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一种利用新鲜肉苁蓉生产毛蕊花糖苷的方法.pdf

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  • 文档编号:855032
  • 上传时间:2018-03-15
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  • 摘要
    申请专利号:

    CN200910041646.3

    申请日:

    2009.08.04

    公开号:

    CN101629200A

    公开日:

    2010.01.20

    当前法律状态:

    终止

    有效性:

    无权

    法律详情:

    未缴年费专利权终止IPC(主分类):C12P 19/44申请日:20090804授权公告日:20120111终止日期:20120804|||授权|||实质审查的生效|||公开

    IPC分类号:

    C12P19/44; C07H15/18; C07H1/00

    主分类号:

    C12P19/44

    申请人:

    中山大学; 深圳学者健康工程有限公司; 广州绿色盈康生物工程有限公司

    发明人:

    刘 昕; 贾宝国; 田晓玲; 刘小卓; 彭青云; 招淑燕; 肖 健; 陈娅婷; 何秀燕

    地址:

    510275广东省广州市新港西路135号

    优先权:

    专利代理机构:

    代理人:

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    内容摘要

    本发明提出一种利用新鲜肉苁蓉生产毛蕊花糖苷的方法。本发明方法是将新鲜肉苁蓉肉质茎,经高温灭酶、细胞破碎、浆液提取、分离提纯等系统工艺处理,得到肉苁蓉提取液;通过调整分离提纯工艺条件,收获的肉苁蓉提取液中(以干物质计)苯乙醇苷类成分百分比含量可达54.3%~93%;将得到的肉苁蓉提取液作为催化反应底物,以β-葡萄糖苷酶工业酶制剂固定化酶作为生物催化剂,催化水解底物中松果菊苷使葡萄糖基配体末端断裂、定向转化为高活性的毛蕊花糖苷单体化合物;将经催化反应后的肉苁蓉提取液,通过浓缩及干燥工艺,获得富含毛蕊

    权利要求书

    1: 一种利用新鲜肉苁蓉生产毛蕊花糖苷的方法,将新鲜肉苁蓉肉质茎,经高温灭酶、细胞破碎、 浆液提取、分离提纯工艺处理,得到肉苁蓉提取液;再将肉苁蓉提取液作为催化反应底物,以β-葡萄 糖苷酶工业酶制剂固定化酶作为生物催化剂,催化水解底物中松果菊苷使葡萄糖基配体末端断裂、定 向转化为高活性的毛蕊花糖苷单体化合物;催化反应过程温度为38℃~60℃,pH为4.0~5.8;时间为 4h~8h,催化反应过程反应物中的β-葡萄糖苷酶活力为20U/g~1000U/g;将经催化反应后的肉苁蓉提 取液,再通过浓缩及干燥工艺,获得富含毛蕊花糖苷成分的粉状物或干燥物。
    2: 按照权利要求1所述的方法,其特征是该方法的具体步骤包括: (1)挑选新鲜肉苁蓉肉质茎,通过进行高温灭酶,然后置于通常工业破碎碾磨装置中将肉苁蓉肉 质茎破碎碾磨,加入工业纯净水洗涤破碎细胞;然后采用通常工业压滤机压滤或工业离心机分离,获 取肉苁蓉细胞浆液; (2)将上述得到的肉苁蓉细胞浆液,采用通常工业超滤膜分离,再采用通常工业纳滤膜分离,得 到富含苯乙醇苷类成分的肉苁蓉提取液; (3)将上述得到的肉苁蓉提取液作为催化反应底物,采用通常固定化酶工业生产中的吸附法固定 方式,获得的β-葡萄糖苷酶工业酶制剂固定化酶作为生物催化剂,经通常工业固定化酶反应器进行催 化反应,催化水解去掉底物中松果菊苷葡萄糖基配体末端的一个葡萄糖基、定向转化为毛蕊花糖苷单 体化合物;催化反应过程温度为38℃~60℃,pH为4.0~5.8,时间为4h~8h,催化反应过程反应物中 的β-葡萄糖苷酶活力为20U/g~1000U/g; (4)将经上述催化反应后的肉苁蓉提取液,通过通常工业真空浓缩工艺或工业薄膜蒸发浓缩工艺, 获得固形物含量为30%~50%的浓缩物;再通过工业喷雾干燥工艺或其他干燥方法,获得富含毛蕊花 糖苷单体化合物成分的粉状物或干燥物。
    3: 按照权利要求1或2所述的方法,其特征是在催化反应过程中添加K + 、Na + 、Mn 2+ 或Co 2+ 作为 催化反应的激活剂,添加的激活剂在初始反应物中浓度为0.1mol/L~2.5mol/L。 4.按照权利要求3所述的方法,其特征是在催化反应过程中添加的K + 、Na + 、Mn 2+ 或Co 2+ 激活剂 在初始反应物中浓度为0.5mol/L~1.5mol/L。 5.按照权利要求1或2所述的方法,其特征是所述的高温灭酶的温度为85℃~130℃,时间为 5min~10min。 6.按照权利要求2所述的方法,其特征是步骤(1)中所述的加入工业纯净水洗涤破碎细胞的加 水量为肉苁蓉破碎细胞重量的100%~400%。 7.按照权利要求2所述的方法,其特征是在步骤(1)中所述的采用通常工业压滤机压滤或工业 离心机分离获取肉苁蓉细胞浆液之后,再将滤渣经一次至数次加入工业纯净水,每次加入工业纯净水 的量为滤渣重量的100%~400%,一次至数次经通常工业破碎碾磨机进一步碾磨成浆状物,或者同时 再采用通常工业超声波提取装置对破碎细胞进行提取,再经工业压滤机压滤或工业离心机分离进一步 获取肉苁蓉细胞浆液。 8.按照权利要求2所述的方法,其特征是步骤(2)中所述的超滤膜的相对分子质量为1000~4500, 纳滤膜的相对分子质量为200~300。 9.按照权利要求2所述的方法,其特征是步骤(2)中再采用通常工业大孔树脂吸附分离工艺, 或/和采用通常工业层析柱分离纯化工艺,或/和采用通常模拟移动床色谱分离系统工艺或通常多功能色 谱分离工艺,进一步分离纯化。 10.按照权利要求1或2所述的方法,其特征是所述的的β-葡萄糖苷酶工业酶制剂,包括β-葡萄 糖苷酶、纤维素酶、植物提取复合酶或/和植物水解复合酶。 11.按照权利要求2所述的方法,其特征是步骤(4)中所述的工业真空浓缩工艺或工业薄膜蒸发 浓缩工艺的温度为42℃~80℃;工业喷雾干燥工艺的干燥塔进风温度为125℃~285℃。
    4: 0~
    5: 8;时间为 4h~8h,催化反应过程反应物中的β-葡萄糖苷酶活力为20U/g~1000U/g;将经催化反应后的肉苁蓉提 取液,再通过浓缩及干燥工艺,获得富含毛蕊花糖苷成分的粉状物或干燥物。 2.按照权利要求1所述的方法,其特征是该方法的具体步骤包括: (1)挑选新鲜肉苁蓉肉质茎,通过进行高温灭酶,然后置于通常工业破碎碾磨装置中将肉苁蓉肉 质茎破碎碾磨,加入工业纯净水洗涤破碎细胞;然后采用通常工业压滤机压滤或工业离心机分离,获 取肉苁蓉细胞浆液; (2)将上述得到的肉苁蓉细胞浆液,采用通常工业超滤膜分离,再采用通常工业纳滤膜分离,得 到富含苯乙醇苷类成分的肉苁蓉提取液; (3)将上述得到的肉苁蓉提取液作为催化反应底物,采用通常固定化酶工业生产中的吸附法固定 方式,获得的β-葡萄糖苷酶工业酶制剂固定化酶作为生物催化剂,经通常工业固定化酶反应器进行催 化反应,催化水解去掉底物中松果菊苷葡萄糖基配体末端的一个葡萄糖基、定向转化为毛蕊花糖苷单 体化合物;催化反应过程温度为38℃~60℃,pH为4.0~5.8,时间为4h~8h,催化反应过程反应物中 的β-葡萄糖苷酶活力为20U/g~1000U/g; (4)将经上述催化反应后的肉苁蓉提取液,通过通常工业真空浓缩工艺或工业薄膜蒸发浓缩工艺, 获得固形物含量为30%~50%的浓缩物;再通过工业喷雾干燥工艺或其他干燥方法,获得富含毛蕊花 糖苷单体化合物成分的粉状物或干燥物。 3.按照权利要求1或2所述的方法,其特征是在催化反应过程中添加K + 、Na + 、Mn 2+ 或Co 2+ 作为 催化反应的激活剂,添加的激活剂在初始反应物中浓度为0.1mol/L~2.5mol/L。 4.按照权利要求3所述的方法,其特征是在催化反应过程中添加的K + 、Na + 、Mn 2+ 或Co 2+ 激活剂 在初始反应物中浓度为0.5mol/L~1.5mol/L。 5.按照权利要求1或2所述的方法,其特征是所述的高温灭酶的温度为85℃~130℃,时间为 5min~10min。
    6: 按照权利要求2所述的方法,其特征是步骤(1)中所述的加入工业纯净水洗涤破碎细胞的加 水量为肉苁蓉破碎细胞重量的100%~400%。
    7: 按照权利要求2所述的方法,其特征是在步骤(1)中所述的采用通常工业压滤机压滤或工业 离心机分离获取肉苁蓉细胞浆液之后,再将滤渣经一次至数次加入工业纯净水,每次加入工业纯净水 的量为滤渣重量的100%~400%,一次至数次经通常工业破碎碾磨机进一步碾磨成浆状物,或者同时 再采用通常工业超声波提取装置对破碎细胞进行提取,再经工业压滤机压滤或工业离心机分离进一步 获取肉苁蓉细胞浆液。
    8: 按照权利要求2所述的方法,其特征是步骤(2)中所述的超滤膜的相对分子质量为1000~4500, 纳滤膜的相对分子质量为200~300。
    9: 按照权利要求2所述的方法,其特征是步骤(2)中再采用通常工业大孔树脂吸附分离工艺, 或/和采用通常工业层析柱分离纯化工艺,或/和采用通常模拟移动床色谱分离系统工艺或通常多功能色 谱分离工艺,进一步分离纯化。
    10: 按照权利要求1或2所述的方法,其特征是所述的的β-葡萄糖苷酶工业酶制剂,包括β-葡萄 糖苷酶、纤维素酶、植物提取复合酶或/和植物水解复合酶。
    11: 按照权利要求2所述的方法,其特征是步骤(4)中所述的工业真空浓缩工艺或工业薄膜蒸发 浓缩工艺的温度为42℃~80℃;工业喷雾干燥工艺的干燥塔进风温度为125℃~285℃。

    说明书


    一种利用新鲜肉苁蓉生产毛蕊花糖苷的方法

        【技术领域】

        本发明涉及一种以新鲜肉苁蓉为原料,通过固定化酶进行催化转化生产毛蕊花糖苷单体化合物的方法。

        背景技术

        肉苁蓉(Herba Cistanches)是著名的补益中药,具有益精气、补肾助阳和延缓衰老等功效。分析表明,肉苁蓉的主要活性成分为苯乙醇苷类、苯甲醇苷类、环烯醚萜苷类、木脂素苷类、低聚糖类衍生物、D-甘露醇和甜菜碱等。苯乙醇苷类(Phenylethanoid Glycosides,Ph Gs)包括松果菊苷(Echinacoside)、毛蕊花糖苷(Acteoside)等活性物质,通过肠内菌代谢研究发现,苯乙醇苷主要成分松果菊苷在胃肠道中运动过程需经大肠内微生物酶催化转化为毛蕊花糖苷的代谢通道,是导致口服后生物利用度与疗效存在显著差异的主要因素。毛蕊花糖苷单体化合物具有小分子和低极性的特征,在药物吸收中展示良好的吸收率和特殊的药理活性。

        【发明内容】

        本发明的目的是提供一种利用新鲜肉苁蓉原料,通过系统工艺处理和工业固定化酶反应器进行催化转化生产毛蕊花糖苷单体化合物的方法。

        本发明的方法是,将新鲜肉苁蓉肉质茎,经高温灭酶、细胞破碎、浆液提取、分离提纯工艺处理,得到肉苁蓉提取液;再将肉苁蓉提取液作为催化反应底物,以β-葡萄糖苷酶工业酶制剂固定化酶作为生物催化剂,进行催化反应,催化水解底物中松果菊苷使葡萄糖基配体末端断裂、定向转化为高活性的毛蕊花糖苷单体化合物;催化反应过程温度为38℃~60℃,pH为4.0~5.8;时间为4h~8h;催化反应过程反应物中的β-葡萄糖苷酶活力为20U/g~1000U/g;将经催化反应后的肉苁蓉提取液,再通过浓缩及干燥工艺,获得富含毛蕊花糖苷成分的粉状物或干燥物。

        本发明方法的具体步骤包括:

        1、挑选新鲜肉苁蓉肉质茎,进行高温灭酶,然后置于通常工业破碎碾磨装置中将肉苁蓉肉质茎破碎碾磨,加入工业纯净水洗涤破碎细胞;然后采用通常工业压滤机压滤或工业离心机分离,获取肉苁蓉细胞浆液;可再将滤渣经一次至数次(一般为1~3次)加入工业纯净水,一次至数次经通常工业破碎碾磨机进一步碾磨成浆状物,还可同时采用通常工业超声波提取装置对破碎细胞进一步提取,再经工业压滤机压滤或工业离心机分离进一步获取肉苁蓉细胞浆液;

        2、将上述得到的肉苁蓉细胞浆液,采用通常工业超滤膜分离,选择性筛分及截留除去多糖、蛋白质等大分子杂质以及微粒和亚微粒等杂质;再采用通常工业纳滤膜分离,选择性筛分及截留除去氨基酸、D-甘露醇、甜菜碱等小分子杂质;还可再采用通常工业大孔树脂吸附分离工艺,或/和采用通常工业层析柱分离纯化工艺,或/和采用通常模拟移动床色谱分离系统或通常多功能色谱分离工艺进一步分离纯化,得到富含苯乙醇苷类成分的肉苁蓉提取液;通过调整以上分离提纯工艺条件,收获的肉苁蓉提取液中(以干物质计)苯乙醇苷类成分百分比含量可达54.3%~93%;

        3、将上述得到的肉苁蓉提取液作为催化反应底物,采用通常固定化酶工业生产中的吸附法固定方式,获得的β-葡萄糖苷酶工业酶制剂固定化酶作为生物催化剂,经通常工业固定化酶反应器进行间断式或连续式催化反应,催化水解去掉底物中松果菊苷葡萄糖基配体末端的一个葡萄糖基、定向转化为毛蕊花糖苷单体化合物;催化反应过程温度为38℃~60℃,pH为4.0~5.8,时间为4h~8h,催化反应过程反应物中的β-葡萄糖苷酶活力为20U/g~1000U/g;经测定,底物中松果菊苷转化为毛蕊花糖苷的转化率达78.5%~96%;

        4、将经步骤3催化反应后的肉苁蓉提取液,通过通常工业真空浓缩工艺或工业薄膜蒸发浓缩工艺,获得固形物含量为30%~50%的浓缩物;再通过工业喷雾干燥工艺或其他干燥方法,获得富含毛蕊花糖苷单体化合物成分的粉状物或干燥物。收获的粉状物或干燥物中毛蕊化糖苷成分百分比含量可达38.6%~89.2%。

        本发明方法中,催化反应过程可再添加K+、Na+、Mn2+或Co2+作为催化反应的激活剂以促进酶的活性,添加的激活剂在初始反应物中浓度为0.1mol/L~2.5mol/L,最佳浓度为0.5mol/L~1.5mol/L。

        本发明方法涉及的新鲜肉苁蓉肉质茎,可以是新收获(未经冷藏或冷冻保鲜)的新鲜肉苁蓉肉质茎,或者是置于工业冷藏库保鲜的新鲜肉苁蓉肉质茎或置于工业冷冻库冷藏的速冻肉苁蓉肉质茎;或者是上述新鲜肉苁蓉肉质茎的切片及碎料。本发明所述的肉苁蓉是符合《中华人民共和国药典》2005年版收载的列当科植物肉苁蓉Cistanche deserticola Y.C.Ma或管花肉苁蓉Cistanche tubulosa(Schrenk)Wight。

        本发明方法涉及的工业冷藏库保鲜的库温一般为为1℃~13℃,工业冷冻库冷藏的库温一般为为-52℃~-10℃。每次加入工业纯净水的量为肉苁蓉破碎细胞或滤渣的100%~400%(重量比)。

        本发明方法涉及的高温灭酶的温度为85℃~130℃,时间为5min~10min。

        本发明方法涉及的超滤膜的相对分子质量为1000~4500,纳滤膜相对分子质量为200~300;超滤膜选用CA或CTA、PAN、PS、PSA、PES、PVDF、PEK、SPS的系列膜型号;纳滤膜选用4040-UHT-ESNA或8540-UHY-ESNA、ESNA-FREE650、ESNA-FREE1700、NTR7450HG、NTR729HG、NF-CA膜、NF-CA卷式元件及中空纤维件的系列膜型号;大孔吸附树脂选用XAD、Diaion、SP、Posapak及Chromosorb及非离子型高分子吸附剂AB-8、CHA-III、CAD-40、D101、D301、D296、D396R、D4006、D4020、D3520、DA201、DM301、D130、GDX104、HPD100、HPD450、HPD500、HPD600、HPD8、H107、JD-KW、LD601、LD605、ME-1、ME-2、ME-3、NKA-2、NKA-9、R-A、S8、SIP、WLD及X-5型系列型号;模拟移动床色谱分离系统及多功能色谱分离系统,可以选用MB、MD、ME、MF制备型色谱分离层析仪、SMBC实验型、SMBC中试型、XZ12E-4L型、XZ20Z-2L型及SMBC工业化连续制备色谱型的色谱分离系统。本发明涉及的超滤膜、纳滤膜、大孔吸附树脂、非离子型高分子吸附剂、工业层析柱、移动床色谱分离系统、多功能色谱分离系统,可选用通常国外及国内商品。

        本发明方法涉及的工业生产中的吸附法固定方式获得固定化酶,通常是将β-葡萄糖苷酶工业酶制剂酶液与吸附剂接触,再经洗涤除去不吸附的酶液便可以制得固定化酶,包括物理吸附法、离子吸附法;吸附剂包括微孔玻璃、羟基磷灰石、赛珞玢、大孔型合成树脂、特种陶瓷、DEAE-纤维素、DEAE-葡聚糖凝胶、Amberlite IRA-93、IRA-410、IRA-900、Dowex-50、Amberlite CG-50、IRC-50、IR-120,可选用通常国外及国内商品。

        本发明方法涉及的β-葡萄糖苷酶工业酶制剂,包括β-葡萄糖苷酶及富含β-葡萄糖苷酶的纤维素酶、植物提取复合酶、植物水解复合酶。

        本发明方法涉及的工业固定化酶反应器可以是通常工业搅拌罐式反应器、固定化床反应器或流化床反应器。

        本发明方法涉及的工业真空浓缩工艺或工业薄膜蒸发浓缩工艺地温度为42℃~80℃;工业喷雾干燥工艺的干燥塔进风温度为125℃~285℃。

        本发明方法涉及的其它工业干燥的方法包括通常工业滚筒干燥、气流干燥、流化床干燥、微波真空干燥、微波干燥、真空干燥或热风循环干燥。

        本发明方法生产的富含毛蕊花糖苷单体化合物成分的粉状物或干燥物,可直接用于医药原料,或作为化妆品原料,也可作为原料或复方原料生产口服液、胶囊剂、片剂、颗粒剂、冲剂、丸剂或袋泡茶等功能性保健食品。本发明方法的推广实施,将使肉苁蓉这一名贵的中药更好地造福于人类的健康。

        本发明方法中涉及的各种量的百分比(%),除了另有说明外,均为重量百分比。

        【具体实施方式】

        下面结合实施例对本发明作进一步详细说明。

        实施例一:

        1、挑选置于库温为4℃的工业冷藏库保鲜的新鲜肉苁蓉肉质茎,通过工业微波加热装置进行高温灭酶,温度为85℃,时间为5min;然后置于工业破碎碾磨装置中将肉苁蓉肉质茎破碎碾磨,加入工业纯净水洗涤破碎细胞,水的加入量为破碎细胞重量的200%;然后采用工业压滤机压滤,获取肉苁蓉细胞浆液;

        2、将上述得到的肉苁蓉细胞浆液采用相对分子质量为3000的超滤膜分离,再采用相对分子质量为250的纳滤膜进行纳滤,然后采用AB-8型的工业大孔吸附树脂进行吸附分离,并经工业层析柱分离纯化工艺,以及采用XZ12E-4L型多功能色谱分离系统进一步分离提纯,得到富含苯乙醇苷类成分的肉苁蓉提取液;经检测,收获的肉苁蓉提取液中(以干物质计)苯乙醇苷类成分百分比含量为93%;

        3、将上述得到的肉苁蓉提取液作为催化反应底物,采用通常工业生产中的物理吸附法羟基磷灰石作为吸附剂的固定方式,获得β-葡萄糖苷酶固定化酶作为生物催化剂,经通常固定化床反应器进行连续式催化反应,催化水解去掉底物中松果菊苷葡萄糖基配体末端的一个葡萄糖基、定向转化为毛蕊花糖苷单体化合物;加入在初始反应物中浓度为2.5mol/L的Na+作为催化反应的激活剂,催化反应过程温度为47℃,pH为4.9,每批次催化反应时间为5.5h,连续进行催化反应5批次;催化反应过程反应物中的β-葡萄糖苷酶活力为45U/g;经检测,底物中松果菊苷转化为毛蕊花糖苷单体化合物的转化率达96%;

        4、将经上述催化反应后的肉苁蓉提取液,通过工业真空浓缩工艺,温度为60℃,获得固形物含量为40%的浓缩物;进一步通过工业真空干燥工艺,干燥温度为58℃,获得富含毛蕊花糖苷单体化合物成分的干燥物;经分析测定,所收获的干燥物中(以干物质计),毛蕊花糖苷单体化合物的百分比含量为89.2%。

        实施例二:

        1、挑选置于库温为10℃的工业冷藏库保鲜的新鲜肉苁蓉肉质茎,通过工业加热装置进行高温灭酶,温度为130℃,时间为10min;然后置于工业破碎碾磨装置中将肉苁蓉肉质茎破碎碾磨,加入工业纯净水洗涤破碎细胞,水的加入量为破碎细胞重量的150%;然后采用工业离心机分离,获取肉苁蓉细胞浆液;并再将滤渣加入工业纯净水,水的加入量为滤渣重量的200%,经通常工业破碎碾磨机进一步碾磨成浆状物,并采用超声波提取装置对破碎细胞进行提取,再经工业离心机分离进一步获取肉苁蓉细胞浆液;

        2、将上述得到的肉苁蓉细胞浆液,采用相对分子质量为3500的超滤膜分离,再采用相对分子质量为300的纳滤膜进行纳滤,然后采用XAD型的工业大孔吸附树脂进行吸附分离,并经工业层析柱分离纯化工艺,以及XZ20Z-ZL型多功能色谱分离系统进一步分离提纯,得到富含苯乙醇苷类成分的肉苁蓉提取液;经检测,收获的肉苁蓉提取液中(以干物质计)苯乙醇苷类成分百分比含量为91.3%;

        3、将上述得到的肉苁蓉提取液作为催化反应底物,采用通常工业生产中的物理吸附法赛珞玢作为吸附剂的固定方式,获得β-葡萄糖苷酶固定化酶作为生物催化剂,经通常工业固定化反应器进行连续式催化反应,催化水解去掉底物中松果菊苷葡萄糖基配体末端的一个葡萄糖基、定向转化为毛蕊花糖苷单体化合物;加入在初始反应物中浓度为0.1mol/L的Mn2+作为催化反应的激活剂;催化反应过程温度为43℃,pH为4.6,每批次催化反应时间为6.0h,连续进行催化反应10批次;催化反应过程反应物中的β-葡萄糖苷酶活力为100U/g;经检测,底物中松果菊苷转化为毛蕊花糖苷单体化合物的转化率达93.2%;

        4、将经上述催化反应后的肉苁蓉提取液,通过工业薄膜蒸发浓缩工艺,温度为55℃,获得固形物含量为43%的浓缩物;进一步通过工业滚筒干燥工艺,干燥温度为55℃,获得富含毛蕊花糖苷单体化合物成分的干燥物;经分析测定,所收获的干燥物中(以干物质计),毛蕊花糖苷单体化合物的百分比含量为88.9%。

        实施例三:

        1、挑选置于库温为-32℃的工业冷冻库冷藏的新鲜肉苁蓉肉质茎,通过工业加热装置进行高温灭酶,温度为125℃,时间为10min;然后置于工业破碎碾磨装置中将肉苁蓉肉质茎破碎碾磨,加入工业纯净水洗涤破碎细胞,水的加入量为破碎细胞重量的300%;然后采用工业压滤机压滤,获取肉苁蓉细胞浆液;

        2、将上述得到的肉苁蓉细胞浆液采用相对分子质量为4500的超滤膜分离,再采用相对分子质量为250的纳滤膜进行纳滤,然后采用NKA-2型的工业大孔吸附树脂进行吸附分离,并经工业层析柱分离纯化工艺进一步分离提纯,得到富含苯乙醇苷类成分的肉苁蓉提取液;经检测,收获的肉苁蓉提取液中(以干物质计)苯乙醇苷类成分百分比含量为76.5%;

        3、将上述得到的肉苁蓉提取液作为催化反应底物,采用通常工业生产中的物理吸附法大孔型合成树脂作为吸附剂的固定方式,获得β-葡萄糖苷酶固定化酶作为生物催化剂,经通常工业流化床反应器进行连续式催化反应,催化水解去掉底物中松果菊苷葡萄糖基配体末端的一个葡萄糖基、定向转化为毛蕊花糖苷单体化合物;催化反应过程温度为42℃,pH为4.9,每批次催化反应时间为8h,连续进行催化反应8批次;催化反应过反应物中的β-葡萄糖苷酶活力为80U/g;经检测,底物中松果菊苷转化为毛蕊花糖苷单体化合物的转化率达88.5%;

        4、将经上述催化反应后的肉苁蓉提取液,通过工业真空浓缩工艺,温度为60℃,获得固形物含量为42%的浓缩物;进一步通过工业喷雾干燥工艺,干燥塔进风温度为185℃,获得富含毛蕊花糖苷单体化合物成分的粉状物;经分析测定,所收获的粉状物中(以干物质计),毛蕊花糖苷单体化合物的百分比含量为73.1%。

        实施例四:

        1、挑选置于库温为13℃的工业冷藏库保鲜的新鲜肉苁蓉肉质茎,通过工业加热装置进行高温灭酶,温度为130℃,时间为9min;然后置于工业破碎碾磨装置中将肉苁蓉肉质茎破碎碾磨,加入工业纯净水洗涤破碎细胞,水的加入量为破碎细胞重量的100%;然后采用工业压滤机压滤分离,获取肉苁蓉细胞浆液;并再分别将滤渣经2次加入工业纯净水,每次水的加入量为滤渣重量的100%,再经通常工业破碎碾磨机进一步碾磨成浆状物,再经工业压滤机压滤分离进一步获取肉苁蓉细胞浆液;

        2、将上述得到的肉苁蓉细胞浆液采用相对分子质量为4000的超滤膜分离,再采用相对分子质量为300的纳滤膜进行纳滤,然后采用CAD-40型的工业大孔吸附树脂进行吸附分离,并经工业层析柱分离纯化工艺进一步分离提纯,得到富含苯乙醇苷类成分的肉苁蓉提取液;经检测,收获的肉苁蓉提取液中(以干物质计)苯乙醇苷类成分百分比含量为79.1%;

        3、将上述得到的肉苁蓉提取液作为催化反应底物,采用通常工业生产中的离子吸附法DEAE-葡聚糖凝胶作为吸附剂的固定方式,获得β-葡萄糖苷酶固定化酶作为生物催化剂,经通常工业搅拌罐式反应器进行连续式催化反应,催化水解去掉底物中松果菊苷葡萄糖基配体末端的一个葡萄糖基、定向转化为毛蕊花糖苷单体化合物;催化反应过程温度为47℃,pH为5.0,每批次催化反应时间为5.0h,连续进行催化反应13批次;催化反应过反应物中的β-葡萄糖苷酶活力为100U/g;经检测,底物中松果菊苷转化为毛蕊花糖苷单体化合物的转化率达90.1%;

        4、将经上述催化反应后的肉苁蓉提取液,通过工业薄膜蒸发浓缩工艺,温度为60℃,获得固形物含量为48%的浓缩物;进一步通过工业滚筒干燥工艺,干燥温度为55℃,获得富含毛蕊花糖苷单体化合物成分的干燥物;经分析测定,所收获的干燥物中(以干物质计),毛蕊花糖苷单体化合物的百分比含量为70.1%。

        实施例五:

        1、挑选置于库温为-18℃的工业冷冻库冷藏的新鲜肉苁蓉肉质茎,通过工业加热装置进行高温灭酶,温度为130℃,时间为10min;然后置于工业破碎碾磨装置中将肉苁蓉肉质茎破碎碾磨,加入工业纯净水洗涤破碎细胞,水的加入量为破碎细胞重量的400%;然后采用工业压滤机压滤,获取肉苁蓉细胞浆液;

        2、将上述得到的肉苁蓉细胞浆液采用相对分子质量为1000的超滤膜分离,再采用相对分子质量为250的纳滤膜进行纳滤,然后采用DM301型的工业大孔吸附树脂进行吸附分离,并经工业层析柱分离纯化工艺进一步分离提纯,得到富含苯乙醇苷类成分的肉苁蓉提取液;经检测,收获的肉苁蓉提取液中(以干物质计)苯乙醇苷类成分百分比含量为78.9%;

        3、将上述得到的肉苁蓉提取液作为催化反应底物,采用通常工业生产中的离子吸附法IRC-50作为吸附剂的固定方式,获得β-葡萄糖苷酶固定化酶作为生物催化剂,经通常工业搅拌罐式反应器进行连续式催化反应,催化水解去掉底物中松果菊苷葡萄糖基配体末端的一个葡萄糖基、定向转化为毛蕊花糖苷单体化合物;催化反应过程温度为45℃,pH为4.2,每批次催化反应时间为7h,连续进行催化反应8批次,催化反应过反应物中的β-葡萄糖苷酶活力为120U/g;经检测,底物中松果菊苷转化为毛蕊花糖苷单体化合物的转化率达95%;

        4、将经上述催化反应后的肉苁蓉提取液,通过工业真空浓缩工艺,温度为56℃,获得固形物含量为30%的浓缩物;进一步通过工业真空干燥工艺,干燥温度为56℃,获得富含毛蕊花糖苷单体化合物成分的干燥物;经分析测定,所收获的干燥物中(以干物质计),毛蕊花糖苷单体化合物的百分比含量为72.3%。

        实施例六:

        1、挑选置于库温为10℃的工业冷藏库保鲜的新鲜肉苁蓉肉质茎,通过工业加热装置进行高温灭酶,温度为130℃,时间为10min;然后置于工业破碎碾磨装置中将肉苁蓉肉质茎破碎碾磨,加入工业纯净水洗涤破碎细胞,水的加入量为破碎细胞重量的250%;然后采用工业压滤机压滤,获取肉苁蓉细胞浆液;并再将滤渣加入工业纯净水,水的加入量为滤渣重量的200%,经通常工业破碎碾磨机进一步碾磨成浆状物,再经工业压滤机压滤分离进一步获取肉苁蓉破碎细胞浆液;

        2、将上述得到的肉苁蓉细胞浆液采用相对分子质量为1500的中空纤维超滤膜分离,再采用相对分子质量为200的纳滤膜进行纳滤,然后采用X-5型的工业大孔吸附树脂进行吸附分离,并经工业层析柱分离纯化工艺进一步分离提纯,得到富含苯乙醇苷类成分的肉苁蓉提取液;经检测,收获的肉苁蓉提取液中(以干物质计)苯乙醇苷类成分百分比含量为82.3%;

        3、将上述得到的肉苁蓉提取液作为催化反应底物,采用通常工业生产中的离子吸附法IRC-120作为吸附剂的固定方式,获得植物水解复合酶固定化酶作为生物催化剂,经通常工业搅拌罐式反应器进行间断式催化反应,催化水解去掉底物中松果菊苷葡萄糖基配体末端的一个葡萄糖基、定向转化为毛蕊花糖苷单体化合物;催化反应过程温度为45℃,pH为4.9,催化反应时间为6h;催化反应过反应物中的β-葡萄糖苷酶活力为400U/g;经检测,底物中松果菊苷转化为毛蕊花糖苷单体化合物的转化率达88.6%;

        4、将经上述催化反应后的肉苁蓉提取液,通过工业薄膜蒸发浓缩工艺,温度为70℃,获得固形物含量为38%的浓缩物;进一步通过工业滚筒干燥工艺,干燥温度为60℃,获得富含毛蕊花糖苷单体化合物成分的干燥物;经分析测定,所收获的干燥物中(以干物质计),毛蕊花糖苷单体化合物的百分比含量为71.2%。

        实施例七:

        1、挑选肉苁蓉碎料,通过工业微波加热装置进行高温灭酶,温度为95℃,时间为6min;然后置于工业破碎碾磨装置中将肉苁蓉肉质茎破碎碾磨,加入工业纯净水洗涤破碎细胞,水的加入量为破碎细胞重量的200%;然后将肉苁蓉细胞浆状物采用工业压滤机压滤,获取肉苁蓉细胞浆液;

        2、将上述得到的肉苁蓉细胞浆液采用相对分子质量为3000的超滤膜分离,再采用相对分子质量为250的纳滤膜进行纳滤,并经工业层析分离纯化工艺进一步分离提纯,得到富含苯乙醇苷类成分的肉苁蓉提取液;经检测,收获的肉苁蓉提取液中(以干物质计)苯乙醇苷类成分百分比含量为83.1%;

        3、将上述得到的肉苁蓉提取液作为催化反应底物,采用通常工业生产中的物理吸附法羟基磷灰石作为吸附剂的固定方式,获得β-葡萄糖苷酶固定化酶作为生物催化剂,经通常固定化床反应器进行连续式催化反应,催化水解去掉底物中松果菊苷葡萄糖基配体末端的一个葡萄糖基、定向转化为毛蕊花糖苷单体化合物;催化反应过程温度为52℃,pH为5.8,每批次催化反应时间为8h,连续进行催化反应12批次,催化反应过程反应物中的β-葡萄糖苷酶活力为1000U/g;经检测,底物中松果菊苷转化为毛蕊花糖苷单体化合物的转化率达85.6%;

        4、将经上述催化反应后的肉苁蓉提取液,通过工业真空浓缩工艺,温度为60℃,获得固形物含量为50%的浓缩物;进一步通过工业真空干燥工艺,干燥温度为58℃,获得富含毛蕊花糖苷单体化合物成分的干燥物;经分析测定,所收获的干燥物中(以干物质计),毛蕊花糖苷单体化合物的百分比含量为78.1%。

        实施例八:

        1、挑选置于库温为8℃的工业冷藏库保鲜的新鲜肉苁蓉肉质茎,通过工业加热装置进行高温灭酶,温度为128℃,时间为10min;然后置于工业破碎碾磨装置中将肉苁蓉肉质茎破碎碾磨,加入工业纯净水洗涤破碎细胞,水的加入量为破碎细胞重量的100%;然后采用工业离心机分离,获取肉苁蓉细胞浆液;并再分别将滤渣经2次加入工业纯净水,每次水的加入量为滤渣重量的150%,经通常工业破碎碾磨机进一步碾磨成浆状物,再经工业离心机分离进一步获取肉苁蓉破碎细胞浆液;

        2、将上述得到的肉苁蓉细胞浆液采用相对分子质量为3000的超滤膜分离,再采用相对分子质量为300的纳滤膜进行纳滤,然后采用R-A型的工业大孔吸附树脂进行吸附分离,得到富含苯乙醇苷类成分的肉苁蓉提取液;经检测,收获的肉苁蓉提取液中(以干物质计)苯乙醇苷类成分百分比含量为61.9%;

        3、将上述得到的肉苁蓉提取液作为催化反应底物,采用通常工业生产中的离子吸附法DEAE-纤维素作为吸附剂的固定方式,获得纤维素酶固定化酶作为生物催化剂,经通常流化床反应器进行连续式催化反应,催化水解去掉底物中松果菊苷葡萄糖基配体末端的一个葡萄糖基、定向转化为毛蕊花糖苷单体化合物;催化反应过程温度为50℃,pH为5.0,每批次催化反应时间为4h,连续进行催化反应7批次;催化反应过程反应物中的β-葡萄糖苷酶活力为10U/g;经检测,底物中松果菊苷转化为毛蕊花糖苷单体化合物的转化率达80.2%

        4、将经上述催化反应后的肉苁蓉提取液,通过工业薄膜蒸发浓缩工艺,温度为61℃,获得固形物含量为38%的浓缩物;进一步通过工业滚筒干燥工艺,干燥温度为65℃,获得富含毛蕊花糖苷单体化合物成分的干燥物;经分析测定,所收获的干燥物中(以干物质计),毛蕊花糖苷单体化合物的百分比含量为52.1%。

        实施例九:

        1、采用新鲜的肉苁蓉肉质茎,通过工业加热装置进行高温灭酶,温度为130℃,时间为10min;然后置于工业破碎碾磨装置中将肉苁蓉肉质茎破碎碾磨,加入工业纯净水洗涤破碎细胞水的加入量为滤渣重量的250%,;然后将肉苁蓉细胞浆状物采用工业压滤机压滤,获取肉苁蓉细胞浆液;

        2、将上述得到的肉苁蓉细胞浆液采用相对分子质量为3500的超滤膜分离,再采用相对分子质量为250的纳滤膜进行纳滤,得到富含苯乙醇苷类成分的肉苁蓉提取液;经检测,收获的肉苁蓉提取液中(以干物质计)苯乙醇苷类成分百分比含量为54.3%;

        3、将上述得到的肉苁蓉提取液作为催化反应底物,采用通常工业生产中的离子吸附法DEAE-葡聚糖凝胶作为吸附剂的固定方式,获得β-葡萄糖苷酶固定化酶作为生物催化剂,经通常固定化床反应器进行连续式催化反应,催化水解去掉底物中松果菊苷葡萄糖基配体末端的一个葡萄糖基、定向转化为毛蕊花糖苷单体化合物;催化反应过程温度为60℃,pH为4.6,每批次催化反应时间为3.5h,连续进行催化反应12批次,催化反应过程反应物中的β-葡萄糖苷酶活力为24U/g;经检测,底物中松果菊苷转化为毛蕊花糖苷单体化合物的转化率达78.5%

        4、将经上述催化反应后的肉苁蓉提取液,通过工业真空浓缩工艺,温度为60℃,获得固形物含量为38%的浓缩物;进一步通过工业喷雾干燥工艺,干燥塔进风温度为185℃,获得富含毛蕊花糖苷单体化合物成分的粉状物;经分析测定,所收获的粉状物中(以干物质计),毛蕊花糖苷单体化合物的百分比含量为38.6%。

        实施例十:

        1、挑选置于库温为13℃的工业冷藏库保鲜的新鲜肉苁蓉肉质茎,通过工业高温装置灭酶,温度为125℃,时间为9min;然后置于工业破碎碾磨装置中将肉苁蓉肉质茎破碎碾磨,加入工业纯净水洗涤破碎细胞水的加入量为滤渣重量的100%,;然后采用工业离心机分离,获取肉苁蓉细胞浆液;并再将滤渣加入工业纯净水,水的加入量为滤渣重量的400%,经通常工业破碎碾磨机进一步碾磨成浆状物,再经工业离心机分离,进一步获取肉苁蓉破碎细胞浆液;

        2、将上述得到的肉苁蓉细胞浆液采用相对分子质量为1000的超滤膜分离,再采用SP大孔树脂吸附分离提纯,并经相对分子质量为200的纳滤膜进行纳滤,得到富含苯乙醇苷类成分的肉苁蓉提取液;经检测,收获的肉苁蓉提取液中(以干物质计)苯乙醇苷类成分百分比含量为55.2%;

        3、将上述得到的肉苁蓉提取液作为催化反应底物,采用通常工业生产中的离子吸附法IR-120作为吸附剂的固定方式,获得植物提取复合酶固定化酶作为生物催化剂,经通常工业搅拌罐式反应器进行间断式催化反应,催化水解去掉底物中松果菊苷葡萄糖基配体末端的一个葡萄糖基、定向转化为毛蕊花糖苷单体化合物;催化反应过程温度为38℃,pH为4.0,催化反应时间为6h,连续进行催化反应12批次,催化反应过程反应物中的β-葡萄糖苷酶活力为32U/g;经检测,底物中松果菊苷转化为毛蕊花糖苷单体化合物的转化率达79.2%

        4、将经上述催化反应后的肉苁蓉提取液,通过工业薄膜蒸发浓缩工艺,温度为49℃,获得固形物含量为43%的浓缩物;进一步通过工业滚筒干燥工艺,干燥温度为65℃,获得富含毛蕊花糖苷单体化合物成分的干燥物;经分析测定,所收获的干燥物中(以干物质计),毛蕊花糖苷单体化合物的百分比含量为46.3%。

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