技术领域
本发明涉及一种生物医药材料。
背景技术
现有的医药材料很多，但还没有一种能在人体可接受的温度范围 内在液态和固态间变化的材料，因此很多场合的使用受到限制。
发明内容
本发明的目的在于提供一种4℃呈液态37℃呈固态的生物材料 及制备方法和用途。
本发明的技术解决方案是：
一种4℃呈液态37℃呈固态的生物材料，其特征是：在4℃时呈 液态，在37℃时呈固态；其制备方法为：
(1)将食药用菌在4-29℃的低温条件下进行酶解处理，经过 滤得到低温食药用菌提取液；置于4℃无菌条件下保存；
(2)细胞培养：将纤维细胞、上皮细胞、成骨细胞中的一种或 数种，混合或单独培养；细胞培养时，在常规细胞培养液中加入1-40％ 重量百分比的上述食药用菌提取液，经1-12周培养，将上清收集保 存于4℃无菌环境备用；
(3)酶解反应：取来源于深海鱼或哺乳动物的真皮或骨骼组织； 将上述组织和步骤(2)得到的上清按照1-12∶1重量比加入4℃的 酶解液中反应；反应后在4℃无菌环境下过滤，过滤精度范围：0.10 μm-0.22μm；滤过液PH调整至7.4，得到产品，保存于4℃无菌 环境中。
一种4℃呈液态37℃呈固态的生物材料的制备方法，其特征是： 包括下列步骤：
(1)将食药用菌在4-29℃的低温条件下进行酶解处理，经过 滤得到低温食药用菌提取液；置于4℃无菌条件下保存；
(2)细胞培养：将纤维细胞、上皮细胞、成骨细胞中的一种或 数种，混合或单独培养；细胞培养时，在常规细胞培养液中加入1-40％ 重量百分比的上述食药用菌提取液，经1-12周培养，将上清收集保 存于4℃无菌环境备用；
(3)酶解反应：取来源于深海鱼或哺乳动物的真皮或骨骼组织； 将上述组织和步骤(2)得到的上清按照1-12∶1重量比加入4℃的 酶解液中反应；反应后在4℃无菌环境下过滤，过滤精度范围：0.10 μm-0.22μm；滤过液PH调整至7.4，得到产品，保存于4℃无菌 环境中。
所述食药用菌为鸡油菌、干巴菌、牛肝菌、鸡纵菌、羊肚菌、金 福菇、黄伞、榛蘑、青蘑、猴头菇、红蘑、灰树花、茶薪菇、紫芝、 大杯蕈、茶树菇、滑子蘑、珊瑚菇、长根菇、榆黄蘑、真姬菇、阿魏 蘑、杏鲍菇、鲍鱼菇中的一种或数种，但不仅限于此。
步骤(1)的酶解处理时，使用的酶为果胶酶、纤维素酶、半纤 维素酶、α-淀粉酶、葡萄糖淀粉酶、β-淀粉酶中的一种或数种；料 液重量比：1∶1-19；酶解反应时间：1-190小时；PH值：3-9； 酶浓度∶与食药用菌重量比为：酶0.01-5∶食药用菌100；步骤(1) 中的过滤精度为0.10μm-0.22μm。
步骤(3)中的酶解条件为：PH值：3-5.4；酶解反应温度： 4-9摄氏度；料液重量比：1∶1-19；酶解反应时间：72-480小时； 酶的种类：金属蛋白酶、巯基蛋白酶、丝氨酸羧肽酶、组织蛋白酶、 内肽酶、无花果蛋白酶、酸蛋白酶中的一种或数种，但不仅限于此； 酶浓度∶与原料重量比为：酶0.01-5∶原料100。
一种4℃呈液态37℃呈固态的生物材料在制备一过性或永久性 阻塞、半阻塞体中的应用。
是作为鼻泪管、肿瘤血管或输精管的一过性或永久性阻塞、半阻 塞材料。
本发明制作方法简便，原料易得，操作方便，制得的产品在摄氏 4度时呈液态，37度时呈固态，可用于具有治疗目的的一过性或永 久性阻塞、半阻塞体内管腔(如鼻泪管、肿瘤血管、输精管等等)， 可作为药物、基因、疫苗的缓释平台以及靶向给药载体。
下面结合实施例对本发明作进一步说明。
具体实施方式
一种4℃呈液态37℃呈固态的生物材料的制备方法，包括下列 步骤：
(1)将食药用菌在4-29℃(例4℃、15℃、29℃)的低温条件 下进行酶解处理，经过滤得到低温食药用菌提取液；置于4℃无菌条 件下保存；
(2)细胞培养：将纤维细胞、上皮细胞、成骨细胞中的一种或 数种，混合或单独培养；细胞培养时，在常规细胞培养液中加入1-40％ (例1％、20％、40％)重量百分比的上述食药用菌提取液，经1-12 周(例1周、7周、12周)培养，将上清收集保存于4℃无菌环境备 用；
(3)酶解反应：取来源于深海鱼或哺乳动物的真皮或骨骼组织； 将上述组织和步骤(2)得到的上清按照1-12∶1(例1∶1、6∶1、12∶1) 重量比加入4℃的酶解液中反应；反应后在4℃无菌环境下过滤，过 滤精度范围：0.10μm-0.22μm(例0.10μm、0.18μm、0.22μm)； 滤过液PH调整至7.4，得到产品，保存于4℃无菌环境中。
所述食药用菌为鸡油菌、干巴菌、牛肝菌、鸡纵菌、羊肚菌、金 福菇、黄伞、榛蘑、青蘑、猴头菇、红蘑、灰树花、茶薪菇、紫芝、 大杯蕈、茶树菇、滑子蘑、珊瑚菇、长根菇、榆黄蘑、真姬菇、阿魏 蘑、杏鲍菇、鲍鱼菇中的一种或数种，但不仅限于此。
步骤(1)的酶解处理时，使用的酶为果胶酶、纤维素酶、半纤 维素酶、α-淀粉酶、葡萄糖淀粉酶、β-淀粉酶中的一种或数种；料 液重量比：1∶1-19(例1∶1、1∶10、1∶19)；酶解反应时间：1-190 小时(例1小时、100小时、190小时)；PH值：3-9(例3、6、9)； 酶浓度∶与食药用菌重量比为：酶0.01-5∶食药用菌100(例 0.01∶100、3∶100、5∶100)；步骤(1)中的过滤精度为0.10μm-0.22 μm(例0.10μm、0.18μm、0.22μm)。
步骤(3)中的酶解条件为：PH值：3-5.4(例3、4、5)；酶解 反应温度：4-9摄氏度(例4℃、6℃、9℃)；料液重量比：1∶1-19 (例1∶1、1∶10、1∶19)；酶解反应时间：72-480小时(例72小时、 200小时、480小时)；酶的种类：金属蛋白酶、巯基蛋白酶、丝氨酸 羧肽酶、组织蛋白酶、内肽酶、无花果蛋白酶、酸蛋白酶中的一种或 数种，但不仅限于此；酶浓度∶与原料(即组织和上清)重量比为： 酶0.01-5∶原料100(例0.01∶100、3∶100、5∶100)。
上述4℃呈液态37℃呈固态的生物材料在制备一过性或永久性 阻塞、半阻塞体中的应用，是作为鼻泪管、肿瘤血管或输精管的一过 性或永久性阻塞、半阻塞材料。