一种液体接种制备柠檬酸大麸曲的方法.pdf

本发明涉及一种液体接种制备柠檬酸用大麸曲的方法，其制备方法的步骤为：⑴将黑曲霉接种于PDA斜面培养基上活化，在35-37度温度下培养5-7天，得到黑曲霉斜面菌种；⑵将步骤⑴培养好的黑曲霉斜面菌种接种于液体种子培养基，在35-38度温度下培养24-48小时，转速150-300转/分，得到黑曲霉液体种子；⑶将步骤⑵培养好的黑曲霉液体种子接入麸曲培养基中，接种量为0.3-2wt%，36-38度翻动培养4-6天，制得大麸曲；⑷将步骤⑶制得的大麸曲转入发酵罐培养。本发明可以省略柠檬酸发酵过程中逐级放大的繁琐工艺，缩短发酵周期，节约了人力成本和设备成本，降低了用摇瓶麸曲接种中的染菌问题，进一步优化了柠檬酸的发酵工艺，促进了柠檬酸的生产，本方法可提高柠檬酸产率5-10%。

1.一种液体接种制备柠檬酸用大麸曲的方法，其特征在于：其制备方法的步骤为：⑴.将黑曲霉接种于PDA斜面培养基上活化，在35-37度温度下培养5-7天，得到黑曲霉斜面菌种；⑵.将步骤⑴培养好的黑曲霉斜面菌种接种于液体种子培养基，在35-38度温度下培养24-48小时，转速150-300转/分，得到黑曲霉液体种子；⑶.将步骤⑵培养好的黑曲霉液体种子接入麸曲培养基中，接种量为0.3-2wt%，36-38度翻动培养4-6天，制得大麸曲；⑷.将步骤⑶制得的大麸曲转入发酵罐培养。 2.根据权利要求1所述的液体接种制备柠檬酸用大麸曲的方法，其特征在于：所述的液体种子培养基的制备方法为：将经高温淀粉酶水解后的10-12wt%玉米淀粉，豆粕粉0.2-1wt%，硫酸铵0.5-2wt%，搅拌均匀后，灭菌，得到液体种子培养基。 3.根据权利要求1所述的液体接种制备柠檬酸用大麸曲的方法，其特征在于：所述的麸曲培养基的制备方法为：将麸皮过筛后取筛上麸皮，按麸皮：水的重量比1:1-2的比例加水，搅拌均匀至无聚团，灭菌，制得麸曲培养基。

技术领域

本发明属于柠檬酸的工业化生产技术领域，尤其是一种液体接种制 备柠檬酸大麸曲的方法。

背景技术

柠檬酸是一种非常重要的有机酸，广泛应用于食品工业、制药、日 用化工等工业部门。近年来，柠檬酸的世界总产量急剧上升，我国柠檬 酸产量达80多万吨，出口60多万吨，出口创汇5亿多美元，产量及出 口量居世界第一，目前已成为世界上最大的柠檬酸生产和出口的国家。目 前，黑曲霉利用糖类发酵生成柠檬酸是重要的生物合成途径。优良的菌种对 于柠檬酸发酵起着决定性的作用，中国柠檬酸发酵达到了相当高的水平，但 是现有的主要问题是：我国柠檬酸行业制备黑曲霉麸曲还是采用传统工艺， 即一批发酵的种子需要制备很多三角瓶麸曲，再经过一级种子和二级种子的 逐级放大，最终进入发酵罐进行发酵。三角瓶麸曲是由斜面直接接种，制备 过程劳动量大，且在接种前需要进行抽查，检验其发酵能力，工艺繁琐，无 法形成标准化生产。且麸曲染菌几率高，无法形成标准化生产等问题。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种由液体接种制作 柠檬酸大麸曲的生产工艺，这种大麸曲能直接投入发酵罐中进行发酵， 简化了发酵工艺，降低生产劳动量，与传统工艺相比，产酸率持平或略 有提高，同时也节约了成本。

本发明解决其技术问题是通过以下技术方案实现的：

一种液体接种制备柠檬酸用大麸曲的方法，其特征在于：其制备方 法的步骤为：

⑴.将黑曲霉接种于PDA斜面培养基上活化，在35-37度温度下培养 5-7天，得到黑曲霉斜面菌种；

⑵.将步骤⑴培养好的黑曲霉斜面菌种接种于液体种子培养基，在 35-38度温度下培养24-48小时，转速150-300转/分，得到黑曲霉液体种 子；

⑶.将步骤⑵培养好的黑曲霉液体种子接入麸曲培养基中，接种量为 0.3-2wt%，36-38度翻动培养4-6天，制得大麸曲；

⑷.将步骤⑶制得的大麸曲转入发酵罐培养。

所述的液体种子培养基的制备方法为：将经高温淀粉酶水解后的 10-12wt%玉米淀粉，豆粕粉0.2-1wt%，硫酸铵0.5-2wt%，搅拌均匀后， 灭菌，得到液体种子培养基。

所述的麸曲培养基的制备方法为：将麸皮过筛后取筛上麸皮，按麸 皮：水的重量比1:1-2的比例加水，搅拌均匀至无聚团，灭菌，制得麸曲 培养基。

本发明的优点和有益效果为：

本发明通过制作大麸曲，不仅可以省略柠檬酸发酵过程中逐级放大 的繁琐工艺，缩短发酵周期，节约了人力成本和设备成本，降低了用摇 瓶麸曲接种中的染菌问题，进一步优化了柠檬酸的发酵工艺，促进了柠 檬酸的生产，本方法可提高柠檬酸产率5-10%。

具体实施方式

下面通过具体实施例对本发明作进一步详述，以下实施例只是描述 性的，不是限定性的，不能以此限定本发明的保护范围。

一种液体接种制备柠檬酸用大麸曲的方法，其制备方法的步骤为：

⑴.将黑曲霉接种于PDA斜面培养基上活化，在35-37度温度下培养 5-7天，得到黑曲霉斜面菌种。

⑵.将步骤⑴培养好的黑曲霉斜面菌种接种于液体种子培养基，在 35-38度温度下培养24-48小时，转速150-300转/分，得到黑曲霉液体种 子。液体种子培养基的制备方法为：将经高温淀粉酶水解后的10-12%wt% 玉米淀粉，豆粕粉0.2-1wt%，硫酸铵0.5-2wt%，搅拌均匀后，灭菌，得 到液体种子培养基。

⑶.将步骤⑵培养好的黑曲霉液体种子接入麸曲培养基中，接种量为 0.3-2wt%，36-38度翻动培养4-6天，制得大麸曲。麸曲培养基的制备方 法为：将麸皮过筛后取筛上麸皮，按麸皮：水的重量比1:1-2的比例加水， 搅拌均匀至无聚团，灭菌，制得麸曲培养基。

⑷.将步骤⑶制得的大麸曲转入发酵罐培养。

采用本发明液体接种制备柠檬酸大麸曲的方法与传统柠檬酸生产工 艺进行试验对比。

传统柠檬酸生产工艺

工艺路线：

菌种斜面→三角瓶麸曲→一级种子罐培养→发酵罐发酵

发酵72小时后，取出测其产酸（原料糖浓度为12%）

接种量 3% 5% 8% 10% 第一批 9.5% 9.7% 10.8% 10.9% 第二批 9.7% 10.1% 10.7% 11.0% 第三批 10.3% 10.5% 10.8% 11.2%

本发明制备大麸曲

工艺路线：

菌种斜面→液体种子摇瓶→麸曲固体发酵罐→发酵罐发酵

发酵65小时后，取出测其产酸（原料糖浓度为12%）

接种量 3% 5% 8% 10% 第一批 10.5% 10.9% 11.0% 11.8% 第二批 10.8% 11.3% 11.2% 11.9% 第三批 10.5% 11% 11.4% 11.8%

试验说明：

上述实验数据表明：本发明与传统工艺相比较，在相同的原料浓度 以及接种量的情况下，其产酸率平均可提高5%-10%，并且缩短了发酵时 间，节约了能源，同时使得麸曲标准化，更适合大规模的工业化生产。

尽管为说明目的公开了本发明的实施例，但是本领域的技术人员可 以理解：在不脱离本发明及所附权利要求的精神和范围内，各种替换、 变化和修改都是可能的，因此，本发明的范围不局限于实施例所公开的 内容。