技术领域
本发明涉及一种抗毒瘾口服液,特别是一种抗毒瘾口服液的制备 方法,属医药卫生领域。
背景技术
从蛇毒中分离出神经生长因子(nerve growth factor NGF)然后 制成戒毒注射液,从而达到戒毒的目的。神经生长因子(NGF)是最 早发现的细胞调节因子,也是神经系统最重要的生理活性物质之一, 由于NGF具有广泛的应用价值,所以世界上各大制药公司都投入大 量人力对NGF进行开发研究。据有关文献报导,已从多种生物材料 中分离纯化出NGF,其中包括蛇毒。将蛇毒用于戒毒,国内也有相 关报导。中国专利CN-1104096A“蛇毒替代戒毒及蛇毒抗老人痴呆 药及制备方法”及CN-1209998A“一种用于戒毒止痛的药物制备方 法”中都有以蛇毒的配伍药制成戒毒药物的报导。其从蛇毒中提NGF 一般均是将蛇毒经过不同的层析柱进行层析分离。由于蛇毒成份复 杂,分离纯化要求高,因而难于获得均一的,有利于工业化生产的 NGF。上述报导的蛇毒戒毒药物,对戒毒有一定的效果,但却难于戒 患者的毒瘾。
发明内容
本发明的目的是提供一种抗毒瘾口服液,即从蛇毒中分离纯化出 分辩率高、对酸、碱、温度稳定性好的NGF,将NGF与多糖及中药 鹿茸,制何首乌,淫羊霍,干姜,甘草,苯甲酸纳,蔗糖配合,制备 出抗毒瘾口服药物。
本发明是这样实现的:由蛇毒中分离出NGF,及从菇类提取多 糖(金针菇多糖、香菇多糖),然后将神经生长因子NGF和多糖按重 量比1∶1混合,以无菌水配制,微孔滤膜过滤,除菌、与以上中药 浸出液配制为口服液。
具体实施方式
下面详细说明之:
A、蛇毒神经生长因子NGF的制备。
蛇毒NGF采用眼镜蛇、银环蛇和金环蛇等蛇毒提取,经冷冻干 燥制成干粉。在常温下用连续SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳制备NGF。
1)、在0.05~0.5%(重量浓度)SDS(十二烷基硫酸钠)条件下 进行凝胶电泳,蛇毒蛋白质在凝胶介质中向阳极泳动时依分子的大小 不同而得到分离灌制聚内烯酰胺凝胶时,先倒出分离胶,待分离胶聚 合后再在其中灌制积层胶,然而固牢在电泳装置中,蛇毒样品在SDS 存在下煮沸溶解,并加入2-巯基乙醇(2-ME)或2-硫苏糖醇(DTT) 以还原二硫键。
2)将蛇毒样品与2×磷酸/SDS样品缓冲液按1∶1混合,于100 ℃加热2min,然后加样入电泳孔。
3)通电电泳,对于0.75mm厚凝胶,先以1.5mA电泳,电泳至 视踪染料进入凝胶,在30mA下电泳5h(10%凝胶)直至染料到达凝 胶底部为止,保持凝胶温度在15~20℃。
4)将相对应的胶带切下,用玻璃粉纯化、除去杂质,真空抽干 得NGF样品。
B、金针菇发酵后提取多糖。
将金针菇菌丝体在全自动发酵罐中发酵后进行多糖提取,金针菇 菌丝体经发酵后,样品泡浸在冷的95%乙醇中,然后用80%乙醇连续 提取三次,每次24小时,将提取过的材料用热的酒精清洗,然后放 在铅制器皿中烘干,经葡聚糖凝胶G200层析纯化多糖备用。
C,将天然中药的处方组成及处方量为(重量单位:克)鹿茸1-6, 制何首乌1-9,淫羊霍0.5-5.5,干姜2-9,甘草3-8.生产工艺采用提取 或粉碎法.然后热水浸提有效成分备用.
D将似上八味中药的提取液按等量配成10毫升/支口服液.口服 液的制备工艺为:配料,微孔薄膜过滤,装瓶,封口,消毒,包装,成品,储藏 (2-8度).
本抗毒瘾口服液是一种戒毒瘾药物。由蛇毒神经生长因子和菇类 多糖,中药复合配制而成,戒毒(尤其是戒心瘾)效果显著,且具有 减低复吸率50%以上及修复免疫损伤机能(恢复常人的80%)的功能。 戒毒瘾药物经广东省汕头、清远、湛江、顺德、湖南怀化等地戒毒所 临床试用,效果很好。以一个疗程(20支)为例,95%患者可脱瘾, 降低复吸率在80%以上,一般达50~60%。本药物经广东省科委和广 东省卫生厅检验,认为该药物安全、有效、创新。是用生物工程药物 戒毒的一大突破。
实施例:
蛇毒+20%SDS+0.1mol磷酸缓冲液,在3500~4000转/分转速条件 下离心5分钟,得到的样品依次用100%,95%和75%的酒精洗去杂 质,然后用G200层析过柱。再经过甲基化,用聚丙烯酰胺(SDS) 凝胶电泳,可得到不同的电泳带,从中选取相应分子量-7983(Mebs D.etal,Biochem.Biophys.Res.Commun;1971,44.711.)的电泳带进行切 割,将切割后的电泳带用DPS进行纯化,得NGF(蛇毒神经生长因 子)待用。