技术领域：
本发明属于中药技术领域，具体涉及痔舒适洗液的质量控制方法。
背景技术：
痔舒适洗液为外科痔类非处方药药品，它能够清热燥湿，化淤解毒，止血消肿， 止痛止痒，用于痔疮急性发作。使用时取适量药液，用温开水稀释至约10倍以上， 坐浴或直接涂洗，一日2次，一周为一疗程。
痔舒适洗液的处方、制法和性状为：
处方：槐角 100克 三七 80克 苦参 110克 白及 100克
蛇床子 100 克败酱草 100克 艾叶 65克
马齿苋 80克 山银花 65克 防风 65克
白矾 50克 硼砂 50克 冰片 5克 甘草 30克
制法：以上十四味，冰片加适量乙醇溶解；白矾、硼砂用适量水溶解；三七粉 碎成粗粉，照流浸膏剂与浸膏剂项下的渗漉法(中国药典2005年版一部附录IO)， 用70％乙醇作溶剂，浸渍24小时后进行渗漉，漉液回收乙醇，浓缩至相对密度为 1.0-1.1(50℃)，药渣备用，山银花、蛇床子、艾叶提取挥发油，挥发油加适量聚 山梨酯80，混匀，蒸馏后的水溶液另器收集。上述两种药渣合并，与其余槐角等七 味加水煎煮三次，第一次2小时，第二次1.5小时，第三次1小时，合并煎液，滤 过，滤液浓缩至与生药量比为1∶1，加乙醇使含醇量达60％，搅匀，静置48小时， 取上清液回收乙醇，浓缩至相对密度为0.9-1.1(50℃)，加入冰片及上述各药液， 加水调整总量至1000毫升，搅匀，灌封，灭菌，即得。
本品为深棕色的液体；具有冰片香气。
槐角为豆科植物槐的果实。槐角性味苦，辛咸，气寒，无毒。槐角干燥荚果呈 圆柱形，有时弯曲，种子间缢缩成连珠状，长1-6厘米，直径0.6-1厘米。表面黄 绿色、棕色至棕黑色，一侧边缘背缝线黄色。顶端有突起的残留柱基；基部常有果 柄。果肉干后皱缩。气微弱，焦糖样；味微苦。内有种子1-6枚。种子肾形，长8-10 毫米，宽5-8毫米，厚约5毫米。全国各地均产，主产河北、山东、江苏、辽宁等 地。
槐角黄酮类和异黄酮类化合物有：染料木素、槐属甙、槐属双甙、山柰酚糖甙 -C、槐属黄酮甙和芸香甙、芸香甙的含量很高，幼果中达46％。槐属甙含量为1.5-2.0％. 槐属黄酮甙含量为0.8％。另含槐糖0.4％。种子含油9.9％。游离或结合的脂肪酸中， 油酸为22.3％，亚油酸为53％，亚麻酸为12％。
槐角的功效包括：清热，润肝，凉血，止血。治肠风泻血，痔血，崩漏，血淋， 血痢，心胸烦闷，风眩欲倒，阴疮湿痒；主五内邪气热，止涎唾，补绝伤，五痔， 火疮，妇人乳瘕，子藏急痛；治丈夫女人阴疮湿痒；清心、肺、脾、肝、大肠之火。 现代研究证明槐角能对抗葡萄球菌及大肠杆菌。
甘草为豆科植物甘草的根及根状茎。
甘草为多年生草本，高约30-70厘米，罕达1米，根茎圆柱状；主根甚长，粗 大，外皮红褐色至暗褐色。茎直立，稍带木质，被白色短毛及腺鳞或腺状毛。单数 羽状复叶，托叶披针形，早落；小叶4-8对，小叶柄甚短，长1毫米许；小叶片卵 圆形、卵状椭圆形或偶近于圆形，长2-5.5厘米，宽1.5-3厘米，先端急尖或近钝 状，基部通常圆形，两面被腺鳞及短毛。总状花序腋生，花密集，长5-12厘米； 花萼钟形，长约为花冠的1/2而稍长，萼齿5，披针形，较萼筒略长，外被短毛及 腺鳞；花冠淡紫堇色，长约14毫米，旗瓣大，长方椭圆形，先端圆或微缺，下部 有短爪，龙骨瓣直，较翼瓣短，均有长爪；雄蕊10，2体，花丝长短不一，花药大 小不等；雌蕊1，子房无柄。荚果线状长圆形，镰刀状或弯曲呈环状，通常宽6-8 毫米，密被褐色的刺状腺毛。种子2-8，扁圆形或肾形，黑色光滑。花期6-7月。 果期7-9月。生于向阳干燥的钙质草原、河岸砂质土等地。
甘草分布东北、西北、华北等地，主产内蒙古、甘肃；其次为陕西、山西、辽 宁、吉林、黑龙江、河北、青海、新疆等地。以内蒙古伊克昭盟杭锦旗所产品质最 优。
甘草根及根茎含甘草甜素，为甘草酸(glycyrrhizic acid)的钾、钙盐，甘草 甙(liquiritin)、甘草甙元(liquiritigenin)、异甘草甙(isoliquiritin)、异 甘草元(isoliquritigenin)、新甘草甙(neo-liquiritin)、新异甘草甙 (neoiso-liquiritin)等。
甘草性味甘平。甘草的功效包括：和中缓急，润肺，解毒，调和诸药。炙用， 治脾胃虚弱，食少，腹痛便溏，劳倦发热，肺痿咳嗽，心悸，惊痫；生用，治咽喉 肿痛，消化性溃疡，痈疽疮疡，解药毒及食物中毒。《本经》：主五脏六府寒热邪气， 坚筋骨，长肌肉，倍力，金疮肿，解毒。温中下气，烦满短气，伤脏咳嗽，止渴， 通经脉，利血气，解百药毒。《药性论》：主腹中冷痛，治惊痫，除腹胀满；补益五 脏；制诸药毒；养肾气内伤，令人阴(不)痿；主妇人血沥腰痛；虚而多热；加而用 之。《汤液本草》：治肺痿之脓血，而作吐剂；消五发之疮疽，与黄耆同功。
蛇床子为伞形科植物蛇床的果实。蛇床子为一年生草本，高30-80厘米。茎直 立，圆柱形，有纵棱，疏生细柔毛。根生叶有柄，基部有短而阔的叶鞘；叶片卵形， 2-3回羽状分裂，最终裂片线状披针形，先端尖锐；茎上部的叶和根生叶相似，但 叶柄较短。复伞形花序顶生或侧生，伞梗10-25个，基部总苞片8-10，线形，具缘 毛；小总苞片8-10，线形；萼齿不明显，花瓣5，白色，倒卵形，先端凹，而具狭 窄内折的小舌；雄蕊5，与花瓣互生，花丝细长，花药椭圆形；子房下位，花柱2 枚，花柱基部圆锥形。双悬果椭圆形，果棱成翅状，无毛。花期4-7月，果期6-8 月。生于山坡草丛中，或田间、路旁。我国大部分地区均有分布。
蛇床子含挥发油1.3％，主要成分为蒎烯、莰烯、异戊酸龙脑酯、异龙脑。又 含甲氧基欧芹酚，蛇床明素，异虎耳草素，佛手柑内酯，二氢山芹醇及其当归酸酯、 乙酸酯和异戊酸酯，蛇床定，异丁酰氧基二氢山芹醇乙酸酯。
蛇床子药理作用包括：抗滴虫作用以肝浸膏作为培养基，10％及20％蛇床子煎剂 对阴道滴虫无杀灭作用或极弱，甲氧基欧芹酚体外亦无杀灭阴道滴虫的作用。也有 报道对阴道滴虫有效者，但其结果的可靠性有待进一步证实。
蛇床子辛苦、温。蛇床子的功效包括：温肾助阳，祛风，燥湿，杀虫。主妇人 阴中肿痛，男子阴痿、湿痒，除痹气，利关节，癫痫，恶创。
蛇床子素又名甲氧基欧芩酚或欧芹酚甲醚，属香豆素类化合物，棱柱状结晶(乙 醚)、针状结晶(稀乙醇)。熔点83-84℃。沸点145-150℃。溶于碱溶液、甲醇、 乙醇、氯仿、丙酮、醋酸乙酯和沸石油醚等，不溶于水和石油醚。CAS登记号： 484-12-8，分子式：C15H16O3，分子量：244.29。蛇床子素具有解痉、降血压、抗心 律失常、增强免疫功能及广谱抗菌作用，是蛇床子药材的重要指标物质。
槐角、甘草和蛇床子在痔舒适洗液中均发挥了不可替代的作用，因而对这3味 药材在痔舒适洗液中的监控是保证药物发挥作用的内在需求。
目前痔舒适洗液的中针对甘草和槐角的定性质量控制方法存在缺失，尤其是没 有痔舒适洗液中有关蛇床子的定量检测方法。
发明内容：
本发明的目的在于从甘草和槐角的定性鉴别和蛇床子素的定量分析两方面提 供更加可靠的痔舒适洗液的质量控制方法。
具体而言，本发明的质量控制方法是：取所述洗液20毫升，加乙酸乙酯提取2 次，每次30毫升，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1毫升使溶解，作为供试 品溶液；另取甘草对照药材2克，加20毫升水煎煮2次，每次0.5小时，滤过， 滤液浓缩至20毫升，加乙酸乙酯提取2次，每次30毫升，合并乙酸乙酯液，蒸 干，残渣加甲醇1毫升使溶解，作为对照药材溶液；吸取上述两种溶液各20微升， 分别点于同一含羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，甲苯-乙酸乙酯-甲酸 按照20∶7∶0.5配比展开剂，展开，取出，晾干，喷以1％磷钼酸溶液，加热至斑 点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上显相同的斑点。
上述的质量控制方法进一步为：取所述洗液20毫升，加乙酸乙酯提取2次， 每次30毫升，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1毫升使溶解，作为供试品溶 液；另取甘草对照药材2克，加20毫升水煎煮2次，每次0.5小时，滤过，滤液 浓缩至20毫升，加乙酸乙酯提取2次，每次30毫升，合并乙酸乙酯液，蒸干， 残渣加甲醇1毫升使溶解，作为对照药材溶液；另取槐角苷对照品适量，加甲醇0.5 毫升，制成饱和溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各 5微升，分别点于同一聚酰胺薄层板上，以60％乙酸为展开剂，展开，取出，晾干， 喷以1％三氯化铝乙醇溶液，晾干，置紫外光灯在365nm下检视，供试品色谱中，在 与对照品色谱相应的位置上，显相同的荧光斑点。
上述的质量控制方法中所述痔舒适洗液每1毫升含蛇床子以蛇床子素计，不少 于11.5微克。
上述的质量控制方法按照以下方法测定所述洗液：
色谱条件与系统适用性：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充柱；流动相：水-乙 腈比例为40∶60；检测波长为321nm；柱温：室温；理论板数按蛇床子素峰计算应 不低于2000；
对照品溶液的制备：精密称取在五氧化二磷干燥器中减压干燥至恒重的蛇床子 素对照品适量，加乙醇制成每1毫升含蛇床子素150微克的溶液，即得；
供试品溶液的制备：精密量取本品20毫升，置分液漏斗中，用乙醚振摇提取3 次，每次20毫升，合并乙醚提取液，用5％氨溶液10毫升洗涤，静置分层，弃去氨 溶液，倾取乙醚上清液；剩余少量乳化层用乙醚洗涤2次，每次5毫升，合并乙醚 液，蒸干，残渣加乙醇溶解转移至25毫升的容量瓶中定容，摇匀，过0.45微米的 微孔滤膜，即得；
测定法：分别精密吸取上述对照品与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪， 测定，即得。
本发明的定性和定量结合的质量控制方法，为药品的生产、流通和临床应用提 供了更好的保障。通过本发明的实际检测结果，表明每毫升含蛇床子以蛇床子素的 含量均不少于11.5微克。因而为了提高痔舒适洗液在实际检测的真实性，为了避 免掺杂使假，体现药品的真实品质，发明人将痔舒适洗液中每毫升含蛇床子以蛇床 子素的含量定为不少于11.5微克。
具体实施方式：
下面实验例进一步描述本发明，但所述实验例仅用于说明本发明而不是限制本 发明。
实验例1
随机挑选5个批号的痔舒适洗液(批号为：20070911-1、20070913-1、 20071918-1、20071103-1和20071005-1)，采用本方法重复5个批次的痔舒适洗液。
取本品20ml，加乙酸乙酯提取2次，每次30ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残 渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取甘草对照药材2g，加20ml水煎煮2 次，每次0.5小时，滤过，滤液浓缩至20ml，加乙酸乙酯提取2次，每次30ml， 合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱 法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各20μl，分别点 于同一含羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(20∶ 7∶0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1％磷钼酸溶液，加热至斑点显色清晰。 供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上显相同的斑点。
表1 对痔舒适洗液中甘草的薄层对照
实验例2
随机挑选5个批号的痔舒适洗液(批号为：20070911-1、20070913-1、 20071918-1、20071103-1和20071005-1)，采用本方法重复5个批次的痔舒适洗液。
取本品20ml，加乙酸乙酯提取2次，每次30ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残 渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取槐角苷对照品适量，加甲醇0.5ml， 制成饱和溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B) 试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一聚酰胺薄层板上，以60％乙酸为展 开剂，展开，取出，晾干，喷以1％三氯化铝乙醇溶液，晾干，置紫外光灯(365nm) 下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的荧光斑点。
表2 对痔舒适洗液中槐角的薄层对照
实验例3
随机挑选5个批号的痔舒适洗液(批号为：20070911-1、20070913-1、 20071918-1、20071103-1和20071005-1)，将痔舒适洗液照高效液相色谱法(中国 药典2005年版一部附录VI D)测定.
【含量测定】照高效液相色谱法(中国药典2005版一部附录VID)测定。
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充柱；流动相： 水-乙腈(40∶60)；检测波长为321nm；柱温：室温。理论板数按蛇床子素峰计算 应不低于2000。
对照品溶液的制备 精密称取在五氧化二磷干燥器中减压干燥至恒重的蛇床 子素对照品适量，加乙醇制成每1ml含蛇床子素150μg的溶液，即得。
供试品溶液的制备 精密量取本品20ml，置分液漏斗中，用乙醚振摇提取3 次，每次20ml，合并乙醚提取液，用5％氨溶液10ml洗涤，静置分层，弃去氨溶液， 倾取乙醚上清液。剩余少量乳化层用乙醚洗涤2次，每次5ml。合并乙醚液，蒸干， 残渣加乙醇溶解转移至25ml的容量瓶中定容，摇匀，过微孔滤膜(0.45μm)，即 得。
测定法 分别精密吸取上述对照品与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪， 测定，即得。
表3 对痔舒适洗液中蛇床子素的检测数据
通过本发明的实际检测结果，表明每毫升含蛇床子以蛇床子素的含量均不少于 11.5微克。因而为了提高痔舒适洗液在实际检测的真实性，为了避免掺杂使假，体 现药品的真实品质，发明人将痔舒适洗液中每毫升含蛇床子以蛇床子素的含量定为 不少于11.5微克。