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重金属废水处理的复合微生物菌剂及其制备方法和应用.pdf

  • 上传人:没水****6
  • 文档编号:8616493
  • 上传时间:2020-10-06
  • 格式:PDF
  • 页数:8
  • 大小:394.36KB
  • 摘要
    申请专利号:

    CN201711419338.0

    申请日:

    20171225

    公开号:

    CN108034602A

    公开日:

    20180515

    当前法律状态:

    有效性:

    审查中

    法律详情:

    IPC分类号:

    C12N1/20,C12N1/14,C02F3/34,C12R1/465,C12R1/785,C12R1/885,C12R1/66,C12R1/80,C12R1/745,C12R1/01,C02F101/20

    主分类号:

    C12N1/20,C12N1/14,C02F3/34,C12R1/465,C12R1/785,C12R1/885,C12R1/66,C12R1/80,C12R1/745,C12R1/01,C02F101/20

    申请人:

    江苏世邦生物工程科技有限公司

    发明人:

    谢悦波,姚竣耀,刘才群

    地址:

    211800 江苏省南京市紫金(浦口)科技创业特别社区台中路99号

    优先权:

    CN201711419338A

    专利代理机构:

    南京苏高专利商标事务所(普通合伙)

    代理人:

    王艳

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    内容摘要

    本发明公开了一种复合微生物菌剂,包括如下重量份的原料组分:加州链霉菌ATCC15436培养物50~100份、外皮毛霉菌ATCC18358培养物75~100份、纤维素分解菌培养物10~100份、固氮菌培养物10~100份和填料50~180份。该复合微生物菌剂通过加州链霉菌与外皮毛霉菌、纤维素分解菌与固氮菌的混合培养制成的粉剂对重金属离子的吸附作用,有效地净化处理排放的工业废水。

    权利要求书

    1.一种复合微生物菌剂,其特征在于:包括如下重量份的原料组分:加州链霉菌ATCC15436培养物50~100份、外皮毛霉菌ATCC18358培养物75~100份、纤维素分解菌培养物10~100份、固氮菌培养物10~100份和填料50~180份。 2.根据权利要求1所述复合微生物菌剂,其特征在于:所述纤维素分解菌培养物为木霉菌培养物、曲霉菌培养物、青霉菌培养物或头孢霉菌培养物;所述固氮菌培养物为圆褐固氮菌或拜叶林克氏菌。 3.根据权利要求1所述复合微生物菌剂,其特征在于:所述填料包括如下重量份的原料组分:聚乙烯醇0~30份、柠檬酸0~50份和纤维粉碎物50~100份。 4.权利要求1所述复合微生物菌剂的制备方法,其特征在于:包括如下步骤:(1)扩大培养:将加州链霉菌ATCC15436、外皮毛霉菌ATCC18358、纤维素分解菌和固氮菌分别接种至扩大培养基中培养,分别得到加州链霉菌ATCC15436培养物、外皮毛霉菌ATCC18358培养物、纤维素分解菌培养物和固氮菌培养物;(2)混合培养:将加州链霉菌ATCC15436培养物和外皮毛霉菌ATCC18358培养物按所述重量份接入培养基1中进行混合培养,筛选得到加州链霉菌ATCC15436和外皮毛霉菌ATCC18358的混合培养物1;将纤维素分解菌培养物和固氮菌培养物按所述重量份接入培养基2中进行混合培养,筛选得到纤维素分解菌和固氮菌的混合培养物2;(3)发酵培养:将步骤(2)所述的混合培养物1和混合培养物2分别置于无菌发酵室内进行曲盘培养发酵,发酵完成后,将所述两种发酵培养物均匀混合,再按重量份加入填料,再经干燥、粉碎、过滤,制成复合微生物菌剂。 5.根据权利要求4所述复合微生物菌剂的制备方法,其特征在于:步骤(1)中,所述扩大培养基包含如下组分浓度的组分:酵母提取物2~8g/L、胰蛋白胨5~12g/L和氯化钠4~6g/L。 6.根据权利要求4所述复合微生物菌剂的制备方法,其特征在于:步骤(2)中,所述培养基1包含如下组分浓度的组分:马铃薯提取物100~500g/L、葡萄糖25~30g/L、琼脂15~25g/L、酵母提取物15~30g/L和氯化钠3~5g/L;所述培养基2包含如下组分浓度:KHPO0.5~1g/L、MgSO·7HO0.3~1g/L、NaCl0.2~0.8g/L、CaSO·2HO0~0.3g/L、CaCO3.0~5.0g/L、FeCl0~0.01g/L、CaCl0.2~0.5g/L、甘露醇0.5~3.0g/L。 7.根据权利要求4所述复合微生物菌剂的制备方法,其特征在于:步骤(3)中,所述发酵培养的无菌发酵室内发酵温度为25~35℃,发酵时间为36~72小时;干燥温度为75~80℃。 8.权利要求1所述的复合微生物菌剂在重金属污水处理中的应用。 9.根据权利要求8所述的应用,其特征在于:在待处理的重金属污水中加入葡萄糖、蛋白胨、氮磷钾复合肥和微量元素水溶肥料,调节pH至7~8;加入所述复合微生物菌剂,剂量为50~200g/m;曝气或搅拌24~48小时,静置20~25min,过滤出水。

    说明书

    技术领域

    本发明涉及一种微生物菌剂及其制备方法和应用,尤其涉及一种用于重金属废水处理的复合微生物菌剂及其制备方法和应用。

    背景技术

    金属加工废水中的含有大量的废酸和锌、铜、铬等重金属离子以及有机光亮剂等,这些物质毒性较大,有些还含有致癌、致畸、致突变的剧毒性,但是,废水中的重金属一般不能被分解破坏,只能转移其存在位置、转变其物质形态,因此含有重金属工业废水必须进行回收处理,从而做到消除或减少对环境的污染及对人类健康的威胁。

    现有技术中,金属加工企业多使用化学试剂对污水中的重金属离子进行吸附,但是用于吸附的化学试剂在水中会造成二次污染,如不进行二次处理仍然会影响水质;为了解决二次污染的问题,人们开始使用多菌种菌剂治理污水时,然而,现有技术中的多菌种菌剂处理金属的效果不佳,残留较多,并且在制备时,需要对各菌种分别发酵培养,步骤繁琐,操作不便。

    发明内容

    发明目的:本发明的第一目的是提供一种复合微生物菌剂。

    本发明的第二目的是提供该复合微生物菌剂的制备方法。

    本发明的第三目的是提供该复合微生物菌剂的应用。

    技术方案:为了实现上述发明目的,本发明提供了一种复合微生物菌剂,包括如下重量份的原料组分:加州链霉菌ATCC15436培养物50~100份、外皮毛霉菌ATCC18358培养物75~100份、纤维素分解菌培养物10~100份、固氮菌培养物10~100份和填料50~180份。

    优选地,纤维素分解菌培养物为木霉菌培养物、曲霉菌培养物、青霉菌培养物和枝顶孢霉菌培养物中的一种或几种;固氮菌培养物为圆褐固氮菌或拜叶林克氏菌。

    进一步地,所述填料包括聚乙烯醇0~30份、柠檬酸0~50份和纤维粉碎物50~100份。

    优选地,所述纤维粉碎物为秸秆、植物茎叶和果皮粉碎物中的一种或几种。

    本发明的复合微生物菌剂的制备方法,包括如下步骤:

    (1)扩大培养:将加州链霉菌ATCC15436、外皮毛霉菌ATCC18358、纤维素分解菌和固氮菌分别接种至扩大培养基中培养,分别得到加州链霉菌ATCC15436培养物、外皮毛霉菌ATCC18358培养物、纤维素分解菌培养物和固氮菌培养物;

    (2)混合培养:将加州链霉菌ATCC15436培养物和外皮毛霉菌ATCC18358培养物按重量份接入培养基1中进行混合培养,筛选得到加州链霉菌ATCC15436和外皮毛霉菌ATCC18358的混合培养物1;将纤维素分解菌培养物和固氮菌培养物按重量份接入培养基2中进行混合培养,筛选得到纤维素分解菌和固氮菌的混合培养物2;

    (3)发酵培养:将步骤(2)所述的混合培养物1和混合培养物2分别接种到无菌发酵室内的发酵培养基中进行曲盘培养发酵,发酵完成后,将所述两种发酵培养物均匀混合,再按重量份加入填料,再经干燥、粉碎、过滤,制成复合微生物菌剂。

    其中,步骤(1)中,所述扩大培养基包含如下组分浓度:酵母提取物2~8g/L、胰蛋白胨5~12g/L和氯化钠4~6g/L。

    进一步地,步骤(2)中,所述培养基1包含如下组分浓度:马铃薯提取物100~500g/L、葡萄糖25~30g/L、琼脂15~25g/L、酵母提取物15~30g/L和氯化钠3~5g/L;所述培养基2包含如下组分浓度:KH2PO4 0.5~1g/L、MgSO4·7H2O 0.3~1g/L、NaCl 0.2~0.8g/L、CaSO4·2H2O 0~0.3g/L、CaCO3 3.0~5.0g/L、FeCl3 0~0.01g/L、CaCl3 0.2~0.5g/L、甘露醇0.5~3.0g/L。

    优选地,步骤(3)中,曲盘发酵培养中的曲盘尺寸大小发酵培养基原料组分及浓度为:50~80g/L麸皮,10~40g/L玉米芯,10~20g/L豆饼粉,0.5~1.5g/L(NH4)2SO4,蛋白胨0.5~1g/L,0.3~0.4g/L KH2PO4,0.2~0.3g/L CaCl2,0.1~0.2g/L ZnCl2,0.1~0.2g/L MgSO4,0.02~0.08g/L Fe2(SO4)3,0.4~0.8g/L吐温40;100~150℃灭菌40~60min,冷却后得到发酵培养基。无菌发酵室内的发酵温度为25~35℃,发酵时间为36~72小时;干燥温度为75~80℃。

    本发明内容还包括所述的复合微生物菌剂在重金属污水处理中的应用。

    上述应用的方式为在待处理的重金属污水中加入葡萄糖、蛋白胨、氮磷钾复合肥和微量元素水溶肥料,调节pH至7~8;加入所述复合微生物菌剂,剂量为50~200g/m3;曝气或搅拌24~48小时,静置20~25min,过滤出水。

    有益效果:与现有技术相比,本发明具有如下优点:具有除重金属离子效果好、多菌种混合培养效率高的优点;通过加州链霉菌产生抗生素和外皮毛霉菌混合培养、纤维素分解菌和固氮菌的混合培养制成的粉剂对重金属离子的吸附作用,有效地净化处理排放的重金属工业废水。

    具体实施方式

    下面对本发明的技术方案作详细的说明,如无特殊说明,下列原料均可从市售获得。

    实施例1复合微生物菌剂的制备及应用

    原料组分:加州链霉菌ATCC15436培养物50份、外皮毛霉菌ATCC18358培养物75份、头孢霉菌培养物100份、圆褐固氮菌培养物100份、聚乙烯醇30份、柠檬酸50份和纤维粉碎物100份。

    制备及应用:(1)扩大培养:制备原料组分为酵母提取物2g/L、胰蛋白胨5g/L和氯化钠4g/L的扩大培养基,将加州链霉菌ATCC15436、外皮毛霉菌ATCC18358、头孢霉菌和圆褐固氮菌分别接种至扩大培养基中培养,分别得到加州链霉菌ATCC15436培养物、外皮毛霉菌ATCC18358培养物、头孢霉菌培养物和圆褐固氮菌培养物;

    (2)混合培养:制备原料组分为马铃薯提取物100g/L、葡萄糖25g/L、琼脂15g/L、酵母提取物15g/L和氯化钠3g/L的混合培养基,将加州链霉菌ATCC15436培养物50份、外皮毛霉菌ATCC18358培养物75份在该混合培养基中进行混合培养,筛选得到加州链霉菌ATCC15436和外皮毛霉菌ATCC18358的混合培养物;制备原料组分为KH2PO4 0.5g/L、MgSO4·7H2O 1g/L、NaCl 0.8g/L、CaCO3 3.0g/L、CaCl3 0.2g/L、甘露醇0.5g/L的混合培养基,将头孢霉菌培养物100份、圆褐固氮菌培养物100份在该混合培养基中进行混合培养,筛选得到头孢霉菌培养物和圆褐固氮菌的混合培养物

    (3)发酵培养:将步骤(2)所述的加州链霉菌ATCC15436和外皮毛霉菌ATCC18358的混合培养物和头孢霉菌培养物和圆褐固氮菌的混合培养物分别放到无菌发酵室内进行曲盘培养发酵,曲盘发酵培养中的曲盘尺寸大小发酵培养基原料组分及浓度为:50g/L麸皮,10g/L玉米芯,10g/L豆饼粉,0.5g/L(NH4)2SO4,蛋白胨0.5g/L,0.3g/L KH2PO4,0.2g/L CaCl2,0.1g/L ZnCl2,0.1g/L MgSO4,0.02g/L Fe2(SO4)3,0.4g/L吐温40;100℃灭菌40min,冷却后得到发酵培养基。发酵温度为35℃,发酵时间为36小时;发酵完成后,将上述两种发酵培养物均匀混合,再加入聚乙烯醇30份、柠檬酸50份和纤维粉碎物100份(纤维粉碎物为秸秆和果皮粉碎物),再经75℃干燥、粉碎、过滤,制成复合微生物菌剂。

    (4)在待处理的重金属废水中加入葡萄糖、蛋白胨、氮磷钾复合肥和微量元素水溶肥料,调节pH至7;加入步骤(3)制备的复合微生物菌剂,剂量为200g/m3;曝气或搅拌48小时,静置20min,过滤出水。

    实施例2复合微生物菌剂的制备及应用

    原料组分:加州链霉菌ATCC15436培养物75份、外皮毛霉菌ATCC18358培养物90份、曲霉菌培养物50份、圆褐固氮菌培养物50份和纤维粉碎物50份。

    制备及应用:(1)扩大培养:制备原料组分为酵母提取物5g/L、胰蛋白胨8g/L和氯化钠5g/L的扩大培养基,将加州链霉菌ATCC15436、外皮毛霉菌ATCC18358、曲霉菌和圆褐固氮菌分别接种至扩大培养基中培养,分别得到加州链霉菌ATCC15436培养物、外皮毛霉菌ATCC18358培养物、曲霉菌培养物和圆褐固氮菌培养物;

    (2)混合培养:制备原料组分为马铃薯提取物300g/L、葡萄糖27g/L、琼脂20g/L、酵母提取物25g/L和氯化钠4g/L的混合培养基,将外皮毛霉菌ATCC18358培养物90份、曲霉菌培养物50份接入该混合培养基中进行混合培养,筛选得到加州链霉菌ATCC15436和外皮毛霉菌ATCC18358的混合培养物;制备原料组分为原料组分为KH2PO40.8g/L、MgSO4·7H2O 0.5g/L、NaCl 0.5g/L、CaSO4·2H2O 0.2g/L、CaCO3 4.0g/L、FeCl3 0.01g/L、CaCl3 0.3g/L、甘露醇1.0g/L的混合培养基,将圆褐固氮菌培养物50份和纤维粉碎物50份接入该混合培养基中进行混合培养,筛选得到曲霉菌和圆褐固氮菌的混合培养物;

    (3)发酵培养:将步骤(2)所述的混合培养物放到无菌发酵室内进行曲盘培养发酵,曲盘发酵培养中的曲盘尺寸大小发酵培养基原料组分及浓度为:80g/L麸皮,40g/L玉米芯,20g/L豆饼粉,1.5g/L(NH4)2SO4,蛋白胨1g/L,0.4g/L KH2PO4,0.3g/LCaCl2,0.2g/L ZnCl2,0.2g/L MgSO4,0.08g/L Fe2(SO4)3,0.8g/L吐温40,150℃灭菌60min,冷却后得到发酵培养基;发酵温度为28℃,发酵时间为40小时;发酵完成后,将上述两种发酵培养物均匀混合,再加入纤维粉碎物50份(纤维粉碎物为秸秆和果皮粉碎物),再经78℃干燥、粉碎、过滤,制成复合微生物菌剂。

    (4)在待处理的重金属废水中加入葡萄糖、蛋白胨、氮磷钾复合肥和微量元素水溶肥料,调节pH至7.5;加入步骤(3)制备的复合微生物菌剂,剂量为100g/m3;曝气或搅拌48小时,静置25min,过滤出水。

    实施例3复合微生物菌剂的制备及应用

    原料组分:加州链霉菌ATCC15436培养物90份、外皮毛霉菌ATCC18358培养物85份、木霉菌培养物75份、拜叶林克氏菌培养物65份、聚乙烯醇15份、柠檬酸30份和纤维粉碎物75份。

    制备及应用:(1)扩大培养:制备原料组分为酵母提取物5g/L、胰蛋白胨8g/L和氯化钠5g/L的扩大培养基,将加州链霉菌ATCC15436、外皮毛霉菌ATCC18358、木霉菌和拜叶林克氏菌分别接种至扩大培养基中培养,分别得到加州链霉菌ATCC15436培养物、外皮毛霉菌ATCC18358培养物、木霉菌培养物和拜叶林克氏菌培养物;

    (2)混合培养:制备原料组分为马铃薯提取物300g/L、葡萄糖27g/L、琼脂20g/L、酵母提取物25g/L和氯化钠4g/L的混合培养基,将加州链霉菌ATCC15436培养物90份、外皮毛霉菌ATCC18358培养物85份接入该混合培养基中进行混合培养,筛选得到加州链霉菌ATCC15436和外皮毛霉菌ATCC18358的混合培养物;制备原料组分为原料组分为KH2PO40.8g/L、MgSO4·7H2O 0.5g/L、NaCl 0.5g/L、CaSO4·2H2O 0.2g/L、CaCO3 4.0g/L、FeCl3 0.01g/L、CaCl3 0.3g/L、甘露醇1.0g/L的混合培养基,将木霉菌培养物75份、拜叶林克氏菌培养物65份接入该混合培养基中进行混合培养,筛选得到木霉菌和拜叶林克氏菌的混合培养物;

    (3)发酵培养:将步骤(2)所述的混合培养物放到无菌发酵室内进行曲盘培养发酵,曲盘发酵培养中的曲盘尺寸大小发酵培养基原料组分及浓度为:60g/L麸皮,20g/L玉米芯,15g/L豆饼粉,1.0g/L(NH4)2SO4,蛋白胨0.75g/L,0.35g/L KH2PO4,0.25g/L CaCl2,0.15g/L ZnCl2,0.15g/L MgSO4,0.06g/L Fe2(SO4)3,0.6g/L吐温40;125℃灭菌50min,冷却后得到发酵培养基;发酵温度为28℃,发酵时间为40小时;发酵完成后,将上述两种发酵培养物均匀混合,再加入聚乙烯醇15份、柠檬酸30份和纤维粉碎物75份(纤维粉碎物为秸秆和果皮粉碎物),再经78℃干燥、粉碎、过滤,制成复合微生物菌剂。

    (4)在待处理的重金属废水中加入葡萄糖、蛋白胨、氮磷钾复合肥和微量元素水溶肥料,调节pH至7.8;加入步骤(3)制备的复合微生物菌剂,剂量为100g/m3;曝气或搅拌36小时,静置25min,过滤出水。

    实施例4复合微生物菌剂的制备及应用

    原料组分:加州链霉菌ATCC15436培养物100份、外皮毛霉菌ATCC18358培养物100份、青霉菌培养物10份、拜叶林克氏菌培养物10份、聚乙烯醇20份、柠檬酸25份和纤维粉碎物75份。

    制备及应用:(1)扩大培养:制备原料组分为酵母提取物8g/L、胰蛋白胨12g/L和氯化钠6g/L的扩大培养基,将加州链霉菌ATCC15436、外皮毛霉菌ATCC18358、青霉菌培养物和拜叶林克氏菌分别接种至扩大培养基中培养,分别得到加州链霉菌ATCC15436培养物、外皮毛霉菌ATCC18358培养物、青霉菌培养物和拜叶林克氏菌培养物;

    (2)混合培养:制备原料组分为马铃薯提取物500g/L、葡萄糖30g/L、琼脂25g/L、酵母提取物30g/L和氯化钠5g/L的混合培养基,将加州链霉菌ATCC15436培养物100份、外皮毛霉菌ATCC18358培养物100份接入该混合培养基中进行混合培养,筛选得到加州链霉菌ATCC15436和外皮毛霉菌ATCC18358的混合培养物;制备原料组分为KH2PO41g/L、MgSO4·7H2O 0.3g/L、NaCl 0.2g/L、CaSO4·2H2O 0.3g/L、CaCO35.0g/L、FeCl3 0.01g/L、CaCl30.5g/L、甘露醇3.0g/L的混合培养基,将青霉菌培养物10份、拜叶林克氏菌培养物10份接入该混合培养基中进行混合培养,筛选得到青霉菌和拜叶林克氏菌的混合培养物;

    (3)发酵培养:将步骤(2)所述的混合培养物放到无菌发酵室内进行曲盘培养发酵,曲盘发酵培养中的曲盘尺寸大小发酵培养基原料组分及浓度为:70g/L麸皮,20g/L玉米芯,18g/L豆饼粉,1.0g/L(NH4)2SO4,蛋白胨0.8g/L,0.37g/L KH2PO4,0.28g/L CaCl2,0.16g/L ZnCl2,0.18g/L MgSO4,0.06g/L Fe2(SO4)3,0.7g/L吐温40;130℃灭菌50min,冷却后得到发酵培养基;发酵温度为25℃,发酵时间为72小时;发酵完成后,将上述两种发酵培养物均匀混合,再加入聚乙烯醇20份、柠檬酸25份和纤维粉碎物75份(纤维粉碎物为秸秆和果皮粉碎物),再经80℃干燥、粉碎、过滤,制成复合微生物菌剂。

    (4)在待处理的重金属废水中加入葡萄糖、蛋白胨、氮磷钾复合肥和微量元素水溶肥料,调节pH至8;加入步骤(3)制备的复合微生物菌剂,剂量为50g/m3;曝气或搅拌24小时,静置25min,过滤出水。

    使用上述实施例1~4中的复合微生物菌剂对含重金属废水进行处理,结果如表1:

    表1复合微生物菌剂对重金属在工业废水处理效果的影响

    由表1可知,实施例1~4对含重金属工业废水处理效果理想,对Pb2+的去除率在96.7%以上,对Cu2+的去除率在98.2%以上,对Cr3+的去除率在97.3%以上,对Cr6+的去除率在96.3%以上,对Cd2+的去除率在91.25%以上。其中,实施例2综合处理含多种重金属离子的工业废水的效果最好,实施例4对处理含铬(Cr3+、Cr6+)较多的废水的效果最好。

    实验例5

    设计四组平行实验,将具有现有技术中金属吸附能力的芽孢杆菌培养物作为对照组,按照实施例1的制备步骤(1)分别扩大培养芽孢杆菌培养物、加州链霉菌ATCC15436培养物、外皮毛霉菌ATCC18358培养物,得到各自的扩大培养物;在按照实施例1的制备步骤(3)发酵完成后,分别加入芽孢杆菌扩大培养物A、加州链霉菌ATCC15436扩大培养物B、外皮毛霉菌ATCC18358扩大培养物C、加州链霉菌ATCC15436与外皮毛霉菌ATCC18358的混合培养物D(加州链霉菌ATCC15436与外皮毛霉菌ATCC18358重量份比为1:1.5)各125份;原料组分中的其他组分,如头孢霉菌培养物100份、圆褐固氮菌培养物100份、聚乙烯醇30份、柠檬酸50份和纤维粉碎物100份与制备步骤均和实施例1相同,使用制得的复合微生物菌剂对含重金属废水进行处理,结果如表2所示。

    表2不同微生物种类的复合微生物菌剂对含重金属的工业废水处理效果的影响

    由表2可知,当使用对照组芽孢杆菌扩大培养物作为吸附重金属的复合微生物菌剂的原料,与分别单独使用加州链霉菌ATCC15436扩大培养物、外皮毛霉菌ATCC18358扩大培养物作为原料相比,效果有较大差异;加州链霉菌ATCC15436与外皮毛霉菌ATCC18358的混合培养物作为原料的复合微生物菌剂的重金属去除率相比于对照组芽孢杆菌扩大培养物,处理各种金属离子的效果显著提高,尤其是对Cu2+、Cr3+和Cr6+去除率分别由93.4%、93.1%和94.8%提高到98.4%、97.3%和96.8%。

    关 键  词:
    重金属 废水处理 复合 微生物 及其 制备 方法 应用
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