技术领域
本发明涉及粗品肝素钠的提取工艺方法，具体涉及一种粗品肝素钠的分级酒沉工艺。
背景技术
肝素钠存在于动物的心、肝、脾、肺、胸腺、肌肉、血管等，以O-连接形式与核心蛋白（coreprotein，CP）形成肝素蛋白聚糖（heparinproteoglycan,Hep-PG）。具有降血脂、抗动脉粥样硬化、免疫调节、抗炎、抗肿瘤、抗单纯孢疹病毒、抗凝血等生物活性。是目前世界上产量和销售量最大的来自天然的糖类药物。
我国是肝素钠生产大国，提取肝素主要采用盐解法和酶解法，一般是经过分解、吸附、脱附、酒沉和烘干5个工艺步骤，目前的酒沉步骤是将脱附液直接加酒精至相应的酒精度数得到粗品肝素的沉淀，这样得到的肝素杂质含量高、效价低、成品品质等级低使得肝素的总得率降低且亿单位肝素的价格低，直接影响生产经济效益。因此在酒沉工艺中减少杂质、提升成品的品级，从而提高经济效益，也是本发明的意义所在。
发明内容
针对粗品肝素生产酒沉工艺中得到的肝素杂质含量高、效价低、成品品质等级低的问题，本发明提出一种分级酒沉工艺，其操作简便，所得肝素杂质含量低，效价高，品级高。
为了达到上述目的，本发明的技术方案是：
一种粗品肝素钠的分级酒沉工艺，将肝素脱附液中加入一定酒精，调pH，离心除杂，再加酒精沉淀，获得酒沉肝素钠。具体工艺步骤如下：
（1）向肝素钠的脱附液中加入85%-95%酒精，比例按脱附液：酒精（V/V）=1-1.2：1，搅拌7-10min至均匀
（2）调pH=2-4，静置5-10min后，离心，分别收集沉淀和上清液。
（3）由（2）得上清调pH=10-11，静置10-15min，离心，分别收集沉淀和上清液。
（4）由（3）得上清调pH=6.5-7.5，继续加85%-95%酒精调酒精度至30-38°，静置8-10h，收集沉淀，经脱水烘干后得产品粗品肝素钠。
所述粗品肝素钠的分级酒沉工艺，所得粗品肝素钠的效价在130-150USPU/mg，杂蛋白含量在5%以下。
所述粗品肝素钠的分级酒沉工艺，步骤（1）中，肝素钠的脱附液的盐度为15-19°（20℃下）；
所述粗品肝素钠的分级酒沉工艺，步骤（2）中，调节pH时所用的酸为1-2mol/L的盐酸溶液，步骤（2）的操作环境在20℃以下，边搅拌边调节。
所述粗品肝素钠的分级酒沉工艺，步骤（3）中，调节pH时所用的碱为2-3mol/L的氢氧化钠溶液；
所述粗品肝素钠的分级酒沉工艺，步骤（2）（3）中，所得沉淀，复溶后，再经酒沉，烘干后，用于保健品、化妆品等途径；
所述粗品肝素钠的分级酒沉工艺，步骤（4）中，调节pH时所用的酸为1-2mol/L的盐酸溶液，边搅拌边调节，避免局部pH过低。
本发明的优点和有益效果为：
（1）本发明通过分级醇沉，能够有效的除掉粗品肝素中的蛋白酸碱性蛋白及核酸类等杂质，在脱附液：酒精（V/V）=1-1.2：1时调pH至2-4，既利于除去杂质，有有效的避免了肝素活性基团的损失，之后调pH=10-11，能够有效的除去混杂在肝素中的碱性蛋白，二次分级醇沉后获得粗品肝素杂质含量低，效价高（130-150USPU/mg），品级高，出成率可达到1400-1600根/亿单位。
（2）本发明粗品肝素钠的分级酒沉工艺具有操作简单，得率高，适合工业生产，能够解决粗品肝素行业中所得产品杂质含量高，品级低的缺陷，具有重要的市场应用前景。
具体实施方式
实施例1
一种粗品肝素钠的分级酒沉工艺，将肝素脱附液中加入一定酒精，调pH，离心除杂，再加酒精沉淀，获得酒沉肝素钠。具体工艺步骤如下：
（1）向肝素钠的脱附液中加入85%-95%酒精，比例按脱附液：酒精（V/V）=1-1.2：1，搅拌7-10min至均匀；肝素钠的脱附液的盐度为15-19°（20℃下）；
（2）调pH=2-4，静置5-10min后，离心，分别收集沉淀和上清液；调节pH时所用的酸为1-2mol/L的盐酸溶液，步骤（2）的操作环境在20℃以下，边搅拌边调节；
（3）由（2）得上清调pH=10-11，静置10-15min，离心，分别收集沉淀和上清液；调节pH时所用的碱为2-3mol/L的氢氧化钠溶液；
（4）由（3）得上清调pH=6.5-7.5，继续加85%-95%酒精调酒精度至30-38°，静置8-10h，收集沉淀，经脱水烘干后得产品粗品肝素钠；所得粗品肝素钠的效价在130-150USPU/mg，杂蛋白含量在5%以下；调节pH时所用的酸为1-2mol/L的盐酸溶液，边搅拌边调节，避免局部pH过低。
所述粗品肝素钠的分级酒沉工艺，步骤（2）（3）中，所得沉淀液和上清液，复溶后，再经酒沉，烘干后，可以制作出保健品、化妆品等。可以溶液再利用，防止浪费，防止污染，产生效益。