系统 Promega E2510 β-雌二醇 Sigma E2758 MEM Hyclone SH30024.01B 胎牛血清(FBS) Corning 35-076-CV 胎牛血清-无菌过滤 Moregate FBSF G418，硫酸盐 Enzo ALX-380-013-G005 丙酮酸钠溶液 Sigma S8636-100ML 非必需氨基酸溶液 Sigma M7145-100ML 青霉素-链霉素溶液 Hyclone SV30010 DMSO 上海泰坦化学 G75927B 去离子水 上海恒瑞医药 自制 ERE-pGL4.17 金唯智生物技术有限公司 合成
3、实验步骤
3.1 ERE/MCF-7单克隆细胞株的获得：
将ERE-pGL4.17这一质粒转入MCF-7细胞株(TCHu 74，ATCC)，通过在培养基中加入G418，并在96孔细胞培养板中筛选出ERE/MCF-7单克隆细胞株。
3.2化合物对E与ER活性的抑制作用实验：
ERE/MCF-7单克隆细胞株使用完全培养基(在500mL EME中加入57mL FBS、5.7mL丙酮酸钠溶液、5.7mL非必需氨基酸溶液和2.85mL 100mg/ml G418，混匀)培养，每3天传代一次。实验前一天使用不完全培养基(在500mL EME中加入57mL CS-FBS、5.7mL丙酮酸钠溶液、5.7mL非必需氨基酸溶液和2.85mL 100mg/ml G418，混匀)培养细胞。以20,000细胞/孔铺96孔板(Corning，#3599)，过夜培养至100％汇合。第二天，弃去细胞培养板中的培养基，在细胞培养板孔中加入90μl/孔的化合物稀释液(取50mL ERE-荧光素酶/MCF-7不完全培养基，加入5uL1μMβ-雌二醇重构体(E2758，Sigma)，充分混匀)。另取一块新的96孔板，加入95μl/孔的化合物稀释液。取5ul 20mM化合物的储存液加入到95μl DMSO中，混匀定为第一个浓度点，然后第一个浓度点中取10μl加入到90μlDMSO中，混匀，定为第二个浓度点，依次稀释成7个浓度点。取5uL配制好的化合物加入到95μL化合物稀释液中，取10μl稀释的化合物加入到细胞培养板中使得化合物的终浓度为10000、1000、100、10、1、0.1、0.01nM，将加了化合物的细胞培养板放入37℃培养箱中，培养5小时，弃去细胞培养液，加入50μL每孔配制好的荧光素酶底物，室温避光放置10-15分钟，然后在Victor3中读取化学发光信号值，读取的数据使用软件处理。
4、测试结果
本发明中化合物对E与ER的结合的抑制作用通过以上的试验进行测定，测得的IC50值见表1。
表1本发明中化合物对E与ER的活性的抑制作用IC50
实施例编号 IC50(nM) 3 2.81 4 0.83 5 1.22 9 0.62 10 0.29 12 0.98
结论：本发明化合物对E与ER的结合作用具有明显的抑制作用。
测试例2本发明化合物对MCF7细胞增殖的抑制效应
1、实验目的
本实验的目的是采用ATP法测试本发明化合物对MCF7细胞增殖的抑制作用，根据IC50大小评价化合物的体外活性。
2、实验试剂和材料
3、实验方法
在96孔细胞培养板中加入100μL的MCF7细胞悬液，密度为5×104细胞/ml，培养基为10％FBS的EMEM，96孔板外围只加入100μl 10％FBS的EMEM培养基。将培养板在培养箱培养24小时(37℃，5％CO2)。24小时细胞贴壁后，弃去培养基，每孔加入90μl 2％FBS的EMEM培养基和10μL配置的不同浓度的待测化合物，每个化合物两复孔。将培养板在培养箱(37℃，5％CO2)孵育72小时后，向每孔加入50μl混合后的Cell Titer-Glo(10ml缓冲液加入对应的装有底物的棕色瓶中)，振荡混匀，室温放置10分钟。取出100μl加入白色不透明的96孔板对应孔中，利用酶标仪(Victor3,PE)检测化学发光。
4、数据分析
用Graphpad Prism 5对数据进行处理分析。结果参见表2。
表2本发明化合物对MCF7细胞增殖的抑制效应的IC50
结论：本发明化合物对MCF7细胞增殖有明显的抑制作用。
测试例3本发明化合物对ERα降解作用
1、实验目的
测试本发明化合物引起ERα降解作用，该方法用来测定本发明化合物对ERα的降解作用。
2、实验材料及仪器
BioTek Synergy HT平板阅读器
MCF-7细胞系(TCHu 74，ATCC)
ERαDuoset Kit(#DYC5715E，R&D System)
3、实验方法
MCF-7细胞培养在DMEM/F-12+10％FBS培养基中。
实验第一天，将MCF-7用DMEM/F-12培养基+10％活性炭处理FBS重悬，并以50000细胞/孔接种于48孔板中培养22-24小时。
实验第二天，将待测化合物稀释至培养基中加入48孔板中；ERα捕获抗体用PBS稀释至1μg/ml，以100μl/孔加入96孔板中，封板并在室温条件包被过夜。
实验第三天，将包被过的96孔板用PBS洗2次，加入110ul/孔封闭液(1％BSA溶于PBS)，室温封闭1小时。48孔板用PBS洗1次，吸掉残余液体，向每孔加入60ul裂解液(6M尿素、1mM EDTA、0.5％TritonX-100、1mM PMSF、蛋白酶抑制剂混合物(Protease Inhibitor cocktail))于冰上裂解15分钟后，加入稀释液(1mM EDTA，0.5％TritonX-100溶于PBS)；将细胞稀释后的裂解液以100ul每孔转入封闭完毕的96孔板中，室温孵育2小时；用洗液(PBST)洗板4次后加入稀释的一抗，孵育1小时后，将96孔板洗4次加入二抗孵育30分钟；用洗液洗板后加入TMB显色15分钟后用1M硫酸终止反应读取450nm光吸收。
4、测试结果
本发明化合物对ERα降解作用所测得的IC50值见表3。
表3本发明化合物对ERα降解作用的IC50值
结论：本发明化合物对ERα有明显的降解作用。
药代动力学评价
测试例4本发明实施例4和12化合物的裸鼠药代动力学测试
1、摘要
以BALB/C裸鼠为受试动物，应用LC/MS/MS法测定了BALB/C裸鼠灌胃给予实施例化合物后不同时刻血浆中的药物浓度。研究本发明化合物在BALB/C裸鼠体内的药代动力学行为，评价其药动学特征。
2、试验方案
2.1试验药品
实施例4和12化合物
2.2试验动物
BALB/C裸鼠18只，雌性，购自上海西普尔-必凯实验动物有限公司，动物生产许可证号：SCXK(沪)2008-0016。
2.3药物配制
称取适量样品，加入9％PEG400+0.5％吐温80+0.5％PVP+90％的0.5％CMC水溶液，按顺序依次加入，超声制成0.5mg/ml混悬液。
注：
PEG400：聚乙二醇400
CMC-Na：羧甲基纤维素钠
PVP：聚乙烯吡咯烷酮K30
2.4给药
BALB/C裸鼠18只，雌性，平均分成2组；禁食一夜后分别灌胃给药，给药体积0.2ml/10g。
3、操作
BALB/C裸鼠18只，雌性，平均分成2组；禁食一夜后分别灌胃和静脉注射给药。灌胃给药组于给药后0.5、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、11.0、24.0h采血0.1ml(每个时间点3只动物)，置于肝素化试管中，3500rpm离心10min分离血浆，于-20℃保存。
用LC/MS/MS法测定不同化合物灌胃给药后BALB/C裸鼠血浆中的待测化合物含量。
4、裸鼠药代动力学参数结果
本发明实施例4和12化合物的药代动力学参数如下：
结论：本发明化合物的药代吸收良好，具有明显的药代吸收效果。
测试例5本发明实施例3、5、9和10化合物的大鼠药代动力学测试
1、摘要
以SD大鼠为受试动物，应用LC/MS/MS法测定了SD大鼠灌胃给予实施例3、5、9和10化合物后不同时刻血浆中的药物浓度。研究本发明化合物在SD大鼠体内的药代动力学行为，评价其药动学特征。
2、试验方案
2.1试验药品
实施例3、5、9、10化合物
2.2试验动物
健康成年SD大鼠16只，雌性，购自上海西普尔-必凯实验动物有限公司，动物生产许可证号：SCXK(沪)2008-0016。
2.3药物配制
称取适量样品，加入0.5％CMC-Na，超声制成0.5mg/ml混悬液。
2.4给药
健康成年SD大鼠16只，雌性，分成4组，禁食一夜后分别灌胃给药，给药体积5ml/kg。
3、操作
灌胃给药组于给药前及给药后0.5、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、11.0、24.0h由眼眶采血0.1ml，置于肝素化试管中，3500rpm离心10分钟分离血浆，于-20℃保存，给药后2h进食。
用LC/MS/MS法测定不同化合物灌胃给药后SD大鼠血浆中的待测化合物含量。
4、大鼠药代动力学参数结果
本发明实施例3、5、9、10化合物的药代动力学参数如下：
结论：本发明化合物的药代吸收良好，具有明显的药代吸收效果。