一种光-生耦合定向转化低变质煤的方法.pdf

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1、(10)授权公告号 CN 101580851 B (45)授权公告日 2011.04.06 CN 101580851 B *CN101580851B* (21)申请号 200910022992.7 (22)申请日 2009.06.19 C12P 1/00(2006.01) C12P 39/00(2006.01) C12R 1/645(2006.01) C12R 1/80(2006.01) C12R 1/20(2006.01) (73)专利权人 西安科技大学 地址 710054 陕西省西安市雁塔路中段58号 (72)发明人 周安宁 孟庆宇 王永娟 张亚婷 曾梅 (74)专利代理机构 西安创知专利。

2、事务所 61213 代理人 谭文琰 (54) 发明名称 一种光 - 生耦合定向转化低变质煤的方法 (57) 摘要 本发明公开了一种光 - 生耦合定向转化低变 质煤的方法，该方法包括以下步骤 ：(1) 光氧化 煤粉的制备 ；(2) 光氧化煤粉的碱抽提 ；(3) 光 氧化煤粉及碱抽提后光氧化煤粉的微生物转化， 微生物转化所用的菌株是粗壮串珠霉、黄绿青 霉、黄杆菌及三株菌的混合菌。本发明通过选择 合适的转化条件转化低变质煤，通过控制煤粉的 光氧化时间、接种量、转化条件以及光氧化煤粉 的用量可以有效提高低变质煤基再生腐殖酸的产 量，不仅可以实现煤炭绿色转化、高附加值利用 及提高资源有效利用率 ；而且用。

3、物理和生物的 方法可以提高煤基腐殖酸的产率，降低腐殖酸生 产成本，不污染环境。 (51)Int.Cl. 审查员 王航 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利 权利要求书 1 页 说明书 6 页 附图 1 页 CN 101580851 B1/1 页 2 1. 一种光 - 生耦合定向转化低变质煤的方法， 其特征在于该方法包括以下步骤 ： (1)光氧化煤粉的制备 ： 将粒度为D9010m的超细煤粉经质量浓度为95的酒精进 行灭菌， 将灭菌后的超细煤粉放入光反应器中进行光氧化， 控制氧气流量 10 40mlmin-1 使光反应器内氧气处于饱和状态， 光氧化 4 8h 后制得光氧化煤粉，。

4、 将光氧化煤粉于 100 110真空干燥， 密封避光保存， 备用， 所述超细煤粉与酒精的质量比为 1 3 5 ； (2) 光氧化煤粉的碱抽提 ： 将步骤 (1) 中的光氧化煤粉经焦磷酸钠碱抽提液抽提后生 成再生腐殖酸和碱抽提后光氧化煤粉， 将碱抽提后的光氧化煤粉用蒸馏水洗至接近中性后 于 100 110真空干燥， 密封避光保存， 备用 ； (3) 光氧化煤粉及碱抽提后光氧化煤粉的微生物转化 ： 在每个 250mL 锥形瓶中加 入 50mL 无机盐液体培养基， 并用 8 层纱布封口， 115 125灭菌， 自然冷却后按 107孢 子数 /50mL 无机盐液体培养基的量将粗壮串珠菌霉， 黄绿青霉，。

5、 黄杆菌及三菌的混合菌 孢子液分别加入无菌的无机盐液体培养基中， 再加入光氧化煤粉或碱抽提后光氧化煤粉 1.000.01g， 在温度为 25 30， 转速为 120 180r/min 条件下的摇床恒温培养转化 8-14天， 将转化后的溶液倒入离心管中， 在15002500r/min的离心机中进行固液分离， 所 得的转化残渣在 50 70的条件下放在真空干燥器中干燥， 用容量法对煤粉中的再生腐 殖酸产率进行测定 ； 所述无机盐液体培养基是以光氧化煤粉或碱抽提后光氧化煤粉为唯一 碳源， pH 7， 无机盐液体培养基的原料组成为 ： KH2PO40.4 0.6g/L， Na2HPO40.4 0.6g。

6、/ L， MgSO47H2O0.1 0.3g/L， 硫酸铵 1.0 3.0g/L， CaCl20.1 0.2g/L， H2O 1000ml ； 所述低变质煤为神府煤。 2. 按照权利要求 1 所述的一种光 - 生耦合定向转化低变质煤的方法， 其特征在于 ： 步 骤 (2) 中所述碱抽提过程为 ： 将光氧化超细煤粉放入锥形瓶中， 加入焦磷酸钠碱抽提液， 摇 动锥形瓶使光氧化超细煤粉润湿， 置于沸水浴中加热抽提 2h 并经常摇动， 使光氧化超细煤 粉全部下沉， 取出锥形瓶， 冷却后过滤， 并用蒸馏水清洗碱抽提后的光氧化煤粉直至 pH 值 接近中性， 真空干燥备用 ； 每 100ml 焦磷酸钠碱抽提。

7、液中加入光氧化煤粉 0.1 0.3g。 3. 按照权利要求 1 或 2 所述的一种光 - 生耦合定向转化低变质煤的方法， 其特征 在于 ： 步骤 (3) 中所述无机盐液体培养基的原料组成为 ： KH2PO40.5g/L， Na2HPO40.5g/L， MgSO47H2O 0.2g/L， 硫酸铵 2.0g/L， CaCl20.1g/L， H2O 1000ml。 4.按照权利要求1或2所述的一种光-生耦合定向转化低变质煤的方法， 其特征在于 ： 步骤 (1) 中所述光反应器内安装有两排上下平行设置的紫外灯管 (6)， 两排上下平行设置 的紫外灯管 (6) 之间设置有用于放置超细煤粉的石英玻璃板 (。

8、8)。 5. 按照权利要求 4 所述的一种光 - 生耦合定向转化低变质煤的方法， 其特征在于 ： 每 排紫外灯管 (6) 的数量为 3 只， 每只紫外灯管 (6) 的功率为 15W。 权 利 要 求 书 CN 101580851 B1/6 页 3 一种光 - 生耦合定向转化低变质煤的方法 技术领域 0001 本发明属于煤粉处理应用技术领域， 涉及一种低变质煤的转化方法， 尤其是涉及 一种光氧化和生物耦合定向转化低变质煤的方法。 背景技术 0002 煤的微生物转化研究始于 20 世纪 80 年代， 目前已经取得了不少成果， 随着石油 资源的枯竭和生物技术的发展， 煤炭的生物转化技术会有很大发展。。

9、目前煤炭的微生物 转化领域已经分离鉴定出来的溶 ( 降解 ) 解煤试验的微生物很多。细菌类有 Bacillus subtilis， Bacillus pumilus， Bacilluscereus 和 Pseudomonas cepacia strain DLC-07。 放 线 菌 类 有 Streptomycesflavovirens， Streptomyces viridosporus， Streptomyces 75V12 和 Streptomyces badius 252。真菌类的担子菌属中有 Trametes versicolor， Polyporous versicolor， Po。

10、ria placenta 和 Phanerochaetechrysosporium ； 酵 母 菌 中 的一些种及丝状真菌 Aspergillussp.， Aspergillus terreus， Aspergillus terricola， Apergillusochraceous， Paecilomyces spp.。在这些菌属中， 云芝、 青霉、 假单胞菌的液化 能力较强。试验用过的煤种有风化煤， 褐煤， 甚至年轻烟煤。 0003 美国发明专利申请公开说明书中， 申请号为 5670345 所述的用生物技术从煤中获 得腐殖酸和洁净燃料 ( 酒精， 甲烷 ) 的方法。所用的微生物为细菌 Mi。

11、c-1 或 KSARC56。用这 种方法同样可以把芳香族化合物如苯酚和它的同系物转化为甲烷或二氧化碳。 0004 美国发明专利申请公开说明书中， 应用号为 220686 所述的将废弃的生物质原料 ( 包括煤 )， 利用厌氧微生物转化为合成气， 再将合成气转化为其他有用的产品， 如氢、 醇 类和酸类。在整个转化过程中包括生物质原料生成最初的合成气， 然后冷却合成气， 最后 将合成气转化为别的有用的产品。这里所用的厌氧微生物为细菌 ERIH1 和杆状细菌 ATCC 55404。 0005 美国发明专利申请公开说明书中， 应用号为 540598 所述用生物技术将煤转化为 甲烷的方法。方法中所用的微生。

12、物取自于地表以下的地层中， 比如被开采过的矿。将分离 出的微生物注入到开采后的煤矿， 可以在不污染环境的情况下再次得到能源甲烷。 0006 美国发明专利申请公开说明书中， 申请号为 5885825 提供了一种用生物化学的方 法将固体碳材料 ( 煤 ) 转化的方法。专利中发现了一种新的可以将固体碳材料 ( 煤 ) 转化 的微生物。 0007 美国发明专利申请公开说明书中， 申请号为 5459065 利用白腐真菌可以将煤焦油 和其他的一些芳香族化合物降解， 白腐真菌在降解煤焦油过程中部分是依靠其自身分泌的 木质素过氧化物酶。 0008 美国发明专利申请公开说明书中， 应用号为662214。 与专利。

13、5459065相同， 只是所 用的微生物为 Phanerochaete chrysosporium. 0009 中国发明专利申请公开说明书中， 申请号为 200710180054 所述一种腐殖酸有机 肥的生产方法， 用放线菌、 光合菌、 孢子菌、 丝状菌、 乳酸菌、 酵母菌、 水、 肉汤、 红糖水培养出 说 明 书 CN 101580851 B2/6 页 4 活性生物菌液和放大成活性生物菌水。以风化煤、 干鸡粪、 棉籽饼、 膨润土为主料， 混合， 兑 加生物菌水， 搅拌， 堆放， 自然发酵成腐熟物。加入尿素、 过磷酸钙、 硫酸钾， 混合均匀， 粉碎 成粉末。造粒。将动物血、 骨骼、 杂碎、 植。

14、物油渣绞碎， 水煮， 消毒， 过滤， 将光合菌、 放线菌、 乳酸菌兑入红糖水中， 将红糖水加到滤液中， 再加入酵母菌， 保温自然发酵， 转化为液态氨 基酸。加水稀释， 再将稀释液喷洒在粒料上上色， 送入烘干机烘干， 出料。 0010 中国发明专利申请公开说明书中， 申请号为 02158189 所述一种微生物降解低能 量煤生产黄腐酸的方法， 将原料与辅料混合， 加入降解菌株， 对煤进行发酵， 得到黄腐酸 ； 所述辅料包括天然植物碳源、 天然植物蛋白源、 尿素 ； 所述降解菌是青霉菌 Penicillium sp.LNP6CGMCC 0866 或芽胞杆菌 Bacill us sp.BJB2 CGM。

15、CC 0867。这种方法可从褐煤、 风 化煤和煤矸石等多种来源得到黄腐酸， 且产量比化学法明显提高 ； 所得黄腐酸活性强， 由于 生物降解作用， 所得黄腐酸分子明显变小， 氧和氮含量增加， 絮凝极限大 ； 发酵、 提取过程不 使用化学溶剂， 不会产生污染环境的二次废物 ； 辅料为农业下脚料， 残渣可作有机肥使用， 可实现能源的可持续利用。 0011 不同的煤种， 生物溶解产物是不同的， 同一煤种， 使用的菌株不同， 溶煤产物也不 同。到目前为止未见使用粗壮串珠菌霉、 黄绿青霉和黄杆菌进行溶煤的报道。 发明内容 0012 本发明所要解决的技术问题在于针对上述现有技术中的不足， 提供一种光 - 生。

16、耦 合定向转化低变质煤的方法， 该方法通过光氧化和生物转化耦合， 一方面提高低变质煤的 转化率， 另一方面提高低变质煤再生腐殖酸的产率， 从而制得精细化学品， 并实现煤的温和 条件下转化和非燃烧利用， 提高资源有效利用率。 0013 为解决上述技术问题， 本发明采用的技术方案是 ： 一种光 - 生耦合定向转化低变 质煤的方法， 其特征在于该方法包括以下步骤 ： 0014 (1) 光氧化煤粉的制备 ： 将粒度为 D90 10m 的超细煤粉经质量浓度为 95 的酒精进行灭菌， 将灭菌后的超细煤粉放入光反应器中进行光氧化， 控制氧气流量 10 40mlmin-1使光反应器内氧气处于饱和状态， 光氧化。

17、 4 8h 后制得光氧化煤粉， 将光氧 化煤粉于 100 110真空干燥， 密封避光保存， 备用， 所述超细煤粉与酒精的质量比为 1 3 5 ； 0015 (2) 光氧化煤粉的碱抽提 ： 将步骤 (1) 中的光氧化煤粉经焦磷酸钠碱抽提液抽提 后生成再生腐殖酸和碱抽提后光氧化煤粉， 将碱抽提后的光氧化煤粉用蒸馏水洗至接近中 性后于 100 110真空干燥， 密封避光保存， 备用 ； 0016 (3) 光氧化煤粉及碱抽提后光氧化煤粉的微生物转化 ： 在每个 250mL 锥形瓶中加 入50mL无机盐液体培养基， 并用8层纱布封口， 115125灭菌， 自然冷却后按107孢子数 /50mL 无机盐液体。

18、培养基的量将粗壮串珠菌， 黄绿青霉， 黄杆菌及三菌的混合菌孢子液分别 加入无菌的无机盐液体培养基中， 再加入光氧化煤粉或碱抽提后光氧化煤粉 1.000.01g， 在温度为 25 30， 转速为 120 180r/min 条件下的摇床恒温培养转化 8-14 天， 将转 化后的溶液倒入离心管中， 在 1500 2500r/min 的离心机中进行固液分离， 所得的转化 残渣在 50 70的条件下放在真空干燥器中干燥， 用容量法对煤粉中的再生腐殖酸产 率进行测定 ； 所述液体无机盐培养基是以光氧化煤粉或碱抽提后光氧化煤粉为唯一碳源， 说 明 书 CN 101580851 B3/6 页 5 pH 7， 。

19、液体无机盐培养基的原料组成为 ： KH2PO4 0.4 0.6g/L， Na2HPO4 0.4 0.6g/L， MgSO47H2O0.1 0.3g/L， 硫酸铵 1.0 3.0g/L， CaCl2 0.1 0.2g/L， H2O 1000ml。 0017 上述步骤 (2) 中所述碱抽提过程为 ： 将光氧化超细煤粉放入锥形瓶中， 加入焦磷 酸钠碱抽提液， 摇动锥形瓶使光氧化超细煤粉润湿， 置于沸水浴中加热抽提 2h 并经常摇 动， 使光氧化超细煤粉全部下沉， 取出锥形瓶， 冷却后过滤， 并用蒸馏水清洗碱抽提后的光 氧化煤粉直至 pH 值接近中性， 真空干燥备用 ； 每 100ml 焦磷酸钠碱抽提。

20、液中加入光氧化煤 粉 0.1 0.3g。 0018 上述步骤 (3) 中所述液体无机盐培养基的原料组成为 ： KH2PO4 0.5g/L， Na2HPO4 0.5g/L， MgSO47H2O 0.2g/L， 硫酸铵 2.0g/L， CaCl2 0.1g/L， H2O1000ml。 0019 上述步骤 (1) 中所述光反应器内安装有两排上下平行设置的紫外灯管， 两排上下 平行设置的紫外灯管之间设置有用于放置超细煤粉的石英玻璃板。 0020 每排紫外灯管的数量为 3 只， 每只紫外灯管的功率为 15W。 0021 本发明所述低变质煤是指变质程度低的煤， 随着煤变质程度的加深， 煤分子内会 发生脱水。

21、、 脱羧、 脱甲烷、 脱氧和缩聚等反应， 同时碳含量也增大。 0022 本发明通过选择合适的转化条件可以提高煤的腐殖酸产量， 包括煤粉的光氧化时 间、 光照强度、 通氧量、 微生物接种量、 生物转化温度、 生物转化时间、 pH 值及培养基底物等， 该方法的微生物最佳培养温度为28。 培养基pH值可在7.0左右。 经粗壮串珠霉(Monilia crassa Sh.Et Dodge) 转化后的碱提的光氧化煤残煤的再生腐殖酸的产率为 24.64， 原 低变质煤粉的腐殖酸的含量为 4.26， 光氧化 6h 的低变质超细煤粉的再生腐殖酸产率为 10.9， 经光 - 生耦合后再生腐殖酸的产率达到 35.5。

22、4， 三菌的混合菌转化后的碱提的光 氧化煤残煤的再生腐殖酸产率为 ： 22.58， 经光 - 生耦合后再生腐殖酸的产率为 33.48。 0023 本发明与现有技术相比具有以下优点 ： 本发明通过选择合适的转化条件转化低变 质煤， 一方面可以实现煤炭绿色转化、 高附加值利用及提高资源有效利用率 ； 另一方面可以 用物理和生物的方法提高煤基腐殖酸的产率， 腐殖酸生产成本低， 不污染环境。 0024 下面通过附图和实施例， 对本发明的技术方案做进一步的详细描述。 附图说明 0025 图 1 为本发明中光氧化反应装置的结构示意图。 0026 图中 ： 1-氧气瓶 ； 2-减压阀 ； 3-气体缓冲瓶 ；。

23、 4-转子流量计 ； 5-光反应器 ； 6-紫外 灯管 ； 7- 尾气收集瓶 ； 8- 石英玻璃板。 具体实施方式 0027 如图 1 所示， 本发明一种光 - 生耦合定向转化低变质煤的方法， 包括以下步骤 ： 0028 (1) 光氧化煤粉的制备 ： 将粒度为 D90 10m 的超细煤粉经质量浓度为 95的 酒精进行灭菌， 将灭菌后的超细煤粉放入光反应器 5 中进行光氧化， 控制氧气流量 10 40mlmin-1使光反应器内氧气处于饱和状态， 光氧化 4 8h 后制得光氧化煤粉， 将光氧 化煤粉于 100 110真空干燥， 密封避光保存， 备用， 所述超细煤粉与酒精的质量比为 1 3 5 ； 。

24、所述光反应器 5 内安装有两排上下平行设置的紫外灯管 6， 两排上下平行设置 的紫外灯管 6 之间设置有用于放置超细煤粉的石英玻璃板 8。每排紫外灯管 6 的数量为 3 说 明 书 CN 101580851 B4/6 页 6 只， 每只紫外灯管 6 的功率为 15W。 0029 (2) 光氧化煤粉的碱抽提 ： 将步骤 (1) 中的光氧化煤粉经焦磷酸钠碱抽提液抽提 后生成再生腐殖酸和碱抽提后光氧化煤粉， 将碱抽提后的光氧化煤粉用蒸馏水洗至接近中 性后于100110真空干燥， 密封避光保存， 备用 ； 所述碱抽提的具体过程为 ： 将光氧化超 细煤粉放入锥形瓶中， 加入焦磷酸钠碱抽提液， 摇动锥形瓶。

25、使光氧化超细煤粉润湿， 置于沸 水浴中加热抽提 2h 并经常摇动， 使光氧化超细煤粉全部下沉， 取出锥形瓶， 冷却后过滤， 并 用蒸馏水清洗碱抽提后的光氧化煤粉直至 pH 值接近中性， 真空干燥备用 ； 每 100ml 焦磷酸 钠碱抽提液中加入光氧化煤粉 0.1 0.3g。 0030 (3) 光氧化煤粉及碱抽提后光氧化煤粉的微生物转化 ： 在每个 250mL 锥形瓶中 加入 50mL 无机盐液体培养基， 并用 8 层纱布封口， 115 125灭菌， 自然冷却后按 107孢 子数 /50mL 无机盐液体培养基的量将粗壮串珠菌霉， 黄绿青霉， 黄杆菌及三菌的混合菌 孢子液分别加入无菌的无机盐液体培。

26、养基中， 再加入光氧化煤粉或碱抽提后光氧化煤粉 1.000.01g， 在温度为 25 30， 转速为 120 180r/min 条件下的摇床恒温培养转化 8-14天， 将转化后的溶液倒入离心管中， 在15002500r/min的离心机中进行固液分离， 所 得的转化残渣在 50 70的条件下放在真空干燥器中干燥， 用容量法对煤粉中的再生腐 殖酸产率进行测定 ； 所述液体无机盐培养基是以光氧化煤粉或碱抽提后光氧化煤粉为唯一 碳源， pH7， 液体无机盐培养基的原料组成为 ： KH2PO4 0.40.6g/L， Na2HPO4 0.40.6g/ L， MgSO47H2O0.1 0.3g/L， 硫酸铵。

27、 1.0 3.0g/L， CaCl2 0.1 0.2g/L， H2O 1000ml。 0031 实施例 1 ： 神府煤的光氧化 0032 1. 煤粉的准备 0033 将粒度为 D90 10m 的神府超细原煤煤粉用质量浓度为 95的酒精灭菌， 超细 原煤煤粉与酒精的质量比为 1 4， 干燥后备用。 0034 2. 神府煤的光氧化反应 0035 将粒度为 D90 10m 的神府超细煤粉 5.00g0.01g 平铺于光反应器 5 的石英玻 璃板 8 上， 打开氧气瓶 1， 通过调节减压阀 2 和转子流量计 4 控制氧气流量为 30mlmin-1， 使光反应器 5 内的氧气处于饱和状态。6 根 15w。

28、 紫外灯管 6 照射神府超细煤粉 6h( 紫外灯 管 6 置于煤样上下各三根 )， 反应完成的尾气由尾气收集瓶 7 收集。 0036 3. 结果 0037 根据 GB/T11957-2001 规定， 运用容量法对光氧化 6h 的神府超细煤粉中的总腐殖 酸产率进行测定， 总腐殖酸的含量为 10.90。 0038 实施例 2 ： 光 - 生耦合对神府煤的转化 0039 1. 菌种 0040 粗壮串珠霉 (Monilia crassa Sh.Et Dodge)、 黄绿青霉 (Penicilliuncitreo-viride Biourge)、 黄杆菌 (Flavobacterium Bergey e。

29、t al) 及三株 菌的混合菌。 0041 2. 培养基 0042 生物转化培养基 ： 液体无机盐培养基， 121、 20min 灭菌。所述液体无机盐培养基 的原料组成为 ： KH2PO4 0.5g/L， Na2HPO4 0.5g/L， MgSO47H2O0.2g/L， 硫酸铵 2.0g/L， CaCl2 0.1g/L， H2O 1000ml。 说 明 书 CN 101580851 B5/6 页 7 0043 3. 光氧化神府煤的微生物转化 0044 在每个 250mL 锥形瓶中加入 50mL 的生物转化培养基 - 液体无机盐培养基。按 107 个孢子 /50mL 培养基的量将三株菌的孢子液加。

30、入无菌的液体无机盐培养基中， 分别再加入 光氧化煤样 1.000.01g 摇匀， 在温度为 28， 转速为 150r/min 的摇床中培养 14 天。最后 从煤转化残余物中小心挑出菌丝体， 将溶液用干燥好的定量滤纸过滤。所得残煤在 80下 干燥至恒重， 进一步计算生物转化率。 0045 4. 结果 0046 粗壮串珠霉 (Monilia crassa Sh.Et Dodge) 对光氧化神府煤的转化率为 23.89。黄绿青霉 (Penicilliun citreo-viride Biourge) 对光氧化神府煤的转化率为 27.21。 黄杆菌属(Flavobacterium Bergey et 。

31、al)对光氧化神府煤的转化率为20.11。 三菌的混合菌对光氧化神府煤的转化率较低为 5.58。 0047 实施例 3 ： 光 - 生耦合转化神府煤对再生腐殖酸的影响 0048 1. 菌种 0049 粗壮串珠霉 (Monilia crassa Sh.Et Dodge)、 黄绿青霉 (Penicilliuncitreo-viride Biourge)、 黄杆菌 (Flavobacterium Bergey et al) 及三菌 的混合菌。 0050 2. 培养基 0051 生物转化培养基 ： 液体无机盐培养基， 121、 20min 灭菌。所述液体无机盐培养基 的原料组成为 ： KH2PO4 0。

32、.5g/L， Na2HPO4 0.5g/L， MgSO47H2O0.2g/L， 硫酸铵 2.0g/L， CaCl2 0.1g/L， H2O 1000ml。 0052 3. 光氧化 6h 神府煤的碱提残煤样的制备 0053 将光氧化 6h 的神府超细煤粉用焦磷酸钠碱液抽提， 将其中的腐殖酸提取干净。提 取条件是将 0.2g( 少量多次提取 ) 光氧化超细煤粉放入 250ml 锥形瓶中， 加入焦磷酸钠碱 抽提液 100ml， 摇动锥形瓶使煤样润湿， 置于沸水浴中加热抽提 2h 并经常摇动， 使煤样全部 下沉， 取出锥形瓶， 冷却后， 过滤并用蒸馏水清洗残煤渣直至 pH 值接近中性， 干燥备用。 0。

33、054 4. 微生物对光氧化 6h 神府煤碱提残煤样的转化 0055 在每个 250mL 锥形瓶中加入 50mL 的生物转化培养基 - 液体无机盐培养基。按 107 个孢子 /50mL 培养基的量将单菌及三菌混合菌的孢子液加入无菌的液体无机盐培养基中， 再加入已灭菌的光氧化 6h 神府煤碱提残煤样 1.0040.01g， 摇匀， 在温度为 28， 转速为 150r/min的摇床中培养8-14天， 将转化后的溶液倒入离心管中， 在15002500r/min的离 心机中进行固液分离， 所得的转化残渣在5070的条件下放在真空干燥器中干燥。 根据 GB/T11957-2001 规定， 运用容量法对微。

34、生物转化生成的腐殖酸总产率进行测定。 0056 5. 结果 0057 粗壮串珠霉对光氧化 6h 神府煤碱提残煤样转化 8 天的腐殖酸的产率为 24.64。 再加上 10.90光氧化煤中的再生腐殖酸产率， 用此法可使神府煤的再生腐殖酸的产率提 高到 35.54， 而神府原煤中腐殖酸的含量仅仅为 5.71。三菌的混合菌对该残煤 14 天转 化后的腐殖酸产率为 22.58， 这样能够将神府煤中的再生腐殖酸产率提高到 33.48。 0058 以上所述， 仅是本发明的较佳实施例， 并非对本发明作任何限制， 凡是根据本发明 技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、 变更以及等效结构变化， 均仍属于本发明技 说 明 书 CN 101580851 B6/6 页 8 术方案的保护范围内。 说 明 书 CN 101580851 B1/1 页 9 图 1 说 明 书 附 图 。