一种壳聚糖纳米粒及其制备方法和应用.pdf

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1、(10)授权公告号 CN 101732257 B (45)授权公告日 2011.09.14 CN 101732257 B *CN101732257B* (21)申请号 200910214314.0 (22)申请日 2009.12.29 A61K 9/14(2006.01) A61K 31/722(2006.01) A61P 3/04(2006.01) A61P 3/06(2006.01) A23L 1/29(2006.01) (73)专利权人 广东药学院 地址 510006 广东省广州市大学城外环东路 280 号 (72)发明人 苏政权 张宏亮 陶毅 高冰 胡因铭 郭姣 (74)专利代理机构 。

2、广州粤高专利商标代理有限 公司 44102 代理人 陈卫 (54) 发明名称 一种壳聚糖纳米粒及其制备方法和应用 (57) 摘要 本发明公开了一种壳聚糖纳米粒及其制备方 法和应用。采用壳聚糖与三聚磷酸钠反应后旋转 蒸发浓缩喷雾干燥得到所述纳米粒。本发明采用 简单易行的方法将壳聚糖纳米化， 显著提高壳聚 糖的活性， 解决其吸收及溶解性难等问题， 同时也 可大大降低其副作用， 从根本上解决壳聚糖目前 应用于减肥降血脂方面存在的技术难题和技术瓶 颈。本发明方法简单易行， 成本较低， 易于推广。 (51)Int.Cl. 审查员 王菲 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利 权利要求书 。

3、1 页 说明书 10 页 附图 2 页 CN 101732257 B1/1 页 2 1. 一种壳聚糖纳米粒， 其特征在于采用溶解于乙酸溶液的壳聚糖与三聚磷酸钠反应后 旋转蒸发浓缩喷雾干燥得到 ； 其制备方法包括以下步骤 ： (1) 将壳聚糖溶于乙酸溶液得壳聚糖溶液备用 ； (2) 往步骤 (1) 壳聚糖溶液中加入三聚磷酸钠反应得纳米混悬液 ； 壳聚糖溶液中加入 三聚磷酸钠的操作是在室温、 400 1000r/min 的机械搅拌条件下进行 ； (3) 步骤 (2) 所得的纳米混悬液旋转蒸发浓缩 ； (4) 步骤 (3) 所得的浓缩液进行喷雾干燥即得 ； 其中， 步骤 (1) 所述乙酸溶液体积比浓。

4、度为 0.5 2； 乙酸溶液用量为每 100ml 乙酸 溶液溶解 0.5 5g 壳聚糖 ； 步骤 (2) 所述三聚磷酸钠浓度为 0.5 2mg/ml， 用量按照壳聚 糖溶液与三聚磷酸钠的体积比为 5 1 10 1 确定 ； 所述反应时间为 30 60 分钟 ； 步 骤 (3) 所述旋转蒸发浓缩温度为 60 80； 步骤 (4) 所述喷雾干燥条件为进口温度 140 190， 出口温度 80 110， 进样流速 500 1000ml/h， 压力 5 15atm， 风速 0.65 0.95m3/min。 2. 根据权利要求 1 所述壳聚糖纳米粒的制备方法， 其特征在于步骤 (1) 乙酸溶液体积 比浓。

5、度为 0.5 1 ； 乙酸溶液用量为每 100ml 乙酸溶液溶解 1 3g 壳聚糖 ； 步骤 (2) 所 述三聚磷酸钠浓度为 0.5 1mg/ml ； 步骤 (4) 所述喷雾干燥条件为进口温度 150 160， 出口温度 85 95， 进样流速 500 700ml/h， 压力 10 15atm， 风速 0.65 0.8m3/min。 3. 一种权利要求 1 所述壳聚糖纳米粒的应用， 其特征在于应用于制备预防和治疗高血 脂症或控制体重的保健食品或药物方面。 4. 一种水溶性壳聚糖纳米粒， 其特征在于将水溶性壳聚糖溶解后与三聚磷酸钠反应旋 转蒸发浓缩喷雾干燥得到 ； 其制备方法包括以下步骤 ： (。

6、1) 将水溶性壳聚糖溶于水得水溶性壳聚糖溶液 ； (2) 往步骤 (1) 水溶性壳聚糖溶液中加入三聚磷酸钠反应得纳米混悬液 ； (3) 步骤 (2) 所得的纳米混悬液旋转蒸发浓缩 ； (4) 步骤 (3) 所得的浓缩液进行喷雾干燥即得 ； 其中， 步骤 (1) 所述水溶性壳聚糖与水的质量体积比为 0.5 5g/100ml ； 步骤 (2) 所 述三聚磷酸钠浓度为 0.5 2mg/ml， 用量按照壳聚糖与三聚磷酸钠的质量比为 5 1 10 1 确定 ； 所述反应时间为 30 60 分钟 ； 步骤 (3) 所述旋转蒸发浓缩温度为 60 80 ； 步骤 (4) 所述喷雾干燥条件为进口温度 140 1。

7、90， 出口温度 80 110， 进样流 速 500 1000ml/h， 压力 5 15atm， 风速 0.65 0.95m3/min。 5. 根据权利要求 4 所述壳聚糖纳米粒的制备方法， 其特征在于步骤 (1) 所述水溶性壳 聚糖与水的质量体积比为 1 3g 100ml ； 步骤 (2) 所述三聚磷酸钠浓度为 0.75 1mg/ ml ； 步骤 (4) 所述喷雾干燥条件为进口温度 150 160， 出口温度 85 95， 进样流速 500 700ml/h， 压力 10 15atm， 风速 0.65 0.8m3/min。 6. 一种权利要求 4 所述水溶性壳聚糖纳米粒的应用， 其特征在于应用。

8、于制备预防和治 疗高血脂症或控制体重的保健食品或药物方面。 权 利 要 求 书 CN 101732257 B1/10 页 3 一种壳聚糖纳米粒及其制备方法和应用 技术领域 0001 本发明属于医药及功能性食品技术领域， 具体涉及一种壳聚糖纳米粒及其制备方 法和应用。 背景技术 0002 壳聚糖 (chitosan) 是甲壳素的 N- 脱乙酰基产物， 化学名为聚 (1， 4)-2- 氨 基 -2- 脱氧-D- 葡聚糖。广泛存在于低等生物菌类、 藻类细胞、 节支动物虾、 蟹、 昆虫的外 壳中， 是地球上仅次于纤维素的第二大生物多糖。壳聚糖是一种天然、 无毒、 可生物降解的 化合物， 有优良的生物相。

9、容性、 抗菌性和吸附性， 对脂肪和胆固醇具有良好的吸附性能。 0003 壳聚糖分子结构中含有多个氨基， 作为聚阳离子， 可与动物体内带阴离子基团的 胆酸、 胆固醇紧密结合形成复合物， 该类配合物不易被胃酸水解， 不易被消化系统消化， 阻 止了哺乳类动物对这类物质的消化吸收， 促使它排出体外。同时壳聚糖还可阻止消化系统 对胆固醇、 甘油三酯的吸收， 促进其分解代谢， 从而产生降血脂作用， 降低血清、 肝脏组织中 胆固醇含量和脂肪水平。 0004 这些优良的生理活性使壳聚糖开始应用于肥胖及其并发症的预防和治疗上， 成为 一种新型的降血脂减肥药物及功能性食品。 0005 但是壳聚糖应用于减肥降血脂也。

10、存在着很多问题。 使用壳聚糖于人体的减肥降血 脂实验中其剂量一般是 2 3g/d， 这种剂量下减肥效果不明显， 如果增大剂量却又容易产 生便秘和恶心等不良症状， 同时必然增加使用者的经济负担。 0006 另外， 壳聚糖结晶性较强， 溶解性能很差， 化学性质不活泼， 仅能溶解于稀的酸性 溶液， 大大限制了壳聚糖在各领域的应用。 发明内容 0007 本发明目的是针对现有壳聚糖的不足， 提供一种壳聚糖纳米粒， 包括壳聚糖纳米 粒和水溶性壳聚糖纳米粒。具体针对现有壳聚糖需要使用的剂量大而易引起不良反应、 在 胃中溶解时间过长等缺陷， 提供一种纳米粒级壳聚糖， 提高壳聚糖的活性， 解决吸收及溶解 性等问。

11、题， 同时也可大大降低其副作用， 从根本上解决壳聚糖目前应用于各个领域、 尤其是 医药及功能性食品技术领域存在的技术难题和瓶颈。 0008 本发明的另一个目的是提供所述纳米粒的制备方法。 0009 本发明还有一个目的是提供所述纳米粒的应用。 0010 本发明的目的通过以下技术方案予以实现 ： 0011 提供一种壳聚糖纳米粒， 采用溶解于乙酸溶液的壳聚糖与三聚磷酸钠 (TPP) 反应 经旋转蒸发浓缩后喷雾干燥得到。 0012 或者， 采用水溶性壳聚糖与三聚磷酸钠 (TPP) 反应后旋转蒸发浓缩喷雾干燥得 到。 0013 本发明同时提供了所述壳聚糖纳米粒的制备方法， 包括以下步骤 ： 说 明 书 。

12、CN 101732257 B2/10 页 4 0014 (1) 将壳聚糖溶于乙酸溶液得壳聚糖溶液， 放置备用 ； 0015 (2) 往步骤 (1) 壳聚糖溶液中加入 TPP 反应得纳米混悬液 ； 0016 (3) 步骤 (2) 所得的纳米混悬液经旋转蒸发浓缩 ； 0017 (4) 步骤 (3) 所得的浓缩液进行喷雾干燥。 0018 步骤 (1) 可采用体积比浓度为 0.5 2的乙酸溶液 ； 乙酸溶液用量为 100ml 乙 酸溶液溶解 0.5 5g 的壳聚糖。 0019 优选的， 可采用体积比浓度为 0.5 1的乙酸溶液 ； 乙酸溶液用量为 100ml 乙酸 溶液溶解 1 3g 的壳聚糖。 00。

13、20 步骤 (2) 所述 TPP 浓度为 0.5 2mg/ml， 优选 0.75 1mg/ml ； 用量按照壳聚糖与 TPP 的质量比为 5 1 10 1 确定。 0021 步骤(2)壳聚糖溶液中加入TPP的操作是在室温、 4001000r/min的机械搅拌条 件下进行， 所述反应时间为 30 60 分钟， 体系有明显的蓝色乳光生成。 0022 步骤(3)所述旋转蒸发浓缩参照现有常规的技术， 优选在6080控温条件下进 行， 将纳米混悬液蒸发至体积减少为原来的一半即可。 0023 步骤 (4) 所述喷雾干燥条件为 ： 进口温度 140 190， 出口温度 80 110， 进 样流速 500 1。

14、000ml/h， 压力 5 15atm， 风速 0.65 0.95m3/min。 0024 优选的条件为进口温度150160， 出口温度8595， 进样流速500700ml/ h， 压力 10 15atm， 风速 0.65 0.8m3/min。 0025 本发明同时提供了水溶性壳聚糖纳米粒的制备方法， 具体包括以下步骤 ： 0026 (1) 将水溶性壳聚糖溶于水得水溶性壳聚糖溶液， 放置备用 ； 0027 (2) 往步骤 (1) 水溶性壳聚糖溶液中加入三聚磷酸钠反应得纳米混悬液 ； 0028 (3) 步骤 (2) 所得的纳米混悬液旋转蒸发浓缩 ； 0029 (4) 步骤 (3) 所得的浓缩液进。

15、行喷雾干燥。 0030 优选的， 步骤 (1) 所述水溶性壳聚糖与水的质量体积比为 ： 0.5 5g 水溶性壳聚 糖 ： 100ml 水。 0031 步骤 (2) 所述三聚磷酸钠浓度为 0.5 2mg/ml， 优选 0.75 1mg/ml ； 用量按照壳 聚糖与三聚磷酸钠的质量比为 5 1 10 1 确定 ； 所述反应时间为 30 60 分钟 ； 0032 步骤(3)所述旋转蒸发浓缩参照现有常规的技术， 优选在6080控温条件下进 行， 将纳米混悬液蒸发至体积减少为原来的一半即可。 0033 步骤(4)所述喷雾干燥条件为 ： 进口温度为140190， 出口温度为80110， 进样流速为 500。

16、 1000ml/h， 压力为 5 15atm， 风速为 0.65 0.95m3/min。 0034 优选的喷雾干燥条件为 ： 进口温度为150160， 出口温度为8595， 进样流 速为 500 700ml/h， 压力为 10 15atm， 风速为 0.65 0.8m3/min。 0035 本发明制备得到壳聚糖纳米粒和水溶性壳聚糖纳米粒的粒径通常 1000nm， 产率 为 40 100。 0036 本发明制备得到的壳聚糖纳米粒或水溶性壳聚糖纳米粒可应用于制备预防和治 疗高血脂或减肥保健食品或者药物方面， 具有剂量小、 有效作用显著、 毒副作用小的优点。 0037 本发明的有益效果是 ： 003。

17、8 本发明针对现有壳聚糖需使用的剂量大易引起不良反应、 在胃中溶解时间过长的 说 明 书 CN 101732257 B3/10 页 5 缺陷， 运用现代药剂学手段， 采用温和的阴、 阳聚电解质电荷相互作用形成纳米复合物， 通 过研究不同阴离子聚电解质形成纳米粒和脱乙酰度形成的壳聚糖纳米粒混悬液技术效果， 总结得到本发明技术方案， 将壳聚糖纳米粒混悬液进行旋转蒸发浓缩、 喷雾干燥制得具有 减肥降血脂性能的壳聚糖纳米粒， 显著提高壳聚糖的活性， 解决其吸收及溶解性难等问题， 同时也可大大降低其副作用， 从根本上解决壳聚糖目前应用于减肥降血脂方面存在的技术 难题和技术瓶颈。 0039 本发明方法简单。

18、易行， 成本较低， 易于推广。 附图说明 0040 图 1 壳聚糖纳米粒粒度分布图 0041 图 2 壳聚糖纳米粒透射电镜图 0042 图 3 水溶性壳聚糖纳米粒粒度分布图 0043 图 4 水溶性壳聚糖纳米粒透射电镜图 具体实施方式 0044 下面结合具体实施例进一步详细说明本发明， 有助于本领域的普通技术人员进一 步理解本发明， 但不以任何形式限制本发明。 0045 实施例 1 壳聚糖纳米粒的制备 0046 (1) 将 25g 壳聚糖 ( 按照现有方法自制或市购产品， 参考分子量为 30 50 万， 但 分子量与本发明技术的实现无直接关系， 下同 ) 溶于 1000ml0.5的乙酸溶液中，。

19、 搅拌使其 完全溶解， 放置备用 ； 0047 (2) 在室温、 800r/min 的机械搅拌条件下， 往步骤 (1) 壳聚糖溶液中加入 0.75mg/ ml TPP 100ml， 反应 45min， 体系有明显的蓝色乳光生成， 得纳米混悬液 ； 0048 (3) 步骤 (2) 所得的纳米混悬液在 70控温条件下进行旋转蒸发浓缩， 体积蒸发 至纳米混悬液体积的一半即可 ； 0049 (4) 步骤 (3) 所得的浓缩液进行喷雾干燥， 设置进口温度为 160， 出口温度为 85， 进样流速为 600ml/h， 压力为 13atm， 风速为 0.75m3/min。喷雾干燥所得即为壳聚糖纳 米粒。 0。

20、050 实施例 2 壳聚糖纳米粒的制备 0051 (1) 将 25g 壳聚糖溶于 1000ml 体积比浓度为 1的乙酸溶液中， 搅拌使其完全溶 解， 放置备用 ； 0052 (2) 在室温、 600r/min 的机械搅拌条件下， 往上述壳聚糖溶液中加入 0.85mg/ml TPP 100ml， 反应 60min， 体系有明显的蓝色乳光生成， 得纳米混悬液 ； 0053 (3) 步骤 (2) 所得的纳米混悬液在 60控温条件下进行旋转蒸发浓缩， 体积蒸发 至纳米混悬液体积的一半即可 ； 0054 (4) 步骤 (3) 所得的浓缩液进行喷雾干燥， 设置进口温度为 160， 出口温度为 85， 进样。

21、流速为 600ml/h， 压力为 13atm， 风速为 0.75m3/min。喷雾干燥所得即为壳聚糖纳 米粒。 0055 实施例 3 壳聚糖纳米粒的制备 说 明 书 CN 101732257 B4/10 页 6 0056 (1) 将 25g 壳聚糖溶于 1000ml 体积比浓度为 2的乙酸溶液中， 搅拌使其完全溶 解， 放置备用 ； 0057 (2) 在室温、 600r/min 的机械搅拌条件下， 往上述壳聚糖溶液中加入 2mg/ml TPP 120ml， 反应 60min， 体系有明显的蓝色乳光生成， 得纳米混悬液 ； 0058 (3) 步骤 (2) 所得的纳米混悬液在 75控温条件下进行旋。

22、转蒸发浓缩， 体积蒸发 至纳米混悬液体积的一半即可 ； 0059 (4) 步骤 (3) 所得的浓缩液进行喷雾干燥， 设置进口温度为 140， 出口温度为 110， 进样流速 1000ml/h， 压力为 5atm， 风速为 0.65m3/min。喷雾干燥所得即为壳聚糖纳 米粒。 0060 实施例 4 壳聚糖纳米粒的制备 0061 (1) 将 50g 壳聚糖溶于 1000ml 体积比浓度为 2的乙酸溶液中， 搅拌使其完全溶 解， 放置备用 ； 0062 (2) 在室温、 600r/min 的机械搅拌条件下， 往上述壳聚糖溶液中加入 0.5mg/ml TPP 200ml， 反应 60min， 体系有。

23、明显的蓝色乳光生成， 得纳米混悬液 ； 0063 (3) 步骤 (2) 所得的纳米混悬液在 80控温条件下进行旋转蒸发浓缩， 体积蒸发 至纳米混悬液体积的一半即可 ； 0064 (4) 步骤 (3) 所得的浓缩液进行喷雾干燥， 设置进口温度为 190， 出口温度为 80， 进样流速 500ml/h， 压力为 15atm， 风速为 0.95m3/min。喷雾干燥所得即为壳聚糖纳米 粒。 0065 实施例 5 壳聚糖纳米粒的制备 0066 (1) 将 25g 壳聚糖溶于 1000ml 0.8的乙酸溶液中， 搅拌使其完全溶解， 放置备 用 ； 0067 (2) 在室温、 700r/min 的机械搅拌。

24、条件下， 往上述壳聚糖溶液中加入 1mg/ml TPP 100ml， 反应 30min， 体系有明显的蓝色乳光生成， 得纳米混悬液 ； 0068 (3) 步骤 (2) 所得的纳米混悬液在 65控温条件下进行旋转蒸发浓缩， 体积蒸发 至纳米混悬液体积的一半即可 ； 0069 (4) 步骤 (3) 所得的浓缩液进行喷雾干燥， 设置进口温度为 160， 出口温度为 85， 进样流速为 600ml/h， 压力为 13atm， 风速为 0.75m3/min。喷雾干燥所得即为壳聚糖纳 米粒。 0070 壳聚糖纳米粒粒度分布图和壳聚糖纳米粒透射电镜图分别见附图 1 和附图 2。由 附图 1 和附图 2 可见。

25、， 壳聚糖纳米粒为球形， 且表面光滑， 粒径分布集中。 0071 实施例 6 水溶性壳聚糖纳米粒的制备 0072 (1) 将 25g 水溶性壳聚糖 ( 按照现有方法自制或市购产品， 分子量为 5 10 万， 但分子量与本发明技术的实现无直接关系 ) 溶于 2500ml 水中， 搅拌使其完全溶解， 放置备 用 ； 0073 (2) 在室温、 700r/min 的机械搅拌条件下， 往上述壳聚糖溶液中加入 1mg/ml TPP 100ml， 反应 30min， 体系有明显的蓝色乳光生成， 得纳米混悬液 ； 0074 (3) 步骤 (2) 所得的纳米混悬液在 65控温条件下进行旋转蒸发浓缩， 体积蒸发。

26、 至纳米混悬液体积的一半即可 ； 说 明 书 CN 101732257 B5/10 页 7 0075 (4) 步骤 (3) 所得的浓缩液进行喷雾干燥， 设置进口温度为 160， 出口温度为 85， 进样流速为 600ml/h， 压力为 13atm， 风速为 0.75m3/min。喷雾干燥所得即为水溶性壳 聚糖纳米粒。 0076 实施例 7 水溶性壳聚糖纳米粒的制备 0077 (1) 将 25g 水溶性壳聚糖溶于 1250ml 水中， 搅拌使其完全溶解， 放置备用 ； 0078 (2) 在室温、 600r/min 的机械搅拌条件下， 往上述壳聚糖溶液中加入 0.85mg/ml TPP 100ml。

27、， 反应 60min， 体系有明显的蓝色乳光生成 ； 0079 (3) 步骤 (2) 所得的纳米混悬液在 60控温条件下进行旋转蒸发浓缩， 体积蒸发 至纳米混悬液体积的一半即可 ； 0080 (4) 步骤 (3) 所得的浓缩液进行喷雾干燥， 设置进口温度为 160， 出口温度为 85， 进样流速为 600ml/h， 压力为 13atm， 风速为 0.75m3/min。喷雾干燥所得即为水溶性壳 聚糖纳米粒。 0081 水溶性壳聚糖纳米粒粒度分布图和水溶性壳聚糖纳米粒透射电镜图分别见附图 3 和附图 4。由附图 3 和附图 4 可见， 水溶性壳聚糖纳米粒为为球形， 粒径分布集中。 0082 实施例。

28、 8 本发明壳聚糖纳米粒和水溶性壳聚糖纳米粒减肥作用以及预防和治疗 高脂血症作用实验 0083 1. 预防高脂血症的作用实验 0084 (1) 动物选择及高脂配方 0085 实验动物 ： 选清洁级的昆明种小鼠 48 只 ( 购自广州中医药大学实验动物中心 )， 体重为 30 50g， 雌雄各半。 0086 高脂乳剂配方 ： 取 1g 丙硫氧嘧啶置于乳钵中研细， 另器存放备用。取 20g 猪油， 加热 (80 ) 融化后， 加入 10g 研细的胆固醇， 1g 丙硫氧嘧啶， 充分搅拌溶解， 再加入 5ml 吐 温80， 搅拌， 然后加入10的去氧胆酸钠液20ml， 搅拌乳化， 加蒸馏水至100ml。

29、， 即得高脂乳 剂。 0087 (2) 剂量分组及给药时间确定 0088 昆明种小鼠适应性喂养 5 天， 随机分为 8 组， 每组 6 只。实验设本发明壳聚糖纳米 粒 (CTS-NP) 高、 低剂量组， 本发明水溶性壳聚糖纳米粒 (WSC-NP) 高、 低剂量组。高剂量组 每日平均食量定为 900mg/kg， 低剂量为 450mg/kg。 0089 另设正常对照组、 高脂对照组、 壳聚糖 (CTS) 对照组和水溶性壳聚糖 (WSC) 对照 组， 其中 CTS 对照组和 WSC 对照组剂量同给药组高剂量。给药时间为 15 天。正常对照组灌 以生理盐水， 高脂对照组灌以高脂乳剂， CTS 对照组灌。

30、以普通 CTS 液， WSC 对照组灌以普通 WSC 液。 0090 (3) 操作步骤 0091 空白对照组喂以普通饲料 ； 其它组灌以高脂乳剂， 同时给以受试样品， 连续 15 天 ； 实验结束后眼眶取血测总胆固醇(TC)、 高密度脂蛋白(HDL)、 低密度脂蛋白(LDL)和甘油三 酯 (TG)， 并对各组动物体重实际增长的平均值进行比较。 0092 以上结果的计量资料经 SPSS 16.0 统计软件进行处理， 方差分析， 多样本均数比 较的显著性检验用 q 检验。 0093 (4) 实验结果 说 明 书 CN 101732257 B6/10 页 8 0094 A. 血清生化实验结果见表 1。

31、 所示。 0095 由表 1 可知， 高脂对照组与正常对照组相比， 其 TC， TG， LDL 均高于正常组， 且差异 有显著性， 造模成功 ； CTS-NP 与 WSC-NP 高、 低剂量组与高脂模型组相比 TG 水平均明显降 低， 且 CTS-NP 与 WSC-NP 低剂量组与 CTS 对照组和 WSC 对照组没有差异 (P 0.05)。说明 减少 CTS-NP 与 WSC-NP 用量， 同样可以达到预防高脂血症的效果。 0096 表 1CTS-NP 与 WSC-NP 对实验性小鼠血清生化的影响 0097 0098 B. 体重增量实验结果见表 2 所示。 0099 由表 2 可知， CTS。

32、-NP 与 WSC-NP 高、 低剂量组与高脂模型组相比体重增量均减少， 且低剂量组的 CTS-NP 与 WSC-NP 与 CTS 对照和 WSC 对照差异不明显 (P 0.05)。 0100 表 2CTS-NP 与 WSC-NP 对实验性小鼠体重增量的影响 0101 0102 2. 治疗高脂血症的作用实验 0103 (1) 动物选择及高脂配方 0104 实验动物选SPF级的SD大鼠64只(购自广州中医药大学实验动物中心)， 单一性 别 ( 雄性 )， 体重在 180 220g 之间。 0105 高脂配方同 1.。 0106 (2) 剂量分组及给药时间确定 说 明 书 CN 101732257。

33、 B7/10 页 9 0107 适应性喂养 5 天， 随机分为 8 组， 每组 8 只。 0108 实验设 CTS-NP 中、 低剂量组， WSC-NP 中、 小剂量组。依文献报道普通壳聚糖大 鼠的给药剂量为 600mg/kg 鼠重， 当用此浓度进行配制时， 发现过于粘稠无法给药， 减小至 150mg/kg 鼠重方可， 因此选择此浓度为中剂量， 并确定小剂量为 75mg/kg 鼠重。 0109 另设正常对照组、 高脂对照组、 CTS对照组和WSC对照组， 其中CTS对照组与WSC对 照组剂量同给药组中剂量。给药时间为 30 天。 0110 (3) 操作步骤 0111 空白对照组给以普通饲料， 。

34、其余各组均灌以高脂乳剂， 15 天后， 取血测 TC、 TG、 HDL、 LDL， 观察模型是否成功。 之后， 高脂对照组继续灌以高脂乳剂， 其余各组分别喂以普通 饲料， 并给以受试样品。然后连续给药 30 天， 并定期称量体重。 0112 于实验结束禁食 16 小时后取血， 测 TC、 TG、 HDL、 LDL 的变化。同时测定血浆粘度。 0113 解剖尸体， 取出肝脏， 称其湿重， 加提取液 ( 氯仿与甲醇 1 1 体积比 ) 每 100mg 肝湿重加入 2ml， 研成匀浆， 再补加提取液， 混匀， 离心， 测其 TC， TG。同时取肾周、 睾周脂肪， 称重。 0114 以上结果的计量资料。

35、经 SPSS16.0 统计软件进行处理， 方差分析， 多样本均数比较 的显著性检验用 q 检验 0115 (4) 实验结果 0116 A. 血清生化实验结果见表 3 所示。 0117 由表 3 可知， 高脂模型组与正常对照组比较， TC， LDL-C 均明显升高， 证明动物造模 基本成功 ； 与模型组相比， CTS-NP 与 WSC-NP 中、 小剂量组均使 TC 和 LDL 明显下降， 且与 CTS 对照组， WSC 对照组相比， 差异具有显著性 (P 0.05)。 0118 表 3CTS-NP 与 WSC-NP 对实验性大鼠血清生化的影响 0119 0120 B. 血浆粘度实验结果见表 4。

36、 所示。 0121 由表 4 可知， CTS-NP 中、 小剂量组与 WSC-NP 中、 小剂量组与高脂模型组相比， 其血 浆粘度均显著下降。且与 CTS 对照组， WSC 对照组相比效果更好 (P 0.05)。 0122 表 4CTS-NP 与 WSC-NP 对实验性大鼠血浆粘度的影响 0123 说 明 书 CN 101732257 B8/10 页 10 0124 C. 体重增量实验结果见表 5 所示。 0125 由表 5 可知， CTS-NP 与 WSC-NP 中、 小剂量组与正常对照组相比， 均使体重增量减 少。小剂量组的 CTS-NP 与 WSC-NP 与 CTS 对照组， WSC 对。

37、照组相比， 差异没有显著性 (P 0.05)。表明 CTS-NP 与 WSC-NP 与 CTS、 WSC 对照组相比， 使用剂量减少一半， 即可达到减肥 效果。 0126 表 5CTS-NP 与 WSC-NP 对实验性大鼠体重的影响 0127 0128 D. 肝重、 肝指数、 体脂实验结果见表 6 所示。 0129 由表 6 可知， CTS-NP 与 WSC-NP 大小剂量与高脂对照组和正常对照组相比， 均无统 计学差异。 0130 表 6CTS-NP 与 WSC-NP 对实验性大鼠肝重和体脂的影响 0131 说 明 书 CN 101732257 B9/10 页 11 0132 E. 肝脏生化。

38、实验结果见表 7 所示。 0133 由表 7 可知， 高脂模型组的 TC 与 LDL 均高于正常组 ； CTS-NP 与 WSC-NP 中、 小剂量 均使 TC 降低， HDL 升高。说明 CTS-NP 与 WSC-NP 均能减少肝脏中 TC 的沉积。 0134 表 7CTS-NP 与 WSC-NP 对实验性大鼠肝脏生化的影响 0135 0136 F. 血清和肝脏 SOD 实验结果见表 8 所示。 0137 由表 8 可知， CTS-NP 中剂量组与模型对照组相比， 血清 SOD 活性明显增强， 其余各 组没有统计学差异。肝脏 SOD 数值较小， 没有统计学意义。 0138 表 8CTS-NP。

39、 与 WSC-NP 对实验性大鼠血清和肝 SOD 的影响 0139 说 明 书 CN 101732257 B10/10 页 12 0140 本发明所述的壳聚糖纳米粒 (CTS-NP) 和水溶性壳聚糖纳米粒 (WSC-NP) 能显著 降低血浆粘度， 同时对 TC、 LDL 也有很好的降低作用， 说明其降血脂效果较好。CTS-NP 和 WSC-NP对体重也有所减轻， 解决了目前壳聚糖服用剂量大的问题。 而且， 血清SOD值的活性 大大增强， 说明 CTS-NP 和 WSC-NP 有很强的抗氧化活性。 说 明 书 CN 101732257 B1/2 页 13 图 1 图 2 说 明 书 附 图 CN 101732257 B2/2 页 14 图 3 图 4 说 明 书 附 图 。