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一种速效多菌种微生物复合冲施肥及其制备方法.pdf

  • 上传人:Y0****01
  • 文档编号:859628
  • 上传时间:2018-03-15
  • 格式:PDF
  • 页数:14
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  • 摘要
    申请专利号:

    CN201010540183.8

    申请日:

    2010.11.11

    公开号:

    CN102002470A

    公开日:

    2011.04.06

    当前法律状态:

    授权

    有效性:

    有权

    法律详情:

    专利权的转移IPC(主分类):C12N1/20变更事项:专利权人变更前权利人:山西博亚方舟生物科技有限公司变更后权利人:山西晨雨晋中肥业有限公司变更事项:地址变更前权利人:030032 山西省太原市高新区中心北街3号晨雨大厦13层变更后权利人:030600 山西省晋中市晋中开发区南六堡村登记生效日:20150318|||专利权的转移IPC(主分类):C12N 1/20变更事项:专利权人变更前权利人:唐清池变更后权利人:山西博亚方舟生物科技有限公司变更事项:地址变更前权利人:045209 山西省阳泉市平定县冠山镇贵石沟居委会北大街63号变更后权利人:030032 山西省太原市高新区中心北街3号晨雨大厦13层登记生效日:20140714|||授权|||实质审查的生效IPC(主分类):C12N 1/20申请日:20101111|||公开

    IPC分类号:

    C12N1/20; C12N1/16; C05F11/08; C12R1/85(2006.01)N; C12R1/225(2006.01)N; C12R1/125(2006.01)N; C12R1/10(2006.01)N; C12R1/11(2006.01)N; C12R1/065(2006.01)N; C12R1/04(2006.01)N

    主分类号:

    C12N1/20

    申请人:

    唐清池

    发明人:

    唐清池; 司金安; 王学宾; 李忠宏; 胡伟; 文凤发; 郭银保

    地址:

    045209 山西省阳泉市平定县冠山镇贵石沟居委会北大街63号

    优先权:

    专利代理机构:

    湖北武汉永嘉专利代理有限公司 42102

    代理人:

    钟锋

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    内容摘要

    本发明涉及一种速效多菌种微生物复合冲施肥及其制备方法。一种速效多菌种微生物复合冲施肥,其特征在于:它包括由光合细菌、酵母菌、乳酸菌、双歧杆菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、胶冻芽孢杆菌、圆褐固氮菌和放线菌分别经发酵培养制得的菌粉复配而成,该速效多菌种微生物复合冲施肥中酵母菌(Pichiafermentanslodder)ACCC20319T菌数≥2.0×108cfu/g,其他各菌种的菌数均≥2.0×109cfu/g。该速效多菌种微生物复合冲施肥可提高作物品质,提高作物产量,缩短作物生长周期。

    权利要求书

    1.一种速效多菌种微生物复合冲施肥,其特征在于:它包括由光合细菌(Rhodoplanes elegans)ACCC 10649、酵母菌(Pichia fermentans lodder)ACCC 20319T、乳酸菌(Lactococcus lactis)ACCC 11092、双歧杆菌(Bifidobacterium sp)ACCC 11054、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtills subsp. spizienii Nakamura et al)ACCC 10242T、地衣芽孢杆菌(BacillusLicheniformis (Weigmannn) Chester)ACCC 10146、侧孢芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus (Laubach) shida et al) ACCC 11079、巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium de Bary) ACCC 10010、胶冻芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus Krasilnikov) ACCC 10013、圆褐固氮菌(Azotobacter chroococum Beijerinck) ACCC 10001和放线菌(Actinobacillus capsulatus Arseculeratne) ACCC 11051分别经发酵培养制得的菌粉复配而成,该速效多菌种微生物复合冲施肥中酵母菌(Pichia fermentans lodder)ACCC 20319T菌数≥2.0×108cfu/g,其他各菌种的菌数均≥2.0×109cfu/g。2.根据权利要求1所述的速效多菌种微生物复合冲施肥,其特征在于:所述各菌种菌粉的重量百分数为:光合细菌菌粉10%~12.5%、酵母菌菌粉10%~12.5%、乳酸菌菌粉10%~12.5%、双歧杆菌菌粉10%~12.5%、枯草芽孢杆菌菌粉10%~12%、地衣芽孢杆菌菌粉10%~12%、侧孢芽孢杆菌菌粉10%~12%、巨大芽孢杆菌菌粉5%~8%、胶冻芽孢杆菌菌粉5%~8%、圆褐固氮菌菌粉5%~8%、放线菌菌粉5%~8%。3.根据权利要求1所述的速效多菌种微生物复合冲施肥,其特征在于:所述的菌粉是将各菌种的菌液以轻质碳酸钙为载体复配而得到的。4.根据权利要求1所述的速效多菌种微生物复合冲施肥,其特征在于:所述的菌粉是通过在各菌种的菌液中加入轻质磷酸钙,所述轻质碳酸钙的加入量为菌液重量的40﹪~50﹪(重量百分数),搅拌30min~40min,脱水浓缩,低温烘干至含水率≤5﹪,粉碎至细度≥100目而得到的。5.根据权利要求1所述的速效多菌种微生物复合冲施肥,其特征在于:所述的速效多菌种微生物复合冲施肥还包括有机硅和黄腐酸钾,所述各菌种的菌粉总量、有机硅和黄腐酸钾的重量百分数为:菌粉总量5%~25%,有机硅0.5%~1%,黄腐酸钾74.5%~94%,所述的有机硅由杭州包尔得有机硅有限公司生产,产品型号:BD-3077-F,产品名称:捷润粉剂。6.根据权利要求1所述的速效多菌种微生物复合冲施肥的制备方法,其特征在于:包括以下步骤:(1)复合菌粉的制备①各菌种菌液的制备光合细菌(Rhodoplanes elegans)ACCC 10649菌液的制备:在无菌条件下,将光和细菌(Rhodoplanes elegans)ACCC 10649接种到液体培养基中,所述的液体培养基为:各组分在1.0L蒸馏水中的含量为:酵母粉3.0g、蛋白胨3.0g、七水硫酸镁0.5g、无水氯化钙0.3g,PH值调至6.8~7.0,置于常规光培养箱内,28℃~30℃常规光照培养6~7天,得到菌数≥5.0×109cfu/ml的种子培养液,然后接种到50升含有5%(重量百分数)红糖的无菌水中,接种量为无菌水重量的2﹪,在溶氧量为5﹪即发酵罐中氧气的体积与发酵液的体积比为5%的条件下,25℃~30℃于密封罐中静置培养10~15天,得到菌数≥1.0×109cfu/ml的光合细菌菌液;酵母菌(Pichia fermentans lodder)ACCC 20319T菌液的制备:在无菌条件下,将酵母菌(Pichia fermentans lodder)ACCC 20319T接种到液体培养基中,所述的液体培养基为:各组分在1.0L蒸馏水中的含量为:七水硫酸镁1.0g、磷酸二氢钾2.0g、尿素30.g、玉米浆1.0g、硫酸锰0.02g、硫酸亚铁0.2g,PH值调至5.5,30℃~31℃培养4~5天,得到菌数≥5.0×108cfu/ml的种子培养液,然后接种到50升含有5%(重量百分数)红糖的无菌水中,接种量为无菌水重量的2﹪,在溶氧量为5﹪即发酵罐中氧气的体积与发酵液的体积比为5%的条件下,25℃~30℃于密封罐中静置培养10~15天,得到菌数≥1.0×108cfu/ml的酵母菌菌液;乳酸菌(Lactococcus lactis)ACCC 11092菌液的制备:在无菌条件下,将乳酸菌(Lactococcus lactis)ACCC 11092接种到液体培养基中,所述的液体培养基为:各组分在1.0L蒸馏水中的含量为:番茄汁200.0ml、可溶性淀粉0.5g、蛋白胨15.0g、氯化钠5.0g、酵母菌6.0g、吐温80 1.0g、葡萄糖20.0g,pH值调至7.2, 30℃~35℃培养2~3天,得到菌数≥5.0×109cfu/ml的种子培养液,然后接种到50升含有5%(重量百分数)红糖的无菌水中接种量为无菌水重量的2﹪,在溶氧量为5﹪即发酵罐中氧气的体积与发酵液的体积比为5%的条件下,25℃~30℃于密封罐中静置培养10~15天,得到菌数≥1.0×109cfu/ml的乳酸菌菌液;双歧杆菌(Lactococcus lactis)ACCC 11092菌液的制备:在无菌条件下,将双歧杆菌(Lactococcus lactis)ACCC 11092接种到液体培养基中,所述的液体培养基为:各组分在1.0L蒸馏水中的含量为:番茄汁200.0ml、可溶性淀粉0.5g、蛋白胨15.0g、氯化钠5.0g、酵母菌6.0g、吐温80 1.0g、葡萄糖20.0g,pH值调至7.2, 30℃~35℃培养2~3天,得到菌数≥5.0×109cfu/ml的种子培养液,然后接种到50升含有5%(重量百分数)红糖的无菌水中,接种量为无菌水重量的2﹪,在溶氧量为5﹪即发酵罐中氧气的体积与发酵液的体积比为5%的条件下,25℃~30℃于密封罐中静置培养10~15天,得到菌数≥1.0×109cfu/ml的双歧杆菌菌液;枯草芽孢杆菌(Bacillus subtills subsp. spizienii Nakamura et al)ACCC 10242T、地衣芽孢杆菌(BacillusLicheniformis (Weigmannn) Chester) ACCC 10146、侧孢芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus (Laubach) shida et al) ACCC 11079、巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium de Bary) ACCC 10010、胶冻芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus Krasilnikov) ACCC 10013、圆褐固氮菌(Azotobacter chroococum Beijerinck) ACCC 10001和放线菌(Actinobacillus capsulatus Arseculeratne) ACCC 11051菌液的制备,其中所述的培养基按重量百分数计均为:淀粉5﹪、豆饼粉7.5﹪、磷酸氢二钾0.2﹪、硫酸铵0.1﹪、硫酸镁0.05﹪、三氯化铁0.005﹪、碳酸钙0.05﹪、酵母粉0.01﹪、硼酸0.005﹪、pH值调至7.2~7.4:枯草芽孢杆菌(Bacillus subtills subsp. spizienii Nakamura et al)ACCC 10242T菌液的制备:在无菌条件下,将枯草芽孢杆菌(Bacillus subtills subsp. spizienii Nakamura et al)ACCC 10242T接入到培养基中,通气量0.5~1.0L∕L·min,搅拌速度150~200rpm,罐压0.5kg∕cm2,耗氧培养48小时,得到的菌液中枯草芽孢杆菌菌数≥2.0×109cfu/ mL;地衣芽孢杆菌(BacillusLicheniformis (Weigmannn) Chester) ACCC 10146菌液的制备:在无菌条件下,将地衣芽孢杆菌(BacillusLicheniformis (Weigmannn) Chester) ACCC 10146接入到培养基中,通气量0.5~1.0L∕L·min,搅拌速度150~200rpm,罐压0.5kg∕cm2,耗氧培养48小时,得到的菌液中地衣芽孢杆菌菌数≥2.0×109cfu/ mL;侧孢芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus (Laubach) shida et al) ACCC 11079菌液的制备:在无菌条件下,将侧孢芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus (Laubach) shida et al) ACCC 11079接入到培养基中,通气量0.5~1.0L∕L·min,搅拌速度150~200rpm,罐压0.5kg∕cm2,耗氧培养48小时,得到的菌液中侧孢芽孢杆菌菌数≥2.0×109cfu/ mL;巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium de Bary) ACCC 10010菌液的制备:在无菌条件下,将巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium de Bary) ACCC 10010接入到培养基中,通气量0.5~1.0L∕L·min,搅拌速度150~200rpm,罐压0.5kg∕cm2,耗氧培养48小时,得到的菌液中巨大芽孢杆菌菌数≥2.0×109cfu/ mL;胶冻芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus Krasilnikov) ACCC 10013菌液的制备:在无菌条件下,将胶冻芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus Krasilnikov) ACCC 10013接入到培养基中,通气量0.5~1.0L∕L·min,搅拌速度150~200rpm,罐压0.5kg∕cm2,耗氧培养48小时,得到的菌液中胶冻芽孢杆菌菌数≥2.0×109cfu/ mL;圆褐固氮菌(Azotobacter chroococum Beijerinck) ACCC 10001菌液的制备:在无菌条件下,将圆褐固氮菌(Azotobacter chroococum Beijerinck) ACCC 10001接入到培养基中,通气量0.5~1.0L∕L·min,搅拌速度150~200rpm,罐压0.5kg∕cm2,耗氧培养48小时,得到的菌液中圆褐固氮菌菌数≥2.0×109cfu/ mL;放线菌(Actinobacillus capsulatus Arseculeratne) ACCC 11051菌液的制备:在无菌条件下,将放线菌(Actinobacillus capsulatus Arseculeratne) ACCC 11051接入到培养基中,通气量0.5~1.0L∕L·min,搅拌速度150~200rpm,罐压0.5kg∕cm2,耗氧培养48小时,得到的菌液中的放线菌菌数≥2.0×109cfu/ mL;②各菌种菌粉的制备通过分别在各菌种的菌液中加入轻质碳酸钙,所述轻质碳酸钙的加入量为菌液重量的40﹪~50﹪,搅拌30min~40min,脱水浓缩,低温烘干至含水率≤5﹪,粉碎,得到细度≥100目的各菌种的菌粉,其中酵母菌菌粉中酵母菌的菌数≥2.0×108cfu/g,其余各菌种菌粉中相应菌种的菌数≥2.0×109cfu/g;③各菌种菌粉的混合将各菌种的菌粉按照重量百分数为:光合细菌(Rhodoplanes elegans)ACCC 10649菌粉 10%~12.5%、酵母菌(Pichia fermentans lodder)ACCC 20319T菌粉10%~12.5%、乳酸菌(Lactococcus lactis)ACCC 11092菌粉10%~12.5%、双歧杆菌(Bifidobacterium sp)ACCC 11054菌粉10%~12.5%、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtills subsp. spizienii Nakamura et al)ACCC 10242T菌粉10%~12%、地衣芽孢杆菌(BacillusLicheniformis (Weigmannn) Chester) ACCC 10146菌粉10%~12%、侧孢芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus (Laubach) shida et al) ACCC 11079菌粉10%~12%、巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium de Bary) ACCC 10010菌粉5%~8%、胶冻芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus Krasilnikov)ACCC 10013菌粉5%~8%、圆褐固氮菌(Azotobacter chroococum Beijerinck) ACCC 10001菌粉5%~8%和放线菌(Actinobacillus capsulatus Arseculeratne) ACCC 11051菌粉5%~8%进行混合,得到复合菌粉;  (2)复配将混合得到的复合菌粉与有机硅和黄腐酸钾按重量百分数为:菌粉 5%~25%、有机硅0.5%~1%、黄腐酸钾74.5%~94%复配而得到速效多菌种微生物复合冲施肥。

    说明书

    一种速效多菌种微生物复合冲施肥及其制备方法

    技术领域

    本发明属生物肥领域,特别涉及一种速效多菌种微生物复合冲施肥及其制备方法。

    背景技术

    目前冲施肥以供给植物氮、磷、钾大量元素及中微量元素居多。传统的冲施肥是以无机元素为主。大量使用该类冲施肥,可使土壤出现板结,土质恶化,地力下降,农产品品质下降,同时严重地打破了土壤的微生态平衡,加剧了作物病虫害的发生几率,也明显增加了农药的使用量,这使得土壤的微生态环境进一步受到破坏,形成恶性循环。传统的冲施肥在使用时,由于其水溶性过高,而容易随雨水流失或随地表水分蒸发,使得真正被作物吸收的营养物质还不到1/3。

    现有的有机微生物冲施肥主要存在以下不足:所使用的菌种以解磷、解钾和固氮为主,有一少部分加入少量具有抗病害作用的菌种,但是见效较慢,肥料损失率较高,并受使用方法和使用环境的影响较大。

    发明内容

    本发明是针对现有技术的不足,提供一种速效多菌种微生物复合冲施肥的方法。该速效多菌种微生物复合冲施肥可提高作物品质,提高作物产量,缩短作物生长周期。

    为解决上述技术问题,本发明所采用的技术方案为:

    一种速效多菌种微生物复合冲施肥,其特征在于:它包括由光合细菌(Rhodoplanes elegans)ACCC 10649、酵母菌(Pichia fermentans lodder)ACCC 20319T、乳酸菌(Lactococcus lactis)ACCC 11092、双歧杆菌(Bifidobacterium sp)ACCC 11054、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtills subsp. spizienii Nakamura et al)ACCC 10242T、地衣芽孢杆菌(BacillusLicheniformis (Weigmannn) Chester)ACCC 10146、侧孢芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus (Laubach) shida et al) ACCC 11079、巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium de Bary) ACCC 10010、胶冻芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus Krasilnikov) ACCC 10013、圆褐固氮菌(Azotobacter chroococum Beijerinck) ACCC 10001和放线菌(Actinobacillus capsulatus Arseculeratne) ACCC 11051分别经发酵培养制得的菌粉复配而成,该速效多菌种微生物复合冲施肥中酵母菌(Pichia fermentans lodder)ACCC 20319T菌数≥2.0×108cfu/g,其他各菌种的菌数均≥2.0×109cfu/g。

    按上述方案,所述各菌种菌粉的重量百分数为:光合细菌菌粉10%~12.5%、酵母菌菌粉10%~12.5%、乳酸菌菌粉10%~12.5%、双歧杆菌菌粉10%~12.5%、枯草芽孢杆菌菌粉10%~12%、地衣芽孢杆菌菌粉10%~12%、侧孢芽孢杆菌菌粉10%~12%、巨大芽孢杆菌菌粉5%~8%、胶冻芽孢杆菌菌粉5%~8%、圆褐固氮菌菌粉5%~8%、放线菌菌粉5%~8%。

    按上述方案,所述的菌粉是将各菌种的菌液以轻质碳酸钙为载体复配而得到的。

    按上述方案,所述的菌粉是通过在各菌种的菌液中加入轻质磷酸钙,所述轻质碳酸钙的加入量为菌液重量的40﹪~50﹪(重量百分数),搅拌30min~40min,脱水浓缩,低温烘干至含水率≤5﹪,粉碎至细度≥100目而得到的。

    按上述方案,所述的速效多菌种微生物复合冲施肥还包括有机硅和黄腐酸钾,所述各菌种的菌粉总量、有机硅和黄腐酸钾的重量百分数为:菌粉总量5%~25%,有机硅0.5%~1%,黄腐酸钾74.5%~94%,所述的有机硅由杭州包尔得有机硅有限公司生产,产品型号:BD-3077-F,产品名称:捷润粉剂。 

    一种速效多菌种微生物复合冲施肥的制备方法,包括以下步骤:

    (1)复合菌粉的制备

    ①各菌种菌液的制备

    光合细菌(Rhodoplanes elegans)ACCC 10649菌液的制备:

    在无菌条件下,将光和细菌(Rhodoplanes elegans)ACCC 10649接种到液体培养基中,所述的液体培养基为:各组分在1.0L蒸馏水中的含量为:酵母粉3.0g、蛋白胨3.0g、七水硫酸镁0.5g、无水氯化钙0.3g,PH值调至6.8~7.0,置于常规光培养箱内,28℃~30℃常规光照培养6~7天,得到菌数≥5.0×109cfu/ml的种子培养液,然后接种到50升含有5%(重量百分数)红糖的无菌水中,接种量为无菌水重量的2﹪,在溶氧量为5﹪即发酵罐中氧气的体积与发酵液的体积比为5%的条件下,25℃~30℃于密封罐中静置培养10~15天,得到菌数≥1.0×109cfu/ml的光合细菌菌液;

    酵母菌(Pichia fermentans lodder)ACCC 20319T菌液的制备:

    在无菌条件下,将酵母菌(Pichia fermentans lodder)ACCC 20319T接种到液体培养基中,所述的液体培养基为:各组分在1.0L蒸馏水中的含量为:七水硫酸镁1.0g、磷酸二氢钾2.0g、尿素30.g、玉米浆1.0g、硫酸锰0.02g、硫酸亚铁0.2g,PH值调至5.5,30℃~31℃培养4~5天,得到菌数≥5.0×108cfu/ml的种子培养液,然后接种到50升含有5%(重量百分数)红糖的无菌水中,接种量为无菌水重量的2﹪,在溶氧量为5﹪即发酵罐中氧气的体积与发酵液的体积比为5%的条件下,25℃~30℃于密封罐中静置培养10~15天,得到菌数≥1.0×108cfu/ml的酵母菌菌液;

    乳酸菌(Lactococcus lactis)ACCC 11092菌液的制备:

    在无菌条件下,将乳酸菌(Lactococcus lactis)ACCC 11092接种到液体培养基中,所述的液体培养基为:各组分在1.0L蒸馏水中的含量为:番茄汁200.0ml、可溶性淀粉0.5g、蛋白胨15.0g、氯化钠5.0g、酵母菌6.0g、吐温80 1.0g、葡萄糖20.0g,pH值调至7.2, 30℃~35℃培养2~3天,得到菌数≥5.0×109cfu/ml的种子培养液,然后接种到50升含有5%(重量百分数)红糖的无菌水中接种量为无菌水重量的2﹪,在溶氧量为5﹪即发酵罐中氧气的体积与发酵液的体积比为5%的条件下,25℃~30℃于密封罐中静置培养10~15天,得到菌数≥1.0×109cfu/ml的乳酸菌菌液;

    双歧杆菌(Lactococcus lactis)ACCC 11092菌液的制备:

    在无菌条件下,将双歧杆菌(Lactococcus lactis)ACCC 11092接种到液体培养基中,所述的液体培养基为:各组分在1.0L蒸馏水中的含量为:番茄汁200.0ml、可溶性淀粉0.5g、蛋白胨15.0g、氯化钠5.0g、酵母菌6.0g、吐温80 1.0g、葡萄糖20.0g,pH值调至7.2, 30℃~35℃培养2~3天,得到菌数≥5.0×109cfu/ml的种子培养液,然后接种到50升含有5%(重量百分数)红糖的无菌水中,接种量为无菌水重量的2﹪,在溶氧量为5﹪即发酵罐中氧气的体积与发酵液的体积比为5%的条件下,25℃~30℃于密封罐中静置培养10~15天,得到菌数≥1.0×109cfu/ml的双歧杆菌菌液;

    枯草芽孢杆菌(Bacillus subtills subsp. spizienii Nakamura et al)ACCC 10242T、地衣芽孢杆菌(BacillusLicheniformis (Weigmannn) Chester) ACCC 10146、侧孢芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus (Laubach) shida et al) ACCC 11079、巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium de Bary) ACCC 10010、胶冻芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus Krasilnikov) ACCC 10013、圆褐固氮菌(Azotobacter chroococum Beijerinck) ACCC 10001和放线菌(Actinobacillus capsulatus Arseculeratne) ACCC 11051菌液的制备,其中所述的培养基按重量百分数计均为:淀粉5﹪、豆饼粉7.5﹪、磷酸氢二钾0.2﹪、硫酸铵0.1﹪、硫酸镁0.05﹪、三氯化铁0.005﹪、碳酸钙0.05﹪、酵母粉0.01﹪、硼酸0.005﹪、pH值调至7.2~7.4:

    枯草芽孢杆菌(Bacillus subtills subsp. spizienii Nakamura et al)ACCC 10242T菌液的制备:

    在无菌条件下,将枯草芽孢杆菌(Bacillus subtills subsp. spizienii Nakamura et al)ACCC 10242T接入到培养基中,通气量0.5~1.0L∕L·min,搅拌速度150~200rpm,罐压0.5kg∕cm2,耗氧培养48小时,得到的菌液中枯草芽孢杆菌菌数≥2.0×109cfu/ mL;

    地衣芽孢杆菌(BacillusLicheniformis (Weigmannn) Chester) ACCC 10146菌液的制备:

    在无菌条件下,将地衣芽孢杆菌(BacillusLicheniformis (Weigmannn) Chester) ACCC 10146接入到培养基中,通气量0.5~1.0L∕L·min,搅拌速度150~200rpm,罐压0.5kg∕cm2,耗氧培养48小时,得到的菌液中地衣芽孢杆菌菌数≥2.0×109cfu/ mL;

    侧孢芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus (Laubach) shida et al) ACCC 11079菌液的制备:

    在无菌条件下,将侧孢芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus (Laubach) shida et al) ACCC 11079接入到培养基中,通气量0.5~1.0L∕L·min,搅拌速度150~200rpm,罐压0.5kg∕cm2,耗氧培养48小时,得到的菌液中侧孢芽孢杆菌菌数≥2.0×109cfu/ mL;

    巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium de Bary) ACCC 10010菌液的制备:

    在无菌条件下,将巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium de Bary) ACCC 10010接入到培养基中,通气量0.5~1.0L∕L·min,搅拌速度150~200rpm,罐压0.5kg∕cm2,耗氧培养48小时,得到的菌液中巨大芽孢杆菌菌数≥2.0×109cfu/ mL;

    胶冻芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus Krasilnikov) ACCC 10013菌液的制备:

    在无菌条件下,将胶冻芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus Krasilnikov) ACCC 10013接入到培养基中,通气量0.5~1.0L∕L·min,搅拌速度150~200rpm,罐压0.5kg∕cm2,耗氧培养48小时,得到的菌液中胶冻芽孢杆菌菌数≥2.0×109cfu/ mL;

    圆褐固氮菌(Azotobacter chroococum Beijerinck) ACCC 10001菌液的制备:

    在无菌条件下,将圆褐固氮菌(Azotobacter chroococum Beijerinck) ACCC 10001接入到培养基中,通气量0.5~1.0L∕L·min,搅拌速度150~200rpm,罐压0.5kg∕cm2,耗氧培养48小时,得到的菌液中圆褐固氮菌菌数≥2.0×109cfu/ mL;

    放线菌(Actinobacillus capsulatus Arseculeratne) ACCC 11051菌液的制备:

    在无菌条件下,将放线菌(Actinobacillus capsulatus Arseculeratne) ACCC 11051接入到培养基中,通气量0.5~1.0L∕L·min,搅拌速度150~200rpm,罐压0.5kg∕cm2,耗氧培养48小时,得到的菌液中的放线菌菌数≥2.0×109cfu/ mL;

    ②各菌种菌粉的制备

    通过分别在各菌种的菌液中加入轻质碳酸钙,所述轻质碳酸钙的加入量为菌液重量的40﹪~50﹪,搅拌30min~40min,脱水浓缩,低温烘干至含水率≤5﹪,粉碎,得到细度≥100目的各菌种的菌粉,其中酵母菌菌粉中酵母菌的菌数≥2.0×108cfu/g,其余各菌种菌粉中相应菌种的菌数≥2.0×109cfu/g;

    ③各菌种菌粉的混合

    将各菌种的菌粉按照重量百分数为:光合细菌(Rhodoplanes elegans)ACCC 10649菌粉 10%~12.5%、酵母菌(Pichia fermentans lodder)ACCC 20319T菌粉10%~12.5%、乳酸菌(Lactococcus lactis)ACCC 11092菌粉10%~12.5%、双歧杆菌(Bifidobacterium sp)ACCC 11054菌粉10%~12.5%、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtills subsp. spizienii Nakamura et al)ACCC 10242T菌粉10%~12%、地衣芽孢杆菌(BacillusLicheniformis (Weigmannn) Chester) ACCC 10146菌粉10%~12%、侧孢芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus (Laubach) shida et al) ACCC 11079菌粉10%~12%、巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium de Bary) ACCC 10010菌粉5%~8%、胶冻芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus Krasilnikov)ACCC 10013菌粉5%~8%、圆褐固氮菌(Azotobacter chroococum Beijerinck) ACCC 10001菌粉5%~8%和放线菌(Actinobacillus capsulatus Arseculeratne) ACCC 11051菌粉5%~8%进行混合,得到复合菌粉;

    (2)复配

    将步骤(1)混合得到的复合菌粉与有机硅和黄腐酸钾按重量百分数为:复合菌粉 5%~25%、有机硅0.5%~1%、黄腐酸钾74.5%~94%复配而得到速效多菌种微生物复合冲施肥。

    本发明所选用的菌种功能如下:

    (1)光合细菌(Rhodoplanes elegans)ACCC 10649、酵母菌(Pichia fermentans lodder)ACCC 20319T、乳酸菌(Lactococcus lactis)ACCC 11092和双歧杆菌(Bifidobacterium sp)ACCC 11054,能产生大量不同种类的氨基酸、具有生物活性的酶类如淀粉酶、蛋白酶等,提高还田秸秆的利用率。

    (2)枯草芽孢杆菌(Bacillus subtills subsp. spizienii Nakamura et al)ACCC 10242T、地衣芽孢杆菌(BacillusLicheniformis (Weigmannn) Chester) ACCC 10146、侧孢芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus (Laubach) shida et al) ACCC 11079和放线菌(Actinobacillus capsulatus Arseculeratne) ACCC 11051,抑制病原菌繁殖,减轻病虫害,降低农药残留,促进根系生长,增强根系吸收能力,并能活化土壤养分。

    (3)巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium de Bary) ACCC 10010,把土壤中的无效磷转化为作物能够直接吸收利用的有效磷。

    (4)胶冻芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus Krasilnikov)ACCC 10013,促进作物对钾的吸收。

    (5)圆褐固氮菌(Azotobacter chroococum Beijerinck) ACCC 10001,将空气中的氮转化成氨类物质,为作物的生长提供氮源。

    本发明利用多菌种复合配制的速效多菌种微生物复合冲施肥可为植物提供由微生物固定、产生或分解的氮、磷、钾,解决施肥不均衡造成的肥害和不必要的资源浪费。有益效果如下:

    1.本发明采用11个具有各自不同功能的菌种按照一定的比例复合配制而成的速效多菌种微生物复合冲施肥,即可有效的避免了菌种间的竞争和排异等现象,也使每个菌种都能充分发挥其特有的功效。

    2.本发明所选用的黄腐酸钾,能明显地促进作物根系的生长,提高作物吸肥能力。

    3.本发明提供的速效多菌种微生物复合冲施肥能够使作物的叶片变厚,提高光合作用的效率,增加作物的抗逆性、抗重茬、抗病害,促进作物体内的亚硝酸盐转化为可被作物吸收利用的氨类物质。

    4.本发明能够明显地消除作物的药残和肥残,提高作物品质,提高作物产量,缩短生长周期。

    5.本发明所选用的有机硅可使速效多菌种微生物复合冲施肥迅速被种植物吸收,并将其快速定殖在种植物根圈内,减少土著细菌对速效多菌种微生物复合冲施肥中的微生物产生的不利影响。

    具体实施方式

    下面用具体实施例对本发明作进一步的详细说明,但本发明不仅仅局限于以下实施例。

    下述实施例中,所述的有机硅由杭州包尔得有机硅有限公司生产,产品型号:BD-3077-F, 

    产品名称:捷润粉剂,结构式或组分:乙氧基改性聚三硅氧烷与合适的无机填料,物化数据及指标:活性物(%):50±2;水溶液表面张力(25℃)mN/m:21.0~24.0 ;外观:白色粉体,性能特点:优异的农用化学品增效剂,具有低表面张力,良好的展着性、渗透性及乳化分散性,是一种新型高效的农药助剂,效果远优于JFC、氮酮、噻酮等普通表面活性剂,具有比普通的脂肪胺、乙氧基醇类等表面活性剂更低的植物毒性和环境危害,可极大地减少对人类和环境的不良影响。 

    实施例1

    一种速效多菌种微生物复合冲施肥的制备方法,其特征在于:包括以下步骤:

    (1)复合菌粉的制备

    ①各菌种菌液的制备

    光合细菌(Rhodoplanes elegans)ACCC 10649菌液的制备:

    在无菌条件下,将光和细菌(Rhodoplanes elegans)ACCC 10649接种到液体培养基中,所述的液体培养基为:各组分在1.0L蒸馏水中的含量为:酵母粉3.0g、蛋白胨3.0g、七水硫酸镁0.5g、无水氯化钙0.3g,pH值调至6.8~7.0,置于常规光培养箱内,28℃~30℃常规光照培养6~7天,得到菌数≥5.0×109cfu/ml的种子培养液,然后接种到50升含有5%(重量百分数)红糖的无菌水中,接种量为无菌水重量的2﹪,在溶氧量为5﹪即发酵罐中氧气的体积与发酵液的体积比为5%的条件下,25℃~30℃于密封罐中静置培养10~15天,得到菌数≥1.0×109cfu/ml的光合细菌(Rhodoplanes elegans)ACCC 10649菌液;

    酵母菌(Pichia fermentans lodder)ACCC 20319T菌液的制备:

    在无菌条件下,将酵母菌(Pichia fermentans lodder)ACCC 20319T接种到液体培养基中,所述的液体培养基为:各组分在1.0L蒸馏水中的含量为:七水硫酸镁1.0g、磷酸二氢钾2.0g、尿素30.g、玉米浆1.0g、硫酸锰0.02g、硫酸亚铁0.2g,pH值调至5.5,30℃~31℃培养4~5天得到菌数≥5.0×108cfu/ml的种子培养液,然后接种到50升含有5%(重量百分数)红糖的无菌水中,接种量为无菌水重量的2﹪,在溶氧量为5﹪即发酵罐中氧气的体积与发酵液的体积比为5%的条件下,25℃~30℃于密封罐中静置培养10~15天,得到菌数≥1.0×108cfu/ml的酵母菌(Pichia fermentans lodder)ACCC 20319T菌液;

    乳酸菌(Lactococcus lactis)ACCC 11092菌液的制备:

    在无菌条件下,将乳酸菌(Lactococcus lactis)ACCC 11092接种到液体培养基中,所述的液体培养基为:各组分在1.0L蒸馏水中的含量为:番茄汁200.0ml、可溶性淀粉0.5g、蛋白胨15.0g、氯化钠5.0g、酵母菌6.0g、吐温80 1.0g、葡萄糖20.0g,PH值调至7.2, 30℃~35℃培养2~3天,得到菌数≥5.0×109cfu/ml的种子培养液,然后接种到50升含有5%(重量百分数)红糖的无菌水中,接种量为无菌水重量的2﹪,在溶氧量为5﹪即发酵罐中氧气的体积与发酵液的体积比为5%的条件下,25℃~30℃于密封罐中静置培养10~15天,得到菌数≥1.0×109cfu/ml的乳酸菌(Lactococcus lactis)ACCC 11092菌液;

    双歧杆菌(Lactococcus lactis)ACCC 11092菌液的制备:

    在无菌条件下,将双歧杆菌(Lactococcus lactis)ACCC 11092接种到液体培养基中,所述的液体培养基为:各组分在1.0L蒸馏水中的含量为:番茄汁200.0ml、可溶性淀粉0.5g、蛋白胨15.0g、氯化钠5.0g、酵母菌6.0g、吐温80 1.0g、葡萄糖20.0g,PH值调至7.2, 30℃~35℃培养2~3天,得到菌数≥5.0×109cfu/ml的种子培养液,然后接种到50升含有5%(重量百分数)红糖的无菌水中,接种量为无菌水重量的2﹪,在溶氧量为5﹪即发酵罐中氧气的体积与发酵液的体积比为5%的条件下,25℃~30℃于密封罐中静置培养10~15天,得到菌数≥1.0×109cfu/ml的双歧杆菌(Lactococcus lactis)ACCC 11092菌液;

    枯草芽孢杆菌(Bacillus subtills subsp. spizienii Nakamura et al)ACCC 10242T、地衣芽孢杆菌(BacillusLicheniformis (Weigmannn) Chester) ACCC 10146、侧孢芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus (Laubach) shida et al) ACCC 11079、巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium de Bary) ACCC 10010、胶冻芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus Krasilnikov) ACCC 10013、圆褐固氮菌(Azotobacter chroococum Beijerinck) ACCC 10001和放线菌(Actinobacillus capsulatus Arseculeratne) ACCC 11051菌液的制备,其中所述的培养基按重量百分数计均为:淀粉5﹪、豆饼粉7.5﹪、磷酸氢二钾0.2﹪、硫酸铵0.1﹪、硫酸镁0.05﹪、三氯化铁0.005﹪、碳酸钙0.05﹪、酵母粉0.01﹪、硼酸0.005﹪、pH值调至7.2~7.4:

    枯草芽孢杆菌(Bacillus subtills subsp. spizienii Nakamura et al)ACCC 10242T菌液的制备:

    在无菌条件下,将枯草芽孢杆菌(Bacillus subtills subsp. spizienii Nakamura et al)ACCC 10242T接入到培养基中,通气量0.5~1.0L∕L·min,搅拌速度150~200rpm,罐压0.5kg∕cm2,耗氧培养48小时,得到的菌液中枯草芽孢杆菌菌数≥2.0×109cfu/ mL;

    地衣芽孢杆菌(BacillusLicheniformis (Weigmannn) Chester) ACCC 10146菌液的制备:

    在无菌条件下,将地衣芽孢杆菌(BacillusLicheniformis (Weigmannn) Chester) ACCC 10146接入到培养基中,通气量0.5~1.0L∕L·min,搅拌速度150~200rpm,罐压0.5kg∕cm2,耗氧培养48小时,得到的菌液中地衣芽孢杆菌菌数≥2.0×109cfu/ mL;

    侧孢芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus (Laubach) shida et al) ACCC 11079菌液的制备:

    在无菌条件下,将侧孢芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus (Laubach) shida et al) ACCC 11079接入到培养基中,通气量0.5~1.0L∕L·min,搅拌速度150~200rpm,罐压0.5kg∕cm2,耗氧培养48小时,得到的菌液中侧孢芽孢杆菌菌数≥2.0×109cfu/ mL;

    巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium de Bary) ACCC 10010菌液的制备:

    在无菌条件下,将巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium de Bary) ACCC 10010接入到培养基中,通气量0.5~1.0L∕L·min,搅拌速度150~200rpm,罐压0.5kg∕cm2,耗氧培养48小时,得到的菌液中巨大芽孢杆菌菌数≥2.0×109cfu/ mL;

    胶冻芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus Krasilnikov) ACCC 10013菌液的制备:

    在无菌条件下,将胶冻芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus Krasilnikov) ACCC 10013接入到培养基中,通气量0.5~1.0L∕L·min,搅拌速度150~200rpm,罐压0.5kg∕cm2,耗氧培养48小时,得到的菌液中胶冻芽孢杆菌菌数≥2.0×109cfu/ mL;

    圆褐固氮菌(Azotobacter chroococum Beijerinck) ACCC 10001菌液的制备:

    在无菌条件下,将圆褐固氮菌(Azotobacter chroococum Beijerinck) ACCC 10001接入到培养基中,通气量0.5~1.0L∕L·min,搅拌速度150~200rpm,罐压0.5kg∕cm2,耗氧培养48小时,得到的菌液中圆褐固氮菌菌数≥2.0×109cfu/ mL;

    放线菌(Actinobacillus capsulatus Arseculeratne) ACCC 11051菌液的制备:

    在无菌条件下,将放线菌(Actinobacillus capsulatus Arseculeratne) ACCC 11051接入到培养基中,通气量0.5~1.0L∕L·min,搅拌速度150~200rpm,罐压0.5kg∕cm2,耗氧培养48小时,得到的菌液中的放线菌菌数≥2.0×109cfu/ mL;

    ②各菌种菌粉的制备

    通过分别在各菌种的菌液中加入轻质碳酸钙,所述轻质碳酸钙的加入量为菌液总重量的40﹪~50﹪,搅拌30min~40min,脱水浓缩,低温烘干至含水率≤5﹪,粉碎,得到细度≥100目的各菌种的菌粉,其中,酵母菌(Pichia fermentans lodder)ACCC 20319T菌粉的菌数≥2.0×108cfu/g,其余各菌粉中的菌数均≥2.0×109cfu/g;

    ③各菌种菌粉的混合

    将各菌种的菌粉按重量百分数为:光合细菌菌粉10%、酵母菌菌粉10%、乳酸菌菌粉10%、双歧杆菌菌粉10%、枯草芽孢杆菌菌粉10%、地衣芽孢杆菌菌粉10%、侧孢芽孢杆菌菌粉10%、巨大芽孢杆菌菌粉8%、胶冻芽孢杆菌菌粉8%、圆褐固氮菌菌粉8%和放线菌菌粉6%混合得到复合菌粉;

    (2)复配

    将复合菌粉与有机硅和黄腐酸钾按重量百分数为:复合菌粉5%、有机硅1%、黄腐酸钾94%,复配而得到速效多菌种微生物复合冲施肥。

    实施例2

    一种速效多菌种微生物复合冲施肥的制备方法,其特征在于:包括以下步骤:

    (1)复合菌粉的制备

    ①各菌种菌液的制备

    按照实施例1的方法制得各菌种的菌液;

    ②各菌种菌粉的制备

    按照实施例1的方法将步骤①制得的各菌种菌液制得菌粉,其中,酵母菌(Pichia fermentans lodder)ACCC 20319T菌粉的菌数≥2.0×108cfu/g,其余各菌粉中的菌数均≥2.0×109cfu/g;

    ②各菌种菌粉的混合

    将制备得到的各菌种菌粉按重量百分数为:光合细菌菌粉12%、酵母菌菌粉12%、乳酸菌菌粉12%、双歧杆菌菌粉12%、枯草芽孢杆菌菌粉11%、地衣芽孢杆菌菌粉11%、侧孢芽孢杆菌菌粉10%、巨大芽孢杆菌菌粉5%、胶冻芽孢杆菌菌粉5%、圆褐固氮菌菌粉5%和放线菌菌粉5%混合得到复合菌粉;

    (2)复配

    将复合菌粉与有机硅和黄腐酸钾以重量比分别为:菌粉25%、有机硅0.5%、黄腐酸钾74.5%,复配而得到速效多菌种微生物复合冲施肥。

    实施例3

    一种速效多菌种微生物复合冲施肥的制备方法,其特征在于:包括以下步骤:

    (1)复合菌粉的制备

    ①各菌种菌液的制备

    按照实施例1的方法制得各菌种的菌液;

    ②各菌种菌粉的制备

    按照实施例1的方法将步骤①制得的各菌种菌液制得菌粉,其中,酵母菌(Pichia fermentans lodder)ACCC 20319T菌粉的菌数≥2.0×108cfu/g,其余各菌粉中的菌数均≥2.0×109cfu/g;

    ②各菌种菌粉的混合

    将制备得到的各菌种菌粉按重量百分数为:光合细菌菌粉11%、酵母菌菌粉11%、乳酸菌菌粉11%、双歧杆菌菌粉11%、枯草芽孢杆菌菌粉12%、地衣芽孢杆菌菌粉12%、侧孢芽孢杆菌菌粉12%、巨大芽孢杆菌菌粉6%、胶冻芽孢杆菌菌粉6%、圆褐固氮菌菌粉6%和放线菌菌粉8%混合得到复合菌粉;

    (2)复配

    将复合菌粉与有机硅和黄腐酸钾按重量百分数为:菌粉10%、有机硅1%、黄腐酸钾89%,复配而得到速效多菌种微生物复合冲施肥。

    应用实施例   

    采用本发明实施例1制备的速效多菌种微生物复合冲施肥,按照10kg/亩作为冲施肥使用,根据不同作物生长规律,在作物生长、开花期和坐果期,共冲施3次,或在作物定植后,每10—20天一次,共使用2~3次。使用效果如下:

    以白菜为例:株重增加1.8kg、株幅扩大7.1cm、球高增加1.2cm、叶长增加4.3cm叶宽增加1.8cm、叶柄增长2.5cm。

    以小麦为例:株高增加13.2cm、成熟期提前8~10天、产量提到8%~10%、品质可达到一级小麦。

    以黄瓜为例:叶片加厚、保花率提高50%、挂果提前7~10天、产量提高15~20%、角斑病、霜霉病、白粉病发病率为零。

    以西红柿为例:与不使用冲施肥相比,维生素C含量增加4.1倍,可溶性固形物减少、糖酸比增加,叶绿素增加20~30%,真菌、细菌病害减少、果实整齐,坐果期延长20~30天。

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    一种 速效 菌种 微生物 复合 施肥 及其 制备 方法
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