技术领域
本发明涉及含有盐酸莫西沙星为主要药效成分的注射剂的制剂及其制备方法和用途，还涉及这种盐酸莫西沙星注射液药物组合物的质量控制方法。
技术背景
氟喹诺酮类药物是近二十多年来发展非常迅速的一种全合成抗菌药物，主要作用于细菌DNA的螺旋酶及拓扑异构酶，具有抗菌谱广、抗菌作用强，安全性高等特点，在临床上被广泛应用于治疗由革兰氏阳性菌、阴性菌、厌氧菌等引起的呼吸道、泌尿道、皮肤软组织、耳鼻喉科、妇科及结核病等各种感染。根据喹诺酮类药物的化学结构、抗菌作用和体内过程可划分为一、二、三、四代，其中第三代药物如环丙沙星、左氧氟沙星等由于具有优异的抗感染作用和安全性，已跻身于世界畅销药物之列。但随着喹诺酮类药物使用范围的扩大以及用量的增加，在抵御各种感染性疾病的同时，耐药现象日趋严重，主要是由金黄色葡萄球菌、革兰氏阳性菌及绿脓菌等引起的耐药，以及与非甾体抗炎药合用诱发痉挛、光敏毒性、关节毒性等不良反应，因此需要开发新的喹诺酮类药物来克服这些问题。
盐酸莫西沙星是德国Bayer公司研究开发的新广谱高效第四代氟喹诺酮抗菌药，于1996年6月最先在德国上市，商品名：Avelox，同年12月获美国FDA批准上市。本品片剂于2002年在中国上市，2005年盐酸莫西沙星氯化钠注射液在中国上市，商品名：拜复乐。从化学结构来看，莫西沙星7位取代基团为二氮杂双环，可减少微生物主动外排所致的耐药(是喹诺酮类药物交叉耐药的主要机制)，保证了其耐药性低的优势，在8位引入甲氧基团，使本品在保留喹诺酮类药物对革兰氏阴性菌原有抗菌活性的同时，增强了对革兰氏阳性菌、非典型病原菌和厌氧菌的抗菌作用。莫西沙星除对铜绿假单胞菌的抗菌活性弱于左氧氟沙星之外，对非典型病原菌如肺炎链球菌、衣原体、军团菌、有芽胞和无芽胞的厌氧菌等都强于左氧氟沙星。此外，莫西沙星对β-内酰胺类、大环内酯类、氨基糖苷类和四环素类抗生素耐药的细菌亦有效，且和这些抗菌药物无交叉耐药性。莫西沙星不是肝细胞色素P-450同工酶抑制剂，因此与许多其它药物之间不存在相互作用。
盐酸莫西沙星临床上应用于治疗上呼吸道和下呼吸道感染，如急性窦炎、慢性支气管炎急生发作、社区获得性肺炎，以及皮肤和软组织感染等。在治疗社区获得性肺炎方面，根据Koch H等对本品上市后的监测结果，1467例确诊为社区获得性肺炎患者口服莫西沙星0.4g，每日1次，90％～99％患者的症状得到改善或治愈，54.2％的患者服用莫西沙星，3日后症状改善，平均治愈时间为8.0±2.7日，不良反应发生率为0.7％，主要为胃肠道反应，本品可作为社区获得性肺炎治疗的首选药物。
莫西沙星作为超广谱氟喹诺酮类抗菌药物，由于本品作用于细菌的两个靶位即拓扑异构化酶II和IV，所以本品不仅对敏感的细菌有效，而且对耐药菌株也有高度活性。临床上对多种感染显示出优良的治疗效果。本品的最大特点是对常见的引起呼吸道感染的细菌包括肺炎链球菌、流感杆菌、卡他莫拉汉氏菌及肺炎支原体、肺炎衣原体均有高度活性包括对B-内酰胺类抗生素、大环内酯类及已有氟喹诺酮药物均耐药的菌株。同时本品对呼吸系统组织及体液的渗透性良好，且耐受性和安全性均良好。莫西沙星的穿透力强，在肺组织中能保持较高浓度，对慢性支气管炎急性发作以及慢性阻塞性肺病细菌感染的疗效独特。近几年，由于空气污染等多种原因，我国呼吸系统感染发病率直线上线，本品在此领域内有显著的优势。需求量稳步攀升。自1999年9月1日Bayer公司首先在德国上市本品以来，相继已在美国、欧联盟、拉丁美洲和亚洲地区数十个国家上市，商品名Avelox，Actira，Octegra，Proflox。世界范围至少已有600多方例患者应用过本品。本品已逐渐成为治疗呼吸道感染的重要药物。中国专利00811427.7涉及了一种莫西沙星/氯化钠制剂。中国专利00811427.7记载了盐酸莫西沙星与葡萄糖的水制剂由于铁离子的原因导致此种制剂的稳定性很差。
CN1368891A(00811427.7)涉及含有莫西沙星盐酸盐和氯化钠的水性组合物、作为药物的所述组合物制剂和所述组合物在生产用于治疗或预防人或动物细菌感染的药物中的应用，组合物中含有0.04％-0.4％(w/v)(基于莫西沙星的量)莫西沙星盐酸盐和0.4％-0.9％(w/v)氯化钠的水制剂。
CN103830164A(201210472535.X)公开了含有增溶剂和金属离子络合剂的盐酸莫西沙星注射液以及该注射液的制备方法，该盐酸莫西沙星注射液，基于所述注射液的体积，包含1～2W/V的盐酸莫西沙星、0.005～0.6W/V的增溶剂和0.001～0.1W/V的金属离子络合剂。
CN103520093A(201310477145.6)公开了一种盐酸莫西沙星注射液及其制备方法，该注射液以葡萄糖为等渗调节剂，其中所述的注射液中含有醋酸铵和醋酸，醋酸调节注射液的pH为3.0-4.0。本发明制备了一种稳定的盐酸莫西沙星葡萄糖注射液，易于工业化生产，给不宜采用氯化钠注射液的患者提供了一种新的用药选择。
CN101972257A(201010280041.2)涉及一种含有莫西沙星的药物组合物，其特征在于其由莫西沙星或其盐和电解质平衡液组成，电解质平衡液选自乳酸钠林格注射液或醋酸钠林格注射液。本发明药物组合物，莫西沙星或其盐溶解性好，较少引起代谢性酸中毒，在进行抗菌治疗的同时，还可以调节体液、电解质及酸碱平衡。本发明药物组合物性质稳定。
CN102631316A(201210127205.7)涉及一种莫西沙星注射液，其包含莫西沙星或其盐或它们的水合物以及调节溶液PH值的PH调节剂。本发明的莫西沙星注射液质量稳定、安全可靠。
CN104771359A(201510155726.7)公开一种稳定的盐酸莫西沙星注射液，由盐酸莫西沙星、pH调节剂、稳定剂以及注射用水组成，其特征在于稳定剂为聚乙二醇。发明的莫西沙星稳定，易于储存，解决了莫西沙星存储过程中容易发生析晶和溶液颜色加深的问题。
CN102688183A(201110067458.5)涉及一种稳定的盐酸莫西沙星注射剂。该注射剂具体含有盐酸莫西沙星和木糖醇。该注射剂可以是注射液、输液和冻干粉针剂。本发明改善了现有产品或技术中存在的盐酸莫西沙星葡萄糖或盐酸莫西沙星氯化钠注射液制备、储存和使用过程中盐酸莫西沙星有关物质、溶液颜色、不溶微粒等稳定性。本发明的制备过程对设备的要求不苛刻，易于工业化生产。
CN103919779A(201410132555.1)公开一种含有莫西沙星的药物组合物，其特征在于该组合物由莫西沙星或其盐和乳酸钠林格注射液组成，具体组成为：每100ml该药物组合物中含莫西沙星或其盐0.1～0.4克按莫西沙星计，氯化钠0.54～0.66克、乳酸钠0.28～0.34克、氯化钾0.027～0.033克、氯化钙CaCl2.2H200.018～0.022克；所述药物组合物按照如下方法制备：称取处方量氯化钙，加适量注射用水溶解，并加入适量活性炭，分装，密封后湿热115度灭菌30分钟，得到氯化钙浓溶液；将处方量氯化钠、乳酸钠加入浓配罐中，加入适量注射用水，加热搅拌溶解，加入适量活性炭，搅拌，煮沸保温30分钟，经钛棒过滤至稀配罐，加入处方量盐酸莫西沙星、氯化钾、氯化钙浓溶液，加注射用水至满量，并调节pH4.5～7.0，经0.2um滤器过滤，分装，密封后湿热115度灭菌30分钟。
CN102000024A(201010548680.2)公开一种盐酸莫西沙星氯化钠注射液，含有基于莫西沙星量为0.03％～1％重量/体积的盐酸莫西沙星；0.0001％～3％重量/体积的pH调节剂(有机酸、有机碱、无机酸、无机碱)；0.0001％～0.1％重量/体积的金属离子络合剂；0.65～0.95％的氯化钠。
CN101732246A(200910255714.6)公开了一种莫西沙星水溶液型注射剂，其含有莫西沙星或其药学上可以接受的盐、弱酸的钠盐或磷酸的钠盐、注射用水；其中莫西沙星的含量为0.8％～4％(g/ml)，弱酸的钠盐或磷酸的钠盐的摩尔浓度为0.0002～1mol/L。本发明的莫西沙星水溶液型注射剂产品溶解性强，具有人体可接受的pH值，产品质量更易控制，贮存期内稳定，与临床常用的等渗溶液有良好的相容性，生产成本低，体积小，运输与储存方便。
CN103356479A(201310322660.7)涉及莫西沙星盐酸盐注射水剂，其特征在于，是用碳酸钠溶液作为pH调节剂调节而成，且制剂的pH值为7.1～8.0。在该制剂的制备方法中，优选用总用水量50～80％的水溶解莫西沙星盐酸盐，用15～35％的水以碳酸钠溶液的形式引入。更优选在调节好pH值后，在室温下静置或者弱搅拌一段时间，使pH值恒定。本发明的制剂可以获得较高的有效浓度和较佳的储存稳定性。
CN102895178A(201110214515.8)公开了一种注射用盐酸莫西沙星浓溶液型注射剂，其特征在于含有莫西沙星1％～4％(g/ml)和0.005～1mol/L的不含硫的氨基酸或其药学上可接受的盐；或含有莫西沙星1％～4％(g/ml)、0.005～1mol/L的不含硫的氨基酸和其药学上可接受的盐；其中所述莫西沙星优选为1.8％～4％(g/ml)。
另外，作为一种临床上重要的产品，莫西沙星的质量控制亦是人们非常关注的。例如，CN103869033A(201210544571.2)涉及一种液相色谱法分离测定莫西沙星及其杂质的方法，其特征在于：以苯基键合硅胶为填料的色谱柱，以甲醇-缓冲溶液为流动相，采用梯度洗脱，其中甲醇缓冲溶液起始体积比为30：70～10：90，缓冲溶液含有四丁基季铵盐、四丁基磷酸盐或四丁基硫酸盐与磷酸盐、磷酸的组合。
CN103543230A(201210236984.4)公开一种盐酸莫西沙星及其对映异构体的分离测定方法，其特征在于，包括：1)选择对照物质：盐酸莫西沙星消旋体，盐酸莫西沙星；2)样品制备：取盐酸莫西沙星消旋体，加流动相溶解稀释，配制成1μg/ml～20μg/ml的盐酸莫西沙星消旋体溶液；取盐酸莫西沙星，加流动相溶解稀释，配制成0.4mg/ml～1mg/ml的盐酸莫西沙星溶液；3)色谱条件：高效液相色谱仪，所用色谱柱为反相色谱柱，以硫酸铜和手性试剂的混合水溶液为水相，水相-有机相的混合液为流动相，柱温为：20℃～45℃；流速为：0.6ml/min～1.4ml/min；检测波长为：270～310nm；4)测定：分别精密量取所述盐酸莫西沙星消旋体溶液和所述盐酸莫西沙星溶液各2μl～50μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，但是这种方法不清楚是否适用于测试本发明注射液的配方。
CN102584819A(201210020365.1)涉及一种式I所示N-甲基化的8-甲氧基喹诺酮甲酸类化合物、酸加成盐或碱金属盐，及其制备方法以及在盐酸莫西沙星质量检测与分析中的应用。采用该化合物或其盐作为杂质对照品，用外标法检测与分析盐酸莫西沙星，能够对工业化生产的盐酸莫西沙星原料及制剂中可能含有的该类杂质进行定量控制，有利于提高盐酸莫西沙星的质量，提高临床用药的安全性。
CN103185757A(201110445346.9)提供了一种莫西沙星(R，R)-异构体的检测方法，该检测方法采用高效液相色谱仪进行检测，其条件如下：色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱，流动相为含有L-亮氨酸和金属离子的溶剂，其中所述金属离子为Cu2+、Zn2+或其混合离子，所述溶剂包含水和有机溶剂，水和有机溶剂的体积比为77～82∶23～18。本发明提供的检测方法具有较高的灵敏度和专属性，操作简捷，可快速准确的检测出莫西沙星的(R，R)-异构体，可用于莫西沙星的质量控制，并为此类化合物的研究开发及质量检测奠定了基础，具有现实意义。
本发明人已经发现，上述CN102895178A采用包含氨基酸的配方制成的注射液具有优良的化学稳定性。然而，本发明人还发现，上述CN102895178A包含氨基酸例如包含门冬氨酸的注射液在稍微低温(这种环境是容易遇到的，例如在某些流通环节中在经常遇到)的环境下贮藏后会微有乳光出现，尽管尚不清楚这种是否会对产品的安全性产生影响，但是本领域技术人员公知作为市售药品仍然是需要避免的。本发明人通过进一步的研究发现，这种乳光通过在注射液配制过程中用活性炭吸附能够得以避免；然而令人遗憾的是，因使用活性炭吸附引出的新的问题是在使用活性炭吸附时，表现出对活性成分显著吸附的情形，造成成品中活性成分的显著损失，这就需要通过加大投料量来克服。因此，本领域技术人员仍然期待解决上述各种技术问题和/或矛盾。
发明内容
本发明目的在于提供一种盐酸莫西沙星注射液并能够克服上述各种技术问题和/或避免各种矛盾。已经出人意料的发现，使用本发明方法和配方制备得到的本发明盐酸莫西沙星注射液，能够满意的实现上述目的。
为此，本发明第一方面提供了一种盐酸莫西沙星注射液药物组合物，其中包含盐酸莫西沙星、门冬氨酸、依地酸钙钠、任选的酸碱调节剂、和注射用水。
根据本发明第一方面任一实施方案的盐酸莫西沙星注射液药物组合物，其每20ml中包含：盐酸莫西沙星以莫西沙星计350～450mg、门冬氨酸80～120mg、依地酸钙钠8～12mg。
根据本发明第一方面任一实施方案的盐酸莫西沙星注射液药物组合物，其每20ml中包含：盐酸莫西沙星以莫西沙星计380～420mg、门冬氨酸90～115mg、依地酸钙钠9～11mg。
根据本发明第一方面任一实施方案的盐酸莫西沙星注射液药物组合物，其每20ml中包含：盐酸莫西沙星以莫西沙星计400mg、门冬氨酸90～115mg、依地酸钙钠9～11mg。
根据本发明第一方面任一实施方案的盐酸莫西沙星注射液药物组合物，其pH值为4～5，例如其pH值为4.2～4.8。
根据本发明第一方面任一实施方案的盐酸莫西沙星注射液药物组合物，其中所述酸碱调节剂可以是任何本领域常用于注射液pH调节的酸碱调节剂，例如盐酸、磷酸、硫酸等酸以及氢氧化钠、碳酸氢钠、碳酸钠等碱以及它们的水溶液。在本发明中，所述酸碱调节剂是选自下列的酸碱调节剂：盐酸、氢氧化钠、以及它们的水溶液。
根据本发明第一方面任一实施方案的盐酸莫西沙星注射液药物组合物，其中所述酸碱调节剂的用量是使得所述盐酸莫西沙星注射液药物组合物，其pH值为4～5，例如其pH值为4.2～4.8。
根据本发明第一方面任一实施方案的盐酸莫西沙星注射液药物组合物，其在配制药液的过程中使用了活性炭吸附处理的工艺。活性炭吸附处理工艺在注射液配制过程中是一种常规工艺，通常视具体品种确定是否需要此操作工艺。这种活性炭吸附处理工艺通常来讲包括向所配制的药液中添加针用活性炭，然后搅拌一段时间，最后过滤脱炭。
根据本发明第一方面任一实施方案的盐酸莫西沙星注射液药物组合物，其是照包括如下的步骤制备得到的：
(a)用配液总量的60～80％的注射用水(例如水温为50～90℃)使门冬氨酸和依地酸钙钠溶解，用酸碱调节剂调节所得药液pH值为4.3～4.7，(例如待药液温度在40～70℃范围时)向其中添加盐酸莫西沙星，搅拌使溶解；
(b)(例如待药液温度在40～70℃范围时)向所得药液中加入活性炭(以溶液体积计0.05～0.15％w/v)，搅拌吸附20～60分钟，脱炭过滤；
(c)补加注射用水至全量，同时用酸碱调节剂校验并调节所得药液pH值为4.3～4.7；
(d)将所得药液过滤，灌装到玻璃瓶中，密封，灭菌，即得。
进一步的，本发明第二方面提供了制备盐酸莫西沙星注射液药物组合物例如本发明第一方面任一实施方案所述的盐酸莫西沙星注射液药物组合物的方法，所述盐酸莫西沙星注射液药物组合物中包含盐酸莫西沙星、门冬氨酸、依地酸钙钠、任选的酸碱调节剂、和注射用水；该方法包括使用活性炭吸附处理的工艺配制药液。
根据本发明第二方面任一实施方案的方法，该方法包括如下步骤：
(a)用配液总量的60～80％的注射用水(例如水温为50～90℃)使门冬氨酸和依地酸钙钠溶解，用酸碱调节剂调节所得药液pH值为4.3～4.7，(例如待药液温度在40～70℃范围时)向其中添加盐酸莫西沙星，搅拌使溶解；
(b)(例如待药液温度在40～70℃范围时)向所得药液中加入活性炭(以溶液体积计0.05～0.15％w/v)，搅拌吸附20～60分钟，脱炭过滤；
(c)补加注射用水至全量，同时用酸碱调节剂校验并调节所得药液pH值为4.3～4.7；
(d)将所得药液过滤，灌装到玻璃瓶中，密封，灭菌，即得。
根据本发明第二方面任一实施方案的方法，其中所述盐酸莫西沙星注射液药物组合物每20ml中包含：盐酸莫西沙星以莫西沙星计350～450mg、门冬氨酸80～120mg、依地酸钙钠8～12mg。
根据本发明第二方面任一实施方案的方法，其中所述盐酸莫西沙星注射液药物组合物每20ml中包含：盐酸莫西沙星以莫西沙星计380～420mg、门冬氨酸90～115mg、依地酸钙钠9～11mg。
根据本发明第二方面任一实施方案的方法，其中所述盐酸莫西沙星注射液药物组合物每20ml中包含：盐酸莫西沙星以莫西沙星计400mg、门冬氨酸90～115mg、依地酸钙钠9～11mg。
根据本发明第二方面任一实施方案的方法，其中所述盐酸莫西沙星注射液药物组合物的pH值为4～5，例如其pH值为4.2～4.8。
根据本发明第二方面任一实施方案的方法，其中所述酸碱调节剂可以是任何本领域常用于注射液pH调节的酸碱调节剂，例如盐酸、磷酸、硫酸等酸以及氢氧化钠、碳酸氢钠、碳酸钠等碱以及它们的水溶液。在本发明中，所述酸碱调节剂是选自下列的酸碱调节剂：盐酸、氢氧化钠、以及它们的水溶液。
根据本发明第二方面任一实施方案的方法，其中所述酸碱调节剂的用量是使得所述盐酸莫西沙星注射液药物组合物，其pH值为4～5，例如其pH值为4.2～4.8。
临床使用的盐酸莫西沙星为SS构型，其原料药和制剂例如注射液通常需要监测其中RR-异构体的含量，已经出人意料的发现，本发明同时添加了门冬氨酸和依地酸钙钠注射液其在进行异构体含量测定时需要特殊的色谱条件才能实现优良的色谱分析。
为此，本发明第三方面提供了对盐酸莫西沙星注射液药物组合物例如本发明第一方面任一实施方案所述的盐酸莫西沙星注射液药物组合物中的RR异构体(即R,R盐酸莫西沙星)进行含量测定的方法，所述盐酸莫西沙星注射液药物组合物中包含盐酸莫西沙星、门冬氨酸、依地酸钙钠、任选的酸碱调节剂、和注射用水；该方法包括如下操作：
(1)取注射液0.5ml，置100ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；另取盐酸莫西沙星消旋体对照品约10mg，精密称定，置100ml量瓶中，加流动相溶解稀释至刻度，制成每1ml约含0.1mg的溶液，作为系统适用性实验溶液；
(2)色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱；以甲醇-缓冲液(取D-苯丙氨酸1.32g与硫酸铜1.0g，加水1000ml溶解后，用碱性物质调节pH值至3.3～3.7)(25：75)为流动相；流速1.0ml/min；柱温40℃；检测波长293nm；取系统适用性试验溶液20μl注入液相色谱仪，记录色谱图，盐酸莫西沙星和RR-异构体依次出峰，两峰之间分离度应大于2.0，理论塔板数按莫西沙星峰计应不少于2000；
(3)精密量取供试品溶液20μl注入液相色谱仪，记录色谱图，读取该供试品溶液色谱图中SS异构体(即注射液中的活性成分盐酸莫西沙星)和RR异构体的峰面积，以下式计算注射液中的RR-异构体的含量：
RR异构体含量＝[RR异构体峰面积÷(SS异构体峰面积+RR异构体峰面积)]×100％。
通过上述公式可以计算得到注射液中RR异构体相对于全部构型物质的百分含量。通常来讲，要求盐酸莫西沙星注射液药物组合物中的RR异构体的含量低于0.10％。
根据本发明第三方面任一实施方案的方法，用于配制流动相时的所述碱性物质选自氢氧化钠、碳酸氢钠、三乙胺。已经出人意料的发现，当使用三乙胺调节缓冲液的pH，可以克服可能是由于依地酸钙钠引起的对RR异构体测定精密度影响的缺陷。
根据本发明第三方面任一实施方案的方法，所述盐酸莫西沙星注射液药物组合物每20ml中包含：盐酸莫西沙星以莫西沙星计350～450mg、门冬氨酸80～120mg、依地酸钙钠8～12mg。
根据本发明第三方面任一实施方案的方法，所述盐酸莫西沙星注射液药物组合物每20ml中包含：盐酸莫西沙星以莫西沙星计380～420mg、门冬氨酸90～115mg、依地酸钙钠9～11mg。
根据本发明第三方面任一实施方案的方法，所述盐酸莫西沙星注射液药物组合物每20ml中包含：盐酸莫西沙星以莫西沙星计400mg、门冬氨酸90～115mg、依地酸钙钠9～11mg。
根据本发明第三方面任一实施方案的方法，所述盐酸莫西沙星注射液药物组合物pH值为4～5，例如其pH值为4.2～4.8。
根据本发明第三方面任一实施方案的方法，其中所述酸碱调节剂可以是任何本领域常用于注射液pH调节的酸碱调节剂，例如盐酸、磷酸、硫酸等酸以及氢氧化钠、碳酸氢钠、碳酸钠等碱以及它们的水溶液。在本发明中，所述酸碱调节剂是选自下列的酸碱调节剂：盐酸、氢氧化钠、以及它们的水溶液。
根据本发明第三方面任一实施方案的方法，其中所述酸碱调节剂的用量是使得所述盐酸莫西沙星注射液药物组合物，其pH值为4～5，例如其pH值为4.2～4.8。
根据本发明第三方面任一实施方案的方法，所述盐酸莫西沙星注射液药物组合物在配制药液的过程中使用了活性炭吸附处理的工艺。
根据本发明第三方面任一实施方案的方法，所述盐酸莫西沙星注射液药物组合物是照包括如下的步骤制备得到的：
(a)用配液总量的60～80％的注射用水(例如水温为50～90℃)使门冬氨酸和依地酸钙钠溶解，用酸碱调节剂调节所得药液pH值为4.3～4.7，(例如待药液温度在40～70℃范围时)向其中添加盐酸莫西沙星，搅拌使溶解；
(b)(例如待药液温度在40～70℃范围时)向所得药液中加入活性炭(以溶液体积计0.05～0.15％w/v)，搅拌吸附20～60分钟，脱炭过滤；
(c)补加注射用水至全量，同时用酸碱调节剂校验并调节所得药液pH值为4.3～4.7；
(d)将所得药液过滤，灌装到玻璃瓶中，密封，灭菌，即得。
本发明任一方面或该任一方面的任一实施方案所具有的任一技术特征同样适用其它任一实施方案或其它任一方面的任一实施方案，只要它们不会相互矛盾，当然在相互之间适用时，必要的话可对相应特征作适当修饰。下面对本发明的各个方面和特点作进一步的描述。
本发明所引述的所有文献，它们的全部内容通过引用并入本文，并且如果这些文献所表达的含义与本发明不一致时，以本发明的表述为准。此外，本发明使用的各种术语和短语具有本领域技术人员公知的一般含义，即便如此，本发明仍然希望在此对这些术语和短语作更详尽的说明和解释，提及的术语和短语如有与公知含义不一致的，以本发明所表述的含义为准。
盐酸莫西沙星是在美国上市的一种广谱和具有抗菌活性的8-甲氧基氟喹诺酮类抗菌药，应用于有上呼吸道和下呼吸道感染的成人的抗生素类药物。盐酸莫西沙星的英文名为MoxifloxacinHydrochloride，分子式为C21H24FN3O4·HCl，分子量为437.89，CAS号为186826-86-8，中文化学名为1-环丙基-7-(S,S-2,8-重氮-二环[4.3.0]壬烷-8-基)-6-氟-8-甲氧-1,4-二氢-4-氧-3-喹啉羧酸盐酸盐，英文化学名为1-Cyclopropyl-6-fluoro-1,4-dihydro-8-methoxy-7-[(4aS,7aS)-octahydro-6H-pyrrolo[3,4-b]pyridin-6-yl]-4-oxo-3-quinolinecarboxylic acid，monohydrochloride，其化学结构式如下：
盐酸莫西沙星的RR对映异构体为1-环丙基-7-(R,R-2,8-重氮-二环[4.3.0]壬烷-8-基)-6-氟-8-甲氧-1,4-二氢-4-氧-3-喹啉羧酸盐酸盐。
本发明配方和方法制备得到的盐酸莫西沙星注射液呈现优异的特点，并且本发明用于分析注射液中的异构体的方法亦具有优异的方法学特征。
具体实施方式
通过下面的实施例可以对本发明进行进一步的描述，然而，本发明的范围并不限于下述实施例。本领域的专业人员能够理解，在不背离本发明的精神和范围的前提下，可以对本发明进行各种变化和修饰。本发明对试验中所使用到的材料以及试验方法进行一般性和/或具体的描述。虽然为实现本发明目的所使用的许多材料和操作方法是本领域公知的，但是本发明仍然在此作尽可能详细描述。以下实施例进一步说明本发明，而不是限制本发明。
在本发明下文中，例明注射液配方时，如未另外说明，是以每20ml的量阐述的，但是在实际生产操作时，每次投料量至少10L。在下文中，如无另外说明，所用的酸碱调节剂是1M氢氧化钠溶液。
试验例1：注射液中主成分的有关物质检查方法
避光操作。
色谱条件与系统适用性试验：用苯基硅烷键合硅胶为填充剂，柱温45℃；检查波长293nm；流速1.3ml/min，以缓冲液(1L水中含0.5g四甲基氢氧化铵，1.0g磷酸二氢钾和2.0ml磷酸)，为流动相A，甲醇为流动相B，按下表进行梯度洗脱。取对照溶液20μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高约为满量程的20％；量取系统适用性试验溶液20μl注入液相色谱仪，记录色谱图，出峰顺序为莫西沙星、盐酸莫西沙星杂质A(RRT约1.1)、B(RRT约1.2)、C(RRT约1.30)、D(RRT约1.4)、E(RRT约1.6)，杂质A与莫西沙星的分离度应大于2.0。
时间(分钟) 流动相A(％) 流动相B(％) 0 75 25 25 75 25 35 47 53 50 47 53 60 78 22 85 78 22
精密量取本品5ml，置100ml棕色量瓶中，加稀释液(称取0.50g四甲基氢氧化铵和1.0g磷酸二氢钾，溶于500ml水中，加入2ml磷酸和0.050g无水亚硫酸钠，加水稀释至1000ml)稀释至刻度，摇匀，制成每1ml中约含盐酸莫西沙星1.0mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取供试品溶液5ml，置100ml量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀，再精密量取2ml，置100ml量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀，制成每1ml中约含1.0μg的溶液，作为对照溶液。取喹啉羧酸对照品5mg，精密称定，置100ml量瓶中，用甲醇溶解稀释至刻度，混匀，再精密量取5ml，置25ml量瓶中加甲醇稀释至刻度，混匀，制成每1ml中约含10ug的溶液，作为杂质定位溶液。另取莫西沙星峰鉴别用对照品(含盐酸莫西沙星杂质A、B、C、D、E)约10mg，精密称定，置10ml量瓶中，加稀释液溶解稀释至刻度，制成每1ml约含1mg的溶液，作为系统适用性试验溶液。
精密量取杂质定位溶液、对照溶液及供试品溶液各20ul，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。供试品溶液的色谱图中如有杂质峰，供试品溶液的色谱图中如有杂质峰，喹啉羧酸、盐酸莫西沙星杂质B、E按校正后的峰面积计算(分别乘以校正因子4.2、1.4、3.5)；通常而言，要求盐酸莫西沙星注射液中，杂质A、B、C、D、E以及其他单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积(0.08％)；各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的1.4倍(0.14％)。
分析：按自身对照法计算供试品溶液色谱图中的杂质含量。
其中：
S喹啉羧酸：为供试品溶液中喹啉羧酸的峰面积；
S杂A：为供试品溶液中盐酸莫西沙星杂质A的峰面积；
S杂B：为供试品溶液中盐酸莫西沙星杂质B的峰面积；
S杂C：为供试品溶液中盐酸莫西沙星杂质C的峰面积；
S杂D：为供试品溶液中盐酸莫西沙星杂质D的峰面积；
S杂E：为供试品溶液中盐酸莫西沙星杂质E的峰面积；
S供单：为供试品溶液中其他单个最大杂质的峰面积；
S供和：为供试品溶液中各杂质峰面积的和；
S对：为对照溶液的主峰面积。
上述杂质A、B、C、D、E分别为：
其中，杂质A为R＝R′＝F，
杂质B为R＝R′＝OCH3，
杂质C为R＝F，R′＝OC2H5，
杂质D为R＝OCH3，R′＝F，
杂质E为R＝F，R′＝OH。
试验例2：注射液中主成分的含量测定方法
色谱条件与系统适用性试验：用苯基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-缓冲液(1L水中含四甲基氢氧化铵0.5g，磷酸二氢钾1.0g和磷酸2.0ml)(22：78)为流动相；柱温45℃；检测波长293nm；流速1.3ml/min，理论塔板数按莫西沙星峰计算不低于3000，拖尾因子不得大于1.5。
测定法：取本品5ml，置100ml棕色量瓶中，加稀释液(取四甲基氢氧化铵0.5g和磷酸二氢钾1.0g，溶解于500ml水中，加磷酸2.0ml和无水亚硫酸钠0.05g，加水稀释至1000ml)稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置50ml棕色量瓶中，加稀释液稀释至刻度，摇匀，制成1ml中约含0.1mg的溶液作为供试品溶液(1)、同法制得供试品溶液(2)，精密量取20ul注入液相色谱仪，记录色谱图；另取盐酸莫西沙星对照品约10mg，精密称定，置100ml容量瓶中，加稀释液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液(1)、同法制得对照品溶液(2)，同法测定。
分析：按外标法以峰面积计算盐酸莫西沙星以莫西沙星(C21H24FN3O4)计的含量。
式中：
S供：为供试品溶液的主峰面积；
n供：为供试品溶液的稀释倍数；
V供：为供试品取样量；
m对：为对照品称样量；
C对：为对照品的含量；
S对：为对照品溶液的主峰面积；
n对：为对照品溶液的稀释倍数；
K对：为对照品的平均毫克峰面积，
K对＝S对/(m对×C对)。
通常而言，要求盐酸莫西沙星注射液中含盐酸莫西沙星以莫西沙星(C21H24FN3O4)计应为标示量的97.0％～105.0％。
试验例3：注射液中RR异构体(即R,R盐酸莫西沙星)的含量测定方法
(1)取注射液0.5ml，置100ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；另取盐酸莫西沙星消旋体对照品约10mg，精密称定，置100ml量瓶中，加流动相溶解稀释至刻度，制成每1ml约含0.1mg的溶液，作为系统适用性实验溶液；
(2)色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱；以甲醇-缓冲液(取D-苯丙氨酸1.32g与硫酸铜1.0g，加水1000ml溶解后，用碱性物质(具体使用的是三乙胺)调节pH值至3.3～3.7)(25：75)为流动相；流速1.0ml/min；柱温40℃；检测波长293nm；取系统适用性试验溶液20μl注入液相色谱仪，记录色谱图，盐酸莫西沙星和RR-异构体依次出峰，两峰之间分离度应大于2.0，理论塔板数按莫西沙星峰计应不少于2000；
(3)精密量取供试品溶液20μl注入液相色谱仪，记录色谱图，读取该供试品溶液色谱图中SS异构体(即注射液中的活性成分盐酸莫西沙星)和RR异构体的峰面积，以下式计算注射液中的RR-异构体的含量：
RR异构体含量＝[RR异构体峰面积÷(SS异构体峰面积+RR异构体峰面积)]×100％。
通过上述公式可以计算得到注射液中RR异构体相对于全部构型物质的百分含量。通常来讲，要求盐酸莫西沙星注射液药物组合物中的RR异构体的含量低于0.10％。
对照试验例1：测定盐酸莫西沙星注射液中的对映异构体的方法
参照CN 103543230 B之实施例1的方法进行。
对照试验例2：测定盐酸莫西沙星注射液中的对映异构体的方法
参考CN 103543230 B之实施例1的方法，但不同的仅是改用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱进行。
对照试验例3：测定盐酸莫西沙星注射液中的对映异构体的方法
参照以上本发明试验例3的方法，不同的仅是在配制流动相时所用的碱性物质改用氢氧化钠。
试验例4：注射液的稳定性考察：
使以下实施例1-6、实施例11-13所制得的注射液置于45℃高温放置4月(在本发明中可称为45℃4月处置)，照以上各种试验例，分别于0月和6月测定注射液中活性成分莫西沙星的含量、有关物质含量、对映异构体含量。对于每一指标，以下式计算其经此45℃4月处置后的变化百分数：
某指标变化百分数＝[(|0月指标值-6月指标值|)÷0月指标值]×100％
上述变化百分数经0月值与6月值差值取绝对值后为正数，表示该指标的变化情况，其越大则表明注射液该指标的变化越大，例如对于活性成分莫西沙星的含量，该变化百分数越大表示活性成分含量降低越多。结果显示，实施例1-6、实施例11-13所得全部注射液，不论是否添加EDTA、不论是否在工艺中用炭吸附，均显示三个参数变化百分数呈微小变化的结果，例如莫西沙星含量变化百分数均在1.6～3.1％范围内且各样品相互之间无明显差异，有关物质含量变化百分数均在1.13～1.74％范围内且各样品相互之间无明显差异，对映异构体含量变化百分数均在0.86～1.44％范围内且各样品相互之间无明显差异。
另外，将实施例1-6、实施例11-13所制得的注射液置于8～10℃低温条件下放置1月(在本发明中可称为10℃1月处置)，照以上各种试验例，分别于0月和1月测定注射液中活性成分莫西沙星的含量、有关物质含量、对映异构体含量。对于每一指标经此10℃1月处置后的变化百分数亦可参考上述45℃4月处置的计算式处理，结果显示与高温处置一样，莫西沙星的含量、有关物质含量、对映异构体含量三个指标在不同注射液试样之间均未显示明显差异，三个含量变化百分数均分别在0.12～0.16％、0.07～0.11％和0.02～0.03％范围内。
外观观察：实施例1-6、实施例11-13所得全部批次的注射液，在制备完成后观察，均为澄明溶液，且均未观察到有乳光现象。实施例1-6、实施例11-13所得全部批次的注射液在经历45℃4月处置后观察，均为澄明溶液，且均未观察到有乳光现象。实施例1-6、实施例11所得全部批次的经炭处理工艺所得注射液在经历10℃1月处置后观察，均为澄明溶液，且均未观察到有乳光现象。实施例12、实施例13所得全部批次的未经炭处理工艺所得注射液在经历10℃1月处置后观察，均观察到有乳光现象，并且这些试样再经室温放置1月后乳光不会消失，这是完全不能令人接受的，因此在药品特别是注射液的流通、贮藏、运输过程中完全有可能会暴露于10℃左右的温度下并且这种暴露时间完全可能超过1个月。由以上结果可见，不用活性炭吸附处理的注射液在经历低温环境后会出现不可接受的乳光现象，而当用活性炭处理后可以克服这种乳光形成。
试验例5：注射液工艺性能考察：
在实施例1-6、实施例11制备注射液的工艺中，使用了活性炭吸附处理，在炭过滤前后，测定药液中的活性成分的浓度，以滤后药液中浓度除以滤前药液中浓度再乘以100％所得百分数，作为过滤后药液中活性成分的残余百分数，结果显示实施例11制备的6个注射液时残余百分数均在91～92％范围内，而实施例1-6制备的6个注射液时残余百分数均在99～100％范围内，表明活性炭吸附会有活性成分的显著损失，而当药液中添加了依地酸钙钠后，完全可以避免这种损失，这是完全出人意料的，因为现有技术未曾见有任何这种技术教导，例如关于依地酸钙钠能够克服活性炭对药物吸附的教导。另外，本发明人在参照CN102631316B实施例1的配方和制法制备盐酸莫西沙星注射液时亦发现，在钛过滤器脱碳前后的药液中，活性成分的残余百分数为90.8％，表明同样存在吸附损失，这种损失通常需要在原料药投料增加来对冲。
试验例6：RR异构体检测
使用本发明上述试验例3、对照试验例1、对照试验例2、对照试验例3的方法，测定本发明制得的各种注射液中RR异构体的含量。
结果显示，试验例3方法所得色谱图与对照试验例1、对照试验例2、对照试验例3方法所得色谱图基本上相同，并且均与CN103543230B之图1和图2基本相同，特别是例如SS异构体和RR异构体在分离度、理论板数等方面试验例3、对照试验例1、对照试验例2、对照试验例3方法均与CN103543230B之图1和图2基本相同(例如盐酸莫西沙星和RR-异构体两峰之间分离度均大于3.0，理论塔板数按莫西沙星峰计均大于3000)。
在注射液中，由于RR异构体含量非常低，例如CN103543230B之图2中的峰2所示，这样，容易造成该色谱峰记录的偏差大，由此造成该小峰在不同进样测试时峰面积的波动，这种波动容易反映在峰面积的精密度上，可以以该RR异构体峰面积的相对标准偏差RSD表示，即对于同一注射液样品，使用某一测试方法测试6次，计算此6次测试中RR异构体的峰面积，再计算其相对标准偏差RSD，通常而言RSD低于0.5％是优选的，而当大于1％是不利的甚至是不可接受的，特别是对于这种生物学活性不明了的杂质，精确测定是非常有必要的。
对于实施例11、实施例13所得全部批次的未添加依地酸钙钠的注射液，在分别使用试验例3、对照试验例1、对照试验例2、对照试验例3四种方法测定注射液中的异构体时，SS异构体的RSD均在0.1～0.2％范围内、RR异构体的RSD均在0.2～0.3％范围内，表明各种方法对于两种异构体的测试精密度无差别并且均非优异；
对于实施例1-6、实施例12所得全部批次的添加了依地酸钙钠的注射液，在使用试验例3方法测定注射液中的异构体时，SS异构体的RSD均在0.1～0.2％范围内、RR异构体的RSD均在0.1～0.3％范围内，表明这种方法对于两种异构体的测试精密度无差别并且均非优异；
对于实施例1-6、实施例12所得全部批次的添加了依地酸钙钠的注射液，在分别使用对照试验例1、对照试验例2、对照试验例3三种方法测定注射液中的异构体时，SS异构体的RSD均在0.1～0.3％范围内、RR异构体的RSD均在1.6～2.1％范围内，表明这种方法对于SS异构体的测试精密度无差别并且均非优异，但是对于RR异构体测试的精密度显然不可接受。上述情形表明，可能是由于配方中依地酸钙钠的存在，不同的异构体测试方法对于RR异构体响应精密度不同，当使用氢氧化钠为调节流动相的碱性物质时，存在潜在的方法学缺陷，而改用本发明试验例3的方法时，这种缺陷得以克服。
实施例1：制备盐酸莫西沙星注射液
处方：
盐酸莫西沙星(以莫西沙星计)400mg，
门冬氨酸100mg，
依地酸钙钠10mg，
酸碱调节剂适量调节注射液pH，
注射用水适量，至20ml。
制法：
(a)用配液总量的70％的注射用水(水温70℃)使门冬氨酸和依地酸钙钠溶解，用酸碱调节剂调节所得药液pH值为4.5，待药液温度在60℃时向其中添加盐酸莫西沙星，搅拌使溶解；
(b)待药液温度在40～70℃时向所得药液中加入活性炭(以溶液体积计0.1％w/v)，搅拌吸附30分钟，脱炭过滤；
(c)补加注射用水至全量，同时用酸碱调节剂校验并调节所得药液pH值为4.5；
(d)将所得药液过滤，灌装到玻璃瓶中(20ml/瓶)，密封，灭菌，即得。
实施例2：制备盐酸莫西沙星注射液
处方：
盐酸莫西沙星(以莫西沙星计)350mg，
门冬氨酸80mg，
依地酸钙钠12mg，
酸碱调节剂适量调节注射液pH，
注射用水适量，至20ml。
制法：
(a)用配液总量的60％的注射用水(水温75℃)使门冬氨酸和依地酸钙钠溶解，用酸碱调节剂调节所得药液pH值为4.3，待药液温度在70℃时向其中添加盐酸莫西沙星，搅拌使溶解；
(b)待药液温度在40～70℃时向所得药液中加入活性炭(以溶液体积计0.125％w/v)，搅拌吸附40分钟，脱炭过滤；
(c)补加注射用水至全量，同时用酸碱调节剂校验并调节所得药液pH值为4.3；
(d)将所得药液过滤，灌装到玻璃瓶中(20ml/瓶)，密封，灭菌，即得。
实施例3：制备盐酸莫西沙星注射液
处方：
盐酸莫西沙星(以莫西沙星计)450mg，
门冬氨酸120mg，
依地酸钙钠8mg，
酸碱调节剂适量调节注射液pH，
注射用水适量，至20ml。
制法：
(a)用配液总量的80％的注射用水(水温60℃)使门冬氨酸和依地酸钙钠溶解，用酸碱调节剂调节所得药液pH值为4.7，待药液温度在40℃时向其中添加盐酸莫西沙星，搅拌使溶解；
(b)待药液温度在40～70℃时向所得药液中加入活性炭(以溶液体积计0.075％w/v)，搅拌吸附20 分钟，脱炭过滤；
(c)补加注射用水至全量，同时用酸碱调节剂校验并调节所得药液pH值为4.7；
(d)将所得药液过滤，灌装到玻璃瓶中(20ml/瓶)，密封，灭菌，即得。
实施例4：制备盐酸莫西沙星注射液
处方：
盐酸莫西沙星(以莫西沙星计)380mg，
门冬氨酸115mg，
依地酸钙钠9mg，
酸碱调节剂适量调节注射液pH，
注射用水适量，至20ml。
制法：
(a)用配液总量的75％的注射用水(水温90℃)使门冬氨酸和依地酸钙钠溶解，用酸碱调节剂调节所得药液pH值为4.4，待药液温度在55℃时向其中添加盐酸莫西沙星，搅拌使溶解；
(b)待药液温度在40～70℃时向所得药液中加入活性炭(以溶液体积计0.15％w/v)，搅拌吸附60分钟，脱炭过滤；
(c)补加注射用水至全量，同时用酸碱调节剂校验并调节所得药液pH值为4.4；
(d)将所得药液过滤，灌装到玻璃瓶中(20ml/瓶)，密封，灭菌，即得。
实施例5：制备盐酸莫西沙星注射液
处方：
盐酸莫西沙星(以莫西沙星计)420mg，
门冬氨酸90mg，
依地酸钙钠11mg，
酸碱调节剂适量调节注射液pH，
注射用水适量，至20ml。
制法：
(a)用配液总量的70％的注射用水(水温50℃)使门冬氨酸和依地酸钙钠溶解，用酸碱调节剂调节所得药液pH值为4.6，待药液温度在50℃时向其中添加盐酸莫西沙星，搅拌使溶解；
(b)待药液温度在40～70℃时向所得药液中加入活性炭(以溶液体积计0.05％w/v)，搅拌吸附30分钟，脱炭过滤；
(c)补加注射用水至全量，同时用酸碱调节剂校验并调节所得药液pH值为4.6；
(d)将所得药液过滤，灌装到玻璃瓶中(20ml/瓶)，密封，灭菌，即得。
实施例6：制备盐酸莫西沙星注射液
处方：
盐酸莫西沙星(以莫西沙星计)400mg，
门冬氨酸105mg，
依地酸钙钠10mg，
酸碱调节剂适量调节注射液pH，
注射用水适量，至20ml。
制法：
(a)用配液总量的65％的注射用水(水温70℃)使门冬氨酸和依地酸钙钠溶解，用酸碱调节剂调节所得药液pH值为4.5，待药液温度在65℃时向其中添加盐酸莫西沙星，搅拌使溶解；
(b)待药液温度在40～70℃时向所得药液中加入活性炭(以溶液体积计0.1％w/v)，搅拌吸附45分钟，脱炭过滤；
(c)补加注射用水至全量，同时用酸碱调节剂校验并调节所得药液pH值为4.5；
(d)将所得药液过滤，灌装到玻璃瓶中(20ml/瓶)，密封，灭菌，即得。
实施例11：制备盐酸莫西沙星注射液
处方和工艺分别参照实施例1-实施例6，不同的仅是不添加依地酸钙钠，得到6个注射液样品。
实施例12：制备盐酸莫西沙星注射液
处方和工艺分别参照实施例1-实施例6，不同的仅是在制备时不进行步骤(b)的活性炭吸附处理。
实施例13：制备盐酸莫西沙星注射液(#178-Ex2)
处方：盐酸莫西沙星21.82g(相当于莫西沙星20g)、门冬氨酸6.66g、氢氧化钠适量、注射用水加至1000ml。
制法：取700ml注射用水，加入处方量门冬氨酸和盐酸莫西沙星加热搅拌溶解，加氢氧化钠溶液至PH值4.40，加注射用水至1000ml。0.22um微孔滤膜过滤，以20ml/支灌装，121℃热压灭菌15min。
以上所述实施例仅是为充分说明本发明而所举的较佳的实施例，本发明的保护范围不限于此。本技术领域的技术人员在本发明基础上所作的等同替代或变换，均在本发明的保护范围之内。本发明的保护范围以权利要求书为准。