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1、(10)申请公布号 CN 102140429 A (43)申请公布日 2011.08.03 CN 102140429 A *CN102140429A* (21)申请号 201010590805.8 (22)申请日 2010.12.06 C12N 1/20(2006.01) C12R 1/38(2006.01) (71)申请人 青岛中仁药业有限公司 地址 266329 山东省青岛市胶州胶西工业园 6 号路中仁药业有限公司研发中心 (72)发明人 徐权汉 张浩 惠云龙 郑德志 (74)专利代理机构 青岛高晓专利事务所 37104 代理人 隋臻玮 (54) 发明名称 一种自然生态条件下的光合细菌发酵。
2、技术 (57) 摘要 本发明涉及一种自然生态条件下的光合细菌 发酵技术， 按照漂粉精硫酸铝钾碳酸钠重量 比为 2 5 0.5 的比例配制消毒剂 ； 光合细菌 培养剂各组分重量比为 ： 醋酸钠硫代硫酸钠 碳酸氢钠磷酸二氢钾氯化钙硫酸镁为 7 31.30.1(0.04-0.05)(0.01-0.02) ； 将培 养用水加入透光容器后， 加入重量比为 0.1的 消毒剂， 搅拌， 静置后过滤得灭菌清液 ； 在灭菌清 液中加入培养用水重量 1的光合细菌培养剂配 制成培养液， 在培养液中加入光合细菌种液， 培养 液与光合细菌种液重量比为3(0.9-1.1)， 搅拌 均匀 ； 分装至发酵容器， 留气室， 置。
3、于室外有光照 处， 15 -40下经 2-5 天的培养， 色度呈深红色 即可。本发明方法成本低、 操作简单、 规模可大可 小、 不需要固定的生产场地、 成功率高， 特别适于 农业、 养殖业者自行培养。 (51)Int.Cl. (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书 1 页 说明书 3 页 CN 102140434 A1/1 页 2 1. 一种自然生态条件下的光合细菌发酵技术， 其特征在于按照如下步骤操作 ： 第一 步， 按照漂粉精硫酸铝钾碳酸钠重量比为 2 5 0.5 的比例配制消毒剂 ； 第二步， 光 合细菌培养剂各组分重量比为 ： 醋酸钠硫代硫酸钠碳酸氢钠磷。
4、酸二氢钾氯化钙 硫酸镁为 7 3 1.3 0.1 (0.04-0.05) (0.01-0.02) ； 第三步， 将培养用水加入透 光容器后， 加入培养用水重量 0.1的消毒剂， 搅拌均匀， 静置后过滤得灭菌清液 ； 在灭菌 清液中加入培养用水重量 1的光合细菌培养剂， 充分溶解、 搅匀后成培养液， 在培养液中 加入光合细菌种液搅拌均匀， 培养液与光合细菌种液重量比为 3 (0.9-1.1) ； 把已接种好 的光合细菌分装至发酵容器中， 留气室， 置于室外有光照处， 每日搅拌数次， 15 -40下经 2-5 天的培养， 用肉眼比色或色卡比较， 色度呈深红色和原菌种相近即可， 培养后的光合细 菌数。
5、量达到 1x108/ml。 2. 根据权利要求 1 所述的一种自然生态条件下的光合细菌发酵技术， 其特征在于培养 用水为河水、 池水、 井水、 自来水。 3. 根据权利要求 1 所述的一种自然生态条件下的光合细菌发酵技术， 其特征在于所述 自然生态为不需要特定的能源和其他复杂的建筑设施， 是在完全的自然条件下培养， 光照 利用太阳能光源。 4. 根据权利要求 1 所述的一种自然生态条件下的光合细菌发酵技术， 其特征在于所述 光合细菌为 ACCC10649 沼泽红假单胞菌。 5. 根据权利要求 1 所述的一种自然生态条件下的光合细菌发酵技术， 其特征在于所用 的发酵容器为透明带盖的容器、 玻璃瓶。
6、、 白色塑料桶， 具有透光性。 权 利 要 求 书 CN 102140429 A CN 102140434 A1/3 页 3 一种自然生态条件下的光合细菌发酵技术 技术领域 ： 0001 本发明涉及一种在自然生态条件下的光合细菌发酵技术， 属微生物发酵技术领 域。 背景技术 ： 0002 光合细菌具有许多优良生理特性， 在自然界中碳、 氧、 硫等物质循环中发挥重要的 作用。在有光照或无光照、 有氧或无氧环境中均能生长， 不仅具有固氮能力， 还能供给其它 微生物氮源， 因此光合细菌和其他微生物氮源有良好的协同作用， 能促进其它微生物生长。 光合细菌是具有营养物质的有益菌， 它含有丰富的维生素、 。
7、蛋白质、 钙、 磷、 铁以及多种生理 活性物质， 如辅酶、 类胡萝卜素、 生物素、 促生长和抗病活性物质。 0003 随着对光合细菌研究的深入， 其应用范围也在不断扩大， 如光合细菌在农作物中 具有促进作物生长、 改善土质和增产作用， 可有效降解土壤中残留农药 H2S， 是良好的土壤 调节剂。光合细菌在水产养殖方面也已经得到广泛应用， 在畜牧业方面， 光合细菌也具有 良好的应用前景， 并已有许多成功的报道， 马晓来等 ( 中国科学院研究生院 ) 在河北石家 庄和保定进行大棚甜瓜、 彩椒、 西红柿、 花生的试验， 采用根施和叶面喷施。施用光合细菌 的甜瓜比对照提前 2 天成熟， 色泽鲜黄、 瓜形。
8、周正， 单瓜比对照重 11.5g ； 五彩椒比对照增产 14.3， 西红柿比对照增产 12.1， 花生比对照增产 10.9， 大田小麦每亩增产 38.3kg， 增 幅达 10.9。山西、 洪洞县杜戍村杨马汉养殖场 16 头病猪出绝食、 拉稀、 发烧症状， 先后注 射菌毒金刚和猪瘟疫苗无疗效， 饲光合细菌添加剂后， 7日后全部恢复正常。 总之， 光合细菌 是目前应用时间最长、 应用范围最广的微生态细菌。 0004 光合细菌培养技术目前有许多方法， 最常用的方法是光合细菌发酵反应器和水池 式培养。光合细菌发酵反应器， 类似于细菌液体深层发酵反应器， 设内置光源， 该反应器价 格昂贵， 设备投资大，。
9、 生产成本高， 运转时能耗较大， 发酵容量有限， 难以满足生产的需要。 还有一类是单细胞藻培养的方法， 该方法易污染、 成功率低、 实际操作复杂， 用水池培养， 质 量难以稳定。 发明内容 ： 0005 本发明的目的在于克服现有技术的缺点， 旨在提供一种自然生态条件下的光合细 菌发酵技术， 本发明方法简单易行， 成本低， 不需要复杂的发酵反应器， 易于推广应用。 0006 为了实现上述发明目的， 本发明的一种自然生态条件下的光合细菌发酵技术按照 如下步骤操作 ： 0007 第一步， 水源消毒剂的配制 ： 按照漂粉精硫酸铝钾碳酸钠重量比为 250.5的比例配制净化消毒剂。 漂粉精和硫酸铝钾均为工。
10、业级， 漂粉精能杀灭水源中 绝大部分的单胞藻、 原生动物及各类细菌， 硫酸铝能使水中混浊物絮凝沉淀。 消毒剂的用量 为培养用水重量的 0.1。 0008 第二步， 光合细菌培养剂的配制 ： 培养剂是无氮源的无机化合物为原料配制而成， 说 明 书 CN 102140429 A CN 102140434 A2/3 页 4 由醋酸钠 (CH3COONa 3H2O)、 硫代硫酸钠 (Na2S2O3 5H2O)、 碳酸氢钠、 磷酸二氢钾、 氯化钙、 硫 酸镁组成， 各组分重量比为 ： 醋酸钠硫代硫酸钠碳酸氢钠磷酸二氢钾氯化钙硫 酸镁为 7 3 1.3 0.1 (0.04-0.05) (0.01-0.02。
11、)， 培养剂用量为培养用水重量的 1。 0009 上述培养剂作用是 ： 提供光合细菌生长繁殖的必须营养物质 ； 能分解消毒剂中的 残毒 ； 不含氮源， 绝大部分异养菌的营养要素是C源与N源， 无N源一般异养菌难以生存 ； 能 快速夺取水中的氧， 使培养剂为缺氧溶液， 使一般的好氧细菌无法生存。其中， 硫代硫酸钠 的作用是 ： 光合细菌营养源、 中和漂粉精中的余氯、 作为还原剂能去除培养剂中的溶解氧， 使培养液处于厌氧状态。醋酸钠的作用是 ： 光合细菌营养源、 高浓度的醋酸钠具有杀菌作 用。碳酸氢钠作用是 ： 光合细菌营养源、 使培养剂的 PH 值呈碱性状态。钙、 镁、 磷、 钾为光合 细菌培养。
12、剂的微量元素。 0010 第三步， 光合细菌培养步骤 ： 培养用水 ( 河水、 池水、 井水、 自来水 ) 加入透光容器 后， 加入 0.1 ( 重量百分比 ) 的消毒剂， 搅拌均匀， 静置后过滤得灭菌清液 ； 在灭菌清液中 加入 1 ( 重量百分比 ) 的光合细菌培养剂， 充分溶解、 搅匀后成培养液， 培养液呈厌氧、 无 氮、 碱性、 高醋酸钠状态， 在培养液中加入光合细菌种液搅拌均匀， 培养液与光合细菌种液 重量比为 3 (0.9-1.1) ； 把已接种好的光合细菌分装至发酵容器中， 注意面 1/5 留气室， 加盖， 置于室外有光照处， 每日搅拌数次， 15 -40下经 2-5 天的培养，。
13、 用肉眼比色或色卡 比较， 色度呈深红色， 和原菌种相近即可， 培养后的光合细菌的数量可达到 1x108/ml。 0011 本发明所述自然生态为不需要特定的能源和其他复杂的建筑设施， 是在完全的自 然条件下培养， 光照利用太阳能光源， 水源可以用自来水、 池塘水、 井、 河水， 甚至有机废水、 沼液等 ( 但不能使用有化学药品、 重金属离子等有毒水源 )。 0012 本 发 明 所 述 光 合 细 菌 为 ACCC10649 沼 泽 红 假 单 胞 菌 (Rhodop seudanonas palustris)， 从中国农业微生物菌种保藏中心购得， 一般市售光合细菌均为此种。 光合细菌 在有氧。
14、、 无氧、 有光、 无光中均能生长， 在有光照的情况下， 由于光合细菌能产生鲜艳的红色 ( 红螺菌科沼泽红光合细菌 )， 无光照的条件下也能生长， 但是无色， 但经光照后， 无色光合 细菌经光合作用仍可产生红色素， 因此， 培养的光合细菌晚上无需补充光照。 0013 本发明方法所用的发酵容器为透明带盖的容器、 玻璃瓶、 白色塑料桶等均可， 具有 透光性， 在阳光照射下其光强度已经足够。 容器在阳光下产生温室效应， 其内温度比室外温 度高 3 5 度， 有利于光合细菌生长。容器内部形成与外界隔离的小气候环境， 因此， 刮风 下雨不影响， 外界杂菌也难以侵入。 0014 本发明方法成本低、 操作简。
15、单、 规模可大可小、 不需要固定的生产场地、 灵活机动、 成功率高， 特别适于农业、 养殖业者自行培养。 具体实施方式 ： 0015 下面结合具体实施例对本发明做进一步的阐述。 0016 实施例 1 0017 第一步， 水源消毒剂的配制 ： 15g 0018 配方 ： 漂粉精 ( 工业级 )4g 0019 钾明矾 ( 工业级、 硫酸铝钾 )10g 说 明 书 CN 102140429 A CN 102140434 A3/3 页 5 0020 碳酸钠 1g 0021 第二步， 光合细菌培养剂的配制 ： 100g 0022 配方 ： 醋酸钠 61.1g(CH3COONa3H2O) 0023 硫代硫。
16、酸钠 26.2g(Na2S2O35H2O) 0024 碳酸氢钠 11.3g(NaHCO3) 0025 磷酸二氢钾 0.9g(KH2PO4) 0026 氯化钙 0.4g(CaCl2) 0027 硫酸镁 0.1g(MgSO4) 0028 第三步， 光合细菌培养步骤 ： 将 10L 培养用水 ( 河水、 池水、 井水、 自来水 ) 加入透 光容器后， 加入 10g 消毒剂， 搅拌均匀， 静置后过滤得灭菌清液 ； 在灭菌清液中加入 100g 光 合细菌培养剂， 充分溶解、 搅匀后成培养液， 培养液呈厌氧、 无氮、 碱性、 高醋酸钠状态， 在培 养液中加入 3L ACCC10649 沼泽红假单胞种液搅拌。
17、均匀 ； 把已接种好的光合细菌分装至乳 白色带盖塑料桶， 注意面 1/5 留气室， 加盖， 置于室外有光照处 ； 每日搅拌数次， 15 -40 下经 2-5 天的培养， 用肉眼比色或色卡比较， 色度呈深红色， 和原菌种相近即可。培养后的 光合细菌的数量可达到 1x108/ml。 0029 实施例 2 0030 第一步， 水源消毒剂的配制 ： 750g 0031 配方 ： 漂粉精 ( 工业级 )200g 0032 钾明矾 ( 工业级、 硫酸铝钾 )500g 0033 碳酸钠 50g 0034 第二步， 光合细菌培养剂的配制 ： 100kg 0035 配方 ： 醋酸钠 61.1kg(CH3COON。
18、a3H2O) 0036 硫代硫酸钠 26.2kg(Na2S2O35H2O) 0037 碳酸氢钠 11.3kg(NaHCO3) 0038 磷酸二氢钾 0.9kg(KH2PO4) 0039 氯化钙 0.4kg(CaCl2) 0040 硫酸镁 0.1kg(MgSO4) 0041 取 750Kg 清水 ( 自来水、 井水均可 ) 加入 750g 固体消毒剂， 搅拌均匀， 消毒 12 小 时左右， 静置后过滤得灭菌清液 ； 在灭菌清液中加入培养剂 7.5Kg， 充分溶解、 搅拌， 加入 250KgACCC10649沼泽红假单胞菌菌种并搅拌， 总量约为1000Kg， 分装至100Kg的白塑料桶， 每桶 80Kg， 约 12 桶， 放至太阳照射区 ( 高温季节注意中午温度不超过 40， 如超过 40时 要遮阴或移至阴凉处 ； 低温季节注意晚间保温 )， 经 2 5 天， 与菌种比色， 二者色度一样或 相近即可， 如为连阴天可延长培养时间。培养后的光合细菌的数量可达到 1x108/ml。 说 明 书 CN 102140429 A 。