技术领域
本发明涉及一种具有改善睡眠作用的药物组合物及其制备方法和应用，属于制药技术领域。
背景技术
人的一生大约有1/3的时间是在睡眠中度过的。当人们处于睡眠状态中时，可以使人们的大脑和身体得到休息、休整和恢复。有助于人们日常的工作和学习。科学提高睡眠质量，是人们正常工作学习生活的保障。目前改善睡眠的药物有很多，人们也意识到了用中药代替西药进行睡眠质量的改善，不仅效果良好，还无成瘾症状，使用安全保证。因此，针对由于各种原因导致的睡眠障碍、严重失眠等人群，以预防为主要目的，选用具有明确改善睡眠作用的原料，对人体无毒副作用且价格低廉，开发出以改善睡眠为主要功能的药品或保健食品具有良好的市场前景。
专利CN200810102529.9公开了具有改善睡眠功能的保健食品及其制备方法，该保健食品配方由短梗五加茶、酸枣仁、天麻、远志、蛤蚧、百合、五味子组成，我们在研究中发现，酸枣仁和远志在改善睡眠质量中起到关键的作用，搭配对中枢神经系统有镇静作用的刺五加，息风止痉、平肝潜阳、祛风通络的天麻即能获得良好的效果，通过对四味药的处方配比进行认真细致的筛选研究，就能获得处方简单，作用效果良好且无毒副作用的产品，非常适合工业化的大生产，产品有效成分含量高、性能稳定。
发明内容
本发明的目的在于，提供一种疗效确切、处方简单、制作工艺简便、适合于工业化大生产的具有改善睡眠作用的药物组合物，以及该药物组合物的制备方法和应用。
本发明提供的具有改善睡眠作用的药物组合物，按照重量组份计算，由下述原料药制成：酸枣仁9～16份、刺五加9～16份、远志3～8份、天麻3～8份。
具体地说，按照重量组份计算，由下述原料药制成：酸枣仁11～14份、刺五加11～14份、远志4～6份、天麻4～6份。
更具体地，按照重量组份计算，由下述原料药制成：酸枣仁12.5份、刺五加12.5份、远志5份、天麻5份。
本发明所述具有改善睡眠作用的药物组合物的制备工艺为：
（1）将酸枣仁、刺五加、远志和天麻原料根据饮片大小破碎，混合均匀，加入8～12倍重量的水煎煮提取1～3次，每次提取时间为1～3小时，第1次提取之前浸泡0.5-1小时，过滤，合并滤液，滤液减压回收至在50～70℃条件下相对密度为1.05～1.20的稠膏，喷雾干燥，称重，备用；
（2）在干燥后的药粉中添加辅料，用常规方法制备成需要的制剂剂型。
具体地说，本发明所述具有改善睡眠作用的药物组合物的制备工艺为：
（1）将酸枣仁、刺五加、远志和天麻原料根据饮片大小破碎，混合均匀，加入10倍重量的水煎煮提取2次，每次提取时间为1.5小时，第1次提取之前浸泡0.5小时，过滤，合并滤液，滤液减压回收至在50～70℃条件下相对密度为1.05～1.15的稠膏，喷雾干燥，称重，备用；
（2）在干燥后的药粉中添加辅料，用常规方法制备成需要的制剂剂型。
本发明制得的活性成分可采用常规共知的相应制剂方法，加入常规辅料，如崩解剂、润滑剂、粘合剂等，制成各种口服制剂，如片、硬胶囊、颗粒、滴丸、软胶囊、口服液等，优选为硬胶囊剂。
本发明使用的各成分特性及其功效如下：
酸枣仁：味甘、性平。归心、脾、肝、胆经。养肝、宁心、安神、敛汗。主治虚烦不眠、惊悸怔忪、虚汗。现代研究表明其具有镇静、催眠作用，安定作用和镇痛降温的作用，其中有效成分酸枣仁皂苷能明显抑制正常小鼠的活动次数，抑制苯丙胺的中枢兴奋作用和降低大鼠的协调运动，延长睡眠时间。
刺五加：味辛、苦、微甘、性温，归肝、肾经。祛风湿、补肝肾、强筋骨、活血脉。主治风寒湿痹、腰膝疼痛、筋骨痿软、行动迟缓、体虚嬴弱等。近代医学研究证明刺五加的作用特点与人参基本相同，具有调节机体紊乱使之趋于正常的功能。能预防压力所致疾病，有良好的抗疲劳和恢复精力的作用，对中枢神经系统有镇静作用，能延长己烯醛麻醉时间，降低己烯醛麻醉后的兴奋性，同时还具有抗惊厥的作用。
远志：性温，味苦、辛，具有安神益智、祛痰、消肿的功能，用于心肾不交引起的失眠多梦、健忘惊悸，神志恍惚，咳痰不爽，疮疡肿毒，乳房肿痛。现代药理学研究表明，远志对神经系统的作用体现在镇静、抗惊厥作用、促进体力和智力的作用、抗痴呆和脑保护活性方面，另外还对呼吸系统、血压、平滑肌、心肌等方面有良好的作用效果。
天麻：味甘、性平，归肝经。息风止痉，平肝潜阳，祛风通络。用于眩晕眼黑、头风头痛、肢体麻木、半身不遂、小儿惊痫动风。其药理作用主要表现在对中枢神经的镇静、安眠，对心血管的降压、扩血管降低心肌耗氧量，抗炎免疫等方面。
综合以上，本方中酸枣仁和刺五加为君药，酸枣仁宁心安神，刺五加活血补肾，再辅以臣药远志安神益智、天麻平肝通络，各药的活性成分相互协同作用，共同达到镇静安神、宁心养肝的作用，达到改善睡眠的目的，适用于各类需要改善睡眠者。
本发明所用药物采用水煎煮提取，有效成分提取完全，同时在提取之前先浸泡0.5-1小时，使活性成分得到充分溶出，有利于后续工艺的进行；浓缩时采用减压回收的方法，缩短操作时间，且减低了有效成分的破坏和损失；采用喷雾干燥提取物膏体，能耗低、污染小，水分蒸发迅速、干燥时间短，省去蒸发、粉碎等工艺，且制品质量好、溶解性高。在工业化大生产中非常合理。
用本发明所述具有改善睡眠作用的药物组合物的制备方法制得的易眠胶囊，从根本上改善睡眠，而且制作工艺简单方便，成本较低。经临床验证，结果显示本发明药物组合物比现有产品处方更简单，且改善睡眠疗效更加确切，安全性好。
具体实施方式：
以下通过实施例和实验例对本发明作进一步的说明。
一、工艺筛选研究
1、提取方法选择
取酸枣仁900g、刺五加900g、远志300g、天麻300g粉碎混合，分别采用乙醇回流提取、水煎煮提取两种方法进行提取，以酸枣仁中的酸枣仁皂苷A含量、刺五加中的紫丁香苷含量、远志中细叶远志皂苷的含量、天麻中天麻素的含量，提取液澄明度，过滤难易程度为指标，考察两种方法的提取率，结果见下表1。
表1提取方法选择
实验结果表明，两种方法提取液均比较透明，含量差别不大，其中采用水煎煮提取的方法过滤较容易，成本较低。故优选水煎煮的提取方法。
2、硬胶囊的辅料筛选研究
中药成份复杂，含有大量多糖类物质，在制成口服制剂时流动性差，因此一般需要添加一定的稀释剂和润滑剂来改善药粉的流动性，满足填充的要求，常用的稀释剂有玉米淀粉、蔗糖、微晶纤维素、糊精、可压性淀粉等，常用的润滑剂有硬脂酸镁、滑石粉、微粉硅胶等。我们通过对采用上述稀释剂和润滑剂制得后的药粉的流动性、溶出、经济程度等考察指标的研究，选择出最合适的一种或几种的混合物。结果见下表：
表2 辅料种类选择试验
辅料 流动性 溶出 经济 玉米淀粉、硬脂酸镁 不好 较难 便宜 玉米淀粉、滑石粉 不好 较难 便宜 蔗糖、硬脂酸镁 不好 难 便宜 蔗糖、滑石粉 不好 难 便宜 微晶纤维素、微粉硅胶 较好 较易 贵 微晶纤维素、硬脂酸镁 较好 较易 较贵 糊精、微粉硅胶 好 易 贵 糊精、硬脂酸镁 好 易 便宜 糊精、滑石粉 好 较易 便宜 可压性淀粉、微粉硅胶 较好 易 较贵 可压性淀粉、硬脂酸镁 较好 较易 便宜
实验结果表明，综合考虑各项指标后，可以看出采用糊精和硬脂酸镁制备硬胶囊，产品流动性好，不易粘连，易于填充，经济合理。进一步考察用量：
表3 辅料用量选择试验
辅料 流动性 溶出 糊精：硬脂酸镁=8:1 较差 较迟缓 糊精：硬脂酸镁=9:1 好 较易 糊精：硬脂酸镁=10:1 好 易 糊精：硬脂酸镁=11:1 好 易 糊精：硬脂酸镁=12:1 较好 较迟缓
结果表明，使用糊精：硬脂酸镁比例在9-11:1之间时，药粉流动性和溶出难易程度均比较理想，其中糊精：硬脂酸镁=10:1时效果最优。
因此，选择具有改善睡眠作用的药物组合物的制备方法如下：
实施例1：片剂的制备
原料配比：酸枣仁900g、刺五加900g、远志300g、天麻300g
制备方法：（1）将酸枣仁、刺五加、远志和天麻原料根据饮片大小破碎，混合均匀，加入8倍重量的水煎煮提取3次，每次提取时间为1小时，第1次提取之前浸泡1小时，过滤，合并滤液，滤液减压回收至在50℃条件下相对密度为1.05的稠膏，喷雾干燥，称重，备用；
（2）在干燥后的药粉中添加1%硬脂酸镁为润滑剂，加片剂总量8%微晶纤维素,12%可压性淀粉充分混匀，压制成1500片，包薄膜衣，即得。
用法用量：一日2次，每次3片。
实施例2：硬胶囊剂的制备
原料配比：酸枣仁1250g、刺五加1250g、远志500g、天麻500g
制备方法：（1）将酸枣仁、刺五加、远志和天麻原料根据饮片大小破碎，混合均匀，加入10倍重量的水煎煮提取2次，每次提取时间为1.5小时，第1次提取之前浸泡0.5小时，过滤，合并滤液，滤液减压回收至在60℃条件下相对密度为1.05～1.15的稠膏，喷雾干燥，称重，备用；
（2）在干燥后的药粉中添加糊精135g和硬脂酸镁13g，混合均匀，装入胶囊（450mg/粒），抛光，装瓶，即得硬胶囊1500粒。
用法用量：一日2次，每次3粒。
实施例3：颗粒剂的制备
原料配比：酸枣仁1600g、刺五加1600g、远志800g、天麻800g
制备方法：（1）将酸枣仁、刺五加、远志和天麻原料根据饮片大小破碎，混合均匀，加入12倍重量的水煎煮提取1次，提取时间为3小时，提取之前浸泡0.5小时，过滤，滤液减压回收至在70℃条件下相对密度为1.20的稠膏，喷雾干燥，称重，备用；
（2）在干燥后的药粉中加入糊精至总量为5000g，粉碎，混匀，制粒，干燥，整粒，包装。开水冲服。
用法用量：一日2次，每次10g。
实施例4 滴丸剂的制备
原料配比：酸枣仁1100g、刺五加1400g、远志400g、天麻600g
制备方法：（1）将酸枣仁、刺五加、远志和天麻原料根据饮片大小破碎，混合均匀，加入9倍重量的水煎煮提取2次，每次提取时间为1.5小时，第1次提取之前浸泡1小时，过滤，合并滤液，滤液减压回收至在60℃条件下相对密度为1.05～1.15的稠膏，喷雾干燥，称重，备用；
（2）将干燥后的药粉中加入熔融状态的聚乙二醇M6000中，搅拌，使其分散均匀，保温备用；将混合均匀的熔融基质至于保温装置滴丸机中并保持基质于搅拌状态，开机滴注，用液体石蜡或硅油做滴丸成型的冷却剂；将制成的滴丸从冷却剂中取出，用少量无水乙醇进行快速清洗后置于摊盘中于30~40℃条件下鼓风干燥，拣丸，上光，包装，制得滴丸剂1500丸。
用法用量：一日2次，每次3粒
实施例5 口服液的制备
原料配比：酸枣仁1400g、刺五加1100g、远志450g、天麻550g
制备方法：（1）将酸枣仁、刺五加、远志和天麻原料根据饮片大小破碎，混合均匀，加入11倍重量的水煎煮提取1次，提取时间为3小时，提取之前浸泡1小时，过滤，滤液减压回收至在70℃条件下相对密度为1.05的稠膏；
（2）在稠膏中添加加入制剂总量25%的蔗糖、0.3%苯甲酸钠、0.1%羟苯乙酯，加热溶解，放冷，加水至5000ml，制成口服液。
用法用量：一日2次，每次10ml。
实施例6 软胶囊的制备
原料配比：酸枣仁1300g、刺五加1200g、远志700g、天麻400g
制备方法：（1）将酸枣仁、刺五加、远志和天麻原料根据饮片大小破碎，混合均匀，加入10倍重量的水煎煮提取2次，每次提取时间为2小时，第1次提取之前浸泡0.5小时，过滤，合并滤液，滤液减压回收至在60℃条件下相对密度为1.15的稠膏，喷雾干燥，称重，备用；
（2）在干燥后的药粉中添加加入蜂蜡适量，混合，混合物用自动旋转轧囊剂制成1500粒，干燥，取出，用乙醇洗涤，干燥48小时，即得。
用法用量：一日2次，每次3粒。
实施例7 低处方量硬胶囊的制备
原料配比：酸枣仁800g、刺五加800g、远志200g、天麻200g
制备方法：按照实施例2的方法制备。
实施例8 高处方量硬胶囊的制备
原料配比：酸枣仁1700g、刺五加1700g、远志900g、天麻900g
制备方法：按照实施例2的方法制备。
二、效果试验研究
本发明所用药物均为CFDA规定的准许用于药品、保健食品的原料和可药食两用的原料。根据《保健食品与评价技术规范》（2003）版对改善睡眠功能保健食品的判定标准，经过动物实验和人体实验表明，本发明组合物制成的产品具有明显的改善睡眠的功能。
实验例1 处方筛选和动物实验
本发明组合物改善睡眠功能学实验情绪如下：
1、材料与方法：
1.1药物：本发明制剂：按照本发明实施例1-3、7、8的制备方法制备成各种受试样品，编号样品1-5；
对照药品：CN200810102529.9实施例1和实施例4的方法制成的对照药品，编号对照1、对照2。
以上受试样品均在使用时或研磨或破碎或直接量取，加蒸馏水制成一定浓度溶液灌胃。
1.2试验动物： ICR种小鼠，清洁级，由贵阳医学院实验动物中心提供。
1.3实验方法
1.3.1对自发活动的影响 小鼠96只雌雄各半，随机分为8组。对照1、2组给药剂量为0.48g活性成分/kg·d，本发明样品1-5组给药剂量分别为6.40、9.33、12.80、5.33、13.87g生药/kg·d，用药量均为人用量的40倍。空白组给予等体积的生理盐水。连续灌胃30d，末次给药后30min，将小鼠放入自发活动计数器内适应5min，然后记录5min内小鼠的活动情况。
1.3.2对戊巴比妥钠睡眠时间的影响 小鼠96只，雌雄兼用，随机分成8组。对照1、2组给药剂量为0.48g活性成分/kg·d，本发明样品1-5组给药剂量分别为6.40、9.33、12.80、5.33、13.87g生药/kg·d，用药量均为人用量的40倍。空白组给予等体积的生理盐水。连续灌胃30d，末次给药后30min，每组小鼠腹腔注射戊巴比妥钠40mg/kg。记录小鼠的睡眠时间（以翻正反射消失为入睡时间，从翻正反射消失至恢复时间为睡眠持续时间）。
1.3.3对戊巴比妥钠阈下睡眠剂量影响 小鼠分组及给予受试药物同1.3.2，连续灌胃30d，末次给药后30min，各组动物腹腔注射戊巴比妥钠30mg/kg，观察给予戊巴比妥钠后30min内各组发生睡眠的动物数（以翻正反射消失1min以上为指标）。
2、试验结果
2.1对自发活动的影响结果（见表4）
表4对小鼠5min自发活动的影响
2.2对戊巴比妥钠诱导睡眠时间的影响（见表5）
表5对戊巴比妥钠诱导小鼠睡眠时间的影响（）
本发明制剂组（样品1-3）与空白组比较：*P<0.01，有显著差异性；本发明制剂组（样品1-3）与对照组比较：# P<0.05。
2.3对戊巴比妥钠阈下剂量催眠实验的影响（见表6）
表6对戊巴比妥钠阈下剂量小鼠入睡发生率的影响（）
组别 动物只数 入睡动物数 睡眠动物发生率 空白对照组 12 2 16.7% 对照1 12 7 58.3% 对照2 12 8 66.7% 样品1 12 9 75.0%* 样品2 12 9 75.0%* 样品3 12 10 83.3%* 样品4 12 6 50.0% 样品5 12 10 83.3%*
本发明制剂组（样品1-3）与空白组比较：*P<0.05，有显著差异性。
2.4对戊巴比妥钠睡眠潜伏期的影响（见表7）
表7对小鼠戊巴比妥钠睡眠潜伏期的影响（）
组别 n 睡眠潜伏时间/min 组别 n 睡眠潜伏时间/min 空白对照组 12 27.1±5.5 样品2 12 19.6±4.5** 对照1 12 23.4±4.8 样品3 12 19.1±4.1** 对照2 12 22.6±4.7 样品4 12 23.8±5.0 样品1 12 20.2±4.3* 样品5 12 19.0±4.4**
本发明制剂组（样品1-3）与空白组比较：*P<0.05，**P<0.01。
结论：以上实验结果表明，本发明制剂在处方组成减少的情况下，能明显延长戊巴比妥钠诱导的小鼠睡眠时间、提高戊巴比妥钠阈下剂量小鼠入睡动物发生率、缩短戊巴比妥钠睡眠潜伏期，其作用还优于对照品，证明本发明制剂有明显改善睡眠的作用，并呈良好量效关系；另外，采用本发明所述低组分制得的硬胶囊剂，其治疗效果与对照药物相当，高组分疗效没有明显增加，表明采用本发明所述的用量范围，处方合理，改善睡眠的效果良好。
另外，本发明组合物制成的制剂在试验期间大鼠无任何过敏反应及其他不良反应，说明本发明组合物无不良影响。
实验例2 本发明组合物改善睡眠作用的临床研究
1、资料：67例年龄30-65岁的适宜人群的志愿者，其中男38例，女29例，男女比例为1.3：1，适宜人群中加班熬夜等职业患者占39%，教师27%，工人22%，其他12%。试验组即样品1-3组共计40例，对照组27例，各组患者治疗前在年龄分布、病程、病情等级方面无明显差异。
2、实验情况
1.2.1实验用药：试验药：本发明实施例1-3制备得到的改善睡眠片剂、硬胶囊和颗粒，单位剂量为1.6g生药/片、2.33g生药/粒、9.6g生药/袋。编号样品1、2、3。
对照药：CN200810102529.9实施例1和实施例4的方法制成的对照软胶囊，每粒含活性成分700mg，编号对照1、对照2。
1.2.2用药方法及流程：本发明制剂，每天2次，每次3粒/片；颗粒剂开水冲服，每天2次，每次1袋；对照软胶囊，每日1次，每次1粒。疗程1个月。
3、结果：服用受试药物一周后，适宜人群在安静休息状态下，本发明组合物组有93%的需要改善睡眠的人群感觉能很快进入甜睡状态，连续睡眠一般不少于8小时；对照药物组进入甜睡状态的人数占89%。连续使用两周后，适宜人群在安静休息状态下，服用本发明组合物的受试人群中中间起夜者占19%，对照药物组占21%，连续服用后，一般情况下均进入正常状态。
结论：各型需改善睡眠人群在服用本发明药物的一个时期后，睡眠逐渐趋于稳定，基本恢复正常，再继续坚持服用后睡眠质量获得良好的改善，作用效果好于对照药物。通过临床验证，本发明组合物出来具有改善睡眠功效外，还能平衡血压、缓解疲劳、增强记忆力等效果。