技术领域
本发明涉及整骨麻药在制备抗炎、镇痛药物中的用途，属于医药领域。
背景技术
炎症是机体对于刺激的一种防御反应，通常表现为红、肿、热、痛和功能障碍等，包括感染性炎症和非感染性炎症。目前，临床上常用的抗炎药物主要分为两大类：一类是甾体抗炎药，如氢化可的松及其人工合成的衍生物；另一类是非甾体抗炎药，即医疗实践中所指的解热镇痛抗炎药如阿司匹林、保泰松、塞来昔布等。
疼痛是一种不愉快的知觉和情绪，是许多疾病的症状，它与实质的和潜在的组织损伤相联系，兼有生理和心理的因素。在很多情况下都需要对患者作镇痛的治疗。现常用于镇痛的药物有两大类，一类是抑制前列腺素生物合成的镇痛药，一类是与阿片受体作用的镇痛药。
长期的临床实践表明，目前常用的上述抗炎、镇痛药物均存在不同程度的不良反应，比如，阿司匹林具有严重的胃肠道副作用，保泰松所致的肝细胞胆汁淤积和肉芽肿肝炎可使某些病人致命。
因此，提供一种抗炎、镇痛药效明确，且无明显毒副作用的替代药物，成为了一个亟待解决的问题。
整骨麻药出自《清太医院秘录医方配本·外科损伤门》，书中记载其用法用量：“凡开取箭头，服五分，茶酒任下，则不痛。解药，甘草煎汤灌之，则苏。”中医临床上曾将该配方药物内服用于麻醉。
目前，尚未见关于整骨麻药抗炎、镇痛作用的相关报道。
发明内容
本发明的目的在于提供整骨麻药在制备抗炎、镇痛药物中的用途。
本发明提供了下述重量配比的原料药在制备抗炎、镇痛药物中的用途，其中，所述原料药的重量配比为：麻黄0.5-1.5份、胡茄子0.5-1.5份、姜黄0.5-1.5份、川乌0.5-1.5份、草乌0.5-1.5份、闹羊花1-3份。
优选的，所述原料药的重量配比为：麻黄1份、胡茄子1份、姜黄1份、川乌1份、草乌1份、闹羊花2份。
进一步的，所述的药物为外用药物。
进一步的，所述的药物是由各重量配比原料药的原生药粉、水或有机溶剂提取物，加入药学上可接受的辅料或者辅助性成分制备而成的外用制剂。
进一步的，所述的制剂为凝胶剂、膏剂、膜剂、酊剂、搽剂、巴布剂或糊剂。
本发明提供了一种具有抗炎、镇痛作用的外用药物组合物，它是由下述重量配比的原料药及辅料制备而成的凝胶剂：
麻黄0.5-1.5份、胡茄子0.5-1.5份、姜黄0.5-1.5份、川乌0.5-1.5份、草乌0.5-1.5份、闹羊花1-3份；
羧甲基纤维素钠0.5-4份、丙二醇1-8份、水1-8份。
优选的，所述的外用药物组合物是由下述重量配比的原料药及辅料制备而成的凝胶剂：
麻黄1份、胡茄子1份、姜黄1份、川乌1份、草乌1份、闹羊花2份；
羧甲基纤维素钠2.5份、丙二醇5份、水5份。
本发明提供了一种所述外用药物组合物的制备方法，包括如下步骤：
a、称取各重量配比的原料药，加入水或有机溶剂提取，提取物备用；
b、向a步骤提取物中加入水，混匀，备用；
c、将羧甲基纤维素钠与丙二醇在研钵中研匀，然后边研边加入b步骤溶液，溶胀，研匀，即得凝胶剂。
其中，所述的水提取物由下述方法制备得到：取各重量配比的原料药，每次加入12～15份水，煎煮2次，第一次煎煮2h，第二次煎煮1.5h，收集水煎液，浓缩，即得。
其中，所述的有机溶剂提取物为乙醇提取物，提取方法为：取各重量配比的原料药，加入60％v/v乙醇水溶液提取，料液比1:6，于80～90℃提取2次，第一次提取2h，第二次提取1.5h，收集提取液，浓缩，即得。
本发明提供了上述重量配比的原料药在制备抗炎、镇痛药物中的用途，并进一步提供了以其为活性成分制备的凝胶剂，可充分发挥其抗炎、镇痛的功效。药效实验表明，上述重量配比的原料药具有显著的抗炎、镇痛作用，效果优于市售药物扶他林，且无明显皮肤刺激性，安全性良好，具有广阔的临床应用前景。
显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
具体实施方式
本发明具体实施方式中使用的原料、设备均为已知产品，通过购买市售产品获得。
实施例1整骨麻药水提物的制备
取麻黄50g、胡茄子50g、姜黄50g、川乌50g、草乌50g、闹羊花100g，加水浸泡0.5h，煎煮2次，第一次加入5250mL水，煎煮2h；第二次加入4200mL水，煎煮1.5h。水煎液过滤后合并滤液，浓缩干燥后，采用小型粉碎机粉碎，得到干膏粉50.9116g，置于密封袋，干燥器内备用。
实施例2整骨麻药醇提物的制备
取麻黄30g、胡茄子30g、姜黄30g、川乌30g、草乌30g、闹羊花60g，加入60％v/v乙醇水溶液提取，料液比1:6，于80～90℃提取2次，第一次2h，第二次1.5h，过滤后合并滤液，浓缩干燥后，采用小型粉碎机粉碎，得到干膏粉25.9415g，置于密封袋，干燥器内备用。
实施例3本发明整骨麻药凝胶剂的制备
处方：根据实施例2制备的整骨麻药醇提干膏粉 1.224g
羧甲基纤维素钠(CMC-Na) 1.224g
丙二醇 15mL
蒸馏水 15mL
制法：将CMC-Na与丙二醇在研钵中研匀，然后边研边将溶有整骨麻药醇提干粉的水溶液缓缓加入，待溶胀后研匀，即得本发明整骨麻药凝胶剂Ⅰ。
实施例4本发明整骨麻药凝胶剂的制备
处方：根据实施例2制备的整骨麻药醇提干膏粉 2.448g
羧甲基纤维素钠(CMC-Na) 2.448g
丙二醇 30mL
蒸馏水 30mL
制法：将CMC-Na与丙二醇在研钵中研匀，然后边研边将溶有整骨麻药醇提干粉的水溶液缓缓加入，待溶胀后研匀，即得本发明整骨麻药凝胶剂Ⅱ。
实施例5本发明整骨麻药凝胶剂的制备
处方：根据实施例2制备的整骨麻药醇提干膏粉 4.896g
羧甲基纤维素钠(CMC-Na) 2.448g
丙二醇 32mL
蒸馏水 20mL
制法：将CMC-Na与丙二醇在研钵中研匀，然后边研边将溶有整骨麻药醇提干粉的水溶液缓缓加入，待溶胀后研匀，即得本发明整骨麻药凝胶剂Ⅲ。
对比例1空白基质凝胶剂的制备
处方：羧甲基纤维素钠(CMC-Na) 1.224g
丙二醇 15mL
蒸馏水 15mL
制法：先将CMC-Na与丙二醇在研钵中研匀，然后边研边将蒸馏水缓缓加入，待溶胀后研匀，即得空白基质凝胶剂。
以下通过药效实验证明本发明的有益效果。
实验例1实施例1、2制备的水提物、醇提物抗炎效果比较
1材料
1.1动物SD大鼠18只，体质量250±10g，雌雄各半，由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供，实验动物许可证号：SCXK(沪)2012-0002。
1.2药物整骨麻药水提物(根据实施例1制备)、整骨麻药醇提物(根据实施例2制备)。
1.3试剂1％角叉菜胶(SIGMA-ALDRICH，批号：9000-07-1)。
1.4仪器ZH-YLS-7B足趾容积测量仪(安徽正华生物仪器设备有限公司)、AL204型电子天平(梅特勒-托利多仪器上海有限公司)。
2方法
2.1分组健康SD大鼠18只，雌雄各半，随机分为：空白组、整骨麻药水提外用组、整骨麻药醇提外用组，共3组，每组6只。
2.2造模将1％角叉菜胶0.1mL注射于每只大鼠右后足趾三四趾之间(右后肢足掌心向踝关节方向进针)。
2.3给药整骨麻药水提外用组按人的临床口服等效剂量(1.1025g生药/kg)于大鼠足关节脚掌处给予涂抹整骨麻药水提物；整骨麻药醇提外用组按人的临床口服等效剂量(1.1025g生药/kg)于大鼠足关节脚掌处给予涂抹整骨麻药醇提物；空白组于相同处给予涂抹等量空白基质(根据对比例1制备)，每天2次，给药3天。
2.4指标检测末次给药后1h，于右后足关节处作标记，用足趾容积测量仪测量每只大鼠右后足容积2次，取平均值作为各大鼠致炎前正常足容积，将1％角叉菜胶0.1mL注射于每只大鼠右后足趾三四趾之间(右后肢足掌心向踝关节方向进针)，同时再给药一次，左足作为正常对照，分别于注入后0.67h、2h、4h测定大鼠足容积，以致炎前后足趾容积差作为足肿胀度(肿胀度＝致炎后平均大鼠足容积—致炎前平均大鼠足容积)，并计算炎症抑制率(抑制率＝(空白组平均肿胀度—给药组平均肿胀度)/空白组平均肿胀度)。
2.5统计学处理实验数据均以表示，采用SPSS20.0统计软件进行单因素方差分析，组间比较采用t检验，以p<0.05为差异有统计学意义。
3结果，见表1。
实验结果：与空白组相比，整骨麻药水提物、醇提物外用均可对角叉菜胶引起的大鼠足肿胀反应产生明显的抑制作用；其中，整骨麻药醇提物的抗炎效果较水提物更佳。
实验例2整骨麻药的抗炎作用
1材料
1.1动物SD大鼠60只，体质量250±10g，雌雄各半，由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供，实验动物许可证号：SCXK(沪)2012-0002。
1.2药物整骨麻药凝胶剂Ⅰ～Ⅲ(根据实施例3～5制备)。
1.3试剂1％角叉菜胶(SIGMA-ALDRICH，批号：9000-07-1)。
1.4仪器ZH-YLS-7B足趾容积测量仪(安徽正华生物仪器设备有限公司)、AL204型电子天平(梅特勒-托利多仪器上海有限公司)。
2方法
2.1分组健康SD大鼠60只，雌雄各半，随机分为：空白组、整骨麻药凝胶剂低、中、高剂量组，其中低、中、高剂量组又分为0.67h、2h、4h三个测量组，共10组，每组6只。
2.2造模将1％角叉菜胶0.1mL注射于每只大鼠右后足趾三四趾之间(右后肢足掌心向踝关节方向进针)。
2.3给药整骨麻药凝胶剂低、中、高剂量组分别给予整骨麻药凝胶剂Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ，按设定剂量(低剂量组为临床口服等效剂量，中、高剂量组分别为临床口服等效剂量的2倍、4倍，则低、中、高剂量组的给药剂量分别为1.1025g生药/kg、2.205g生药/kg、4.41g生药/kg)于大鼠足关节脚掌处涂抹相应药物，空白组给予涂抹等量空白基质(根据对比例1制备)；连续2次，每次间隔30min。
2.4指标检测末次给药后1h，于右后足关节处作标记，用足趾容积测量仪测量每只大鼠右后足容积2次，取平均值作为各鼠致炎前正常足容积，将1％角叉菜胶0.1mL注射于每只大鼠右后足趾三四趾之间(右后肢足掌心向踝关节方向进针)，同时再给药一次，左足作为正常对照，分别于注入后0.67h、2h、4h测定大鼠足容积，以致炎前后足趾容积差作为足肿胀度(肿胀度＝致炎后平均大鼠足容积—致炎前平均大鼠足容积)，并计算炎症抑制率(抑制率＝(空白组平均肿胀度—给药组平均肿胀度)/空白组平均肿胀度)。
2.5统计学处理实验数据均以表示，采用SPSS20.0统计软件进行单因素方差分析，组间比较采用t检验，以p<0.05为差异有统计学意义。
3结果，见表2。
实验结果：与空白组相比，低剂量组只在给药后2h的足肿胀度有显著性差异(P<0.05)；中剂量组在给药后2h、4h的足肿胀度均有显著性差异(P<0.05或P<0.01)；高剂量组在给药后0.67h、2h、4h的足肿胀度均有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。
以上结果表明，整骨麻药对角叉菜胶引起的大鼠足肿胀反应具有明显抑制作用，且中、高剂量的抗炎效果优于低剂量。
实验例3整骨麻药与扶他林的抗炎效果比较
1材料
1.1动物SD大鼠60只，体质量250±10g，雌雄各半，由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供，实验动物许可证号：SCXK(沪)2012-0002。
1.2药物整骨麻药凝胶剂(根据实施例4、5制备)；扶他林乳胶剂(北京诺华制药有限公司，批号：X5086)。
1.3试剂1％角叉菜胶(SIGMA-ALDRICH，批号：9000-07-1)。
1.4仪器ZH-YLS-7B足趾容积测量仪(安徽正华生物仪器设备有限公司)、AL204型电子天平(梅特勒-托利多仪器上海有限公司)。
2方法
2.1分组健康SD大鼠60只，雌雄各半，随机分为：空白组、扶他林组、整骨麻药凝胶剂中、高剂量组，其中扶他林组、整骨麻药凝胶剂中、高剂量组又分为0.67h、2h、4h三个测量组，共10组，每组6只。
2.2造模将1％角叉菜胶0.1mL注射于每只大鼠右后足趾三四趾之间(右后肢足掌心向踝关节方向进针)。
2.3给药各组按设定剂量[扶他林组(0.5g/kg)，整骨麻药凝胶剂中、高剂量组(中、高剂量组的给药剂量分别为2.205g生药/kg、4.41g生药/kg)]于大鼠足关节脚掌处涂抹相应药物，空白组给予涂抹等量空白基质(根据对比例1制备)，连续2次，每次间隔30min。
2.4指标检测末次给药后1h，于右后足关节处作标记，用足趾容积测量仪测量每只大鼠右后足容积2次，取平均值作为各鼠致炎前正常足容积，将1％角叉菜胶0.1mL注射于每只大鼠右后足趾三四趾之间(右后肢足掌心向踝关节方向进针)，同时再给药一次，左足作为正常对照，分别于注入后0.67h、2h、4h测定大鼠足容积，以致炎前后足趾容积差作为足肿胀度(肿胀度＝致炎后平均大鼠足容积—致炎前平均大鼠足容积)，并计算炎症抑制率(抑制率＝(空白组平均肿胀度—给药组平均肿胀度)/空白组平均肿胀度)。
2.5统计学处理实验数据均以表示，采用SPSS20.0统计软件进行单因素方差分析，组间比较采用t检验，以p<0.05为差异有统计学意义。
3结果，见表3。
实验结果：与空白组相比，中剂量组在给药后2h、4h的足肿胀度均有显著性差异(P<0.05或P<0.01)，高剂量组在给药后0.67h、2h、4h的足肿胀度均有显著性差异(P<0.05或P<0.01)，说明高剂量组抗炎效果稍优于中剂量组。与扶他林对照组相比，整骨麻药高剂量组2h和4h的肿胀抑制率分别为66.7％和57.44％，均分别高于扶他林组的60.68％和44.61％。
综合以上实验结果，说明整骨麻药具有显著的抗炎效果，可达到与常用抗炎药物扶他林相当的水平。
实验例4采用热板法考察整骨麻药的镇痛作用
1材料
1.1动物SPF级昆明种小鼠70只，4周龄，雌性，体质量20±2g，由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供，实验动物许可证号：SCXK(沪)2012-0002。
1.2药物整骨麻药凝胶剂(实验室自制)；扶他林乳胶剂(北京诺华制药有限公司，批号：X5086)。
1.3仪器RB-200智能热板仪(成都泰盟软件有限公司)，AL204型电子天平(梅特勒-托利多仪器上海有限公司)。
2方法
取小鼠逐只放于(55±0.5)℃热板仪上，立刻计时，记录小鼠从置于热板上到舔后足反应所需时间(s)，作为该小鼠的正常痛阈值。挑选痛阈值在5～30s内的小鼠，添后足时间小于或大于以及跳跃不安的小鼠均弃去不用。
取合格的小鼠60只，随机分为空白组、模型组(空白基质组)、阳性对照组(扶他林组)、整骨麻药凝胶剂低、中、高剂量组，每组10只，各组按设定剂量(小鼠与人体等效剂量换算比例为12:1，扶他林组、整骨麻药凝胶剂低、中、高剂量组分别为0.95g/kg，2.1g生药/kg、4.2g生药/kg、8.4g生药/kg，模型组给予涂抹等量空白基质)给小鼠双足涂抹给药2次，每隔30min涂药1次，空白组不作处理。将各组小鼠放于热板内以舔后足作为疼痛反应的指标，记录小鼠自投入热板至出现舔后足反应的时间，如60s内无反应的小鼠，应立即取出，其痛阈值按60s计算。于涂抹给药0.5h、1h、2h测定其痛阈值，计算痛阈百分率。
痛阈提高率＝(给药后痛阈值一给药前痛阈值)/给药前痛阈值*100％
3结果，见表4。
实验结果：与空白组相比，整骨麻药低剂量组在给药后1h、2h的痛阈值均有显著性差异(P<0.01)，整骨麻药中、高剂量组在给药后0.5h、1h、2h的痛阈值均有显著性差异(P<0.01)。与空白基质组比较，整骨麻药低剂量组在给药后2h的痛阈值有显著性差异(P<0.01)，整骨麻药中、高剂量组在给药后0.5h、1h、2h的痛阈值均有显著性差异(P<0.01)。与扶他林对照组相比，低、中剂量组在给药后0.5h、1h、2h的痛阈值均无显著性差异(P＞0.05)；整骨麻药高剂量组在给药后1h、2h的痛阈值均有显著性差异(P<0.05)。
以上结果表明，整骨麻药高剂量对小鼠热板所致疼痛具有较好的抑制作用，疗效优于扶他林。
实验例5通过醋酸致小鼠扭体反应实验考察整骨麻药的镇痛作用
1材料
1.1动物SPF级昆明种小鼠60只，4周龄，雌性，体质量20±2g，由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供，实验动物许可证号：SCXK(沪)2012-0002。
1.2药物整骨麻药凝胶剂(实验室自制)；扶他林乳胶剂(北京诺华制药有限公司，批号：X5086)；乙酸(国药集团化学试剂有限公司，批号：20141215)。
1.3仪器RB-200智能热板仪(成都泰盟软件有限公司)，AL204型电子天平(梅特勒-托利多仪器上海有限公司)。
2方法
SPF级小鼠60只，随机分为空白组、模型组、阳性对照组(扶他林组)、整骨麻药低、中、高剂量组，每组10只，各组按设定剂量(扶他林组，整骨麻药凝胶剂低、中、高剂量组分别为0.95g/kg，2.1g生药/kg、4.2g生药/kg、8.4g生药/kg，模型组给予涂抹等量空白基质)于腹部涂抹给药2次，每隔30min涂药1次，空白组不作处理。于末次给药1h后将0.6％醋酸溶液注射于小鼠腹腔内(0.2mL/只)，以引起深部的大面积而持久的疼痛刺激，致使小鼠产生扭体反应。以小鼠腹部凹陷、双后肢伸展为扭体反应指标。观察各组小鼠出现扭体反应的时间(潜伏期)及15min内产生扭体反应的次数。
3结果，见表5。
实验结果：与空白组相比，整骨麻药低剂量组能延长小鼠扭体反应的潜伏期，但差异无统计学意义(P＞0.05)；整骨麻药低剂量组15min内扭体次数减少，差异具有统计学意义(P<0.05)；整骨麻药中、高剂量组能明显延长小鼠扭体反应的潜伏期(P<0.05或P<0.01)，15min内扭体次数明显减少(P<0.01)。与空白基质组比较，整骨麻药低剂量组能延长小鼠扭体反应的潜伏期，15min内扭体次数减少，但差异均无统计学意义(P＞0.05)；整骨麻药中、高剂量组能明显延长小鼠扭体反应的潜伏期(P<0.05或P<0.01)，15min内扭体次数明显减少(P<0.05或P<0.01)。与扶他林对照组相比，整骨麻药中、高剂量组能延长小鼠扭体反应的潜伏期，15min内扭体次数减少，但差异均无统计学意义(P＞0.05)。
综合上述实验结果，表明整骨麻药外用可发挥显著的镇痛作用，效果优于或与扶他林相当。
实验例6整骨麻药的皮肤刺激性实验研究
1.材料
1.1动物SPF级昆明种小鼠20只，4周龄，雌雄各半，体质量20±2g，由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供，实验动物许可证号：SCXK(沪)2012-0002。
1.2药品整骨麻药凝胶剂(根据实施例5制备)；赋形剂：凡士林(山东利尔康医疗科技股份有限公司江西分公司，批号：150529)。
2.方法
2.1动物分组将20只小鼠，随机分为：完整皮肤受试药、赋形剂组和受损皮肤受试药、赋形剂组，共2组，每组10只。
2.2检测方法①设赋形剂对照，采用同体左右侧自身对比的方法，即左侧脱毛区涂凡士林，右侧脱毛区涂整骨麻药凝胶剂。②给药前24h对给药区(背部脊柱两侧)进行脱毛处理，去毛范围左、右各3cm×3cm。给药前检查去毛皮肤是否受损，有损伤的皮肤不宜进行完整皮肤试验。进行破损皮肤研究时在脱毛部位用刀片划“井”字，并以渗血为度。③整骨麻药凝胶剂涂敷在右侧脱毛区，左侧脱毛区涂敷凡士林，然后用二层纱布和一层玻璃纸或类似物覆盖，再用医用橡皮膏加以固定。④24h后用温水洗去整骨麻药凝胶剂，除去受试物后1、24、48、72h观察涂敷部位有无红斑和水肿反应。⑤实验结果评分标准参见表6和表7。
3结果，见表8
实验结果：完整皮肤赋形剂对照组、破损皮肤赋形剂对照组小鼠皮肤均未出现红斑、水肿等皮肤刺激反应，整骨麻药给药部位皮肤未见其它异常反应。各组动物的一般状态、行为、体征等均未见异常。
以上结果表明，整骨麻药对皮肤无刺激性，安全性良好。