技术领域
本发明属中药制药领域，具体涉及一种复方鸡血藤颗粒的制备方法和质量控 制方法。
背景技术
复方鸡血藤膏为传统中药，收载于《中国药典》(2005年版一部)，由滇鸡 血藤膏粉、川牛膝、续断、红花和黑豆等药加工而成，功能补血、活血、调经， 用于血虚、手足麻木、关节酸痛和月经不调。该制剂疗效确切、应用历史悠久， 但由于基础研究薄弱，目前剂型落后，质量标准水平低、可控性差。
现有技术的复方鸡血藤膏成品质地坚硬，需用酒、水各半炖化冲服，非常不 方便，且辅料糯米、饴糖总量超过70％，服用时，加大了用药剂量。由于基础研 究薄弱，2005年版《中国药典》复方鸡血藤膏项下仅规定了制剂性状和香豆素 类、酚类化合物的显色反应，专属性差，缺乏方中各药味的特征性鉴别和指标成 分的含量测定方法，文献中也未见对复方鸡血藤膏的质量控制研究报道。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术存在的缺陷，提供一种用药剂量小，服用方 便，可明确质量控制的制备复方鸡血藤颗粒剂的方法。
本发明的进一步目的还在于提供上述复方鸡血藤颗粒的质量控制方法，以 HPLC方法对指标成分进行定量。
本方法制得的复方鸡血藤颗粒剂对治疗血虚、手足麻木、关节酸痛和月经不 调有确切疗效。
本发明对复方鸡血藤膏的君药滇鸡血藤进行化学成分研究，结果表明，其中 以异型南五味子丁素为主的联苯环辛烯类木脂素成分是滇鸡血藤药材的主要活 性成分，具有抗氧化、抗病毒活性，且能明显抑制KCl、CaCl2和NA产生的血管 收缩以及ADP和PAF诱导的兔血小板聚集，将其作为复方鸡血藤制剂质量控制的 指标成分。
本发明提供的复方鸡血藤制剂是以中药滇鸡血藤、川牛膝、续断、红花和黑 豆为原料制成的颗粒剂，各原料药的重量配比为：滇鸡血藤膏粉(滇鸡血藤的水 提干浸膏粉)218.75份，川牛膝59.5份，续断53份，红花5份，黑豆12.5 份。
本发明提供的复方鸡血藤颗粒剂的制备方法，包括以下步骤：
1)取原料药滇鸡血藤加4-6倍量水煎煮3次，每次2-4小时，合并煎液， 滤过，滤液浓缩成稠膏，80℃以下干燥，粉碎，过筛，备用；
2)取原料川牛膝、续断、红花、黑豆加4-6倍量水煎煮2-3次，每次1-2 小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩，加入上述滇鸡血藤膏粉，拌匀，80℃以下干 燥，粉碎，过筛，得中间体干浸膏粉；
3)取上述干浸膏粉1份与辅料1-2份混匀，制粒，干燥，包装，即得复方 鸡血藤颗粒；
4)采用HPLC含量测定方法，对上述复方鸡血藤颗粒的木脂素成分进行定量 测试，以其中异型南五味子庚素、戈米辛A、内南五味子素、内南五味子乙素、 异型南五味子丁素、南五味子素或五味子丙素中的一种或几种含量为质量控制的 指标成分。
所述的辅料是药学领域制备颗粒剂时的常用辅料，，包括赋形剂选自蔗糖、 糊精、可溶性淀粉或乳糖；矫味剂选自木糖醇、甜菊甙、甜蜜素、蛋白糖、阿斯 巴甜或甘草甜素其中的一种或几种的组合物。
所述的HPLC含量测定方法的色谱条件为：用十八烷基键合相硅胶为填充剂， 加乙腈-甲醇-水为流动相，梯度洗脱：10:40:50(0min)→10:47:43(23min) →10:50:40(35min)→10:80:10(59min)，共65min；流速1ml/min；检测波 长230nm。
具体实施方式
实施例1
取滇鸡血藤，加水煎煮三次，第一次6倍量水4h，第二次4倍量水3h，第 三次4倍量水2h，滤过，滤液浓缩至1.28g/ml，60℃真空干燥，粉碎，过六号 筛，备用；川牛膝、续断、红花、黑豆加水煎煮三次，每次4倍量水2小时，合 并煎液，滤过，滤液浓缩至0.73g/ml，加入滇鸡血藤膏粉，充分拌匀，60℃真 空干燥，粉碎，过五号筛。将得到的干膏粉与可溶性淀粉和木糖醇粉按4∶5∶ 1.8的比例均匀混合，喷50％乙醇(用量30％)制软材，过12目筛制粒，60℃ 烘干，整粒，分装，即得本发明无糖的颗粒剂。
实施例2
取滇鸡血藤，加水煎煮三次，第一次6倍量水4h，第二次4倍量水3h，第 三次4倍量水2h，滤过，滤液浓缩至1.30g/ml，60℃真空干燥，粉碎，过六号 筛，备用；川牛膝、续断、红花、黑豆加水煎煮三次，每次4倍量水2h，合并 煎液，滤过，滤液浓缩至0.70g/ml，加入滇鸡血藤膏粉，充分拌匀，60℃真空 干燥，粉碎，过五号筛。将得到的干膏粉与糖粉和糊精按2∶1∶1的比例均匀混 合，喷50％乙醇(用量25％)制软材，过12目筛制粒，60℃烘干，整粒，分装， 即得本发明含糖的颗粒剂。
实施例3
取滇鸡血藤，加水煎煮三次，第一次6倍量水4h，第二次4倍量水3h，第 三次4倍量水2h，滤过，滤液浓缩至1.30g/ml，60℃真空干燥，粉碎，过六号 筛，备用；川牛膝、续断、红花、黑豆加水煎煮三次，每次4倍量水2h，合并 煎液，滤过，滤液浓缩至0.73g/ml，加入滇鸡血藤膏粉，充分拌匀，60℃真空 干燥，粉碎，过五号筛。将得到的干膏粉与糊精和木糖醇按2∶1∶0.5的比例均 匀混合，喷50％乙醇(用量25％)制软材，过12目筛制粒，60℃烘干，整粒， 分装，即得本发明无糖的颗粒剂。
实施例4
采用HPLC含量测定方法同时对复方鸡血藤颗粒中异型南五味子庚素、戈米 辛A、内南五味子素、内南五味子乙素、异型南五味子丁素、南五味子素或五味 子丙素中的一种或几种木脂素成分进行定量。
对前述实施例中提供的方法制备的颗粒剂三批样品进行了上述7种木脂素 成分的含量测定，方法如下：
照高效液相色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VI D)测定。
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基键合相硅胶为填充剂，加乙腈-甲 醇-水为流动相，梯度洗脱：10:40:50(0min)→10:47:43(23min)→10:50: 40(35min)→10:80:10(59min)，共65min；流速1ml/min；检测波长230nm， 理论塔板数按异型南五味子丁素计算应不低于8000。
对照品溶液的制备精密称取经五氧化二磷干燥至恒重的异型南五味子庚 素、戈米辛A、内南五味子素、内南五味子乙素、异型南五味子丁素、南五味子 素和五味子丙素对照品各1.0、1.0、8.0、2.0、8.0、8.0、4.0mg于50ml容量 瓶中，用甲醇溶解并定容，作为混合对照品贮备液；将该贮备液分别稀释至20、 100倍，作为对照品溶液。
供试品溶液的制备取本发明产品研细，过五号筛，约0.5g，精密称定， 置50ml具塞锥形瓶中，加环己烷10ml冷浸24h，补足失重，滤过，取续滤液2ml， 50℃减压蒸干，残留物用1ml甲醇溶解，0.45μm微孔滤膜过滤，取续滤液作为 供试品溶液。
测定法分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20μl，注入液相色谱 仪，记录色谱图，按峰面积值用外标两点法计算含量，即得，结果显示，本发明 产品的质量可控性强。
见表1。
表1复方鸡血藤颗粒中7个木脂素含量测定结果(μg/g)(n＝3)
批号 1 2 3 均值 HG GA IN IB HD KA SC 1.37±0.005 0.86±0.031 9.43±0.179 2.64±0.042 10.01±0.012 6.76±0.178 1.93±0.019 1.43±0.059 0.83±0.044 10.03±0.352 2.59±0.151 10.03±0.342 6.88±0.216 2.15±0.141 1.37±0.067 0.75±0.051 9.89±0.397 2.79±0.103 10.27±0.513 7.25±0.276 2.35±0.023 1.39±0.036 0.81±0.054 9.78±0.313 2.67±0.104 10.10±0.143 6.97±0.256 2.14±0.212