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1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201710661523.4 (22)申请日 2017.08.04 (71)申请人 徐钉锈 地址 524200 广东省湛江市雷州市纪家镇 傲坡村19号 (72)发明人 徐钉锈 (74)专利代理机构 广州一锐专利代理有限公司 44369 代理人 李新梅 杨昕昕 (51)Int.Cl. A61K 31/585(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 一种逆转肿瘤多药耐药性的药物组合物及 提取物 (57)摘要 本发明涉及药物化学技术领域, 具体公开了。
2、 一种逆转肿瘤多药耐药性的药物组合物及提取 物。 所述逆转肿瘤多药耐药性的药物组合物, 其 特征在于, 包含如下重量份的成分: 沙蟾毒精 30 60份; 嚏根草配基 820份; 远华蟾蜍精 1025 份; 蟾毒它灵 2550份; 华蟾毒它灵 2040份; 蟾 毒灵 2550份; 华蟾酥毒基 3060份; 酯蟾毒配 基 1530份。 所述蟾酥提取物以所述的药物组合 物作为有效成分。 所述的药物组合物对肿瘤耐药 性的逆转倍数为3070倍; 所述的提取物对肿瘤 耐药性的逆转倍数为1020倍。 权利要求书1页 说明书6页 CN 107375303 A 2017.11.24 CN 107375303 A。
3、 1.一种逆转肿瘤多药耐药性的药物组合物, 其特征在于, 包含如下重量份的成分: 沙蟾 毒精 3060份; 华蟾酥毒基 3060份; 远华蟾蜍精 1025份; 蟾毒它灵 2550份; 华蟾毒它 灵 2050份; 蟾毒灵 2550份; 酯蟾毒配基 1540份; 嚏根草配基 820份。 2.根据权利要求1所述的逆转肿瘤多药耐药性的药物组合物, 其特征在于, 包含如下重 量份的成分: 沙蟾毒精 3560份; 华蟾酥毒基 3560份; 远华蟾蜍精 1222份; 蟾毒它灵 28 46份; 华蟾毒它灵 2035份; 蟾毒灵 2545份; 酯蟾毒配基 1828份; 嚏根草配基 815份。 3.根据权利要求1。
4、所述的逆转肿瘤多药耐药性的药物组合物, 其特征在于, 包含如下重 量份的成分: 沙蟾毒精 4550份; 华蟾酥毒基 4550份; 远华蟾蜍精 1520份; 蟾毒它灵 3540份; 华蟾毒它灵 2430份; 蟾毒灵 3237份; 酯蟾毒配基 2025份; 嚏根草配基 1013份。 4.一种逆转肿瘤多药耐药性的蟾酥提取物, 其特征在于, 所述的蟾酥提取物含有蟾蜍 毒素类有效成分, 所述蟾蜍毒素类有效成分中含有如下重量份的成分: 沙蟾毒精 3060份; 华蟾酥毒基 3060份; 远华蟾蜍精 1025份; 蟾毒它灵 2550份; 华蟾毒它灵 2050份; 蟾毒灵 2550份; 酯蟾毒配基 1540份;。
5、 嚏根草配基 820份。 5.根据权利要求4所述的逆转肿瘤多药耐药性的蟾酥提取物, 其特征在于, 所述蟾蜍毒 素类有效成分中含有如下重量份的成分: 沙蟾毒精 3560份; 华蟾酥毒基 3560份; 远华蟾蜍精 1222份; 蟾毒它灵 2846份; 华蟾毒它灵 2035份; 蟾毒灵 2545份; 酯蟾毒配基 1828份; 嚏根草配基 815份。 6.根据权利要求5所述的逆转肿瘤多药耐药性的蟾酥提取物, 其特征在于, 所述蟾蜍毒 素类有效成分中含有如下重量份的成分: 沙蟾毒精 4550份; 华蟾酥毒基 4550份; 远华蟾蜍精 1520份; 蟾毒它灵 3540份; 华蟾毒它灵 2430份; 蟾毒灵。
6、 3237份; 酯蟾毒配基 2025份; 嚏根草配基 1013份。 7.根据权利要求4所述的逆转肿瘤多药耐药性的蟾酥提取物, 其特征在于, 所述的蟾蜍 毒素类有效成分占蟾酥提取物总重量的10%以上。 8.根据权利要求7所述的逆转肿瘤多药耐药性的蟾酥提取物, 其特征在于, 所述的蟾蜍 毒素类有效成分占蟾酥提取物总重量的30%以上; 更进一步优选地, 所述的蟾蜍毒素类有效 成分占蟾酥提取物总重量的3080%。 9.权利要求13任一项所述的逆转肿瘤多药耐药性的药物组合物, 其特征在于, 所述的 肿瘤为肝癌、 肺癌以及乳腺癌。 10.权利要求13任一项所述的逆转肿瘤多药耐药性的蟾酥提取物, 其特征在于。
7、, 所述 的肿瘤为肝癌、 肺癌以及乳腺癌。 权 利 要 求 书 1/1 页 2 CN 107375303 A 2 一种逆转肿瘤多药耐药性的药物组合物及提取物 技术领域 0001 本发明涉及药物化学技术领域, 具体涉及一种逆转肿瘤多药耐药性的药物组合物 及提取物。 背景技术 0002 肿瘤 (tumour) 是指机体在各种致瘤因子作用下, 局部组织细胞增生所形成的新生 物 (neogrowth) , 因为这种新生物多呈占位性块状突起, 也称赘生物 (neoplasm) 。 根据新生 物的细胞特性及对机体的危害性程度, 又将肿瘤分为良性肿瘤和恶性肿瘤两大类, 而癌症 即为恶性肿瘤的总称。 0003。
8、 目前, 化疗是癌症治疗的主要方法, 而接受长期化疗的癌症病人会在治疗过程中 出现多药耐药性 (MDR) 。 多药耐药性是指, 肿瘤细胞在化疗时, 长期接触某一化疗药物, 不仅 会对这一药物产生抗药性, 还会对其他结构和功能不同的化疗药物产生抗药性, 从而大大 降低了化学药物治疗的效果。 因此, 开发能逆转肿瘤耐药性的药物是肿瘤化疗急需解决的 问题。 发明内容 0004 本发明所要解决的技术问题是, 提供一种一种逆转肿瘤多药耐药性的药物组合物 及提取物。 0005 本发明所要解决的上述技术问题, 通过以下技术方案予以实现: 一种逆转肿瘤多药耐药性的药物组合物, 包含如下重量份的成分: 沙蟾毒精。
9、 3060份; 华蟾酥毒基 3060份; 远华蟾蜍精 1025份; 蟾毒它灵 2550份; 华蟾毒它灵 2050份; 蟾 毒灵 2550份; 酯蟾毒配基 1540份; 嚏根草配基 820份。 优选地, 所述的逆转肿瘤多药耐 药性的药物组合物, 包含如下重量份的成分: 沙蟾毒精 3560份; 华蟾酥毒基 3560份; 远华蟾蜍精 1222份; 蟾毒它灵 2846份; 华蟾毒它灵 2035份; 蟾毒灵 2545份; 酯蟾毒配基 1828份; 嚏根草配基 815份。 0006 进一步优选地, 所述的逆转肿瘤多药耐药性的药物组合物, 包含如下重量份的成分: 沙蟾毒精 4550份; 华蟾酥毒基 4550。
10、份; 远华蟾蜍精 1520份; 蟾毒它灵 3540份; 华蟾毒它灵 2430份; 蟾毒灵 3237份; 酯蟾毒配基 2025份; 嚏根草配基 1013份。 一种 逆转肿瘤多药耐药性的蟾酥提取物, 所述的蟾酥提取物含有蟾蜍毒素类有效成分, 所述蟾 蜍毒素类有效成分中含有如下重量份的成分: 沙蟾毒精 3060份; 华蟾酥毒基 3060份; 远华蟾蜍精 1025份; 蟾毒它灵 2550份; 华蟾毒它灵 2050份; 蟾毒灵 2550份; 酯蟾毒配基 1540份; 嚏根草配基 820份。 0007 优选地, 所述蟾蜍毒素类有效成分中含有如下重量份的成分: 沙蟾毒精 3560份; 华蟾酥毒基 3560份。
11、; 远华蟾蜍精 1222份; 蟾毒它灵 2846份; 华蟾毒它灵 2035份; 蟾毒灵 2545份; 酯蟾毒配基 1828份; 嚏根草配基 815份。 说 明 书 1/6 页 3 CN 107375303 A 3 0008 进一步优选地, 所述蟾蜍毒素类有效成分中含有如下重量份的成分: 沙蟾毒精 4550份; 华蟾酥毒基 4550份; 远华蟾蜍精 1520份; 蟾毒它灵 3540份; 华蟾毒它灵 2430份; 蟾毒灵 3237份; 酯蟾毒配基 2025份; 嚏根草配基 1013份。 优选 地, 所述的蟾蜍毒素类有效成分占蟾酥提取物总重量的10%以上。 0009 进一步优选地, 所述的蟾蜍毒素类。
12、有效成分占蟾酥提取物总重量的30%以上。 0010 更进一步优选地, 所述的蟾蜍毒素类有效成分占蟾酥提取物总重量的3080%。 0011 优选地, 在所述的逆转肿瘤多药耐药性的药物组合物中, 所述的肿瘤为肝癌、 肺癌 以及乳腺癌。 0012 优选地, 在所述的逆转肿瘤多药耐药性的蟾酥提取物中, 所述的肿瘤为肝癌、 肺癌 以及乳腺癌。 0013 有益效果: 本发明提供了一种全新的逆转肿瘤多药耐药性的药物组合物以及蟾酥 提取物, 所述的药物组合物以及蟾酥提取物具有优异的逆转肿瘤耐药性作用; 所述的药物 组合物对肿瘤耐药性的逆转倍数为3070倍; 所述蟾酥提取物以所述的药物组合物作为有 效成分, 且。
13、对肿瘤耐药性的逆转倍数为1020倍, 且随着其中的有效成分含量越高, 其逆转 倍数越大。 0014 具体实施方式 0015 以下结合具体实施例来进一步解释本发明, 但实施例对本发明不做任何形式的限 定。 0016 实施例1 逆转肿瘤多药耐药性的蟾酥提取物的制备 (1) 取蟾酥100g加入1L体积分数为95%的乙醇水溶液, 在25下浸渍3天, 过滤即得乙醇 提取物; (2) 将乙醇提取物浓缩至无醇味, 然后用非极性大孔树脂柱富集蟾蜍毒素类有效成分; 所述的非极性大孔树脂柱富集蟾蜍毒素类有效成分的具体方法为: 将乙醇提取物上样 于非极性大孔树脂柱 (D101大孔树脂柱) 后, 先用水洗脱除杂, 再。
14、用80%的乙醇洗脱非极性大 孔树脂柱; 收集乙醇洗脱部位, 浓缩、 干燥即得所述的蟾酥提取物。 0017 经检测, 该实施例制备得到的蟾酥提取物中蟾蜍毒素类有效成分占蟾酥提取物总 重量的72%, 其中, 蟾蜍毒素类有效成分中含有如下重量份的具体成分: 沙蟾毒精47份; 华蟾 酥毒基47份; 远华蟾蜍精18份; 蟾毒它灵38份; 华蟾毒它灵27份; 蟾毒灵36份; 酯蟾毒配基24 份; 嚏根草配基12份。 0018 上述各成分的检测方法采用液相色谱进行检测, 具体条件为: 用Agilent Zorbax SB C18(柱长250mm, 内径4.6mm, 粒径5 m) 为色谱柱; 以乙腈为流动相A。
15、, 以0.1%乙酸铵溶液为 流动相B, 检测波长为296nm; 柱温30, 流速为1.0mL/min。 采用梯度洗脱, 梯度洗脱条件见 表1: 表1. 梯度洗脱条件 时间 (min)流动相A (%)流动相B (%) 051090 51010239077 说 明 书 2/6 页 4 CN 107375303 A 4 10272377 273223307770 32443070 444930407060 49644060 646940606040 69906040 实施例2 逆转肿瘤多药耐药性的蟾酥提取物的制备 (1) 取蟾酥100g加入1L体积分数为95%的乙醇水溶液, 在25下浸渍3天, 过滤。
16、即得乙醇 提取物; (2) 将乙醇提取物浓缩至无醇味, 然后用非极性大孔树脂柱富集蟾蜍毒素类有效成分; 所述的非极性大孔树脂柱富集蟾蜍毒素类有效成分的具体方法为: 将乙醇提取物上样 于非极性大孔树脂柱 (D101大孔树脂柱) 后, 先用水洗脱除杂, 再用60%的乙醇洗脱非极性大 孔树脂柱; 收集乙醇洗脱部位, 浓缩、 干燥即得所述的蟾酥提取物。 0019 经检测, 该实施例制备得到的蟾酥提取物中蟾蜍毒素类有效成分占蟾酥提取物总 重量的63%, 其中, 蟾蜍毒素类有效成分中含有如下重量份的具体成分: 沙蟾毒精55份; 华蟾 酥毒基36份; 远华蟾蜍精21份; 蟾毒它灵45份; 华蟾毒它灵26份;。
17、 蟾毒灵27份; 酯蟾毒配基20 份; 嚏根草配基13份。 0020 实施例3 逆转肿瘤多药耐药性的蟾酥提取物的制备 (1) 取蟾酥100g加入1L体积分数为95%的乙醇水溶液, 在25下浸渍3天, 过滤即得乙醇 提取物; (2) 将乙醇提取物浓缩至无醇味, 然后用非极性大孔树脂柱富集蟾蜍毒素类有效成分; 所述的非极性大孔树脂柱富集蟾蜍毒素类有效成分的具体方法为: 将乙醇提取物上样 于非极性大孔树脂柱 (D101大孔树脂柱) 后, 先用水洗脱除杂, 再用40%的乙醇洗脱非极性大 孔树脂柱; 收集乙醇洗脱部位, 浓缩、 干燥即得所述的蟾酥提取物。 0021 经检测, 该实施例制备得到的蟾酥提取物。
18、中蟾蜍毒素类有效成分占蟾酥提取物总 重量的45%, 其中, 蟾蜍毒素类有效成分中含有如下重量份的具体成分: 沙蟾毒精57份; 华蟾 酥毒基32份; 远华蟾蜍精24份; 蟾毒它 灵47份; 华蟾毒它灵22份; 蟾毒灵26份; 酯蟾毒配基16份; 嚏根草配基18份。 0022 实施例4 逆转肿瘤耐药性试验 取人肝癌细胞HuH7、 人肺腺癌耐药细胞A549/DDP以及人乳腺癌细胞MCF-7/ADR置于培 养基 (RPMI 1640培养基) 中培养, 癌细胞以10103每孔加入96孔板中, 在37含5CO2的 培养箱中培养24小时后贴壁后吸去原来的培养基。 然后空白组再加入含10% 胎牛血清的 RPM。
19、I 1640培养基; 药物处理组加入含有0.01100 g/mL待测药物的RPMI 1640培养基; 阳性 对照组加入含有0.01100 g/mL长春新碱的RPMI 1640培养基; 继续培养48 h后, 再加入浓 度5mg/mL的MTT, 继续培养4 h, 吸去上清液, 加入100 L DMSO, 暗处放置10min, 利用酶标仪 (Sunrise公司) 在570nm下测定吸光值, 并根据吸光值计算细胞存活情况, 每个处理设6个重 复孔。 细胞存活率(%)=OD药物处理组/OD空白组100。 再根据剂量效应曲线计算细胞 说 明 书 3/6 页 5 CN 107375303 A 5 半抑制浓度。
20、(IC50), 结果见表2。 0023 逆转倍数IC50(化疗药物)/IC50(化疗药物+本发明所述的组合物或提取物)。 0024 药物处理组分别为: 药物处理组1为长春新碱; 药物处理组2为长春新碱+药物组合物 (长春新碱和药物组合物的重量比1:1) (所述药 物组合物由沙蟾毒精47份; 华蟾酥毒基47份; 远华蟾蜍精18份; 蟾毒它灵38份; 华蟾毒它灵 27份; 蟾毒灵36份; 酯蟾毒配基24份; 嚏根草配基12份混合而成) ; 药物处理组3为长春新碱+药物组合物 (长春新碱和药物组合物的重量比1:1) (所述药 物组合物由沙蟾毒精55份; 华蟾酥毒基36份; 远华蟾蜍精21份; 蟾毒它。
21、灵45份; 华蟾毒它灵 26份; 蟾毒灵27份; 酯蟾毒配基20份; 嚏根草配基13份混合而成) ; 药物处理组4为长春新碱+药物组合物 (长春新碱和药物组合物的重量比1:1) (所述药 物组合物由沙蟾毒精57份; 华蟾酥毒基32份; 远 华蟾蜍精24份; 蟾毒它灵47份; 华蟾毒它灵22份; 蟾毒灵26份; 酯蟾毒配基16份; 嚏根草 配基18份混合而成) ; 药物处理组5为长春新碱+实施例1提取物 (长春新碱和实施例1提取物的重量比1:1) ; 药物处理组6为长春新碱+实施例2提取物 (长春新碱和实施例1提取物的重量比1:1) ; 药物处理组7为长春新碱+实施例3提取物 (长春新碱和实施例。
22、1提取物的重量比1:1) ; 表2. 癌细胞的IC50以及逆转倍数测试结果 说 明 书 4/6 页 6 CN 107375303 A 6 从表2实验组24可以看出, 按本发明所述成分配比组成的药物组合物能明显逆转人肝 癌耐药细胞HuH7、 人肺腺癌耐药细胞A549/DDP以及人乳腺癌耐药细胞MCF-7/ADR等对长春 新碱的耐药性, 其逆转倍数为3070倍。 这说明, 本发明所述的药物组合可以逆转肿瘤耐药 性。 0025 从表2实验组57可以看出, 发明提取物能明显逆转人肝癌耐药细胞HuH7、 人肺腺 癌耐药细胞A549/DDP以及人乳腺癌耐药细胞MCF-7/ADR等对长春新碱的耐药性, 其逆转倍 数为1020倍。 这说明以本发明所述药物组合物作为有效成分的提取物可以逆转肿瘤耐药 说 明 书 5/6 页 7 CN 107375303 A 7 性, 且所述药物组合物作为有效成分在提取物种的含量越高, 逆转肿瘤耐药性的效果更好。 说 明 书 6/6 页 8 CN 107375303 A 8 。